纳米酶RuO2制备治疗假体周围骨溶解和抑制破骨细胞成熟分化药物以及制备假体的应用

技术领域

本发明涉及骨溶解药物领域，具体涉及纳米酶RuO

背景技术

骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是最常见的退行性疾病之一，它渐进式侵害关节软骨、骨和滑膜组织，导致关节疼痛、畸形和功能障碍，从而影响患者的活动能力。目前我国的OA患者超过了1亿，全球范围内症状性OA在成人中的发病率约为10％～12％，终末期OA患者只能采用全膝关节置换手术的方式改善关节症状和功能，随着人们对于生活质量的要求逐渐提高以及人口老龄化的趋势愈演愈烈，每年接受全膝关节置换手术的病人数量逐年增加。然而，植入关节假体的使用时间受到无菌性松动极大的限制，其是关节假体失效的严重并发症和主要原因，目前，临床上对于人工关节无菌性松动的唯一疗效确切的治疗方式是人工关节翻修手术，但是与初次关节置换相比，人工关节翻修手术通常伴随着更高的手术难度和治疗成本，并且远期疗效仍不尽人意，给个人、家庭和社会带来沉重负担。

人工关节无菌性松动是指在无感染情况下人工关节假体出现松动，其发生机制复杂，现在的主流观点认为磨损颗粒导致的假体周围骨溶解是诱发人工关节无菌性松动的主要原因。近年来有研究认为多种类型细胞参与假体周围骨溶解的病理过程。

目前，人工关节使用广泛的有金属-金属关节面，其会引起金属离子的释放，引起异物反应从而导致关节松动；金属－高交联聚乙烯关节面，其会导致颗粒磨损和假体松动；陶瓷－陶瓷关节面虽然有出色的耐磨性、减少颗粒磨损的风险，但陶瓷因其本身的脆性及偶发的碎裂亦会导致关节松动。如今虽然人工关节材料层出不穷，如PEEK/ZnO-SCF复合材料,具有良好的耐磨性、抗菌性和生物相容性；鳞片状纹理结构的钴铬钼合金具有良好的摩擦磨损性能；金属骨小梁涂层和钛丝涂层臼杯可以改善人工假体的磨损性能并延长使用寿命，但是人工关节磨损行为的影响因素较多且相互关联，所以关节置换后的无菌性松动仍未获得满意的解决。

纳米酶RuO

发明内容

本发明的目的是提供纳米酶RuO

为实现上述目的，本发明提供的技术方案是：

纳米酶RuO

进一步地，所述的应用为纳米酶RuO

进一步地，所述的假体周围骨溶解为假体磨损产生的金属颗粒导致的假体周围骨溶解。

进一步地，所述的药物为将纳米酶RuO

进一步地，所述的纳米酶RuO

步骤(1)、制备Cu

步骤(2)、将Cu

步骤(3)、蚀刻Cu

其中，步骤(2)孵育沉积后离心回收产物，将其分散于水中，在70-90℃下加热20-50分钟。

本发明还保护纳米酶RuO

所述的纳米酶RuO

所述的纳米酶RuO

所述的纳米酶RuO

所述的纳米酶RuO

本发明还保护纳米酶RuO

将纳米酶RuO

将纳米酶RuO

本发明还保护一种假体材料，含有纳米酶RuO

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明首次发现纳米酶RuO

本发明使用的纳米酶RuO

纳米酶RuO

本发明发现在体内水平纳米酶RuO

本发明提供了纳米酶RuO

附图说明

图1为检测不同浓度纳米酶RuO

图2为纳米酶RuO

图3为纳米酶RuO

图4为纳米酶RuO

图5为纳米酶RuO

图6为在小鼠假体周围骨溶解模型中，小鼠颅骨局部注射纳米酶RuO

具体实施方式

以下通过实施例的形式对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

下述实施例中所使用的实验方法，如无特殊说明均为常规方法，所用的试剂、方法和设备，如无特殊说明均为本技术领域常规试剂、方法和设备。

实施例1

纳米酶RuO

(1)合成Cu

(2)合成Cu

(3)合成RuO

实施例2

纳米酶RuO

称取25mg纳米酶RuO

实施例3

小鼠颅骨假体周围骨溶解模型建立：

选取8周龄的C57BL/6雄性小鼠用于实验，异氟烷吸入麻醉后常规备皮消毒颅顶，取颅骨正中切口显露颅骨，直视下刮片刮去颅骨骨膜，颅骨局部注射植入100μl金属假体磨损微粒(TiAl6V4微粒)；术中不损伤颅骨表面，彻底止血后缝合创口；假手术组不植入金属假体磨损微粒(TiAl6V4微粒)，其余操作与造模组一致。术后每日肌注青霉素，连续3天。3天后观察小鼠颅骨是否发生感染，未感染小鼠继续进行下一步实验。

造模结束后，纳米酶RuO

在小鼠颅骨表面注射例2得到的纳米酶RuO

实施例4

将小鼠分为四组，分别是：组1-假手术小鼠注射生理盐水，组2-假手术小鼠注射纳米酶RuO

表1

连续给药8周后安乐死实验动物，获取颅骨标本，切片行组织学染色，免疫组织化学染色评估颅骨退变情况，检查破骨细胞成熟分化指标的表达水平。

本实施例明确了纳米酶RuO

实施例5

(1)CCK8法检测纳米酶RuO

提取小鼠原代骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)，培养至P1代后将其加入96孔培养板中，培养至细胞密度＞90％时，分别加入0μg/mL，1μg/mL，5μg/mL，10μg/mL，20μg/mL,50μg/mL,100μg/mL和200μg/mL的纳米酶RuO

实验结果参见图1，在使用不同浓度的纳米酶RuO

(2)转录组测序验证RuO

通过转录组测序的方法验证RuO

(3)RuO

将RuO

如图3所示，荧光定量PCR检测结果表明RuO

如图4所示，Western Blot实验结果表明RuO

如图5所示，通过TRAP染色及骨片实验检测了RuO

如图6所示，在小鼠假体周围骨溶解模型中，关节腔局部分别注射RuO

以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何形式上的限制，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，依据本发明的技术实质，对以上实施例所作的任何简单的修改、等同替换与改进等，均仍属于本发明技术方案的保护范围之内。