非甾体抗炎药物与十六酰胺乙醇偶联药物及其组合物

技术领域

本发明涉及医药领域，具体为非甾体抗炎药物与十六酰胺乙醇偶联药物及其组合物。

背景技术

国际疼痛研究协会(IASP)将疼痛定义为与实际或潜在的组织损伤相关，或类似的令人不愉快的感觉和情感体验。身体产生了病理性损伤，这种疼痛信号警示人们防御病原体或一些伤害性刺激，但是当这种信号产生异常或变得缓慢时，也同样损害人体健康。疼痛可以分为伤害性疼痛(nociceptive，来自组织损伤)、神经性疼痛(neuropathic，来自神经损伤)和可塑性疼痛(nociplastic，来自神经系统敏感)。如今，疼痛已经严重影响患者的生活质量，并造成巨大的经济负担。

目前有很多方式可以治疗疼痛，包括药物治疗、心理治疗、综合治疗和侵入性手术，但基于药物的治疗仍然是疼痛的主要治疗方法。临床上，使用单一使用治疗药物可能无法达到理想疗效，目前临床上推荐一种个性化的多模式、跨学科的治疗方法。

非甾体抗炎药(NSAIDs)是一种不同的非阿片类药物，通过抑制环氧合酶(COX)活性并抑制花生四烯酸产生的前列腺素，多用于疼痛和炎症患者的治疗，如慢性疼痛、骨关节炎、类风湿性关节炎、术后疼痛、痛经等，如布洛芬、酮洛芬和萘普生，是最常用的处方药。根据其化学结构，NSAIDs可大致分为水杨酸类、芳基和异芳基乙酸衍生物、吲哚类衍生物、邻氨基苯甲酸酯类和烯醇酸类。据2018年统计，每天有超过3000万人服用NSAIDs，在欧洲，NSAIDs占所有处方的7.7％以上。在美国，每年开出的NSAIDs处方超过7000万份，加上非处方药的使用，每年消耗的NSAIDs剂量超过300亿剂。长期使用这些非甾体抗炎药可能导致严重的胃肠道损伤和肾功能不全，从而限制这些药物的使用。

十六酰胺乙醇(PEA)是一种内源性脂肪酸酰胺，是调节疼痛和炎症的内源性脂质，属于核转录因子激动剂的一类。PEA通过多种机制发挥抗炎镇痛作用，它可以直接激活过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-α)和孤儿受体(GPCR55)而发挥作用；PEA本身对CB2受体的亲和力非常弱，它具有随从效应，通过间接激活大麻素受体CB1、CB2或瞬时受体电位香草酸1型受体(TRPV1)而发挥消炎镇痛作用：

(1).PEA的代谢通过脂肪酰胺水解酶(FAAH)或N-酰基乙醇胺水解酸酰胺酶(NAAA)水解为棕榈酸和乙醇胺。它可以直接抑制FAAH的表达，从而增加内源性AEA和2-AG水平，AEA和2-AG可以直接激活CB2或CB1受体和TRPV1通道。

(2).PEA可能引起TRPV1通道的变构调节，从而增强AEA和2-AG对TRPV1通道的激活和脱敏。

(3).PEA也可能作用于PPAR-α而激活TRPV1通道。

由于NSAIDs长期使用易产生不良反应，其中最主要的是胃肠道副作用。NSAIDs在发挥镇痛作用的同时也抑制了前列腺素的合成，降低前列腺素对胃肠道的保护作用，或由于NSAIDs使H

前药设计是一种重要的药物设计工具。前药是在代谢过程中转化为具有预期活性的活性代谢物的非活性化合物，可以改善各种药物不良的理化和药代动力学性质。据报道，2019年全球市场上10％的药物可以被归类为前药，在市场上推出的所有药物中，批准的前药数量相当可观。本发明通过药物偶联的方式，将不同作用机制的药物进行组合，制备成前药，优化药物结构，以达到药物之间的协同作用，增加疗效。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供非甾体抗炎药物与十六酰胺乙醇偶联药物及其组合物，以解决上述背景技术提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：非甾体抗炎药物与十六酰胺乙醇偶联药物，偶联药物为如式(I)表示的化合物；

其中NSAIDs选自含有羧基的非甾体抗炎药。

作为本发明的一种优选技术方案，所述NASIDs为含有羧基的非甾体抗炎药物，包括布洛芬、酮洛芬、萘普生、吲哚美辛或氟比洛芬的任意一种。

作为本发明的一种优选技术方案，所述化合物为以下的任意一种；

2-棕榈酰胺乙基(S)-2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸酯；萘普生-十六酰胺乙醇；

2-棕榈酰胺乙基2-(4-异丁基苯基)丙酸酯；布洛芬-十六酰胺乙醇；

2-棕榈酰胺乙基2-(3-苯甲酰苯基)丙酸酯；酮洛芬-十六酰胺乙醇；

2-棕榈酰胺乙基2-(2-氟-[1,1'-联苯]-4-基)丙酸酯；氟比洛芬-十六酰胺乙醇

2-棕榈酰胺乙基2-(1-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)醋酸酯；吲哚美辛-十六酰胺乙醇。

非甾体抗炎药物与十六酰胺乙醇的组合物，组合物由式(I)表示的化合物、其药学可接受的盐、其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体或其非对映异构体和药学上可接受的辅料组成。

非甾体抗炎药物与十六酰胺乙醇偶联药物及其组合物的应用，化合物和药物组合物在制备预防或治疗疼痛药物中的应用。

作为本发明的一种优选技术方案，所述疼痛为急性疼痛、慢性疼痛、神经病理性疼痛、炎症性疼痛、伤害性疼痛、癌性疼痛、痛觉过敏和内脏疼痛。

本发明的通式(I)化合物、或其溶剂化物、或其共晶、或其同位素替换形式或其混合物形式和药学上可接受的辅料制成适合于通过任何适当途径给药的形式，活性化合物优选是以单位剂量的方式，或者是以患者可以以单剂自我给药的方式；本发明提供的化合物或组合物的单位剂量的表达方式可以是片剂、胶囊、注射液、颗粒剂、酊剂、锭剂、栓剂、再生药粉或液体制剂。

其使用方法中所用化合物或组合物的剂量通常随疼痛的严重程度、患者的体重和化合物的相对功效而改变。作为一般性指导，合适的单位剂量可以是0.01～1000mg。

本发明提供的药物组合物除活性化合物外，可含有一种或多种辅料，辅料选自以下成分：填充剂(稀释剂)、粘合剂、润湿剂、崩解剂或赋形剂等。根据给药方法的不同，组合物可含有0.1至99重量百分比的活性化合物。

含活性成分的药物组合物可以是适用于口服、注射的形式或以贴片的递药系统经皮施用，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊、注射液、冻干粉，或糖浆剂或酊剂。可按照本领域任何已知的制备药用组合物的方法制备口服或注射组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分:甜味剂、矫味剂、着色剂、pH调节剂和防腐剂。

本发明还提供预防或治疗疾病的方法，方法包含将治疗有效量的本发明化合物或组合物施用给需要的受试者。

所述疾病为疼痛相关疾病，包括急性疼痛，如软组织及关节急性损伤疼痛，手术后疼痛，急性带状疱疹疼痛，痛风等；慢性疼痛，如软组织及关节劳损性或退变疼痛，椎间盘源性疼痛，神经源性疼痛等；

所述疼痛相关疾病还包括顽固性疼痛，如三叉神经痛，疱疹后遗神经痛，糖尿病周围神经痛等；

所述疼痛相关疾病还包括癌性疼痛，如晚期肿瘤痛，肿瘤转移痛等。所述疼痛相关疾病包括特殊性疼痛，如顽固性心绞痛，特发性胸腹痛等。

本发明提供的化合物还可包含其同位素衍生物。术语“同位素衍生物”指结构不同仅在于存在一种或多种同位素富集原子的化合物。例如具有本发明的结构，除了用“氘”或“氚”代替氢或者用

本发明提供的化合物还包括各种氘化形式的通式(I)化合物。与碳原子连接的各个可用的氢原子可独立地被氘原子替换。本领域技术人员能够参考相关文献合成氘化形式的通式(I)化合物。在制备氘代形式的通式(I)化合物时可使用市售的氘代起始物质,或它们可使用常规技术采用氘代试剂合成，氘代试剂包括但不限于氘代硼烷、三氘代硼烷四氢呋喃溶液、氘代氢化锂铝、氘代碘乙烷和氘代碘甲烷等。

针对药物或药理学活性剂而言,术语“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。

本发明的有益效果是：本发明通过药物偶联的方式，将不同作用机制的药物进行组合，制备成前药，优化药物结构，以达到药物之间的协同作用，增加疗效。

本发明基于临床需求将NSAIDs和PEA进行药物偶联成前药，一方面可以减少NSAIDs的羧酸与胃黏膜的直接接触，从而抑制其对胃粘膜的损伤；另一方面可以通过NSAIDs和PEA间镇痛机理互补发挥协同作用，降低其起效剂量，减少剂量相关副作用。

附图说明

图1为布洛芬-十六酰胺乙醇偶联药物的

图2为布洛芬-十六酰胺乙醇偶联药物的

图3为酮洛芬-十六酰胺乙醇偶联药物的

图4为酮洛芬-十六酰胺乙醇偶联药物的

图5为氟比洛芬-十六酰胺乙醇偶联药物的

图6为吲哚美辛-十六酰胺乙醇偶联药物的

图7为萘普生-十六酰胺乙醇偶联药物在小鼠角叉菜胶炎性疼痛模型中的镇痛效果时效图；

图8为吲哚美辛-十六酰胺乙醇偶联药物在小鼠角叉菜胶炎性疼痛模型中的镇痛效果时效图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易被本领域人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。

实施例化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以ppm的单位给出。NMR的测定是用BrukerAVANCE III HD 500核磁仪,测定溶剂为氘代氯仿(CDCl

MS的测定使用Agilent 1260HPLC-6520Accurate-Mass Q-Tof质谱仪，测试条件：电喷雾离子源(ESI)，正离子模式。

薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板,薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm,薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。

硅胶柱色谱法一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体；

实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃；

实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)。

实施例1：萘普生-十六酰胺乙醇(1)的合成；

于50mL茄形瓶中室温下加入PEA 300mg(1.0mmol，1.0eq.)，萘普生230mg(1mmol，1.0eq.)，DMAP 12mg(0.1mmol，1.0eq.)，四氢呋喃5mL，磁力搅拌下再加入EDCI 230mg(1.2mmol，1.2eq.)，室温反应2小时后TLC监测(PE:EA＝1:1，R

实施例2：布洛芬-十六酰胺乙醇(2)的合成；

于50mL茄形瓶中室温下加入PEA 300mg(1.0mmol，1.0eq.)，布洛芬210mg(1mmol，1.0eq.)，DMAP 12mg(0.1mmol，1.0eq.)，四氢呋喃5mL，磁力搅拌下再加入EDCI 230mg(1.2mmol，1.2eq.)，室温反应2小时后TLC监测(PE:EA＝1:1，R

实施例3：酮洛芬-十六酰胺乙醇(3)的合成；

于50mL茄形瓶中室温下加入PEA 300mg(1.0mmol，1.0eq.)，酮洛芬250mg(1mmol，1.0eq.)，DMAP 12mg(0.1mmol，1.0eq.)，四氢呋喃5mL，磁力搅拌下再加入EDCI 230mg(1.2mmol，1.2eq.)，室温反应2小时后TLC监测(PE:EA＝1:1，R

实施例4：氟比洛芬-十六酰胺乙醇(4)的合成；

于100mL茄形瓶中加入245mg(1.0mmol，1.0eq.)氟比洛芬，并加入5mL二氯甲烷室温下磁力搅拌溶解。逐滴滴入草酰氯380mg(3.0mmol，3.0eq.)，待搅拌均匀后，用毛细管蘸取一滴DMF加入反应液中进行催化，室温反应0.5小时。反应完毕后，用真空旋转蒸发仪(20℃)除去溶剂和未完全反应的草酰氯。另准备100mL茄形瓶，加入PEA 240mg(0.8mmol，0.8eq.)、三乙胺101mg(1mmol，1.0eq.)和5mL二氯甲烷搅拌均匀，加入刚刚旋干的残渣，室温反应4小时，期间用TLC监测(DCM:MeOH＝10:1，R

实施例5：吲哚美辛-十六酰胺乙醇(5)的合成；

于100mL茄形瓶中加入358mg(1.0mmol，1.0eq.)吲哚美辛，并加入5mL二氯甲烷室温下磁力搅拌均匀。逐滴滴入草酰氯380mg(3.0mmol，3.0eq.)，待搅拌均匀后，用毛细管蘸取一滴DMF加入反应液中进行催化，室温反应0.5小时。反应完毕后，用真空旋转蒸发仪(20℃)除去溶剂和未完全反应的草酰氯。另准备100mL茄形瓶，加入PEA 240mg(0.8mmol，0.8eq.)、三乙胺101mg(1mmol，1.0eq.)和5mL二氯甲烷搅拌均匀，加入刚刚旋干的残渣，室温反应4小时，期间用TLC监测(PE:EA＝1:1，R

实施例6：非甾体抗炎药-十六酰胺乙醇偶联的抗炎镇痛作用筛选；

所用动物为健康雌性ICR小鼠，体重(22±4g)。动物环境温度(22±2)℃，相对湿度为(50±5)％，明暗周期为12h/12h(开/关灯时间：8:00AM/20:00PM)的环境中生活，可自由进食，饮水。实验前禁食。

角叉菜胶(CAR)诱导的炎症模型，实验前一晚小鼠禁食但不断水，实验开始前将小鼠移至实验环境并适应仪器30min。小鼠右后足足底皮下注射(i.pl.)1％的角叉菜胶溶液(溶于生理盐水)20μL诱导外周炎症，2.5-3小时后角叉菜胶处理的小鼠对机械性刺激的敏感度增加，表现为缩足阈值的降低。按给药体积0.1mL/100g灌胃给药后30min,60min,90min，120min检测小鼠右后足跖的机械痛阈值。

痛觉超敏通过缩足阈值(MWTs)来判定，用ZH-ZKL动态足底分析仪评估。小鼠被放在底部是金属丝网的高架台上，用亚克力板挡板制成6-8隔室，实验前小鼠须适应至少30min，测试时用一根金属细丝(直径0.4mm)，对小鼠后足施加压力(直至小鼠出现缩足反应)，缩足阈值被自动记录(单位以g表示)，过程重复三次，中间30s的间隔。测试过程不碰触金属丝网。

镇痛抑制率(MPE％)＝(给药后机械阈值﹣0min机械阈值)/(造模前基线值﹣0min机械阈值)×100％

表1：非甾体抗炎药-十六酰胺乙醇偶联(50mg/kg)的角叉菜胶诱导炎症性疼痛模型

通过对比分析，说明萘普生-十六酰胺乙醇(50mg/kg)、吲哚美辛-十六酰胺乙醇(50mg/kg)的镇痛作用相对较强，进一步对它们展开更深一步的镇痛活性研究。

实施例7：萘普生-十六酰胺乙醇偶联药物抗炎镇痛作用评价；

萘普生-十六酰胺乙醇的偶联药物对炎症性疼痛具有剂量依赖的镇痛作用，在25、50、100mg/kg三个剂量下的最大镇痛抑制率分别为22.2％、49.7％、58.4％，经计算其ED

实施例8：吲哚美辛-十六酰胺乙醇偶联药物抗炎镇痛作用评价；

吲哚美辛-十六酰胺乙醇的偶联药物对炎症性疼痛具有剂量依赖的镇痛作用，在12.5、25、50、100mg/kg四个剂量下的最大镇痛抑制率分别为20.8％、36.2％、62.1％、74.4％，经计算其ED

以上实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。