一种覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法

技术领域

本发明涉及植物炮制技术领域，具体为一种覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法。

背景技术

口服液剂是以中药汤剂为基础，提取药物中有效成分，加入矫味剂、抑菌剂等附加剂，并按注射剂安瓿灌封处理工艺，制成的一种无菌或半无菌的口服液体制剂，因此亦称口服安瓿剂。其生产一般是采用一些成熟和传统的制备工艺，特别是以水溶性中药汤剂为基础的保健口服液。

传统的口服液剂生产过程是将两种或多种中药药材经过水洗、水浸、分三次煎煮、合并煎煮液、加热浓缩，再经过调制，精滤，灌封等工艺。这种生产过程中几种药材经过加水分三次煎煮得到的仅仅只是一些水溶性成分，利用不充分，并且三次煎煮液合并后还需要再加热减压蒸馏浓缩至原体积的 1/6左右，会消耗大量的能源。针对现有技术的不足，本发明提供了一种覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法，通过特殊训化诱导了的乳酸菌对其进行发酵炮制，生产过程省去了反复煎煮、蒸馏浓缩的过程，发酵液滤液即可为口服液，而且覆盆子叶口服液中的有效成分总黄酮的含量也因为发酵过程得到提高。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法，解决了传统的口服液剂生产过程工艺复杂，包括将两种或多种中药药材经过水洗、水浸、分三次煎煮、合并煎煮液、加热浓缩，再经过调制，精滤，灌封等工艺，对药材煎煮液利用不充分，且浓缩煎煮液会消耗大量的能源的问题。

(二)技术方案

本发明提出一种覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法，以覆盆子叶为基础发酵培养液，辅以硫酸镁、蔗糖和玉米浆粉制成发酵生产用培养基，通过经特殊训化诱导的乳酸菌对其进行发酵炮制，生产出一种覆盆子叶发酵炮制口服液，生产过程省去了反复煎煮、蒸馏浓缩的过程，发酵液滤液即为口服液，而且提高了口服液中有效成分总黄酮的含量。

为实现上述目的，本发明采用的具体技术方案如下：

本发明提供一种覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法，包括以下步骤:

(1)将覆盆子叶经除杂、水洗、用热水浸润泡发后，再加入MgSO

(2)向步骤(1)的培养液接入覆盆子叶乳酸菌活化菌种液，120rpm搅拌1～5分钟，发酵，采样和镜检发酵液，至pH值达到4.0～4.5，即可结束发酵；

(3)将步骤(2)的发酵液进行80目～120目过滤，可得滤液56L，检测滤液的覆盆子叶总黄酮含量；

(4)对步骤(3)的过滤液进行调配、再精滤，可得精滤液52L，按10ml/ 瓶灌封至安瓿瓶中，再经过115℃灭菌20分钟、包装和抽检合格后即为口服液成品。

优选的，所述步骤(1)中覆盆子干叶6000g，MgSO

优选的，所述步骤(2)中培养液接入覆盆子叶乳酸菌活化菌种液是覆盆子叶在发酵炮制过程中通过乳酸菌的生长、代谢、合成、乳化、重排、转化和积累的影响，使覆盆子叶得到了比水提煎煮更充分、更全面的释放和利用。

优选的，所述步骤(2)中乳酸菌活化菌种液的添加量为3.3～5L，活菌数为1×10

优选的，所述步骤(2)中的发酵是在37℃恒温静息发酵30～36小时，期间间歇式搅拌3～8次。

优选的，所述口服液在保证药方和功效基本不变的同时新增了乳酸菌发酵后的生物活性产物和风味物质，具有多种保健功能及天然风味。

优选的，所述步骤(2)中覆盆子叶乳酸菌活化菌种液包含经训化诱导的乳酸菌菌株，所述经训化诱导的乳酸菌菌株是以覆盆子叶的药材培养液与MRS 培养液的混合比由0:1到1:3，再到1:1、2:1、3:1、4:1至1:0，逐渐增加覆盆子叶的药材培养液在MRS培养基中的占比直至完全替代，从而训化诱导出具有覆盆子叶匀浆液耐受性且能利用覆盆子叶作为自身生长培养基成分的乳酸菌菌株。

优选的，所述经训化诱导的乳酸菌菌株应用于覆盆子叶发酵炮制口服液的制备。

(三)有益效果

本发明提供了一种覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法，具备以下有益效果：

(1)该覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法，发酵炮制过程中，覆盆子叶的水浸、匀浆破碎和121℃灭菌20min和37℃恒温发酵30～36h的过程也是覆盆子叶经高温高压加速煎煮、萃取、菌体代谢降解和释放中药成分的过程，药效不变、安全性不变。

(2)该覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法，将覆盆子叶匀浆破碎做成药材培养液，通过逐步增加该药材培养液在MRS培养液中占比的方法，可训化诱导出一株对覆盆子叶具有耐受性并且能够利用其作为自身生长培养基的乳酸菌菌株；药材组织及细胞成分经过乳酸菌的生长、代谢、合成、乳化、重排、转化和积累等一系列生命活动，得到了比水提煎煮更充分、更全面的释放和利用。

(3)该覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法，发酵炮制过程中补加硫酸镁、蔗糖和玉米浆粉弥补药材作为发酵菌培养基所表现的养分不足和起到对药材多糖和总黄酮的保护作用，同时保证口服液药方和功效不变。硫酸镁作为乳酸菌的生长因子利于乳酸菌的生长繁殖和代谢；蔗糖利于乳酸菌优先利用，保护药材自身的植物多糖和总黄酮免遭菌体代谢利用；玉米浆粉补充药材自身氮源的不足。

(4)该覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法，乳酸菌菌株发酵覆盆子叶培养液，合成了乳酸和特有的风味物质，将药材所含的黄酮类转化成了能更易被人体吸收利用的黄酮苷元；同时乳酸菌合成分泌了胞外多糖，胞外多糖的降解温度最低为290.44℃，高于食品常规的加工和灭菌温度。所以在保持了覆盆子叶功能基础上，该口服液还新增了乳酸菌发酵后的生物活性产物和风味物质，口感有所改善，具有多种保健功能及天然风味，提高产品生产效率和活性成分，优于传统口服液的生产方法。

具体实施方式

为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种覆盆子叶发酵炮制口服液的制备方法进行说明，本发明的保护范围不受以下实施例的限制。

实施例1：

覆盆子叶逐步训化诱导制备乳酸菌菌株：

(1)制备覆盆子叶培养液：称取60g覆盆子干叶经水洗、热水浸润泡发后，一起匀浆加水定容至600ml；

(2)制备覆盆子叶—MRS不同比例混合培养液：①0:1培养液：仅取MRS 培养液100ml，②1:3培养液：取覆盆子叶培养液25ml和MRS培养液75ml混合，③1:1培养液：取覆盆子叶培养液50ml和MRS培养液50ml混合，④2:1 培养液：取覆盆子叶培养液60ml和MRS培养液30ml混合，⑤3:1培养液：取覆盆子叶培养液75ml和MRS培养液25ml混合，⑥4:1培养液：取覆盆子叶培养液80ml和MRS培养液20ml混合，⑦1:0培养液：仅取覆盆子叶培养液100ml。

(3)逐步训化诱导菌株：将乳酸菌接种在步骤(2)的①号培养液中， 37℃恒温培养36h至pH值＜4.5，再按3％接种量转接至②培养液中，37℃恒温培养30h至pH值＜4.5，再按3％接种量转接至③号培养液中，37℃恒温培养33h至pH值＜4.5，依次按序号分步转接、培养、到④、⑤、⑥号培养液中，直至该菌种已适应在⑦号培养液中生长，且培养36h至pH值＜4.5，最后训化诱导出一株具有覆盆子叶耐受性且能利用其作为自身生长培养基成分的乳酸菌菌株。覆盆子叶培养液所含黄酮类物质有消炎作用，即对一般细菌具有抑制或杀灭作用，而经训化诱导后的乳酸菌菌株对覆盆子叶中的黄酮类物质具有耐受性和抗性。

实施例2：

(1)6000g覆盆子干叶经除杂、水洗、用热水浸润泡发后，再加入食品级的12gMgSO

(2)向步骤(1)得到的培养液接入发酵炮制菌种液5L，活菌数为3× 10

(3)向步骤(2)得到的发酵液滤液进行调配、再精滤，可得精滤液52L 左右，按10ml/瓶灌封至安瓿瓶中，再经过115℃灭菌20min、包装和抽检合格后即为口服液成品。

检测步骤(1)得到的培养液的含量为2900mg/L，检测口服液成品的总黄酮含量为3200mg/L，则发酵炮制前后总黄酮含量约相差10.3％，可见，本发明通过发酵炮制技术对该保健口服液的有效成分提升有显著的作用。

实施例3：

(1)6000g覆盆子干叶经除杂、水洗、用热水浸润泡发后，再加入食品级的12gMgSO

(2)向步骤(1)得到的培养液接入发酵炮制菌种液3.3L，活菌数为3 ×10

(3)向步骤(2)得到的发酵液滤液进行调配、再精滤，可得精滤液52L 左右，按10ml/瓶灌封至安瓿瓶中，再经过115℃灭菌20min、包装和抽检合格后即为口服液成品。

检测步骤(1)得到的培养液的含量为2870mg/L，检测口服液成品的总黄酮含量为3090mg/L，则发酵炮制前后总黄酮含量约相差7.7％，可见，本发明通过发酵炮制技术对该保健口服液的有效成分提升有显著的作用。

实施例4：

(1)6000g覆盆子干叶经除杂、水洗、用热水浸润泡发后，再加入食品级的12gMgSO

(2)向步骤(1)得到的培养液接入发酵炮制菌种液4.5L，活菌数为3 ×10

(3)向步骤(2)得到的发酵液滤液进行调配、再精滤，可得精滤液52L 左右，按10ml/瓶灌封至安瓿瓶中，再经过115℃灭菌20min、包装和抽检合格后即为口服液成品。

检测步骤(1)得到的培养液的含量为2640mg/L，检测口服液成品的总黄酮含量为2880mg/L，则发酵炮制前后总黄酮含量约相差9.1％，可见，本发明通过发酵炮制技术对该保健口服液的有效成分提升有显著的作用。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。