一种面部自体胶原种子复合液

技术领域

本发明涉及医疗美容技术领域，具体而言，涉及一种面部自体胶原种子复合液。

背景技术

皮肤的真皮层的主要细胞是成纤维细胞，成纤维细胞和其分泌的胶原纤维、弹力纤维及基质成分共同构成了皮肤的真皮层，也是保证人们皮肤紧致的关键所在。然而，绝大部分人随着年龄的增长，胶原蛋白会逐渐流失并使胶原纤维和弹力纤维的数量减少，而成纤维细胞分泌胶原纤维和弹力纤维的速度无法与胶原纤维和弹力纤维减少的速度匹配，皮肤变得不再紧致、松弛，甚至出现各种皱纹。日常生活中，人们通常会采用多种措施对抗衰老，以便长期保持肌肤紧致的状态，除了运动健身提高机体代谢外，护肤品或医疗美容产品是人们经常使用的，但目前市面上繁复的产品其实也无法起到较好的祛皱效果，多是一些甘油、丁二醇等组成的保湿产品，使使用者在短期使用后皮肤因含水量高而具有一定的弹性，表面看起来皱纹减少了，但一旦停用，皮肤松弛、褶皱的情况又会出现甚至加重。

发明内容

本发明的目的在于提供一种面部自体胶原种子复合液，该面部自体胶原种子复合液通过添加自体胶原蛋白、紧致因子和祛皱因子，利用其中的营养因子从深层次刺激成纤维细胞再生胶原纤维，使肌肤更加紧致，杜绝皱纹。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

本申请实施例提供一种面部自体胶原种子复合液，主要由如下重量份的原料制备而成：自体胶原蛋白20～28份、紧致因子18～25份、祛皱因子12～20份、透明质酸3～5份和去离子水200～280份，所述自体胶原蛋白为自体成纤维细胞的提取物，所述紧致因子包括菊苣提取物、三七提取物、花旗参提取物中的一种或多种。

综上，相对于现有技术，本发明的实施例至少具有如下优点或有益效果：

本发明提供的面部自体胶原种子复合液，通过使用自体成纤维细胞来源的提取物，充分利用其中的胶原蛋白、促生长因子和氨基酸等促进皮肤网状纤维的再生，配以适宜浓度的透明质酸，在促进皮肤胶原纤维再生的基础上，可以达到较好的补水保湿效果，进一步促进胶原蛋白、促生长因子和氨基酸等有益成分的渗透，同时，也添加一定量的紧致因子和祛皱因子，使其中的有益因子能诱导成纤维细胞产生更多的胶原蛋白形成胶原纤维，保持肌肤紧致。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

本申请实施例提供一种面部自体胶原种子复合液，主要由如下重量份的原料制备而成，自体胶原蛋白20～28份、紧致因子18～25份、祛皱因子12～20份、透明质酸2～3份和去离子水200～280份，所述自体胶原蛋白为自体成纤维细胞的提取物，所述紧致因子包括菊苣提取物、三七提取物、花旗参提取物中的一种或多种。

在本发明的一些实施例中，上述面部自体胶原种子复合液，所述祛皱因子包括蜂王胎冻干粉、蜂王浆、龙眼提取物和维生素E中的一种或多种。

在本发明的一些实施例中，上述面部自体胶原种子复合液，主要由如下重量份的原料制备而成，自体胶原蛋白20份、紧致因子22份、祛皱因子16份、透明质酸2.3份和去离子水260份。

在本发明的一些实施例中，上述面部自体胶原种子复合液，所述紧致因子包括菊苣提取物6重量份、三七提取物8重量份和花旗参提取物8重量份。

在本发明的一些实施例中，上述面部自体胶原种子复合液，所述祛皱因子主要由如下重量份的原料制备而成，蜂王胎冻干粉5份、蜂王浆10份和维生素E1份。

在本发明的一些实施例中，上述面部自体胶原种子复合液，还包括保湿因子12～18重量份。

在本发明的一些实施例中，上述面部自体胶原种子复合液，所述保湿因子包括芦荟提取物、麦冬氨基酸提取物和人参提取物中的一种或多种。

在本发明的一些实施例中，上述面部自体胶原种子复合液，所述保湿因子包括芦荟提取物6重量份、麦冬氨基酸提取物6重量份和人参提取物2重量份。

另一方面，本发明实施例提供一种前述面部自体胶原种子复合液的制备方法，包括如下操作步骤：将自体胶原蛋白、紧致因子、祛皱因子、保湿因子和透明质酸分别预溶于去离子水，制备成母液再混匀，即得到所述面部自体胶原种子复合液。

在本发明的一些实施例中，上述面部自体胶原种子复合液的制备方法，制备所述母液的温度为40～45℃，搅拌速度为1000～1500r/min。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例1

本实施例的目的在于提供一种自体胶原蛋白，包括如下步骤：

(1)签署同意书后收集自体皮肤标本，皮肤标本厚2～3mm，直径4～5mm，洗净后剪碎，得到组织块；

(2)将组织块置于双抗培养基中，培养至组织块周围爬出原代纤维细胞；

(3)待原代纤维细胞汇合度达到85％以上，取出组织块，将原代纤维细胞按1:3传代，即得到所述成纤维细胞；

(4)将步骤(3)中得到的成纤维细胞传代培养至所需要的量，将培养基上清收集起来，得到上清一，将成纤维细胞沉淀用0.025％的胰蛋白酶消化后置于无菌离心管中，于4℃下，1000g离心5min，分离得到细胞沉淀，即为沉淀一；

(5)将步骤(4)中得到的沉淀一利用细胞裂解液重悬裂解，充分裂解后低速离心，即温度在4℃以下为优，得到上清二和沉淀二，低温离心力为1600g，低温离心的时间为8min；

(6)将沉淀二利用蛋白酶酶解，酶解液为胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的混合酶解液，其中胰蛋白酶的质量百分数为1.3％，胰凝乳蛋白酶的质量百分数为0.5％，于48℃酶解2.5h后终止酶解，将酶解液经高速离心去除未酶解的部分，高速离心的离心力为15000g，离心时间为30min，离心完成后收集得到上清液并过20kDa，收集滤液即上清三；

(7)合并上清一、上清二和上清三，得到上清液，将上清液经超高速离心后收集沉淀三，超高速离心的离心力为150000g，离心时间为2h；

(8)将沉淀二和沉淀三按重量比9:1混合，即得到所述自体胶原蛋白。

实施例2

本实施例的目的在于利用实施例1提供的自体胶原蛋白制备的面部自体胶原种子复合液，主要通过如下步骤制备而成：

(1)准确称量自体胶原蛋白25g、透明质酸2g、去离子水210g、紧致因子19g、祛皱因子14g和保湿因子18g备用；

(2)将自体胶原蛋白预溶于去离子水，于40～45℃，1000～1500r/min条件下制成一定浓度的自体胶原蛋白溶液，并调节pH为7±0.3；

(3)将透明质酸预溶于去离子水，于40℃，1000r/min条件下制成一定浓度的透明质酸溶液，备用；

(4)将紧致因子预溶于去离子水，于40℃，1000r/min条件下制成一定浓度的紧致因子溶液，备用，紧致因子包括经低温冷冻干燥制备而成的三七提取物7g、花旗参提取物7g和菊苣提取物5g；

(5)将祛皱因子预溶于去离子水，于40℃，1000r/min条件下制成一定浓度的祛皱因子溶液，备用，祛皱因子包括蜂王胎冻干粉4g、蜂王浆3g、龙眼提取物6g和维生素E1g；

(6)将保湿因子预溶于去离子水，于40℃，1000r/min条件下制成一定浓度的保湿因子溶液，备用，保湿因子包括芦荟提取物6g、麦冬氨基酸提取物6g和人参提取物6g；

(7)将步骤(2)～(6)制备的自体胶原蛋白溶液、透明质酸溶液、紧致因子溶液和保湿因子溶液混合，并加入必要的辅料如pH调节剂、乳化剂、增稠剂等改善所述面部自体胶原种子复合液的外观和使用肤感，即得到所述面部自体胶原种子复合液。

实施例3

本实施例的目的在于利用实施例1提供的自体胶原蛋白制备的面部自体胶原种子复合液，主要通过如下步骤制备而成：

(1)准确称量自体胶原蛋白23g、透明质酸2.2g、去离子水200g、紧致因子18g、祛皱因子12g和保湿因子17g备用；

(2)将自体胶原蛋白预溶于去离子水，于42℃，1200r/min条件下制成一定浓度的自体胶原蛋白溶液，并调节pH为7±0.3；

(3)将透明质酸预溶于去离子水，于42℃，1200r/min条件下制成一定浓度的透明质酸溶液，备用；

(4)将紧致因子预溶于去离子水，于42℃，1200r/min条件下制成一定浓度的紧致因子溶液，备用，紧致因子包括经低温冷冻干燥制备而成的三七提取物6g、花旗参提取物6g和菊苣提取物6g；

(5)将祛皱因子预溶于去离子水，于42℃，1200r/min条件下制成一定浓度的祛皱因子溶液，备用，祛皱因子包括蜂王胎冻干粉6g、蜂王浆4g、龙眼提取物1g和维生素E1g；

(6)将保湿因子预溶于去离子水，于42℃，1200r/min条件下制成一定浓度的保湿因子溶液，备用，保湿因子包括人参提取物9g、麦冬氨基酸提取物8g；

(7)将步骤(2)～(6)制备的自体胶原蛋白溶液、透明质酸溶液、紧致因子溶液和保湿因子溶液混合，并加入必要的辅料如pH调节剂、乳化剂、增稠剂等改善所述面部自体胶原种子复合液的外观和使用肤感，即得到所述面部自体胶原种子复合液。

实施例4

本实施例的目的在于利用实施例1提供的自体胶原蛋白制备的面部自体胶原种子复合液，主要通过如下步骤制备而成：

(1)准确称量自体胶原蛋白24g、透明质酸2.5g、去离子水230g、紧致因子23g、祛皱因子18g和保湿因子16g备用；

(2)将自体胶原蛋白预溶于去离子水，于45℃，1500r/min条件下制成一定浓度的自体胶原蛋白溶液，并调节pH为7±0.3；

(3)将透明质酸预溶于去离子水，于45℃，1500r/min条件下制成一定浓度的透明质酸溶液，备用；

(4)将紧致因子预溶于去离子水，于45℃，1500r/min条件下制成一定浓度的紧致因子溶液，备用，紧致因子包括经低温冷冻干燥制备而成的三七提取物12g和菊苣提取物11g；

(5)将祛皱因子预溶于去离子水，于45℃，1500r/min条件下制成一定浓度的祛皱因子溶液，备用，祛皱因子包括蜂王胎冻干粉7g、蜂王浆7g和龙眼提取物4g；

(6)将保湿因子预溶于去离子水，于45℃，1500r/min条件下制成一定浓度的保湿因子溶液，备用，保湿因子包括芦荟提取物8g、麦冬氨基酸提取物8g；

(7)将步骤(2)～(6)制备的自体胶原蛋白溶液、透明质酸溶液、紧致因子溶液和保湿因子溶液混合，并加入必要的辅料如pH调节剂、乳化剂、增稠剂等改善所述面部自体胶原种子复合液的外观和使用肤感，即得到所述面部自体胶原种子复合液。

实施例5

本实施例的目的在于利用实施例1提供的自体胶原蛋白制备的面部自体胶原种子复合液，主要通过如下步骤制备而成：

(1)准确称量自体胶原蛋白20g、透明质酸2.3g、去离子水260g、紧致因子22g、祛皱因子16g和保湿因子14g备用；

(2)将自体胶原蛋白预溶于去离子水，于42℃，1300r/min条件下制成一定浓度的自体胶原蛋白溶液，并调节pH为7±0.3；

(3)将透明质酸预溶于去离子水，于43℃，1300r/min条件下制成一定浓度的透明质酸溶液，备用；

(4)将紧致因子预溶于去离子水，于43℃，1300r/min条件下制成一定浓度的紧致因子溶液，备用，紧致因子包括经低温冷冻干燥制备而成的三七提取物8g、花旗参提取物8g和菊苣提取物6g；

(5)将祛皱因子预溶于去离子水，于42℃，1300r/min条件下制成一定浓度的祛皱因子溶液，备用，祛皱因子包括蜂王胎冻干粉5g、蜂王浆10g和维生素E1g；

(6)将保湿因子预溶于去离子水，于43℃，1000～1500r/min条件下制成一定浓度的保湿因子溶液，备用，保湿因子包括芦荟提取物6g、麦冬氨基酸提取物6g和人参提取物2g；

(7)将步骤(2)～(6)制备的自体胶原蛋白溶液、透明质酸溶液、紧致因子溶液和保湿因子溶液混合，并加入必要的辅料如pH调节剂、乳化剂、增稠剂等改善所述面部自体胶原种子复合液的外观和使用肤感，即得到所述面部自体胶原种子复合液。

实施例6

本实施例的目的在于利用实施例1提供的自体胶原蛋白制备的面部自体胶原种子复合液，主要通过如下步骤制备而成：

(1)准确称量自体胶原蛋白26g、透明质酸2.4g、去离子水240g、紧致因子25g、祛皱因子20g和保湿因子15g备用；

(2)将自体胶原蛋白预溶于去离子水，于43℃，1200r/min条件下制成一定浓度的自体胶原蛋白溶液，并调节pH为7±0.3；

(3)将透明质酸预溶于去离子水，于42℃，1300r/min条件下制成一定浓度的透明质酸溶液，备用；

(4)将紧致因子预溶于去离子水，于44℃，1400r/min条件下制成一定浓度的紧致因子溶液，备用，紧致因子包括经低温冷冻干燥制备而成的三七提取物12g、花旗参提取物6g和菊苣提取物7g；

(5)将祛皱因子预溶于去离子水，于43℃，1200r/min条件下制成一定浓度的祛皱因子溶液，备用，祛皱因子包括蜂王胎冻干粉8g、蜂王浆8g、龙眼提取物3g和维生素E1g；

(6)将保湿因子预溶于去离子水，于44℃，1400r/min条件下制成一定浓度的保湿因子溶液，备用，保湿因子包括芦荟提取物5g、麦冬氨基酸提取物5g和人参提取物5g；

(7)将步骤(2)～(6)制备的自体胶原蛋白溶液、透明质酸溶液、紧致因子溶液和保湿因子溶液混合，并加入必要的辅料如pH调节剂、乳化剂、增稠剂等改善所述面部自体胶原种子复合液的外观和使用肤感，即得到所述面部自体胶原种子复合液。

实施例7

本实施例的目的在于利用实施例1提供的自体胶原蛋白制备的面部自体胶原种子复合液，主要通过如下步骤制备而成：

(1)准确称量自体胶原蛋白28g、透明质酸2.8g、去离子水280g、紧致因子24g、祛皱因子17g和保湿因子12g备用；

(2)将自体胶原蛋白预溶于去离子水，于42℃，1400r/min条件下制成一定浓度的自体胶原蛋白溶液，并调节pH为7±0.3；

(3)将透明质酸预溶于去离子水，于42℃，1300r/min条件下制成一定浓度的透明质酸溶液，备用；

(4)将紧致因子预溶于去离子水，于41℃，1100r/min条件下制成一定浓度的紧致因子溶液，备用，紧致因子包括经低温冷冻干燥制备而成的三七提取物12g和花旗参提取物12g；

(5)将祛皱因子预溶于去离子水，于41℃，1200r/min条件下制成一定浓度的祛皱因子溶液，备用，祛皱因子包括蜂王胎冻干粉8g、蜂王浆8g和维生素E1g；

(6)将保湿因子预溶于去离子水，于41℃，1100r/min条件下制成一定浓度的保湿因子溶液，备用，保湿因子包括芦荟提取物4g、麦冬氨基酸提取物4g和人参提取物4g；

(7)将步骤(2)～(6)制备的自体胶原蛋白溶液、透明质酸溶液、紧致因子溶液和保湿因子溶液混合，并加入必要的辅料如pH调节剂、乳化剂、增稠剂等改善所述面部自体胶原种子复合液的外观和使用肤感，即得到所述面部自体胶原种子复合液。

实施例8

本实施例的目的在于利用实施例1提供的自体胶原蛋白制备的面部自体胶原种子复合液，主要通过如下步骤制备而成：

(1)准确称量自体胶原蛋白27g、透明质酸3.0g、去离子水250g、紧致因子20g、祛皱因子19g和保湿因子13g备用；

(2)将自体胶原蛋白预溶于去离子水，于43℃，1300r/min条件下制成一定浓度的自体胶原蛋白溶液，并调节pH为7±0.3；

(3)将透明质酸预溶于去离子水，于44℃，1300r/min条件下制成一定浓度的透明质酸溶液，备用；

(4)将紧致因子预溶于去离子水，于42℃，1300r/min条件下制成一定浓度的紧致因子溶液，备用，紧致因子包括经低温冷冻干燥制备而成的三七提取物12g和花旗参提取物8g；

(5)将祛皱因子预溶于去离子水，于41℃，1200r/min条件下制成一定浓度的祛皱因子溶液，备用，祛皱因子包括蜂王胎冻干粉4g、蜂王浆8g、龙眼提取物10g和维生素E1g；

(6)将保湿因子预溶于去离子水，于43℃，1200r/min条件下制成一定浓度的保湿因子溶液，备用，保湿因子包括芦荟提取物6g、麦冬氨基酸提取物4g和人参提取物3g；

(7)将步骤(2)～(6)制备的自体胶原蛋白溶液、透明质酸溶液、紧致因子溶液和保湿因子溶液混合，并加入必要的辅料如pH调节剂、乳化剂、增稠剂等改善所述面部自体胶原种子复合液的外观和使用肤感，即得到所述面部自体胶原种子复合液。

效果例

本效果例的目的在于验证前述实施例提供的自体胶原蛋白制备的面部自体胶原种子复合液的使用效果。

征集30岁以上健康女性80名，测定本发明实施例2～8提供的面部自体胶原种子复合液的使用效果，平均分为8组，1～7组分别使用实施例2～8提供的面部自体胶原种子复合液，8组使用的产品除自体胶原蛋白溶液、自体脂肪、透明质酸溶液、紧致因子溶液、祛皱因子溶液和保湿因子溶液外，其余辅料与1～7组中所用辅料相同。

1、皮肤刺激性情况

在每组志愿者的手背皮肤上涂抹各组对应的面部自体胶原种子复合液，于24h内监测涂抹部分是否有红斑和瘙痒症状并进行记录，结果表明，本发明实施例2～8提供的面部自体胶原种子复合液涂抹后，均无红斑和瘙痒情况。

2、皮肤紧致情况

每组志愿者对应涂抹前述面部自体胶原种子复合液，以10分制进行评价，0分代表皮肤松弛，细纹多，10分代表皮肤弹力好且基本无细纹，分别在使用前、使用1个月和两个月后对测试者的肤色进行打分。结果如表1所示：

由表1可知，对于妊娠纹的改善效果，以实施例2和实施例5提供的面部自体胶原种子复合液的效果最佳，可通过自体胶原蛋白、紧致因子和祛皱因子促进肌肤胶原纤维的再生，从而从深层次改善肌肤状态，更加紧致。

表1

综上所述，本发明实施例提供的面部自体胶原种子复合液，通过使用自体成纤维细胞来源的提取物，充分利用其中的胶原蛋白、促生长因子和氨基酸等促进皮肤网状纤维的再生，配以适宜浓度的透明质酸，在促进皮肤胶原纤维再生的基础上，可以达到较好的补水保湿效果，进一步促进胶原蛋白、促生长因子和氨基酸等有益成分的渗透，同时，也添加一定量的紧致因子和祛皱因子，如菊苣、三七和花旗参等，使其中的有益因子能诱导成纤维细胞产生更多的胶原蛋白形成胶原纤维，保持肌肤紧致。

以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。