一种促糖尿病皮肤创面组织再生修复活性肽及其应用

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种促糖尿病皮肤创面组织再生修复活性肽及其应用。

背景技术

慢性难愈合性皮肤创面在糖尿病患者等严重慢性病患者中尤为常见。随着糖尿病患者数量的不断增加，糖尿病溃疡的发病率也逐年上升，现已成为溃疡患者中仅次于手术后的主要原因。糖尿病皮肤创面致残率高且治疗昂贵，严重影响糖尿病患者的生活质量。目前，糖尿病慢性难愈合性创面的治疗方法包括控制血糖、抗感染和清创治疗等，但效果并不理想，因此迫切需要探索新的治疗策略。在糖尿病患者中，由于持续的高血糖环境，其创面修复过程往往受到严重干扰。这种高血糖状态会导致创面炎症反应异常，上皮化进程受到阻碍，并涉及多个病理生理过程。糖尿病皮肤创面难以修复的主要原因包括创面局部生长因子分泌减少、氧化应激、血管受损、慢性炎症反应等。鉴于糖尿病溃疡的愈合机制具有高度复杂性且尚未被全面揭示，其治疗方案依然是当前临床医学面临的一项重要挑战。因此，进一步深入挖掘糖尿病溃疡的新型治疗方法，对于确立清晰的治疗方向和寻找新的治疗靶点至关重要。

近年来，从两栖动物皮肤中提取的生物活性肽在全球药物研发领域异军突起。这些多肽强效的修复能力和较低的生物毒性，使其成为未来药物研发的重要候选。作为一种外源性分子探针，生物活性肽不仅为基础科学研究打开新的研究视角，更重要的是，帮助科研人员更深刻地揭示疾病的根源。目前，针对生物活性肽的研究倍受关注。

滇蛙蝌蚪生活在海拔450-1200 m的中大型山溪中，为适应生活环境，它们的皮肤分泌物含有丰富的生物活性肽。本发明旨在提供一种来源于滇蛙蝌蚪的具有显著促慢性难愈合性皮肤创面修复的活性肽Lividin-x299。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种活性肽Lividin-x299，本发明的第二目的是提供所述活性肽Lividin-x299的应用。

本发明的第一目的是这样实现的，所述活性肽Lividin-x299的氨基酸序列为：TPFYSMLIMCALYNRC，如SEQ ID NO.1所示，其结构式如式（I）所示：

式（I）。

本发明的第二目的是这样实现的，所述活性肽Lividin-x299的应用为在制备促皮肤创面修复药物中的应用，尤其为在制备促慢性糖尿病皮肤相关创面修复药物中的应用。

本发明的有益效果为：本发明提供的活性肽Lividin-x299具有优异的促皮肤创面修复活性，实验结果显示，采用其对糖尿病小鼠的创面进行治疗时，治疗5天和10天后，Lividin-x299低剂量组和Lividin-x299高剂量组的促伤口修复程度均显著高于空白组。治疗5天后，阳性对照组，Lividin-x299低剂量组促伤口修复活性达到62.3%，显著高于空白组，10天后，Lividin-x299低剂量组的促伤口修复活性高达81.6%，显著促进了糖尿病慢性皮肤创面的再生，对糖尿病小鼠的难愈性创面具有优异的修复效果。

本发明提供的活性肽Lividin-x299是一种来源于滇蛙蝌蚪的生物活性肽，具有两栖动物来源的多肽的共性：活性、靶向性强，毒性小等。本发明生物活性肽Lividin-x29作为一种外源性分子探针，为解析内源性慢性糖尿病皮肤创面修复的机制以及相关促修复药物的研发开辟了新的路径和新的研究方向。

附图说明

图1为本发明活性肽Lividin-x299的结构式；

图2为本发明活性肽Lividin-x299对Ⅱ型糖尿病小鼠皮肤全皮层损伤的修复结果图；

图3为本发明活性肽Lividin-x299对Ⅱ型糖尿病小鼠皮肤全皮层损伤的愈合率量化图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步的详细说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或改进，均落入本发明的保护范围。

本发明提供了一种活性肽Lividin-x299，其氨基酸序列为：TPFYSMLIMCALYNRC，其结构式如式（I）所示：

式（I）

本发明还提供了所述活性肽Lividin-x299在制备促皮肤创面修复药物中的应用。

所述皮肤创伤为Ⅱ型糖尿病慢性皮肤创面。

本发明进一步提供了一种药物组合物，其包含作为活性剂的所述活性肽Lividin-x299及其药学上有效的载体。

实施例1活性肽Lividin-x299的合成

发明人从滇蛙蝌蚪相关分泌物中鉴定出一系列促组织再生活性肽类分子群。其中活性肽Lividin-x299的氨基酸序列为：TPFYSMLIMCALYNRC，可采用常规化学合成或基因表达的方式制备得到。

本发明活性肽Lividin-x299由武汉百意欣生物技术有限公司按照设计的Lividin-x299结构合成（图1）。

实施例2活性肽Lividin-x299促Ⅱ型糖尿病小鼠皮肤创面修复活性检测

实验方法：Ⅱ型糖尿病小鼠全皮层损伤实验

使用链脲佐菌素构建昆明小鼠Ⅱ型糖尿病动物模型。用1%戊巴比妥钠（60mg/kg）麻醉昆明小鼠，去除背部皮毛。在小鼠背部两侧使用活检穿刺器创建两个直径为8 mm的全层伤口。将小鼠随机分为四组，分别为空白组（control, PBS），阳性对照组（rh-bFGF, 100ng/ml），Lividin-x299低剂量组（1 nM）和Lividin-x299高剂量组（10 nM）。每间隔12小时给药一次，每次将10 µL不同的药物均匀涂覆于伤口表面，术后0，5和10天拍照记录创口变化情况。

结果：如图2所示，随着治疗时间的增加，四个组小鼠的皮肤伤口面积都逐渐减小，而活性肽Lividin-x299低剂量组和高剂量组同阳性对照组一样，能够显著促进小鼠背部全皮层创口修复。治疗5天和10天后，阳性对照组，Lividin-x299低剂量组和Lividin-x299高剂量组的促伤口修复程度均显著高于空白组。如图3所示，治疗5天后，阳性对照组，Lividin-x299低剂量组和Lividin-x299高剂量组促伤口修复活性分别达到62.3%，64%和38.9%，三个组的疗效显著高于空白组。值得注意的是，10天后Lividin-x299低剂量组的促伤口修复活性高达77.8%和81.6%，优于阳性对照组且显著高于空白组。

综上，本发明提供的活性肽Lividin-x299具有较强的促皮肤组织再生活性，具有一定的药物研发和临床应用价值。