氯化铷在制备治疗帕金森综合征的药物中的用途

技术领域

本发明涉及医药技术领域。更具体地说，本发明涉及氯化铷在制备治疗帕金森综合征的药物中的用途。

背景技术

帕金森疾病(Parkinson's disease，PD)是常见的神经系统退行性疾病，其临床表现主要包括静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态障碍，同时患者可伴有抑郁、便秘和睡眠障碍等非运动症状。帕金森病的诊断主要依靠病史、临床症状及体征，一般的辅助检查多无异常改变。其发病机制目前仍未完全明确，目前没有针对其发病机制进行治疗的药物。因此，找到一种药物能够针对其发病机制的研究成为国内外研究的热点。

发明内容

本发明提供氯化铷在制备治疗帕金森综合征的药物中的用途，氯化铷对MPTP诱导小鼠帕金森综合征具有保护作用，并为防治帕金森综合征提供了理论依据。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种氯化铷在制备治疗帕金森综合征的药物中的用途。

优选的是，所述药物含有治疗有效量的氯化铷和药学上可接受的载体。

优选的是，药学上可接受的载体包括稀释剂、增溶剂、潜溶剂、崩解剂、分散剂、润滑剂、矫味剂、抗氧剂、粘合剂、吸收剂、湿润剂、缓冲剂、交联剂。

优选的是，所述药物被制成药学上允许的剂型。

优选的是，所述药物被制成以灌胃给药方式的剂型。

优选的是，氯化铷的给药剂量为不低于0.5mg/kg·d。

本发明至少包括以下有益效果：

MPTP造模后小鼠发生运动障碍、协调能力降低，氯化铷给药后能够显著改善小鼠运动障碍，改善运动协调能力。同时HE染色观察小鼠脑黑质结构，模型组脑黑质和纹状体结构损伤，氯化铷给药后能够显著改善脑组织黑质和纹状体结构损伤。MPTP造模后α-突触核蛋白显著升高，氯化铷能够显著降低α-突触核蛋白表达。说明氯化铷对MPTP诱导帕金森病小鼠具有保护作用。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

附图说明

图1为氯化铷对MPTP小鼠震颤麻痹评分的影响；

图2为氯化铷对MPTP小鼠旷场实验评分的影响；

图3为氯化铷对MPTP小鼠爬杆实验评分的影响；

图4为氯化铷对MPTP小鼠悬挂实验评分的影响；

图5为氯化铷对MPTP小鼠游泳实验评分的影响；

图6为氯化铷对MPTP小鼠5项行为学评分加和统计结果；

图7为氯化铷对MPTP小鼠脑组织黑质体的影响；

图8为氯化铷对MPTP小鼠脑组织纹状体的影响；

图9为氯化铷对MPTP小鼠脑组织α-突触核蛋白的影响；

图10为氯化铷对DAT mRNA表达的影响；

图11为氯化铷对TH mRNA表达的影响。

具体实施方式

下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。

需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

氯化铷在制备治疗帕金森综合征的药物中的用途。

所述药物含有治疗有效量的氯化铷和药学上可接受的载体。药学上可接受的载体包括稀释剂、增溶剂、潜溶剂、崩解剂、分散剂、润滑剂、矫味剂、抗氧剂、粘合剂、吸收剂、湿润剂、缓冲剂、交联剂。

所述药物被制成药学上允许的剂型。所述剂型包括丸剂、片剂、粉剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、滴丸、滴剂、喷雾剂、注射剂、混悬液、凝胶剂、栓剂。

所述药物被制成以灌胃给药方式的剂型。以灌胃给药方式的剂型包括但不局限于溶液剂、混悬剂、固体制剂。

氯化铷的给药剂量为不低于0.5mg/kg·d。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。

1实验材料与方法

MPTP(纯度≥98％，sigma公司)，氯化铷(RbCl)(纯度≥98％，麦克林公司)，复方左旋多巴片(上海罗氏制药有限公司)。

1.1实验动物

C57/BL6J小鼠，雄性60只，7-8w龄，25-30g。小鼠适应性喂养三天，将所有鼠进行3次旷场实验，剔除自发行为异常小鼠。

1.2动物造模

随机取50只小鼠给予MPTP溶液，腹腔注射30mg/kg，每日一次，持续7天，第3天、第7天开展行为学实验检测并记录评分，根据行为学实验评分，达到7.5分后，判断为造模成功，开始分组给药。

1.3动物分组

将小鼠分组成6组：空白对照组(生理盐水30mg/kg)，模型对照组(MTPT 30mg/kg)，RbCl低剂量组(7.5mg/kg)，RbCl中剂量组(15mg/kg)，RbCl高剂量组(30mg/kg)，阳性对照组(复方左旋多巴胺30mg/kg)，MPTP的溶媒为生理盐水。以上各组在图1-11中分别简化为Control、MPTP、MPTP+RbCl 7.5mg/kg、MPTP+RbCl 15mg/kg、MPTP+RbCl30mg/kg，MPTP+Dopamine 30mg/kg。

1.4动物给药

将造模成功的小鼠分组后，每天称量并记录体重，按体重0.1mL/10g对小鼠进行灌胃给药14天，一天一次，每两天观察动物震颤行为出现与消失的时间，给药第7天、第14天开展行为学实验检测并记录评分。隔天给予30mg/kg造模剂维持PD症状。

1.5行为学实验

行为学检测有：震颤麻痹、旷场实验、爬杆实验、悬挂实验和游泳实验。

(1)震颤麻痹

观察小鼠给药后1h内是否出现立尾、竖毛、流涎、震颤、麻痹、死亡等情况，按照小鼠表现进行评分：0分，与正常小鼠相似，无任何症状；1分，出现竖毛、弓背、间断性细小震颤，但活动自如；2分，出现吞咽频繁，频繁性震颤，后肢张开，颤尾，活动逐渐受限；3分，出现流涎、持续性震颤，四肢僵硬，活动受限；4分，因全身麻痹而死亡。

(2)旷场实验(判断其活动情况)

采用亚克力材质50cm×50cm×50cm方盒作为场地，均匀划分为9格，将小鼠放入旷场的正中格内，记录小鼠三爪以上跨入邻格的次数，观察持续2min。评分标准为：0分，跨入次数＞40次；1分，跨入次数为31～40次；2分，跨入次数为21～30次；3分，跨入次数＜21次。

(3)爬杆实验(判断其前肢状态)

准备一直经为25cm的软木小球固定于一根长50cm直径1cm的木杆顶端，木杆缠上纱布以防打滑，将待测小鼠放到小球上，记录小鼠从球部爬到底部的时间。评分标准为：0分，爬杆时间＜4.01s；1分，爬杆时间为4.01～8.0s；2分，爬杆时间为8.01～12.0s；3分，爬杆时间＞12.00s。

(4)悬挂实验(判断小鼠后抓抓握状态)

被测小鼠倒置悬挂，将两前爪置于30cm长、25cm高水平线中点，而后放开小鼠，记录其抓握情况。评分标准为：0分，两后爪均可抓住线；后爪反复抓取线，间断可抓住，可记为0.5分；1分，一只后爪可抓住线；2分，两只后爪均不能抓住线。

(5)游泳实验(判断小鼠协调能力)

将被测小鼠放于40cm×25cm×16cm的水箱中，水深15cm，水温为(27±2)℃，记录3min内小鼠的漂浮时间。评分标准为：0分，漂浮0～30s；1分，漂浮31～90s；2分，漂浮91～150s；3分，漂浮151～180s；4分，漂浮期间呛水。

1.6取材检测相关指标

(1)末次给药后1d，取脑组织用于黑质体、纹状体HE染色；

(2)免疫组化检测脑组织α-突触核蛋白表达(α-synuclein)；

(3)qRT-PCR检测小鼠脑组织多巴胺转运体(DAT)、酪氨酸羟化酶(TH)mRNA表达。

2实验结果

2.1氯化铷对MPTP小鼠震颤麻痹评分的影响

如图1所示，

2.2旷场实验

如图2所示，

2.3爬杆实验

如图3所示，

2.4悬挂实验

如图4所示，

2.5游泳实验

如图5所示，

2.6综合统计

将受试鼠的5项行为学评分加和，统计结果如图6所示，

2.7氯化铷对MPTP小鼠脑组织黑质和纹状体结构的影响

图7中的ABCDEF分别指的是空白对照组、模型对照组(MTPT 30mg/kg)，阳性对照组(复方左旋多巴胺30mg/kg)、RbCl低剂量组(7.5mg/kg)，RbCl中剂量组(15mg/kg)，RbCl高剂量组(30mg/kg)，图8中的ABCDEF分别指的是空白对照组、模型对照组(MTPT30mg/kg)，阳性对照组(复方左旋多巴胺30mg/kg)、RbCl低剂量组(7.5mg/kg)，RbCl中剂量组(15mg/kg)，RbCl高剂量组(30mg/kg)，HE染色结果表明，与空白对照组比较，腹腔注射MPTP造模后，小鼠脑黑质体和纹状体结构受损，给药后，RbCl低剂量组(7.5mg/kg)、RbCl中剂量组(15mg/kg)、RbCl高剂量组(30mg/kg)能够显著改善黑质体和纹状体结构损伤。

2.8氯化铷对MPTP小鼠脑组织黑质体α-突触核蛋白(α-synuclein)的影响

图9中的ABCDEF分别指的是空白对照组、模型对照组(MTPT 30mg/kg)，阳性对照组(复方左旋多巴胺30mg/kg)、RbCl低剂量组(7.5mg/kg)，RbCl中剂量组(15mg/kg)，RbCl高剂量组(30mg/kg)。α-synuclein是中枢神经系统突触前及核周表达的可溶性蛋白质，它与帕金森病的发病机制和功能障碍密切相关。免疫组化结果表明，与空白对照组比较，腹腔注射MPTP造模后，小鼠脑组织黑体α-synuclein表达显著升高，给药后，RbCl低剂量组(7.5mg/kg)、RbCl中剂量组(15mg/kg)、RbCl高剂量组(30mg/kg)能够显著降低α-突触核蛋白表达。说明RbCl能够通过降低α-synuclein来改善帕金森病。

2.9氯化铷对MPTP小鼠脑组织多巴胺转运体(DAT)、酪氨酸羟化酶(TH)表达的影响

如图10所示，

3结论

实验结果发现，氯化铷对MPTP诱导小鼠帕金森病具有保护作用，可以改善其行为学变化，及脑黑质和纹状体损伤。其作用机制可能通过降低α-突触核蛋白表达，升高DAT和TH对多巴胺神经元发挥保护作用相关。

这里说明的设备数量和处理规模是用来简化本发明的说明的。对本发明的应用、修改和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。