生物化学、啤酒、烈性酒、果汁酒、醋、微生物学、酶学、突变或遗传工程

本发明公开了一种高表达病毒的人胚胎肾细胞293及其用途。人胚胎肾细胞293(Wayne293cell line)，保藏编号为：CGMCC No.45137。本发明的Wayne 293cell line细胞具有密度高、瞬转效率高、病毒包装滴度高，能够高表达病毒的Wayne 293cell line细胞，最高密度方面可以达到6.7×106Cell/mL,比传统细胞高3×106CELL/mL；瞬转效率达到73％，比传统细胞高21％；病毒包装滴度达到5×1014vg/L,比传统细胞高4×1014vg/L，市场前景广阔。

本发明提供了一种发酵液中活菌的保护、回收方法，所述发酵液中活菌的保护、回收方法包括以下步骤：将发酵液与乳清浓缩蛋白WPC‑34、魔芋葡甘聚糖和钙盐混合反应，之后离心回收菌种。本发明提供的保护、回收方法能够有效保护发酵液中的活菌，减少其经过离心分离后的死亡，提高菌种存活率，同时还能提高菌种收得率。

本发明公开一种耐热性纳豆激酶重组基因工程菌及其构建方法和应用。基于模拟计算方法筛选到了纳豆激酶蛋白Y256P突变位点，构建含有突变位点的PGEX‑6P‑NKY256P重组质粒载体，并将其转入大肠杆菌BL21中进行表达，获得重组基因工程菌LNUB571。本发明成功构建耐热性纳豆激酶重组基因工程菌，纳豆激酶热稳定性显著提高，为今后纳豆激酶工业化生产及大规模应用奠定了基础。

本发明公开了检测样本中HTR6的试剂在制备低级别胶质瘤的预后产品中的应用。本发明的第一方面，提供检测样本中生物标志物的试剂在制备低级别胶质瘤的预后产品中的应用，生物标志物包括HTR6。根据本申请实施例的应用，至少具有如下有益效果：本发明通过一系列生物信息学分析方法来筛选低级别胶质瘤与正常组织中差异表达的基因或其蛋白质，首次提出HTR6基因或者HTR6蛋白作为低级别胶质瘤预后进行判断的生物标志物，弥补了现有低级别胶质瘤预后指标的不足，具有良好的临床价值。

本发明涉及白酒加工设备技术领域，具体涉及一种白酒原料拌曲装置，包括安装架以及设置在所述安装架内部的带式输送机，还包括：拌合斗，设置于所述安装架顶部一端，所述拌合斗用于承接所述带式输送机输送的白酒原料，本发明通过推动安装架使得带式输送机能够铲起地上待加曲的白酒原料，并经带式输送机输送至拌合斗内部，通过将加曲斗内部的酒曲与落入拌合斗内部的白酒原料进行混合，能够高效的实现对白酒原料的加曲与拌合，过这种方式能够控制酒曲与白酒原料的均衡配比，避免加曲不均匀的情况出现，由于使用者能够通过推动安装架向前行进即可对地面上的白酒原料进行加曲拌合，能够节省人工翻堆拌合耗费的大量人力，使得加曲效率大大提高。

本发明提供一种测序文库接头、测序文库及其构建方法、提升NGS建库连接效率的方法。其中，该测序文库接头的3’末端为TG(T/A)。应用本发明的技术方案，通过将测序文库接头以TG末尾来提高连接效率，进一步的，以ATG结尾末端进一步提高连接效率，以此提升测序文库的建库效率。

本发明公开了一种用于提高肥料吸收率的菌群及其筛选和使用方法，涉及农业技术领域。本发明中一种用于提高肥料吸收率的菌群，包括30～35重量份的复合菌属、40～47重量份的聚谷氨酸和25～32重量份的腐殖质；复合菌属包括相对丰度为51%～56%的芽孢杆菌属、相对丰度为22%～28%的链霉菌属、相对丰度为5%～8%的固氮菌属和相对丰度为3%～7%的牛肝菌属。本发明在配合以化肥的使用过程中，产生的各种酶可以起到络合化肥的作用，从而提高植物对化肥的吸收率，改善突然的板结，保证益菌群的存活和繁殖，提高突然的蓄水、蓄肥和透气等能力，改善根系环境，提升作物根系能力，提高植物的抗病性，从而降低化肥的投入量，降低生产成本。

本发明公开了一种无扩增时间分辨荧光侧向层析检测方法检测沙门氏菌及耐药菌，属于快速检测技术领域。本发明基于CRISPR/Casl2a技术设计得到针对沙门氏菌和沙门氏菌耐药菌株的crRNA，其中，SEQIDNO.1～SEQIDNO.8所示的crRNA可以特异性的用于检测沙门氏菌和沙门氏菌耐药菌株，SEQIDNO.9～SEQIDNO.14所示的crRNA可以特异性的用于检测沙门氏菌耐药菌株，有效区分沙门氏菌和沙门氏菌耐药菌株。本发明提供的针对沙门氏菌耐药菌株的时间分辨荧光试剂盒检测限LOD可达到1.8×102CFU/mL，并且本精密度和准确度高，可以实现有效的快速筛查和检测。

本发明涉及生物饲料加工设备技术领域，更具体地说，本发明提供了一种多菌种发酵的生物饲料用不停机混合结构，所述混合结构设置在混合罐内，包括回流机构、菌种活化液添加机构和联动组件；所述回流机构包括回流管、螺旋叶片和第二转轴，所述回流管固定设置在混合罐中，并将混合罐分隔成混合室和回流室，所述回流管的两端分别开设有将回流室与混合室连通的通孔，两个所述通孔分别位于混合室的顶部和底部，所述回流室内设有第二转轴；在菌种活化液添加机构将菌种活化液添加到混合室内的过程中，通过回流机构将混合室底部的混合料送到混合室顶部，增大了混合料与菌种活化液的接触面，起到促进混合料与菌种活化液混合的作用。

本发明专利提供了一株重组毕赤酵母及其在高效制备14α‑羟基孕酮中的应用，属于发酵工程技术领域；本发明以毕赤酵母为宿主，采用毕赤酵母全细胞边诱导边催化的方式实现14α‑羟基孕酮转化高投料量和高转化率，为研究开发高效孕酮C14α‑羟化生产工艺提供了宝贵材料(菌种)和基础数据支撑。

本发明提供一种肉灵芝保健酒及其制备方法，涉及保健酒技术领域。该一种肉灵芝保健酒，由以下重量份的原料制成：肉灵芝300‑550、冬虫夏草100‑150、西洋参50‑80、枸杞30‑40、桂花10‑15、龙眼20‑40、当归20‑35、黄芪10‑16、杏仁20‑35、茯苓15‑35、何首乌40‑60、苍术15‑25、陈皮10‑30、白芍35‑55、丁香25‑45、鹿茸16‑20、冰糖50‑70、南芎20‑25、广沉香10‑25、白酒1500‑2000。本发明设计的保健酒以肉灵芝、冬虫夏草作为主料，再配合多种其他中药作为原料，使得该保健酒具有极好的养肝益肾、健胃养脾、生精益血、强身健体的功效，连续服用一端时间后，身体素质会大大提高。

本发明公开了一种提高岩藻糖基乳糖产量的工程大肠杆菌及生产方法，属于基因工程技术领域。本发明利用合成生物学手段，在大肠杆菌BL21(DE3)ΔlacZΔwcaJΔnudDΔpfkAΔlon宿主菌中组合调控HpfutC/HpM32的转录和翻译水平，通过改变转录水平的控制元件(启动子)，翻译水平的控制元件(RBS)，融合标签以及基因拷贝数来提高α‑1，2/3‑岩藻糖基转移酶的催化活力和可溶性表达。构建得到的重组大肠杆菌实现了2’‑岩藻糖基乳糖和3‑岩藻糖基乳糖的高效合成，菌株遗传稳定，转化率高，具有明显的工业化生产潜力。

本发明涉及食品加工技术领域，尤其涉及一种五种粮食酒，一种五种粮食酒,由以下的原料组成:高粱20市斤、玉米10市斤、小麦10市斤、黄豆10市斤、糯米150市斤，共计200市斤用天然水加红粬酿制而成。本发明的纯粮酒用以酿酒可以将五种食物中的营养成分综合到一起,长期少量饮酒可以通过酒液将食物中的营养成分分解到五脏六腑,更好的吸收各种食物的营养成分，而且酒液口感好,不上头,不难受、后劲小。

本发明涉及了一种人BMP3和NDRG4基因甲基化检测试剂盒，该试剂盒包括酶切反应液，所述酶切反应液包含酶切缓冲液、甲基化依赖型限制性内切酶，还包括针对BMP3基因和/或NDRG4基因的CpG岛分别设计的引物和部分双链线性DNA探针的荧光PCR反应液。本发明所述检测试剂盒能够实现在一管中依次进行酶切反应和荧光PCR反应以检测BMP3和NDRG4基因甲基化状态，具有操作简单快速、灵敏度高、特异性好、易于自动化的特点。

本公开描述了一种目标基因的检测方法，包括以下步骤：针对一个或多个目标基因，从每个目标基因的基因序列中选取多个目标区域，针对每个目标区域分别设计引物组；准备多个待测核酸样本；使用引物组对各个待测核酸样本进行PCR扩增，得到目标文库；对目标文库进行测序，获取目标文库的测序数据；基于测序数据判断各个目标区域是否被检出；并且对于各个待测核酸样本，若被检出的目标区域的数量与多个目标区域的数量相比大于预设比例，则判定待测核酸样本中含有目标基因。根据本公开的检测方法，能够提高检测结果准确性。本公开还描述了一种用于检测目标基因的引物组、试剂盒及应用。

本发明涉及一种解除胰腺癌免疫抑制性微环境的方法，属于生物技术领域，包括以下步骤：包括以下步骤：将荧光素酶稳转胰腺癌Panc02细胞注射到脾脏下极的模型小鼠胰腺中，建立原位Panc02小鼠胰腺癌模型,植入后第6天，通过在每个时间点注射荧光素并在暴露5s后通过IV I S系统成像来监测原位肿瘤生长,将出现肿瘤的小鼠分出；将Panc02细胞注射在上述的小鼠右侧背部，构建远处瘤模型；再注射磷脂包裹的六氟化硫微泡后对原位瘤进行超声空化处理；收集不同治疗的Panc02远处瘤进行转录组分析。本发明技术方案中。超声空化能够重塑肿瘤组织的基因表达谱，下调包括Foxp3、CD274和CTLA4等多个免疫检查点分子及一些共刺激分子，解除抑制性肿瘤免疫微环境。

本发明涉及植物基因工程领域，具体涉及水稻细胞分裂素氧化酶OsCKX3基因在调控植物叶夹角中的应用。本发明公开了水稻基因OsCKX3或其编码的蛋白在水稻作物改良中的应用：调控水稻叶枕发育和叶夹角、改善水稻株型和提高水稻产量。

本发明公开了一株产中性乳糖酶的乳酸克鲁维酵母，属于生物工程技术和酶工程领域。本发明提供的乳酸克鲁维酵母JNXR‑2101已于2021年12月15日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 20211628。该菌株胞外中性乳糖酶酶活可达10.22U/mL，摇瓶发酵优化后胞内酶活可达83.36U/mL，5L发酵罐中分批补料优化后，其总酶活可达220‑250U/mL。本发明的乳酸克鲁维酵母JNXR‑2101所产的乳糖酶符合国家食品安全标准和食品添加剂标准，安全性较高。

本发明公开了一种乾酱香型白酒及其制备工艺，属于酿酒技术领域。采用本发明的制备方法得到的乾酱香型白酒，酿造工艺重点在对原辅料配比，通风式高温堆积两个方面进行了系统的优化，与传统酱香酿造工艺相比，采用本酿造生产工艺，生产、储存、勾兑而成的乾酱香型白酒，其感观特征有别于传统的酱香型白酒，产出的酒香气幽雅飘逸，入口绵柔醇厚，无杂味，具有明显的感观特征和独特的个性。本发明为开放式发酵(堆积发酵)及密闭式发酵(窖池发酵)，二者结合使酒质具有绵柔爽净、丰满协调、回味悠长的风格特征。

贝莱斯芽孢杆菌DB219及其应用，属于生物技术领域。本发明一方面提供了一株新的贝莱斯芽孢杆菌DB219，另一方面提供了该贝莱斯芽孢杆菌DB219的应用。发明筛选的贝莱斯芽孢杆菌所产的凝乳酶活性较高，经纯化后，其比酶活、得率和提纯比较高，可以提升凝乳酶的纯化效率，并且大幅度缩短了发酵周期，加快了生产速度，成本低廉，其特性也能更好地满足后期干酪规模化的生产需要，为进一步实现细菌源凝乳酶的工业化生产提供了重要依据。

本发明公开了一种识别基因编辑动物全基因组变异的方法。通过分析供体细胞和基因编辑后新生克隆猪的全基因组，使用mutect2、strelka2和/或lofreq分析识别基因编辑造成的全基因组范围内的变异位点。本发明的分析方法用以分析全基因组范围内的所有突变，不以sgRNA同源性预测作为依据，能最大限度地检测所有存在的变异位点；以无偏的方式直接分析基因编辑猪与供体细胞的基因差异，不受遗传学影响，且操作方便，高效处理批量样品；适用于所有克隆动物全基因组比较分析，适用于任何工具和方法对供体细胞造成变异的检测，包括克隆操作自身对克隆动物造成变异的检测。

本发明一种基于荧光素酶的新冠病毒膜融合抑制剂筛选方法，包括：构建表达新冠病毒刺突蛋白特异性受体ACE2和荧光素酶的大亚基的细胞系，称为表达ACE2/大亚基的细胞系；构建表达新冠病毒刺突蛋白Spike或Spike突变体和荧光素酶的小亚基的细胞系，称为表达小亚基/Spike的细胞系；将两种细胞系进行共培养，共培养体系中加入荧光素酶的底物进行反应，测量反应发光值，得用药前发光值；共培养体系中加入测试药物和荧光素酶的底物进行反应，测量发光值，得用药后发光值；用药前后发光值进行比较，根据比较结果筛选药物。本发明不需要成本高昂的荧光显微成像系统，降低检测成本，且适合高通量筛选。

本发明公开了一种可避免假阴性的对虾黄头病毒核酸检测试剂盒。该试剂盒包含一组检测对虾黄头病毒的引物组和一组检测对虾属内参基因的引物组，所述两组引物组均包括一对特异性引物及对应的TaqMan探针，试剂盒还包括一管式的反应预混液，阳性对照参考品和阴性对照参考品。本发明提供的一管式分装试剂盒可直接从复杂样品中检测对虾黄头病毒，具有特异性强、灵敏度高、实验重复性好、操作便捷快速的优点，不需要昂贵的仪器即可完成检测，并且内参基因可以全程监控检测过程，有效避免假阴性结果出现。可用于对虾黄头病毒的快速、准确检测。

本发明公开了一种膜蛋白工程化外泌体及其制备方法，所述外泌体膜蛋白慢病毒表达载体能将外源基因高效的表达到外泌体的膜上，所述方法为：将所需表达至外泌体膜上的基因与外泌体膜蛋白LAMP2B的信号肽(SP)和跨膜区(TMD)序列融合，组成LAMP2B_SP‑转基因序列‑LAMP2B_TMD融合序列，随后将所述序列克隆至慢病毒表达载体，感染细胞系，分离纯化得到膜蛋白工程化外泌体。经实验验证，本方法成功将可溶性蛋白VEGF和细胞膜蛋白CD24高效表达至外泌体膜上，本方案优化了基因工程化外泌体的改造方法，提高了外泌体表面的修饰效率，对于外泌体作为药物载体的靶向性研究和应用具有重要的意义。

本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种耐乙醇酰胺酶、基因、表达载体、工程菌及制备方法和应用，所述酰胺酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该酰胺酶能够耐受高浓度乙醇、可降解氨基甲酸乙酯，但不降解尿素。本发明所获得的酰胺酶可在含有高浓度乙醇条件下高效降解氨基甲酸乙酯且不降解尿素，有助于该酶高效的运用于酒精饮料中氨基甲酸乙酯的降解。本发明为实现酒精饮料中致癌物氨基甲酸乙酯的降解奠定了基础，具有巨大的经济及社会效益。

本发明公开了一种haPD‑1外泌体及其制备方法与应用，其是由HEK293T细胞分泌的、在膜上能表达haPD‑1重组蛋白的外泌体。所述haPD‑1重组蛋白，其从N端起，依次是LAMP2B N端信号肽、haPD‑1蛋白胞外区、LAMP2B跨膜区和GFP序列。本发明通过将haPD‑1信号肽及跨膜区更换为外泌体膜蛋白LAMP2B的信号肽及跨膜区，使haPD‑1富集表达至外泌体膜上，收集过表达重组haPD‑1蛋白的外泌体并研究其在抗肿瘤中的用途。

本发明公开了一种用于检测CHIKV、DENV、ZIKV分型区基因组的引物组合，其包括用于CHIKV、DENV、ZIKV RNA逆转录的特异性引物、扩增分型区基因组的引物，采用该引物组合，利用逆转录和多重PCR对靶基因进行扩增后，在二代测序平台的基础上，构建用于检测CHIKV、DENV、ZIKV分型区基因组及突变位点的二代测序技术，该方法具有适用性广、通量高、准确性好、灵敏性高，一次可检测出多个样本的优点，为CHIKV、DENV、ZIKV基因组的深度分析提供了便捷方法，对流行病学研究及临床早期分子诊断等具有重要意义。

本发明公开了一种催化小分子羧酸甲酯化的甲基转移酶及其应用，涉及小分子羧酸化合物甲酯化、生物工程和酶催化领域，其氨基酸序列为如序列表SEQIDNO:1～SEQIDNO:7中任一所示；该甲基转移酶的表达载体，包含编码甲基转移酶的核酸序列，表达载体为原核生物表达载体或真核生物表达载体；包含该表达载体的工程菌；将甲基转移酶用于催化小分子羧酸化合物的羧基发生甲基化，生成甲酯化产物的应用；该工程菌在转化羧酸化合物生成甲酯化产物的应用。本发明提供了一种小分子羧酸甲酯化工艺，该工艺绿色高效，价格低廉，适用性宽泛，能够实现多种小分子羧酸的甲酯化，具有极大的应用潜力及经济价值。

本发明公开了一种大豆症青相关病毒侵染性克隆载体和大豆高效接种方法，将不少于1.2个串联重复的大豆症青相关病毒全基因组序列构建到pBINPLUS载体上制备得到大豆症青相关病毒(SoSGV)侵染性克隆载体，并且能够通过发根农杆菌K599诱导的毛状根成功侵染大豆，提供一种解决大豆双生病毒(大豆症青相关病毒)侵染性克隆不易侵染大豆问题的方法。本发明仅用3条引物即可构建2.0个串联重复的侵染性克隆载体；优化大豆中的病毒接种方法：PCR和Western Blot检测结果表明经K599诱导的大豆症青相关病毒能够在多个大豆品种中实现系统侵染，产生症青症状，能作为后续筛选抗性品种体系。

本发明公开了一种特异性检测蛭弧菌数量的绝对定量PCR引物及检测方法，包括特异性引物；检测方法包括：提取待测样品的DNA；通过特异性引物对提取的待测样品DNA进行PCR扩增；对PCR扩增后的产物进行纯化；将纯化后的DNA与载体进行连接扩培，制得重组质粒；对重组质粒进行提取，并进行浓度测定；将提取的重组质粒进行倍比稀释，制得重组质粒标准模板；将特异性引物加入到重组质粒标准模板中，进行荧光定量PCR检测，建立CT值与拷贝数之间的转换关系；将特异性引物加入到需要检测的样品中，进行荧光定量PCR检测，测定样品的CT值，根据CT值与拷贝数之间的转换关系，得出拷贝数。本发明能够准确检测出蛭弧菌，并且检测过程简单易操作。

本发明提供了一种带有可视化蛋白融合抗生素筛选标记的CRISPR/Cas9载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。通过将抗生素筛选标记和可视化蛋白进行融合，由同一个启动子驱动，成功构建了一种载体大小更小、转化率更高的新的带有可视化蛋白标记的CRISPR/Cas9载体，并成功将该CRISPR/Cas9载体用于构建了番茄SlD14基因的基因编辑载体，最终培育出表型与野生番茄表型明显不同的转基因番茄植株，证明了该CRISPR/Cas9载体的有效性。

本发明涉及一种微生物纯化仪。本发明中提供的微生物自动纯化的处理系统，可以实现自动识别取种，取种时相机拍摄图像，计算机对图像进行分析，通过计算机算法处理后，可以找到纯度较高的微生物菌落。计算菌落位置下达指令给系统完成取种操作，解决了现有自动取种设备无法实现菌落识别的问题。另外，本发明提供的微生物纯化仪通过工作台面、存储台面及升降装置的设置，提供了一种合理的培养皿动线，输入输出均为培养皿，解决了现有设备需要更换器皿及培养皿自由落体带来的损伤问题，是一种可自动化运行、具有较高生物安全性的纯化系统。

本发明涉及用于鉴定基因的等位基因的试剂盒和探针，具体地涉及用于鉴定受试对象中的一个或多个HLA基因等位基因的试剂盒、用于为需要移植的移植受体鉴定移植供体的试剂盒和用于降低移植受体发展移植物抗宿主病的可能性的试剂盒；本发明还涉及与HLA基因中的HLA基因靶序列杂交的寡核苷酸探针，以及包含该寡核苷酸探针的试剂盒。本发明还涉及一种鉴定受试对象中的非HLA基因中的一个或多个等位基因的方法。

本发明涉及生物医学技术领域，具体公开了一种海参活性肽及其制备方法与在制备具有抗衰老作用的产品中的应用。所述的海参活性肽的制备方法，其包含如下步骤：(1)取新鲜的海参，绞碎后加入水后进行研磨得海参浆；(2)将海参浆进行超声提取，超声提取结束后进行固液分离得海参浆沉淀和海参提取液；(3)在步骤(2)得到的海参浆沉淀中加入水，接着再加入复合酶进行酶解；得海参酶解液；(4)将海参提取液和海参酶解液混合，然后依次用孔径为3kD、2kD和1kD的透析袋进行透析，取分子量在2kD～3kD之间的海参活性肽即得所述的海参活性肽。研究表明，由该方法制备得到的海参活性肽具有优异的抗衰老作用。

本发明属于生物技术领域，公开了与慢性乙型肝炎抗病毒治疗应答疗效相关的SNP分子标记及其应用，具体公开了一种与乙型肝炎抗病毒治疗应答疗效相关的SNP分子标记，所述SNP分子标记的序列如SEQIDNO.3所示，SNP位点位于第68位，多态性为C/T。本发明提供的SNP分子标记可应用于预测乙型肝炎抗病毒治疗应答疗效，能够根据基因分型结果对乙型肝炎患者对抗病毒治疗应答疗效进行评估，从而有利于乙型肝炎患者治疗方法的选择及精准治疗。

本发明公开了调控CNR基因表达或调控CNR蛋白含量的物质在调控植物果实中类黄酮类化合物合成或制备调控植物果实中类黄酮类化合物合成的产品中的应用。CNR基因可为如下任一种：d1)核苷酸序列是如SEQ ID No.5所示的DNA分子；d2)编码序列是如SEQ ID No.7所示的DNA分子；d3)与d1)或d2)限定的核苷酸序列具有90％或90％以上同一性，来源于番茄且编码CNR蛋白的DNA分子；d4)在严格条件下与d1)或d2)限定的核苷酸序列杂交，且编码CNR蛋白的DNA分子。本发明实施例表明，通过对CNR基因基因进行过表达或敲除可以调控类黄酮类化合物在植物果实中的类黄酮类化合物含量。

本发明涉及酿酒加工技术领域，尤其是一种蓝莓红茶蒸馏酒的酿造方法，其步骤如下：(1)茶叶采摘、(2)机制揉捻、(3)控温发酵、(4)炒茶、(5)蓝莓发酵原料配制、(6)蓝莓发酵、(7)蒸馏、(8)陈酿、勾调、包装。本发明通过茶叶制备红茶，控制茶的发酵程度，提高红茶中的有效成分含量；通过蓝莓的针对性发酵，有效提高发酵底物中的无机盐含量，促进发酵中菌种的代谢，可以分泌更多的酶系和次生代谢物，促进发酵物中芳香物质的形成。最后经过蒸馏，使得蓝莓发酵物和红茶中有效成分充分释放，得到香味更好，质量上乘的蒸馏酒。

本发明公开了一种酶活提高的双果糖酐水解酶突变体E389A，属于基因工程技术领域。本发明对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的双果糖酐水解酶的第389位氨基酸定点突变，得到双果糖酐水解酶突变体E389A。本发明提供的双果糖酐水解酶E389A的最适pH为6.5，最适反应温度为55℃，酶活和催化效率相比野生酶分别提高了3.6倍和4倍。对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的双果糖酐水解酶的第389位氨基酸定点突变提高了双果糖酐水解酶的生产能力和催化效率，为工业中菊二糖生产提供了优良催化剂，有助于降低生产成本，为菊二糖的研究奠定了基础。

本发明公开了一种蓝莓刺梨果酒残渣过滤装置及酿造方法，包括发酵罐，发酵罐底部设置有挤压送料管，挤压送料管下部设置有粗筛板，挤压送料管下方通过酒液流道活动连接有离心过滤筒，离心过滤离心过滤筒外设置有透明曝液仓，透明曝液仓外设置有紫外线消毒仓，本发明通过离心过滤筒和透明曝液仓的设置，可以在离心过滤筒过滤酒液的同时通过惯性将酒液扬起，并溅射在透明曝液仓内壁上，与此同时紫外线灯管发出紫外线穿过透明曝液仓对喷溅在透明曝液仓仓壁上的酒液进行紫外线消毒，进一步除去过滤漏下的少量细菌，使酒液得到彻底消毒。

本发明公开了检测脓毒症病原体的引物组合物、及其核酸检测试剂盒、检测方法。其中，本发明公开了检测脓毒症病原体的引物组合物，其包括金黄色葡萄球菌引物组、肺炎克雷伯菌引物组、大肠埃希氏菌引物组、粪肠球菌引物组、鲍曼不动杆菌引物组、铜绿假单胞菌引物组、嗜麦芽窄食单胞菌引物组、肺炎链球菌引物组、脑膜炎奈瑟菌引物组、曲霉菌引物组、阴沟肠杆菌引物组和B族链球菌引物组中的至少一组。本发明提供的检测脓毒症病原体的引物组、包含所述引物组的核酸检测试剂盒及检测方法，可快速、准确地检测各种脓毒症病原体，以弥补现有针对脓毒症病原体检测技术存在的费时耗力的缺陷，提高检测灵敏度和特异性，降低劳动强度，缩短检测周期。

本发明涉及保健酒酿造技术领域，且公开了一种调气理血功能酒，其特征在于，包括以下重量份的各原料组分，黄芪45‑55g，当归15‑20g，大枣12‑20g，通草15‑20g，王不留20‑30g，陈皮10‑20g，人参10‑15g，茯苓25‑35g，炙甘草12‑15g，川穹12‑15g，熟地黄20‑25g，鲫鱼120‑150g，虾50‑60g，黄酒500‑600g，该调气理血功能酒，因为海虾有壮阳益肾、补精、通乳之功，鲫鱼具有益气健脾、利尿消肿、通络下乳等功效，方中黄芪、当归、大枣、川穹、熟地补气养血，通草、王不留通经下乳，脾胃为气血生化之源，脾胃壮，气血足，乳汁足，所以配以人参、茯苓、炙甘草健脾益气，产后脾胃功能偏弱，熟地、大枣等普遍偏腻，配以陈皮理气开胃，健脾消食，防止滋腻药物阻碍脾胃的运化吸收，提高药物的吸收程度，增强药效。

本发明公开了用于维生素D和钙代谢相关基因分型的扩增引物组及探针、试剂盒、分型方法。扩增引物组及探针包括：CYP2R1‑rs10741657位点的ARMS引物组及探针：CYP2R1‑rs10741657野生型正向引物、突变型正向引物、共用反向引物及共用探针；GC‑rs2282679位点的ARMS引物组及探针：GC‑rs2282679野生型正向引物、突变型正向引物、共用反向引物及共用探针；VDR‑rs2228570位点的ARMS引物组及探针：VDR‑rs2228570野生型正向引物、突变型正向引物、共用反向引物、及共用探针，其序列分别如SEQ ID NO：01～12所示。能够对CYP2R1‑rs10741657、GC‑rs2282679以及VDR‑rs2228570三个基因位点多态性进行准确检测分析，检测灵敏度高、检测时间短，检测成本低，操作方法简便。

本发明公开了长链非编码RNA Gm10561在调控成肌细胞增殖分化中的应用。本发明通过研究表明，lncRNA Gm10561与成肌细胞增殖分化相关，通过超表达载体pcDNA3.1‑Gm10561转染进成肌细胞，上调lncRNA Gm10561表达可以促进小鼠和猪成肌细胞的增殖分化功能，同时，经过siRNA下调lncRNA Gm10561表达会抑制小鼠C2C12细胞的增殖分化功能。lncRNA Gm10561对成肌细胞增殖分化具有重要调控作用：lncRNA Gm10561能够显著促进成肌细胞增殖分化，为今后进一步研究骨骼肌发育机制打下基础，并且为提高家畜产肉性能提供新思路。

本发明属于生物医药领域，公开了一种用于甲状腺结节良恶性判别的生物标志物、多基因联检试剂盒及应用。所述生物标志物组包含8种DNA单碱基突变和4种基因融合中的至少一种；所述8种DNA单碱基突变选自BRAF基因V600E、TERT基因C228T/C250T、KRAS基因G12C/G12V/Q61R、NRAS基因Q61R、HRAS基因Q61R，所述4种基因融合选自CCDC6‑RET(Exon1‑Exon12)、NCOA4‑RET(Exon8‑Exon12)、PAX8‑PPARG(Exon10‑Exon2)、ETV6‑NTRK3(Exon4‑Exon14)。本发明的方法和试剂盒检测灵敏度高、特异性高，应用场景广泛。

本发明公开了一种幽门螺杆菌检测试剂盒；属于生物技术领域；检测试剂盒包括：含有13C标记的尿素试剂的容器；含有增敏剂的容器；呼气测试瓶；用于向上述测试瓶的细管；上述增敏剂包括新型有机酸，其由6‑羟基苯并吡喃‑3‑甲醛与醋酸酐制得。本发明制得的幽门螺杆菌检测试剂盒具有较高检测精确度与准确性的幽门螺杆菌检测试剂盒，同时能够降低检测试剂盒中含13C标记的尿素试剂的使用量以及13C的丰度。

一种CaO‑沼渣‑活性炭联合强化秸秆干式厌氧发酵酸化性能的方法属于有机固体废物厌氧消化领域。本发明通过在青稞秆的预处理及厌氧消化阶段加入不同比例的CaO、沼渣和活性炭，可以提高青稞秆厌氧消化的产酸量，产酸量比对照组高出471.57％‑1290.75％，最优组产乙酸浓度为11074mg/L，比对照组高出1235.62％。系统稳定性明显提高，酸化系统和甲烷化系统的碱度分别比其对照组高出4.85％‑50.98％和139.06％‑144.80％，甲烷化系统的pH值也比对照组高了13.04％‑14.11％。甲烷化试验前25天的甲烷产量比对照组提高22.69％‑53.26％。本方法既可以提高厌氧发酵系统的产酸量，也可以提高系统的稳定性，从而提高系统的产甲烷能力。

本申请属于组织工程模拟技术领域，尤其涉及一种血脑屏障体外模型及其制备方法。该血脑屏障体外模型包括石英管和分别位于石英管两端的第一陶瓷导电凝胶层和第二陶瓷导电凝胶层，石英管内设有在超声压力复合场条件下形成的脑微血管内皮细胞单层，脑微血管内皮细胞单层内的细胞之间以及脑微血管内皮细胞单层与石英管内壁之间通过DNA链连接，脑微血管内皮细胞单层的上表面黏附生长有星型胶质细胞和小胶质细胞。该血脑屏障体外模型可以更真实的模拟血脑屏障结构，而且不同细胞之间的直接共培养接触可以更真实的反应实际情况，这样的血脑屏障体外模型可以有益于中枢神经系统的药物开发筛选，具有很好的应用前景。

本发明的目的在于提供一种生物制剂在治疗胎盘功能障碍中的应用，属于医学技术领域。该生物制剂由抑制LOC101929800基因表达的siRNA组成，LOC101929800基因的转录本序列为序列表中的SEQ ID NO.1，siRNA的序列为序列表中的SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11。通过在缺氧复氧的细胞中转染siRNA抑制LOC101929800基因，本发明发现其能够一定程度的逆转缺氧复氧所导致的滋养层细胞侵袭能力下降，因此可将其用于制备治疗胎盘损伤的生物制剂。

本发明公开了一种基于静息细胞转化精制醋酸泼尼松的方法，包括以下步骤：制备节杆菌的静息细胞体系；在静息细胞体系中加入表面活性剂孵育，然后加入醋酸可的松和助溶剂进行转化；醋酸泼尼松的提取纯化。该方法能有效去除产品中杂质含量，尤其是未知最大单杂，有效提高了产品质量，且操作步骤简单、成本低廉，有利于工业化生产。

本发明提供了一种从海藻中提取碘的方法，步骤如下：将干海带制成海带粉；向海带粉中加入水，搅拌均匀，海带粉和水的重量比为1：10～25；向海带粉和水的溶液中加入生物酶，调节溶液pH值为7.0～8.5，海带粉和生物酶的重量比为1：0.02～0.05；将溶液在30℃～60℃条件下，超声提取8～12h，得到提取液；将提取液离心、过滤、浓缩、冷却，得到目标产物。本发明所述的从海藻中提取碘的方法采用生物酶解技术和超声提取技术，得到了含有较高含量的无机碘和有机碘的碘液。