一种介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种生物医用材料领域，特别是一种介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针及其制备方法。

背景技术

微针给药是一种结合皮下注射与皮肤贴片双重优点的微侵袭透皮给药方式。微针刺穿皮肤表皮的角质层后形成了微小通道，药物沿着该通道进入皮肤，提高了其渗透率和在特定部位的蓄积；同时微针又不触及分布有痛觉神经的真皮层，从而不会引起疼痛，也不会引起皮肤损伤；所以微针给药是一种安全、有效、无痛感的经皮给药方式。微针以其高效、安全、无痛感等优势在经皮给药领域中得到了广泛的应用。

可溶性微针是以可溶性、可降解高分子材料制备的微针。在给药过程中，药物在可溶性微针中高分子材料溶解或者降解后被释放出来。可溶性微针比不可溶性微针具有更好的生物相容性及更大的载药量，受到了越来越多的关注和研究。

纳米颗粒主要包括乳胶体、聚合物、陶瓷颗粒、金属颗粒和碳颗粒。无毒无害的、具有良好的生物安全性的纳米颗粒可作为药物载体，提高药物的利用度，近些年成为研究的热点。介孔聚多巴胺纳米颗粒具有良好的生物相容性、近红外吸收性能、清除氧化自由基、表面具有介孔结构和丰富的官能团，可用来负载糖皮质激素类药物，提高糖皮质激素的生物利用度。

口腔溃疡是发生在口腔黏膜上的常见病、多发病。发病人群广泛，男女及各年龄阶段均可发病。由于病因不明确，目前临床上的治疗以局部对症治疗为主。然而，由于口腔环境特殊，局部用药会受到唾液的冲刷、咀嚼肌群运动以及不自觉的吞咽运动的影响，药物在口腔黏膜上停留时间较短，作用于病变部位的时间不足，局部有效药物浓度低，因而疗效欠佳。采用曲安奈德注射液直接对溃疡基底部进行局部注射，溃疡发生时本身就带有明显的疼痛，局部注射时引起的疼痛导致患者依从性变差，从而降低治疗效果。

中国专利公开号CN115252535A中公开了一种载糖皮质激素的可溶性微针，由背衬层和微针阵列一体成型，内含糖皮质激素类药物和一种可溶性聚合物。但在疾病治疗过程中，由于糖皮质激素类药物本身水溶性差，生物利用度低，可进入皮肤或黏膜的药物的数量少，难以高效地发挥糖皮质激素类药物的治疗作用，从而造成糖皮质激素类药物的过度使用；并且长期使用糖皮质激素类药物会导致一系列的药物副作用。上述发明可溶性微针中只使用了一种可溶性聚合物，没有充分发挥微针这一制剂类型的联合用药功能。

发明内容

本发明的目的在于提供一种介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针及其制备方法，以解决现有技术中糖皮质激素类药物的生物利用度低而导致药物的初始剂量多或使用周期长，或引发一系列副作用，以及单一可溶性聚合物未充分发挥微针载体联合用药的问题。

为实现本发明目的技术解决方案，本发明提供一种介导载糖皮质激素类药物的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针，包括背衬层和微针阵列，背衬层和微针阵列一体成型，内含载糖皮质激素类药物的介孔聚多巴胺纳米颗粒和两种可溶性聚合物。

进一步，糖皮质激素类药物独立选自曲安奈德、倍他米松21-磷酸钠、倍他米松17，21-二丙酸酯或地塞米松磷酸钠，或其组合。在本发明中，优选的实施例中，糖皮质激素类药物选自曲安奈德。

在本发明中，微针的载药量是有具体限定的，它可以是生物相容性实验中的安全计量范围。优选的，载糖皮质激素类药物的介孔聚多巴胺纳米颗粒的质量浓度为0.1-2mg/mL。在本发明优选的实施例中，载糖皮质激素类药物的介孔聚多巴胺纳米颗粒的质量浓度100μg/mL。

可溶性聚合物需具有良好的水溶性和生物相容性材料，选自透明质酸、透明质酸钠、白芨多糖、明胶、丝素蛋白(蚕丝蛋白)、糊精、羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、软骨硫磺素、葡聚糖、海藻酸钠、支链淀粉、麦芽糖、聚Υ-谷氨酸或聚乙烯吡咯烷酮、或其组合。优选的，可溶性聚合物选自透明质酸钠和白芨多糖。通常情况下，低分子量聚合物在水中可以快速溶解。因此，本发明优选采用择重均分子量为5～100kDa的透明质酸钠，更优选的透明质酸钠的重均分子量为5～10kDa。

透明质酸钠的质量浓度为300mg/mL。

上述介导载糖皮质激素类药物的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针的技术方案中，微针的形状和微针中微针的密度等可根据实际应用需求通过调整微针模具的尺寸进行调整。微针主体呈棱锥形，圆锥形，类圆锥形，为了保持该微针的机械强度，微针长度为300-1000μm，微针的底面直径与微针高度之比为1:(2-3)，相邻微针针尖间距为500-1200μm。优选的，微针长度为700μm，底径为300μm，相邻所述微针针尖间距为600μm。

相应的，本发明提供一种介导载糖皮质激素类药物的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针的制备方法，具体包括以下步骤：

S1、在60mL乙醇和65mL去离子水的混合溶液中加入0.36g

S2、将S1中制备的介孔聚多巴胺纳米颗粒在超声震动下使其均匀地分散在甲醇中；在油浴45℃，900r/min磁力搅拌下，逐滴加入糖皮质激素甲醇溶液，介孔聚多巴胺纳米颗粒：糖皮质激素＝1:(0.5-2)，反应维持3-6小时；随后使用甲醇洗涤粗产物至少3次，以去除未结合的糖皮质激素类药物；最后真空干燥得到载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒。

S3、将载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒在超声震动下均匀地分散在双蒸水溶液中，再加入两种可溶性聚合物，得到含有载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性聚合物水溶液；

S4、将微针模具放入超声波清洗机清洗；

S5、将清洗后的模具注满超纯水，至真空环境中15-30分钟后，吸出模具中的多余水分；

S6、将S3得到的含载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性聚合物水溶液填入微针模具；

S7、将步骤S6得到的微针模具置于超声波清洗机中，超声震动10-45分钟后取出；

S8、常温下干燥剥离，得到介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针。

在步骤S1中，介孔聚多巴胺纳米颗粒的洗涤次数应根据具体的离心速度和时间、溶剂体积等因素决定，至少3次，最终应达到上清接近无色的效果。

在步骤S2中，载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的洗涤次数应根据具体的离心速度和时间、溶剂体积等因素决定，至少3次，最终应达到上清中不含有糖皮质激素的效果。

在制备载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒时，通过测定上清中糖皮质激素剩余的质量，来计算包封率和载药率。作为优选，在步骤S2中，介孔聚多巴胺颗粒：糖皮质激素为1:1。

在步骤S4中，模具超声波清洗，可以去除模具微针孔径内的污染物，以便于包含药物的可溶性水溶液充分填入模具。超声清洗的时间没有特别需求，只要满足清洗目的即可。优选的，超声清洗时间为10-30分钟，更优选的清洗时间为15分钟。

作为优选，在步骤S5中真空条件常温下-0.08MPa。而合适的真空环境对于本发明药物的可溶性水溶液充分填入模具非常重要，不合适的预处理条件会使得微针没有足够的机械强度。

超声波震动可以使得含有药物的可溶性聚合物水溶液可以填满整个模具，从而使微针获得足够的机械强度。在实际的制备过程中，可根据所处的地理环境，选择合适的超声震动时间。优选的，步骤S7中，超声震动时间为10-45分钟。当室内环境比较干燥，温度较高时，超声震动时间不低于10分钟。当室内环境阴冷，潮湿，可以适当延长超声震动的时间。但时间的把握主要取决于，超声波清洗机震动时水温的变化。时间过长，超声机器产热，导致微针模具中的微针溶液干燥，不利于微针溶液进入模具的针体部分，更不利于脱模。

在步骤S6与步骤S7中，微针及背衬层是一次性填满的。也可以采用分步填满的方式进行。在一实施例中，可以先将步骤S3中制得的含有药物的可溶性聚合物水溶液填入模具中，刮去多余的溶液，置于超声波清洗机中，超声震动30分钟后取出；再向模具中填入含有药物的可溶性聚合物水溶液(制作背衬层)刮去多余的溶液，置于超声波清洗机中，超声震动20-30分钟后取出；再按照相同的步骤S8进行。

此外，在步骤S8中，干燥剥离的时间为24-72小时。更进一步的，干燥时间为24-48小时。

相应的，本发明提供的介导载糖皮质激素类药物的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针可以用于在治疗口腔溃疡。口腔溃疡主要包括复发性阿弗他溃疡，创伤性溃疡，放化疗引起的口腔溃疡，白塞病导致的口腔溃疡。

本发明与现有技术相比，其显著优点是：

1、与现有微针相比，采用本发明的提供的介导载糖皮质激素类药物的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针，借助介孔聚多巴胺纳米颗粒良好的载药能力，增加了糖皮质激素进入黏膜组织的浓度，提高了糖皮质激素的生物利用度；借助介孔聚多巴胺纳米颗粒能够清除氧化自由基的优点，辅助治疗口腔溃疡。并且，含有两种可溶性聚合物，充分发挥微针这一给药系统的联合用药作用。治疗过程中，应用少量糖皮质激素即可达到治疗目的，减少药物的副作用，降低成本，增加患者的依从性；

2、本发明提供的介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针具有良好的机械强度，还具有快速溶解特性，这些特点有利于该微针刺穿口腔黏膜、快速释放药物，使用该微针可有效替代黏膜下的局部注射，降低患者疼痛感，实现快速无痛的药物递送；同时，该微针使用的可溶性聚合物为生物相容性良好的高分子材料，具有作为药物递送的安全载体的潜力，该微针使用的载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒通过细胞实验验证了其安全浓度范围，并通过动物实验证实两种可溶性聚合物与载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒在生物体内相互作用，促进伤口快速愈合；

3、本发明提供的介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针制备方法，操作简单，条件温和，有利于大规模工业生产，同时，载药量可根据实际应用需求灵活调整。

附图说明

图1是本发明制备介导载糖皮质激素类药物的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针的制备方法示意图；

图2是本发明的制备介孔聚多巴胺纳米颗粒和载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的图片：

其中图2A是实施例1步骤S1中制备介孔聚多巴胺纳米颗粒的透射电镜图和粒径分布图；图2B是实施例1步骤S2中制备载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的透射电镜图和粒径分布图；图2C是介孔聚多巴胺纳米颗粒与糖皮质激素以不同质量比进行负载的包封率和载药率；图2D是对比例1制作得到的载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的透射电镜图；

图3是不同浓度的纳米颗粒和可溶性微针的生物安全性实验：

其中图3A是介孔聚多巴胺纳米颗粒的生物安全性实验图片；图3B是载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的生物安全性实验图片；图3C是载介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针的生物安全性图片；图3D是介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针的生物安全性实验图片；

图4是不同制备条件下制备的微针图片：

其中图4A是实施例1制作的微针照片；图4B是实施例2制作的微针照片；图4C是实施例3制作的微针照片；图4D是对比例2制作的微针图片；图4E是对比例3制作的微针图片；

图5是本发明的介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖可溶性微针扫描电镜图；

图6是本发明制备的可溶性微针的应用示意图；

图7是本发明可溶性微针透皮效果图；

图8是本发明可溶性微针溶解实验图；

图9是本发明提供的介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针应用于大鼠口腔溃疡模型的疗效结果图：

其中图9A是本发明提供的分别在建模时、建模后第一天、治疗第三天、治疗第五天、治疗第七天不处理阴性对照组、0.1％曲安奈德口腔软膏局部外用阳性对照组、透明质酸钠-白芨多糖微针组、负载介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组、介导载曲安奈德的介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组的大体照片；图9B是治疗第三天、治疗第五天、治疗第七天不处理阴性对照组、0.1％曲安奈德口腔软膏局部外用阳性对照组、空白透明质酸钠-白芨多糖微针组、负载介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组、介导载曲安奈德的介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组疗效示意图；

图10是本发明应用于动物实验的H&E染色病理图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

本发明实施例中采用的主要仪器：磁力搅拌器(大龙兴创实验仪器有限公司，中国北京)；超声清洗机(新智生物科技有限公司，中国浙江)；扫描电子显微镜(VEGA3,TESCAN,Czechia)；真空干燥箱(北京中兴伟业世纪仪器有限公司)；

本发明实施例中采用的主要试剂：1,3,5-三甲苯(TMB,Mw 120.19g/mol,AR,97％)、1,3,5-Trimethylbenzene(Tris,Mw 121.14g/mol，≥99.9％)、盐酸多巴胺(Mw189.64g/mol,98％)和曲安奈德(TA)购自阿拉丁试剂有限公司(中国上海)；

本发明实施例中采用的CCK-8细胞实验：人正常口腔上皮角质形成细胞(实验室自提取)；完整培养基包括Dulbecco's Modified Eagle培养基(DMEM,BiologicalIndustries,Israel)、10％的胎牛血清(FBS,Solarbio,中国北京)和1％的青霉素/链霉素(Biological Industries，以色列)。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)购自Absin BioscienceInc.(中国上海)。

本发明实施例中采用的动物模型：自济南鹏跃实验动物育种中心(中国山东)购买成年Sprague Dawley大鼠(SD，雄性，～150g)，并在青岛大学实验动物中心维持在特异性无病原体(SPF)状态。该动物方案由青岛大学附属青岛口腔医院伦理委员会审查(合同授权2021KQYX031)。所有实验均按照实验动物护理和使用指南的说明进行。微针制备：

实施例1

按照如图1所示步骤，进行微针制备：

S1、在60mL乙醇和65mL去离子水的混合溶液中加入0.36g

S2、将S1中制备的介孔聚多巴胺纳米颗粒在超声震动下使其均匀地分散在甲醇中；在油浴45℃，900r/min磁力搅拌下，逐滴加入糖皮质激素甲醇溶液，介孔聚多巴胺纳米颗粒：糖皮质激素＝1:(0.5-2)，反应维持3-6小时；随后使用甲醇洗涤粗产物至少3次，以去除未结合的糖皮质激素类药物；最后真空干燥得到载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒。

S3、将载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒在超声震动下均匀地分散在双蒸水溶液中，再加入两种可溶性聚合物，得到含有载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性聚合物水溶液；

S4、将微针模具放入超声波清洗机清洗；

S5、将清洗后的模具注满超纯水，至真空环境中15-30分钟后，吸出模具中的多余水分；

S6、将S3得到的含载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性聚合物水溶液填入微针模具；

S7、将步骤S6得到的微针模具置于超声波清洗机中，超声震动10-45分钟后取出；

S8、常温下干燥剥离，得到介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针。

如图2A所示，得到的介孔聚多巴胺纳米颗粒通过透射电镜(TEM)观察到，介孔聚多巴胺纳米颗粒具有单分散的球形结构，表面具有明显的介孔结构；粒径范围为142～531nm。

如图2B所示，得到的载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒通过透射电镜(TEM)观察到，载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒具有单分散的球形结构，表面介孔结构相比于介孔聚多巴胺纳米颗粒更趋于平坦；粒径范围为142nm到717nm。载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒粒径尺寸的增大意味着一些糖皮质激素被负载到介孔聚多巴胺纳米颗粒表面上。

如图2C所示，采用介孔聚多巴胺纳米颗粒和糖皮质激素的不同质量比制备载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒，综合比较包封率和载药量，最终选择1:1为最佳。

如图4A所示，得到的背衬层及微针都含有药物成分，针体完整均匀，呈棕褐色。如图5所示，扫描电子显微镜(SEM)下看到每根微针均竖立，完整，为模具的圆锥状。

实施例2

制备操作方法与实施例1基本相同，不同之处仅在于，步骤S3中微针基质溶液中只含有透明质酸钠和白芨多糖两种可溶性聚合物，不含有载曲安奈德的介孔聚多巴胺纳米颗粒。

如图4B所示，微针贴片制作过程中，微针基质溶液中只含有透明质酸钠和白芨多糖两种可溶性聚合物，不含有载曲安奈德的介孔聚多巴胺纳米颗粒，制作完成脱模后的微针在镜下针体完整，呈透明状。

实施例3

制备操作方法与实施例1基本相同，不同之处仅在于，微针基质溶液中含有透明质酸钠和白芨多糖两种可溶性聚合物，以及100μg/mL介孔聚多巴胺纳米颗粒。

如图4C所示，微针制作过程中，微针基质溶液中含有透明质酸钠和白芨多糖两种可溶性聚合物，以及空白介孔聚多巴胺纳米颗粒，脱模后，微针形态完好，针体完好，呈棕褐色。

对比例1

制备操作方法与实施例1基本相同，不同之处仅在于，步骤S2中磁力搅拌器的速度为400r/min。

如图2D所示，磁力搅拌的速度较低使得制备的载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒直径大小不均一，形状不规则，表面介孔结构不能充分负载药物。

对比例2

制备操作方法与实施例1基本相同，不同之处仅在于，步骤S3中真空条件改为-0.07MPa。

如图4D所示，不合适的真空环境使得制备的微针产生了气泡，微针容易折断，影响正常使用。

对比例3

制备操作方法与实施例2基本相同，不同之处仅在于，透明质酸(HA)：白芨多糖(BSP)改为1:2。

如图4E所示，微针在脱模时，由于透明质酸浓度低，24-72h内微针贴片无法完全干燥，脱模需要时间较长。

生物安全性实验：

分别将实施例1中步骤S1、S2和S8制备的介孔聚多巴胺纳米颗粒和载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒、介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针和实施例3中制备的载介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针采用标准CCK-8试验方法测定生物安全性。将人口腔角质形成细胞(HOK)以每孔3×10

如图3A和3B所示，介孔聚多巴胺纳米颗粒和载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒在质量浓度为100μg/mL以内具有良好的生物安全性；如图3C和3D所示，载介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针和介导载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒的可溶性微针载质量浓度为2mg/mL以内具有良好的生物安全性。

微针机械强度试验：

取实施例1制得可溶性微针贴片垂直均匀的插入大鼠舌腹部3分钟，然后轻轻取出，如图7所示，大鼠舌腹部有均匀的针孔。

微针溶解度试验：

取实施例1制得可溶性微针贴片分别垂直均匀的插入3只大鼠舌腹部15秒，30秒，1分钟，3分钟。取出的微针贴片放置于普通光学显微镜下观察微针溶解情况。如图8所示，微针插入15秒后，针尖部分迅速溶解，接近针头总长度的30％。30秒后，微针针体约溶解至总长度的50％。1分钟后，微针针体约溶解至总长度的70％。3分钟后，仅剩下微针的基底部。因此，本发明制得的微针可以在3分钟内迅速溶解。

疗效评估：

受试对象：雄性成年SD大鼠，通过苯酚溶液化学烧灼建立口腔溃疡大鼠模型，具体如下：大鼠用注射1％戊巴比妥钠溶液麻醉，然后将大鼠的舌腹粘膜用浸泡的90％苯酚溶液烧灼60秒。第二天，检查大鼠溃疡表面形成情况并用数码相机拍照。

动物分组：将建立的口腔溃疡的大鼠按治疗方式分为不处理阴性对照组(3只)、0.1％曲安奈德口腔软膏局部外用阳性对照组(3只)、透明质酸钠-白芨多糖微针组(3只)、负载介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组(3只)、介导载曲安奈德的介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组(3只)。

其中除不处理阴性对照组(Control)外，其余各组的制备方法如下：

治疗方案：

不处理阴性对照组不予任何处理；

0.1％曲安奈德口腔软膏局部外用阳性对照组(Ning Zhi

透明质酸钠-白芨多糖微针组(HA/BSP MNs)给予微针按压压溃疡处3分钟，第一天一次，余下6天内不处理；

负载介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组(MPDA-HA/BSP MNs)如图6所示予以相应微针及膜按压溃疡处3分钟，第一天一次，余下6天内不处理；介导载曲安奈德的介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组(TA@MPDA-HA/BSP MNs)予以相应微针及膜按压溃疡处3分钟，第一天一次，余下6天内不处理。

实验结果：在第0天，第1天，第3天，第5天和第7天用数码相机检查溃疡表面并拍照以进行进一步分析。在第7天，处死所有大鼠并将舌部组织进行组织学观察。

如图9所示，为微针的治疗效果图：其中图9A所示不处理组的溃疡仍未愈合，面积仍较大，上皮仍缺失；0.1％曲安奈德口腔软膏局部外用阳性对照组和透明质酸钠-白芨多糖微针组溃疡面积较前稍有减小，但仍有大量黏膜表面渗出；负载介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组在第七天溃疡面积较小，未见明显渗出；介导载曲安奈德的介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组在第七天时溃疡基本愈合，黏膜表面完整，无明显炎症反应，说明介导载曲安奈德的介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针具有更好的治疗效果。如图9B所示，为微针治疗后第三天，第五天，第七天的效果示意图，介导载曲安奈德的介孔聚多巴胺纳米颗粒的透明质酸钠-白芨多糖微针组治疗效果一直优于其它各组效果。

如图10所示，对处死后的大鼠舌部组织进行H&E染色显示，不处理组显示上皮脱落，大量嗜中性粒细胞和浆细胞浸润在粘膜下层，两者均为炎性细胞。纤维蛋白层直接与溃疡区域接触，导致伤口愈合过程较慢，没有胶原蛋白再生和上皮化的证据。在1％曲安奈德口腔软膏组，显示组织的上皮缺乏连续性，角质层仍有缺失。在HA/BSP MNs组中，上皮愈合缺乏连续性，基底膜增厚，少量炎性细胞浸润。在MPDA-HA/BSP MNs组和TA@MPDA-HA/BSPMNs组中，我们可以明显看出，溃疡没有显著的炎症反应，上皮愈合，基底膜完整，并且与对照组相比，胶原再生更好。与正常组织相比，MPDA-HA/BSPMNs组的基底膜稍有增厚，而TA@MPDA-HA/BSPMNs组的愈合最好，组织学上倾向于正常组织。这是因为微针的组成是载糖皮质激素的介孔聚多巴胺纳米颗粒、透明质酸钠和白芨多糖两种可溶性聚合物，都起到促进伤口愈合的作用。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的仅为本发明的优选例，并不用来限制本发明，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。