包含非那雄胺的缓释型注射用组合物

技术领域

本发明涉及一种包含非那雄胺的缓释型注射用组合物(sustained-releaseinjectable compositions)，更具体而言，涉及一种包含非那雄胺的缓释型注射用组合物，其以注射剂型被注入体内时，能够维持长时间的非那雄胺的给药效果。

背景技术

目前，韩国使用的男性型脱发治疗剂包括非那雄胺(finasteride)和度他雄胺(dutasteride)作为口服制剂。这些脱发治疗剂可通过阻断将睾丸素转化为二氢睾酮(DHT)的5-α-还原酶(5-α-reductase)抑制剂来抑制作为一种强大的男性荷尔蒙的DHT的生成，由此，通过抑制由头皮中的DHT引起的毛根收缩来治疗雄激素性脱发。

5-α-还原酶(5-α-reductase)抑制剂可分为1型(Type 1)和2型(Type 2)，1型(Type 1)分布在头皮和皮脂腺中，2型(Type 2)分布在头皮和前列腺中。非那雄胺只能阻断5-α-还原酶(5-α-reductase)抑制剂的2型(Type 2)，而度他雄胺可以阻断1型(Type 1)和2型(Type 2)。通过该机理，认为度他雄胺比非那雄胺具有更强的DHT抑制效果。但是，以服用初期一年为基准，度他雄胺的副作用发生率更高，非那雄胺目前被最广泛地用作脱发治疗剂，并且在安全性方面优于度他雄胺，因为它是唯一获得FDA批准的药物。

如韩国公开专利第10-2016-0002411号，现有的口服脱发治疗剂，需以每天服用的方式服用3个月以上才能够达到治疗效果，停止服用药物时存在药效下降而回到其先前状态的问题。因此，为了通过维持药效来维持治疗脱发的效果，存在必须在每天的特定时间持续服用的问题。

度他雄胺以及非那雄胺等脱发治疗剂由于与男性荷尔蒙有关，已被指定为育龄妇女或孕妇的禁忌药物，并且如将脱发治疗剂暴露于育龄妇女或孕妇时，可能会导致男性胎儿的外生殖器异常，从而导致畸形婴儿的出生，因此服用时需留意脱发治疗剂的保管或使用。另外，由于药物还可通过皮肤吸收来影响胎儿，因此要避免接触该药物，对于与育龄妇女或孕妇一起生活的服用者而言，要特别注意对其的使用。

即脱发治疗剂(如度他雄胺和非那雄胺)仅提供为用于口服的剂型。

可以说，只有当使用者在医院收到药物处方，且使用者将药物带回家并保管，并且以每天在特定时间服用的方式持续服用时，才会出现治疗脱发的效果。

这种用法存在使禁止暴露于育龄妇女或孕妇的脱发治疗剂的使用不便的问题。

因此，急需开发一种脱发治疗剂，其利用稳定性更高的非那雄胺，并且通过一次给药可以维持1个月以上的药效，并且由于可以皮下注射而不是口服形式给药，因此易于保管和使用。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：KR 10-2016-0002411 A1

发明内容

发明要解决的问题

本发明目的在于，提供一种包含非那雄胺的缓释型注射用组合物。

本发明的另一目的在于，提供包含非那雄胺的注射用组合物，其在以注射剂型注入时，能够长时间维持一定的血药浓度，而没有初期过度释放。

本发明的另一目的在于，提供一种能够皮下注射的剂型(而非口服剂型)，从而无需使用者保管，并且通过直接在医院给药的方法来表现出基于非那雄胺的治疗脱发和治疗良性前列腺增生的效果，以提供具有优异的保管和使用便捷性的注射用组合物。

本发明的另一目的在于，提供一种皮下注射用组合物，其能够连续维持1个月至3个月的脱发治疗效果和良性前列腺增生治疗。

本发明的另一目的在于，提供含有缓释型粒子的注射用组合物，作为包含非那雄胺的缓释型粒子，维持1个月至3个月的长期给药效果，同时以粒子的平均直径具有恒定的微尺寸的方式进行制备，由此调节药物的释放以维持恒定的有效药物浓度，并应用于由均一大小的粒子组成的注射剂，以减少向患者注射时的异物感和疼痛感。

用于解决问题的手段

为实现上述目的，本发明一实施例的包含非那雄胺的缓释型注射用组合物为包含非那雄胺的缓释型注射用组合物，注入到体内的缓释型注射用组合物持续释放非那雄胺，上述释放的非那雄胺的最大血药浓度(C

相对于给药的非那雄胺1mg，上述非那雄胺的最大血药浓度(C

相对于给药的非那雄胺1mg，上述非那雄胺的血药浓度时间曲线下面积(The areaunder the concentration，AUC

上述缓释型注射用组合物由于调节了药物的释放速率，因此没有最初的过度释放问题，并形成了达1至3个月持续释放模式，并且能够抑制DHT以及睾丸激素(Testosterone)的产生。

上述注射用组合物包含混悬溶剂，上述混悬溶剂可包含等渗剂、混悬剂以及溶剂。

上述等渗剂可选自由D-甘露醇(D-Mannitol)、麦芽糖醇(Maltitol)、山梨醇(Sorbitol)、乳糖醇(Lactitol)、木糖醇(Xylitol)、氯化钠(Sodium chloride)以及它们的混合构成的组。

上述混悬剂可选自由羧甲基纤维素钠(Sodium Carboxymethylcellulose)、聚山梨醇酯80(Polysorbate 80)、淀粉(starch)、淀粉衍生物、多元醇类、壳聚糖(chitosan)、壳聚糖衍生物、纤维素(cellulose)、纤维素衍生物、胶原(collagen)、明胶(gelatin)、透明质酸(hyaluronic acid，HA)、海藻酸(alginic acid)、藻胶(algin)、果胶(pectin)、卡拉胶(carrageenan)、软骨素(chondroitin)、硫酸软骨素(chondroitin sulfate)、葡聚糖(dextran)、硫酸葡聚糖(dextran sulfate)、聚赖氨酸(polylysine)、肌联蛋白(titin)、血纤维蛋白(fibrin)、琼脂糖(agaros)、氟醚(fluran)、黄原胶(xanthan gum)以及它们的混合构成的组。

在本发明中，术语“注射”是指使用注射器向皮内、皮下、肌内、静脉内或动脉内等注入药液。具体地，由于本发明的药物组合物表现出防止脱发或促进毛发生长的功效，因此上述注射可以是皮下注射，但不限于此。上述注射器不仅可以是通过针头给药的普通注射器，只要它是用于皮下将本发明的组合物进行给药的注射器，则可以不受限制地使用。

上述皮下组织是位于真皮层下侧的肌肉和骨骼之间的部分，并且具有包含大量脂肪的脂肪细胞，其赋予人体柔软性、轮廓，并且还可以用作能量。另外，这也意味着动脉和淋巴液的循环。

在本发明中，等渗剂(isotonicity agent)是一种向制剂赋予适当的张度(tonicity)的化合物，以防止水穿过生理上具有抗性且与制剂接触的细胞膜的净流动(netflow)。

在本发明中，给药是指通过适当的方法将规定物质引入个体。在本发明中，考虑到上述组合物的注射到个体中防止脱发或促进毛发生长的性质，所以上述给药可以为通过皮下组织的给药。

发明效果

根据本发明的包含非那雄胺的缓释型注射用组合物，以注射剂型注入时，非那雄胺的释放能够长时间维持一定的血药浓度，而没有初期过度释放，并且，以皮下注射给药时，能够持续维持1个月至3个月的脱发治疗效果。

上述注射用组合物控制药物的释放以维持恒定的有效药物浓度，且能够减少向患者以注射剂给药时的异物感和疼痛感。

另外，以能够皮下注射的剂型的方式提供(而非口服剂型)，从而无需使用者保管，并且通过直接在医院给药的方法来表现出基于非那雄胺的治疗脱发和治疗良性前列腺增生的效果，使得保管和使用便捷性更加优异。

附图说明

图1是本发明一实施例的缓释型粒子的SEM照片。

图2是本发明一实施例的缓释型粒子的SEM照片。

图3是本发明一实施例的缓释型粒子的SEM照片。

图4是根据本发明一实施例的制备的缓释型粒子的分布检测结果。

图5是关于本发明一实施例的比较例的粒子的分布检测结果。

图6是本发明一实施例的比较例的PK曲线检测结果。

图7是关于本发明一实施例的比较例的血药浓度演变。

图8是关于本发明一实施例的比较例的28天反复给药时的PK曲线。

图9是本发明一实施例的缓释型粒子的平均血药浓度曲线检测结果。

图10是本发明一实施例的缓释型粒子的平均血药浓度曲线检测结果。

图11是本发明一实施例的缓释型粒子的平均血药浓度曲线检测结果。

图12是根据本发明一实施例的注射剂组合物的非那雄胺含量的平均血药浓度曲线检测结果。

图13是用本发明一实施例的注射剂组合物进行给药后，对非那雄胺的平均血药浓度曲线以及DHT的变化率的检测结果。

图14是用本发明一实施例的口服剂型的血药浓度曲线以及DHT变化率的检测结果。

图15是用本发明一实施例的注射剂组合物进行给药后，对3个月期间的非那雄胺的平均血药浓度曲线以及DHT的变化率的检测结果。

具体实施方式

在下文中，将详细描述本发明的实施例，使得本领域普通技术人员可以容易地实现本发明。然而，本发明可以以各种不同的形式来实现，不限于在此说明的实施例。

通常，非那雄胺为用于口服的固体口服剂型，因此使用者必须在每天的特定时间服用非那雄胺剂型，并且存在需将药物保管在家中以便服用的问题。

如上所述，非那雄胺与男性荷尔蒙有关，因此被指定为育龄妇女或孕妇的禁忌药物，将脱发治疗剂暴露至育龄妇女或孕妇进行脱发治疗可能会导致男性胎儿的外生殖器异常，从而存在产下畸形儿的担忧，因此，具有在服用时需格外留意脱发治疗剂的保管或使用的不便。

另外，以固体口服剂型的方式服用的情况下，在每天服用时，会产生非那雄胺的血药浓度维持在高的状态的问题。

即就以口服剂型的方式服用的非那雄胺而言，最大血药浓度(C

为了显示服用非那雄胺的药物效果，使用者在不需要具有等同于口服剂型的最大血药浓度值的水平的情况下，可能会使使用者暴露于过度的非那雄胺的问题。

因此，就本发明而言，涉及包含非那雄胺的缓释型粒子，其可以用作注射剂型，而不是口服剂型。

具体而言，上述缓释型粒子包含非那雄胺以及生物降解性高分子，是均匀地含有非那雄胺以及生物降解性高分子的球状，上述平均直径为35至55μm。

上述缓释型粒子包含生物降解性高分子以及非那雄胺，此时，其为均匀混合生物降解性高分子以及非那雄胺的组合物而制备成完整的球状的缓释型粒子，而不是胶囊形状的剂型，其特征在于非那雄胺均匀地分布在上述缓释型粒子中。

因此，当将本发明的皮下注射用组合物注入到体内时，缓释型粒子本身被施用到体内，并且随着构成上述缓释型粒子的生物降解性高分子随时间分解，均匀地分布的非那雄胺被释放到体内。

如上所述，通过释放到体内的非那雄胺，可表现出防止脱发和促进生发的效果。

另外，由于可用作注射剂型，因此可解决以固体口服剂型提供时的保管以及使用上的问题。

上述缓释型粒子的平均直径为35至55μm，对平均直径的标准偏差为3.0至5.5μm。

本发明是通过下述缓释型粒子的制备方法而制备的缓释型粒子，如上所述，以生物降解性高分子以及非那雄胺均匀分布为特征，并且特征在于，制备的缓释型粒子以平均直径为35至55μm，且对平均直径的标准偏差为3.0至5.5μm分布。

即使制备成微小尺寸的粒子，但标准偏差也仅为3.0至5.5μm，因此可以制备成几乎相同尺寸的粒子。

就已知为使用高分子制备缓释型粒子的通常的制备方法的溶剂蒸发法而言，所制备的颗粒的直径范围是多样的，因此为了制备如本发明中的平均直径为35至55μm的粒子，制备缓释型粒子后，需将过小或过大的粒子分类并去除后使用，因此存在产率过低的问题。

相反，本发明的缓释型粒子的平均直径为35至55μm，标准偏差仅为3.0至5.5μm，可以大量生产几乎相同尺寸的缓释型粒子，因此产率优异。

当上述粒子的平均直径为35μm以下时，可能制备成所制备的缓释型粒子的直径为20μm以下的小的缓释型粒子，从而在注入人体后被巨噬细胞捕食的可能性增加，因此，有效药物的释放和体内吸收可能会受到影响。另外，当粒子的尺寸超过55μm的情况下，当进行注射时，异物感和疼痛感会增加，并且所制备的粒子的粒径分布会增大，使得难以制备具有均匀粒度的缓释型粒子。

本发明的缓释型粒子的比表面积为0.14至0.150m

另外，上述最大血药浓度(C

本发明一实施例的缓释型粒子为完整的球状，特征在于具有均匀形成的球状表面，此时，比表面积为0.14至0.150m

由于具有如上所述的比表面积值，当注入本发明的缓释型粒子时，最大血药浓度(C

就通常以口服剂型的方式服用的非那雄胺而言，在服用后1至2小时后达到有效浓度，由于药物的半衰期，以健康的成年男性为基准时建议服用3天，以保持一定的浓度。

即作为以口服剂型的方式服用的非那雄胺在服用后1至2小时后表现出最大血药浓度，此时，最大血药浓度(C

口服剂型通过服用表现出最高水平的最大血药浓度，但半衰期相对较短，不仅需要每天服用以保持有效浓度，且在服用口服剂型后，显示出高的血药浓度值，因此存在必须以高于通过服用非那雄胺显示出治疗效果的血药浓度值的方式服用的问题。

相反，本发明的缓释型粒子作为注射剂给药后，最大血药浓度为0.9至10.0μg/L，表现出通过非那雄胺的给药的治疗效果的同时，由于血药浓度值比口服剂型低，所以可以相对减少用非那雄胺进行给药而发生的副作用。

然而，由于最大血药浓度值可以根据非那雄胺的给药量而变化，因此难以对数值进行相对比较。

对此，考虑到以口服剂型的方式服用的非那雄胺通常以1mg的量进行服用，已确认上述口服剂型的最大血药浓度为42.87μg/L。

相反，可以确认，以给药量为基准，相对于1mg非那雄胺，本发明的缓释型粒子的最大血药浓度值低，为0.3～0.5μg/L。

与口服剂型相比，虽然最大血药浓度值很低，但由于长时间持续的非那雄胺的释放效果，可以抑制DHT和睾丸激素的产生，从而会显示出预防脱发以及治疗良性前列腺增生的治疗效果。

就口服剂型而言，由于非那雄胺的半衰期的影响，存在需要每天都要服用的问题，由此，最大血药浓度值持续维持在高的状态，因此具有发生副作用的问题。

相反，就本发明而言，已经证实，在与口服剂型相同地以1mg的量进行给药的条件下，表现出非常低的最大血药浓度值，从而能使副作用的发生最小化，并且通过降低血药浓度，可以最大程度地减少由于非那雄胺释放所造成的身体负担。

另外，就口服剂型而言，在初期表现出最大血药浓度值之后，显示出血药浓度值迅速降低的曲线，而本发明的注射用组合物基于缓释型粒子而具有受控的药物释放速率，可以防止初期的过度释放问题，并且，其特征在于表现出1至3个月的持续释放模式。

可以基于最大血药浓度(C

初始血药浓度值小于最大血药浓度值，则表示不会发生初期过度释放，且由于持续释放模式，最大血药浓度值与初始血药浓度值没有较大差异，可以说维持在一定范围。

本发明的缓释型粒子在注入至体内后，药时曲线下面积(The area under theconcentration，AUC

当确定血药浓度-时间曲线时，在该曲线下则会形成一个面积，该面积称为药时曲线下面积，简称为AUC。

AUC由如下式的给药剂量以及清除率而确定。

AUC＝给药剂量(dose)/清除率(clearance)

尽管上述清除率(Clearance，CLs)是模式非依赖性(model-independent)参数，但与消除速率常数(K)、分布容积(V)具有如下数学关系。

CLs＝V×K

如在该关系式中所示，清除率(clearance)和分布容积可确定药物消除速率。

当清除率(Clearance)一定时，AUC与给药量成正比，因此当药物剂量加倍时，AUC就会加倍。另一方面，根据该概念，还意味着可以通过AUC和剂量来求出清除率(clearance)。

由于通常可知根据给药量和时间的血药浓度，因此可以求出AUC，从而可以通过下式求出清除率(clearance)。

药物清除率(drug clearance)＝给药剂量(dose)/AUC

假定为单室(One-compartment)模型并进行一定剂量的药物的给药时，则AUC可以以如下方式轻易求出。

AUC＝最初浓度(Co)/消除速率常数(K)

但是，对于随时间的药物浓度的自然对数值以线性或非线性地减少的药物而言，可以通过称为“梯形法则(trapezoidal rule)”的方法求出AUC。

梯形法则(Trapezoidal rule)是将血药浓度-时间曲线被视为连接了多个梯形，由此以直线连接每个相邻的测得的血药浓度。

虽然梯形的上部是曲线，但是如果时间间隔(梯形的高度)较小，则可以将曲线假定为直线，由此所产生的误差非常小，可以忽略不计。

各梯形面积可用这种方法容易地计算，并且所有梯形面积的总和成为浓度曲线下的总面积。

AUC的计算对于计算药物清除率(clearanc)非常有用。

当通过梯形法则(Trapezoidal rule)计算AUC时，血药浓度不会被自然对数值替代。

为计算清除率(Clearanc)，需要使用时间0到无穷大的AUC。从时间0到无穷大的AUC也可通过梯形法则(trapezoidal rule)计算，该方法使用如下方式进行计算，即将从时间0到测量最后一次浓度的时间的AUC与计算出的从最后一次测量时间直至无穷大的面积相加。

AUC值大可以表明表现出相对较高的生物利用度。即在注入包含本发明的非那雄胺的缓释型粒子时，其可以作为表示吸收到体内的吸收量的指标。

就口服剂型而言，与本发明的缓释型粒子不同，在体内的吸收量相对较低。

由此表明，根据口服剂型的服用，血药浓度值高于本发明的缓释型粒子的血药浓度值，但就体内吸收率而言，由于药物的半衰期等的影响，表现出比本发明的缓释型粒子低的值。

即进行体内给药后，尽管表现出高血药浓度，但是由于停留在体内的时间短，因此存在吸收率低的问题。

相反，本发明的缓释型粒子可以在保持相对较低的血药浓度值的同时，还能长时间表现出药物释放效果，从而表现出优异的生物利用度，并且基于这种结果，可以说非那雄胺的给药效果比口服剂型更优异。

对于给药的非那雄胺1mg，上述非那雄胺的药时曲线下面积(The area under theconcentration，AUC

如上所述，考虑到非那雄胺的药时曲线下面积根据注射用组合物中所含非那雄胺的含量可能会发生差异，为了证实，排除非那雄胺含量的影响的根据缓释型粒子的影响，确认了相比于1mg非那雄胺的AUC

如上所述，可以看出，相对于给药的非那雄胺1mg为70至100(μg*h/L)，与口服剂型相比，表现出优异的非那雄胺给药效果。

通过体内注射，包含本发明的非那雄胺的缓释型粒子可以连续释放非那雄胺1至3个月。

包含本发明的非那雄胺的缓释型粒子的制备以如下顺序进行：1)制备第一混合物的步骤(S100)；2)制备第二混合物的步骤(S200)；3)将第一混合物注入到直线方向的微通道(micro channel)的步骤(S300)；4)将第二混合物注入到两侧面或一侧面的微通道的步骤(S400)；5)收集缓释型粒子的步骤(S500)；6)搅拌收集的缓释型粒子的步骤(S600)；以及7)洗涤以及干燥缓释型粒子的步骤(S700)。

以下，将对本发明一实施例的包含非那雄胺的缓释型粒子的制备方法的进行更具体的说明，具体如下。

步骤1)(S100)为制备第一混合物的步骤，是将生物降解性高分子以及非那雄胺溶于有机溶剂中来制备第一混合物的步骤，上述生物降解性高分子选自由聚乳酸、聚丙交酯、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(polylactic-co-glycolic acid)、聚丙交酯-乙交酯共聚物(PolyLactide-co-Glycolide，PLGA)、聚磷腈、聚亚氨基碳酸酯、聚磷酸酯、聚酸酐、聚原酸酯、聚己内酯、聚羟基戊酸酯、聚羟基丁酸酯、聚氨基酸以及它们的组合构成的组，优选为聚丙交酯-乙交酯共聚物(PLGA)，但不限于上述示例。

另外，上述有机溶剂是不与水相混的，例如，是选自由氯仿、氯乙烷、二氯乙烷、三氯乙烷以及它们的混合物构成的组中的一种以上，优选为二氯乙烷，但不限于上述示例，作为能够溶解生物降解性高分子以及非那雄胺的有机溶剂，不限于上述示例，本领域技术人员可以轻易选择的任何有机溶剂都将能够适用。

上述步骤1)(S100)是制备溶解生物降解性高分子以及非那雄胺的第一混合物的，如上所述，溶剂使用有机溶剂。这是利用非那雄胺以及生物降解性高分子的溶解特性，使用有机溶剂完全溶解。完全溶解后，第一混合物以2：1至15：1的重量比例包含生物降解性高分子以及非那雄胺。

当生物降解性高分子以及非那雄胺的重量比例低于2：1时，即包含低于上述重量比例的生物降解性高分子时，生物降解性高分子的重量比例相比非那雄胺的重量少，难以制备以均匀分布在球状的生物降解性高分子粒子的方式包含非那雄胺的缓释型粒子，并且当生物降解性高分子以及非那雄胺的重量比例超过15：1时，即包含超过上述重量比例的生物降解性高分子时，缓释型粒子内非那雄胺的含量少，因此为实现所需浓度的药物给药，可能出现需进行大量的缓释型粒子的给药的问题。

更具体地，上述第一混合物中包含10至20重量％的生物降解性高分子，优选15重量％，但是不限于上述示例。

上述步骤2)(S200)是制备第二混合物的步骤，将表面活性剂溶于水中来制备第二混合物。上述表面活性剂只要可以帮助生物降解性高分子溶液形成稳定的乳液(emulsion)的，则可没有限制地使用。具体地，表面活性剂是选自由非离子性表面活性剂、阴离子性表面活性剂、阳离子性表面活性剂以及它们的混合物构成的组中的任意一种以上，更具体地，是选自由甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、明胶、聚乙烯醇、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、月桂基硫酸钠、硬脂酸钠、酯胺、直链二胺、脂肪胺以及它们的混合物构成的组中的任意一种以上，优选为聚乙烯醇，但不限于示例。

上述步骤3)(S300)以及步骤4)(S400)是将第一混合物以及第二混合物注入形成在晶片(wafer)上的微通道，并使其流动的步骤。

更具体地，可以在选自由硅晶片(siliconwafer)或高分子薄膜构成的组的材料上形成微通道，但是上述材料的示例不限于上述示例，可以使用能够形成微通道的所有材料。

上述高分子薄膜可选自由聚酰亚胺(Polyimide)、聚乙烯(Polyethylene)、氟化乙烯丙烯(Fluorinated ethylene propylene)、聚丙烯(Polypropylene)、聚对苯二甲酸乙二醇酯(Polyethylene terephthalate)、聚萘二甲酸乙二醇酯(Polyethylenenaphthalate)、聚砜(Polysulfone)以及它们的混合构成组，但不限于上述示例。

作为一示例，使用电子束蒸镀机(e-beam evaporator)将铝沉积在硅晶片上，并使用光刻技术(photolithography)在铝上构图(patterning)光刻胶(photoresist)。此后，使用光刻胶作为掩模来蚀刻(etching)铝，并且在去除光刻胶之后，使用铝作为掩模通过深反应离子蚀刻(deep ion reactive etching，DRIE)来蚀刻硅，除去铝之后，在晶片上阳极键合玻璃并密封以制备上述微通道。

上述微通道的平均直径为35至55μm，优选为50μm，但不限于示例。当微通道的平均直径为35μm以下时，可能制备成所制备的缓释型粒子的直径为20μm以下的小缓释型粒子，从而在注入人体后被巨噬细胞捕食的可能性增加，因此，有效药物的释放和体内吸收可能会受到影响。另外，当所制备的缓释型粒子的尺寸超过55μm时，当进行注射时，异物感和疼痛感会增加，并且所制备的粒子的粒径分布会增大，使得难以制备具有均匀粒度的缓释型粒子。

然而，上述微通道的平均直径可根据注入压力的范围而改变。作为一示例，当通道的直径为100μm时，上述第二混合物应在1000至2000mbar的压力下注入，并且第一混合物可在200至400mbar的压力下注入。

上述微通道的平均直径与粒子的平均直径密切相关，但也与第一混合物以及第二混合物的注入压力密切相关，因此不限于上述示例，可根据所制备的粒子的平均直径或注入时的压力条件而变更。

另外，上述微通道的截面宽(w)以及截面的高(d)与所制备的缓释型粒子的平均直径(d’)有着密切地关系。如图8所示，相对于缓释型粒子的平均直径(d’)，上述微通道截面宽(w)为0.7至1.3的比例范围，相对于缓释型粒子的平均直径(d’)，微通道截面的高(d)为0.7至1.3的比例范围。

即当确定所要制备的缓释型粒子的平均直径(d’)时，只有将微通道截面宽(w)以及高(d)的长度设为平均直径(d’)的0.7至1.3比例范围，才能够制备所需尺寸的缓释型粒子。

上述步骤3)(S300)是将第一混合物注入到直线方向的微通道，并使其流动的步骤，上述步骤4)(S400)是将第二混合物注入到以与直线方向的微通道形成交叉点方式形成的两侧面或一侧面的微通道，并使其流动的步骤。

即第一混合物沿直线方向的微通道流动，第二混合物沿以上述直线方向的微通道为基准在两侧面或一侧面与直线方向的微通道形成交叉点的微通道流动，从而与第一混合物的流动实现交汇。

此时，向直线方向的微通道注入第一混合物时，以一定的压力条件注入，使得以一定的流速流动，此时的压力条件为500至1500mbar，优选为1100mbar，但不限于示例。

另外，向两侧面或一侧面的微通道注入第二混合物时，以一定的压力条件注入，使得以一定的流速流动，此时的压力条件为1500至2500mbar，优选为2200mbar，但不限于示例。

即为使与第一混合物的流动形成交叉点的第二混合物比向直线方向的微通道注入的第一混合物更快的流速流动，第二混合物在更高的压力条件下流动。

如上所述，通过改变第一混合物以及第二混合物的流速，且使第二混合物的流速比第一混合物的流速更快，由此在第一混合物的流动和第二混合物的流动交汇的点，流速相对更快的第二混合物压缩第一混合物，此时，由于第一混合物以及第二混合物的排斥力，第一混合物中的生物降解性高分子以及非那雄胺生成球状的缓释型粒子，更具体而言，形成非那雄胺均匀分布在呈球状的生物降解性高分子中的形式的缓释型粒子。

上述步骤5)(S500)是收集缓释型粒子的步骤，在装有第二混合物的水槽内收集缓释型粒子，防止初期生成的缓释型粒子间的聚集现象(aggregation)。

上述步骤5)(S500)利用在上述步骤2)(S200)中制备的第二混合物，即表面活性剂以及水的混合溶液，其中，在上述步骤2)(S200)中制备第二混合物之后，一部分注入到微通道，另一部分移动至步骤5)(S500)的水槽中，用于防止收集的缓释型粒子间的聚集现象。

上述步骤6)(S600)是搅拌在水槽内收集的缓释型粒子的步骤，以一定的温度条件以及搅拌速度搅拌缓释型粒子，蒸发去除存在于缓释型粒子的表面的有机溶剂。此时，搅拌条件以下述顺序进行：在15至20℃下以150至650rpm的速度搅拌0.5至1.5小时的一次搅拌步骤；以及在上述一次搅拌步骤之后，在35至45℃下以200至1000rpm的速度搅拌2.0至6.0小时的二次搅拌步骤；以及在上述二次搅拌步骤之后，在15至25℃下以200至1000rpm的速度搅拌0.5至1.5小时的三次搅拌步骤。

上述搅拌速度在一次以及二次搅拌步骤中以不同的搅拌速度进行，并且在二次搅拌工序中以比在一次搅拌工序更快的速度进行搅拌工序。

除了搅拌速度之外，温度条件的特征在于使二次搅拌工序的温度升高至比一次搅拌工序更高的温度并进行搅拌，并且随着温度的逐步升高，可以调节存在于缓释型粒子表面上的有机溶剂的蒸发速度。即通过使存在于缓释型粒子表面的有机溶剂逐渐蒸发，可以制备具有光滑表面的缓释型粒子。

第一混合物以及第二混合物流经微通道时的温度为15至20℃，优选为17℃。即流经微通道，并在交叉点生成缓释型粒子后，直至对收集的缓释型粒子进行一次搅拌，恒定地维持15至20℃的低温。只有在缓释型粒子的制备过程中维持低温，才能够制备并维持球状的粒子。即在非低温的条件下，会发生难以制备一定的球状的粒子的问题。

最后，上述步骤7)(S700)是洗涤以及干燥缓释型粒子的步骤，将通过搅拌去除了表面的所有有机溶剂的缓释型粒子，用除菌过滤的纯净水洗涤多次，以去除残留在缓释型粒子的表面活性剂，之后冷冻干燥。

最终生成的缓释型粒子是非那雄胺药物均匀分布在球形的生物降解性高分子缓释型粒子的形式，以2：1至15：1的重量比例包含生物降解性高分子以及非那雄胺。

包含在缓释型粒子内的生物降解性高分子以及非那雄胺的重量比例与在第一混合物中的重量比例相同，即在制备缓释型粒子并蒸发所有有机溶剂后，可以制备以与在第一混合物内的重量比例相同的比例含有生物降解性高分子以及非那雄胺的缓释型粒子。

本发明的另一实施例的含包含非那雄胺的缓释型粒子的注射用组合物，可包含含非那雄胺的缓释型粒子以及混悬溶剂。

上述注射用组合物为缓释型粒子均匀地包含在混悬溶剂中的形式，并且当施用注射用组合物时，将缓释型粒子本身注入至体内，从而表现出长期的非那雄胺的给药效果。

更具体而言，当缓释型粒子注入体内时，通过生物降解性高分子的分解而表现出非那雄胺的释放效果，此时，由于本发明的缓释型粒子为生物降解性高分子以及非那雄胺均匀混合的形式，因此可表现出长时间恒定浓度的非那雄胺的给药效果。

即利用本发明的注射用组合物注射一次时，非那雄胺在体内持续释放1个月至3个月之久，由此解决了需每天服用的问题，并提高了使用者的便利性。

上述混悬溶剂包含等渗剂、混悬剂(Suspending agents)以及溶剂。

更具体而言，上述等渗剂可选自由D-甘露醇(D-Mannitol)、麦芽糖醇(Maltitol)、山梨醇(Sorbitol)、乳糖醇(Lactitol)、木糖醇(Xylitol)、氯化钠(Sodium chloride)以及它们的混合构成的组，优选为D-甘露醇，但不限于上述示例。

上述混悬剂可选自由羧甲基纤维素钠(Sodium Carboxymethylcellulose)、聚山梨醇酯80(Polysorbate 80)、淀粉(starch)、淀粉衍生物、多元醇类、壳聚糖(chitosan)、壳聚糖衍生物、纤维素(cellulose)、纤维素衍生物、胶原(collagen)、明胶(gelatin)、透明质酸(hyaluronic acid，HA)、海藻酸(alginic acid)、藻胶(algin)、果胶(pectin)、卡拉胶(carrageenan)、软骨素(chondroitin)、硫酸软骨素(chondroitin sulfate)、葡聚糖(dextran)、硫酸葡聚糖(dextran sulfate)、聚赖氨酸(polylysine)、肌联蛋白(titin)、血纤维蛋白(fibrin)、琼脂糖(agares)、氟醚(fluran)、黄原胶(xanthan gum)以及它们的混合构成的组，优选为羧甲基纤维素钠以及聚山梨醇酯80，但不限于上述示例。

上述溶剂可使用注射用水(Injection water)，但可以无限制地使用可以用作注射用水的溶剂。

制备例1

含包含非那雄胺的缓释型粒子的皮下注射用组合物的制备

1.包含非那雄胺的缓释型粒子的制备(实施例1)

将聚丙交酯-乙交酯共聚物(PLGA)以及非那雄胺溶于二氯甲烷(dichloromethane)中以制备第一混合物。此时，在第一混合物内以15重量％的比例包含聚丙交酯-乙交酯共聚物，聚丙交酯-乙交酯共聚物以及非那雄胺的重量比例为2：1。

将作为表面活性剂的聚乙烯醇混合于水中，制备了以0.25重量％包含聚乙烯醇的第二混合物。

将上述第一混合物以及第二混合物注入形成在硅晶片上的微通道中以使其流动。此时，为了使第一混合物以及第二混合物以一定的流速流动，使第一混合物在1100mbar的压力条件下流动，并且使第二混合物在2200mbar的压力条件下流动。温度条件维持在17℃。

在装有第二混合物的水槽内收集了在上述第一混合物的流动以及第二混合物的流动交汇的交叉点生成的缓释型粒子。将在上述水槽内收集的缓释型粒子在17℃下以200至400rpm的速度搅拌1小时以进行一次搅拌，并将温度上升至43℃以300至800rpm的速度搅拌4小时以进行二次搅拌，在20℃下以200至1000rpm的速度搅拌1小时以进行三次搅拌。

将完成搅拌的缓释型粒子用除菌过滤的纯净水洗涤多次，冷冻干燥后制备了缓释型粒子。

实施例2

除了以9：1的重量比例包含聚丙交酯-乙交酯共聚物以及非那雄胺之外，以与实施例1形同的方法制备。

实施例3

除了以12：1的重量比例包含聚丙交酯-乙交酯共聚物以及非那雄胺之外，以与实施例1形同的方法制备。

2.皮下注射用组合物的制备

以一小瓶(Vial)为基准，将以上述实施例1至3制备的缓释型粒子添加至2.0ml混悬溶剂中，然后均匀地进行混悬以制备皮下注射用组合物。

上述混悬溶剂以如下表1的组成构成。

[表1]

实验例1

缓释型粒子的性状探讨

为探讨本发明一实施例的缓释型粒子的性状，通过SEM照片探讨了所制备的缓释型粒子的性状。

图1至3涉及本发明一实施例的缓释型粒子的SEM照片，可以看出生成了完全球状的缓释型粒子。

作为比较例，与本发明的缓释型粒子的制备方法不同，利用溶剂蒸发法制备了缓释型粒子。将非那雄胺以及生物降解性高分子以与制备例1相同的方式混合，并注入注射器(Syringe)中以制备颗粒。

此时，搅拌条件以40℃、4hr以及1000rpm的条件进行，并制备粒子。

根据实施例1至3以及比较例制备的缓释型粒子的分布的结果如图4和图5。

实施例1至3的3次检测结果如下表2。

[表2]

粒子的直径测量结果如上表2，确认到，根据测量结果的平均直径的标准偏差分别为5.10μm、3.39μm以及4.65μm。

上述测量的结果可以看出，根据图4和表2的结果，通过本发明的制备方法制备的缓释型粒子被制备成具有相似尺寸的粒子。

另外，通过粒子分析测得的比表面积(m

相反，就比较例而言，确认了显示出如下表3的粒子分布。

[表3]

如上述实验结果，确认了制备的粒子存在各种尺寸，且标准偏差为28.76μm，通过数值证实了粒子分布。

另外，制备的粒子的比表面积(m

实验例2

药代动力学特性评价

确认了本发明的包含非那雄胺的缓释型粒子以及包含该缓释型粒子的注射剂型的药代动力学评价。

评价通过以下方式进行：在向比格犬单次给药非那雄胺1mg口服剂型(保法止(Propecia))(作为比较例)和本发明的实施例1至3的剂型后，利用LC-MS/MS对血液中的非那雄胺的浓度进行定量。

药代动力学(Pharmacokinetics，PKs)分析利用

用于分析的主要设备以及装置如下。

微量天平(Micro balance)，SI-234，丹佛仪器公司(DENVER INSTRUMENT)离心机(Centrifuge)，离心机(Centrifuge)5424，艾本德(Eppendorf)

旋涡混匀仪(Vortex mixer)，Genie-2型(Model Genie-2)，科技工业公司(Scientific Industries)

自动移液器(Auto pipette)，20μL、100μL、200μL、1000μL(Research plus)，艾本德(Eppendorf)

螺旋帽(Screw caps)，Microsolve公司

小瓶(Vials)，螺旋盖(Screw top)300μL，Microsolve公司

注射器分配器(Syringe dispenser)，PB-600，汉密尔顿公司(HAMILTON COMPANY)

超声波清洗机(Ultrasonic cleaner)，3510E-DTH，必能信(BRANSONIC)

高效液相色谱(HPLC)，安捷伦科技1290英飞迪Ⅱ(Agilent Technolgies1290InfinityⅡ)，安捷伦(Agilent)

质谱仪(Mass spectrometer)，6490三重四极杆质谱仪(6490Triple Quad LC/MS)，安捷伦科技(Agilent Technologies)

数据处理系统(Data processing system)，质量猎人工作站B0.7版本(Masshunter Workstation Ver B.07)(安捷伦(Agilent))

LC-MS/MS条件如下。

高效液相色谱(HPLC)，安捷伦科技1290英飞迪Ⅱ(Agilent Technolgies1290InfinityⅡ)，安捷伦(Agilent)

柱(Column)：菲罗门C18(Phenomenex Kinetex C18)，1.7μm(100mm x2.1mm，内径(I.D.))

柱温(Column temperature)：40±0.5℃

流动相(Mobile phase)：(A)蒸馏水(DW)中0.1％甲酸(0.1％Formic acid in DW)(B)100％甲醇(Methanol)

等度洗脱流动相(Isocratic elution mobile phase)A：B(40：60，v/v)

流速(Flow rate)：0.2mL/min

进样量(Injection volume)：5μL

样品盘温度(Sample tray temperature)：10±5℃

喷油器清洗液强(Injector wash solution strong)：70％甲醇(Methanol)

喷油器清洗液弱(Injector wash solution weak)：30％甲醇(Methanol)

采集时间(Acquisition time)：8分钟(min)

自动进样器运行时间(Autosampler run time)：8分钟(min)

(DW：蒸馏水(distilled water))

质谱仪(Mass spectrometer)，6490三重四极杆质谱仪(6490Triple Quad LC/MS)，安捷伦科技(Agilent Technologies)

电离(Ionization)：阳离子电喷雾(Positive ion electrospray)(ESI+)

模式(Mode)：MRM

气体温度(Gas temperature)：200℃

气体流量(Gas flow)：14L/min

雾化器(Nebulizer)：20psi

毛细管(Capillary)：3000V

图6显示了单次口服保法止(ID01-03)的PK曲线。另外，图7显示了单次给药保法止后非那雄胺的血药浓度随时间的变化。

下表4中显示了对照药物给药组的PK参数。使用

根据直至给药后最后一个可测量的采血点的血浆浓度计算出的AUC

[表4]

为了与本发明的注射剂型进行比较，在PK研究(PK Study)中通过基于重复施用保法止1mg(每日一次，QD)的结果设定28天重复施用方案的模拟结果如图8。

另外，将本发明的实施例1至3的注射剂施用于比格犬并确认非那雄胺的血药浓度曲线的结果如图9至11。

详细的PK数据如下表5。

[表5]

根据上述比较例和实施例1至3的测量结果确认到，就口服剂型而言，非那雄胺的最大血药浓度值大于实施例1至3的血药浓度，但是AUC

另外，关于药效是否持续28天，比较例1必须每天服用才能够维持可维持药效的有效血药浓度，而在本发明的制备例1至3中，以维持有效血药浓度的方式持续了28天之久的药效。

制备例2

含包含非那雄胺的缓释型粒子的皮下注射用组合物的制备

以与上述制备例1相同的方法制备缓释型粒子后，制备成皮下注射用组合物。

此时，以一小瓶为基准，以包含10％(实施例1)、20％(实施例2)、40％(实施例3)、60％(实施例4)和100％(实施例5)的非那雄胺的方式制备了缓释型粒子。

实验例3

利用制备例2制备的缓释型粒子的药代动力学特性评价

在制备例2中制备的实施例1至3与上述药代动力学评价试验相同，追加了关于实施例4以及5的结果，具体如下表6。

[表6]

上述结果为关于AUC

在图12中，曲线1为实施例1的血药浓度，曲线2为实施例2的血药浓度，曲线3为实施例3的血药浓度，曲线4为实施例4的血药浓度以及曲线5为实施例5的血药浓度。

如图12所示，由于所给药的注射剂组合物中所含非那雄胺的含量不同，因此会出现血药浓度值的差异，但是从药物浓度的曲线可确认不会引起初期过度释放问题，不仅如此，可确认表现出了一个月之久的持续的非那雄胺的释放。

另外，可以根据DHT生成抑制的效果，确认基于非那雄胺的释放的防止脱发和良性前列腺增生的效果。

上述DHT生成抑制效果，以在进行实验之前的比格犬的平均血液DHT浓度为100％来测量浓度变化率(％)。

该实验结果如图13，图13示出实施例5的1个月的血药浓度和DHT的生成抑制，由于1个月的持续的非那雄胺的释放，对于DHT表现出生成抑制效果。

图14是根据保法止(1mg QD)的重复给药的血药浓度值和DHT的生成抑制效果的测量结果。

根据上述实验结果可确认，口服剂型在给药时发生初期过度释放，之后血药物浓度随时间迅速下降，因此DHT抑制效果也消失了。因此，存在必须每天重复口服的麻烦。

图15是在用本发明的缓释型粒子进行给药后确认药物是否持续释放3个月的结果，确认了在3个月期间内能释放一定程度的药物(没有非那雄胺的过度释放)，且还维持了DHT生成抑制效果。

图13至图15中，“DHT水平”意指相对于基线值的DHT的水平。

尽管已经在上面详细说明了本发明的优选实施例，但是本发明的范围不限于此，本领域技术人员利用所附权利要求书中限定的本发明的基本构思的各种变形和改良形式也属于本发明的权利范围。