延缓采后果蔬褪绿黄化的复合保鲜剂及方法

技术领域

本发明属于水果贮藏保鲜技术领域，更具体地，本发明涉及一种延缓采后香橼褪绿黄化的复合保鲜剂及方法。

背景技术

香橼，又称香水柠檬，原产亚洲的亚热带及暖温带地区，在中国华南地区广泛种植，具有一定的地域种植特色。香橼富含丰富的香精油及抗氧化衰老相关次生代谢物，可作为中药材来源(Chhikara et al.,2018)。近年来，随着奶茶、餐饮等发展，香橼逐渐作为香气风味来源，市场需求不断增加。香橼通常在绿熟时期采收，贮藏运输过程中果皮逐渐褪绿黄化、香气风味挥发散失，严重影响其从田间到餐桌的商品价值(Taghvaeefard et al.,2021)。因此，探索绿色高效的贮藏保鲜方法，延缓香橼采后贮藏货架期、减损保质，对提高市场经济价值具有重要意义。

香橼采后贮藏过程中，果实叶绿素降解、果皮褪绿黄化及香气风味降低是影响香橼品质和市场价值的主要因素。研究者们通过气调包装、人工合成细胞分裂素等可在一定程度延缓香蕉、菜心褪绿衰老的进程。然而，目前对香橼采后贮藏保鲜仍缺乏相应的研究报道，对香橼采后绿色高效的贮藏保鲜技术方法也未得到广泛探索。因此，探索针对香橼采后褪绿黄化、延缓叶绿素快速降解的绿色高效贮藏保鲜方法，尤其是筛选具有天然活性的动植物来源的安全高效的保鲜剂具有重要意义。

发明内容

基于此，本发明的目的在于提供一种复合保鲜剂及其应用、以及一种延缓采后香橼褪绿黄化的方法，本发明的复合保鲜剂可以很好地延缓采后香橼褪绿黄化、抑制香橼叶绿素含量降低。

实现上述发明目的的技术方案包括如下。

本发明的第一方面，提供了一种复合保鲜剂，所述复合保鲜剂的有效成分包括浓度为10～60ppm的硫酸软骨素和浓度为10～60ppm的肝素。

本发明的第二方面，提供了上述复合保鲜剂在延缓采后果蔬褪绿黄化中的应用。

本发明的第三方面，提供了一种延缓采后香橼褪绿黄化的方法，包括以下步骤：使用上述复合保鲜剂对采后八成熟的绿色香橼果实进行浸泡、涂敷或喷洒处理。

本发明具有以下有益效果：

本发明采用硫酸软骨素、肝素与透明质酸复配作为复合保鲜剂处理采后香橼，表现出协同增效延缓香橼叶绿素含量降低、抑制果实褪绿黄化的作用，从而可以有效延缓香橼采后货架期，且本发明的复合保鲜剂具有绿色高效的特点，有效成分均可完全水溶，不会产生环境污染。

附图说明

图1为本发明试验例中采收0天的新鲜香橼果实与对照组贮藏36天后的香橼果实的实物图；图中比例尺为1cm。

图2为本发明试验例中经各实验组处理后贮藏36天的香橼果实的实物图；其中，CK：对照；HP：肝素；CS：硫酸软骨素；HA，透明质酸；图中比例尺为1cm。

图3为本发明试验例中经各实验组处理后贮藏36天的香橼果实的黄化指数结果；其中，CK：对照；HP：肝素；CS：硫酸软骨素；HA，透明质酸；图中不同字母表示各组间p<0.05水平的显著性差异。

图4为本发明试验例中经各实验组处理后贮藏36天的香橼果实的色度结果；其中，CK：对照；HP：肝素；CS：硫酸软骨素；HA，透明质酸；图中不同字母表示各组间p<0.05水平的显著性差异。

图5为本发明试验例中经各实验组处理后贮藏36天的香橼果实的叶绿素含量结果；其中，CK：对照；HP：肝素；CS：硫酸软骨素；HA，透明质酸；图中不同字母表示各组间p<0.05水平的显著性差异。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明公开内容的理解更加透彻全面。

除非另有定义，本发明所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不用于限制本发明。本发明所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用化学试剂，均为市售产品。

本发明的发明人基于多年来对果蔬保鲜方面的研究经验，经过大量的实验后发现：硫酸软骨素与肝素复配作为保鲜剂，可以有效延缓采后香橼叶绿素降解、果实褪绿黄化等后熟衰老进程；在此基础上，再添加透明质酸，由三种成分复配的复合保鲜剂处理采后香橼，表现出协同增效延缓香橼叶绿素含量降低、抑制果实褪绿黄化的作用。香橼果实在贮藏36天后，仍能较好地保持表皮绿色，黄化指标显著下降(由81％降为54.5％)；显著阻抑了色度角的快速下降，采后36天仍可以保持在108°(香橼青绿时期色度角为121°)；明显协同增效延缓叶绿素降解，贮藏36天后，叶绿素仍高达47.3mg kg

在本发明的其中一些实施例中，公开了一种复合保鲜剂，所述复合保鲜剂的有效成分包括浓度为10～60ppm的硫酸软骨素和浓度为10～60ppm的肝素。

在其中一些实施例中，所述硫酸软骨素和肝素的浓度均为15～45ppm。

在其中一些实施例中，所述硫酸软骨素和肝素的浓度均为18～35ppm。

在其中一些实施例中，所述复合保鲜剂的有效成分还包括透明质酸，所述透明质酸在复合保鲜剂中的浓度为10～60ppm。

在其中一些实施例中，所述复合保鲜剂由浓度为18～22ppm的硫酸软骨素、浓度为18～22ppm的肝素和浓度为18～22ppm的透明质酸组成。

在本发明的另一些实施例中，公开了上述复合保鲜剂在延缓采后果蔬褪绿黄化中的应用。

在其中一些实施例中，所述果蔬为香橼。

在本发明的另一些实施例中，公开了延缓采后香橼蔬褪绿黄化的方法，包括以下步骤：采摘八成熟的绿色香橼果实，选择大小均匀，表面无机械损伤的果实，通过浸泡、涂敷或喷洒的方式，将上述复合保鲜剂包覆在香橼果实表面，风干表面水分，再于15～22℃室温贮藏。

在其中一些实施例中，所述浸泡的时间为5～20min。

在其中一些实施例中，所述浸泡的时间为8～12min。

以下实施例中的香橼是于广东省广州市增城香橼种植基地采摘的八成熟的青绿香橼果实；硫酸软骨素、肝素及透明质酸购自北京索莱宝生物科技有限公司提供；聚乙烯气调保鲜袋(厚度为30μm)购自上海复命新材料科技有限公司。可调恒温箱：-5-50℃，ThermoScientific。色度计：CR-400手持色度仪(Minolta Camera Co.Ltd.,Osaka,Japan)。分光光度计：UV-2600紫外分光光度计(Shimadzu，Japan)。

以下结合附图和具体实施例来详细说明本发明。

实施例1一种复合保鲜剂及延缓采后香橼褪绿黄化的方法

本实施例提供的复合保鲜剂，其有效成分为浓度为45ppm的硫酸软骨素和浓度为15ppm的肝素。

本实施例提供的复合保鲜剂的制备方法，包括以下步骤：将硫酸软骨素和肝素溶于水中，使其浓度分别为45ppm和15ppm。

本实施例中还提供了一种延缓采后香橼褪绿黄化的方法，包括以下步骤：

采摘八成熟的绿色香橼果实，选择大小均匀，表面无机械损伤的果实，使用本实施例的复合保鲜剂浸泡10min，再风干表面水分，封装于30μm厚的聚乙烯气调保鲜袋中，22℃贮藏。

实施例2一种复合保鲜剂及延缓采后香橼褪绿黄化的方法

本实施例提供的复合保鲜剂，其有效成分为浓度为20ppm的硫酸软骨素、浓度为20ppm的肝素和浓度为20ppm的透明质酸。

本实施例提供的复合保鲜剂的制备方法及使用方法同实施例1。

实施例3一种复合保鲜剂及延缓采后香橼褪绿黄化的方法

本实施例提供的复合保鲜剂，其有效成分为浓度为30ppm的硫酸软骨素、浓度为40ppm的肝素和浓度为10ppm的透明质酸。

本实施例提供的复合保鲜剂的制备方法及使用方法同实施例1。

实施例4一种复合保鲜剂及延缓采后香橼褪绿黄化的方法

本实施例提供的复合保鲜剂，其有效成分为浓度为18ppm的硫酸软骨素、浓度为50ppm的肝素和浓度为25ppm的透明质酸。

本实施例提供的复合保鲜剂的制备方法及使用方法同实施例1。

试验例本发明的复合保鲜剂对采后香橼果实褪绿黄化的影响

一、实验方法

采摘约八成成熟度香橼果实用于进行采后贮藏保鲜相关研究，选取大小一致、无明显伤痕、无病虫害的香橼果实，随机分为8组：

对比组CK(Control check)：使用清水浸泡处理果实，取出后自然风干表面水分，包装于聚乙烯气调保鲜袋(30μm厚)中。

实验组1：使用60ppm肝素溶液(HP)浸泡处理果实，取出后自然风干表面水分，包装于聚乙烯气调保鲜袋(30μm厚)中。

实验组2：使用60ppm硫酸软骨素溶液(CS)浸泡处理果实，取出后自然风干表面水分，包装于聚乙烯气调保鲜袋(30μm厚)中。

实验组3：使用60ppm透明质酸溶液(HA)浸泡处理果实，取出后自然风干表面水分，包装于聚乙烯气调保鲜袋(30μm厚)中。

实验组4：使用30ppm肝素(HP)及30ppm硫酸软骨素(CS)溶液浸泡处理果实，取出后自然风干表面水分，包装于聚乙烯气调保鲜袋(30μm厚)中。

实验组5：使用30ppm肝素(HP)及30ppm透明质酸(HA)溶液浸泡处理果实，取出后自然风干表面水分，包装于聚乙烯气调保鲜袋(30μm厚)中。

实验组6：使用30ppm硫酸软骨素(CS)溶液及30ppm透明质酸(HA)溶液浸泡处理果实，取出后自然风干表面水分，包装于聚乙烯气调保鲜袋(30μm厚)中。

实验组7：使用20ppm肝素、20ppm硫酸软骨素溶液及20ppm透明质酸溶液浸泡处理果实，取出后自然风干表面水分，包装于聚乙烯气调保鲜袋(30μm厚)中。

以上8组果实分别浸泡10min，室温条件下晾干后常温(22℃～24℃)贮藏果实。香橼果实分别在0、10、20、30及36天(对照基本完全黄化)观测果实后熟衰老变化，分别记录褪绿黄化情况、测定果实色度及叶绿素含量变化情况。

二、实验结果

1、黄化指数

根据每个果实色泽变化的果皮表面大小设定黄化等级标准：

0，青绿色；

1，0-1/4黄化面积；

2，1/4-1/2黄化面积；

3，1/2-3/4黄化面积；

4，>3/4黄化面积。

黄化指数计算公式如下：

黄化指数＝∑(黄化等级×每个黄化等级的果实占总果实的比例)。

图1为香橼鲜果采样0天和对照贮藏36天后的香橼实物图，鲜果香橼青绿色，除果实因避光轻微黄色斑点，果实表面均匀光泽呈青绿色；常温贮藏36天后，对照组果实几乎完全成熟黄化。图2为各处理组的果实贮藏36天后的香橼实物图，图3为各处理组的果实贮藏36天后的黄化率(Yellowing index)情况。

从图2～图3可知，与对照组CK(几乎褪绿，黄化率达81％)相比，肝素处理(HP，实验组1)、硫酸软骨素(CS、实验组2)和透明质酸(HA、实验组3)均可一定程度延缓褪绿进程(黄化率分别为71.6％、67.5％与71.4％)，其中硫酸软骨素(实验组2)表现出更好的效果。保鲜剂两两组合处理(实验组5～6)香橼果实，延缓香橼后熟褪绿的效果与单独保鲜剂处理的效果相当(黄化率分别为68.9％与65.6％)，而肝素与硫酸软骨素复合处理(实验组4)与单独保鲜剂处理、与实验组5～6相比，效果明显更好(黄化率为60.4％)。肝素、硫酸软骨素和透明质酸三者复合处理(HP+CS+HA实验组7)的香橼果实在贮藏36天后，仍能较好地保持表皮绿色，黄化指数的上升缓慢(54.5％)，显示出明显的抑制香橼褪绿黄化的保鲜效果。

2、果实色度变化测定

随机取贮藏36天后各处理组的香橼果实，测定果实色度变化。每组测定6～8个果实。使用色度计在每个果实的果身均匀测定三个点，测定选择CIE模式，记录L*、a*和b*值，再计算色度角表示(°)，色度角可反应色泽变化，90°为完全变化的临界值。结果如图4所示。

图4结果显示，香橼青绿时期色度角为121°，贮藏36天基本黄化，色角度为93.8°。尽管单独保鲜剂可以一定程度延缓色度角降低，但明显不如两种组合的效果，三种组合则可显著阻抑色度角的快速下降，采后36天仍可以保持在108°(实验组7)。

3、叶绿素含量测定

随机取贮藏36天后各处理组的香橼果实表皮，测定叶绿素含量变化。每组测定6～8个果实。

将各处理组的果皮收集，液氮速冻后存放于-80℃。待收集完所有果皮后，进行粉碎。各组称取0.5g果皮粉末，10mL 80％丙酮提取24h，随后过滤收集滤液。使用UV-2600紫外分光光度计在663nm、645nm下分别测定吸光值，计算叶绿酸含量，单位为mg kg

结果如图5所示。香橼叶绿素含量随着贮藏的黄化逐渐降低。新鲜香橼叶绿素高达64mg kg

本实施例的结果表明：肝素与硫酸软骨素作为复合保鲜剂，尤其是肝素与硫酸软骨素与透明质酸作为复合保鲜剂，可以起到协同增效的作用，明显延缓香橼果实在常温贮藏过程中的后熟衰老变化，具体体现在：减缓采后香橼的褪绿黄化、抑制色度角及叶绿素含量的快速降低。本发明的复合保鲜剂对研究采收后香橼抗氧化角度褪绿衰老及果实软化调节的机理、保鲜技术开发均具有重要意义。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。