一种染色体显微玻片制备最优参数获取方法

技术领域

本发明涉及染色体检测领域，尤其是涉及染色体显微玻片制备最优参数获取方法。

背景技术

在染色体检测领域，常用到显微镜等显微设备对含染色体的玻片进行显微图像采集，再对采集的显微图像进行染色体核型分析，从而判定染色体是否正常，在核型分析前，含染色体的显微玻片的制备质量决定了后续染色体核型分析的准确率。

医院现有的染色体玻片制备方法为手工制取，操作员制片前需“试片”以获得本批次玻片制备的最优硝化与染色时间。人工试片具体步骤：人工操作员将细胞裂解胰酶从4℃冰箱取出置于37℃水浴皿中，将吉姆萨染色液从室温保存柜内取出，同时置于37℃水浴皿中，待二者温度升至37℃后，将含染色体细胞显微玻片置于细胞裂解硝化胰酶中，硝化40-60s后，使用生理盐水冲洗，记录硝化时间，再将玻片置于吉姆萨染液中，染色150-180s,使用生理盐水冲洗，记录染色时间，使用生理冲洗后放置于100倍显微镜下观察细胞硝化状态，反复多次实验后，确定本批次实验最优的硝化时间、染色时间和水浴皿中的水浴温度，及硝化最优参数。该人工制片方法存在操作繁琐、试片时间长、人工误差大的缺点。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种染色体显微玻片制备最优参数获取方法，操作简单、时间短并且误差小。

本发明的目的之一采用如下技术方案实现：

一种染色体显微玻片制备最优参数获取方法，包括以下步骤：

S1：将含有染色体的细胞玻片进行细胞硝化，硝化时间为t

S2：将硝化后的细胞玻片进行染色，染色时间为t

S3：采集染色后的细胞玻片的图像，根据图像计算玻片硝化程度并给出对应指标N

S4：计算最优硝化时间

S5：计算最优染色时间

进一步地，在步骤S3中，根据图像计算玻片硝化程度并给出对应指标N

S310：采集多张玻片多个视野染色体硝化图像；

S311：识别被硝化细胞，并标记该细胞与周围指定范围内最远染色体之间的距离；

S312：统计染色体硝化效果，建立被硝化细胞硝化程度N与该细胞周围指定范围内最远染色体距离单峰曲线；

S313：建立硝化时间与该细胞周围指定范围内最远染色体距离曲线；

S314：扫描待测染色体图像并标记该细胞周围指定范围内最远染色体距离，将距离代入上述曲线求得硝化程度指标N

进一步地，在步骤S3中，根据图像计算玻片染色程度并给出对应指标D

S320：采集多张玻片多个视野染色体染色图像；

S321：对图像进行预处理；

S322：识别图像中被染色的染色体；

S323：计算染色体所在像素点R通道数值平均值；

S324：统计图像染色效果，建立染色程度与R通道数值曲线；

S325：扫描待测染色体图像并识别图像被中被染色的染色体，计算染色体所在像素点R通道数值平均值，代入曲线，求得染色程度指标D

进一步地，在步骤S4中，λ为硝化指标N

进一步地，最优硝化程度N通过对比多次显微实验的细胞硝化程度得到。

进一步地，在步骤S5中，θ为当前染色指标D

进一步地，最优染色指标D通过对比多次显微实验的细胞染色深浅得到。

进一步地，所述染色体显微玻片制备最优参数获取方法还包括步骤S6：记录参数t

进一步地，所述染色体显微玻片制备最优参数获取方法还包括步骤S7：当制备的玻片数量超过预设数量后，重复步骤S1至S5，计算得到新的t

相比现有技术，本发明染色体显微玻片制备最优参数获取方法通过将含有染色体的细胞玻片进行细胞硝化，硝化时间为t

附图说明

图1为本发明染色体显微玻片制备最优参数获取方法的流程图；

图2为根据图像计算玻片硝化程度并给出对应指标的流程图；

图3为根据图像计算玻片染色程度并给出对应指标的流程图；

图4为实施染色体显微玻片制备装置的示意图。

图中：10、玻片染色结构；11、试剂贮存仓；12、硝化染色仓；13、玻片转运装置；14、操作台；20、图像采集结构；21、相机；22、显微镜；23、固定装置；30、计算机。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

需要说明的是，当组件被称为“固定于”另一个组件，它可以直接在另一个组件上或者也可以存在另一中间组件，通过中间组件固定。当一个组件被认为是“连接”另一个组件，它可以是直接连接到另一个组件或者可能同时存在另一中间组件。当一个组件被认为是“设置于”另一个组件，它可以是直接设置在另一个组件上或者可能同时存在另一中间组件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

图1为本发明染色体显微玻片制备最优参数获取方法的流程图，本发明染色体显微玻片制备最优参数获取方法包括以下步骤：

S1：将含有染色体的细胞玻片进行细胞硝化，硝化时间为t

S2：将硝化后的细胞玻片进行染色，染色时间为t

S3：采集染色后的细胞玻片的图像，根据图像计算玻片硝化程度并给出对应指标N

S4：计算最优硝化时间

S5：计算最优染色时间

具体的，在步骤S1之前，需要将胰酶通过液路从4℃的试剂贮存仓抽取至胰酶硝化仓，将吉姆萨染色液通过液路从室温下试剂贮存仓抽取至吉姆萨染色仓，将两仓室温度同时提升至37℃；转运抓手将含有染色体的细胞玻片转运至胰酶硝化仓进行细胞硝化。

具体的，在步骤S2中，染色的试剂为吉姆萨染液。

请继续参阅图2，在步骤S3中，根据图像计算玻片硝化程度并给出对应指标N

S310：采集多张玻片多个视野染色体硝化图像；

S311：识别被硝化细胞，并标记该细胞与周围指定范围内最远染色体之间的距离；

S312：统计染色体硝化效果，建立被硝化细胞硝化程度N与该细胞周围指定范围内最远染色体距离单峰曲线；

S313：建立硝化时间与该细胞周围指定范围内最远染色体距离曲线；

S314：扫描待测染色体图像并标记该细胞周围指定范围内最远染色体距离，将距离代入上述曲线求得硝化程度指标N

具体的，在步骤S310中，使用显微镜与相机采集染色体玻片图像。S313中，距离随硝化时间成正比。

请继续参阅图3，在步骤S3中，根据图像计算玻片染色程度并给出对应指标D

S320：采集多张玻片多个视野染色体染色图像；

S321：对图像进行预处理；

S322：识别图像中被染色的染色体；

S323：计算染色体所在像素点R通道数值平均值；

S324：统计图像染色效果，建立染色程度与R通道数值曲线；

S325：扫描待测染色体图像并识别图像被中被染色的染色体，计算染色体所在像素点R通道数值平均值，代入曲线，求得染色程度指标D

具体的，在步骤S321中，对图像进行预处理为去除图像中的噪声。在步骤S331中，R通道为敏感通道。

具体的，在步骤S4中，λ为硝化指标N

具体的，在步骤S5中，θ为当前染色指标D

染色体显微玻片制备最优参数获取方法还包括步骤S6以及S7。

S6：记录参数t

S7：当制备的玻片数量超过预设数量后，重复步骤S1至S5，计算得到新的t

相比现有技术，本发明染色体显微玻片制备最优参数获取方法通过将含有染色体的细胞玻片进行细胞硝化，硝化时间为t

请继续参阅图4，为实现上述染色体显微玻片制备最优参数获取方法的染色体显微玻片制备装置的框架图，染色体显微玻片制备装置包括玻片染色结构10、图像采集结构20以及计算机30。

玻片染色结构10包括试剂贮存仓11、硝化染色仓12、玻片转运装置13以及操作台14。试剂贮存仓11用于以4℃或37℃的温度保存试剂。保存的试剂为硝化试剂以及染色试剂。硝化染色仓12与试剂贮存仓11连通，硝化染色仓12用于硝化裂解载玻片上的细胞，使染色体分散并染色。玻片转运装置13用于转运玻片，在本实施例中，玻片转运装置13为机械手。操作台14用于承载玻片。

图像采集结构20包括相机21、显微镜22以及固定装置23。相机21用于采集图像信息。显微镜22用于获得玻片显微信息。固定装置23将玻片固定在操作台14上。

计算机30用于采集数据导入、参数计算、装置运行控制。

以上实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进演变，都是依据本发明实质技术对以上实施例做的等同修饰与演变，这些都属于本发明的保护范围。