一种接合菌ZH-1及其应用

技术领域

本发明涉及植物真菌病害防治领域，特别涉及一种接合菌ZH-1及其应用。

背景技术

稻瘟病菌(

生物防治是利用其他微生物或微生物代谢产物来抑制病原菌的生长繁殖或调节植物生长的措施。我国近年来在生物防治技术方面研究比较多，并取得了很好的效果。目前，用于防治稻瘟病菌的主要有微生物源农药如真菌类，放线菌类和细菌类；植物源农药如皂荚、无患子、棒树、油茶等提取物；植物保护素类化合物如黄丽类化合物樱花素、萜类化合物稻壳酮Ａ和稻壳酮Ｂ等。由于生物防治具有安全、绿色、高效、环保能有点，成为植物病害防治的热点。

接合孢菌（

发明内容

本发明的目的在于提供一种接合菌ZH-1及其应用，能有效抑制稻瘟病菌，为水稻稻瘟病的绿色安全防治提供了新的途径。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种接合菌ZH-1，该菌株命名为

接合菌ZH-1作为防治水稻稻瘟病的生物制剂的应用。

一种防治水稻稻瘟病的微生物源农药，所述微生物源农药的微生物源为接合菌ZH-1。

一种防治水稻稻瘟病的方法，将接合菌ZH-1接种至液体培养基中培养，扩大培养后，过滤，水稻种子浸泡滤液后播种或将滤液喷洒于水稻植株表面。

本发明的有益效果是：该菌能够显著抑制稻瘟病菌、炭疽病菌等植物病原真菌的生长以及分生孢子的萌发，其液体培养状态下的滤液具有高效抑制稻瘟病菌的活性，能够实现对稻瘟病的防治。

附图说明

图1为接合菌ZH-1菌落形态。

图2为接合菌ZH-1菌丝（标尺为10 µm）和分生孢子形态（标尺为2 µm）。

图3为接合菌ZH-1对稻瘟病菌和炭疽菌菌落的抑制情况。

图4为接合菌ZH-1培养滤液对稻瘟病菌孢子萌发的抑制情况（标尺为50 µm）。

图5为接合菌ZH-1培养滤液处理后稻瘟病菌侵染大麦叶片情况。

图6为接合菌ZH-1培养滤液浸种水稻种子抑菌情况。

具体实施方式

下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的具体说明。

本发明中，若非特指，所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。

实施例1 接合菌ZH-1菌株的分离与鉴定

一、ZH-1菌株的获得、分离与纯化

在实验室（浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所真菌与植物研究室）环境下将稻瘟病菌接种于CM固体培养基（生工生物）中25℃培养7天，发现培养基中出现一个粉红色单菌落，该菌落可以明显抑制稻瘟病菌的生长，为了鉴定该菌株，将该菌株转接于新的CM固体培养基中25℃，16/8 h光照/黑暗交替培养。在培养15天后，向培养基中加入2 mL无菌水，将菌丝轻轻刮下，用三层滤纸过滤收集孢子，并将孢子稀释到10

二、菌株鉴定

（1）形态学鉴定：在25℃ ，CM培养基中生长7天后菌落直径为1.2 cm；菌落扩展能力缓慢，基部隆起气生菌丝稀疏（图1）。显微镜下观察菌丝有隔膜，分生孢子梗不分支。孢子单胞无色，椭圆形，7-10×3.5-7 µm（图2）。

（2）分子鉴定：将ZH-1在25℃ ，CM固体培养基中生长7天后取1平方厘米菌丝块用振荡器震碎，转入CM液体培养基（生工生物）中25℃ 150 rpm/min 培养5天，过滤后收集1 g菌丝,经液氮研磨后提取基因组DNA并进行ITS测序，将测序所得ITS核苷酸序列（SEQID.No.1）采用NCBI数据库进行BLASt比对，该系列与登录号为MH860771.1和MZ568332.1的接合菌属（

实施例2 ZH-1菌株对稻瘟病菌的防效

（1）ZH-1对稻瘟病菌和炭疽病菌菌落抑制实验

采用对峙培养方法，将ZH-1菌株和稻瘟病菌以及炭疽病菌分别接种于CM固体培养基上，25℃ 16/8 h光照/黑暗交替培养7天。发现ZH-1对稻瘟病菌生长抑制率为37.3%，对炭疽菌生长抑制率为41.7%（图3）。

（2）ZH-1菌株抑制稻瘟病菌孢子萌发

将ZH-1在25℃ CM固体培养基中生长7天后取1平方厘米菌丝块用振荡器震碎，转入CM液体培养基中25℃ 150 rpm/min 培养5天，用三层滤纸过滤，将滤液用0.45 µm滤膜过滤后混合稻瘟病菌孢子（CM培养液作为对照），并将孢子浓度稀释到5 × 10

（3）ZH-1滤液混合稻瘟病菌孢子接种大麦叶片

将ZH-1在25℃ CM固体培养基中生长7天后取1平方厘米菌丝块用振荡器震碎，转入CM液体培养基中25℃ 150 rpm/min 培养5天，用三层滤纸过滤，将滤液用0.45 µm滤膜过滤后混合稻瘟病菌孢子（CM培养液作为对照），并将孢子浓度稀释到5 × 10

（4）ZH-1滤液浸种水稻种子抑菌实验

将ZH-1滤液用0.45 µm滤膜过滤后浸种水稻种子，37℃ 培养2天后发现未浸种的水稻种子明显发霉长菌，发芽率降低，而经将ZH-1滤液浸种的水稻种子则没有长菌，发芽率正常（图6）。

本发明提供的一株能够抑制水稻稻瘟病菌的接合菌ZH-1，将其滤液用于抑制稻瘟病菌分生孢子萌发，抑制率达100%。叶片接种实验显示接合菌ZH-1滤液处理后的叶片稻瘟病菌将不能侵染。ZH-1滤液浸种水稻种子具有抑菌催芽作用。预示接合菌ZH-1在植物病原真菌防治领域具有广阔的前景与巨大的价值。

以上所述的实施例只是本发明的一种较佳的方案，并非对本发明作任何形式上的限制，在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。

SEQUENCE LISTING

<110> 浙江省农业科学院

<120> 一种接合菌ZH-1及其应用

<130> 2022.03

<160> 1

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 558

<212> DNA

<213> 接合菌（Zygosporium masonii）

<400> 1

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