剑菌属细菌S2_8_1在促进植物合成细胞分裂素方面的应用

技术领域

本发明属于微生物及其应用技术领域，涉及一种促进植物合成细胞分裂素的剑菌属细菌及其应用。

背景技术

细胞分裂素是调控植物生长发育的一种非常重要的生长激素，其在植物细胞分裂、生理过程、器官发育、生长等方面发挥着不可替代的作用。通过合适的手段调控植物产生细胞分裂素来促进其生长发育，对农业生产具有重要的意义。

剑菌属细菌在土壤和河流沉积物等自然环境中广泛存在，目前针对剑菌属细菌在环境保护领域研究的报道较多，却尚未见到关于其在促进植物生长领域的研究报道。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的一在于提供剑菌属细菌S2_8_1在促进植物合成细胞分裂素方面的应用，目的二在于提供剑菌属细菌S2_8_1在促进玉米生长或促进多花黑麦草去叶再生方面的应用。本发明以促进植物生长为目标，在土壤筛选出一株可促进植物产生细胞分裂素的剑菌属细菌菌株，并应用于作物和牧草的生长，为农业生产提供了一种新的微生物资源。

为了实现上述目的，本发明采用的具体方案为：

剑菌属细菌S2_8_1在促进植物合成细胞分裂素方面的应用，其特征在于：所述剑菌属细菌S2_8_1，分类命名为

作为对上述方案的进一步优化，所述植物优选为玉米或多花黑麦草。

剑菌属细菌S2_8_1在如下（a）~（b）任意一种中的应用：

（a）、在促进玉米生长中的应用；

（b）、在促进多花黑麦草去叶再生方面的应用；

所述剑菌属细菌S2_8_1，分类命名为

一种促进植物合成细胞分裂素的方法，在植物盆栽土壤中接种剑菌属细菌S2_8_1；所述剑菌属细菌S2_8_1，分类命名为

作为对上述方法的进一步优化，所述植物为玉米或多花黑麦草。所述玉米为盆栽，且出苗后生长20天。所述多花黑麦草为盆栽，且出苗后生长70天。

有益效果：本发明所述剑菌属细菌S2_8_1能促进植物产生细胞分裂素，可以应用于促进玉米生长和黑麦草再生。所制备的菌剂具有生产成本低，使用方便，适合在全国玉米和多花黑麦草种植的地区使用。

附图说明

图1是本发明所述具有促进植物产生细胞分裂素的剑菌属细菌S2_8_1在分离培养基的菌落形态图；

图2是本发明所述剑菌属细菌S2_8_1在异养LB培养基的菌落形态图；

图3是本发明所述剑菌属细菌S2_8_1菌落形态光学显微镜图; 图中单个S2_8_1菌株的长度为1.09μm，宽度为0.54μm。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。

下列实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

下述实施例中所述接种量均为按照相应体积比进行接种。

实施例1：具有促进植物产生细胞分裂素S2_8_1的分离筛选。

取河南科技大学试验农场的土壤20g，加入富集培养基中，其配方为：(NH

取上面得到的富集培养液0.1ml，涂布于琼脂平板分离培养基上，在28℃和避光条件下培养7天。琼脂平板的分离培养基的配方为：(NH

在上面得到的含有纯净的细菌菌落平板培养基上，移植纯菌落5～10个于富集培养基(配方如上)中，在28℃和避光条件下培养15天，即得到本研究所述的微生物菌剂。

上述具有促进植物产生细胞分裂素细菌，命名为S2_8_1，已进行保藏，保藏信息如下：剑菌属细菌S2_8_1，其分类命名为

实施例2：本发明所述的具有促进植物产生细胞分裂素S2_8_1对玉米产生细胞分裂素的效应和其生长的影响。

选取生长一致、出苗后20天的玉米苗36盆，每盆3棵，盆内装有土壤，每千克土壤含有机物质16.5g。将所述的36盆玉米苗随机分为3组，每组12盆，即试验组a、b、c组，再把试验组a、b、c分别随机分为a1、a2、a3、a4亚组，b1、b2、b3、b4亚组，c1、c2、c3、c4亚组，每亚组中的3盆表示3个重复。

取试验亚组a1、b1、c1的根、茎、叶，将它们放入温度为75℃的烘干箱内，烘干后分别得到玉米全株烘干物，然后用电子天平检测烘干物的重量，得到试验组a、b、c接种前的烘干物质量Ra0、Rb0、Rc0，备用。

取试验亚组a2、b2、c2的叶片，用酶联免疫法测定它们的玉米素核苷含量，因玉米素核苷是细胞分裂素的主要活体类型，故得到试验组a、b、c接种前的叶细胞分裂素含量Za0、Zb0、Zc0，备用。

取试验亚组a3、a4、b3、b4、c3、c4，在a3、a4和b3、b4亚组的每盆的土壤中加入上述微生物菌剂100 ml，在c3和c4亚组的每盆中加入上述纯的富集溶液作为对照；5天后，继续在a3和a4亚组的每盆中加入上述微生物菌剂100 ml，b3、b4和c3、c4亚组则加入纯的富集溶液；再过5天后制得S2_8_1接种量分别为200ml和100ml的a和b组，以及未接种的c组，备用。

上述10天结束后，取试验亚组a3、b3、c3的根、茎、叶，将它们放入温度为75℃的烘干箱内，烘干后分别得到玉米全株烘干物，然后用电子天平检测烘干物的重量，得到试验组a、b、c接种10天后的烘干物质量Ra1、Rb1、Rc1，备用。

上述10天结束后，取试验亚组a4、b4、c4的叶片，用酶联免疫法测定它们的玉米素核苷含量，因玉米素核苷是细胞分裂素的主要活体类型，得到试验组a、b、c接种，10天后的叶细胞分裂素含量Za1、Zb1、Zc1，备用。

比较上述Ra0、Rb0、Rc0、Ra1、Rb1、Rc1、Za0、Zb0、Zc0、Za1、Zb1、Zc1的大小，Ra0、Rb0、Rc0三者相似，且Za0、Zb0、Zc0三者相似，而Ra1>Rb2> Rc3，且Za1>Zb2> Zc3，说明接种S2_8_1通过促进玉米产生细胞分裂素而造成其生长的加速。

结果表明Ra0、Rb0、Rc0分别为2.86、2.83、2.78 g/盆，三者没显著差别，同样Za0、Zb0、Zc0分别为107.87、110.25、113.25ng/g，这三者同样没有显著差别，说明接种前玉米长势和叶片细胞分裂素含量一致

Ra1、Rb1、Rc1分别为7.06、5.85、5.03g/盆，Ra1 比Rb1高27.37%，Rb1 比Rc1高19.75%。Za1、Zb1、Zc1分别为167.94、125.61、99.32ng/g，Za1 比Zb1高20.68%，Rb1 比Rc1高16.30%。上述结果说明接种S2_8_1通过促进玉米产生细胞分裂素而造成其生长的加速。

实施例3：本发明所述的具有促进植物产生细胞分裂素S2_8_1对多花黑麦草产生细胞分裂素的效应和其去叶再生的影响。

选取生长一致、出苗后生长70天的多花黑麦草36盆，每盆6棵，盆内装有土壤，每千克土壤含有机物质16.5g。将所述的36盆多花黑麦草随机分为3组，每组12盆，即试验组a、b、c组，再把试验组a、b、c分别随机分为a1、a2、a3、a4亚组，b1、b2、b3、b4亚组，c1、c2、c3、c4亚组，每亚组中的3盆表示3个重复。

取试验亚组a1、b1、c1的根、茎、叶，将它们放入温度为75℃的烘干箱内，烘干后分别得到多花黑麦草全株烘干物，然后用电子天平检测烘干物的重量，得到试验组a、b、c接种前的烘干物质量Ra0、Rb0、Rc0，备用。

取试验亚组a2、b2、c2的叶片，用酶联免疫法测定它们的玉米素核苷含量，因玉米素核苷是细胞分裂素的主要活体类型，故得到试验组a、b、c接种前的叶细胞分裂素含量Za0、Zb0、Zc0，备用。

取试验亚组a3、a4、b3、b4、c3、c4，在a3、a4和b3、b4亚组的每盆的土壤中加入上述微生物菌剂100 ml，在c3、c4亚组的每盆中加入上述纯的富集溶液作为对照；5天后，继续在和a3、a4亚组的每盆中加入上述微生物菌剂100 ml，b3、b4和c3、c4亚组则加入纯的富集溶液；再过5天后制得S2_8_1接种量分别为200ml和100ml的a和b组，以及未接种的c组，备用。

上述10天结束后，剪去a3、a4、b3、b4、c3、c4亚组的叶片，留下5cm的茬。再让去叶后的a3、a4、b3、b4、c3、c24亚组的叶片再生7天，制得再生7天后的试验a、b、c组，备用。

上述再生7天结束后，取试验亚组a3、b3、c3的叶片，用酶联免疫法测定它们的玉米素核苷含量，因玉米素核苷是细胞分裂素的主要活体类型，得到试验组a、b、c接种后再生10天的叶细胞分裂素含量Za1、Zb1、Zc1，备用。

上述再生7天结束后，剪去a4、b4、c4亚组的再生出的叶片，继续留5cm的茬，将这些剪下的叶片放入温度为75℃的烘干箱内，烘干后分别得到多花黑麦草全株烘干物，然后用电子天平检测烘干物的重量，得到试验组a、b、c接种10天后的再生叶片烘干物质量Ta1、Tb1、Tc1，备用。

比较上述Ra0、Rb0、Rc0、Za0、Zb0、Zc0的大小，Ra0，Rb0，Rc0三者之间，以及Za0，Zb0，Zc0三者之间，没有显著差别，说明接种S2_8_1前多花黑麦草生长一致，叶片细胞分裂素含量一致。

比较上述Ta1、Tb1、Tc1、Za1、Zb1、Zc1的大小，如果Ta1>Tb1>Tc1，且Za1>Zb1>Zc1，说明接种S2_8_1通过促进多花黑麦草产生细胞分裂素而造成其叶片再生的加速。

结果表明Ra0、Rb0、Rc0分别为4.92、4.99、5.06g/盆，三者之间没有显著差别。Za0、Zb0、Zc0分别为96.53、90.67、88.56 ng/g，三者之间同样没有显著差别。上述结果说明接种S2_8_1前多花黑麦草生长一致，叶片细胞分裂素含量一致。

结果表明Ta1、Tb1、Tc1分别为1.85、1.53、1.01g/盆，Ta1 比Tb1高20.93%，Tb1 比Tc1高52.48%。Za1、Zb1、Zc1分别为148.92、103.65、87.33ng/g，Za1比Zb1高43.68%，Zb1比Zc1高18.69%。上述结果说明接种S2_8_1通过促进多花黑麦草产生细胞分裂素而造成其叶片再生的加速。

需要说明的是，以上所述的实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的保护范围，本发明的保护范围以权利要求书为准。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对本发明作出的一些非本质的改进和调整仍属于本发明的保护范围。