ROCK激酶抑制剂

发明领域

本发明涉及作为Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂的化合物。特别地，本发明涉及选择性抑制ROCK活性的化合物，包含该化合物的药物组合物及其使用方法。

背景技术

ROCK是一种重要的RhoA效应子，可通过多种底物的磷酸化来调节多种细胞信号通路，包括肌球蛋白轻链(MLC)，LIM激酶，MYPT1和CPI-17。ROCK底物涉及平滑肌收缩力，血管通透性，肌动蛋白丝组织，细胞粘附，细胞迁移，生长控制和胞质分裂。ROCK直接参与平滑肌收缩是由于MLC的磷酸化增加(这会增加磷酸化后的收缩性)和MLC磷酸酶(受磷酸化所抑制)的增加，从而进一步增加MLC磷酸化ROCK活化，从而导致平滑肌增加收缩力。

文献报道表明，ROCK活性与许多与血管紧张性功能障碍相关的心血管疾病之间存在联系，包括高血压，动脉粥样硬化，缺血性中风，冠状动脉痉挛，脑血管痉挛，心绞痛，勃起功能障碍和肾脏疾病，还与其他平滑肌反应过度有关如青光眼和哮喘。

脑海绵状畸形(CCM)综合征是一种与内皮连接缺陷有关的疾病，主要存在于大脑中，使患者有终生患癫痫，出血性中风和其他神经功能缺损的风险。脑海绵状畸形(CCM)是大多数在中枢神经系统内发现的血管畸形，例如脑干和脊髓，可以以散发性或常染色体显性遗传形式发生，后者映射到三个基因座KRIT-1/CCM1，MGC4607/OSM/CCM2和PDCD10/CCM3(例如，参见Glading等人，(2007)J.Cell Biol。179：247-254)。

CCM1，CCM2和CCM3蛋白每个都与许多蛋白相互作用，包括Rap1，RhoA-GTPase。Rap1通过刺激肌动蛋白纤维的形成在调节肌动蛋白的细胞骨架中发挥作用。CCM1，CCM2或CCM3中的失活突变足以通过抑制内皮细胞血管样管的形成和细胞外基质的入侵而导致细胞之间的连接减弱和血管渗漏的增加，从而诱发CCM血管病变。CCM1，-2或-3蛋白的表达缺失会导致Rap1的显著的高表达和激活增加。Rap1激活的增加与Rho激酶依赖性(ROCK)磷酸化的增加以及ROCK从CCM病理学拯救的内皮细胞的短发夹RNA敲低相关(例如，参见Borikova etal.,(2010)J.Biol.化学285：11760-11764)。

不幸的是，CCM患者的治疗选择有限，并且在美国还没有批准的用于治疗CCM的药物。盐酸法舒地尔是一种异喹啉磺酰胺衍生物，是一种有效的ROCK抑制剂，已在美国境外批准用于治疗蛛网膜下腔出血和脑缺血症状后的脑血管痉挛。法舒地尔已被医生用于药品核准标识外治疗CCM，大概是通过抑制ROCK激酶的活性；然而，法舒地尔对其他AGC家族激酶的选择性较差，但也表现出许多严重的毒副作用和缺点，包括强制短程治疗，口服生物利用度低，细胞毒性和血压波动(例如，参见Xin等.,(2015)BioSci Rep.35：1-13)。

治疗CCM的患者的医疗需求严重未得到满足，并且更广泛地说，治疗涉及平滑肌收缩力升高的许多其他疾病，例如心血管疾病，主要证据表明选择性ROCK激酶抑制剂可能是药理治疗干预手段。与其相结合的是，需要开发新的ROCK激酶抑制剂，其具有改善的治疗时间，改善的口服生物利用度，降低的细胞毒性和降低的脱靶活性，尤其是相对于AGC家族激酶成员而言。

发明内容

本发明人认识到需要开发新的ROCK激酶抑制剂，其显示出改善的细胞潜能，激酶组选择性，功效，稳定性和安全性。本发明的化合物和组合物通过提供有效的，选择性的和口服活性的ROCK抑制剂，有利地克服了这些缺点中的一个或多个。

在本发明的一方面，提供了抑制ROCK激酶活性的化合物。在某些实施例中，化合物由式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)表示：

或其药学上可接受的盐：

其中：

X是一种部分饱和的含氮杂杂芳基；

Y为N或CH；

每个R

Q是键，O或N；

每个R

每个R

每个R

m为0、1、2或3。

在本发明的另一方面，提供了药物组合物，其包含治疗有效量的式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)的化合物以及药学上可接受的赋形剂，盐，溶剂化物，载体和/或稀释剂。

在另一方面，本发明涉及治疗与血管张力增加有关的心血管疾病的方法，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)化合物或包含该化合物的药物组合物。在一个实施例中，心血管疾病是高血压，动脉粥样硬化，缺血性中风，冠状动脉痉挛，脑血管痉挛，心绞痛和勃起功能障碍。

另一方面，本发明涉及一种治疗涉及非血管平滑肌收缩性升高的疾病的方法，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)化合物或包含该化合物的药物组合物。在一实施例中，该疾病涉及非血管平滑肌收缩性升高的哮喘和青光眼。

在本发明的另一方面，提供了抑制细胞中ROCK活性的方法，该方法包括使细胞与式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)化合物接触。还提供了在患者中治疗CCM的方法，该方法包括将治疗有效量的式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)化合物或包含该化合物的药物组合物施用于需要的患者。

具体实施方式

本发明涉及ROCK激酶抑制剂。特别地，本发明涉及选择性抑制ROCK激酶活性的化合物，包含治疗有效量的化合物的药物组合物及其使用方法，例如治疗脑海绵状畸形综合症(CCM)和心血管疾病的方法。

除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常所理解的相同含义。本文所引用的所有专利，专利申请和出版物均在与本公开内容一致的范围内通过引用并入本文。除非另有明确定义，否则术语和范围为其一般定义。

为了简单起见，化学基团被定义并且在全文中主要被称为单价化学基团(例如，烷基，芳基等)。然而，在本领域技术人员清楚的适当结构情况下，这些术语也可以用于传达相应的多价基团。所有原子都应理解为具有正常的键价数(即，对于碳为4，对于N为3，对于O为2，对于S为2、4或6，取决于S的氧化态)。

如本文所用，“ROCK激酶”是指Rho相关蛋白激酶(“ROCK”)家族的成员，包括ROCK1和ROCK2激酶。

如本文所用，“ROCK抑制剂”是指由如本文所述的式(I)或(II)表示的本发明的化合物。这些化合物能够负调节或抑制ROCK激酶的全部或部分酶活性。

本文所用的术语“烷基”是指具有1至12个碳原子的直链和支链脂族基团。这样，“烷基”涵盖C

术语“氰基”是指-CN。

本文所用的术语“环烷基”是含3至12个碳的饱和和部分不饱和的环状烃基。这样，“环烷基”包括C

如本文所用，术语“杂芳基”是指具有5至14个环原子，优选5、6、10、13或14个环原子的基团；具有6、10或14个π电子以环状阵列共享；除了碳原子外，还具有1到3个分别独立为N，O或S的杂原子。“杂芳基”还包括稠合多环(例如，双环)环系统，其中一个或多个稠合环是非芳香族的，前提是至少一个环是芳香族的并且至少一个环包含N，O或S环原子。

杂芳基的实例包括吖啶基，偶氮炔基，苯并咪唑基(benzimidazolyl)，苯并呋喃基(benzofuranyl)，苯并[d]恶唑-2(3H)-酮(benzo[d]oxazol-2(3H)-one)，2H-苯并[b][1,4]恶嗪-3(4H)-酮(2H-benzo[b][l,4]oxazin-3(4H)-one)，苯并硫呋喃基(benzothiofuranyl)，苯并噻吩基(benzothiophenyl)，苯并恶唑基(benzoxazolyl)，苯并噻唑基(benzthiazolyl)，苯并三唑基(benztriazolyl)，苯并四唑基(benztetrazolyl)，苯异唑基(benzisoxazolyl)，苯并异噻唑基(benzisothiazolyl)，苯并咪唑啉基(benzimidazolinyl)，咔唑基(carbazolyl)，4aH-咔唑基(4aH-carbazolyl)，咔啉基(carbolinyl)，苯并二氢吡喃基(Chromanyl)，色烯基(chromenyl)，噌啉基(cinnolinyl)，呋喃基(furanyl)，呋喃唑基(furazanyl)，咪唑啉基(imidazolinyl)，咪唑基(imidazolyl)，1H-吲唑基(1H-indazolyl)，吲哚基(indolenyl)，吲哚啉基(indolinyl)，吲哚嗪基(indolizinyl)，吲哚基(indolyl)，3H-吲唑基，异苯并呋喃基(isobenzofuranyl)，异苯并二氢吡喃基(isochromanyl)，异吲哚唑基(isoindazolyl)，异吲哚啉基(isoindolinyl)，异吲哚基(isoindolyl)，异喹啉基(isoquinolinyl)，异噻唑(isothiazolyl)，异恶唑基(isoxazolyl)，萘啶基(naphthyridinyl)，八氢异喹啉基(octahydroisoquinolinyl)，恶二唑基(oxadiazolyl)，1,2,3-恶二唑基，1,2,4-恶二唑基，1,2,5-恶二唑基，1,3,4-恶二唑基，恶唑烷基(oxazolidinyl)，恶唑基(oxazolyl)，恶唑烷基(oxazolidinyl)，嘧啶基(pyrimidinyl)，菲啶基(phenanthridinyl)，菲咯啉基(phenanthrolinyl)，吩嗪基(phenazinyl)，吩噻嗪基(phenothiazinyl)，吩恶噻基(phenoxathiinyl)，吩恶嗪基(phenoxazinyl)，邻苯二甲酰基(phthalazinyl)，胡椒基(piperonyl)，蝶啶基(pteridinyl)，嘌呤基，吡喃基，吡嗪基，吡唑烷基，吡唑啉基(pyrazolidinyl)，吡唑基(pyrazolinyl)，吡唑基(pyrazolyl)，哒嗪基(pyridazinyl)，吡啶恶唑(pyridooxazole)，吡啶咪唑(pyridoimidazole)，吡啶噻唑(pyridothiazole)，吡啶基(pyridinyl)，吡啶基(pyridyl)，嘧啶基(pyrimidinyl)，吡咯啉基(pyrrolinyl)，2H-吡咯基，吡咯基，喹唑啉基(quinazolinyl)，喹啉基(quinolinyl)，4H-喹嗪基，喹喔啉基(quinoxalinyl)，奎宁环基(quinuclidinyl)，四氢异喹啉基(tetrahydroisoquinolinyl)，四氢喹啉基(tetrahydroquinolinyl)，四唑基(tetrazolyl)，6H-1,2,5-噻二唑基(6H-1,2,5-thiadiazinyl)，1,2,3-噻二唑基(1,2,3-thiadiazolyl)，1,2,4-噻二唑基，1,2,5-噻二唑基，1,3,4-噻二唑基，噻吩基(thianthrenyl)，噻唑基(thiazolyl)，噻吩基(thienyl)，噻吩并噻唑基(thienothiazolyl)，噻吩并恶唑基(thienooxazolyl)，噻吩并咪唑基(thienoimidazolyl)，噻吩基(thiophenyl)，三嗪基(triazinyl)，1,2,3-三唑基，1,2,4-三唑基，1,2,5-三唑基，1,3,4-三唑基和呫吨基(xanthenyl)。

术语“含氮杂杂芳基”是指在具有5至14个环原子，优选5、6、10、13或14的环原子的单环，双环，多环或稠合基团中包含氮原子代替碳原子的杂芳基；在环状阵列中共有6、10或14个π电子。“含氮杂杂芳基”还包括稠合多环(例如，双环)环系统，其中一个或多个稠合环为非芳香族的，前提是至少一个环为芳香族且至少一个环包含N。

示例性的含氮杂的杂芳基基团包括但不限于吲哚嗪基，吲哚基，异吲哚基，3H-吲哚基，吲哚啉基，吲唑基，1H-吲唑基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，嘌呤基，4H-喹嗪基，喹啉基，异喹啉基，噌啉基，邻苯二甲酰基(phthalazinyl)，喹唑啉基，喹喔啉基(quinoxalinyl)，1,8-萘啶基(naphthyridinyl)，蝶啶基，奎宁环基，咔唑基，吖啶基，吩嗪基，吩噻嗪基，吩恶嗪基，2H-吡咯基，吡咯基，2-吡咯基，3-吡咯基，恶唑基，噻唑基，咪唑基，2-咪唑啉基，吡唑基，2-吡唑啉基，异恶唑基，异噻唑基，1,2,3-恶二唑基，1,2,3-三唑基，1,3,4-噻二唑基，吡啶基，哒嗪基，嘧啶基和1,3,5-三嗪基。

术语“卤代烷基”是指其中一个或多个氢已被卤素取代的烷基链。示例性的卤代烷基是三氟甲基，二氟甲基，氟氯甲基和氟甲基。

本文所用的术语“卤素”是指氯，溴，氟或碘。

术语“羟基”是指-OH。

术语“羟烷基”是指-烷基-OH。

如本文所用，化合物的“有效量”是足以负调节或抑制ROCK激酶的活性的量。

如本文所用，化合物的“治疗有效量”是足以改善或以某种方式减轻症状或停止或逆转进程，例如CCM，或负调节或抑制ROCK激酶的活性。这样的量可以单剂量施用或可以根据有效的方案施用。

如本文所用，“治疗”是指改善或以其它方式有益地改变患者的状况、紊乱或疾病的症状或病理的任何方式。

如本文所用，通过施用特定化合物或药物组合物来改善特定病症的症状是指归因于或与组合物的施用有关的任何减轻，无论是永久的还是暂时的，持久的或短暂的。

在本发明的一个方面，提供了由式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)表示的化合物：

或其药学上可接受的盐：

其中：

X是一种部分饱和的含氮杂杂芳基；

Y为N或CH；

每个R

Q是键，O或N；

每个R

每个R

每个R

m为0、1、2或3。

在本发明的一个方面，X是选自吲哚嗪基，吲哚基，异吲哚基，3H-吲哚基，吲哚啉基，吲唑基，1H-吲唑基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，嘌呤基，4H喹嗪基，喹啉基，异喹啉基，噌啉基，邻苯二甲酰基，喹唑啉基，喹喔啉基，1,8-萘啶基，蝶啶基，奎宁环基，咔唑基，吖啶基，吩嗪基，吩噻嗪基，吩恶嗪基，2H-吡咯基，吡咯基，2-吡咯啉基，3-吡咯啉基，恶唑基，噻唑基，咪唑基，2-咪唑啉基，吡唑基，2-吡唑啉基，异恶唑基，异噻唑基，1,2,3-恶二唑基，1,2,3-三唑基，1,3,4-噻二唑基，吡啶基，哒嗪基，嘧啶基和1,3,5-三嗪基的含氮杂杂芳基。在一个实施例中，X是R

在一实施例中，X为：

其中m，Y和R

在一个实施例中，m为1且R

在一个实施例中，R

在一个实施例中，m为2，并且每个R

在一实施例中，X为：

其中每个R

在一个实施例中，R

在一个实施例中，R

在某些实施例中，式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)的化合物为：

以及上述化合物的药学上可接受的盐。

可以将式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)的化合物配制成药物组合物。

本文公开的化合物包括所有药学上可接受的同位素标记的化合物，其中本文公开的化合物的一个或多个原子被具有相同原子序数和原子质量或质量数不同于在自然界通常发现的原子质量或质量数的原子取代。可以纳入本文公开的化合物中的同位素的实例包括氢，碳，氮，氧，磷，硫，氟，氯和碘的同位素，例如

当用重同位素如氘，

为了更好地静态或纵向地表征活体样品中底物受体的占有率或组织表达，用正电子发射同位素(例如

如本文公开的同位素标记的化合物可以通过本领域技术人员已知的常规技术，或通过使用合适的同位素标记的试剂代替之前运用非标记的试剂，与在相关的实施例和方案中描述的那些类似的过程来制备。

本文公开的一些化合物可以立体异构体的形式存在。本文公开的化合物包括所有立体异构体，既可以作为纯的单独的立体异构体制剂，也可以作为各自富集的制剂，并且此类立体异构体的外消旋混合物以及可以根据本领域技术人员已知的方法分离的单独的非对映异构体和对映异构体。另外，本文公开的化合物包括化合物及其混合物的所有单独的互变异构状态。

在另一方面，本发明提供了药物组合物，其包含根据本发明的ROCK激酶抑制剂和药学上可接受的载体，赋形剂或稀释剂。本发明的化合物可以通过本领域公知的任何方法配制，并且可以制备用于通过任何途径给药，包括但不限于肠胃外，口服，舌下，透皮，局部，皮下，鼻内，气管内或直肠内给药。在某些实施例中，本发明的化合物在医院环境中通过静脉注射。在某些其他实施例中，施用可以优选通过口服途径。

载体的特征将取决于给药途径。如本文所用，术语“药学上可接受的”是指与生物系统如细胞，细胞培养物，组织或生物相容的无毒物质，并且不干扰其活性成分的生物活性的有效性。因此，本发明的组合物除抑制剂外还可以包含稀释剂，填充剂，盐，缓冲剂，稳定剂，增溶剂和本领域众所周知的其他材料。药学上可接受的制剂的制备描述于例如《雷明顿药物科学》(Remington's Pharmaceutical Sciences)，第18版，编辑.A.Gennaro，麦克出版社，宾夕法尼亚州伊斯顿，1990年。

如本文所用，术语药学上可接受的盐是指保留上述化合物所需的生物学活性并且显示出最小的或没有不希望有的毒理作用的盐。此类盐的实例包括但不限于与无机酸(例如，盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，硝酸等)形成的酸加成盐，以及与有机酸例如形成的盐，如乙酸，草酸，酒石酸，琥珀酸，苹果酸，抗坏血酸，苯甲酸，单宁酸，棕榈酸，藻酸，聚谷氨酸，萘磺酸，萘二磺酸和聚半乳糖醛酸。化合物也可以通过本领域技术人员已知的药学上可接受的季盐的形式给药，具体包括式-NR+Z-的季铵盐，其中R是氢，烷基或苄基，Z是反离子，包括氯离子，溴离子，碘离子，-O-烷基，甲苯磺酸根，甲基磺酸盐，磺酸盐，磷酸盐或羧酸盐(例如苯甲酸酯，琥珀酸，乙酸盐，乙醇酸盐，马来酸盐，苹果酸盐，柠檬酸盐，酒石酸盐，抗坏血酸盐，苯甲酸盐，肉桂酸盐，扁桃酸酯，苄基酸酯和乙酸二苯酯)。

活性化合物以足以向患者递送治疗有效量而不会在所治疗的患者中引起严重毒性作用的量包含在药学上可接受的载体或稀释剂中。对于所有上述条件，活性化合物的剂量为每天约0.01至300mg/kg，优选每天0.1至100mg/kg，通常为受试者的每公斤体重每天0.5至约25mg。在合适的载体中，典型的局部剂量范围为0.01-3％wt/wt。药学上可接受的衍生物的有效剂量范围可以基于待递送的母体化合物的重量来计算。如果衍生物本身表现出活性，则可以如上所述使用衍生物的重量或通过本领域技术人员已知的其他方式估算有效剂量。

包含本发明化合物的药物组合物可用于本文所述的方法。

在另一方面，本发明提供了抑制细胞中ROCK活性的方法，包括将需要抑制ROCK活性的细胞与治疗有效量的式(Ia)，式(Ib)，(IIa)或式(IIb)化合物，其药学上可接受的盐或包含该化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物接触。

认为本文提供的组合物和方法对于抑制细胞中的ROCK活性特别有用。在一个实施例中，将需要抑制ROCK活性的细胞与有效量的式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)化合物接触，以负调节ROCK激酶的活性。在其他实施例中，可以使用治疗有效量的含有式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)化合物的药学上可接受的盐或药物组合物。在某些实施例中，使细胞与有效量或治疗有效量的式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)化合物接触在体内发生。在某些实施例中，使细胞与有效量或治疗有效量的式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)化合物接触在体外发生。在一个实施例中，式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)的化合物的治疗有效量为每天约0.01mg/kg至300mg/kg。在一个实施例中，式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)的化合物的治疗有效量为每天约0.1mg/kg至100mg/kg。

在一个实施例中，与ROCK1激酶相比，式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)的化合物优先抑制ROCK2激酶的活性。在另一个实施例中，式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)的化合物以相似的程度抑制ROCK2激酶和ROCK1激酶的活性。在一个实施例中，式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)的化合物的治疗有效量为每天约0.01mg/kg至300mg/kg。在一个实施例中，式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)的化合物的治疗有效量为每天约0.1mg/kg至100mg/kg。

在一个实施例中，提供了一种用于治疗患有脑海绵状畸形综合症(CCM)的患者的方法，包括向该患者施用治疗有效量的式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)的化合物，或其药学上可接受的盐，单独或与药学上可接受的载体，赋形剂或稀释剂组合使用的。

在另一个实施例中，提供了治疗与血管张力增加有关的心血管疾病的方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)化合物或其药物组合物。在一个实施例中，心血管疾病是高血压，动脉粥样硬化，缺血性中风，冠状动脉痉挛，脑血管痉挛，心绞痛和勃起功能障碍。

在实施例中，提供了治疗涉及非血管平滑肌收缩性升高的疾病的方法包括将治疗有效量的式(Ia)，式(Ib)，式(IIa)或式(IIb)化合物或其药物组合物给药于有需要的患者。在一实施例中，该疾病涉及非血管平滑肌收缩性升高的哮喘和青光眼。

通过负调节ROCK的活性，特别是在细胞过表达ROCK酶或激活ROCK酶的常染色体显性突变的情况下，在某些实施例中，该方法被设计为调节ROCK的活性，以抑制新的CCM的形成且/或减少或根除已治疗患者中现有的CCM，或治疗某些心血管疾病或涉及非血管平滑肌收缩性升高的疾病。可以根据特定的治疗方案以单剂量或多剂量接触细胞/患者，以实现期望的ROCK负调节。例如，可以使用包括CT扫描或MRI扫描在内的众所周知的方法来监测CCM的大小和数量，以评估治疗的有效性，并且主治医生可以相应地调整剂量。

给患者的给药浓度和途径可根据疾病的严重程度而变化。所述化合物，其药学上可接受的盐以及包含此类化合物和盐的药物组合物也可以与其他化合物共同施用或与其他治疗方法(例如外科手术干预)组合使用，作为术前或术后的佐药。可以使用包括实施例A中的那些众所周知的测定方法，在患者中监测ROCK激酶抑制的程度，以获取治疗的有效性，以及其他颅骨成像技术和仪器，例如CT扫描，MRI，X-射线等，并且主治医生可以相应地调整剂量。

可以使用市售试剂，使用本文所述的合成方法和反应方案，或使用本领域技术人员众所周知的其他试剂和常规方法来制备本发明的化合物。

例如，可以根据一般反应方案I和II制备本发明的化合物。

方案一

方案I说明了本发明的式(I)化合物的制备。R

方案二

方案II说明了本发明的式(II)化合物的制备，其中R

以下实施例旨在举例说明本发明的其他某些实施例，而不旨在限制本发明的范围。

实施例1

化合物1-2：在N

化合物1-3：在N

化合物1-4：在0℃下，向1-羟基异喹啉-5-磺酸(0.8g，3.55mmol)在SOCl

实施例1：向1-羟基异喹啉基-5-磺酰氯(150mg，615.6μmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加TEA(128.5μL，923.4μmol)和4-甲基吲哚啉(90.1mg，677.1μmol)。将混合物在N

获得白色固体状的实施例1，为5-(4-甲基吲哚-1-基)磺酰基-2H-异喹啉-1-酮(90mg，252μmol，41.1％产率)。LC-MS：[M+1]340.09。

实施例2

化合物2-2：向1-氯异喹啉-5-磺酰氯(0.4g，1.53mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入TEA(318μL，2.29mmol)和吲哚啉-5-醇(226.9mg，1.68mmol)。将混合物在N

实施例2：将1-[(1-氯-5-异喹啉基)磺酰基]吲哚啉-5-醇(330mg，914.6μmol)的HCl(10mL，9N)溶液于90℃在N

实施例3

化合物3-1：向1-氯异喹啉-5-磺酰氯(0.3g，1.14mmol)在DCM(8mL)中的溶液中加入TEA(238.9μL，1.72mmol)和吲哚啉(109.1mg，915.6μmol)。将混合物在N

实施例3：将1-氯-5-吲哚啉-1-基磺酰基-异喹啉(0.2g，580.02μmol，1eq)在HCl水溶液(5mL，12M)中的混合物在N

实施例4

实施例4：向1-羟基异喹啉-5-磺酰氯(100.0mg，410.4μmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TEA(85.7μL，615.6μmol)和6-氯吲哚啉(56.7mg，369.4μmol)。将混合物在N

实施例5

实施例5：向1-羟基异喹啉-5-磺酰氯(150.0mg，615.6μmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加6-氟吲哚啉(75.9mg，554.0μmol)和TEA(128.5μL，923.3μmol)。将混合物在N

实施例6

化合物6-1：向1-氯异喹啉-5-磺酰氯(0.3g，1.14mmol)在DCM(8mL)中的溶液中加入TEA(239μL，1.72mmol)和6-甲基吲哚啉(121mg，916μmol)。将混合物在N

实施例6：将1-氯-5-(6-甲基吲哚啉-1-基)磺酰基-异喹啉(0.2g，557μmol)在HCl水溶液(5mL，12M)中的混合物脱气并用N

实施例7

实施例7：向1-氧代-2H-异喹啉-5-磺酰氯(0.3g，1.23mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加TEA(257.0μL，1.85mmol)和吲哚啉-4-基甲醇(202.0mg，1.35mmol)。将混合物在N

实施例8

实施例8：向1-羟基异喹啉-5-磺酰氯(150mg，615μmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TEA(128.5μL，923.3μmol)和4-(三氟甲基)吲哚啉(103.6mg，554.0μmol)。将混合物在N

获得作为白色固体状的实施例8，为5-[4-(三氟甲基)吲哚啉-1-基]磺酰基-2H-异喹啉-1-酮(20mg，44.2μmol，7.18％收率)。LC-MS：[M+1]394.06。

实施例9

实施例9：向1-羟基异喹啉-5-磺酰氯(150mg，615.5μmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TEA(128.5μL，923.3μmol)和4-环丙基吲哚啉(88.2mg，554.0μmol)。将混合物在N

实施例10

化合物10-1：向1-羟基异喹啉-5-磺酰氯(150mg，615.5μmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TEA(128.5μL，923.3μmol)和4-乙烯基吲哚啉(98.3mg，677.1μmol)。将混合物在N

实施例10：将5-(4-乙烯基吲哚啉-1-基)磺酰基-2H-异喹啉-1-酮(50mg，141.8μmol)，Pd/C(5mg，10wt％)在甲醇(5mL)中的混合物脱气并用H

实施例11

实施例11：向1-氧代-2H-异喹啉-5-磺酰氯(244.2mg，1.00mmol)在DCM(5mL)溶液中加入TEA(209.3μL，1.50mmol)和1-吲哚啉-4-基乙醇(180mg，1.10mmol)。将混合物在N

实施例12

化合物12-1：向1-氯异喹啉-5-磺酰氯(0.3g，1.14mmol)在DCM(8mL)中的溶液中加入TEA(238.9μL，1.72mmol)和3，3-二甲基吲哚啉(134.8mg，915.6μmol)。将混合物在N

实施例12：将1-氯-5-(3,3-二甲基吲哚啉-1-基)磺酰基异喹啉(0.2g，536.3μmol)在HCl水溶液(5mL，12M)中的混合物脱气并用N

实施例13

实施例13：向1-羟基异喹啉-5-磺酰氯(100mg，410.4μmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TEA(85.6μL，615.6μmol)和3-甲基吲哚啉(55.7mg，328.3μmol)。将混合物在N

实施例14

化合物14-1：向1-羟基异喹啉-5-磺酰氯(83.4mg，342.6μmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TEA(71.5μL，513.8μmol)和4-异丙烯基吲哚啉(60mg，376.82μmol)。将混合物在N

实施例14：在H

实施例15

实施例15：向1-羟基异喹啉-5-磺酰氯(202.8mg，832.3μmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TEA(173.8μL，1.25mmol)和吲哚啉-6-腈(120mg，832.3μmol)。将混合物在N

实施例16

实施例16：向1-氧代-2H-异喹啉-5-磺酰氯(176.6mg，725.1μmol)在DCM(3mL)中的溶液中添加TEA(151.3μL，1.09mmol)和4,6-二氯吲哚啉(150mg，797.6μmol)。将混合物在N

实施例17

实施例17：向1-氧代-2H-异喹啉-5-磺酰氯(50mg，205.2μmol)的DCM(5mL)溶液中添加TEA(85.6μL，615.6μmol)和4-环丙基吲哚啉-6-腈(37.8mg，205.2μmol)。将混合物在N

实施例18

实施例18：向1-氧代-2H-异喹啉-5-磺酰氯(100mg，410.4μmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入TEA(65.9μL，474.0μmol)和4-甲基吲哚啉-6-腈(50mg，316.0μmol)。将反应混合物在N

实施例19

化合物19-2：将3,5-二氯苯甲醛(25g，142.8mmol)，2,2-二乙氧基乙胺(83.08mL，571.3mmol)在甲苯(200mL)的混合物脱气并用N

化合物19-3：H

获得黄色固体状的化合物19-3，为5,7-二氯异喹啉(8g，40.3mmol，39.0％产率)。

化合物19-4：5,7-二氯异喹啉(100mg，504.9μmol)，二苯基甲亚胺(137.2mg，757.3μmol)，(5-二苯基膦基-9,9-二甲基-呫吨(xanthen)-4-基)-二苯基膦，甲磺酸盐的混合物将2-[2-(甲基氨基)苯基]苯基]钯(485.9mg，504.9μmol)，叔丁基苯(t-BuONa)(2M，1.26mL)的甲苯(10mL)溶液脱气并用N

获得黄色固体状的化合物19-4，为N-(7-氯-5-异喹啉基)-1,1-二苯基甲亚胺(40mg，116.6μmol，11.5％产率)。

化合物19-5：向N-(7-氯-5-异喹啉基)-1,1-二苯基甲亚胺(0.3g，875.0μmol)的THF(10mL)溶液中添加HCl(3M，525.0μL)。将混合物在N

化合物19-6：在-5℃下，向7-氯异喹啉-5-胺(0.1g，559μmol)在HCl(5mL)的溶液中加入NaNO

化合物19-7：向7-氯异喹啉-5-磺酰氯(0.2g，763.0μmol)在丙酮(10mL)的溶液中加入K

获得黄色固体状的化合物19-7，为7-氯-5-(6-氯吲哚啉-1-基)磺酰基-异喹啉(80mg，210.9μmol，27.6％产率)。

化合物19-8：将7-氯-5-(6-氯吲哚啉-1-基)磺酰基-异喹啉(80mg，210.9μmol)和m-CPBA(65.7mg，316.4μmol)在DCM(5mL)中的混合物冷却至0℃，然后将混合物在N

化合物19-9：AC2O将7-氯-5-(6-氯吲哚啉-1-基)磺酰基-2-氧化异喹啉-2-鎓(50mg，126.5μmol)在AC

实施例19：将[7-氯-5-(6-氯吲哚啉-1-基)磺酰基-1-异喹啉基]乙酸酯(40mg，91.4μmol)和KOH(7.70mg，137.2μmol)在甲醇(5mL)中的混合物脱气并用N

实施例20

化合物20-1：向7-氯异喹啉-5-磺酰氯(0.1g，381.5μmol)在丙酮(8mL)中的溶液中添加K

化合物20-2：将1-[(7-氯-5-异喹啉基)磺酰基]吲哚啉-6-腈(30mg，81.1μmol)，m-CPBA(26.2mg，121.6μmol)在DCM(5mL)中的混合物脱气并用N

化合物20-3：将1-(7-氯-2-氧化-异喹啉-2-基-5-基)磺酰吲哚啉-6-腈(30mg，77.7μmol)在Ac

实施例20：将[7-氯-5-(6-氰基吲哚啉-1-基)磺酰基-1-异喹啉基]乙酸酯(20mg，46.7μmol)和KOH(5.25mg，93.4μmol)在甲醇(5mL)中的混合物脱气并用N

获得白色固体状的实施例20，为1-[(7-氯-1-氧代-2H-异喹啉-5-基)磺酰基]吲哚啉-6-腈(2mg，4.7μmol，10.2％产率)。LC-MS：[M+1]385.03。

实施例21

化合物21-2：在-65℃下，向n-BuLi(2.5M，201.8mL)在THF(100mL)中的溶液中加入4-溴异喹啉(30g，144.1mmol)在THF(100mL)的溶液。将混合物在-65℃下搅拌30分钟。在-65℃下加入N-(苯磺酰基)-N-氟-苯磺酰胺(100.0g，317.2mmol)在THF(100mL)的溶液。将混合物在-65℃下搅拌1h。然后将混合物在N

化合物21-3：向4-氟异喹啉(8g，54.3mmol)在H

化合物21-4：将4-氟-5-硝基-异喹啉(5g，26.0mmol)，NH

化合物21-5：在-15℃下，向4-氟异喹啉-5-胺(3g，18.5mmol)在HCl(10mL)中的溶液中加入NaNO

化合物21-6：将4-氟异喹啉-5-磺酰氯(0.5g，2.04mmol)，6-氯吲哚啉(250.1mg，1.63mmol)，TEA(424.9μL，3.05mmol)在DCM(10mL)中的混合物脱气并用N

化合物21-7：将5-(6-氯吲哚啉-1-基)磺酰基-4-氟-异喹啉(0.2g，551μmol)和m-CPBA(142.6mg，826.9μmol)在DCM(10mL)中的混合物脱气并用N

实施例21：将5-(6-氯吲哚啉-1-基)磺酰基-4-氟-2-氧化-异喹啉-2-鎓(70mg，184.7μmol)在Ac

实施例22

化合物22-1：在0℃下向KNO

获得黄色固体状的化合物22-1，为4-溴-5-硝基-异喹啉(75g，296.3mmol，77.0％产率)。

化合物22-2：向4-溴-5-硝基-异喹啉(55g，217.3mmol)在二恶烷(500mL)和H

化合物22-3：向4-甲基-5-硝基-异喹啉(33g，175.3mmol)在THF(500mL)和H

化合物22-4：解决方案1：在N

化合物22-5：向4-甲基异喹啉-5-磺酰氯(2g，8.27mmol)在丙酮(30mL)中的溶液中加入K

化合物22-6：在0℃下，向1-[(4-甲基-5-异喹啉基)磺酰基]吲哚啉-6-腈(1.1g，3.15mmol)在DCM(30mL)中的溶液中加入m-CPBA(1.44g，6.93mmol)。将混合物温热至25℃并搅拌12h。反应混合物直接通过柱色谱法纯化(SiO

实施例22：将1-(4-甲基-2-氧化-异喹啉-2-鎓-5-基)磺酰吲哚啉-6-腈(1g，2.74mmol)在Ac

实施例23

化合物23-1：向4-甲基异喹啉-5-磺酰氯(100mg，413.7μmol)在丙酮(5mL)中的溶液中添加K

获得黄色固体状的化合物23-1，为4-甲基-1-[(4-甲基-5-异喹啉基)磺酰基]吲哚啉-6-腈(50mg，粗品)。

化合物23-2：在0℃下，向4-甲基-1-[(4-甲基-5-异喹啉基)磺酰基]吲哚啉-6-腈(50mg，137μmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加m-CPBA(62.9mg，302.7μmol)。将混合物加热至25℃并搅拌2h。残余物通过柱色谱法(SiO

实施例23：将4-甲基-1-(4-甲基-2-氧化-异喹啉-2-鎓-5-基)磺酰基-吲哚啉-6-腈(40mg，105.4μmol)在Ac

实施例24

化合物24-1：向4-甲基异喹啉-5-磺酰氯(500mg，2.07mmol)在丙酮(10mL)中的溶液中加入K

化合物24-2：在0℃下，向5-(6-氯吲哚啉-1-基)磺酰基-4-甲基-异喹啉(400mg，1.11mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加m-CPBA(579.3mg，2.79mmol)。将混合物加热至25℃并搅拌2.5h。通过柱色谱法(SiO

实施例24：将5-(6-氯吲哚啉-1-基)磺酰基-4-甲基-2-氧化-异喹啉-2-鎓(300mg，800.3μmol)在Ac

实施例25

化合物25-2：将4-硝基异吲哚啉-1,3-二酮(25g，130.1mmol)，NaBH

化合物25-3：将3-羟基-4-硝基-异吲哚啉-1-酮(10g，51.5mmol)在HCl(70mL，20％水溶液)中的混合物脱气并用N

化合物25-4：将3-羟基-4-硝基-3H-异苯并呋喃-1-酮(10g，51.2mmol)，N

获得黄色固体状的化合物25-4，为5-硝基-2H-酞嗪-1-酮(6g，31.3mmol，61.2％产率)。

化合物25-5：将5-硝基-2H-酞嗪-1-酮(6g，31.3mmol)，Pd/C(3g，10wt％)在甲醇(100mL)中的混合物脱气并用H

获得黄色固体状的化合物25-5，为5-氨基-2H-酞嗪-1-酮(3g，18.6mmol，59.3％产率)。

化合物25-6：在-5℃下，向5-氨基-2H-酞嗪-1-酮(3g，18.61mmol)在HCl(20mL)中的溶液中添加NaNO

实施例25：向1-氧代-2H-酞嗪-5-磺酰氯(1g，4.09mmol)在DCM(15mL)中的溶液中添加TEA(853.3uL，6.13mmol)和6-氯吲哚啉(502.2mg，3.27mmol)。将混合物在N

实施例26

实施例26：向1-氧代-2H-酞嗪-5-磺酰氯(0.5g，2.04mmol)在DCM(15mL)中的溶液中添加TEA(426uL，3.07mmol)和吲哚啉-6-腈(235mg，1.63mmol)。将混合物在N

实施例27

化合物27-2。在0℃和N

化合物27-3：在0℃下，向4-氯-5-硝基-异喹啉(4g，19.18mmol，1eq)和NH

解决方案1的制备：在-5℃和N

解决方案2的制备：在0℃下，将SO

化合物27-4：向溶液1中缓慢加入溶液2。将混合物在15℃下搅拌2h。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂。将残余物用H

化合物27-5：在15℃和N

化合物27-6：向1-[(4-氯-5-异喹啉基)磺酰基]吲哚啉-6-腈(600mg，1.62mmol，1eq)在DCM(20mL)中的溶液中添加m-CPBA(769.93mg，3.57mmol)，纯度80％，2.2eq)。将混合物在15℃下搅拌12h。反应混合物直接通过柱色谱法(SiO

实施例27：将1-(4-氯-2-氧化-异喹啉-2-鎓-5-基)磺酰吲哚啉-6-腈(150mg，388.78umol，1eq)在Ac

实施例28

化合物28-2：在20℃下，向6-氯-2，3-二氢-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(1.6g，10.35mmol，1eq)在DCM(20mL)中的溶液中添加Boc

化合物28-3：在15℃下，向叔丁基-6-氯-2,3-二氢吡咯并[3,2-c]吡啶-1-羧酸酯(1.5g，5.89mmol，1eq)在甲醇(50mL)和DIPEA(5mL)中的溶液中添加Pd(dppf)Cl

化合物28-4：向O1-叔丁基O6-甲基2,3-二氢吡咯并[3,2-c]吡啶-1,6-二羧酸酯(1.57g，5.64mmol，1eq)在甲醇(20mL)和H

化合物28-5：向1-叔丁氧基羰基-2,3-二氢吡咯并[3,2-c]吡啶-6-羧酸(650mg，2.46mmol，1eq)在DMF(10mL)中的溶液中加入HATU(1.40g，3.69mmol，1.5eq)，NH

化合物28-6：向叔丁基-6-氨基甲酰基-2,3-二氢吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸酯(250mg，949.52μmol，1eq)在THF(10mL)中的溶液中，加入吡啶(195.28mg，2.47mmol，199.26uL，2.6eq)和TFAA(518.51mg，2.47mmol，343.38mL，2.6eq)加入。将混合物在15℃下搅拌2h。将反应混合物加入H

化合物28-7：将叔丁基-6-氰基-2,3-二氢吡咯并[3,2-c]吡啶-1-甲酸酯(250mg，1.02mmol，1eq)在HCl/EtOAc(10mL)中的溶液在15℃下搅拌保持12h。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂。残余物无需进一步纯化即可使用。获得灰白色固体状的化合物28-7，为2,3-二氢-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-腈(160mg，粗品，HCl)。

化合物28-8：将1-羟基异喹啉-5-磺酸(1.00g，4.44mmol，1eq)在SOCl

实施例28：在15℃下，向2,3-二氢-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-腈(37.53mg，258.55μmol，0.7eq)在DMF(7mL)中的溶液中加入NaH(59.10mg，1.48mmol，78.02μL，60％纯度，4eq)。将混合物在该温度下搅拌30分钟，然后在15℃下加入1-氧代-2H-异喹啉-5-磺酰氯(90mg，369.36μmol，1eq)。将所得混合物在15℃下搅拌1.5h。通过添加H

实施例29

化合物29-2：向4-甲氧基-1H-吲哚-6-腈(230mg，1.34mmol，1eq)在DCM(8mL)中的溶液中加入三乙基硅烷(776.63mg，6.68mmol，1.07mL，5eq)。然后将反应冷却至0℃，并在0℃下逐滴加入TFA(4mL)。将混合物加热至50℃并搅拌12h。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂。残余物通过柱色谱法纯化(SiO

实施例29：向1-氧代-2H-异喹啉-5-磺酰氯(150mg，615.60μmol，1eq)和4-甲氧基吲哚啉-6-甲腈(32.17mg，184.68μmol，0.3eq)在DCM中的溶液(10mL)中加入TEA(207.64mg，1.23mmol，285.61μL，60％纯度，2eq)。将混合物在15℃下搅拌12h。将反应混合物加入H

实施例30和31

化合物30-2：在N

化合物30-3：向4-氨基-1H-吲哚-6-腈(700mg，4.45mmol，1eq)在DCM(15mL)中的溶液中添加TEA(1.35g，13.36mmol，1.86mL，3eq)和乙酰氯(419.54mg，5.34mmol，381.40μL，1.2eq)。将混合物在15℃下搅拌2h。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂。将残余物通过柱色谱法(SiO

化合物30-4：向N-(6-氰基-1H-吲哚-4-基)乙酰胺(600mg，3.01mmol，1eq)在DCM(20mL)中的溶液中加入TESH(3.50g，30.12mmol，4.81mL，10eq)。然后将反应冷却至0℃，并在0℃下逐滴加入TFA(10mL)。将所得混合物在15℃下搅拌12h。将混合物加热至50℃并搅拌5h。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂。残余物通过柱色谱法(SiO

获得浅黄色固体状的化合物30-4，为N-(6-氰基吲哚啉-4-基)乙酰胺(400mg，1.99mmol，66.00％产率)。

实施例30：向1-氧代-2H-异喹啉-5-磺酰氯(200mg，820.79umol，1eq)在DCM(10mL)中的溶液中加入TEA(332.22mg，3.28mmol，456.98uL，4eq)和N-(6-氰基吲哚啉-4-基)乙酰胺(82.58mg，410.40umol，0.5eq)。将混合物在15℃下搅拌12h。将反应混合物加入H

实施例31：N-[6-氰基-1-[(1-氧代-2H-异喹啉-5-基)磺酰基]吲哚啉-4-基]乙酰胺(40mg，97.94μmol，1eq)在浓盐酸(6mL)和EtOH(6mL)中的混合物加热至50℃并搅拌4.5h。将反应混合物加入到Na

实施例32、33和34

化合物32-2：如下并行制备三种反应混合物：在0℃下，向4-溴异喹啉(100g，480.64mmol，1eq)在H

化合物32-3：如下并行制备两种反应混合物：4-溴-5-硝基-异喹啉(50g，197.59mmol，1eq)，Cs

化合物32-4：在0℃下，向4-甲基-5-硝基异喹啉(60g，318.84mmol，1eq)在DCM(800mL)中的溶液中加入m-CPBA(151.31g，701.44mmol，80％纯度，2.2eq)。将混合物在25℃下搅拌12h。反应混合物通过加入Na

化合物32-5：在0℃下，向4-甲基-5-硝基-2-氧化-异喹啉-2-鎓(45g，220.39mmol，1eq)在DCM(500mL)中的溶液中加入POCl

化合物32-6：将1-氯-4-甲基-5-硝基-异喹啉(27g，121.28mmol，1eq)，NaOMe(13.10g，242.56mmol，2eq)在甲醇(500mL)中的混合物脱气并用N

化合物32-7：在0℃下，向1甲氧基-4-甲基-5-硝基-异喹啉(15g，68.74mmol，1eq)在甲醇(210mL)和H

化合物32-8：在-5℃下，向1-甲氧基-4-甲基-异喹啉-5-胺(2g，10.63mmol，1eq)在HCl(80mL)中的溶液中加入NaNO

化合物32-9：在-5℃下，向N-(6-氰基吲哚啉-4-基)乙酰胺(888.67mg，4.42mmol，1.2eq)和吡啶(1.05g，13.25mmol，1.07mL，3.6eq)的混合物中逐滴加入1-甲氧基-4-甲基异喹啉-5-磺酰氯(780mg，2.87mmol，0.78eq)在DCM(10mL)中的溶液。将混合物脱气并用N

实施例32：将N-(6-氰基-1-((1-甲氧基-4-甲基异喹啉-5-基)磺酰基)吲哚啉-4-基)乙酰胺(600mg，1.37mmol，1eq)和TMSI(1.10g，5.50mmol，748.43μL，4eq)在ACN(10mL)中的混合物在N

实施例33：将N-(6-氰基-1-((4-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-5-基)磺酰基)吲哚啉-4-基)乙酰胺(30mg，71.01μmol，1eq)在浓盐酸(5mL)和EtOH(5mL)中的溶液在50℃下搅拌5h。在0℃下，向反应混合物中加入饱和Na

实施例34：向4-氨基-1-((4-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-5-基)磺酰基)吲哚啉-6-腈(20mg，52.57μmol，1eq)在DMF(2mL)中的溶液中加入吡啶(12.48mg，157.72μmol，12.73μL，3eq)和MeI(74.62mg，525.74μmol，32.73μL，10eq)。然后将混合物在25℃下搅拌12h。减压浓缩反应混合物，得到残余物。残余物通过制备型HPLC纯化(色谱柱：WatersXbridge BEH C18100*25mm*5μm；流动相：[水(10mM NH

实施例35、36和37

化合物35-2：在-5℃下，向4-氯异喹啉(40g，244.49mmol，1eq)在H

化合物35-3：在0℃下，向4-氯-5-硝基异喹啉(43g，206.14mmol，1eq)在CHCl

化合物35-4：在0℃下，向4-氯-5-硝基异喹啉2-氧化物(36g，160.28mmol，1eq)在DCM(500mL)中的溶液中缓慢地加入POCl

化合物35-5：向1,4-二氯-5-硝基异喹啉(25g，102.86mmol，1eq)在甲醇(150mL)中的溶液中加入NaOMe(24.45g，113.15mmol，25％纯度，1.1eq)。将混合物在N

化合物35-6：在0℃下，向4-氯-1-甲氧基-5-硝基异喹啉(15.9g，66.63mmol，1eq)和NH

溶液A的制备：在-5℃下，向4-氯-1-甲氧基异喹啉-5-胺(0.2g，958.57umol，1eq)在HCl(8mL)中的溶液中加入NaNO

溶液Β的制备：在0℃下，将SO

化合物35-7：将溶液A转移至溶液Β中，并将混合物在15℃下搅拌2h。在0℃下，通过添加至冰水(20mL)中来淬灭反应混合物，然后用DCM(30mL*3)萃取。合并的有机层用盐水(100mL*2)洗涤，经Na

化合物35-9：在-5℃下，向N-(6-氰基吲哚啉-4-基)乙酰胺(化合物35-8；500mg，2.48mmol，1.3eq)和吡啶(453.57mg，5.73mmol，462.83μL，3eq)的混合物中逐滴加入4-氯-1-甲氧基异喹啉-5-磺酰氯(1.27g，1.91mmol，1eq)在DCM(5mL)中的溶液。将混合物脱气并用N

实施例35：将N-(1-((4-氯-1-甲氧基异喹啉-5-基)磺酰基)-6-氰基吲哚啉-4-基)乙酰胺(100mg，218.87umol，1eq)和TMSI(218.96mg，1.09mmol，148.96uL，5eq)在ACN(10mL)中的混合物在N

实施例36：将N-(1-((4-氯-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-5-基)磺酰基)-6-氰基吲哚啉-4-基)乙酰胺(16mg，36.13umol，1eq)在浓盐酸(3mL)和EtOH(3mL)中的溶液在50℃下搅拌5h。在0℃下，向混合物中加入饱和Na

实施例37：向4-氨基-1-((4-氯-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-5-基)磺酰基)吲哚啉-6-腈(20mg，49.90μmol，1eq)在DMF(2.5mL)中的溶液中加入吡啶(39.47mg，498.95mmol，40.27μL，10eq)和MeI(141.64mg，997.91mmol，62.12μL，20eq)。将混合物在25℃下搅拌12h。减压浓缩混合物，得到残余物。残余物通过制备型HPLC纯化(色谱柱：Waters Xbridge BEHC18100*25mm*5μm；流动相：[水(10mM NH

实施例38

实施例38：在-5℃下，向2,3-二氢-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-6-腈(21.45mg，147.74μmol，1.2eq)和吡啶(29.22mg，369.36μmol，29.81μL，3eq)的混合物中逐滴加入1-氧代-2H-异喹啉-5-磺酰氯(30mg，123.12μmol，1eq)在DCM(3mL)中的溶液。将混合物脱气并用N

实施例39

化合物39-2：在-5℃下，向2,3-二氢-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-6-腈(19.23mg，132.49μmol，1.2eq)和吡啶(26.20mg，331.22μmol，26.73μL，3eq)的混合物逐滴加入1-甲氧基-4-甲基-异喹啉-5-磺酰氯的溶液(30mg，110.41μmol，1eq)在DCM(2mL)中的溶液。将混合物脱气并用N

实施例39：1-[(1-甲氧基-4-甲基-5-异喹啉基)磺酰基]-2,3-二氢吡咯并[3,2-b]吡啶-6-腈(15mg，39.43μmol，1eq)和TMSI(31.56mg，157.72μmol，21.47μL，4eq)在ACN(2mL)中的混合物在N

实施例40

化合物40-2：在-5℃下，向2,3-二氢-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-6-腈(17.89mg，123.23umol，1.2eq)和吡啶(24.37mg，308.07μmol，24.87μL，3eq)的混合物中逐滴加入4-氯-1-甲氧基-异喹啉-5-磺酰氯(30mg，102.69μmol，1eq)在DCM(2mL)中的溶液。将混合物脱气并用N

获得白色固体的化合物40-2，为1-[(4-氯-1-甲氧基-5-异喹啉基)磺酰基]-2,3-二氢吡咯并[3,2-b]吡啶-6-腈(30mg，74.84umol，72.88％产率)。

实施例40：将1-[(4-氯-1-甲氧基-5-异喹啉基)磺酰基]-2,3-二氢吡咯并[3,2-b]吡啶-6-腈(30mg，74.84umol，1eq)和TMSI(59.90mg，299.37umol，40.75uL，4eq)在ACN(2mL)中的混合物在N

吲哚啉2

6-氯吲哚啉

吲哚啉2：在0℃下，向6-氯-1H-吲哚(5g，32.98mmol)在AcOH(80mL)中的混合物中加入NaBH

吲哚啉4

吲哚啉-6-腈

吲哚啉4：在0℃下，向1H-吲哚-6-腈(5g，35.1mmol)在AcOH(80mL)中的混合物中加入NaBH

吲哚啉6

1-(1H-吲哚-4-基)乙-1-酮

吲哚啉7

1-(1H-吲哚-4-基)乙-1-醇

吲哚啉8

1-(吲哚啉-4-基)乙-1-醇

吲哚啉6：向1H-吲哚-4-腈(5g，35.1mmol)在THF(20mL)中的溶液中加入MeLi(1.8M，41.9mL)。将混合物在N

吲哚啉7：在0℃下，向1-(1H-吲哚-4-基)乙酮(2.4g，15.0mmol)在THF(20mL)中的溶液中添加NaBH

吲哚啉8：在0℃下，向1-(1H-吲哚-4-基)乙醇(1g，6.20mmol)在AcOH(10mL)中的混合物中加入NaBH

吲哚啉10

4,6-二氯吲哚啉

吲哚啉10：在0℃下，向4,6-二氯-1H-吲哚(0.5g，2.69mmol)在AcOH(5mL)中的混合物中添加NaBH

吲哚啉12

4-环丙基-1H-吲哚-6-腈

吲哚啉13

4-环丙基吲哚啉-6-腈

吲哚啉12：4-溴1H-吲哚-6-腈(0.1g，452.3μmol)，环丙基硼酸(77.7mg，904.7μmol)，Cs

吲哚啉13：在0℃下，向4-环丙基-1H-吲哚-6-腈(50mg，274.3μmol)在AcOH(3mL)中的溶液中添加氰基硼氢化钠(56.90mg，905.4μmol)。将混合物在25℃下搅拌12h。在0℃下，通过添加冰水(5mL)将反应混合物淬灭，将饱和的NaOH水溶液添加到混合物中以将pH调节至～8。反应混合物用DCM(50mL×2)萃取。合并的有机层经无水Na

获得黄色固体状的化合物，4-环丙基吲哚啉-6-腈(20mg，108.6μmol，39.5％产率)。

吲哚啉15

4-甲基-1H-吲哚-6-腈

吲哚啉16

4-甲基吲哚啉-6-腈

吲哚啉15：向4-溴-1H-吲哚-6-腈(1g，4.52mmol)在二恶烷(15mL)和H

吲哚啉16：向4-甲基-1H-吲哚-6-腈(600mg，3.84mmol)在HOAc(15mL)中的溶液中添加NaBH

吲哚啉18

4-(丙-1-烯-2-基)吲哚啉

吲哚啉18：4-溴吲哚啉(0.5g，2.52mmol)，2-异丙烯基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(509.0mg，3.03mmol)，Cs

吲哚啉20

4-乙烯基吲哚啉

吲哚啉20：在15℃和N

吲哚啉22

4-环丙基吲哚啉

吲哚啉22：向4-溴吲哚啉(0.5g，2.52mmol)在二恶烷(10mL)和H

实施例41

该实施例说明了本发明的示例性化合物抑制ROCK1和/或ROCK2的酶活性。

本发明化合物的剂量-反应曲线是通过荧光偶联酶法测定的，该方法使用与CST(Carna BioSciences，目录号#01-109)融合的纯化的C-末端截断的人类ROCK1催化结构域(登录号NP_005397.1的氨基酸1-477)。01-109)和与GST(Carna BioSciences，目录号#01-110)融合的纯化的C端截断的人类ROCK2酶激酶结构域(登录号NP_004841.2的氨基酸1-553)。此外，全长cGMP依赖性蛋白激酶1(PKG或PRKG1；登录号NP_006249.1的氨基酸1-686)与GST(Carna BioSciences，目录号#01-142)融合，全长PKACα(PRKACA；登录号NP_002721.1的氨基酸1-351)与GST(Carna BioSciences，目录号#01-127)融合，和与GST(CarnaBiosciences，目录号#01-101)融合的C端截断的人类AKT1催化结构域(登录号NP_005154.1的氨基酸104-480)被用作对照，以测量任何不需要的脱靶激酶活性。

简而言之，将本发明的化合物溶解在DMSO中，并对每种化合物在2.5％DMSO中进行12级(a series of 12)，每级三倍(three-fold serial)的一系列稀释。每种化合物的系列稀释液的初始起始浓度为10μM或100μM。还制备了不含化合物，ROCK酶或ATP的对照样品，并与化合物测试样品并行处理。

将在H

表格1

式(I)的示例性化合物对ROCK活性的抑制

尽管已经结合本发明的特定实施例对本发明进行了描述，但是应当理解，本发明能够进行进一步的修改，并且本申请旨在覆盖总体上遵循本发明的原理的本发明的任何变化，使用或修改。本发明包括在本发明所属技术领域内的已知或惯常实践之内的，并且可以应用于上文阐述的基本特征的以下对本公开的偏离，并在所附权利要求的范围内。