一种多维抗皱淡斑褪黑组合物

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种多维抗皱淡斑褪黑组合物。

背景技术

韶光易逝，容颜易老，光鲜美丽的皮肤不过数年。随着年龄的增长，生活压力的增加，很多人容易有容貌焦虑，开始关注干纹、细纹、鱼尾纹、眼下纹、川字纹、黑眼圈、色斑、痘痘、皮肤炎症、皮肤暗沉、皮肤纹理的变化……它们的出现让我们显得不再年轻。因此，多功能护肤的需求也随即而生。

肌肤衰老的原因和机理非常的复杂，是多种因素综合决定的。除了随年龄的增长而伴随的生理性衰老之外，还受生活习惯、环境因素的影响，比如:高压的工作环境、过度劳累、长期精神紧张、情绪不稳、熬夜、不科学的饮食习惯、经常户外活动且不注重防晒等等，这些因素都会导致肌肤出现衰老的迹象，根据这些衰老成因的不同，我们可将皮肤衰老分为生理性老化、机械性老化和外源性老化。

生理性老化：自然衰老是内源性的程序性过程，随时间的流逝而成，与年龄增长有关。随着年龄的增长，人体新陈代谢变缓，角质层的通透性增加变薄，皮肤的屏障功能降低，真皮中胶原蛋白和弹性蛋白的水平降低，纤维结构退化，进而产生皱纹。

机械性老化：经常性的皱眉、微笑使面部肌肉反复的收缩造成持续性皮肤紧张和肌肉收缩，进而产生表情纹。

外源性老化：主要由于皮肤暴露于紫外线(UV)下而造成的慢性损伤，除此以外，寒冷、酷热和过度干燥的空气，污染，吸烟，化妆品使用不当以及高糖饮食、接触有毒有害化学物质等均可导致外源性老化的发生，它是可以控制的，其中紫外线造成的皮肤损伤是外源性老化最重要的因素，紫外线的照射导致肌肤炎症、过氧化，发生糖化反应使肌肤暗黄，胶原蛋白和弹性蛋白加速流失、纤维断裂，黑色素沉积，色斑、红斑形成、皮肤松弛、暗沉无光泽。

目前很多市售的护肤品产品功效单一，比如有些产品就单纯只有抗皱的功效，或者只有淡斑褪黑功效，无法同时满足消费者多功效护肤的需求。并且很多抗皱产品作用机理维度单一，要么是即时祛皱，靠一些成膜剂、粉体、硅弹性体以物理填充的方式，在视觉上带来一定的“假象”让人感觉肌肤变得平滑，但这一类抗皱产品，无法从根本上解决实际的问题，反而会造成肌肤负担，厚重的肤感不透气，甚至有可能会堵塞毛孔，导致长痘痘的现象发生。还有一些抗皱产品，可能是通过保湿修复，通过使用一些透明质酸钠、海藻糖等保湿剂，给肌肤提供保湿因子或者成膜锁住水分，在相对较短的时间内可以起到保湿、改善细纹的作用，但是其作用机制单一，也无法从根本上达到长效的祛皱的效果。

因此，多维度抗皱、多功效的护肤产品是未来化妆品发展的趋势。

发明内容

针对现有的很多抗皱护肤品无法满足消费者多功效的护肤需求，本发明提供了一种多维抗皱淡斑褪黑组合物，以及该组合物在化妆品领域的应用。

为了解决上述问题，本发明提出以下技术方案：

第一方面，本发明提供了乙酰基四肽-5、棕榈酰三肽-5、乙酰基六肽-8、千日菊(ACMELLA OLERACEA)提取物和苹果(PYRUS MALUS)籽提取物的组合在制备多维抗皱淡斑褪黑组合物中的用途。

本发明中所述的多维抗皱淡斑褪黑组合物包括但不限于化妆品组合物，尤其是护肤化妆品组合物。

进一步地，所述多维抗皱淡斑褪黑组合物中，按重量百分比计，所述乙酰基四肽-5的含量为0.0001-0.01％，所述棕榈酰三肽-5的含量为0.0001-0.006％，所述乙酰基六肽-8的含量为0.0001-0.005％，所述千日菊(ACMELLA OLERACEA)提取物的含量为0.001-0.7％，所述苹果(PYRUS MALUS)籽提取物的含量为0.001-0.05％。

第二方面，本发明提供了一种多维抗皱淡斑褪黑组合物，所述多维抗皱淡斑褪黑组合物包括乙酰基四肽-5、棕榈酰三肽-5、乙酰基六肽-8、千日菊(ACMELLA OLERACEA)提取物和苹果(PYRUS MALUS)籽提取物的组合。

本发明中所述的多维抗皱淡斑褪黑组合物包括但不限于化妆品组合物，尤其是护肤化妆品组合物。

具体地，在本发明的多维抗皱淡斑褪黑组合物中，乙酰基四肽-5、棕榈酰三肽-5、乙酰基六肽-8、千日菊(ACMELLA OLERACEA)提取物和苹果(PYRUS MALUS)籽提取物作为抗皱淡斑褪黑组合物，其中，乙酰基四肽-5能降低糖化反应，减少糖化导致的SOD酶失活，帮助减少组织损伤；能降低血管渗透性，防止液体在皮下积累；降解胆红素，减少胆红素的含量，比如能有效淡化黑眼圈；可以增强皮肤弹性。胶原蛋白是人体组织器官的主要结构蛋白，参与人体组织修复，与一些细胞内成分一起保持皮肤的弹性和紧实，棕榈酰三肽-5能够防止胶原蛋白的降解和促进胶原蛋白的生成，改善真皮结构，提高皮肤的紧实度。乙酰基六肽-8是类肉毒素杆菌，摸拟SNARE复合体中SNAP-25蛋白N末端的六个氨基酸组成的肽段，参与竞争SNAP-25在SNARE复合体中的位点，从而影响复合体的形成，使融泡内的乙酰胆碱不能释放，其作用位点是阻断神经细胞与受体之间神经冲动的化学信号传递，减少并阻止肌肉细胞收缩，能显著减少皱纹深度，快速抚平表情纹。千日菊(ACMELLA OLERACEA)提取物富含烷酰胺，号称是植物界的肉毒素，有即刻祛皱效果。千日菊(ACMELLA OLERACEA)提取物与乙酰基六肽-8不同的是，乙酰基六肽-8是竞争性的抑制神经递质乙酰胆碱的释放，作用位点是神经细胞与受体之间神经冲动的化学信号的传递(“竞争性的抑制”意味着可能会有乙酰胆碱被释放出来)；千日菊提取物的作用位点是神经细胞上神经冲动的电子信号的传递，通过抑制钠离子通道导致无法传递神经冲动信号，从而迅速松弛肌肉，平滑表情纹；虽然两者均属于即时祛皱，但作用位点不同，一前一后双重保险，乙酰基六肽-8抑制不到的乙酰胆碱有可能被后面的千日菊(ACMELLA OLERACEA)提取物所抑制。另外，通过应用发现这两个原料对不同的人起作用的程度是不一样的，有些人对乙酰基六肽-8比较敏感，有些人对千日菊比较敏感，两者搭配使用，可以充分兼顾到不同人群对即时祛皱的需求。皮肤老化和皱纹的生成与荷尔蒙的衰退有关。荷尔蒙作用于ECM分子(胶原蛋白、纤维连接蛋白)的合成，这些蛋白构成了皮肤纹理；苹果籽提取物蕴含大量植物性荷尔蒙，能有效双向调节人体内分泌，促进细胞微循环，提高细胞活性等，针对皮肤老化过程中荷尔蒙的减少，起到替代物的作用；苹果籽提取物分子比较小，极易进入皮肤表层，快速补充皱纹肌肤组织所缺失的透明质酸、胶原蛋白和弹性蛋白，进而促进皮肤的新陈代谢，活化细胞，从根本改善肌肤的肤质，实现长效抗皱。

进一步地，所述多维抗皱淡斑褪黑组合物中，按重量百分比计，所述乙酰基四肽-5的含量为0.0001-0.01％，所述棕榈酰三肽-5的含量为0.0001-0.006％，所述乙酰基六肽-8的含量为0.0001-0.005％，所述千日菊(ACMELLA OLERACEA)提取物的含量为0.001-0.7％，所述苹果(PYRUS MALUS)籽提取物的含量为0.001-0.05％。

当本发明的多维抗皱淡斑褪黑组合物为化妆品组合物，本发明除了上述组分外，本发明的组合物还可以任选地包含化妆品组合物的常用成分，常用成分中包括媒介物、表面活性剂、护肤活性成分和化妆品辅料等本领域已知的任何成分，且可根据具体需要选择其类型和用量。

第三方面，本发明还提供了一种提高组合物多维抗皱淡斑褪黑功效的方法，具体为：将乙酰基四肽-5、棕榈酰三肽-5、乙酰基六肽-8、千日菊(ACMELLA OLERACEA)提取物和苹果(PYRUS MALUS)籽提取物的组合加入到组合物中。

所述组合物中，按重量百分比计，所述乙酰基四肽-5的含量为0.0001-0.01％，所述棕榈酰三肽-5的含量为0.0001-0.006％，所述乙酰基六肽-8的含量为0.0001-0.005％，所述千日菊(ACMELLA OLERACEA)提取物的含量为0.001-0.7％，所述苹果(PYRUS MALUS)籽提取物的含量为0.001-0.05％。

上述方法可显著提高组合物抗皱淡斑褪黑的功效。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明结合肌肤衰老产生皱纹的多重原因，通过有针对性进行功效成分设计和搭配，从生理性老化、机械性老化、外源性老化，多维度地实现抗皱的效果，从抗皱的机理维度上又细分为即时抗皱和长效抗皱，其中即时抗皱又进一步从不同作用靶点，多位点进行搭配设计。不仅弥补了现今大部分抗皱产品单一作用维度、机理的缺陷，多维度、多位点相互协同，实现1+1+1＞3的功效，具有更加全面、更显著的祛皱的效果，同时该组合物通过体外功效测试和人体功效测试，均显示出良好的抗皱、保湿、淡斑褪黑的功效。

本发明附加的方面和优点将在下面的描述中部分给出，这些将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

此处所说明的附图用来提供对本发明的进一步理解，构成本申请的一部分，并不构成对本发明的不当限定，在附图中：

图1为本发明实施例6制备得到的混合物TWYP22-167淡斑褪黑测试结果。其中图1A为曲酸(KA)的TYR抑制率标准曲线，图1B为TWYP22-167的对酪氨酸酶的抑制率。

图2为本发明实施例6制备得到的混合物TWYP22-167抗皱、紧致测试结果。其中图2A为西维来司钠(SSH)的Ela抑制率标准曲线，图2B为TWYP22-167对弹性蛋白酶的抑制率。

图3为本发明实施例6制备得到的混合物TWYP22-167保湿测试结果。其中图3A为甘草酸二钾(DG)的透明质酸酶抑制率标准曲线，图3B为TWYP22-167对透明质酸酶的抑制率。

图4为本发明实施例2制备得到的组合物TWYP23-048对酪氨酸酶的活性抑制结果。其中图4A为曲酸(KA)的TYR抑制率标准曲线，图4B为TWYP23-048对酪氨酸酶的抑制率。

图5为本发明实施例2制备得到的组合物TWYP23-048对弹性蛋白酶的活性抑制结果。其中图5A为西维来司钠(SSH)的Ela抑制率标准曲线，图5B为TWYP23-048对弹性蛋白酶的抑制率。

图6为本发明实施例2制备得到的组合物TWYP23-048对透明质酸酶的活性抑制结果。其中图6A为甘草酸二钾(DG)的透明质酸酶抑制率标准曲线，图6B为TWYP23-048对透明质酸酶的抑制率。

图7为分别使用本发明实施例1-5、空白例和对比例1-3制备得到的组合物后皮肤皱纹深度减少百分比。

图8为分别使用本发明实施例1-5、空白例和对比例1-3制备得到的组合物后皮肤皱纹面积减少百分比。

图9为分别使用本发明实施例1-5、空白例和对比例1-3制备得到的组合物后皮肤淡斑褪黑改善率百分比。

图10为使用前和使用本发明实施例2制备得到的组合物TWYP23-048 7天后皮肤棕斑对比图。

图11为使用前和使用本发明实施例2制备得到的组合物TWYP23-048 7天后皮肤在标准光下的对比图。

图12为Primos-lite皮肤高度标尺，为图13-15的标尺。此标尺从左到右不同颜色代表皱纹/纹理变化情况，最左边黑色代表的是皱纹凹陷又大又深，最右边黄色代表的是皱纹越凸出，越靠近标尺0附近的颜色越多，代表肌肤越光滑平坦。

图13为受试者1使用前与使用本发明实施例2制备得到的组合物TWYP23-048三十分钟后的对比效果图。

图14为受试者2使用前与使用本发明实施例2制备得到的组合物TWYP23-048三十分钟后的对比效果图。

图15为受试者3使用前与使用本发明实施例2制备得到的组合物TWYP23-048三十分钟后的对比效果图。

具体实施方式

下面将结合附图和具体实施例，对实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，以下将描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

应当理解，当在本说明书和所附权利要求书中使用时，术语“包括”和“包含”指示所描述特征、整体、步骤、操作、元素和/或组件的存在，但并不排除一个或多个其它特征、整体、步骤、操作、元素、组件和/或其集合的存在或添加。

还应当理解，在此本发明实施例说明书中所使用的术语仅仅是出于描述特定实施例的目的而并不意在限制本发明实施例。如在本发明实施例说明书和所附权利要求书中所使用的那样，除非上下文清楚地指明其它情况，否则单数形式的“一”、“一个”及“该”意在包括复数形式。

本发明实施例中的组分均按重量百分比计；本发明实施例中的原料均可通过市售购得。

实施例1-5和对比例1-3

实施例1-5、空白例和对比例1-3分别提供一种组合物，组合物配方如表1所示。

表1组合物配方

组合物的制备方法如下：

1.按照原料重量百分比，将A相各个原料加入水相锅，搅拌升温至80-85℃，备用。

2.按照原料重量百分比，将B相各个原料加入油相锅，搅拌升温至80-85℃，备用。

3.将水相锅中A相物料抽入乳化锅，将油相锅中B相物料抽入乳化锅，搅拌均质8分钟，保温搅拌15分钟后，继续搅拌降温。

4.降温到45℃，加入C相各个原料(C相中的苹果(PYRUS MALUS)籽提取物于B相添加)，搅拌均匀；

5.降温到42℃，加入D相，搅拌15分钟至均匀。

实施例6

本实施例提供一种乙酰基四肽-5、棕榈酰三肽-5、乙酰基六肽-8、千日菊(ACMELLAOLERACEA)提取物和苹果(PYRUS MALUS)籽提取物的组合，各成分含量如表2所示。

表2各成分及含量

由于组合物中的苹果(PYRUS MALUS)籽提取物是油溶的，其余成分为水溶的，不互溶，故利用实施例2中的乳化剂将各成分乳化为均一混合物(记号TWYP22-167)。

效果验证

一、采用体外功效评价的方法对混合物TWYP22-167进行功效验证。

表3阳性对照物信息

1、检测结果

1.1.酪氨酸酶活性抑制

以曲酸(KA)为标准品，绘制酪氨酸酶抑制率曲线(图1A)，曲酸(KA)的TYR抑制率标准曲线方程为y＝-0.0008154x

样品的酪氨酸酶抑制率如图1B，图中“*”代表与空白对照组(BC)相比，具有显著性差异，p＜0.05。从图中可以看出，混合物TWYP22-167可抑制酪氨酸酶活性达38.1％，且其与空白例相比具有显著性差异，具备潜在美白功效。

1.2弹性蛋白酶活性抑制

以西维来司钠(SSH)为标准品，绘制标准曲线(图2A)。西维来司钠(SSH)的Ela抑制率标准曲线方程为y＝-0.1262x

图2中“*”代表与空白例(BC)相比，具有显著性差异，p＜0.05。从图2B可以看出，混合物TWYP22-167表现出对弹性蛋白酶的抑制作用高达76.43％，与空白例之间有显著性差异，即混合物有抑制弹性蛋白酶活性的能力。说明混合物TWYP22-167在弹性蛋白酶抑制试验方法下，具有潜在的抗皱、紧致功效。

1.3透明质酸酶活性抑制

以甘草酸二钾(DG)为标准品，绘制标准曲线(图3A)。甘草酸二钾(DG)的透明质酸酶抑制率标准曲线方程为y＝-0.001752x

图3中“*”代表与空白例(BC)相比，具有显著性差异，p＜0.05。从图3可以看出，混合物TWYP22-167抑制透明质酸酶活性高达72％，与空白例之间有显著性差异，即样品有抑制透明质酸酶活性的能力，具有潜在的保湿功效。

二、采用体外功效评价的方法对实施例2制备得到的组合物(TWYP23-048)进行功效验证

表4阳性对照物信息

1、检测结果

1.酪氨酸酶活性抑制

以曲酸(KA)为标准品，绘制酪氨酸酶抑制率曲线(图4A)，曲酸(KA)的TYR抑制率标准曲线方程为y＝-0.0007580x

抑制率越高，说明样品美白效果越好。TWYP23-048的酪氨酸酶抑制率如图4B，从图中可以看出，样品TWYP23-048可抑制酪氨酸酶活性达34.8％，且其与空白对照组相比具有显著性差异，TWYP23-048表现出对酪氨酸酶的抑制作用，具备潜在美白功效。

2.弹性蛋白酶活性抑制

以西维来司钠(SSH)为标准品，绘制标准曲线，如图5A所示。西维来司钠(SSH)的Ela抑制率标准曲线方程为y＝-0.1236x

抑制率越高，说明样品抗衰效果越好。TWYP23-048的酪氨酸酶抑制率如图5B，从图中可以看出，TWYP23-048表现出对弹性蛋白酶的抑制作用高达78.73％，具有潜在抗皱功效。

3.透明质酸酶活性抑制

以甘草酸二钾(DG)为标准品，绘制标准曲线，如图6A所示。甘草酸二钾(DG)的透明质酸酶抑制率标准曲线方程为y＝-0.0009895x

对透明质酸酶抑制率越高，说明样品保湿功效越强。从图6B可以看出，样品TWYP23-048抑制透明质酸酶活性高达57.2％，表现出潜在的保湿功效。

三、对实施例2制备得到的组合物(TWYP23-048)进行人体功效验证

1、抗皱测试和淡斑褪黑测试

1.选用33名测试者，年龄35～65岁，针对眼下/眼尾皱纹采取抗皱功效入组标准。以眼下/眼尾作为对象部位，以皱纹等级左右同等程度的受试者作为对象，随机将一侧作为样品涂抹部位，另一侧作为不涂抹部位，涂抹部位连续使用受试样品28天。

临床使用PROMIS系统分析评估眼下/眼尾皱纹深度随时间减少的百分比。测试结果如表5和图7所示。

表5眼下/眼尾皱纹深度随时间减少的百分比

临床使用PROMIS系统分析评估眼下/眼尾皱纹面积随时间减少的百分比。测试结果如表6和图8所示。

表6眼下/眼尾皱纹面积随时间减少的百分比

临床使用Visia-CR棕斑图片测定分析眼下/眼尾部位皮肤淡斑褪黑改善率的百分比。测试结果如表7和图9所示。

表7眼下/眼尾部位皮肤淡斑褪黑改善率的百分比

2.6名亚洲成年受试者在左右眼分别使用TWYP23-048和市售竞品眼霜(肌肤之钥紧致抚纹精华眼霜)后，在D7时TWYP23-048的14个指标改善效果优于市售竞品眼霜，主要集中在水分、斑点、弹性、眼部角度、眼袋、皱纹等维度指标。测试结果如表8所示。同时在使用产品30分钟后，使用皮肤快速光学三维成像系统PRIMOS lite对受试者1、受试者2和受试者3的眼下皮肤进行皱纹/纹理变化观察，其中图12是PRIMOS lite皮肤高度标尺，图13是受试者1的使用前与使用产品30分钟后的皱纹/纹理变化对比图，图14是受试者2的使用前与使用产品30分钟后的皱纹/纹理变化对比图，图15是受试者3的使用前与使用产品30分钟后的皱纹/纹理变化对比图。从对比图观察得到，3名受试者在使用产品30分钟后，皮肤光滑平坦度有明显提升。

表8 D7天TWYP23-048&市售竞品眼霜平均改善率对比

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四、温和性斑贴测试1、检测信息：

检测项目

封闭型皮肤斑贴试验

参考依据

《化妆品安全技术规范(2015年版)》

评判标准

皮肤封闭型斑贴试验皮肤反应分级标准、红斑指数

2、试验方法

通过受试者将受试物放入斑试器小室内，将斑试器贴敷于前臂内部持续24h，于去除受试物斑试器后30min(待压痕消失后)、24h和48h测试肤封闭型斑贴试验皮肤反应分级标准、红斑指数，评价受试物安全性。

3、测试人数

按照测试斑贴测试入组标准，年龄在18～65岁的中国健康男性、女性33人。

4测试环境

测试环境温度：21℃±1℃，相对湿度：50％±10％。

5、数据统计分析方法

使用前后的测量值进行描述性统计，包括平均值、标准差等。描述性统计采用EXCEL进行计算。

应用GraphPadPrism分析软件进行数据的统计分析。计算在各个时间点皮肤各参数的均值和标准差，并进行正态分布检验，符合正态分布[Sig(双侧)＞0.01]要求，采用配对t检验，否则采用两个相关样品秩和检验。上述统计分析均为双尾检验，显著性水平为a＝0.05。

6试验结果

6.1皮肤封闭型斑贴试验皮肤反应评级

从表9可知，与空白对照组相比，在去除斑试器后30min、24h、48h的测试时间点中TWYP23-048的实验组评级分数皆无显著性差异。

表9皮肤封闭型斑贴试验皮肤反应评级分数描述性统计表

注：显著性“ns”表示P＞0.05，“*”表示0.01≤P＜0.05，“**”表示0.001≤P＜0.01，“***”表示0.0001≤P＜0.001，

“****”表示P＜0.0001。

6.2红斑指数

从表10可知，与空白对照组相比，在去除斑试器后30min、24h、48h的测试时间点中TWYP23-048实验组的红斑指数皆无显著性差异。

表10皮肤红斑指数改善值描述性统计表

注：显著性“ns”表示P＞0.05，“*”表示0.01≤P＜0.05，“**”表示0.001≤P＜0.01，“***”表示0.0001≤P＜0.001，

“****”表示P＜0.0001。

特别注意的是，本发明的组合物还可以制成其他剂型的化妆品，如抗皱淡斑褪黑化妆水、抗皱淡斑褪黑喷雾、抗皱淡斑褪黑乳液、抗皱淡斑褪黑精华、抗皱淡斑褪黑BB霜、抗皱淡斑褪黑防晒霜等各种剂型，其他剂型的化妆品与实施例所证实的效果一样。

以上对本发明实施例所提供的技术方案进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本发明实施例的原理以及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只适用于帮助理解本发明实施例的原理；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明实施例，在具体实施方式以及应用范围上均会有改变之处，

综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。