生物化学、啤酒、烈性酒、果汁酒、醋、微生物学、酶学、突变或遗传工程

本发明提供了一种shRNA，编码所述shRNA的正义链和反义链核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO.1‑2或3‑4或5‑6。本发明提供的shRNA以及含有该shRNA的表达载体能有效沉默gat、vacht或vglut基因，抑制伊蚊幼虫生长，提高伊蚊体内抗氧化酶活性，可用于伊蚊的生物控制，具有环境友好的特色和较高的商业应用价值，例如具体实施方式将含有本发明shRNA的表达载体转化微藻核基因组，获得工程藻株，喂养伊蚊幼虫，能够有效沉默靶基因，减少伊蚊幼虫体长，提高伊蚊体内抗氧化酶活性，并使伊蚊幼虫致死。同时本发明采用的shRNA作为RNAi外源性片段，结构单一，专一性更强，能有效降低脱靶概率。

本发明提供了一种1型鸭病毒性肝炎检测试剂盒，包括DVH‑1保守序列扩增引物对、探针；所述DVH‑1保守序列扩增引物对包括上游引物和下游引物，序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示；所述探针序列如SEQ ID NO.3所示，且5’端连接荧光报告基团，3’端连接荧光淬灭基团。本发明还提供了一种上述试剂盒在检测鸭病毒性肝炎中的应用以及1型鸭病毒性肝炎检测方法。本发明试剂盒采用特定扩增引物对及探针对鸭病毒性肝炎特异性的DVH‑1型保守序列进行检测，准确度高、灵敏性好、特异性强，且检测过程耗时短、不易污染，检测结果更准确。

一种检测一体机及其检测方法，包括核酸提取检测模块、机械手模块和光学模块，核酸提取模块用于放置提取卡盒、检测卡盒，其中，提取卡盒用于容纳核酸提取试剂和样本，检测卡盒用于容纳检测靶向试剂，机械手模块用于对将提取卡盒内的提取后的核酸移动至检测卡盒内并将检测卡盒闭合，通过热盖机构对检测卡盒顶部温控，从而防止检测过程中高温产生的气溶胶对环境造成污染，提高本检测一体机的检测生物安全性，本装置的检测过程自动化程度高，检测过程中无需工作人员介入，进一步提高本检测装置的检测效率和检测精度。

本发明属于类器官培养技术领域，具体涉及一种基于iPSC的人血管化肺类器官及其构建方法。针对现有的人成体肺组织来源受限、肺类器官血管化困难，功能缺失、易发生免疫排斥，难以实现临床转化等问题，本发明首次提供了一种基于iPSC的人血管化肺类器官及其构建方法。本发明通过采用特别设计的培养基，通过定向诱导培养分别得到iPSC来源的血管类器官和肺类器官，再将二者采用合适的比例进行融合培养。最终构建得到的血管化肺类器官形成明显的网络状血管结构，提高了肺类器官在体外培养时的存活率，构建了具有肺上皮细胞，内皮细胞，周细胞和成纤维细胞等多种细胞类型的复杂类器官，为研究病原体与宿主反应，发病机制和药物筛选方面提供了强大的平台。

本发明公开了一种膀胱癌循环肿瘤细胞的处理方法及其应用，属于生物医学技术领域。本发明通过CD45抗体磁珠负向富集循环肿瘤细胞，再联合CEP3、CEP7、CEP17和P16四种探针对膀胱癌患者外周血中的循环肿瘤细胞进行检测。本发明检测方法灵敏度高，特异性强，能够高效捕获并检测出膀胱癌患者外周血中循环肿瘤细胞，以此来即时地监测患者术后CTCs变化，以便对患者的状态进行实时观察，可有效实现肿瘤复发预警，疗效及时评价以及肿瘤个体化治疗用药指导。

本发明公开的用于管癌筛查的标志物、检测试剂盒及食管癌筛查方法，所述标志物由DERL1、ZBED6、KLHL15、FOU3F1、KCNA3和OTOP2构成；检测试剂盒内含有能够特异性检测生物样本中上述六个目标基因的核苷酸序列的全长或其任意部分区域核苷酸序列中CpG二核苷酸位点甲基化水平的检测试剂。发明以DNA甲基化异常作为检测对象，基于数字PCR技术，可在微反应单元内高效灵敏地完成目标核酸片段的PCR扩增，获取荧光信号进行统计学分析，摆脱对标准曲线的依赖而直接给出靶序列的拷贝数，提高实验结果在批内和批间的稳定性，提高核酸检测方法的灵敏度，有效减少假阴性的出现，适用于临床检测。

本发明公开了一类特异性分子靶标及其用于快速检测粪肠球菌的方法，所述特异性分子靶标的碱基序列如SEQ ID No.1‑SEQ ID No.20所示。检测方法：根据碱基序列SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.20中的任一个分子靶标来设计特异性扩增引物对；提取样品DNA，PCR法扩增；凝胶电泳检测扩增产物，如电泳结果出现相应的单一扩增条带，则判断样品中含有目标菌，反之则判断样品中不含目标菌。该检测方法具有检测时间短、成本低、操作简单、特异性强等优点，无需经过生化鉴定即可检测到粪肠球菌，更加具有实用性。

本发明公开了用于预测肿瘤进展及预后的基因标志物组合，属于医学分子生物学领域。所述基因标志物组合包括ANXA1基因，或包括ANXA1基因及S100A10、SPP1、CAV1、VIM、CD44、SERPINH1、LGALS3、CEBPB、ATF5和LGALS1中的至少一个基因。本发明还公开了基于所述基因标志物组合的试剂盒及系统。利用本发明，可以预测多种肿瘤的进展及预后，具有非常大的临床应用价值。

本发明公开了一种提高大豆抗病毒性能的基因及其应用，所述基因命名为Rmv920，所述Rmv920基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述用途为利用该基因干预植物对大豆花叶病毒的抗性。本发明成功开发和确认了命名为Rmv920的基因在抗大豆花叶病毒以及其它相关植物病毒中的效能；本发明的研究成果具有重要的理论和实用价值。

本发明涉及一种副干酪乳酪杆菌发酵葡聚糖后生元粉的方法及应用，采用副干酪乳酪杆菌IOB413进行发酵，发酵底物内添加大豆球蛋白‑葡聚糖，发酵后干燥制备的到后生元粉。本发明通过副干酪乳酪杆菌IOB413发酵大豆球蛋白‑葡聚糖后生元粉产品营养成分检测和致敏性、消化性检测，结果表明副干酪乳酪杆菌IOB413发酵大豆球蛋白‑葡聚糖产物后生元粉具有低致敏性、较好的消化特性等优势。

本发明提供了一种与大豆抗蚜虫基因紧密连锁的分子标记M1147和应用，涉及分子标记辅助育种技术领域。本发明所述大豆抗蚜虫基因位于大豆基因组第13号染色体上物理位置30,700,000～30,900,000之间，并基于所述大豆抗蚜虫基因设计了分子标记和对应的分子标记检测方法。利用这些分子标记进行辅助选择，极大地提高了筛选效率，从而缩短培育抗蚜品种的育种年限。

本申请公开了一种红托竹荪菌株ZJZS001、栽培方法、分子标记及其检测试剂盒，保藏编号CCTCC M 20221882，对肉青霉、聚多曲霉有很强的拮抗能力。该菌株生长快，播种至出菇需25天，短于现有红托竹荪商栽品种(对照QF1)；第一潮菌蛋数量为62个/m2，菌蛋密度较高；不含菌托、孢子的鲜竹荪产量2395g/m2，产量高于对照QF1；该菌株子实体所含蛋白质、多糖、谷氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、总糖、硒、铁、锌、钾、铜、维生素B1、维生素B2的含量均高于对照QF1，其中该菌株子实体的铁含量为对照QF1的3倍，锌含量相对对照QF1增加34.89％，产品开发利用价值高。

本发明公开了一种表达LGALS9的通用型细胞及其制备方法与应用。通过在细胞中失活主要组织相容性复合体MHC‑I和II类基因后，过表达LGALS9蛋白，获得的人多能干细胞或人类细胞系可在逃逸T细胞攻击的基础上，进一步逃逸NK细胞的杀伤。同时这些低免疫原性的多能干细胞保留了其干性和分化能力。

本申请公开了一种核酸等温扩增数字检测系统、服务器，其中系统包括依次连接的样本前处理单元、加样单元、检测单元、计算单元，加样单元与温控单元连接；样本前处理单元用于利用真空负压将样本液体输送至加样单元；加样单元用于在温控单元的控制下，对所述样本液体进行裂解，得到样本裂解溶液，对其进行扩增反应得到扩增产物；检测单元用于对扩增产物进行荧光检测；计算单元用于对所述荧光检测结果进行分析，输出判读结果，当所述判读结果为阳性时，触发报警指令。本申请可以在不良环境下全流程、一体化、数字化、智能移动化、高效准确地实现核酸等温扩增数字检测，解决当前大多数POCT类核酸检测设备单一、精准性不够的问题。

本发明公开了一种用于乳酸菌厌氧发酵的发酵罐，涉及发酵罐技术领域，包括固定设置在发酵罐体上的支撑柱，所述支撑柱的另一端与一号电机固定连接，所述一号电机的电机轴与旋转轴固定连接，所述旋转轴上滑动设有破碎机构，本发明通过设置一个破碎机构，通过线轮、绳索与扭力弹簧的配合，带动锥齿轮组往复旋转，并在棘轮圈与两个棘爪的配合下，使得破碎杆保持持续的旋转，并带动齿轮与扇形齿轮与滤网上的齿圈配合，从而带动滤网进行往复摆动，从而扩大整体的破碎范围，使得破碎范围更大，同时在与升降组件进行配合，可以刮去搅拌轴上的粘连的结块，同时通过上下移动进一步的扩大整体的破碎范围，大大增强整体的破碎效果。

本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种与山羊生长性状相关的SNP分子标记rs655589732的应用。所述的山羊SNP分子标记位点如SEQ ID NO.1所示，位于该序列片段的第51位碱基位点处存在一个G/T的碱基突变。本发明通过优选该SNP的优势等位基因G，能够逐代增加优势等位基因频率，提高山羊12月龄体重，加快山羊遗传改良进展从而有效提高山羊育种的经济效益。

本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种与山羊生长性状相关的SNP分子标记rs642525408的应用。所述的山羊SNP分子标记位点如SEQ ID NO.1所示，位于该序列片段的第51位碱基位点处存在一个G/A的碱基突变。本发明通过优选该SNP的优势等位基因，能够逐代增加优势等位基因频率，提高山羊12月龄体重，加快山羊遗传改良进展从而有效提高山羊育种的经济效益。

本发明公开了一种低维纳米材料在DNA特异性位点的识别剪切上的应用，将低维纳米材料溶液与DNA溶液混合，从而利用低维纳米材料的催化活性对DNA的特异性位点进行识别剪切；其中，所述DNA具有至少一个由至少7个连续的碱基T组成的特异性位点。本发明具有无需外界光和金属离子驱动剪切，无需氨基酸等有机材料修饰，剪切效率高、对温度容忍度高等优点，实现了无机低维纳米材料对DNA特异性位点的识别剪切。

本发明涉及生物医学技术领域，尤其是涉及一种高血压诊断标志物及其应用，标志物为Bacteroides faecis。本发明通过测试受试者的样本中Bacteroides faecis肠道菌株的相对丰度分析收缩压SBP和舒张压DBP的斯皮尔曼相关系数，绘制线性回归曲线，采用ROC曲线和曲线下面积AUC评估受试者是否患有高血压。首次发现了新的与高血压相关的Bacteroides faecis肠道菌株，并将其作为标志物，用于制备诊断或辅助诊断高血压检测工具，为高血压诊断及早期预防提供了有效且可靠的手段，不仅有利于高血压的诊断与分型，而且提高了对高血压的临床病理的认识和理解，为未来高血压的治疗与防治提供了新思路。

提供了一种耐热B家族DNA聚合酶突变体及其应用。提供了耐热B家族DNA聚合酶突变体，为将耐热B家族DNA聚合酶氨基酸序列中的A组3个位点408、409和410中至少2个位点的氨基酸残基进行突变，得到具有DNA聚合酶活性的蛋白。对几种B家族的DNA聚合酶的A组位点(408/409/410)、B组位点(451/485)、C组位点(389/383/384)、D组位点(589/676/680)、E组位点(491/493/494/497)和F组位点(474/478/486/480/484)等位点进行分析，从而进行突变体的设计。突变后的几组DNA聚合酶相比非突变DNA聚合酶在催化3’阻断修饰的核苷酸方面，展示了较强的聚合能力，为高通量测序可持续发展提供基础。

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种栽培茄来源的马铃薯晚疫病主效抗性基因Rpi‑mel1及其编码蛋白与应用，该发明将栽培茄来源的主效抗性基因Rpi‑mel1克隆到马铃薯中，通过异源过表达SEQ ID NO:1序列提高马铃薯中Rpi‑mel1编码蛋白的水平，从而使马铃薯叶片具有更强的晚疫病抗性。本发明SEQ ID NO:1所示的抗性基因序列来源于栽培茄(Solanummelongena)；对上述序列的异源过表达提高马铃薯中Rpi‑mel1编码蛋白的水平；遗传改造后马铃薯叶片具有更强的晚疫病抗性。

本发明提供了一种牛副流感病毒3型和牛病毒性腹泻病毒二联腺病毒载体疫苗，它是将BPIV3C F基因、BVDV‑1E2基因克隆至复制缺陷型人5型腺病毒载体上制备得到，其中，BPIV3C F基因序列如SEQ ID No.1所示，BVDV‑1E2基因序列如SEQ ID No.2所示。本发明二联疫苗可刺激机体产生较强的细胞免疫和体液免疫，免疫效果好，安全性高。

本发明公开了一种脐带血造血干细胞倒置分离工艺，包括以下步骤：步骤一、脐带血的采集，自胎盘上采取脐带血，并将脐带血转移至血袋中进行存储；步骤二、脐带血的离心，利用离心机对脐带血进行离心加工，以得到具有内含多液层的血袋；步骤三、多液层的自动分隔，将内含多液层的血袋置于液层分隔装置中，液层分隔装置对血袋中的血浆层、白细胞层以及红细胞层进行分隔；步骤四、白细胞层的收集，分切集液装置对血袋中与白细胞层对应位置的表面分切开，白细胞层液进入分切集液装置；步骤五、干细胞储藏，自白细胞层液提取干细胞并加入细胞冷冻保护液，完成后进行冷冻储藏处理。本发明是一种可避免界面溶液混合，可实现精确快速分浆的分离工艺。

本发明涉及一种蕈状芽孢杆菌HDCM2及其应用，具体涉及一种耐盐碱、广谱抗病和具有促生作用的蕈状芽孢杆菌HDCM2，属于微生物技术领域。所述蕈状芽孢杆菌HDCM2的保藏信息为：保藏编号为CGMCC No：28574，保藏日期为2023年9月28日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类命名为蕈状芽孢杆菌（Bacillus mycoides）。本发明对葡萄灰霉、草莓暹罗炭疽菌、玉米胶孢炭疽菌、梨轮纹病、大豆疫霉和马铃薯致病疫霉这六种供试植物病原真菌具有较好的抑菌效果，耐盐碱，对多种植物具有促生作用。可作为土壤改良、广谱防病和促生的微生物菌剂。

本发明涉及一种稳定表达TRPV4突变体的细胞系、构建细胞系的方法及应用、分离的核酸、载体、重组慢病毒载体、重组慢病毒和重组细胞。所述构建细胞系的方法包括：将分离的核酸、载体、重组慢病毒载体或重组慢病毒与受体细胞进行共孵育，获得稳定表达TRPV4突变体的细胞系。本发明构建的细胞系可用于探索TRPV4的分子功能及特性，为揭示TRPV4在体内的生理功能，并针对其特性开展基础、应用和药物研究提供了研究工具和平台。

本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种与山羊生长性状相关的SNP分子标记rs669481944的应用。所述的山羊SNP分子标记位点如SEQ ID NO.1所示，位于该序列片段的第51位碱基位点处存在一个T/C的碱基突变。本发明通过优选该SNP分子标记的优势等位基因型，能够提高山羊后代12月龄体重，用于种羊的遗传改良，有效地提高肉羊养殖业的经济效益。

本发明属于微生物发酵技术领域，尤其涉及一种基于产油微生物发酵制备微生物油脂和生物柴油的级联系统及方法，所述级联系统包括原料预处理系统、糖化水解系统、产油微生物发酵系统、油脂提取系统、转酯化反应系统和生物柴油纯化系统。本发明通过整合转化过程链条中的多个关键步骤，并吸收最新的绿色技术，整个系统具有模块化、标准化、生态环保、易于智能化控制、易于产业放大、不产生二次污染的优点，并能保证整个系统的连续、稳定运行，具有广阔的应用前景。

本发明公开了一种与小孢子胚胎发生基因连锁的SNP分子标记Me‑5676929及其应用和专用引物。该SNP分子标记位于2号染色体的166621892bp处，碱基为A或G；所述分子标记的位置是基于辣椒参考基因组CM334确定的。检测该分子标记的物质可用于辅助选育高小孢子胚胎发生频率的辣椒品种或者鉴定待测辣椒品种的小孢子胚胎发生频率的高低。其为建立高效、稳定的辣椒单倍体培育技术体系提供实用的分子标记。

本发明涉及高效降解苯酚的耐高温工程菌及制备方法和应用，通过过表达苯酚羟化酶改造野生型热葡萄糖土杆菌，或者共表达苯酚羟化酶和邻苯二酚双加氧酶改造野生型热葡萄糖土杆菌，从而获得能够高效降解苯酚的工程菌36‑S1和36‑S2。改造后得到的工程菌与野生型热葡萄糖土杆菌比较，对苯酚的降解能力有了明显提高，能够用于处理含酚污水，降解污水中的有毒污染物，对环境污染治理具有重要意义和应用价值。

本发明公开了表达SARS‑CoV‑2Omicron Spike蛋白的重组腺病毒及其应用。本发明提供的重组腺病毒是将重组质粒转染腺病毒包装细胞然后进行细胞培养得到的。所述重组质粒为将编码序列3所示蛋白质的DNA分子插入黑猩猩腺病毒载体得到的。本发明在黑猩猩腺病毒载体的△E1区域插入全长SARS‑CoV‑2Omicron变异株Spike蛋白变体的编码基因，通过腺病毒侵染细胞将遗传物质导入靶细胞中转录表达相应的抗原蛋白。蛋白变体中具有膜锚定信号肽、跨膜区和胞内区，所以表达好的蛋白不会分泌到胞外，而是模拟病毒颗粒表面刺突，插在靶细胞的膜上从而起到免疫原的作用，刺激机体产生免疫反应。

本发明属于免疫工程领域，具体公开了一种山羊肺炎支原体M17抗原基因‑羊痘病毒重组多价疫苗及其构建方法，所述方法包括以下步骤：1)山羊肺炎支原体M17基因的获得及原核表达：2)山羊肺炎支原体M17‑羊痘病毒重组表达载体的构建；3)多价病毒的重组与筛选；4)重组病毒的纯化与鉴定；5)双报告系统的消除；本发明利用羊痘病毒可插入26‑45kb的外源基因而不影响病毒繁殖传代，且羊痘病毒弱毒疫苗免疫效果好，具有研发重组多价疫苗的潜质的优点，以羊痘病毒疫苗株为载体，重组羊肺炎支原体重要抗原基因M17构建重组多价疫苗，能够同时对羊痘和羊支原体肺炎具有免疫保护作用。

一种改善高温下稻米品质表现的Wx自然变异位点及其应用，位于Wx基因第十号外显子115位核苷酸（Ex10‑115），存在C/T自然变异；该变异位点与高温下Wx基因编码的GBSSI蛋白和直链淀粉合成的稳定性以及稻米外观密切相关。一个控制水稻直链淀粉含量高温敏感性的Wx位点，该位点位于Wx基因第十号外显子115位核苷酸（Ex10‑115），存在C/T自然变异。Wxa基因的Ex10‑115位点为胸腺嘧啶T，而其它所有的Wx等位基因的Ex10‑115位点均为胞嘧啶C，T/C变异导致了该位点编码的氨基酸从丝氨酸突变成脯氨酸。Ex10‑115位点为C的Wxa型GBSSI蛋白的高温稳定性比Wxb型GBSSI蛋白更强，所控制合成的直链淀粉含量在高温下也更稳定。

本发明公开了一种酵母展示载体及酵母展示方法。本发明的酵母展示载体能够高效率展示，便于抗体或抗原结合片段的改造及建库。

本发明涉及分子标记技术领域，提供一种可对不同浙江红花油茶进行基因型分型的SNP引物及检测方法。本发明的引物共24对，其中12对SNP引物的分型结果组合可以用于浙江红花油茶优良无性系的指纹图谱构建。本发明利用浙江红花油茶基因组数据开发的SNP引物能够对不同浙江红花油茶进行基因型分型检测，并且本发明操作方法简单，通量高，成本低。此外，本发明开发的12对SNP引物构建了不同浙江红花油茶优良无性系的指纹图谱，证明了24个SNP位点可以用来开展浙江红花油茶种质资源鉴定、遗传多样性研究及基于SNP的分子标记关联分析等研究，是一种可靠有效的分子标记。

本发明涉及依克多因合成菌株及其构建方法和应用，该菌株通过在宿主菌中表达ectABC基因簇获得；所述宿主菌为大肠杆菌（Escherichia coli）MG1655；所述ectABC基因簇的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的菌株能够使用低价氮源高效合成依克多因，依克多因产量高并且所得发酵液中杂质较少。

本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种与山羊生长性状相关的SNP分子标记rs645505906的应用。所述的山羊SNP分子标记位点如SEQ ID NO.1所示，位于该序列片段的第51位碱基位点处存在一个C/A的碱基突变。本发明通过优选该SNP的优势等位基因，能够逐代增加优势等位基因频率，提高山羊12月龄体重，加快山羊遗传改良进展从而有效提高山羊育种的经济效益。

本申请涉及生物技术领域，公开一种使用加液装置的加液方法，加液装置包括：试剂组件，包括试剂容器和试剂管路；清洗组件，包括清洗液容器和清洗液管路；及试剂抽取件和试剂输送组件；所述方法包括：在目标容器存在加液需求的情况下，控制试剂组件的试剂管路导通及试剂抽取件开启，以将试剂抽取并暂存于试剂输出组件；控制试剂输出组件向目标容器添加目标剂量的试剂；在目标容器完成加液且预设时长内不存在加液需求的情况下，控制清洗组件的清洗液管路导通及试剂抽取件开启、试剂组件的试剂管路截止，以对试剂组件管路中残留的试剂进行清洗。该方法在保证培养液等试剂不被污染的情况下，实现对管路的清洗且节省试剂量。本申请还公开一种加液装置。

本发明公开了一个SNP分子标记及其在青稞抽穗期性状辅助育种上的应用，所述SNP分子标记位于SEQ ID No.1所示核苷酸序列的第101位，该位点具有T/C多态性，当该位点基因型为TT时，具有较长的抽穗期。本发明的SNP分子标记与青稞抽穗期紧密关联，通过对该位点进行基因分型，即可判断青稞种质的抽穗期长短，该SNP分子标记可用于青稞抽穗期性状的分子辅助育种。

本发明涉及生物防治技术技术领域。本发明提供了一株抑制羊肚菌子囊果白霉病的环状尼氏芽孢杆菌及其应用，所述环状尼氏芽孢杆菌的保藏名称为Niallia circulans D145，拉丁文为Niallia circulans，保藏日期：2023年8月31日，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO：M 20231567。本发明的环状尼氏芽孢杆菌可以有效防控羊肚菌种植过程中的羊肚菌子囊果白霉病，使用本发明菌株进行羊肚菌白霉病生物防控，可以有效控制羊肚菌白霉病发生，增加羊肚菌产量，效果好，安全性高。

本发明属于微生物发酵生产技术领域，具体涉及一种D‑泛酸生产菌株、菌剂、生产D‑泛酸的方法和应用，所述D‑泛酸生产菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No.M20231938，本发明菌株应用于生产D‑泛酸，大大提高了D‑泛酸的发酵产酸率，提高糖转化率，降低生产成本。

本发明公开了一种非均相功能化催化剂Cyt.C@ZIF‑8及其制备方法和应用，该非均相功能化催化剂Cyt.C@ZIF‑8为多元金属有机骨架ZIF‑8空腔内包埋细胞色素C酶，所述多元金属有机骨架ZIF‑8为菱形十二面体，所述多元金属有机骨架ZIF‑8包含咪唑‑2‑甲酸、2‑甲基咪唑和锌离子，咪唑‑2‑甲酸和2‑甲基咪唑分别和锌离子在ZIF‑8骨架上混配。本发明通过酶、锌离子、2‑甲基咪唑和咪唑‑2‑甲酸的仿生矿化，调节咪唑‑2‑甲酸的加入量，增加MOF的负电性，提高了酶的催化活性；同时固定化酶比游离酶具有更高的催化活性。原料廉价，制备条件绿色温和，方法简单，得到的产品具有良好的催化活性。

本发明涉及斯氏假单胞菌Pseudomonas stutzeri DW84菌株作为微生物菌剂在促进烟株植株生长中的应用，应用该菌株在盆栽实验中显示病情指数仅为1.04，相对防效高达到96.15％，对烟草青枯病的防治效果极佳；大田中也表现出60％以上优异的防控效果，极大抑制和防治烟草青枯病的发生。菌株Pseudomonas stutzeri DW84还具有优异的促进烟草植株生长的性能，在室内盆栽试验和大田试验均显示Pseudomonas stutzeri DW84处理组在烟草株高、根长、鲜重、干重等生长指标上均显著高于对照组，也可用于促烟草植株生长中。

本发明提供了检测与鸽胸肌重有关的SNP分子标记的试剂在鉴定和选育相对较大胸肌重鸽的应用，其主要特点是，所述的SNP分子标记位于鸽基因组GCA_028654425.1的4号染色体的第53322790位点处，该处碱基为T或A。本发明同时还提供了该SNP分子标记的序列以及对应的引物组，通过该分子标记和引物组，可利用PCR技术和直接测序法建立快速、高效、准确的分子标记辅助育种技术，进行欧洲肉鸽的早期选育，降低饲养成本，提高生产效益。

本发明公开了一种用于马尾藻无性增殖的培养基及其应用，主要包括提供马尾藻无性增殖三个阶段使用的USAES培养基、GSES培养基、SES培养基。本发明主要选取了马尾藻中的食用海藻羊栖菜作为研究对象，通过利用本培养基培养的羊栖菜假根根丝的相对生长率以及类愈伤组织/不定芽的诱导率及枝段再生数作为指标判断本培养基的应用效果。经过试验证实利用本培养基培养所得的羊栖菜藻体的相对生长率和Fv/Fm也较高，相对生长率最佳可达(4.11±0.424)％/天，Fv/Fm可达0.679±0.0328，本发明可为后续马尾藻的大规模培养提供参考，实施性较强，培养方法经济，不会造成污染，具有一定的实际意义。

本发明提供了一种用于测定小脑共济失调相关基因重复序列动态突变的复合检测引物组及应用，属于临床分子检测技术领域。本发明提供的用于测定小脑共济失调相关基因重复序列动态突变的复合检测引物组包括如SEQ ID NO.1～12所示的引物序列。包含此引物序列的检测体系可以同时检测SCA1、SCA2、SCA3、SCA6、SCA12、DRPLA相关基因的(CAG)n扩增突变。使用单次扩增即可对这几个亚型进行准确分析，分析流程清晰简便。

本发明属于分子生物学和微生物发酵领域，具体涉及一株bacillomycin D高产菌株的构建方法，具体是对bacillomycin D合成酶系进行改造，通过替换bacillomycin D合成酶系中的启动子并敲除竞争途径，最终，叠加工程菌中bacillomycin D的产量可达到出发菌株fmbJ的2.55倍。这为bacillomycin D的高效合成提供了一种较为系统的方法，为高效合成脂肽的研究提供了理论基础。

本发明提供了一种白酒的静动超高压联合催促陈化工艺，所述工艺包括以下步骤：步骤S1、将蒸馏出来的原酒用不锈钢泵泵入超高压机的高压筒内；步骤S2、以静压力保压一定时间；步骤S3、以一定压力进行超高压均质，冷却至10℃以下；步骤S4、最后将白酒进行装桶或装瓶保存，从而实现白酒的陈化；本发明能够经静压和高压联合缩短白酒陈化时间。

本发明提供了一种全氟硅烷化二氧化硅纳米颗粒在微滴数字PCR油相表面活性剂中的应用，涉及生物技术领域。经发明人研究发现，二氧化硅纳米颗粒经过全氟烃基硅烷化试剂硅烷化后，在纳米颗粒表面形成一定程度的硅烷化修饰，使得纳米颗粒表面带有部分的全氟烃基因而具有油水两亲的特性。在使用含全氟硅烷化二氧化硅纳米颗粒的氢氟醚生成油包水微液滴的过程中，二氧化硅纳米颗粒能迅速自主装到液滴的油水界面，形成保护层。该颗粒保护层相比高分子两亲性表面活性剂来说更难以从界面发生逃逸，并且此类表面活性剂不会在连续相中形成胶束，因此液滴的稳定性更好；得益于液滴良好的稳定性，该表面活性剂通用性更高，可适用于更多种类的核酸扩增Mix。

本发明涉及生物技术领域，具体涉及黄芪多糖在促进外源基因在植物体内瞬时表达中的应用，并提供了具体方法，包括如下步骤：(1)将外源基因构建表达载体，转入农杆菌，制备农杆菌浸染液；(2)种植植物种子，生长至幼苗；(3)使用步骤(1)制备得到的农杆菌浸染液侵染步骤(2)所述的植物幼苗叶片；(4)使用黄芪多糖溶液对步骤(3)得到的植物幼苗叶片进行浇灌；(5)将步骤(4)得到的植物幼苗叶片在提取缓冲液中研磨，离心，测定外源基因的表达量。所述的方法解决了苜蓿外源基因表达量低的技术问题；且所述的方法步骤简单，黄芪多糖可以通过从生物材料中提取等多种途径轻易获得，具有广阔的应用前景。

本发明公开了一种胚胎非整倍体的检测方法及应用，具体地，所述的方法包括采用第三代测序技术检测胚胎非整倍体。本发明的检测方法快速、便捷，对于产前和生育护理具有临床指导意义。