增强免疫力的阿胶酸驴奶及其制备方法

技术领域

本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种能够增强免疫力的阿胶酸驴奶及其制备方法。

背景技术

随着人们生活水平的提高和对绿色健康食品的追求，驴奶作为一种优良的保健品日益受到广大消费者的青睐。驴奶不仅具有较高的营养价值，而且具有较良好的药用价值。《本草纲目》中记载：“驴乳，气味甘，冷利，无毒，热频饮之可治气郁，解小儿热毒，不生痘疼”。在秘鲁，驴奶被用来治疗气喘、支气管炎、糖尿病、溃疡、胃炎等疾病，一些妇女甚至可以靠喝驴奶缓解更年期的不适。国内外研究表明，驴奶与人奶成分最为接近，其乳清蛋白占总蛋白质的比例较高、不饱和脂肪酸尤其是亚油酸含量高、低脂肪、低胆固醇、高钙及富硒，而且驴奶富含多种免疫活性物质，可以作为一种免疫促进剂，增强人体免疫功能。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够增强免疫力的阿胶酸驴奶。

本发明的再一目的在于提供上述阿胶驴酸奶的制备方法。

根据本发明具体实施方式的增强免疫力的阿胶酸驴奶，所述阿胶酸驴奶由含有以下步骤的方法制备而成：

S1：将枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉、沙棘汁混合，加纯化水熬制，过滤，得到滤液；

S2：将S1所得滤液与鲜驴奶按体积比1:10～15混合，加入终浓度为0.5～2.0％的阿胶粉、2～13％的糖份，加热溶解，得到阿胶驴奶培养基；

S3：将S2所得阿胶驴酸奶培养基灭菌；

S4：在灭菌阿胶驴酸奶培养基上接入益生菌发酵的种子液，于发酵罐中发酵，即得，其中，益生菌为保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌按1:0.8～1.2:0.8～1.2混合。

根据本发明具体实施方式的增强免疫力的阿胶酸驴奶，步骤S4发酵的具体步骤为：

(1)将糖份、乳粉混合后溶解，灭菌，配制成种子液；

(2)将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌按1:0.8～1.2:0.8～1.2混合后，接种到种子液中，38℃～42℃条件下，培养16～24h；

(3)将步骤(2)发酵后的种子液按照1～3％的比例，接种到阿胶驴奶培养基中，38～42℃条件下，发酵16～24h。

根据本发明具体实施方式的增强免疫力的阿胶酸驴奶，步骤S1前，分别将枸杞、红枣、蛹虫草子实体烘干，粉碎，过筛，得到枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉；将沙棘果洗净，过筛，得到沙棘果汁。

根据本发明具体实施方式的增强免疫力的阿胶酸驴奶，步骤S1中，将枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉、沙棘汁按重量比1:1:1:1混合，加2～5倍纯化水，高温熬制2～3h，120～200目筛过滤，得到滤液。

优选的，向枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉、沙棘汁中加3倍纯化水，高温熬制3h，分级过150目、180目、200目筛。

根据本发明具体实施方式的增强免疫力的阿胶酸驴奶，步骤S3中，将阿胶驴奶培养置于发酵罐中，110℃条件下，灭菌15min，迅速降温冷却到38～42℃。

根据本发明具体实施方式的增强免疫力的阿胶酸驴奶的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

S1：将枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉、沙棘汁混合，加纯化水熬制，过滤，得到滤液；

S2：将S1所得滤液与鲜驴奶按体积比1:10～15混合，加入终浓度为0.5～2.0％的阿胶粉、2～13％的糖份，加热溶解，得到阿胶驴奶培养基；

S3：将S2所得阿胶驴酸奶培养基灭菌；

S4：在灭菌阿胶驴酸奶培养基上接入益生菌发酵的种子液，于发酵罐中发酵，即得，其中，益生菌为保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌按1:0.8～1.2:0.8～1.2混合。

本发明中使用的糖份包括葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、低聚果糖或低聚木糖。

优选的，加入阿胶粉的终浓度为0.5～2.0％，进一步优选的为1.0～1.5％；优选的，加入的糖份包括阿拉伯糖、木糖醇、白砂糖，其中加入阿拉伯糖的终浓度为2～5％；优选的，加入木糖醇或白砂糖的终浓度为5～8％。

根据本发明具体实施方式的增强免疫力的阿胶酸驴奶的制备方法，步骤S4发酵的具体步骤为：

(1)将糖份、乳粉混合后溶解，灭菌，配制成种子液；

(2)将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌按1:0.8～1.2:0.8～1.2混合后，接种到种子液中，38℃～42℃条件下，培养16～24h；

(3)将步骤(2)发酵后的种子液按照1～3％的比例，接种到阿胶驴奶培养基中，38～42℃条件下，发酵16～24h。

本发明可使用保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌进行发酵。利用白沙糖乳粉(或脱脂奶粉)制作种子液，例如，将5％白砂糖、5％脱脂乳粉混合，用蒸馏水定容，在110℃，30min灭菌，配制成种子液。

发酵过程中，每2小时，在线观察一次pH值的变化，pH值到4.0作用，停止发酵即得阿胶酸驴奶。其中，优选的，种子液按1～3％比例接种到阿胶驴奶培养基中，进一步优选的接种比例为2％。

根据本发明具体实施方式的增强免疫力的阿胶酸驴奶的制备方法，步骤S1前，分别将枸杞、红枣、蛹虫草子实体烘干，粉碎，过筛，得到枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉；将沙棘果洗净，过筛，得到沙棘果汁。

根据本发明具体实施方式的增强免疫力的阿胶酸驴奶的制备方法，步骤S1中，将枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉、沙棘果汁按重量比1:1:1:1混合，加2～5倍纯化水，高温熬制2～3h，120～200目筛过滤，得到滤液。

根据本发明具体实施方式的增强免疫力的阿胶酸驴奶的制备方法，步骤S3中，将阿胶驴奶培养置于发酵罐中，110℃条件下，灭菌15min，迅速降温冷却到38～42℃。

枸杞，是茄科、枸杞属植物。枸杞是商品枸杞子、植物宁夏枸杞、中华枸杞等枸杞属物种的统称。

阿胶，中药名。为马科驴属动物驴Equus asinus L.的皮，经漂泡去毛后熬制而成的胶块。具有补血，滋阴，润肺，止血的功效。主治血虚诸证，出血证，肺阴虚燥咳，热病伤阴，心烦失眠，阴虚风动，手足瘈疭。

红枣，鼠李科枣属植物，成熟后变为红色。常晒干制成枣干。

沙棘果为胡颓子科沙棘属植物沙棘(Hippophae rhamnoides L.)的果实，又名醋柳果，酸刺果。

蛹虫草子实体是蛹虫草生殖细胞“孢子”(相当于植物的种子)随风飘散粘上某些昆虫的蛹后，萌发菌丝并侵入蛹体内吸取养分，而后从蛹体上长出的金黄色、或橘黄色、或橘红色的棍棒状物体，是产生生殖细胞“孢子”的生殖体(相当于植物的果实体)。

本发明的有益效果：

本发明的阿胶酸驴奶选择具有丰富营养价值的驴奶，与乳酸菌复配，可有效增强机体免疫力和肠道微生物菌群平衡；同时，添加一定量的阿胶，并配以其他具有免疫调节剂功能的药食同源物质，能够进一步提高机体免疫功能。本发明的阿胶酸驴奶扩大了驴奶的应用范围，使驴奶的营养价值得到充分利用，拓宽其应用途径，具有重要的社会经济效益。本发明的阿胶驴酸奶具有益气补肾、滋阴补肾、活血通经、生津润燥、美肤养颜等功效，因此，本发明所得阿胶酸驴奶可应用于有美容养颜，延缓衰老需求的爱美女士。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。

实施例1制备阿胶驴酸奶

1.1本发明的阿胶驴酸奶的制备方法如下：

1.将枸杞、红枣、蛹虫草子实体于60-90℃烘干，分别用粉碎机粉碎，过80目药筛；

2.将沙棘果清洗干净，榨汁机榨汁，过80目药筛，弃果渣，得沙棘果汁；

3.将步骤1、2所得枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉、沙棘果汁按重量比1:1:1:1混合，加2倍纯化水，高温熬制2h，120目筛过滤，弃果渣，得滤液；

4.将步骤3所得滤液与鲜驴奶按体积比1:10混合，加入终浓度为0.5％的阿胶粉、2％的阿拉伯糖、5％的白砂糖或木糖醇，加热溶解，得阿胶驴奶培养基；

5.将步骤4所得的阿胶驴奶培养置于发酵罐中，110℃条件下，灭菌15min，迅速降温冷却到38～42℃。无菌条件下，接入益生菌发酵的种子液，于发酵罐中38℃，发酵16h。具体步骤为：

(1)5％白砂糖、5％脱脂乳粉混合，用蒸馏水定容，在110℃，30min灭菌，配制成种子液；

(2)将培养好的保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌：嗜酸乳杆菌按1:0.8:0.8比例接种到种子液中，38℃，培养16h；

(3)将发酵好的种子液按1％的比例，接种到发酵罐的阿胶驴奶培养基质中，38℃，发酵16h；

发酵过程中，每2小时在线观察一次pH值的变化，pH值到4.0左右，停止发酵即得阿胶酸驴奶。

1.2本发明的阿胶驴酸奶的制备方法如下：

1.将枸杞、红枣、蛹虫草子实体于60-90℃烘干，分别用粉碎机粉碎，过80目药筛；

2.将沙棘果清洗干净，榨汁机榨汁，过80目药筛，弃果渣得沙棘果汁；

3.将步骤1、2所得枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉、沙棘果汁按重量比1:1:1:1混合，加3倍纯化水，高温熬制2.5h，150目筛过滤，弃果渣，得滤液。

4.将步骤3所得滤液与鲜驴奶按体积比1:12混合，加入终浓度为1.0％的阿胶粉、3％的阿拉伯糖、6％的白砂糖或木糖醇，加热溶解，得阿胶驴奶培养基；

5.将步骤4所得的阿胶驴奶培养置于发酵罐中，110℃条件下，灭菌15min，迅速降温冷却到38～42℃。无菌条件下，接入益生菌发酵的种子液，于发酵罐中40℃，发酵20h。具体步骤为：

(1)5％白砂糖、5％脱脂乳粉混合，用蒸馏水定容，在110℃，30min灭菌，配制成种子液；

(2)将培养好的保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌：嗜酸乳杆菌按1:1:1比例接种到种子液中，40℃，培养20h；

(3)将发酵好的种子液按2％的比例，接种到发酵罐的阿胶驴奶培养基质中，40℃，发酵20h；

发酵过程中，每2小时在线观察一次pH值的变化，pH值到4.0左右，停止发酵即得阿胶酸驴奶。

1.3本发明的阿胶驴酸奶的制备方法如下：

1.将枸杞、红枣、蛹虫草子实体于60-90℃烘干，分别用粉碎机粉碎，过80目药筛；

2.将沙棘果清洗干净，榨汁机榨汁，过80目药筛，弃果渣得沙棘果汁；

3.将步骤1、2所得枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉、沙棘果汁按重量比1:1:1:1混合，加2～5倍纯化水，高温熬制2～3h，120～200目筛过滤，弃果渣，得滤液。

4.将步骤3所得滤液与鲜驴奶按体积比1:10～15混合，加入终浓度为0.5～2.0％的阿胶粉、5％的阿拉伯糖、8％木糖醇，加热溶解，得阿胶驴奶培养基；

5.将步骤4所得的阿胶驴奶培养置于发酵罐中，110℃条件下，灭菌15min，迅速降温冷却到38～42℃。无菌条件下，接入益生菌发酵的种子液，于发酵罐中38～42℃，发酵16～24h。具体步骤为：

(1)5％白砂糖、5％脱脂乳粉混合，用蒸馏水定容，在110℃，30min灭菌，配制成种子液。

(2)将培养好的保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌：嗜酸乳杆菌按1:1.2:1.2比例接种到种子液中，38～42℃，培养16～24h；

(3)将发酵好的种子液按3％的比例，接种到发酵罐的阿胶驴奶培养基质中，38～42℃，发酵16～24h。

发酵过程中，每2小时在线观察一次pH值的变化，pH值到4.0左右，停止发酵即得阿胶酸驴奶。

实施例2制备条件对阿胶驴酸奶的影响

2.1发酵纯驴酸奶

1.鲜驴奶2000ml混合，加入终浓度为5％的阿拉伯糖480g、5％的木糖醇480g，加热溶解，得阿胶驴奶培养基2L；

2.将驴奶培养基于发酵罐中110℃，灭菌15min，迅速降温冷却到38～42℃。无菌条件下，接入益生菌发酵的种子液，于发酵罐中38～42℃，发酵16～24h；具体步骤为：

(1)25g白砂糖、25g脱脂乳粉混合，用蒸馏水定容500mL，在110℃，30min灭菌，配制成种子液；

(2)将培养好的保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌：嗜酸乳杆菌按1:1:1比例接种到种子液培养温度为38.5℃±0.5℃，培养16h；

(3)将按2％的比例取200mL发酵好的种子液，接种到驴奶培养基质中，培养温度为38.5℃±0.5℃，培养；发酵过程中，每2小时，在线观察一次pH值的变化，pH值到4.0作用，停止发酵即得。

2.2发酵不添加阿胶的酸驴奶

1.将枸杞、红枣、蛹虫草子实体各500g，60-90℃烘干，分别用粉碎机粉碎，过80目药筛，称重，得枸杞粉450g、红枣粉473g、蛹虫草子实体435g。

2.将沙棘果500g清洗干净，榨汁机榨汁，过80目药筛，弃果渣留滤液，得滤液300g。

3.取枸杞粉、红枣粉、蛹虫草子实体粉、沙棘滤液各50g混合，加3倍纯化水600mL，高温熬制3h，150、180、200目筛分级过滤，得滤液600mL。

4.按体积比1:15将600mL滤液与鲜驴奶9000ml混合，加入终浓度为5％的阿拉伯糖480g、5％的木糖醇480g，加热溶解，得驴奶培养基10L。

5.将阿胶驴奶培养基于发酵罐中110℃，灭菌15min，迅速降温冷却到38～42℃。无菌条件下，接入益生菌发酵的种子液，于发酵罐中38342℃，发酵16～24h；具体步骤为：

(1)25g白砂糖、25g脱脂乳粉混合，用蒸馏水定容500mL，在110℃，30min灭菌，配制成种子液。

(2)将培养好的保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌：嗜酸乳杆菌分别按2:1:1、1:2:1、1:1:2比例接种到种子液培养温度为38.5℃30.5℃，培养16h。

(3)将按2％的比例取200mL发酵好的种子液，分别接种到三份阿胶驴奶培养基质中，培养温度为38.5℃30.5℃，培养。发酵过程中，每2小时，在线观察一次pH值的变化，pH值到4.0作用，停止发酵。

2.3制备1.0％阿胶酸驴奶

步骤4中按体积比1:10将600mL滤液与鲜驴奶6000ml混合，加入终浓度为1.0％的阿胶粉66g、2％的阿拉伯糖198g、8％的白砂糖528g，加热溶解，得阿胶驴奶培养基6750mL。

将阿胶驴奶培养基于发酵罐中110℃，灭菌15min，迅速降温冷却到38～42℃。无菌条件下，进行发酵，发酵步骤同实施例2.2。

2.4制备1.5％阿胶酸驴奶

将阿胶粉的用量改为144g，其他条件同实施例2.2。

2.5制备不同乳酸菌比例的发酵驴酸奶

按体积比1:15将600mL滤液与鲜驴奶9000ml混合，加入终浓度为1.5％的阿胶粉144g、5％的阿拉伯糖480g、5％的木糖醇480g，加热溶解，得阿胶驴奶培养基10L。将10L阿胶驴奶培养基等分为三份。将培养好的保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌：嗜酸乳杆菌分别按2:1:1、1:2:1、1:1:2比例接种到种子液，进行发酵。其他条件同实施例2.2。

结果如表1所示：

表1主要配方及菌种比例对驴奶发酵的影响

由表1可知，鲜驴奶与滤液(枸杞、红枣蛹虫草子实体、沙棘)按15:1混合，不添加阿胶，发酵时间由发酵纯驴奶的20h延长至28h，且发酵液较稀，口感不够细腻，说明滤液(枸杞、红枣、蛹虫草子实体、沙棘)中某些成分会影响鲜驴奶发酵时间和发酵液的口感。在实施例2.2基础上，添加1.0～1.5％阿胶进行发酵，发酵所需时间可缩短至16h，且发酵后的酸驴奶外观组织细腻、均匀，口感清香。

将菌种比例由保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌：嗜酸乳杆菌1：1：1变为2:1:1、1:2:1、1:1:2，对阿胶酸驴奶发酵。结果显示保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌：嗜酸乳杆菌为2:1:1时，发酵36h，pH值达4.6左右，发酵不完全，出现分层现象，上部有乳清析出，底部呈凝乳态，中间有未发酵的乳液，发酵失败。菌种比例为保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌：嗜酸乳杆菌1:2:1、1:1:2时，虽然可以完全发酵酸驴奶，但发酵时间长、口感差。因此，在复杂环境(驴奶、滤液、阿胶)的作用下，保加利亚乳杆菌：嗜热链球菌：嗜酸乳杆菌比例为1:1:1可达到最优发酵效果。

实施例3验证增强免疫力效果

实施例2.1、实施例2.3、实施例2.4所得酸驴奶作为供试品，检验其对小鼠免疫功能的影响。具体操作如下：

1.取昆系小白鼠40只(普通级、6周龄，体重：20g32g)，雌雄各半，随机分成4组，每组10只，分别为I组(生理盐水组)、II组(纯酸驴奶组)、III组(1.0％阿胶酸驴奶组)、IV组(1.5％阿胶酸驴奶组)，按不同组别每日定时灌胃0.2mL/次，连续7日。

2.观测指标及测定

(1)巨噬细胞吞噬能力测定

末次灌胃后，每只实验小鼠腹腔注射10％的鸡血红细胞1mL，30min后颈椎脱臼处死小鼠，腹腔注射生理盐水1mL，轻揉1min，吸出腹腔洗液1mL滴于处理的载玻片上，37℃孵育30min，用生理盐水漂去未贴壁的细胞，晾干，置于1:1的丙酮-甲醛溶液固定10min。1:6的Giemsa-磷酸缓冲溶液染色3min，蒸馏水漂洗晾干，镜检计数(每张片计数100个细胞)。结果如表2所示。

吞噬能力＝(吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞数)×100％；

吞噬指数＝被吞噬的鸡红细胞是/计数的巨噬细胞数。

实验数据以平均数±标准差(±S)表示，SPSS1.7软件采用t检验进行数据统计分析。

表2不同发酵酸驴奶对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响

注：*表示与生理盐水组比较存在显著性差异(p<0.05，n＝10)，**表示与生理盐水组比较存在极显著差异(p<0.01，n＝10)；Δ表示与酸驴奶比较存在显著性差异(p<0.05，n＝10)，ΔΔ表示与纯酸驴奶比较存在极显著性差异(p<0.01，n＝10)

由表2可知，与生理盐水组(I组)相比酸驴奶组(II组)的小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率显著提高(p<0.05，n＝10)，1.0％阿胶酸驴奶组(III组)和1.5％阿胶酸驴奶组(IV组)的小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率提高极显著(p<0.01，n＝10)；1.0％阿胶酸驴奶组(III组)小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数显著高于理盐水组生理盐水组(I组)(p<0.05，n＝10)，1.5％阿胶酸驴奶组(IV组)的小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数极显著高于生理盐水组(I组)(p<0.01，n＝10)。与酸驴奶组(II组)相比1.0％阿胶酸驴奶组(III组)和1.5％阿胶酸驴奶组(IV组)小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率极显著提高(p<0.01，n＝10)；与酸驴奶组(II组)相比1.0％阿胶酸驴奶组(III组)小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数显著提高(p<0.05，n＝10)，1.5％阿胶酸驴奶组(IV组)小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数极显著提高(p<0.01，n＝10)。

(2)碳廓清能力测定

末次灌胃后4h，称重实验小鼠，尾部静脉注射印度墨汁0.1mL/10g，墨汁注射后，分别在2、10min，从眼眦处取血30μL，并立即加入盛有3mL 0.1％NaCO

碳廓清指数(K)＝(lgOD

吞噬指数(α)＝体重/(肝重+脾重)×K

[注：OD

实验数据以平均数3标准差

表3不同发酵酸驴奶对小鼠碳廓清能力的影响

注：*表示与生理盐水组比较存在显著性差异(p<0.05，n＝10)，**表示与生理盐水组比较存在极显著差异(p<0.01，n＝10)；Δ表示与酸驴奶比较存在显著性差异(p<0.05，n＝10)，ΔΔ表示与纯酸驴奶比较存在极显著性差异(p<0.01，n＝10)

由表3可知，与生理盐水组(I组)相比，酸驴奶组(II组)、1.0％阿胶酸驴奶组(III组)和1.5％阿胶酸驴奶组(IV组)的小鼠碳廓清能力显著提高(p<0.05，n＝10)；与酸驴奶组(II组)相比，1.5％阿胶酸驴奶组(IV组)小鼠碳廓清能力显著提高(p<0.05，n＝10)。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。