一种治疗阳虚型抑郁症的药物及制备方法

技术领域

发明属于中药制药领域，具体涉及一种以中药为原料制备的治疗阳虚型抑郁症的药物以及该药物的制备方法。

背景技术

抑郁症是一种常见的神经精神疾病，正在成为仅次于癌症的“人类第二大杀手”。抑郁症疾病的影响因素十分复杂，包含社会环境压力、遗传因素、神经内分泌因素等各个方面，尽管人们在抑郁症的研究中做出了长期的努力，但是抑郁症和压力相关疾病的病理生理学以及发病的具体机制仍然不清楚。据调查统计，全球抑郁症患病人数达3.5亿，抑郁症患者不仅经历着巨大的个人痛苦，而且会造成严重的社会和经济负担，然而，由于缺乏有效的治疗方法和心理健康资源，抑郁症尚未得到广泛的诊断和治疗。

目前临床应用的主流抗抑郁药物，作用机制基本都基于单胺假说。例如临床最广泛使用的抗抑郁药物氟西汀(Fluoxetine)，为选择性5-HT再摄取抑制剂(SSRI)，可选择性地抑制5-HT转运体，阻断突触前膜对5-HT的再摄取，延长和增加5-HT的作用，从而产生抗抑郁作用。但研究表明，氟西汀这类药物的抗抑郁作用有一定的延迟性，往往需要几个星期的时间才能实现单胺水平的持续性增加，因此，临床上使用需进行长期的治疗，在此过程中会出现一定的药物不良反应(例如大便干结、血压升高、食欲不振、体重降低等)。且抑郁症的发病机制远远不囿于单胺学说这一种，神经营养因子假说、炎症反应假说等等抑郁症发病机制的研究成果层出不穷。基于各类发病机制研发新型抗抑郁药物正在成为研究热点，但要研发出满足抑郁症复杂多样发病机制的抗抑郁药物，任务依然艰巨。

中医药是中华民族优秀传统文化的璀璨明珠，独具特色和优势。由于抑郁症的发生涉及到机体多个系统的参与，不只限于单一的途径，只使用究单胺类药物有一定的局限性，在长期治疗过程中也会产生一定的副作用。而传统中药具有多靶点作用、多系统调节和毒副作用小的独特优势，可针对抑郁症的多系统病因进行治疗，因此传统中药的应用可能是抑郁症治疗的一个新策略。中医治病，讲究疾病的辩证分型，目前中医对抑郁症病因病机的认识，多从肝气郁结、气滞痰郁、忧郁伤神、心脾两虚、阴虚火旺等角度进行探讨和用药，而云南火神派认为阳虚是抑郁症的主要病机之一，同时结合临床调查证实抑郁症患者大多数属于阳虚证候。因此，本发明药物着重从阳虚辩证入手进行治疗，具有多途径起效，多层次调节、多靶点作用的优点。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种治疗阳虚型抑郁症的药物及其制备方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：

一种治疗阳虚型抑郁症的药物：由以下重量份数的药物制成：附子15-100g、干姜10-40g、炙甘草6-30g、炒柴胡10-50g、枳实6-30g，白芍6-30g、川穹6-20g、苍术10-30g、炒香附10-30g,炒淡豆豉10-30g、炒神曲10-20g、炒栀子10-30g。

优选地，所述的附子30-60g、干姜15-30g、炙甘草10-20g、炒柴胡30-40g、枳实10-20g，白芍10-20g、川穹10-20g、苍术10-20g、炒香附10-20g、炒淡豆豉10-20g、炒神曲10-20g、炒栀子10-20g。

本发明还提供该药物的制备方法，包括以下步骤：

1)将上述药物在十倍量的纯水中浸泡60min，然后武火煎沸后改用文火煎煮2h，所得汤剂用四层纱布过滤收集；，

2)接着进行下一次煎煮，方法同步骤1，煎煮至最后一次汤剂透明即可，收集所有汤剂混合均匀后浓缩为混悬液，4℃冰箱中储存。

进一步地，所述药物的剂型包括片剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、糖浆剂、酊剂、口服液或汤剂。

本发明的工作原理如下：

具体到郁证而言，除了重视先天心肾的关系，更注重肝的温升，肝体阴而用阳，更重视肝的“用”。肝属乙木，肝的升发源于体内阳气的温煦，肝的阳气源于内寄的相火，相火源于肾中命门火。命火充足一则可上交心阳以主神明，二则温煦肝木而主气机条达，从而使脏腑相协、生克有度而共凑维护机体健康、祛病强身的目的。基于此，发明人认为阳虚是抑郁症的主要病机之一。这在中医典籍中也是有据可循的，《灵枢·本神》言“肝气虚则恐，实则怒。…心气虚则悲，实则笑不休”，

《素问·生气通天论》曰：“阳气者，精则养神，柔则养筋”，《素问集注》曰：“诸阳之神气上会于脑，诸髓之精上聚于脑，故头为精髓神明之府”，阳气实则脑髓充，脑髓充则神全。主精神意识的功能正常，阳气充足则精神饱满，意识清楚，思维敏捷，情志正常，当阳气不足以充养脑髓，则会出现精神思维及情志的阴性表现，如丧失愉悦感、心境低落、行动及思考能力下降等症状，这也合理解释了为什么抑郁症会出现愉悦感丧失的症状。

扶正解郁方是针对抑郁症的病机，在总结前贤理论和经验的基础上拟得，该方以补命门火之的第一要药附子为君药，以温扶命门火启动一身之阳以治本，辅以干姜以增强附子温通的力量，以消除阳虚之主证；柴胡、枳实、川芎行气解郁，白芍柔肝缓急，苍术、炒神曲健脾除湿、增强柴、枳的行气之力，炒淡豆豉、炒栀子清心除烦，炙甘草调合其他成分，以上述诸药共治肝郁之症。如此组合既能解决抑郁症患者常见的阴性表现，消解其心头阴霾，又使生机通畅、郁滞得解，共同达到“舒其血气，令其调达，而致和平”的目的。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1.首先本发明扶正解郁方在临床治疗方面初步显示出了具有抗抑郁的安全性和有效性，而且能够缓解西药氟西汀带来的便秘等副作用。其次通过动物实验再次明确了扶正解郁方药物具有改善阳虚型抑郁症小鼠抑郁样行为的作用，同时具有氟西汀所不具备的改善阳虚体质的作用，如逆转睾丸的病理损伤以及改善生精功能。

2.临床实验和动物实验证明扶正解郁方能够治疗阳虚型抑郁症，同时在阳虚体质方面的改善作用优于氟西汀。蛋白质印迹实验结果证明扶正解郁方通过促进大脑前额叶皮质CREB1/BDNF相关蛋白的表达而发挥抗抑郁的做用；代谢组结果显示阳虚型抑郁模型组小鼠血清中大脑神经元突触可塑性和神经细胞存活相关代谢物(如硬脂酰胺、核黄素、花生四烯酸、黄素腺嘌呤二核苷酸等)水平下降，扶正解郁方治疗后上升。因此，本发明药物能够治疗阳虚型抑郁症，在抑郁症治疗疗效上不输于西药氟西汀，并能改善患者阳虚体质，且无副作用。

附图说明

图1为门诊患者和住院患者经过药物治疗后HAMD分值比较，其中图1a为住院患者，试验组为扶正解郁方+氟西汀治疗组，对照组为氟西汀治疗组，图1b为门诊患者，试验组：扶正解郁方治疗组，对照组：氟西汀治疗组。*:p<0.05，P<0.05被认为差异有统计学意义。

图2为造模后小鼠状态比较图，其中图2a为小鼠毛色状态，图2b为粪便状态，

图3为造模后行为学实验和体重变化图，其中图3a为旷场实验中央穿梭时间对比图，图3b为强迫游泳实验不动时间对比图，图3c为糖水偏好指数对比图，图3d为体重变化对比图。**:p<0.01，***:p<0.005，****:P<0.001，ns:p>0.05，P<0.05被认为差异有统计学意义。

图4为药物治疗以后小鼠行为学实验，其中图4a为旷场实验中央穿梭时间比较图，图4b为强迫游泳实验不动时间对比图，图4c为糖水偏好指数对比图。*:p<0.05，**:p<0.01，ns:p>0.05，P<0.05被认为差异有统计学意义。

图5为灌胃给药治疗以后小鼠旷场实验中央穿梭轨迹图；

图6为药物治疗后各组实验小鼠体重变化比较图，其中图6a为各组体重量变化对比图，图6b为随时间变化各组体重变化曲线图。*:p<0.05，**:p<0.01，***:p<0.005，P<0.05被认为差异有统计学意义。

图7为药物治疗以后小鼠下丘脑和睾丸组织病理染色图，其中图7a为下丘脑HE染色比较图，图7b为睾丸HE染色比较图；

图8药物治疗以后小鼠血清ACTH和CORT水平，其中图8a为血清ACTH检测结果比较图，图8b为CORT检测结果比较图。*:p<0.05，**:p<0.01，****:P<0.001，ns:p>0.05，P<0.05被认为差异有统计学意义。

图9前额叶皮质CREB1/BDNF信号通路相关蛋白的检测，其中图9a为前额叶皮质该通路相关蛋白PKA、pCREB、BDNF、pTrkB、pERK1/2蛋白质印迹结果图；图9b、图9c、图9d、图9e、图9f分别为CREB1/BDNF信号通路相关蛋白表达水平差异显著性统计分析图，*:p<0.05，**:p<0.01，***:p<0.005，****:P<0.001，P<0.05被认为差异有统计学意义。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明的技术方案做进一步详细说明，但本发明并不局限于以下技术方案。

实施例1一种治疗阳虚型抑郁症的药物，由以下重量份数的药物制成：附子100g、干姜40g、炙甘草30g、炒柴胡50g、枳实30g，白芍30g、川穹20g、苍术30g、炒香附30g、炒淡豆豉30g、炒神曲20g、炒栀子30g。

实施例2一种治疗阳虚型抑郁症的药物，由以下重量份数的药物制成：附子15g、干姜10g、炙甘草6g、炒柴胡10g、枳实6g，白芍6g、川穹6g、苍术10g、炒香附10g、炒淡豆豉10g、炒神曲10g、炒栀子10g。

实施例3一种治疗阳虚型抑郁症的药物，所述的附子30g、干姜15g、炙甘草10g、炒柴胡30g、枳实10g，白芍10g、川穹10g、苍术10g、炒香附10g、炒淡豆豉10g、炒神曲10g、炒栀子10g。

实施例4一种治疗阳虚型抑郁症的药物，所述的附子50g、干姜25g、炙甘草20g、炒柴胡30g、枳实10g，白芍10g、川穹10g、苍术10g、炒香附10g、炒淡豆豉10g、炒神曲10g、炒栀子10g。

实施例5一种治疗阳虚型抑郁症的药物，所述的附子60g、干姜30g、炙甘草20g、炒柴胡40g、枳实20g，白芍20g、川穹20g、苍术20g、炒香附20g、炒淡豆豉20g、炒神曲20g、炒栀子20g。

实施例6一种治疗阳虚型抑郁症的药物，所述的附子30g、干姜15g、炙甘草20g、炒柴胡15g、枳实10g、白芍10g、川穹10g、苍术15g、炒香附10g、炒淡豆豉10g、炒神曲20g、炒栀子20g。

实施例7制备方法

一种治疗阳虚型抑郁症的药物的制备方法，包括以下步骤：

1)将上述实施例1-6中任一实施例中的原料在量取十倍量的纯水中浸泡60min后，武火煎沸后改用文火煎煮两小时，所得汤剂用四层纱布过滤收集，

2)接着进行下一次煎煮，方法同步骤1，煎煮至最后一次汤剂透明即可，收集所有汤剂混合均匀后浓缩为混悬液，4℃冰箱中储存。

优选地，所述药物的剂型包括片剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、糖浆剂、酊剂、口服液或汤剂。

实施例8扶正解郁方同氟西汀疗效的对比

8.1抑郁病人体质调查

对昆明医科大学精神卫生中心门诊就诊的99名抑郁症患者进行了抑郁和体质的调查。抑郁程度根据《汉密尔顿抑郁量表(Hamilton Depression Scale,HAMD》的分值进行划分，按相应分值划分为严重抑郁、中度抑郁、轻度抑郁、正常(表1)。体质调查则通过《中医体质调查表》问卷和两名资深中医师分别根据四诊进行判断。

入选标准：通过中医辨证为阳虚体质的抑郁症患者；年龄在18～55岁之间；患者长期居住地为昆明地区；生命体征平稳，神志清楚具有一定表达能力且4周内未服用抗抑郁药物者；虽有其他内外科疾病但与抑郁无直接联系，且所用的药物均非精神药物者。排除标准：妊娠期、哺乳期妇女，过敏体质者；吸烟者；长期饮酒者；合并心衰、呼衰或其他严重疾病处于急性期者；合并心、肝、肾及造血系统等严重疾病者；合并除抑郁、焦虑外其他严重精神症状或既往有精神障碍以及精神障碍阳性家族史者；符合纳入标准但不愿意参与配合研究者。

调查结果显示，在99名门诊病人中，阳虚体质者有78名，占据78.8％。而在阳虚体质与抑郁程度的相关性统计显示，严重抑郁病人中阳虚者达到92.59％，中度抑郁病人中，阳虚者占据81.40％，轻度抑郁患者中阳虚者为61.11％，正常人中阳虚者的比例为63.63％，由此可见，阳虚体质和抑郁症有较强的相关性，同时结合阳虚和抑郁症的相关论著，从而认为阳虚是抑郁症的主要病机之一(表1)。

表1抑郁严重程度和阳虚之间的关系

抑郁：通过《汉密尔顿抑郁量表(HAMD)》评分。(<8：正常，8-20：轻度抑郁，20-35：中度抑郁，35>：重度抑郁)。

体质：通过《中医体质调查表》问卷和两名资深中医师分别进行判断。

8.2临床初步验证药物疗效

对于住院病人，采用区组随机化方法，将12例符合研究条件的住院病人(阳虚型严重抑郁：HAMD＞24分)按1:1随机分成治疗组(扶正解郁方+氟西汀)和对照组(氟西汀)，观察时长为4周，接着将两组病人使用汉密尔顿抑郁量表进行评分和药物副反应情况调查。药物副反应根据《药物副反应量表》进行判定。住院病人采用扶正解郁方+氟西汀联合使用原因是：首先，该中药配方药物还未上临床，药物的安全性还需要验证；其次，病人已经进行氟西汀治疗，若突然变更治疗方案，病人不易接受。

在验证药物安全性后，将该方用于门诊病人，采用区组随机化方法，对16例符合研究条件的患者(阳虚型轻度抑郁：17≥HAMD＞7分)按1:1随机分成治疗组(扶正解郁方)和对照组(氟西汀)，观察时长为4周，接着将两组病人使用汉密尔顿抑郁量表进行评分和药物副反应情况调查。

8.3临床初步验证扶正解郁方对阳虚型抑郁症有疗效，同时能够缓解氟西汀的副作用

在住院患者中，治疗组(扶正解郁方+氟西汀)和对照组(氟西汀)HAMD分值均降低，同时两药抗抑郁疗效没有明显差异(图1a)，在药物副反应调查中，治疗组(扶正解郁方+氟西汀)仅有2例便秘，对照组(氟西汀)6例全部有便秘(P<0.01)，说明扶正解郁方能够缓解氟西汀带来的便秘副作用。在门诊患者中，治疗组(扶正解郁方)和对照组(氟西汀)HAMD分值均降低，两者疗效没有明显差别，说明扶正解郁方有良好的抗抑郁疗效(图1b)。结合住院患者和门诊患者实验结果，发明人认为扶正解郁方是不输于常规抗抑郁西药氟西汀治疗抑郁症的一种有效方法。

8.4实验小鼠药效对比

8.4.1阳虚型抑郁小鼠模型建立

选取健康体重(20±2g)SPF级C57BL/6小鼠，雌雄各半，提供单位为昆明医科大学实验动物学部，将实验小鼠置于正常光照、环境清洁、通风良好的室温环境中，自由饮食适应7天，每天触摸小鼠以适应实验人员操作。

实验前采用旷场实验、强迫游泳实验和糖水偏好实验进行行为学评分筛选，同时称量体重并记录。接着将小鼠随机分为正常对照组(Con)和阳虚型抑郁症模型组(KYDD)。正常对照组每笼4-5只进行饲养，每天后肢肌肉注射生理盐水；阳虚型抑郁模型组小鼠采取孤养模式以隔绝社交，通过连续注射氢化可的松同时施加慢性不可预知温和应激(CUMS)建立阳虚型抑郁症动物模型。具体方法为每天不同时间段随机给与1-2种刺激，同时按30mg/kg的浓度后肢肌肉注射氢化可的松，连续21天，每7天称量体重并记录。

21天造模结束后观察小鼠状况并进行糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验以判定小鼠抑郁状况。

结果显示，连续21天注射氢化可的松和施加慢性不可预知温和刺激后，阳虚型抑郁模型组小鼠出现毛色暗淡、行动减少、活动降低、脱毛、便溏，常常蜷缩在角落的典型阳虚体征(图2)；行为学实验中，旷场实验中央穿梭时间减少、强迫游泳不动时间增加、糖水偏好指数降低、体重下降(图3)，表明阳虚型抑郁症小鼠模型构建成功。

8.4.2扶正解郁方改善阳虚型抑郁症小鼠模型抑郁样行为

21天造模成功后，将阳虚型抑郁症小鼠随机分为阳虚抑郁组(KYDD)、扶正解郁方治疗组(Fuzheng)和氟西汀治疗组(Fluo)，同时设置正常对照组(Con)，各个实验组小鼠连续灌胃给药28天，每7天称量体重并记录。具体方法为：Con组和KYDD组每天给予0.4ml生理盐水；Fluo组每天按10mg/kg体重的量给药氟西汀；Fuzheng组每天按0.02g/g体重的量进行扶正解郁方药液灌胃(浓缩药液浓度0.5g/ml)，给药量换算参考徐云主编的人民卫生出版社《药理实验方法学》。

灌胃完成后观察小鼠状态并计算体重变化(灌胃后体重-灌胃前体重)，同时通过糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验评判治疗效果。结果显示，相较于KYDD组，Fuzheng和Fluo两组小鼠行动减少、活动降低、蜷缩在角落等症状均得到改善；行为学实验中，两组旷场实验中央穿梭时间和穿梭次数增加，糖水偏好指数上升，强迫游泳不动时间减少(图4和图5)，提示小鼠抑郁症状得到一定的改善；在体重变化指标上，阳虚型抑郁症小鼠经过扶正解郁方治疗以后，体重明显上升，而氟西汀治疗组小鼠的体重增加明显低于正常组和扶正解郁方治疗组(图6)。说明扶正解郁方能够改善阳虚抑郁症小鼠抑郁样行为，与西药氟西汀相同，同时对小鼠体重的改善优于西药氟西汀。

8.4.3扶正解郁方改善阳虚型抑郁症小鼠阳虚体征

研究表明，下丘脑-垂体-相关靶腺轴的病理变化是阳虚的典型病理变化，接下来分别检测了各组小鼠下丘脑和雄鼠睾丸组织病理变化以及血清ACTH、CORT的水平来评价下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)和下丘脑-垂体-性腺轴(HPG轴)的病理和功能改变。结果显示，KYDD组小鼠下丘脑神经元细胞出现萎缩，细胞数量减少，经过扶正解郁方和氟西汀治疗以后细胞数量有所增加(图7a)；KYDD组小鼠睾丸大部分曲细精管中变形的梭形精子细胞数量和管腔中精子变形过程中脱落的残质都明显减少，大部分管腔出现空腔化，精子发生过程趋于缓滞，经过扶正解郁方治疗后，这病理变化得到了逆转，而经过氟西汀治疗以后则没有明显治疗效果(图7b)。血清ELISA结果显示，KYDD组小鼠血清ACTH、CORT水平明显降低，经过扶正解郁方和氟西汀治疗后ACTH水平升高，而Fluo组CORT的水平没有明显上升(图8)。说明扶正解郁方在阳虚体征治疗方面的效果优于氟西汀。

实施例9.扶正解郁方促进前额叶皮质CREB1/BDNF信号通路相关蛋白的表达

CREB1/BDNF相关信号是抑郁症发生涉及的重要通路，前额叶皮质为大脑调控情绪功能的关键区域，接下来通过分子生物学实验验证小鼠大脑前额叶皮质CREB1/BDNF通路相关蛋白的表达水平,以探究扶正解郁方的抗抑郁机制。蛋白质印迹实验表明，KYDD组小鼠前额叶皮质PKA、pCREB、BDNF、pTrkB、pERK1/2蛋白表达均降低，经过扶正解郁方治疗后，PKA、pCREB、BDNF、pTrkB、pERK1/2蛋白表达出现上升，与Fluo组结果一致(图9)。说明本发明药物(扶正解郁方)通过促进大脑前额叶皮质CREB1/BDNF信号通路相关蛋白的表达而达到抗抑郁的作用。

实施例10扶正解郁方调控阳虚型抑郁症小鼠体内代谢物水平

10.1方法

接下来通过非靶向代谢组学技术阐明阳虚型抑郁症的发生发展以及扶正解郁方的治疗作用，同时探究阳虚型抑郁症小鼠体内代谢物水平以及扶正解郁方治疗后的改变。检测样本分为正常对照组(C)、阳虚型抑郁模型组(Y)、扶正解郁方治疗组(F)、氟西汀治疗组(FL)，检测血清样本量为100ul。为了把样本在正负离子模式下的代谢物都检测出来，保持样本中的代谢物检测安全，设置阳离子检测模式和阴离子检测模式(两种检测结果不冲突)，对检测结果进行分析，检测出相关代谢物的改变见表2。

表2差异代谢物筛选结果

pos：阳离子检测模式；neg：阴离子检测模式。

其中相比正常组，阳虚型抑郁模型组小鼠血清硬脂酰胺(Stearamide)、核黄素(Riboflavin)、花生四烯酸(Arachidic acid)、黄素腺嘌呤二核苷酸(Flavin AdenineDinucleotide)等代谢物水平下降，经过扶正解郁方治疗后水平上升(表3)，同时，在扶正解郁方和氟西汀治疗以后相关代谢物改变对比中，扶正解郁方治疗组血清硬脂酰胺(Stearamide)、黄素腺嘌呤二核苷酸(Flavin Adenine Dinucleotide)、血清素(Serotonin)的水平相较于氟西汀治疗组出现升高(表4)，这些物质对于大脑神经元突触可塑性和神经细胞的存活都有重要的作用。说明本发明药物在代谢水平上有良好的干预作用，而且某些代谢物的水平改变高于氟西汀。

表3本发明药物治疗后相关差异代谢物的水平变化表

表4本发明药物治疗后与氟西汀治疗后相关差异代谢物的水平变化对比