一种改善肠道健康的宠物用零食及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于宠物健康技术领域，具体涉及一种改善肠道健康的宠物用零食及其制备方法和应用。

背景技术

伴随着宠物主人养宠知识的越来越丰富，养宠理念逐渐发生了变化，宠物市场也迎来了消费升级。越来越多的家庭开始将宠物看作自己家庭的成员。以往的传统食品不再能够完全满足宠物主人的新式养宠理念，“拟人化”的消费品开始逐渐占据宠物食品市场。因此宠物零食作为一种以往人类特有的消费品，开始在市场受到广泛的关注。在宠物零食这类消费品中，具有功能性的宠物零食因其特有的兼具保健品功能而具有广袤的市场前景，因此功能性零食的开发应当作为宠物零食的热点研究方向。

动物因不适应外界环境或饮食不当而出现消化不良、腹泻等消化道疾病常有发生，同时抗生素的广泛使用导致机体耐药和药物残留，使宠物肠道正常菌群失调，引起便秘、腹泻、消化不良、肠炎等肠道不适症状，给宠物的健康带来了危害。目前，改善肠道环境的宠物用产品也有相关报道，多数为植物原料复配得到，但有的植物原料有异味或者苦味，宠物适口性较差。巧克力口感的产品是宠物易于接受的，但是食用巧克力中的可可碱和咖啡因含有甲基黄嘌呤，对宠物而言是有毒物质，会导致犬猫出现呕吐、腹泻、躁动或者行为异常等现象，更高摄入会出现神经症状，如果不加以治疗会导致宠物死亡。关于适口性好、安全性高且能改善肠道健康的巧克力口感的宠物用产品在现有技术未见相关报道。

发明内容

本发明提供了一种改善肠道健康的宠物用零食及其制备方法和应用，该宠物用零食具有独特的巧克力风味，备受动物喜爱和接受，长期食用可有效缓解肠道炎症，保护肠道健康，安全无毒。

为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供一种改善肠道健康的宠物用零食，包括如下重量份原料：角豆粉330～460份、白砂糖200～250份、绿茶叶70～100份、脱脂奶粉50～80份、脱盐乳清粉60～80份、自制益生菌添加剂5～10份、维生素C10～20份、食用香精10～20份、香兰素5～10份、宠物诱食剂1～10份、食用油10～25份。

优选的，所述自制益生菌添加剂包括如下重量份原料：罗伊氏乳杆菌15～30份、嗜酸乳杆菌5～15份、沸石粉10～60份、丝兰提取物1～5份。

优选的，所述罗伊氏乳杆菌的活菌数均为2×10

本发明提供所述自制益生菌添加剂的制备方法，包括如下步骤：分别将罗伊氏乳杆菌和嗜酸乳杆菌接种于培养基中培养，获得罗伊氏乳杆菌和嗜酸乳杆菌的菌液；将上述菌液混合均匀，离心取沉淀，得菌泥；将菌泥与沸石粉和丝兰提取物混合，即得自制益生菌添加剂。

优选的，所述菌泥与沸石粉和丝兰提取物总和的重量比为1：8～9。

优选的，所述沸石粉与丝兰提取物的重量比为12～14：1。

本发明提供所述宠物用零食的制备方法，包括如下步骤：将白砂糖、角豆粉、脱脂奶粉、脱盐乳清粉、香兰素、绿茶叶、宠物诱食剂混合，精磨，加入食用油和食用香精，搅拌降温，加入自制益生菌添加剂和维生素C，混合混匀，转入保温缸中脱臭脱气；浇注成型，冷却，即得宠物用零食。

优选的，所述精磨温度为45～50℃。

本发明提供所述宠物用零食在制备改善宠物肠道健康产品中的应用。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明首次在不添加可可粉或代可可脂的情况下，制备出具有独特巧克力风味的宠物用零食，该零食以角豆粉为主要原料，其富含可调节肠道微生态的多酚与纤维等益生元成分，复配绿茶叶、白砂糖、脱脂奶粉、脱盐乳清粉、香兰素、维生素C、食用香精、自制微生物添加剂可提高巧克力风味和口感，同时具有独特的奶香味，备受动物喜爱和接受。

本发明将罗伊氏乳杆菌与嗜酸乳杆菌组合，以沸石粉和丝兰提取物为吸附载体制备的自制益生菌添加剂具有缓解肠道炎症、保护肠道健康的功效，与上述原料复配后，不受其它原料的影响，仍保持其原有活性。通过动物试验验证，所用角豆粉与自制益生菌添加剂在改善宠物犬肠道健康方面具有协同增效的作用，二者共同使用更有效改善了患有轻度肠道炎症犬的粪便状态和粪便短链脂肪酸(Short chain fatty acids，SCFAs)组成，同时缓解了肠道炎症引发的机体炎症和肠道黏膜屏障损伤，有益于宠物肠道健康。

附图说明

图1各组试验犬体重生长情况。

图2粪便评分表。

图3各组试验犬粪便评分结果。

图4各组试验犬体重生长情况。

图5各组试验犬肠道指标对比结果。

图6各组试验犬粪便评分结果。

图7各组试验犬粪便中SCFAs对比结果。

具体实施方式

本发明提供了一种改善肠道健康的宠物用零食，包括如下重量份原料：角豆粉330～460份、白砂糖200～250份、绿茶叶70～100份、脱脂奶粉50～80份、脱盐乳清粉60～80份、自制益生菌添加剂5～10份、维生素C10～20份、食用香精10～20份、香兰素5～10份、宠物诱食剂1～10份、食用油10～25份。本发明所述原料在适宜用量下配伍制备的宠物用零食在具有巧克力风味的基础上，还具有独特奶香风味，备受动物喜爱和接受；所用角豆粉与自制益生菌添加剂复配，在调理便秘、腹泻、消化不良等肠道病症中有协同增效的作用，对改善肠道健康有显著疗效。本发明所述原料若无特殊说明，均为本领域技术人员熟知的市售商品。本发明制备的宠物用零食可以适应于各种宠物，比如犬类、猫类、鼠类、鸟类等。

在本发明中，所述角豆粉不含可可碱、咖啡因等甲基黄嘌呤，对犬猫不具有毒性，富含可调节肠道微生态的多酚与纤维等益生元成分，热量远远低于可可粉或代可可脂，含有抗氧化剂-黄酮类物质，具有显著的自由基清除活性，同时还具备低钠、高钙的营养特性。本申请所述角豆粉所含的益生元可调节肠道微生物的组成和结构，是益生菌的食物，可以增加有益菌的数量，与自制益生菌添加剂复配对调节肠道健康有协同增效的效果。

在本发明中，所述绿茶叶含有生命机体所必需的维生素类、蛋白质、氨基酸、糖类及矿物质元素，它们对机体有较高的营养价值，与角豆粉搭配，具有宠物喜欢的独特风味；所述脱脂奶粉增添牛奶风味；所述脱盐乳清粉作为一种奶粉添加物，是将乳清粉中的矿物盐脱去，可减少宠物肾负担；本发明所述白砂糖、食用香精、香兰素、食用油和宠物诱食剂可提高宠物零食的适口性。

在本发明中，所述自制益生菌添加剂包括如下重量份原料：罗伊氏乳杆菌15～30份、嗜酸乳杆菌5～15份、沸石粉10～60份、丝兰提取物1～5份。本发明所述罗伊氏乳杆菌为2×10

本发明提供一种自制益生菌添加剂的制备方法，包括如下步骤：分别将罗伊氏乳杆菌和嗜酸乳杆菌接种于培养基中培养，获得罗伊氏乳杆菌和嗜酸乳杆菌的菌液；将上述菌液混合均匀，离心取沉淀，得菌泥；将菌泥与沸石粉和丝兰提取物混合，即得自制益生菌添加剂。本发明所述菌泥与沸石粉和丝兰提取物总和的重量比为1：8～9，所述沸石粉与丝兰提取物的重量比为12～14：1。本发明所述罗伊氏乳杆菌的培养条件为：pH6.2～6.5的MRS培养基，37℃培养48h；所述嗜酸乳杆菌的培养条件为：pH5.5～6.0的MRS培养基，37℃培养48h。

本发明提供一种宠物用零食的制备方法，包括如下步骤：将白砂糖、角豆粉、脱脂奶粉、脱盐乳清粉、香兰素、绿茶叶、宠物诱食剂混合，精磨，加入食用油和食用香精，搅拌降温，加入自制益生菌添加剂和维生素C，混合混匀，转入保温缸中脱臭脱气；浇注成型，冷却，即得宠物用零食。本发明所述制备方法获得的宠物用零食口感细腻、硬度适中，适宜动物咀嚼，通过精磨将各原料的香味融合一体，使制备的零食具有独特的巧克力风味，同时伴有奶香，增强了动物的适口性。

在本发明中，所述绿茶需放入破碎机中粉碎得绿茶粉，粉碎时间为6～9min，优选为7～8min。本发明将绿茶叶粉与白砂糖、角豆粉、脱脂奶粉、脱盐乳清粉、香兰素、宠物诱食剂混合精磨，可使上述原料混合均匀，同时使各原料的香味融合在一起，形成独特的伴有奶香的巧克力风味。

在本发明中，所述精磨温度为45～50℃，精磨至细度30μm以下。本发明设定的适宜精磨细度和温度可使混合物料混合均匀，构成高度均匀一致的分散体系，利于乳化，还可降低混合物料的水分，增加混合物料的巧克力香味，可增香和调香。

在本发明中，所述自制益生菌添加剂和维生素C的温度为25～30℃。本发明自制益生菌添加剂和维生素C的适宜添加温度，可有效保留自制益生菌添加剂的活性和维生素C的功能。

在本发明中，所述脱臭脱气时间为8～15h，优选为9～14h。本发明将精磨好的物料转入保温缸中保温搅拌，即可达到脱臭脱气的目的。本发明所述保温温度为35～40℃。

在本发明中，所述浇注成型后需静置8～10min，利于物料在磨具中充分展开。本发明所述磨具包括零食豆磨具、零食条磨具或零食棒磨具。本发明需将静置的含物料磨具冷冻2～4h，脱模，装入干燥防潮袋中即可。本发明制备的宠物零食需密封存储，避免阳光直射，储存温度20～23℃、湿度30～40％。

本发明提供一种宠物用零食在制备改善肠道健康产品中的应用。本发明所述宠物用零食改善便秘、腹泻、消化不良等引起的肠道病症，保护肠道健康。

在本发明中，实施例中涉及的原料来源如下：角豆粉购于扶风斯诺特生物科技有限公司，SNT210622；白砂糖购于太古糖业(中国)有限公司，862535；绿茶叶购于无锡宏润鸿农产品有限公司；脱脂奶粉购于厦门味可多食品科技有限公司；脱盐乳清粉购于河南博皓食品添加剂有限公司；食用香精和香兰素购于广东鼎盛食品配料有限公司；宠物诱食剂购于四川华堂聚瑞生物科技有限公司；罗伊氏乳杆菌(PG-LRL116)和嗜酸乳杆菌(PG-LAS107)均购于山东品高药业有限公司；沸石粉购于灵寿县强东矿产品加工厂；丝兰提取物购于陕西东禾福生物科技有限公司；大豆油购于山东福泽康食用油有限公司。

下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。

实施例1

一种改善肠道健康的宠物用零食，由如下重量份原料制成：角豆粉380份、白砂糖250份、绿茶叶80份、脱脂奶粉60份、脱盐乳清粉80份、自制益生菌添加剂5份、维生素C10份、食用香精15份、香兰素10份、宠物诱食剂10份、大豆油20份。

所述自制益生菌添加剂的制备方法包括如下步骤：

(1)菌种培养：将罗伊氏乳杆菌(3.5×10

(2)菌液复配：分别取步骤(1)制备的罗伊氏乳杆菌菌液18份和嗜酸乳杆菌菌液10份，并将上述菌液混合均匀，经离心后取沉淀，得菌泥；

(3)吸附烘干：将步骤(2)制备的菌泥放入混合机中混合均匀，加入沸石粉60份和丝兰提取物5份继续混合均匀，-80℃冷冻干燥10h，即得自制益生菌添加剂。

所述改善肠道健康的宠物用零食的制备方法包括如下步骤：

(1)定量称取：将所需的原料按照上述原料重量份称取；

(2)助剂研磨：将绿茶叶放入破碎机中粉碎6min，取出备用；

(3)恒温精磨：将白砂糖、角豆粉、脱脂奶粉、脱盐乳清粉、香兰素、绿茶叶粉、宠物诱食剂充分混合，加入精磨机，精磨至细度30μm以下，精磨过程温度控制在48℃；

(4)精磨完成后，物料在精磨机中降温至38℃，然后将大豆油和食用香精加入混合物料中，再次搅拌12min；之后在精磨机中降温至28℃，加入准备的自制益生菌添加剂及维生素C粉末，混合均匀；

(5)将混合好的物料转入保温缸中保温37℃，搅拌，脱臭脱气10h；

(6)浇注成型：缓慢向浇注模具中倒入步骤(5)制得的物料，浇注于巧克力豆磨具、巧克力条磨具和巧克力棒磨具中，浇注成型后，静置9min；

(7)冷却：将步骤(6)制得的浇注成型的模具放入冰箱冷冻室冷冻3h；

(8)包装：将步骤(7)脱模后的产品装入干燥防潮袋中收纳即可；

(9)储存：密封存储，避免阳光直射，温度20～23℃，湿度30～40％。

实施例2

一种改善肠道健康的宠物用零食，由如下重量份原料制成：角豆粉400份、白砂糖215份、绿茶叶80份、脱脂奶粉70份、脱盐乳清粉70份、自制益生菌添加剂7份、维生素C15份、食用香精10份、香兰素6份、宠物诱食剂6份、大豆油18份。

所述自制益生菌添加剂的制备方法包括如下步骤：

(1)菌种培养：将罗伊氏乳杆菌(3.5×10

(2)菌液复配：分别取步骤(1)制备的罗伊氏乳杆菌菌液30份和嗜酸乳杆菌菌液5份，并将上述菌液混合均匀，经离心后取沉淀，得菌泥；

(3)吸附烘干：将步骤(2)制备的菌泥放入混合机中混合均匀，加入沸石粉60份、丝兰提取物5份，继续混合均匀，-80℃冷冻干燥10h，即得自制益生菌添加剂。

所述改善肠道健康的宠物用零食的制备方法包括如下步骤：

(1)定量称取：将所需的原料按照上述原料重量份称取；

(2)助剂研磨：将绿茶叶放入破碎机中粉碎9min，取出备用；

(3)恒温精磨：将白砂糖、角豆粉、脱脂奶粉、脱盐乳清粉、香兰素、绿茶叶粉、宠物诱食剂充分混合，加入精磨机，精磨至细度30μm以下，精磨过程温度控制在50℃；

(4)精磨完成后，物料在精磨机中降温至40℃，然后将大豆油和食用香精加入混合物料中，再次搅拌15min；之后在精磨机中降温至25℃，加入准备的自制益生菌添加剂及维生素C粉末，混合均匀；

(5)将混合好的物料转入保温缸中保温37℃，搅拌，脱臭脱气8h，以去除犬猫不喜欢的绿茶气味；

(6)浇注成型：缓慢向浇注模具中倒入步骤(5)制得的物料，浇注于巧克力豆磨具、巧克力条磨具和巧克力棒磨具中，浇注成型后，静置8min；

(7)冷却：将步骤(6)制得的浇注成型的模具放入冰箱冷冻室冷冻4h；

(8)包装：将步骤(7)脱模后的产品装入干燥防潮袋中收纳即可；

(9)储存：密封存储，避免阳光直射，温度20～23℃，湿度30～40％。

实施例3

一种改善肠道健康的宠物用零食，由如下重量份原料制成：角豆粉420份、白砂糖220份、绿茶叶70份、脱脂奶粉50份、脱盐乳清粉80份、自制益生菌添加剂10份、维生素C 20份、食用香精5份、香兰素8份、宠物诱食剂5份、大豆油17份。

所述自制益生菌添加剂的制备方法包括如下步骤：

(1)菌种培养：将罗伊氏乳杆菌(3.5×10

(2)菌液复配：分别取步骤(1)制备的罗伊氏乳杆菌菌液15份和嗜酸乳杆菌菌液15份，并将上述菌液混合均匀，经离心后取沉淀，得菌泥；

(3)吸附烘干：将步骤(2)制备的菌泥放入混合机中混合均匀，加入沸石粉36份、丝兰提取物3份，继续混合均匀，-80℃冷冻干燥10h，即得自制益生菌添加剂。

所述改善肠道健康的宠物用零食的制备方法包括如下步骤：

(1)定量称取：将所需的原料按照上述原料重量份称取；

(2)助剂研磨：将绿茶叶放入破碎机中粉碎6min，取出备用；

(3)恒温精磨：将白砂糖、角豆粉、脱脂奶粉、脱盐乳清粉、香兰素、绿茶叶粉、宠物诱食剂充分混合，加入精磨机，精磨至细度30μm以下，精磨过程温度控制在45℃；

(4)精磨完成后，物料在精磨机中降温至35℃，然后将大豆油和食用香精加入混合物料中，再次搅拌10min；之后在精磨机中降温至30℃，加入准备的自制益生菌添加剂及维生素C粉末，混合均匀；

(5)将混合好的物料转入保温缸中保温37℃，搅拌，脱臭脱气15h；

(6)浇注成型：缓慢向浇注模具中倒入步骤(5)制得的物料，浇注于巧克力豆磨具、巧克力条磨具和巧克力棒磨具中，浇注成型后，静置10min；

(7)冷却：将步骤(6)制得的浇注成型的模具放入冰箱冷冻室冷冻2h；

(8)包装：将步骤(7)脱模后的产品装入干燥防潮袋中收纳即可；

(9)储存：密封存储，避免阳光直射，温度20～23℃，湿度30～40％。

实施例4

一种改善肠道健康的宠物用零食，由如下重量份原料制成：角豆粉440份、白砂糖220份、绿茶叶70份、脱脂奶粉65份、脱盐乳清粉75份、自制益生菌添加剂7份、维生素C15份、食用香精15份、香兰素10份、宠物诱食剂10份、大豆油15份。

所述自制益生菌添加剂的制备方法与实施例3相同。

所述改善肠道健康的宠物用零食的制备方法与实施例3相同。

实施例5

一种改善肠道健康的宠物用零食，由如下重量份原料制成：角豆粉450份、白砂糖200份、绿茶叶70份、脱脂奶粉60份、脱盐乳清粉80份、自制益生菌添加剂5份、维生素C10份、食用香精13份、香兰素5份、宠物诱食剂10份、大豆油12份。

所述自制益生菌添加剂的制备方法与实施例3相同。

所述改善肠道健康的宠物用零食的制备方法与实施例3相同。

对比例1

与实施例3的区别在于不加入自制益生菌添加剂，舍弃自制益生菌添加剂的制备步骤，其余配方和步骤均相同。

对比例2

与实施例3的区别在于将罗伊氏乳杆菌和嗜酸乳杆菌等量替换为植物乳杆菌(购于上海士锋生物科技有限公司)和凝结芽孢杆菌(购于山东中科嘉亿生物工程有限公司)，其余配方和步骤均相同。

实施例6

收集体重和年龄相近的32只健康犬，按照完全随机设计原则将32只犬分到四个处理组中包括对照组、实施例1组、实施例3组和实施例5组，每组8只犬。其中对照组饲喂普通日粮，实施例1、3和5组分别在饲喂普通日粮的基础上饲喂10g/日实施例1制备的宠物用零食、普通日粮的基础上饲喂10g/日实施例3制备的宠物用零食、普通日粮的基础上饲喂10g/日实施例5制备的宠物用零食。正式试验期共64天。试验正式开始后，第0、32天和64天观测每只试验动物的体重增长和粪便状态。正式试验第32天和64天对各组活体用10mL的真空采血管，通过前肢静脉采集血4mL，其中2mL血液加入非抗凝管中静置30min析出上清液后离心，上清即为血清，低温保存；另外2mL血液加入抗凝管中，混匀抗凝剂与血液，离心后上清即为血浆，低温保存；同时收集各组试验动物的新鲜粪便，每份样品3～5g，装入冻存管中，低温保存，用以检测粪便中SCFAs含量。

体重数据是反映宠物生长健康的重要指标。本试验使用体重称称量各组犬第0、32天和64天的体重，并统计分析。由图1所示，第0、32天和64天各个试验组均无明显差异(P>0.05)，证明本发明零食不会对宠物生长造成影响。

血液学指标检测：通过自动血球分析仪对所采集动物的全血进行测定。结果见表1-2。

表1第32天血液学指标结果

表2第64天血液学指标结果

由表1-2所示，试验32天和64天，试验犬的血液学指标，对照组、实施例1、实施例3和实施例5组之间均无显著性差异(P>0.05)，说明各个组均处于正常水平。

血生化指标检测步骤：取全血离心约20min(2000转/min)，收集上清即为血清。使用全自动生化分析仪对血清样品进行血液生化指标测定。结果见表3-4。

表3第32天血生化指标

表4第64天血生化指标

由表3-4所示，试验第32天和64天，试验犬血生化指标，对照组、实施例1、实施例3和实施例5组之间均无显著性差异(P>0.05)，说明各个组均处于正常水平。

粪便评分步骤：采用Waltham粪便评分表如图2所示，由特定受培训人员观察新鲜粪便形状进行评分。结果见图3。

粪便评分是指示犬肠道健康的重要评价指标。如图3所示，第0、32天和64天评分各个实施例组与对照组相比均无明显差异(P>0.05)，说明试验开始时，对照组、实施例1组、实施例3组和实施例5组均处于同一肠道健康水平，且本发明产品不会对肠道造成负面影响。

实施例7

另外选取体重和年龄相近的32只患有轻度肠道炎症犬，随机分为4组包括对照组、实施例3组、对比例1组和对比例2组，每组8只。其中对照组饲喂普通日粮；实施例3组在普通日粮的基础上饲喂10g/日实施例3制备的零食；对比例1组在普通日粮的基础上饲喂10g/日对比例1制备的零食；对比例2组在普通日粮的基础上饲喂10g/日对比例2制备的零食。试验共56天，试验正式开始后，第0、28天和56天观测每只试验动物的体重增长和粪便状态。于试验第56天对各组活体用10mL的真空采血管，通过前肢静脉采集血，2mL血液加入非抗凝管中静置30min析出上清液后2-6℃条件离心20min(2000转/min)，上清即为血清，低温保存；同时收集试验动物的新鲜粪便，每份样品3～5g，装入冻存管中，低温保存。

本试验使用体重称称量各组犬第28天和56天的体重，并统计分析。由图4所示，第0天各个试验组均无明显差异(P>0.05)。第28天，实施例3组显著性高于对照组(P≤0.05)；对比例1组、对比例2组与对照组无明显差异(P>0.05)；对比例1组、对比例2组和实施例3组无明显差异(P>0.05)，两个对比例组位于对照组和实施例3组之间。第56天，实施例3组显著性高于对比例1组和对比例2组(P≤0.05)，而对比例1组、对比例2组显著性高于对照组(P≤0.05)。从第28天和56天数据结果表明，实施例3组对试验犬肠道健康的作用明显优于对比例1组和对比例2组，经过益生菌替换的对比例2组效果不如本发明中的自制益生菌添加剂。

肠道健康指标检测：检测指标为：免疫球蛋白G(IgG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、脂多糖(LPS)、二胺氧化酶(DAO)、脂肪酸结合蛋白(i-FABP)。步骤如下：取试验中采集的离心后血清，使用酶联免疫吸附法进行分析(上述指标检测所用酶联免疫吸附法试剂盒购于美国Bethyl Laboratories公司和Neo scientific公司，其中检测DAO和i-FABP对应的试剂盒购于Neo scientific公司，其余指标检测所用试剂盒购于Bethyl Laboratories公司)。结果见图5。

由图5所示，第56天IgG含量，对比例1组与对照组无显著性差异(P>0.05)，实施例3组明显低于对照组和对比例1组和对比例2组(P≤0.05)，对比例2组与对比例1组无显著性差异(P>0.05)。这表明实施例3组的炎症水平要低于对比例1组、对比例2组和对照组。

第56天MDA含量、IL-1β含量和LPS含量，对照组显著性高于对比例1组和对比例2组(P≤0.05)，对比例1组和对比例2组间无显著性差异(P>0.05)，而对比例1组和对比例2组显著性高于实施例3组(P≤0.05)。这表明在试验第56天，添加了自制益生菌添加剂的实施例3组缓解炎症效果要优于对比例1组和对比例2组。

第56天TNF-α含量，对照组、对比例1组和对比例2组无显著性差异(P>0.05)，均显著性高于实施例3组(P≤0.05)。这表明实施例3组的炎症水平要明显好于其余三组。

第56天IL-6含量，四组之间并无无显著性差异(P>0.05)，这说明IL-6含量在本试验中对炎症影响效果不大。第56天IL-10含量，实施例3组显著高于其他三组(P≤0.05)；对比例1组和对照组、对比例2组无显著性差异(P>0.05)；对比例2组显著性高于对照组(P≤0.05)。这表明，实施例3组的效果要优于对比例1组和对比例2组，实施例3组制备的宠物零食可有效改善犬肠道炎症。

第56天DAO含量，对比例1组与对照组无显著性差异(P>0.05)；实施例3组明显低于对照组和对比例1组(P≤0.05)；对比例2组与对比例1组无显著性差异(P>0.05)。这表明实施例3组的肠道损伤程度要低于对比例1组和对照组。

第56天iFABP含量，对比例1组和对比例2组没有显著性差异(P>0.05)，对照组显著高于两个对比例1组(P≤0.05)，而两个对比例组显著性高于实施例3组，这表明两个对比例组肠道损伤程度位于实施例3组损伤程度和对照组之间，实施例3组对肠道损伤的缓解作用更为有效。

粪便评分步骤：采用Waltham粪便评分表如图2所示，由特定受培训人员观察新鲜粪便形状进行评分。结果见图6。

由图6所示，第0天，四个试验组间均无显著性差异(P>0.05)，说明试验开始时各组的肠道健康水平接近。第28天，对比例1组、对比例2组和实施例3组无显著性差异(P>0.05)；对比例1组、对比例2组和实施例3组显著性高于对照组(P≤0.05)。说明在试验第28天，两个对比例组肠道和实施例3组均缓解了轻微肠道炎症。第56天，实施例3组显著性高于对比例1组和对比例2组(P≤0.05)，这说明，较长时间的饲喂后，加入自制益生菌添加剂的本发明产品对肠道炎症的缓解效果以及肠道健康的保护作用，要优于两个对比例组。

粪便中SCFAs的检测：SCFAs的含量采用气相色谱法测定。将1g粪便样本置于15mL双蒸水中，以玻璃棒充分搅拌使粪便溶解形成均质的悬浊液，悬浊液随后以超声仪超声30min，并在12000×g下离心10min，得到的上清液以0.22μm过滤网过滤后收集。取1μL的上清液注入到以氰丙基甲基硅酮为固定相的毛细管柱(60m×250μm×0.25μm)中。进样口和检测器温度均保持在240℃。载气为氮气，流速为2.0mL/min。根据测得的乙酸、丙酸和丁酸的峰形图的面积，代入以标准品制定的标准曲线的回归方程中，获得数据。结果见图7。

肠道微生物可以通过产生活性代谢物如SCFAs来调节肠道屏障功能及抑制炎症反应，维护肠道稳态。乙酸、丙酸和丁酸是主要的SCFAs，能够为肠道上皮细胞的供给能量，维持肠道的正常功能。由图7所示，第56天乙酸含量，实施例3组显著高于其他三组(P≤0.05)，对比例1组和对比例2组无显著性差异(P>0.05)，均显著性高于对照组(P≤0.05)。这表明实施例3组相较于其他组能够最有效调节肠道健康，维持肠道稳态。第56天丁酸含量，实施例3组显著性高于对比例1组(P>0.05)，对比例1组和对比例2组无显著性差异(P>0.05)，均显著性高于对照组(P≤0.05)。这表明实施例3组相较于其他组能够最有效调节肠道健康，维持肠道稳态，而两个对比例组效果均不如实施例3组。

综上所述，添加自制益生菌添加剂的本发明产品功效要显著优于两个对比例组。表明本发明制备的宠物用零食具有显著改善肠道健康的效果。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。