一种莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球及其制备方法和应用
文献发布时间：2024-04-18 20:02:18
技术领域
本发明涉及药物制剂技术领域，尤其涉及一种莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球及其制备方法和应用。
背景技术
莪术油是一种从莪术中分离提取出来，由多种化合物混合而成的油性物质。其化学成分包含莪术醇、莪术二酮、榄香烯、莪术烯醇、异莪术烯醇、去氢莪术二酮、蓬莪二醇、莪术烯酮、甜没药姜黄醇、莪术烯等，多达几十种。莪术油有广泛的抗肿瘤作用，主要包括抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、直接破坏肿瘤细胞、抑制肿瘤细胞转移与侵袭、抑制肿瘤血管生成、增强化疗药物敏感性、逆转耐药、调节免疫等，对卵巢癌、子宫内膜癌、宫颈癌、乳腺癌、肺癌、胃癌、直肠癌、肝癌等均有效。
肝动脉化疗栓塞（TACE）是中晚期肝癌的首选治疗方法，这种方法是经股动脉插管，选择性插入肝癌的供血动脉，进行栓塞及灌注化疗药物，栓塞主要的肿瘤血管，以阻断肿瘤血供，使肿瘤缺血坏死，并灌注化疗药物以杀死肿瘤细胞，适用于富血供的肝癌。TACE的优点是创伤小、副反应轻、可以反复多次治疗、提高生存质量，延长生命，是治疗肿瘤的有效手段。
载药微球是一种新型的栓塞剂，可以负载药物，在栓塞为肿瘤提供营养的血管的同时，也可释放杀伤肿瘤细胞的化学药物，从而起到双重抗肿瘤作用。目前，关于莪术油栓塞微球的研究多为莪术油明胶微球，通常采用乳化交联法制备，制备过程复杂，且制备的微球大小不均匀，力学性能差。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球及其制备方法和应用。本发明提供的制备方法操作简单，所得微球大小均匀，力学性能好，且载药率高。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
一种莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的制备方法，包括以下步骤：
将氧化再生纤维素溶解于氢氧化钠尿素溶液中，得到氧化再生纤维素溶液；将海藻酸钠和明胶溶于水中，得到海藻酸钠明胶溶液；将所述氧化再生纤维素溶液和所述海藻酸钠明胶溶液混合，得到壳层溶液；
将莪术油作为核芯溶液；采用同轴静电喷雾法将所述壳层溶液和核芯溶液喷入接收液中，得到莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球；所述接收液为金属盐溶液；所述金属盐为二价金属盐或三价金属盐。
优选的，所述氧化再生纤维素溶液中，氧化再生纤维素、氢氧化钠、尿素和水的质量比为（1~5）：（1~5）：（4~10）：（30~60）。
优选的，所述海藻酸钠明胶溶液中，海藻酸钠的浓度为0.5~5wt%，明胶的浓度为0.1~3wt%。
优选的，所述海藻酸钠明胶溶液中还加入氯化钠，所述海藻酸钠明胶溶液中氯化钠的浓度为0.1~2wt%。
优选的，所述氧化再生纤维素溶液与海藻酸钠明胶溶液的体积比（1~5）:（1~5）。
优选的，所述二价金属盐为钙盐、钡盐、锶盐、锌盐和铜盐中的一种或多种；所述三价金属盐为三价铁盐和铝盐中的一种或多种。
优选的，所述同轴静电喷雾的操作条件包括：壳层溶液推注速度为0.1~1 mm/min，核芯溶液推注速度为0.1~1 mm/min，电压为10~20 V，接收距离为2~8 cm。
本发明还提供了上述方案所述制备方法制备得到的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球；所述莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球具有核壳结构，核芯为莪术油，壳层成分包括明胶、海藻酸盐和氧化再生纤维素；所述海藻酸盐为海藻酸的二价或三价金属盐。
本发明还提供了上述方案所述的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球在制备肝动脉化疗栓塞剂中的应用。
本发明提供了一种莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的制备方法，包括以下步骤：将氧化再生纤维素溶解于氢氧化钠尿素溶液中，得到氧化再生纤维素溶液；将海藻酸钠和明胶溶于水中，得到海藻酸钠明胶溶液；将所述氧化再生纤维素溶液和所述海藻酸钠明胶溶液混合，得到壳层溶液；将莪术油作为核芯溶液；采用同轴静电喷雾法将所述壳层溶液和核芯溶液喷入接收液中，得到莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球；所述接收液为金属盐溶液；所述金属盐为二价金属盐或三价金属盐。本发明采用同轴静电喷雾法制备莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球，能够将莪术油完好的包裹在壳层材料中，操作简单，所得微球粒径均匀。
并且，本发明制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球具有明显的核壳结构，大小均一，球形度良好，能够有效掩盖莪术油的刺激性气味，提高莪术油稳定性，还能实现在肿瘤血管的定向栓塞，提高莪术油在肿瘤部位的浓度，减少莪术油在正常组织内的浓度，降低毒副作用，起到靶向治疗效果，而且核壳结构的微球具有缓释作用，生物利用度高；莪术油中含有莪术醇、β-榄香烯、莪术酮等抗肿瘤活性成分，对肿瘤起到有效治疗作用。
本发明还在壳层中加入氧化再生纤维素，氧化再生纤维素能够在微球壳层中形成交联网络，从而提高微球的力学性能，有效抵抗微球的挤压变形，避免在体内发生破碎，使莪术油在肿瘤血管部位牢固栓塞。
综上所述，本发明提供的制备方法步骤简单，成本低，并且所得微球力学性能好，粒径均匀，能够保护莪术油，掩盖莪术油的难闻气味，还具有缓释作用，在肝动脉化疗栓塞领域具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为实施例1中采用28G#20G的同轴针头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的实物图；
图2实施例1中采用不同型号同轴喷头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的光学显微镜照片，其中A为25G#18G、B为28G#20G、C为30G#21G、D为32G#22G；
图3为实施例1中采用不同型号同轴喷头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的粒径频率分布图，其中A为25G#18G、B为28G#20G、C为30G#21G、D为32G#22G；
图4为实施例1中采用28G#20G的同轴针头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的扫描电镜图像；
图5为实施例1中采用28G#20G的同轴针头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的红外光谱图；
图6为实施例1中采用不同型号同轴喷头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的载药量和包封率测试结果；
图7为实施例1中采用不同型号同轴喷头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的体外释放曲线；
图8为实施例1制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球和莪术油/海藻酸钠明胶栓塞微球的力-压缩曲线。
具体实施方式
本发明提供了一种莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的制备方法，包括以下步骤：
将氧化再生纤维素溶解于氢氧化钠尿素溶液中，得到氧化再生纤维素溶液；将海藻酸钠和明胶溶于水中，得到海藻酸钠明胶溶液；将所述氧化再生纤维素溶液和所述海藻酸钠明胶溶液混合，得到壳层溶液；
将莪术油作为核芯溶液；
采用同轴静电喷雾法，将所述壳层溶液和核芯溶液喷入接收液中，得到莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球；所述接收液为金属盐溶液；所述金属盐为二价金属盐或三价金属盐。
本发明将氧化再生纤维素溶解于氢氧化钠尿素溶液中，得到氧化再生纤维素溶液。在本发明中，所述氧化再生纤维素溶液中，氧化再生纤维素、氢氧化钠、尿素和水的质量比优选为（1~5）:（1~5）:（4~10）:（30~60），更优选为（2~3）:（2~3）:（5~8）:（40~50）。
在本发明的具体实施例中，优选先将氢氧化钠和尿素溶于水中，将所得氢氧化钠尿素溶液放入-20℃的冰箱中，冻成冰水混合状态，之后取氧化再生纤维素加入所述氢氧化钠尿素溶液中，磁力搅拌10 min，溶解后在-20℃下保存。使用时，优选用0.22 μm的滤膜过滤三次，得到澄清透明的氧化再生纤维素溶液；在本发明的具体实施例中，优选采用氧化纤维素膜为原料，将所述氧化纤维素膜剪碎后加入所述氢氧化钠尿素溶液中进行溶解。
本发明海藻酸钠和明胶溶于水中，得到海藻酸钠明胶溶液。在本发明中，所述海藻酸钠明胶溶液中，海藻酸钠的浓度优选为0.5~5wt%，更优选为1~3wt%，明胶的浓度优选为0.1~3wt%，更优选为1~2wt%；溶解所述海藻酸钠和明胶使用的水优选为双蒸水。在本发明的具体实施例中，优选将海藻酸钠和明胶加入双蒸水中，磁力搅拌12 h以上，得到透明溶液，即为所述海藻酸钠明胶溶液。
在本发明中，所述海藻酸钠明胶溶液中还加入氯化钠，所述海藻酸钠明胶溶液中氯化钠的浓度为0.1~2wt%；配制所述海藻酸钠明胶溶液时，将所述氯化钠和海藻酸钠、明胶共同加入双蒸水中搅拌溶解即可。
得到氧化再生纤维素溶液和海藻酸钠明胶溶液后，本发明将所述氧化再生纤维素溶液和所述海藻酸钠明胶溶液混合，得到壳层溶液。在本发明中，所述氧化再生纤维素溶液与海藻酸钠明胶溶液的体积比优选为（1~5）:（1~5），更优选为1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、2:1、3:1、4:1或5:1。
得到壳层溶液后，本发明将莪术油作为核芯溶液，采用同轴静电喷雾法将所述壳层溶液和核芯溶液喷入接收液中，得到莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球；所述接收液为金属盐溶液。在本发明中，所述金属盐为二价金属盐或三价金属盐；所述二价金属盐优选为钙盐、钡盐、锶盐、锌盐和铜盐中的一种或多种；所述三价金属盐为三价铁盐或铝盐；所述二价金属盐优选为二价金属的盐酸盐，所述三价金属盐优选为三价金属的盐酸盐；在本发明的具体实施例中，所述金属盐优选为氯化钙、硫酸钡、氯化锌或硫酸铜；所述金属盐溶液的浓度优选为0.2~0.5 mol/L。
在本发明中，所述同轴静电喷雾的操作条件优选包括：壳层溶液推注速度为0.1~1mm/min，优选为0.3~0.5 mm/min；核芯溶液推注速度为0.1~1 mm/min，优选为0.1~0.5 mm/min；电压为10~25 V，优选为15~20 V，接收距离为2~10 cm，优选为5~9 cm；所述同轴静电喷雾采用的同轴针头的型号优选为32G#22G、30G#21G、28G#20G或25G#18G，其中，以32G#22G为例，32G表示同轴针头中套在内侧的针头的型号，22G表示外侧针头的型号；G表示针管尺寸，具体的，18G内径为0.9mm，外径为1.3mm，20G内径为0.6mm，外径为0.9mm，21G内径为0.5mm，外径为0.8mm，22G内径为0.4mm，外径为0.7mm，25G内径为0.2mm，外径为0.5mm，28G内径为0.15mm，外径为0.35mm，30G内径为0.12mm，外径为0.32mm，32G内径为0.06mm外径为0.24mm。在本发明的具体实施例中，具体是将所述壳层溶液注入同轴喷嘴的壳流室中，核芯溶液注入同轴喷嘴的芯流室，之后在上述条件下进行同轴静电喷雾。本发明对同轴静电喷雾采用的装置没有特殊要求，采用本领域技术人员熟知的静电电纺丝仪进行同轴静电喷雾即可。
在本发明中，壳层溶液和核芯溶液通过同轴静电喷雾法喷入接收液中后，海藻酸钠和金属离子发生反应形成凝胶，明胶和海藻酸盐凝胶形成壳层，同时所述氧化再生纤维素掺杂在壳层中，形成骨架结构，壳层将莪术油包覆，形成核壳微球；得到核壳微球后，本发明优选微球收集并用双蒸水进行冲洗，去除表面的接收液，之后在双蒸水中进行保存。
本发明还提供了上述方案所述制备方法制备得到的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球（也称为莪术油核壳微球）；所述莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球具有核壳结构，核芯为莪术油，壳层成分包括明胶、海藻酸盐和氧化再生纤维素；所述海藻酸盐为海藻酸的二价或三价金属盐，优选为海藻酸钙；所述莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球中莪术油的载药量优选为28.62~43.20%。
本发明还提供了上述方案所述的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球在制备肝动脉化疗栓塞剂中的应用。本发明提供的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球具有缓释性能，生物利用度高，且力学性能好，能有效抵抗微球的挤压变形，避免在体内发生破碎，使莪术油在肿瘤血管部位牢固栓塞，具有广阔的应用前景。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
1.试剂的配制
1）海藻酸钠明胶溶液的配制：称取0.6 g的海藻酸钠，0.2 g的明胶，0.18 g的氯化钠，加入双蒸水至20 mL。在磁力搅拌器上搅拌过夜，至形成透明溶液。
氧化再生纤维素溶液的配制：将NaOH 2.8 g和尿素4.8 g溶于40 mL水中，将所得溶液在-20 ℃的冰箱中冻成冰水混合状态。取2 g的氧化再生纤维素纤维膜剪成碎片，放入冷冻的碱尿体系中溶解，磁力搅拌10 min后形成澄清的溶液，放在-20 ℃的冰箱中进行保存。使用时需过两次0.22 μm的滤膜，防止堵塞针头。
取6 mL的海藻酸钠明胶溶液和2 mL的氧化再生纤维素溶液进行混合，磁力搅拌均匀，作为壳层溶液。
2）取5 mL的莪术油作为核芯溶液。
2.莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的合成
以莪术油为油相，氧化再生纤维素海藻酸钠明胶溶液为水相，制备油/水型（O/W型）核壳结构的微球。采用同轴电喷法，依托静电纺丝仪进行制备，具体步骤如下：用注射器分别吸取壳层溶液和核芯溶液各5 mL，置于静电纺丝仪的推注部分，设定壳层溶液推注速度0.3 mm/min，核芯溶液推注速度0.1 mm/min，电压20 V，要求环境参数稳定，取0.2 mol/L的氯化钙溶液100 mL作为接收液，接收距离8 cm。使用的同轴针头的型号分别为32G#22G、30G#21G、28G#20G、25G#18G。得到核壳结构的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球。微球用双蒸水进行多次冲洗，去除表面多余的接收液后，放入4℃冰箱在双蒸水中进行保存。
实施例2
1.试剂的配制
1）海藻酸钠明胶溶液的配制：称取0.4 g的海藻酸钠，0.2 g的明胶，0.18 g的氯化钠。加入双蒸水至20 mL，在磁力搅拌器上搅拌过夜，至形成透明溶液。
氧化再生纤维素溶液的配制：将NaOH 2.8 g和尿素4.8 g溶于40 mL水中，将所得溶液在-20 ℃的冰箱中冻成冰水混合状态。取2 g的氧化再生纤维素纤维膜剪成碎片，放入冷冻的碱尿体系中溶解，磁力搅拌10 min后形成澄清的溶液，放在-20 ℃的冰箱中进行保存。使用时需过两次0.22 μm的滤膜，防止堵塞针头。
取6 mL的海藻酸钠明胶溶液和2 mL的氧化再生纤维素溶液进行混合，磁力搅拌均匀，作为壳层溶液。
2）取5 mL的莪术油作为核芯溶液。
2.莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的合成
以莪术油为油相，氧化再生纤维素海藻酸钠明胶溶液为水相，制备油/水型（O/W型）核壳结构的微球。采用同轴电喷法，依托静电纺丝仪进行制备，具体步骤如下：用注射器分别吸取壳层溶液和核芯溶液各5 mL，置于静电纺丝仪的推注部分，设定壳层溶液推注速度0.3 mm/min，核芯溶液的推注速度0.1 mm/min，电压20 V，要求环境参数稳定，取0.4mol/L的硫酸钡溶液100 mL作为接收液，接收距离8 cm，使用的同轴针头的型号分别为32G#22G、30G#21G、28G#20G、25G#18G。得到核壳结构的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球。微球用双蒸水进行多次冲洗，去除表面多余的接收液后，放入4℃冰箱在双蒸水中进行保存。
实施例3
1.试剂的配制
1）海藻酸钠明胶溶液的配制：称取0.5 g的海藻酸钠，0.2 g的明胶，0.18 g的氯化钠。加入双蒸水至20 mL，在磁力搅拌器上搅拌过夜，至形成透明溶液。
氧化再生纤维素溶液的配制：将NaOH 2.8 g和尿素4.8 g溶于40 mL水中，将所得溶液在-20 ℃的冰箱中冻成冰水混合状态。取2 g的氧化再生纤维素纤维膜剪成碎片，放入冷冻的碱尿体系中溶解，磁力搅拌10 min后形成澄清的溶液，放在-20 ℃的冰箱中进行保存。使用时需过两次0.22 μm的滤膜，防止堵塞针头。
取2 mL的海藻酸钠明胶溶液和2 mL的氧化再生纤维素溶液进行混合，磁力搅拌均匀，作为壳层溶液。
2）取5 mL的莪术油作为核芯溶液。
2.莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的合成
以莪术油为油相，氧化再生纤维素海藻酸钠明胶溶液为水相，制备油/水型（O/W型）核壳结构的微球。采用同轴电喷法，依托静电纺丝仪进行制备，具体步骤如下：用注射器分别吸取壳层溶液和核芯溶液各5 mL，置于静电纺丝仪的推注部分，设定壳层溶液推注速度0.5 mm/min，核芯溶液推注速度0.1 mm/min，电压12 V，要求环境参数稳定，取0.2 mol/L的氯化锌溶液100 mL作为接收液，接收距离8 cm，使用的同轴针头的型号分别为32G#22G、30G#21G、28G#20G、25G#18G。得到核壳结构的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球。微球用双蒸水进行多次冲洗，去除表面多余的接收液后，放入4℃冰箱在双蒸水中进行保存。
实施例4
1.试剂的配制
1）海藻酸钠明胶溶液的配制：称取0.5 g的海藻酸钠，0.2 g的明胶，0.18 g的氯化钠，加入双蒸水至20 mL。在磁力搅拌器上搅拌过夜，至形成透明溶液。
氧化再生纤维素溶液的配制：将NaOH 2.8 g和尿素4.8 g溶于40 mL水中，将所得溶液在-20 ℃的冰箱中冻成冰水混合状态。取2 g的氧化再生纤维素纤维膜剪成碎片，放入冷冻的碱尿体系中溶解，磁力搅拌10 min后形成澄清的溶液，放在-20 ℃的冰箱中进行保存。使用时需过两次0.22 μm的滤膜，防止堵塞针头。
取4 mL的海藻酸钠明胶溶液和1 mL的氧化再生纤维素溶液进行混合，磁力搅拌均匀，作为壳层溶液。
2）取5 mL的莪术油作为核芯溶液。
2.莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的合成
以莪术油为油相，氧化再生纤维素海藻酸钠明胶溶液为水相，制备油/水型（O/W型）核壳结构的微球。采用同轴电喷法，依托静电纺丝仪进行制备，具体步骤如下：用注射器分别吸取壳层溶液和核芯溶液各5 mL，置于静电纺丝仪的推注部分，设定壳层溶液推注速度0.5 mm/min，核芯溶液推注速度0.1 mm/min，电压15 V，要求环境参数稳定，取0.2 mol/L的硫酸铜溶液100 mL作为接收液，接收距离8 cm，使用的同轴针头的型号分别为32G#22G、30G#21G、28G#20G、25G#18G。得到核壳结构的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球。微球用双蒸水进行多次冲洗，去除表面多余的接收液后，放入4℃冰箱在双蒸水中进行保存。
实施例5
其他条件和实施例1相同，仅将其中海藻酸钠明胶溶液的配制改为：称取0.1 g的海藻酸钠，0.02 g的明胶，0.02 g的氯化钠，加入双蒸水至20 mL。在磁力搅拌器上搅拌过夜，至形成透明溶液。
采用28G#20G同轴针头，按照实施例1的条件进行制备，得到核壳结构的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球。
实施例6
其他条件和实施例1相同，仅将其中海藻酸钠明胶溶液的配制改为：称取1 g的海藻酸钠，0.6 g的明胶，0.4 g的氯化钠，加入双蒸水至20 mL。在磁力搅拌器上搅拌过夜，至形成透明溶液。
采用28G#20G同轴针头，按照实施例1的条件进行制备，得到核壳结构的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球。
实施例7
其他条件和实施例1相同，仅在配制海藻酸钠明胶溶液时省略氯化钠。并且，在制备壳层溶液时，取1 mL的海藻酸钠明胶溶液和3 mL的氧化再生纤维素溶液进行混合。
采用28G#20G同轴针头，按照实施例1的条件进行制备，得到核壳结构的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球。
实施例8
其他条件和实施例1相同，仅在配制氧化再生纤维素溶液时，将NaOH的用量改为1g，尿素用量改为4g，水的用量改为30mL，氧化再生纤维素的用量改为1g。
并且，在制备壳层溶液时，取5mL的海藻酸钠明胶溶液和1 mL的氧化再生纤维素溶液进行混合。
采用28G#20G同轴针头，按照实施例1的条件进行制备，得到核壳结构的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球。
实施例9
其他条件和实施例1相同，仅在配制氧化再生纤维素溶液时，将NaOH的用量改为5g，尿素用量改为10g，水的用量改为60mL，氧化再生纤维素的用量改为5g。
并且，在制备壳层溶液时，取1mL的海藻酸钠明胶溶液和5 mL的氧化再生纤维素溶液进行混合。
采用28G#20G同轴针头，按照实施例1的条件进行制备，得到核壳结构的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球。
性能测试：
1、形貌测试和标准
图1为实施例1中采用28G#20G同轴针头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的实物图。根据图1可以看出，本发明制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球粒径均一，分散性好。另外，经观察表明，实施例2~实施例9均能制备得到粒径均一、分散性好的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球。
图2为实施例1中采用不同型号同轴喷头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的光学显微镜照片，其中A为25G#18G、B为28G#20G、C为30G#21G、D为32G#22G，标尺均为200μm。根据图2可以看出，采用不同型号的同轴喷头，能够制备得到不同尺寸的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球，并且所得微球均具有粒径均匀的特点。
图3为实施例1中采用不同型号同轴喷头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的粒径频率分布图，其中A为25G#18G、B为28G#20G、C为30G#21G、D为32G#22G。图3为用ImageJ软件计算了100个微球的粒径，制得的粒径分布直方图。根据图3可以看出，本发明制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球粒径分布较窄。
将实施例1中采用28G#20G号同轴针头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球冻干后进行扫描电镜测试，结果如图4所示。根据图4可以观察到明显的核壳结构，莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球在冻干后表面出现皱缩现象。
2、红外光谱测试
图5为实施例1中采用28G#20G号同轴针头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的红外光谱图。根据图5可以看出，海藻酸钠光谱中3436 cm
3、载药量和包封率测试
图6为实施例1中采用不同型号同轴喷头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的载药量和包封率测试结果。具体测试数据如表1所示。
表1 莪术油核壳微球的载药量和包封率（平均值±SD,n=3,%)
根据图6和表1可知，本发明制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的载药量为28.62~43.20 %，包封率为92.84~99.72 %。
4、体外释放实验
用透析袋法测定实施例1制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的体外释药特性，具体步骤如下：精密移取10 mL 4种不同型号同轴喷头制备的湿态莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球，平均分成三份，置于预处理好的透析袋中（截留分子量为3500）。将上述透析袋分别放入盛有40 mL释放介质（PBS，pH7.4，含0.5%的吐温-80）的锥形瓶内，并置于（37±0.5）℃，100 r/min，恒温水浴振荡器中。分别于0、0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、12、24、48、72、96 h取锥形瓶内的透析液2 mL，同时补充等量新鲜的上述释放介质。平行重复3次，取上述溶液0.2 mL于2 mL EP管中，用香草醛硫酸液定容到2 mL摇匀。避光显色1 h在508 nm处测定吸光度，计算累积释放率，考察其释放行为。同时采用游离的莪术油进行相同的实验，作为对比。
图7为实施例1中采用不同型号同轴喷头制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的体外释放曲线，其中ZTO表示游离的莪术油。从图7中可以明显看出，本发明制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球具有更好的缓释能力。
5、力学性能测试
对实施例1制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的力学性能进行测试；同时，制备莪术油/海藻酸钠明胶栓塞微球并进行力学性能测试，以和莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球的力学性能进行对比。其中，莪术油/海藻酸钠明胶栓塞微球的制备方法为：其他条件和实施例1相同，仅省略壳层中的氧化再生纤维素，即直接以海藻酸钠明胶溶液为壳层溶液，以莪术油为核芯溶液，按照实施例1的条件进行同轴电喷，得到莪术油/海藻酸钠明胶栓塞微球。
图8为实施例1制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球和莪术油/海藻酸钠明胶栓塞微球的力-压缩曲线。根据图8可以看出，随着弹性形变由10%逐渐增大到50%，在相同形变条件下莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球比莪术油/海藻酸钠明胶栓塞微球所需的压力逐渐增大，抗挤压的性能更强，表现出更好的弹性性能。说明本发明制备的莪术油/氧化再生纤维素栓塞微球力学性能好，有效抵抗微球的挤压变形，避免在体内发生破碎，使莪术油在肿瘤血管部位牢固栓塞。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。