喋啶酮化合物及其用途

【技术领域】

本发明涉及适用于治疗细胞增殖性病症(例如，癌症)的化合物及方法。本发明还提供包含本发明化合物的药学上可接受的组合物及使用所述组合物治疗各种增生性病症的方法。

【背景技术】

细胞增殖性病症包含形态和/或基因型上不同于周围组织的恶性及非恶性细胞群体。细胞增殖性病症的实例包括例如实体肿瘤、癌症、糖尿病性视网膜病变、眼内新生血管性综合征、黄斑变性、类风湿性关节炎、牛皮癣及子宫内膜异位。癌症为一组涉及异常细胞增殖、可能侵袭或扩散至身体其他部位的疾病。根据疾病控制与预防中心(Centers forDisease Control and Prevention；CDC)，癌症为美国第二主要死亡原因。因此，需要对细胞增殖性病症的额外治疗以向患者提供更多选择。

【发明内容】

现发现本发明化合物及其药学上可接受的组合物适用于治疗增生性病症(例如癌症)。在一个方面中，本发明提供式I化合物：

或其药学上可接受的盐，其中各变量如本文所定义及描述。

本发明化合物及其药学上可接受的组合物适用于治疗如本文所描述的多种增生性病症(例如癌症)。

【附图的简单说明】

图1为展示化合物136对若干转录报导子的作用的图且展示了经1μM化合物136处理六个小时的HepG2细胞中报导子活性(p<0.01)的倍数变化。

图2为展示亲本HepG2细胞及其中WFS1通过CRISPR/Cas9经基因剔除的HepG2细胞中的WFS1及微管蛋白水平的免疫印迹。

图3为展示经空白对照反转录病毒(pCLPCX)转导的Hek293细胞及经编码全长WFS1cDNA的反转录病毒转导的Hek293细胞中的WFS1蛋白水平的免疫印迹。

图4为展示表达阴性对照shRNA或靶向WFS1的shRNA的HepG2及DU4475癌细胞中的WFS1及微管蛋白水平的免疫印迹。

图5A及图5B为分别展示HepG2细胞及Hek293细胞中由化合物136诱导的钙通量程度的图，其中WFS1蛋白的水平已通过基因剔除(KO)或过度表达改变。

图6为展示在暴露于化合物136或毒胡萝卜素(thapsigargin)6小时之后，亲本HepG2细胞或其中WFS1通过CRISPR/Cas9经基因剔除的HepG2细胞中的WFS1、ATF4、XBP1、核纤层蛋白(lamin)及微管蛋白水平的免疫印迹。

图7为描绘在暴露于化合物136或毒胡萝卜素6小时之后，其在亲本HepG2细胞或其中WFS1通过CRISPR/Cas9经基因剔除的HepG2细胞中的表达变化大于2倍的基因的数目的图。

图8为展示放射性标记化合物136与具有不同程度的WFS1蛋白表达的细胞的膜溶解物的结合程度的图。

图9为展示一组膀胱癌细胞株中WFS1基因表达及对化合物136的反应之间的关联的图。

图10为展示一组428个癌细胞株中WFS1基因表达及对化合物136的反应之间的关联的图。

图11为展示一组23个患者来源的肺异种移植物中WFS1基因表达及对化合物136的反应之间的关联的图。

【实施方案】

1.本发明的某些实施方案的一般描述：

已发现，本发明化合物或其盐在多种细胞株来源及患者来源的异种移植模型中展现明显功效。举例而言，发现本发明化合物或其盐在非小细胞肺癌(NSCLC)、骨髓瘤、肝细胞癌(HCC)、乳癌及黑素瘤的模型中促成完全及持久消退。还已发现，本发明化合物使得对细胞生存力，特定言之过度表达Wolframin(WFS1)的细胞的抑制增强。在不希望受任何特定理论束缚的情况下，据信本发明化合物引起经由称为Wolframin(WFS1)的推定Ca

在一个方面中，本发明提供式I化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

环A选自：3元至8元饱和或部分不饱和单环碳环、苯基、茚满基、具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的4元至8元饱和或部分不饱和单环杂环、具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至12元饱和或部分不饱和双环杂环、5元至8元饱和或部分不饱和桥连双环碳环、具有1至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5元至6元单环杂芳环或具有1至5个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至10元双环杂芳环；

L为共价键或C

R

R

R

R

R

R

R

R

R

各R

两个R

各R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C

同一氮上的两个R基团任选地与其间插原子一起形成除该氮以外具有0至3个独立地选自氮、氧及硫的杂原子的任选地被1至2个氧代取代的4元至7元饱和、部分不饱和或杂芳环；

R

X为N或CH；且

n为0、1、2、3、4或5。

2.化合物及定义：

本发明化合物包括在本文中一般描述且通过本文所揭示的类别、子类及种类进一步说明的那些化合物。如本文所用，除非另有指示，否则以下定义应适用。出于本发明的目的，化学元素根据元素周期表(Periodic Table of the Elements),CAS版,Handbook ofChemistry and Physics,第75版来鉴别。另外，有机化学的一般原理描述于“OrganicChemistry”,Thomas Sorrell,University Science Books,Sausalito:1999及“March'sAdvanced Organic Chemistry”,第5版,编者：Smith,M.B.，及March,J.,John Wiley&Sons,New York:2001，其全部内容以引用的方式并入本文中。

如本文所用，术语“脂族基”或“脂族基团”意味着完全饱和或含有一个或多个不饱和单元的直链(即，非分支链)或支链、被取代或未被取代的烃链，或完全饱和或含有一个或多个不饱和单元但不为芳族的单环烃或双环烃，其与分子的其余部分具有单一连接点(在本文中也被称作“碳环”、“环脂族基”或“环烷基”)。除非另外规定，否则脂族基含有1至6个脂族碳原子。在一些实施方案中，脂族基含有1至5个脂族碳原子。在其他实施方案中，脂族基含有1至4个脂族碳原子。在其他实施方案中，脂族基含有1至3个脂族碳原子，且在其他实施方案中，脂族基含有1至2个脂族碳原子。在一些实施方案中，“环脂族基”(或“碳环”或“环烷基”)是指完全饱和或含有一个或多个不饱和单元，但不为芳族的单环C

如本文所用，术语“双环”或“双环系统”是指在环系统的两个环之间具有一个或多个共享原子的任何双环系统，即碳环或杂环、饱和或具有一个或多个不饱和单元的双环系统。因此，该术语包括任何容许环融合，诸如邻位稠环或螺环。如本文所用，术语“杂双环”为需要一个或多个杂原子存在于双环的一个或两个环中的“双环”亚群。这类杂原子可存在于环接合处，且任选地被取代，且可选自氮(包括氮氧化物)、氧、硫(包括氧化形式，诸如砜及磺酸根)、磷(包括氧化形式，诸如磷酸根)、硼等。在一些实施方案中，双环基团具有7至12个环成员及0至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子。如本文所用，术语“桥连双环”是指具有至少一个桥键的任何双环系统，即碳环或杂环、饱和或部分不饱和双环系统。如IUPAC所定义，“桥键”为多个原子或一个原子的未分支链或连接两个桥头的价键，其中“桥头”为与三个或更多个骨架原子(除氢以外)键结的环系统的任何骨架原子。在一些实施方案中，桥连双环基团具有7至12个环成员及0至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子。此类桥连双环基团为本领域中所熟知，且包括在下文中阐述的那些基团，其中各基团在任何可取代碳或氮原子处与分子的其余部分连接。除非另外规定，否则桥连双环基团任选地被一个或多个如关于脂族基所阐述的取代基取代。另外或替代地，桥连双环基团的任何可取代氮任选地被取代。例示性双环包括：

例示性桥连双环包括：

术语“低碳数烷基”是指C

术语“低碳数卤烷基”是指被一个或多个卤素原子取代的C

术语“杂原子”意味着氧、硫、氮、磷或硅中的一个或多个(包括氮、硫、磷或硅的任何氧化形式；任何碱性氮的季铵化形式；或杂环的可取代氮，例如N(如3,4-二氢-2H-吡咯基中)、NH(如吡咯烷基中)或NR

如本文所用，术语“不饱和”意味着一部分具有一个或多个不饱和单元。

如本文所用，术语“二价C

术语“亚烷基”是指二价烷基。“亚烷基链”为聚亚甲基，即-(CH

术语“亚烯基”是指二价烯基。被取代的亚烯基链为含有至少一个双键的聚亚甲基，其中一个或多个氢原子被取代基取代。适合的取代基包括下文关于被取代的脂族基所描述的那些取代基。

如本文所用，术语“环亚丙基”是指以下结构的二价环丙基：

术语“卤素”意味着F、Cl、Br或I。

单独使用或如在“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳氧基烷基”中作为较大部分的一部分使用的术语“芳基”是指具有总共五至十四个环成员的单环或双环系统，其中系统中的至少一个环为芳族且其中系统中的各环含有3至7个环成员。术语“芳基”可与术语“芳环”互换使用。在本发明的某些实施方案中，“芳基”是指包括(但不限于)苯基、联苯基、萘基、蒽基及其类似基团的芳环系统，其可带有一个或多个取代基。如本文所用，在术语“芳基”范畴内还包括芳环与一个或多个非芳环稠合的基团，诸如茚满基、邻苯二甲酰亚氨基、萘酰亚氨基、啡啶基或四氢萘基及其类似基团。

单独使用或作为例如“杂芳烷基”或“杂芳烷氧基”的较大部分的一部分使用的术语“杂芳基”及“杂芳”是指具有5至10个环原子，优选5、6或9个环原子、在环状数组中共享6、10或14π电子且除碳原子外具有一至五个杂原子的基团。术语“杂原子”是指氮、氧或硫，且包括氮或硫的任何氧化形式及碱性氮的任何季铵化形式。杂芳基包括(但不限于)噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚嗪基、嘌呤基、萘啶基及喋啶基。如本文所用，术语“杂芳基”及“杂芳”还包括其中杂芳环与一个或多个芳基、环脂族或杂环基环稠合的基团，其中连接基或连接点在杂芳环上。非限制性实例包括吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、

如本文所用，术语“杂环(heterocycle/heterocyclic ring)”及“杂环基(heterocyclyl/heterocyclic radical)”可互换使用，且是指稳定的5至7元单环或7元至10元双环杂环部分，其为饱和或部分不饱和的，且除碳原子以外具有一个或多个，优选一至四个如上所定义的杂原子。当关于杂环的环原子使用时，术语“氮”包括被取代的氮。作为一实例，在具有0至3个选自氧、硫或氮的杂原子的饱和或部分不饱和环中，氮可为N(如在3,4-二氢-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或

杂环可在任何杂原子或碳原子处连接至其侧基，从而产生稳定结构，且任何环原子可任选地被取代。此类饱和或部分不饱和杂环基的实例包括(但不限于)四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、哌啶基、吡咯啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、噁唑啶基、哌嗪基、二氧杂环己烷基、二氧戊环基、二氮呯基、噁氮呯基、噻氮呯基、吗啉基及喹咛环基。术语“杂环”、“杂环基”、“杂环基环”、“杂环基团”及“杂环部分”在本文中可互换使用，且还包括杂环基环与一个或多个芳基、杂芳基或环脂族环稠合的基团，诸如吲哚啉基、3H-吲哚基、

如本文所用，术语“部分不饱和”是指包括至少一个双键或参键的环部分。术语“部分不饱和”意欲涵盖具有多个不饱和位点的环，但不意欲包括如本文所定义的芳基或杂芳基部分。

如本文所描述，本发明化合物可含有“任选地被取代”部分。一般而言，术语“被取代”无论前面是否有术语“任选地”均意味着指定部分的一个或多个氢被适合的取代基取代。除非另有指示，否则“任选地被取代”的基团可在基团的各可取代位置处具有适合的取代基，且当任何既定结构中的一个以上位置可被一个以上选自指定基团的取代基取代时，在每一位置处的取代基可相同或不同。由本发明预想的取代基的组合优选为使得形成稳定或化学上可行的化合物的那些取代基。如本文所用，术语“稳定”是指化合物在经受允许其产生、检测及(在某些实施方案中)其回收、纯化及用于本文所揭示的一或多种目的的条件时不发生实质性改变。

可取代碳上的各可选取代基为独立地选自以下的单价取代基：卤素；-(CH

各R

各R

当R

可取代氮上的可选取代基独立地为

如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指在合理医学判断的范畴内，适于与人类及低等动物的组织接触使用而无过度毒性、刺激、过敏反应及类似情形且与合理效益/风险比相称的盐。药学上可接受的盐为本领域中已熟知。举例而言，S.M.Berge等人在以引用的方式并入本文中的J.Pharmaceutical Sciences,1977,66,1-19中详细地描述药学上可接受的盐。本发明化合物的药学上可接受的盐包括衍生自适合无机及有机酸及碱的那些盐。药学上可接受的无毒性酸加成盐的实例为氨基与无机酸(诸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸及过氯酸)或与有机酸(诸如乙酸、草酸、顺丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、丁二酸或丙二酸)形成的盐，或通过使用本领域中所用的其他方法(诸如离子交换)形成的盐。其他药学上可接受的盐包括己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙烷磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲烷磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟碱酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、丁二酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐及其类似盐。

衍生自适当碱的盐包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐及N

除非另有说明，本文中描绘的结构还意在包括该结构的所有异构(例如对映异构、非对映异构及几何(或构形))形式；例如，各不对称中心的R及S构形、Z及E双键异构体及Z及E构形异构体。因此，本发明化合物的单一立体化学异构体以及对映异构、非对映异构及几何(或构形)混合物在本发明范畴内。除非另有说明，否则本发明化合物的所有互变异构形式在本发明范畴内。另外，除非另有说明，否则本文所描绘的结构还意在包括仅在存在一个或多个经同位素富集的原子的方面不同的化合物。举例而言，具有包括氢经氘或氚取代或碳经

3.例示性实施方案的描述：

在一个方面中，本发明提供式I化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

环A选自：3元至8元饱和或部分不饱和单环碳环、苯基、茚满基、具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的4元至8元饱和或部分不饱和单环杂环、具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至12元饱和或部分不饱和双环杂环、5元至8元饱和或部分不饱和桥连双环碳环、具有1至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5元至6元单环杂芳环或具有1至5个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至10元双环杂芳环；

L为共价键或C

R

R

R

R

R

R

R

R

R

各R

两个R

各R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C

同一氮上的两个R基团任选地与其间插原子一起形成除该氮以外具有0至3个独立地选自氮、氧及硫的杂原子的任选地被1至2个氧代取代的4元至7元饱和、部分不饱和或杂芳环；

R

X为N或CH；且

n为0、1、2、3、4或5。

如上文大体上定义，环A选自：3元至8元饱和或部分不饱和单环碳环、苯基、茚满基、具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的4元至8元饱和或部分不饱和单环杂环、具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至12元饱和或部分不饱和双环杂环、5元至8元饱和或部分不饱和桥连双环碳环、具有1至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5元至6元单环杂芳环或具有1至5个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至10元双环杂芳环。

在一些实施方案中，环A为3元至8元饱和或部分不饱和单环碳环。在一些实施方案中，环A为苯基。在一些实施方案中，环A为茚满基。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的4元至8元饱和或部分不饱和单环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至12元饱和或部分不饱和双环杂环。在一些实施方案中，环A为5元至8元饱和或部分不饱和桥连双环碳环。在一些实施方案中，环A为具有1至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5元至6元单环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至5个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至10元双环杂芳环。

在一些实施方案中，环A为3元饱和或部分不饱和单环碳环。在一些实施方案中，环A为4元饱和或部分不饱和单环碳环。在一些实施方案中，环A为5元饱和或部分不饱和单环碳环。在一些实施方案中，环A为6元饱和或部分不饱和单环碳环。在一些实施方案中，环A为7元饱和或部分不饱和单环碳环。在一些实施方案中，环A为8元饱和或部分不饱和单环碳环。在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的4元饱和或部分不饱和单环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5元饱和或部分不饱和单环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的6元饱和或部分不饱和单环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的7元饱和或部分不饱和单环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元饱和或部分不饱和单环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮或氧的杂原子的4元至8元饱和或部分不饱和单环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1个选自氮、氧或硫的杂原子的4元至8元饱和或部分不饱和单环杂环。在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A为：

在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元饱和或部分不饱和双环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的9元饱和或部分不饱和双环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的10元饱和或部分不饱和双环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的11元饱和或部分不饱和双环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的12元饱和或部分不饱和双环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮或氧的杂原子的8元至12元饱和或部分不饱和双环杂环。在一些实施方案中，环A为具有1个选自氮、氧或硫的杂原子的8元至12元饱和或部分不饱和双环杂环。在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A为5元饱和或部分不饱和桥连双环碳环。在一些实施方案中，环A为6元饱和或部分不饱和桥连双环碳环。在一些实施方案中，环A为7元饱和或部分不饱和桥连双环碳环。在一些实施方案中，环A为8元饱和或部分不饱和桥连双环碳环。在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A为具有1至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5元单环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的6元单环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5元至6元单环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5元至6元单环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1个选自氮、氧或硫的杂原子的5元至6元单环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮或氧的杂原子的5元单环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮或硫的杂原子的5元单环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮或氧的杂原子的6元单环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮或硫的杂原子的6元单环杂芳环。在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A为：

在一些实施方案中，环A为具有1至5个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元双环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至5个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的9元双环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至5个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的10元双环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至10元双环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至10元双环杂芳环。在一些实施方案中，环A为具有1至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至10元双环杂芳环。在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A选自：

在一些实施方案中，环A选自：

在一些实施方案中，环A为：

在一些实施方案中，环A为

在一些实施方案中，环A选自下表A至表C中所描述的那些环。

如上文大体上定义，L为共价键或C

在一些实施方案中，L为共价键。在一些实施方案中，L为C

在一些实施方案中，L为C

在一些实施方案中，L为C

在一些实施方案中，L为未被取代的C

在一些实施方案中，L为C

在一些实施方案中，L为C

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为：

在一些实施方案中，L为

在一些实施方案中，L为

在一些实施方案中，L选自下表A至表C中所描述的那些链。

如上文大体上定义，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

如上文大体上定义，R

R

R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

如上文大体上定义，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

如上文大体上定义，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

如上文大体上定义，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

如上文大体上定义，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

如上文大体上定义，各R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，两个R

在一些实施方案中，R

如上文大体上定义，各R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C

在一些实施方案中，R为氢。在一些实施方案中，R为任选地被取代的C

在一些实施方案中，R为任选地被1-4个卤素、-CN、-NO

在一些实施方案中，各R选自下表A至表C中所描述的那些基团。

如上文大体上定义，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

如上文大体上定义，X为N或CH。

在一些实施方案中，X为N。在一些实施方案中，X为CH。

在一些实施方案中，X选自下表A至表C中所描述的那些基团。

如上文大体上定义，n为0、1、2、3、4或5。

在一些实施方案中，n为0。在一些实施方案中，n为1、2、3、4或5。在一些实施方案中，n为1、2、3或4。在一些实施方案中，n为1、2或3。在一些实施方案中，n为1。在一些实施方案中，n为2。在一些实施方案中，n为3。在一些实施方案中，n为4。在一些实施方案中，n为5。

在一些实施方案中，n选自下表A至表C中所描述的那些数字。

在一些实施方案中，本发明提供一种式I'化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式II化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式II'化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式III化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式III'化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式IV化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式IV'化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式V化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式V'化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式VI-a、VI-b、VI-c或VI-d化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式VI'-a、VI'-b、VI'-c或VI'-d化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式VII化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式VII'化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环A、L、R

在一些实施方案中，本发明提供一种式VI'-a、VI'-b、VI'-c或VI'-d化合物或其药学上可接受的盐，其中

R

或

R

在一些实施方案中，

在一些实施方案中，

在一些实施方案中，

在一些实施方案中，n'为1。在一些实施方案中，n'为2。在一些实施方案中，n'为3。在一些实施方案中，n'为4。在一些实施方案中，n”为1。在一些实施方案中，n”为2。在一些实施方案中，n”为3。在一些实施方案中，n”'为0。在一些实施方案中，n”'为1。在一些实施方案中，n”'为2。在一些实施方案中，n”'为3。

在一些实施方案中，

在一些实施方案中，

在一些实施方案中，

在一些实施方案中，本发明提供一种式VIII'-a、VIII'-b或VIII'-c化合物：

或其药学上可接受的盐，其中

R

n在式VIII'-a及VIII'-b中为0、1、2、3或4且在式VIII'-c中为0、1、2或3；且

其中R

在一些实施方案中，本发明提供一种式I化合物，其中该化合物并不是选自以下的化合物：

本发明的例示性化合物阐述于下表A至表C中。

表A：例示性化合物

表B：例示性化合物

表C：例示性化合物

4.提供本发明化合物的一般方法：

本发明化合物一般可通过本领域技术人员已知的用于类似化合物的合成和/或半合成方法及通过本文实例中详细描述的方法制备或分离。

在下文流程中，当描述特定保护基(“PG”)、离去基(“LG”)或转化条件时，一般本领域技术人员应了解，其他保护基、离去基及转化条件也是适合的且涵盖在内。所述基团及转化详细描述于March's Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,andStructure,M.B.Smith及J.March,第5版,John Wiley&Sons,2001、Comprehensive OrganicTransformations,R.C.Larock,第2版,John Wiley&Sons,1999及Protecting Groups inOrganic Synthesis,T.W.Greene及P.G.M.Wuts,第3版,John Wiley&Sons,1999中，所述文献中的每一者的全部内容在此以引用的方式并入本文中。

如本文所用，词组“离去基”(LG)包括(但不限于)卤素(例如氟、氯、溴、碘)、磺酸酯基(例如甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基、苯磺酸酯基、溴苯磺酸酯基、硝基苯磺酸酯基、三氟甲磺酸酯基)、重氮基及其类似基团。

如本文所用，词组“氧保护基”包括例如羰基保护基、羟基保护基等。羟基保护基为本领域中熟知且包括详细描述于Protecting Groups in Organic Synthesis,T.W.Greene及P.G.M.Wuts,第3版,John Wiley&Sons,1999及Philip Kocienski的“ProtectingGroups”,Georg Thieme Verlag Stuttgart,New York,1994中的那些基团，所述文献的全部内容以引入的方式并入本文中。适合的羟基保护基的实例包括(但不限于)酯基、烯丙基醚基、醚基、硅烷基醚基、烷基醚基、芳烷基醚基及烷氧基烷基醚基。此类酯的实例包括甲酸酯、乙酸酯、碳酸酯及磺酸酯。特定实例包括甲酸酯基、甲酸苯甲酰酯基、氯乙酸酯基、三氟乙酸酯基、甲氧基乙酸酯基、三苯基甲氧基乙酸酯基、对氯苯氧基乙酸酯基、3-苯基丙酸酯基、4-氧代戊酸酯基、4,4-(亚乙基二硫基)戊酸酯基、特戊酸酯(三甲基乙酰基)、巴豆酸酯基、4-甲氧基-巴豆酸酯基、苯甲酸酯基、对苯甲酸苯酯基、2,4,6-三甲基苯甲酸酯基、诸如甲基的碳酸酯基、9-芴基甲基、乙基、2,2,2-三氯乙基、2-(三甲基硅烷基)乙基、2-(苯磺酰基)乙基、乙烯基、烯丙基及对硝基苯甲基。此类硅烷基醚的实例包括三甲基硅烷基、三乙基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基、叔丁基二苯基硅烷基、三异丙基硅烷基及其他三烷基硅烷基醚。烷基醚包括甲基、苯甲基、对甲氧基苯甲基、3,4-二甲氧基苯甲基、三苯甲基、叔丁基、烯丙基及烯丙氧基羰基醚或衍生物。烷氧基烷基醚包括缩醛，诸如甲氧基甲基、甲硫基甲基、(2-甲氧基乙氧基)甲基、苯甲氧基甲基、β-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基及四氢吡喃基醚。芳烷基醚的实例包括苯甲基、对甲氧基苯甲基(MPM)、3,4-二甲氧基苯甲基、邻硝基苯甲基、对硝基苯甲基、对卤基苯甲基、2,6-二氯苯甲基、对氰基苯甲基以及2-吡啶甲基及4-吡啶甲基。

氨基保护基为本领域中熟知且包括详细描述于Protecting Groups in OrganicSynthesis,T.W.Greene及P.G.M.Wuts,第3版,John Wiley&Sons,1999及Philip Kocienski的“Protecting Groups”,Georg Thieme Verlag Stuttgart,New York,1994中的那些基团，所述文献的全部内容以引入的方式并入本文中。适合的氨基保护基包括(但不限于)芳烷基氨基、氨基甲酸酯基、环状酰亚氨基、烯丙基氨基、酰氨基及其类似基团。这些基团的实例包括叔丁氧基羰基(BOC)、乙氧基羰基、甲氧基羰基、三氯乙氧基羰基、烯丙氧羰基(Alloc)、苯甲氧羰基(CBZ)、烯丙基、邻苯二甲酰亚氨基、苯甲基(Bn)、芴基甲基羰基(Fmoc)、甲酰基、乙酰基、氯乙酰基、二氯乙酰基、三氯乙酰基、苯乙基、三氟乙酰基、苯甲酰基及其类似基团。

本领域技术人员应了解，存在于本发明化合物中的各种官能基(诸如脂族基、醇、羧酸、酯、酰胺、醛、卤素及腈)可通过包括(但不限于)还原、氧化、酯化、水解、部分氧化、部分还原、卤化、脱水、部分水合及水合的本领域中熟知的技术互相转化。参见例如“March'sAdvanced Organic Chemistry”,第5版,编者：Smith,M.B.及March,J.,John Wiley&Sons,New York:2001，该文献的全部内容以引用的方式并入本文中。这些相互转化可能需要一或多种前述技术，且用于合成本发明化合物的某些方法描述于下文中。

在一个方面中，本发明提供一种用于合成式I或其子式的化合物或其盐的方法，其包含使式

在一些实施方案中，本发明提供一种下式化合物：

在一些实施方案中，本发明提供一种下式化合物：

在一些实施方案中，本发明提供一种用于合成式VI-a化合物或其盐的方法，其包含使式

在一些实施方案中，本发明提供一种用于合成式VI-b化合物或其盐的方法，其包含使式

在一些实施方案中，本发明提供一种用于合成式VI-c化合物或其盐的方法，其包含使式

在一些实施方案中，本发明提供一种下式化合物：

在一些实施方案中，本发明提供一种下式化合物：

在一些实施方案中，本发明提供一种下式化合物：

在一些实施方案中，本发明提供一种下式化合物：

5.用途、调配及给药：

本发明提供治疗患有癌症的个体的方法。方法包含向个体给药药学上有效量的本文所描述的本发明化学实体(例如为本文所描述的本发明化合物或其药学上可接受的盐或其组合物的化学实体)。

本发明还提供抑制癌细胞生长，包括生物系统中的细胞增殖过程、侵袭性及转移的方法。在一些实施方案中，方法用于抑制或降低患有癌症的个体的癌细胞生长、侵袭性、转移或肿瘤发病率。

本发明还提供本文所描述的本发明化学实体用于治疗患有癌症的个体的用途，以及这些化合物在制造用于治疗患有癌症的个体的药剂中的用途。

本发明还提供治疗患有癌症的个体的方法，包含向个体给药内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(unfold protein response；UPR)的wolframin依赖性调节剂或在ER处或其中的钙通量的wolframin依赖性调节剂。在一些实施方案中，治疗患有癌症的个体的方法包含向个体给药内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂。

在一些实施方案中，本发明提供一种活体外方法，其包含在患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中给药wolframin调节剂。

本发明还提供治疗患有癌症的个体的方法，其包含：

测量个体的癌细胞或肿瘤中沃夫然综合征1基因(wolfram syndrome1gene；WFS1)或由WFS1编码的蛋白质的表达水平；以及

若WFS1或由WFS1编码的蛋白质的该表达水平高于来自患有相同癌症的个体的参考值，则向个体给药内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或在ER处或其中的钙通量的wolframin依赖性调节剂。

本发明还提供一种使患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤对抗癌治疗敏感的方法，其包含增加wolframin在患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中的表达；且其中该抗癌治疗包含向癌细胞或肿瘤给药本文所描述的本发明化学实体。

本发明还提供一种治疗患有癌症的个体的方法，其包含增加wolframin在患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中的表达及向个体给药本文所描述的本发明化学实体。

本发明还提供一种治疗患有癌症的个体的方法，其包含测量个体的癌细胞或肿瘤中沃夫然综合征1基因(WFS1)或由WFS1编码的蛋白质的表达水平，及若WFS1或由WFS1编码的蛋白质的该表达水平高于来自患有相同癌症的个体的参考值，则向个体给药内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或在ER处或其中的钙通量的wolframin依赖性调节剂。

本发明还提供一种测量候选分子与wolframin复合物的结合常数的方法，其包含测量通过可结合于wolframin复合物的候选分子结合于wolframin复合物的放射性标记探针的移位，其中该放射性标记探针为放射性标记wolframin依赖性调节剂，诸如在ER处或其中的钙通量的放射性标记wolframin依赖性调节剂或内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的放射性标记wolframin依赖性调节剂。在一些实施方案中，wolframin复合物为wolframin及wolframin结合蛋白或wolframin相关蛋白的复合物。

本发明还提供一种测量候选分子与wolframin的结合常数的方法，其包含测量通过可结合于wolframin的候选分子结合于wolframin的放射性标记探针的移位，其中该放射性标记探针为放射性标记wolframin依赖性调节剂，诸如在ER处或其中的钙通量的放射性标记wolframin依赖性调节剂或内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的放射性标记wolframin依赖性调节剂。

本发明还提供一种筛检候选分子以判定其是否为内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂的方法，其包含将候选分子引入至癌细胞中，该(所述)癌细胞包含wolframin复合物且已用另一分子处理，该另一分子结合于wolframin复合物且调节ER和/或UPR，或其与wolframin复合物的结合调节ER和/或UPR。

本发明还提供一种筛检候选分子以判定其是否为内质网(ER)处或中的钙通量的wolframin依赖性调节剂的方法，其包含将候选分子引入至癌细胞中，该(所述)癌细胞包含wolframin复合物且已用另一分子处理，该另一分子结合于wolframin复合物且调节在ER处或其中的钙通量，或其与wolframin复合物的结合调节在ER处或其中的钙通量。

本发明还提供一种筛检候选分子以判定其是否为wolframin依赖性调节剂(例如内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或内质网(ER)处或中的钙通量的wolframin依赖性调节剂)，该方法包含：监测用于诱导钙通量、ER压力或UPR的敏感细胞；及比较经工程改造以不表达wolfrmin或表达不同量的wolframin或经由自发突变而在除所表达的wolframin量以外的各方面与该敏感细胞类似的基因匹配细胞中起到相同作用的程度。

本发明还提供一种使患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤对抗癌治疗敏感的方法，其包含增加wolframin在患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中的表达；且其中该抗癌治疗包含向癌细胞或肿瘤给药本文所描述的化学实体。

本发明还提供一种使个体的癌细胞或肿瘤对抗癌治疗敏感的方法，其包含：增加wolframin在患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中的表达；且其中该抗癌治疗包含向癌细胞或肿瘤给药wolframin依赖性调节剂，诸如内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或在ER处或其中的钙通量的wolframin依赖性调节剂。

本发明还提供一种治疗患有癌症的个体的方法，其包含：增加wolframin在患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中的表达；及向个体给药本文所描述的本发明化学实体。

本发明还提供一种治疗患有癌症的个体的方法，其包含：增加wolframin在患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中的表达；及向个体给药本文所描述的wolframin依赖性调节剂，诸如内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或在ER处或其中的钙通量的wolframin依赖性调节剂。

在一些实施方案中，治疗患有癌症的个体的方法包含增加wolframin在患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中的表达；及向个体给药如本文所描述的本发明化学实体。

在一些实施方案中，治疗患有癌症的个体的方法包含增加wolframin在患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中的表达；及向个体给药内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或钙通量的wolframin依赖性调节剂(统称为“wolframin依赖性调节剂”)。在实施方案中，此wolframin依赖性调节剂(例如内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或钙通量的wolframin依赖性调节剂)为小分子(例如本文所描述的本发明化学实体)、多肽、核酸分子或抗体或其片段。

在一些实施方案中，治疗患有癌症的个体的方法包含测量患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中沃夫然综合征1基因(WFS1)或由WFS1编码的蛋白质(wolframin)的表达水平；及若WFS1或由WFS1编码的蛋白质的该表达水平高于来自患有相同癌症的个体的参考值，则向个体给药wolframin依赖性调节剂(例如内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或钙通量的wolframin依赖性调节剂)。在一些实施方案中，wolframin依赖性调节剂(例如wolframin依赖性内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)，或钙通量的wolframin依赖性调节剂)为小分子(例如本文所描述的本发明化学实体)、多肽、核酸分子或抗体或其片段。

在一些实施方案中，使患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤对抗癌治疗敏感的方法包含增加wolframin在个体的癌细胞或肿瘤中的表达；且其中该抗癌治疗包含向癌细胞或肿瘤给药本发明的wolframin调节剂中的任一者(例如内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或钙通量的wolframin依赖性调节剂)。在一些实施方案中，wolframin调节剂为小分子(例如本文所描述的本发明化学实体)。在一些实施方案中，wolframin调节剂为多肽、核酸分子或抗体或其片段。

在一些实施方案中，本文所描述的本发明化学实体为如本文所描述的本发明化合物。在一些实施方案中，本文所描述的本发明化学实体为如本文所描述的本发明化合物的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本文所描述的本发明化学实体为如本文所描述的本发明组合物。

本文还提供一种用于预测患有癌症的个体对抗癌治疗的反应的似然度的试剂盒：a)用以测量个体的癌细胞或肿瘤中沃夫然综合征1基因(WFS1)或由WFS1编码的蛋白质的表达水平的试剂；及b)指南，其包含关于抗癌治疗下的患有癌症的患者是否将对使用本文所描述的本发明化学实体的抗癌治疗有反应的说明书，其中WFS1或由WFS1编码的蛋白质的表达水平高于来自患有相同癌症的个体的参考值指示抗癌治疗下的个体很可能对使用本文所描述的本发明化学实体的抗癌治疗有反应。

在本文所提供的试剂盒及方法的一些实施方案中，wolframin依赖性调节剂为内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或在ER处或其中的钙通量的wolframin依赖性调节剂。在一些实施方案中，wolframin依赖性调节剂中的每一者为小分子。在实施方案中，该小分子为本文描述的本发明化学实体。

在本文所提供的试剂盒及方法的一些实施方案中，wolframin依赖性调节剂为内质网(ER)压力和/或未折叠蛋白反应(UPR)的wolframin依赖性调节剂或在ER处或其中的钙通量的wolframin依赖性调节剂。在一些实施方案中，wolframin依赖性调节剂中的每一者为多肽、核酸分子或抗体或其片段。

在一些实施方案中，wolframin依赖性调节剂为多肽。

在一些实施方案中，wolframin依赖性调节剂为核酸分子。在一些实施方案中，核酸分子调节wolframin复合物引起ER压力和/或UPR的活性或功能。在一些实施方案中，此活性或功能可使用本领域中熟知的习知方法，例如通过使用如实例中所描述的实时PCR筛检来监测。

在实施方案中，wolframin依赖性调节剂为抗体或其片段(例如可打开wolframinCa

本发明还提供一种预测患有癌症的个体对使用本文所描述的本发明化合物或组合物的抗癌治疗的反应的似然度的方法。在一个实施方案中，该方法包含测量个体的肿瘤中的内质网(ER)压力或未折叠蛋白反应(UPR)的水平。

本发明还提供一种治疗患有癌症的个体的方法，其包含：a)测量患有癌症的个体的癌细胞或肿瘤中沃夫然综合征1基因(WFS1)或由WFS1编码的蛋白质的表达水平；及b)若WFS1或由WFS1编码的蛋白质的该表达水平高于来自患有相同癌症的个体的参考值，则向个体给药药学上有效量的本文所描述的本发明化学实体。

在一些实施方案中，本发明提供一种治疗患有癌症的个体的方法，其包含给药药学上有效量的本文所描述的本发明化学实体，其中个体的肿瘤中沃夫然综合征1基因(WFS1)或由WFS1编码的蛋白质的表达水平高于来自患有相同癌症的个体的参考值。

在一些实施方案中，本发明提供一种用于预测患有癌症的个体对使用本文所描述的本发明化学实体的抗癌治疗的反应的似然度的活体外方法，其包含测量获自个体的肿瘤样本中内质网(ER)压力或未折叠蛋白反应(UPR)的表达水平。

药学上可接受的组合物

根据另一实施方案，本发明提供一种组合物，其包含本发明化合物或其药学上可接受的衍生物及药学上可接受的载剂、辅助剂或赋形剂。在某些实施方案中，本发明的组合物中的化合物的量为有效引起生物样本或患者的癌细胞死亡的量。在某些实施方案中，本发明的组合物中的化合物的量为有效诱导生物样本或患者的癌细胞中的UPR的量。在某些实施方案中，本发明的组合物中的化合物的量为有效诱导生物样本或患者的癌细胞中的ER压力的量。在某些实施方案中，本发明的组合物中的化合物的量为有效诱导在生物样本或患者的癌细胞中经由WFS1自ER释放钙的量。在某些实施方案中，本发明组合物经调配以用于向需要此类组合物的患者给药。在一些实施方案中，本发明组合物经调配以用于向患者经口给药。

如本文所用的术语“患者”意味着动物，优选为哺乳动物，且最优选为人类。

术语“药学上可接受的载剂、辅助剂或赋形剂”是指不破坏与其一起调配的化合物的药理学活性的无毒载剂、辅助剂或赋形剂。可用于本发明组合物中的药学上可接受的载剂、辅助剂或赋形剂包括(但不限于)离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(诸如人类血清白蛋白)、缓冲物质(诸如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质(诸如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐)、胶态二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯基吡咯烷酮、纤维素类物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇及羊毛脂。

“药学上可接受的衍生物”意味着本发明化合物的任何无毒盐、酯、酯的盐或其他衍生物，其在给药至接受者后即能够直接或间接提供本发明化合物或其活性代谢物或残余物。

如本文所用，术语“其活性代谢物或残余物”意味着其代谢物或残余物也促成细胞死亡。

本发明组合物可经口、非经肠、通过吸入喷雾、局部、经直肠、经鼻、经颊、经阴道或经由植入式贮器给药。如本文所用的术语“非经肠”包括皮下、静脉内、肌肉内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、病灶内及颅内注射或输注技术。优选地，组合物经口、腹膜内或静脉内给药。本发明组合物的无菌可注射形式可为水性或油性悬浮液。这些悬浮液可根据本领域中已知的技术使用适合的分散剂或润湿剂及悬浮剂来调配。无菌可注射制剂也可为无毒非经肠可接受稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的稀释剂及溶剂中，可采用的有水、林格氏溶液及等张氯化钠溶液。另外，习知地采用无菌不挥发性油作为溶剂或悬浮介质。

为此，可采用任何温和不挥发性油，包括合成单甘油酯或二甘油酯。脂肪酸(诸如油酸及其甘油酯衍生物)适用于制备可注射剂，天然药学上可接受的油(诸如橄榄油或蓖麻油，尤其其聚氧乙烯化形式)亦然。这些油溶液或悬浮液也可含有长链醇稀释剂或分散剂，诸如羧甲基纤维素或常用于调配药学上可接受的剂型(包括乳液及悬浮液)的类似分散剂。其他常用界面活性剂(诸如Tween、Span及其他乳化剂)或常用于制造药学上可接受的固体、液体或其他剂型的生物可用性增强剂也可用于调配的目的。

本发明的药学上可接受的组合物可以任何经口可接受的剂型经口给药，包括(但不限于)胶囊、锭剂、水性悬浮液或溶液。就用于经口使用的锭剂而言，常用载剂包括乳糖及玉米淀粉。也通常添加润滑剂，诸如硬脂酸镁。对于以胶囊形式经口给药，适用的稀释剂包括乳糖及干燥玉米淀粉。当需要将水性悬浮液用于经口使用时，将活性成分与乳化剂及悬浮剂组合。视需要，也可添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。

或者，本发明的药学上可接受的组合物可以用于直肠给药的栓剂形式给药。这些栓剂可通过将药剂与适合的非刺激性赋形剂混合来制备，该赋形剂在室温下为固体但在直肠温度下为液体且因此将在直肠中融化以释放药物。此类物质包括可可脂、蜂蜡及聚乙二醇。

本发明的药学上可接受的组合物也可局部给药，尤其当治疗目标包括通过局部施用容易达到的区域或器官(包括眼睛、皮肤或低位肠道的疾病)时。用于这些区域或器官中的每一者的适合局部调配物容易制备。

用于低位肠道的局部施用可以经直肠栓剂调配物(参见上文)形式或以适合灌肠调配物形式实现。也可使用局部经皮贴片。

对于局部施用而言，所提供的药学上可接受的组合物可经调配为含有悬浮或溶解于一或多种载剂中的活性组分的适合的软膏形式。用于本发明化合物的局部给药的载剂包括(但不限于)矿物油、液体石蜡脂、白石蜡脂、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡及水。或者，所提供的药学上可接受的组合物可以含有悬浮或溶解于一或多种药学上可接受的载剂中的活性组分的适合的洗剂或乳膏形式调配。适合载剂包括(但不限于)矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鲸蜡酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二醇、苯甲醇及水。

对于眼科使用而言，所提供的药学上可接受的组合物可经调配为含或不含防腐剂(诸如氯苄烷铵)、于等张pH值经调整的无菌盐水中的微米尺寸化悬浮液，或优选于等张pH值经调整的无菌盐水中的溶液。或者，对于眼科使用而言，药学上可接受的组合物可以软膏(诸如石蜡脂)形式调配。

本发明的药学上可接受的组合物也可通过经鼻气雾剂或吸入剂来给药。这类组合物根据医药调配领域中熟知的技术制备，且可采用苯甲醇或其他适合的防腐剂、增强生物可用性的吸收促进剂、氟碳化物和/或其他习知增溶剂或分散剂制备为于盐水中的溶液。

最优选地，本发明的药学上可接受的组合物经调配以用于经口给药。此类调配物可与或不与食物一起给药。在一些实施方案中，本发明的药学上可接受的组合物不与食物一起给药。在其他实施方案中，本发明的药学上可接受的组合物与食物一起给药。

可与载剂材料组合以产生呈单一剂型的组合物的本发明化合物的量将取决于所治疗的宿主、特定给药模式而变化。优选地，所提供的组合物应调配成使得可向接受这些组合物的患者给药介于0.01至100毫克/公斤体重/天之间的剂量的抑制剂。

还应理解，任何特定患者的特定剂量及治疗方案将视多种因素而定，所述因素包括所用特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、膳食、给药时间、排泄率、药物组合及治疗医师的判断及所治疗特定疾病的严重度。组合物中本发明化合物的量也将视组合物中的特定化合物而定。

化合物及药学上可接受的组合物的用途

本文所描述的化合物及组合物一般适用于治疗细胞增殖性病症。如上文所提供，已发现本文所描述的化合物能够引起经由称为Wolframin(WFS1)的推定Ca

在一些实施方案中，本发明提供一种用于治疗患者的细胞增殖性病症的方法，其包含向该患者给药本发明化合物或包含该化合物的组合物。在一些实施方案中，本发明提供用于治疗细胞增殖性病症的本发明化合物或包含该化合物的组合物。此类病症详细描述于本文中。在一些实施方案中，细胞增殖性病症为特征在于癌细胞中的Wolframin(WFS1)过度表达的癌症。在一些实施方案中，特征在于Wolframin(WFS1)过度表达的癌症选自非小细胞肺癌(NSCLC)、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、肝细胞癌(HCC)、乳癌、膀胱癌、肾癌及黑素瘤。在一些实施方案中，一种用于治疗如本文所描述的细胞增殖性病症的方法进一步包含测定Wolframin(WFS1)表达水平。在一些实施方案中，Wolframin(WFS1)表达水平通过免疫组织化学和/或微数组探针强度测定。

如本文所用，术语“治疗”是指逆转、减轻如本文所描述的疾病或病症或其一或多种症状，延迟其发作，或抑制其进展。在一些实施方案中，可在已出现一或多种症状之后给药治疗。在其他实施方案中，可在不存在症状的情况下给药治疗。举例而言，可在症状发作之前向易感个体给药治疗(例如，根据症状病史和/或根据遗传性或其他易感性因素)。也可在症状已消退之后继续治疗，例如以预防或延迟其复发。

在一些实施方案中，本发明提供一种用于诱导有需要的患者的ER压力的方法，其包含给药本发明化合物或包含该化合物的组合物。在一些实施方案中，本发明提供一种用于诱导有需要的患者的“未折叠蛋白反应”(UPR)的方法，其包含给药本发明化合物或包含该化合物的组合物。在一些实施方案中，本发明提供一种用于引起有需要的患者经由称为Wolframin(WFS1)的推定Ca

在一些实施方案中，本发明提供一种具有式I至式VIII中任一者的化合物，或包含该化合物的组合物，其用于引起有需要的个体经由称为Wolframin(WFS1)的推定Ca

在本发明中用作细胞增殖的抑制剂的化合物的活性可活体外或活体内分析。分析本发明中的化合物的详细条件阐述于下文实例中。

细胞增殖性病症

本发明的特征在于用于细胞增殖性病症(例如癌症)的诊断及预后以及这些病症的治疗的方法及组合物。本文所描述的细胞增殖性病症包括例如癌症、肥胖及增生相依性疾病。此类病症可使用本领域中已知的方法诊断。

癌症

在一个实施方案中，癌症包括(但不限于)白血病(例如急性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性骨髓细胞性白血病、急性骨髓母细胞白血病、急性前髓细胞性白血病、急性骨髓单核细胞性白血病、急性单核细胞性白血病、急性红白血病、慢性白血病、慢性骨髓细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病)、真性多红血球症(polycythemia vera)、淋巴瘤(例如霍奇金氏病(Hodgkin's disease)或非霍奇金氏病)、华氏巨球蛋白血症(Waldenstrom'smacroglobulinemia)、多发性骨髓瘤、重链病及实体肿瘤，诸如肉瘤及癌瘤(例如纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨原性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤文氏肿瘤(Ewing's tumor)、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、胰脏癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓质癌、支气管癌、肾细胞癌、肝肿瘤、胆管癌、绒膜癌、精原细胞瘤(seminoma)、胚胎性癌embryonal carcinoma)、威尔姆斯瘤(Wilm's tumor)、宫颈癌、子宫癌、睪丸癌、肺癌、小细胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神经胶质瘤、星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme；GBM，也称为神经胶母细胞瘤)、神经管胚细胞瘤(medulloblastoma)、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、血管母细胞瘤、听神经瘤、寡树突神经胶质瘤(oligodendroglioma)、神经鞘瘤、神经纤维肉瘤、脑膜瘤、黑素瘤、神经母细胞瘤及视网膜母细胞瘤)。

在一些实施方案中，癌症为神经胶质瘤、星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤(GBM，也称为神经胶母细胞瘤)、神经管胚细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、血管母细胞瘤、听神经瘤、寡树突神经胶质瘤、神经鞘瘤、神经纤维肉瘤、脑膜瘤、黑素瘤、神经母细胞瘤或视网膜母细胞瘤。

在一些实施方案中，癌症为听神经瘤、星形细胞瘤(例如I级-毛细胞性星形细胞瘤(Pilocytic Astrocytoma)、II级-低级星形细胞瘤、III级-退行性星形细胞瘤或IV级-神经胶母细胞瘤(GBM))、脊索瘤、CNS淋巴瘤、颅咽管瘤、脑干神经胶质瘤、室管膜瘤、混合性神经胶质瘤、视神经神经胶质瘤、室管膜下室管膜瘤、神经管胚细胞瘤、脑膜瘤、转移性脑肿瘤、寡树突神经胶质瘤、垂体肿瘤、原发性神经外胚层(PNET)肿瘤或神经鞘瘤。在一些实施方案中，癌症为在儿童中比成年人中更常见的类型，诸如脑干神经胶质瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、幼年型毛细胞性星形细胞瘤(juvenile pilocytic astrocytoma；JPA)、神经管胚细胞瘤、视神经神经胶质瘤、松果体肿瘤、原发性神经外胚层肿瘤(PNET primitiveneuroectodermal tumor)或横纹肌样瘤(rhabdoid tumor)。在一些实施方案中，患者为成人。在一些实施方案中，患者为儿童或儿科患者。

在另一实施方案中，癌症包括(但不限于)间皮瘤、肝胆(肝及胆管)癌、骨癌、胰脏癌、皮肤癌、头部或颈部癌、皮肤或眼内黑素瘤、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、肛门区癌、胃癌、胃肠道(胃、结肠直肠及十二指肠)癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金氏病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、睪丸癌、慢性或急性白血病、慢性骨髓性白血病、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾脏或尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、非霍奇金氏淋巴瘤、脊柱轴肿瘤(spinal axis tumor)、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、肾上腺皮质癌、胆囊癌、多发性骨髓瘤、胆管癌、纤维肉瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤或上述癌症中的一种或多种的组合。

在一些实施方案中，癌症选自：肝细胞癌、卵巢癌、卵巢上皮癌或输卵管癌；乳头状浆液性囊腺癌(papillary serous cystadenocarcinoma)或子宫乳头状浆液性癌(uterinepapillary serous carcinoma；UPSC)；前列腺癌；睪丸癌；胆囊癌；胆管肝细胞癌(hepatocholangiocarcinoma)；软组织及骨滑膜肉瘤；横纹肌肉瘤；骨肉瘤；软骨肉瘤；尤文氏肉瘤；多形性甲状腺癌；肾上腺皮质腺瘤；胰脏癌；胰管癌或胰脏癌；胃肠道/胃(GIST)癌；淋巴瘤；头颈部鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma of the head and neck；SCCHN)；唾液腺癌；神经胶质瘤或脑癌；神经纤维瘤-1相关的恶性周边神经鞘肿瘤(malignantperipheral nerve sheath tumor；MPNST)；华氏巨球蛋白血症；或神经管胚细胞瘤。

在一些实施方案中，癌症选自肝细胞癌(HCC)、肝母细胞瘤、结肠癌、直肠癌、卵巢癌、卵巢上皮癌、输卵管癌、乳头状浆液性囊腺癌、子宫乳头状浆液性癌(UPSC)、胆管肝细胞癌、软组织及骨滑膜肉瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、多形性甲状腺癌、肾上腺皮质腺瘤、胰脏癌、胰管癌、胰脏癌、神经胶质瘤、神经纤维瘤-1相关的恶性周边神经鞘肿瘤(MPNST)、华氏巨球蛋白血症或神经管胚细胞瘤。

在一些实施方案中，本发明提供一种用于治疗以实体肿瘤形式存在的癌症的方法，该癌症诸如肉瘤、癌瘤或淋巴瘤，该方法包含有需要的患者给药经揭示化合物或其药学上可接受的盐的步骤。实体肿瘤一般包含通常不包括囊肿或液体区域的异常组织块。在一些实施方案中，癌症选自：肾细胞癌或肾癌；肝细胞癌(HCC)或肝母细胞瘤或肝癌；黑素瘤；乳癌；结肠直肠癌瘤或结肠直肠癌；结肠癌；直肠癌；肛门癌；肺癌，诸如非小细胞肺癌(NSCLC)或小细胞肺癌(small cell lung cancer；SCLC)；卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢癌瘤或输卵管癌；乳头状浆液性囊腺癌或子宫乳头状浆液性癌(UPSC)；前列腺癌；睪丸癌；胆囊癌；胆管肝细胞瘤；软组织及骨滑膜肉瘤；横纹肌肉瘤；骨肉瘤；软骨肉瘤；尤文氏肉瘤；多形性甲状腺癌；肾上腺皮质癌；胰脏癌；胰管癌或胰脏癌；胃肠道/胃(GIST)癌；淋巴瘤；头颈部鳞状细胞癌(SCCHN)；唾液腺癌；神经胶质瘤或脑癌；神经纤维瘤-1相关的恶性周边神经鞘肿瘤(MPNST)；华氏巨球蛋白血症；或神经管胚细胞瘤。

在一些实施方案中，癌症选自肾细胞癌、肝细胞癌(HCC)、肝母细胞瘤、结肠直肠癌瘤、结肠直肠癌、结肠癌、直肠癌、肛门癌、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢癌、输卵管癌、乳头状浆液性囊腺癌、子宫乳头状浆液性癌(UPSC)、胆管肝细胞瘤、软组织及骨滑膜肉瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、多形性甲状腺癌、肾上腺皮质癌、胰脏癌、胰管癌、胰脏癌、神经胶质瘤、脑癌、神经纤维瘤-1相关的恶性周边神经鞘肿瘤(MPNST)、华氏巨球蛋白血症或神经管胚细胞瘤。

在一些实施方案中，癌症选自肝细胞癌(HCC)、肝母细胞瘤、结肠癌、直肠癌、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢癌、输卵管癌、乳头状浆液性囊腺癌、子宫乳头状浆液性癌(UPSC)、胆管肝细胞癌、软组织及骨滑膜肉瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、多形性甲状腺癌、肾上腺皮质腺瘤、胰脏癌、胰管癌、胰脏癌、神经胶质瘤、神经纤维瘤-1相关的恶性周边神经鞘肿瘤(MPNST)、华氏巨球蛋白血症或神经管胚细胞瘤。

在一些实施方案中，癌症为肝细胞癌(HCC)。在一些实施方案中，癌症为肝母细胞瘤。在一些实施方案中，癌症为结肠癌。在一些实施方案中，癌症为直肠癌。在一些实施方案中，癌症为卵巢癌或卵巢癌瘤。在一些实施方案中，癌症为卵巢上皮癌在一些实施方案中，癌症为输卵管癌。在一些实施方案中，癌症为乳头状浆液性囊腺癌。在一些实施方案中，癌症为子乳头状宫浆液性癌(UPSC)。在一些实施方案中，癌症为胆管肝细胞瘤。在一些实施方案中，癌症为软组织及骨滑膜肉瘤。在一些实施方案中，癌症为横纹肌肉瘤。在一些实施方案中，癌症为骨肉瘤。在一些实施方案中，癌症为多形性甲状腺癌。在一些实施方案中，癌症为肾上腺皮质癌。在一些实施方案中，癌症为胰脏癌或胰管癌。在一些实施方案中，癌症为胰脏癌。在一些实施方案中，癌症为神经胶质瘤。在一些实施方案中，癌症为恶性周边神经鞘肿瘤(MPNST)。在一些实施方案中，癌症为神经纤维瘤-1相关的MPNST。在一些实施方案中，癌症为华氏巨球蛋白血症。在一些实施方案中，癌症为神经管胚细胞瘤。

本发明的特征进一步在于用于病毒相关癌症的诊断、预后及治疗的方法及组合物，所述癌症包括：人类免疫缺乏病毒(HIV)相关实体肿瘤；人类乳头状瘤病毒(HPV)-16阳性不可治愈实体肿瘤；及成人T细胞白血病，其由I型人类T细胞白血病病毒(human T-cellleukemia virus type I；HTLV-I)引起且为特征在于HTLV-I在白血病细胞中的克隆整合的CD4+T细胞白血病的高侵袭性形式(参见https://clinicaltrials.gov/ct2/show/study/NCT02631746)；以及胃癌、鼻咽癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、头颈部鳞状细胞癌及梅克尔细胞癌(Merkel cell carcinoma)中的病毒相关肿瘤。(参见https://clinicaltrials.gov/ct2/show/study/NCT02488759；还参见https://clinicaltrials.gov/ct2/show/study/NCT0240886、https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02426892)。

在一些实施方案中，本发明提供一种用于治疗有需要的患者的癌症的方法，其包含向患者给药本文所描述的化合物、盐或药物组合物中的任一者。在一些实施方案中，癌症为本文所描述的癌症中的任一者。在一些实施方案中，癌症为黑素瘤癌。在一些实施方案中，癌症为乳癌。在一些实施方案中，癌症为肺癌。在一些实施方案中，肺癌为小细胞肺癌(SCLC)。在一些实施方案中，癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。在一些实施方案中，癌症为骨髓瘤。在一些实施方案中，癌症为多发性骨髓瘤。在一些实施方案中，癌症为肝细胞癌(HCC)。在一些实施方案中，癌症为膀胱癌。在一些实施方案中，癌症为肾癌。在一些实施方案中，癌症为黑素瘤。

在一些实施方案中，肿瘤通过遏制肿瘤的进一步生长来治疗。在一些实施方案中，肿瘤通过使肿瘤的尺寸(例如体积或质量)相对于治疗前肿瘤的尺寸减小至少5％、10％、25％、50％、75％、90％或99％来治疗。在一些实施方案中，肿瘤通过使患者的肿瘤量相对于治疗前的肿瘤量降低至少5％、10％、25％、50％、75％、90％或99％来治疗。

根据本发明的方法的化合物及组合物可使用对治疗或减轻细胞增殖性病症的严重度有效的任何量及任何给药途径给药。所需的精确量将取决于个体的物种、年龄及一般状况、疾病或病症的严重度、特定药剂、其给药模式及其类似因素因个体而不同。优选以单位剂型调配本发明的化合物以实现给药便利性及剂量均一性。如本文所用的表述“单位剂型”是指适于待治疗患者的药剂的物理离散单位。然而，应理解，本发明的化合物及组合物的每日总用量将由主治医师在合理医学判断范畴内决定。用于任何特定患者或生物体的特定有效剂量水平将视多种因素而定，所述因素包括待治疗病症及病症严重度；所用特定化合物的活性；所用特定组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别及膳食；所用特定化合物的给药时间、给药途径及排泄率；治疗持续时间；与所用特定化合物组合或同时使用的药物；及医学技术中熟知的类似因素。如本文所用，术语“患者”意味着动物，优选为哺乳动物，且最优选为人类。

本发明的药学上可接受的组合物可视所治疗的疾病或病症的严重度而经口、经直肠、非经肠、脑池内、阴道内、腹膜内、局部(如通过散剂、软膏或滴剂)、经颊、作为经口或经鼻喷雾或其类似方式向人类及其他动物给药。在某些实施方案中，本发明化合物可以每天每公斤个体体重约0.01mg至约50mg且优选约1mg至约25mg的剂量水平，经口或非经肠一日给药一或多次，以获得所需治疗效果。

用于经口给药的液体剂型包括(但不限于)药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆及酏剂。除活性化合物以外，液体剂型可含有：本领域中常用的惰性稀释剂，诸如水或其他溶剂；增溶剂及乳化剂，诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(尤其棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇及脱水山梨糖醇的脂肪酸酯；及其混合物。除惰性稀释剂以外，经口组合物还可包括佐剂，诸如润湿剂、乳化剂及悬浮剂、甜味剂、调味剂及芳香剂。

可根据已知技术使用适合的分散剂或润湿剂及悬浮剂来调配可注射制剂，例如无菌可注射水性或油性悬浮液。无菌可注射制剂还可为无毒非经肠可接受稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的稀释剂及溶剂中，可采用的有水、林格氏溶液、U.S.P.及等张氯化钠溶液。另外，习知地采用无菌不挥发性油作为溶剂或悬浮介质。出于此目的，可采用任何温和的不挥发性油，包括合成的单甘油酯或二甘油酯。另外，在制备可注射剂时使用脂肪酸，诸如油酸。

可注射调配物可例如通过经由细菌截留过滤器过滤或通过并入灭菌剂来灭菌，呈可在使用前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式。

为延长本发明化合物的效果，通常需要减缓来自皮下或肌肉内注射的化合物的吸收。此可通过使用水溶性较差的结晶或非晶形物质的液体悬浮液来实现。化合物的吸收率则视其溶解率而定，溶解率又可能视晶体尺寸及结晶形式而定。或者，非经肠给药的化合物的延迟吸收通过将化合物溶解或悬浮于油赋形剂中来实现。可注射积存形式通过在可生物降解聚合物(诸如聚乳酸交酯-聚乙交酯)中形成化合物的微胶囊基质来制得。视化合物与聚合物的比率及所采用的特定聚合物的性质而定，可控制化合物释放的速率。其他生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)及聚(酸酐)。积存可注射调配物还通过将化合物包覆于与身体组织兼容的脂质体或微乳液中来制备。

用于经直肠或经阴道给药的组合物优选为栓剂，其可通过将本发明化合物与在环境温度下为固体，但在体温下为液体且因此在直肠或阴道腔中融化并释放活性化合物的适合非刺激性赋形剂或载剂(诸如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡)混合来制备。

用于经口给药的固体剂型包括胶囊、锭剂、丸剂、散剂及颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物可与以下混合：至少一种惰性、药学上可接受的赋形剂或载剂，诸如柠檬酸钠或磷酸氢钙；和/或a)填充剂或增量剂，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇及硅酸；b)粘合剂，诸如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖及阿拉伯胶；c)保湿剂，诸如甘油；d)崩解剂，诸如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、褐藻酸、某些硅酸盐及碳酸钠；e)溶液阻滞剂，诸如石蜡；f)吸收促进剂，诸如季铵化合物；g)润湿剂，诸如鲸蜡醇及单硬脂酸甘油酯；h)吸收剂，诸如高岭土及膨润土；及i)润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固态聚乙二醇、月桂基硫酸钠及其混合物。就胶囊、锭剂及丸剂而言，剂型还可包含缓冲剂。

类似类型的固体组合物还可用作使用诸如乳糖或牛乳糖以及高分子量聚乙二醇及其类似物的赋形剂的软填充及硬填充明胶胶囊中的填充剂。锭剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂及颗粒剂的固体剂型可制备有包衣及壳层，诸如肠溶包衣及医药调配技术中熟知的其他包衣。其可任选地含有乳浊剂，且还可具有仅在或优先在肠道的某一部分中释放或任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质及蜡。类似类型的固体组合物还可用作使用诸如乳糖或牛乳糖以及高分子量聚乙二醇及其类似物的赋形剂的软填充及硬填充明胶胶囊中的填充剂。

活性化合物还可与一或多种如上文所指出的赋形剂一起以微囊封形式存在。锭剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂及颗粒剂的固体剂型可制备有包衣及壳层，诸如肠溶包衣、释放控制包衣及医药调配技术中熟知的其他包衣。在此类固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性稀释剂(诸如蔗糖、乳糖或淀粉)混合。如在一般实践中，此类剂型还可包含除惰性稀释剂以外的额外物质，例如制锭润滑剂及其他制锭助剂，诸如硬脂酸镁及微晶纤维素。就胶囊、锭剂及丸剂而言，剂型还可包含缓冲剂。其可任选地含有乳浊剂，且还可具有仅在或优先在肠道的某一部分中释放或任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质及蜡。

用于局部或经皮给药本发明化合物的剂型包括软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、散剂、溶液、喷雾剂、吸入剂或贴片。活性组分在无菌条件下与药学上可接受的载剂及可能需要的任何所需防腐剂或缓冲剂混合。眼科调配物、滴耳剂和滴眼剂还涵盖于本发明的范畴内。另外，本发明涵盖经皮贴片的用途，所述经皮贴片具有向身体受控递送化合物的附加优势。此类剂型可通过将化合物溶解或分配于适当介质中来制备。还可使用吸收增强剂来增加化合物通过皮肤的通量。速率可通过提供速率控制膜或通过将化合物分散于聚合物基质或凝胶中来控制。

在一些实施方案中本发明涉及一种诱导生物样本中的ER压力的方法，其包含使该生物样本与本发明化合物或包含该化合物的组合物接触的步骤。

在一些实施方案中，本发明涉及一种诱导生物样本中的“未折叠蛋白反应”(UPR)的方法，其包含使该生物样本与本发明化合物或包含该化合物的组合物接触的步骤。

在某些实施方案中，本发明涉及一种引起生物样本中经由称为Wolframin(WFS1)的推定Ca

如本文所用，术语“生物样本”包括(但不限于)细胞培养物或其提取物；由哺乳动物所获得的活组织检查材料或其提取物；及血液、唾液、尿液、粪便、精液、眼泪或其他体液或其提取物。

额外治疗剂的共同给药

视待治疗的特定病症或疾病而定，通常经给药以治疗彼病症的额外治疗剂还可存在于本发明组合物中。如本文所用，通常经给药以治疗特定疾病或病症的额外治疗剂称作“适于所治疗的疾病或病症”。

在一些实施方案中，本发明提供一种治疗所揭示疾病或病症的方法，其包含向有需要的患者给药有效量的本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐及同时或依序共同给药有效量的一或多种额外治疗剂，诸如本文所描述的那些治疗剂。在一些实施方案中，该方法包括共同给药一种额外治疗剂。在一些实施方案中，该方法包括共同给药两种额外治疗剂。在一些实施方案中，所揭示的化合物与一或多种额外治疗剂的组合协同作用。

在一些实施方案中，额外治疗剂选自免疫刺激治疗化合物。在一些实施方案中，免疫刺激治疗化合物选自埃罗妥珠单抗(elotuzumab)、米伐木肽(mifamurtide)、铎样受体的促效剂或活化剂或RORγt的活化剂。

在一些实施方案中，该方法进一步包含向该患者给药第三治疗剂，诸如免疫检查点抑制剂。在一些实施方案中，该方法包含向需要的患者给药选自本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐、免疫刺激治疗化合物及免疫检查点抑制剂的三种治疗剂。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括OX40促效剂。临床试验中研究的OX40促效剂包括：PF-04518600/PF-8600(Pfizer)，一种转移性肾癌(NCT03092856)及晚期癌症及肿瘤(NCT02554812；NCT05082566)中的促效性抗OX40抗体；GSK3174998(Merck&Co.)，一种1期癌症试验(NCT02528357)中的促效性抗OX40抗体；MEDI0562(Medimmune/AstraZeneca)，晚期实体肿瘤(NCT02318394及NCT02705482)中的抗OX40抗体；MEDI6469，一种患有结肠直肠癌(NCT02559024)、乳癌(NCT01862900)、头颈癌(NCT02274155)及转移性前列腺癌(NCT01303705)的患者中的促效性抗OX40抗体(Medimmune/AstraZeneca)；以及BMS-986178(Bristol-Myers Squibb)，一种晚期癌症(NCT02737475)中的促效性抗OX40抗体。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括CD137(还称作4-1BB)促效剂。临床试验中研究的CD137促效剂包括：乌图木单抗(utomilumab)(PF-05082566，Pfizer)，一种弥漫性大型B细胞淋巴瘤(NCT02951156)中及晚期癌症及肿瘤(NCT02554812及NCT05082566)中的促效性抗CD137抗体；乌瑞鲁单抗(urelumab)(BMS-663513，Bristol-Myers Squibb)，一种黑素瘤及皮肤癌(NCT02652455)以及神经胶母细胞瘤及神经胶质肉瘤(NCT02658981)中的促效性抗CD137抗体。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括CD27促效剂。临床试验中研究的CD27促效剂包括：瓦里木单抗(varlilumab)(CDX-1127，Celldex Therapeutics)，一种头颈部鳞状细胞癌、卵巢癌、结肠直肠癌、肾细胞癌及神经胶母细胞瘤(NCT02335918)、淋巴瘤(NCT01460134)以及神经胶质瘤及星形细胞瘤(NCT02924038)中的促效性抗CD27抗体。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)促效剂。临床试验中研究的GITR促效剂包括：TRX518(Leap Therapeutics)，一种恶性黑素瘤及其他恶性实体肿瘤(NCT01239134及NCT02628574)中的促效性抗GITR抗体；GWN323(Novartis)，一种实体肿瘤及淋巴瘤(NCT 02740270)中的促效性抗GITR抗体；INCAGN01876(Incyte/Agenus)，一种晚期癌症(NCT02697591及NCT03126110)中的促效性抗GITR抗体；MK-4166(Merck&Co.)，一种实体肿瘤(NCT02132754)中的促效性抗GITR抗体；及MEDI1873(Medimmune/AstraZeneca)，一种晚期实体肿瘤(NCT02583165)中的具有人类IgG1Fc域的促效性六聚GITR-配体分子。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括诱导性T细胞共刺激剂(ICOS，还称为CD278)促效剂。临床试验中研究的ICOS促效剂包括：MEDI-570(Medimmune)，一种淋巴瘤(NCT02520791)中的促效性抗ICOS抗体；GSK3359609(Merck&Co.)，一种1期(NCT02723955)中的促效性抗ICOS抗体；JTX-2011(Jounce Therapeutics)，一种1期(NCT02904226)中的促效性抗ICOS抗体。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括杀手IgG样受体(KIR)抑制剂。临床试验中研究的KIR抑制剂包括：利瑞路单抗(lirilumab)(IPH2102/BMS-986015，Innate Pharma/Bristol-Myers Squibb)，一种白血病(NCT01687387、NCT02399917、NCT02481297、NCT02599649)、多发性骨髓瘤(NCT02252263)及淋巴瘤(NCT01592370)中的抗KIR抗体；骨髓瘤(NCT01222286及NCT01217203)中的IPH2101(1-7F9，Innate Pharma)；以及IPH4102(Innate Pharma)，一种淋巴瘤(NCT02593045)中的结合于长细胞质尾区的三个域的抗KIR抗体(KIR3DL2)。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括CD47与信号调节蛋白α(SIRPa)之间的相互作用的CD47抑制剂。临床试验中研究的CD47/SIRPa抑制剂包括：ALX-148(AlexoTherapeutics)，一种1期(NCT03013218)中结合于CD47且防止CD47/SIRPa介导的信号传导的(SIRPa)的拮抗性变异体；TTI-621(SIRPa-Fc，Trillium Therapeutics)，一种1期临床试验(NCT02890368及NCT02663518)中的通过连接SIRPa的CD47结合域的N端与人类IgG1的Fc域而产生、通过结合人类CD47而起作用且预防其递送其“不许吞噬(do not eat)”信号至巨噬细胞的可溶性重组融合蛋白；CC-90002(Celgene)，一种白血病(NCT02641002)中的抗CD47抗体；以及结肠直肠赘瘤及实体肿瘤(NCT02953782)、急性骨髓白血病(NCT02678338)以及淋巴瘤(NCT02953509)中的Hu5F9-G4(Forty Seven,Inc.)。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括CD73抑制剂。临床试验中研究的CD73抑制剂包括MEDI9447(Medimmune)，一种实体肿瘤(NCT02503774)中的抗CD73抗体；以及BMS-986179(Bristol-Myers Squibb)，一种实体肿瘤(NCT02754141)中的抗CD73抗体。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括干扰素基因蛋白刺激剂(STING，还称为跨膜蛋白173或TMEM173)的促效剂。临床试验中研究的STING的促效剂包括：MK-1454(Merck&Co.)，一种淋巴瘤(NCT03010176)中的促效性合成环状二核苷酸；以及ADU-S100(MIW815，Aduro Biotech/Novartis)，一种1期(NCT02675439及NCT03172936)中的促效性合成环状二核苷酸。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括CSF1R抑制剂。临床试验中研究的CSF1R抑制剂包括：吡昔替尼(pexidartinib)(PLX3397，Plexxikon)，一种结肠直肠癌、胰脏癌、转移性及晚期癌症(NCT02777710)以及黑素瘤、非小细胞肺癌、头颈部鳞状细胞癌、胃肠基质瘤(GIST)及卵巢癌(NCT02452424)中的CSF1R小分子抑制剂；以及IMC-CS4(LY3022855，Lilly)，一种胰脏癌(NCT03153410)、黑素瘤(NCT03101254)及实体肿瘤(NCT02718911)中的抗CSF-1R抗体；以及BLZ945(4-[2((1R,2R)-2-羟基环己基氨基)-苯并噻唑-6-基氧基]-吡啶-2-羧酸甲基酰胺，Novartis)，一种晚期实体肿瘤(NCT02829723)中的CSF1R的经口有效抑制剂。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括NKG2A受体抑制剂。临床试验中研究的NKG2A受体包括莫纳珠单抗(monalizumab)(IPH2201，Innate Pharma)，一种头颈赘瘤(NCT02643550)及慢性淋巴细胞性白血病(NCT02557516)中的抗NKG2A抗体。

在一些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自纳武单抗(nivolumab)、派立珠单抗(pembrolizumab)、伊匹单抗(ipilimumab)、阿维鲁单抗(avelumab)、德瓦鲁单抗(durvalumab)、阿特珠单抗(atezolizumab)或皮立珠单抗(pidilizumab)。

在另一方面中，本发明提供一种治疗有需要的患者的癌症的方法，其中该方法包含与选自以下的一或多种额外治疗剂组合向该患者给药本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐：吲哚胺(2,3)-双加氧酶(IDO)抑制剂、聚ADP核糖聚合酶(PARP)抑制剂、组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)抑制剂、CDK4/CDK6抑制剂或磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂。

在一些实施方案中，IDO抑制剂选自艾帕斯塔(epacadostat)、因多莫得(indoximod)、卡博替尼(capmanitib)、GDC-0919、PF-06840003、BMS:F001287、Phy906/KD108或分解犬尿氨酸的酶。

在一些实施方案中，PARP抑制剂选自奥拉帕尼(olaparib)、芦卡帕尼(rucaparib)、尼拉帕尼(niraparib)、依尼帕瑞(iniparib)、拉唑帕尼(talazoparib)或维利帕尼(veliparib)。

在一些实施方案中，HDAC抑制剂选自伏立诺他(vorinostat)、罗米地辛(romidepsin)、帕比诺他(panobinostat)、贝林诺他(belinostat)、恩替诺特(entinostat)或西达本胺(chidamide)。

在一些实施方案中，CDK4/6抑制剂选自帕博西尼(palbociclib)、瑞博西尼(ribociclib)、玻玛西尼(abemaciclib)或曲拉西尼(trilaciclib)。

在一些实施方案中，该方法进一步包含向该患者给药第三治疗剂，诸如免疫检查点抑制剂。在一些实施方案中，该方法包含向需要的患者给药选自以下的三种治疗剂：本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐，选自吲哚胺(2,3)-双加氧酶(IDO)抑制剂、聚ADP核糖聚合酶(PARP)抑制剂、组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)抑制剂、CDK4/CDK6抑制剂或磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂的第二治疗剂，及选自免疫检查点抑制剂的第三治疗剂。在一些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自纳武单抗、派立珠单抗、伊匹单抗、阿维鲁单抗、德瓦鲁单抗、阿特珠单抗或皮立珠单抗。

可用于本发明中的另一免疫刺激治疗剂为重组人类介白素15(rhIL-15)。rhIL-15已在临床中作为黑素瘤及肾细胞癌(NCT01021059及NCT01369888)及白血病(NCT02689453)的疗法进行测试。可用于本发明中的另一免疫刺激治疗剂为重组人类介白素12(rhIL-12)。另一适合的IL-15类免疫治疗剂为杂二聚体IL-15(hetIL-15,Novartis/Admune)，一种由内源性IL-15的合成形式与可溶性IL-15结合蛋白IL-15受体α链复合构成的融合复合物(IL15:sIL-15RA)，已在1期临床试验中针对黑素瘤、肾细胞癌、非小细胞肺癌及头颈部鳞状细胞癌(NCT02452268)进行测试。已在临床中针对许多肿瘤学适应症将重组人类介白素12(rhIL-12)例如作为用于淋巴瘤的疗法进行测试(NM-IL-12,Neumedicines,Inc.)(NCT02544724及NCT02542124)。

在一些实施方案中，PI3K抑制剂选自艾德昔布(idelalisib)、艾培昔布(alpelisib)、泰尼昔布(taselisib)、皮克昔布(pictilisib)、考班昔布(copanlisib)、杜维昔布(duvelisib)、PQR309或TGR1202。

在另一方面中，本发明提供一种治疗有需要的患者的癌症的方法，其中该方法包含与选自以下的一或多种额外治疗剂组合向该患者给药本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐：铂类治疗剂、紫杉醇、核苷抑制剂或干扰正常DNA合成、蛋白质合成、细胞复制或将以其他方式抑制迅速增生细胞的治疗剂。

在一些实施方案中，铂类治疗剂选自顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、奈达铂(nedaplatin)、匹克铂(picoplatin)或赛特铂(satraplatin)。

在一些实施方案中，紫杉醇选自太平洋紫杉醇(paclitaxel)、多西他赛(docetaxel)、白蛋白结合太平洋紫杉醇、卡巴他赛(cabazitaxel)或SID530。

在一些实施方案中，干扰正常DNA合成、蛋白质合成、细胞复制或将以其他方式干扰迅速增生细胞的复制的治疗剂选自曲贝替定(trabectedin)、甲氮芥(mechlorethamine)、长春新碱(vincristine)、替莫唑胺(temozolomide)、阿糖胞苷(cytarabine)、洛莫司汀(lomustine)、阿扎胞苷(azacitidine)、高三尖杉酯碱(omacetaxine mepesuccinate)、天冬酰胺酶菊伊文氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)、甲磺酸艾日布尔(eribulin mesylate)、卡培他滨(capacetrine)、苯达莫司汀(bendamustine)、伊沙匹隆(ixabepilone)、奈拉滨(nelarabine)、氯法拉滨(clorafabine)、曲氟尿苷(trifluridine)或替吡嘧啶(tipiracil)。

在一些实施方案中，该方法进一步包含向该患者给药第三治疗剂，诸如免疫检查点抑制剂。在一些实施方案中，该方法包含向需要的患者给药选自以下的三种治疗剂：本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐，选自铂类治疗剂、紫杉醇、核苷抑制剂或干扰正常DNA合成、蛋白质合成、细胞复制或将以其他方式抑制迅速增生细胞的第二治疗剂，及选自免疫检查点抑制剂的第三治疗剂。

在一些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自纳武单抗、派立珠单抗、伊匹单抗、阿维鲁单抗、德瓦鲁单抗、阿特珠单抗或皮立珠单抗。

在一些实施方案中，前述方法中的任一者进一步包含自患者获得生物样本及测量疾病相关生物标记的量的步骤。

在一些实施方案中，生物样本为血液样本。

在一些实施方案中，疾病相关生物标记选自循环CD8+T细胞或CD8+T细胞:Treg细胞的比率。

在一个方面中，本发明提供一种治疗晚期癌症的方法，其包含呈单一药剂(单一疗法)形式或与化学治疗剂、诸如激酶抑制剂的靶向治疗剂和/或诸如免疫检查点抑制剂的免疫调节疗法组合给药本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，免疫检查点抑制剂为对抗PD-1的抗体。PD-1结合于程序化细胞死亡1受体(PD-1)以预防受体结合于抑制性配体PDL-1，因此超越肿瘤抑制宿主抗肿瘤免疫反应的能力。

在一些实施方案中，额外治疗剂为激酶抑制剂或VEGF-R拮抗剂。适用于本发明的经批准VEGF抑制剂及激酶抑制剂包括：贝伐单抗(bevacizumab)(

处于研发中且可用于本发明中的其他激酶抑制剂及VEGF-R拮抗剂包括替沃扎尼(tivozanib)(Aveo Pharmaecuticals)；凡塔蓝尼(vatalanib)(Bayer/Novartis)；鲁西坦布(lucitanib)(Clovis Oncology)；多韦替尼(dovitinib)(TKI258，Novartis)；西奥罗尼(Chiauanib)(Chipscreen Biosciences)；CEP-11981(Cephalon)；立尼法尼(linifanib)(Abbott Laboratories)；来那替尼(neratinib)(HKI-272，Puma Biotechnology)；拉多替尼(radotinib)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为mTOR抑制剂，其抑制细胞增殖、血管生成及葡萄糖吸收。适用于本发明的经批准mTOR抑制剂包括依维莫司(everolimus)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为聚ADP核糖聚合酶(PARP)抑制剂。适用于本发明的经批准PARP抑制剂包括奥拉帕尼(

在一些实施方案中，额外治疗剂为磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂。适用于本发明的经批准PI3K抑制剂包括艾德昔布(

在一些实施方案中，额外治疗剂为蛋白酶体抑制剂。适用于本发明的经批准蛋白酶体抑制剂包括硼替佐米(bortezomib)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)抑制剂。适用于本发明的经批准HDAC抑制剂包括伏立诺他(

在一些实施方案中，额外治疗剂为CDK抑制剂，诸如CDK 4/6抑制剂。适用于本发明的经批准CDK 4/6抑制剂包括帕博西尼(

在一些实施方案中，额外治疗剂为吲哚胺(2,3)-双加氧酶(IDO)抑制剂。可用于本发明中的正在研究的IDO抑制剂包括艾帕斯塔(INCB024360，Incyte)；因多莫得(NLG-8189，NewLink Genetics公司)；卡博替尼(INC280，Novartis)；GDC-0919(Genentech/Roche)；PF-06840003(Pfizer)；BMS:F001287(Bristol-Myers Squibb)；Phy906/KD108(Phytoceutica)；及分解犬尿氨酸的酶(Kynase，Kyn Therapeutics)。

在一些实施方案中，额外治疗剂为生长因子拮抗剂，诸如血小板衍生生长因子(PDGF)或表皮生长因子(EGF)或其受体(EGFR)的拮抗剂。可用于本发明中的经批准PDGF拮抗剂包括奥拉单抗(olaratumab)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为芳香酶抑制剂。可用于本发明中的经批准芳香酶抑制剂包括依西美坦(exemestane)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为刺猬路径的拮抗剂。可用于本发明中的经批准刺猬路径抑制剂包括索尼得吉(sonidegib)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为叶酸抑制剂。适用于本发明中的经批准叶酸抑制剂包括培美曲塞(pemetrexed)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为CC趋化细胞素受体4(CCR4)抑制剂。可适用于本发明中的正在研究的CCR4抑制剂包括莫格利珠单抗(mogamulizumab)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为异柠檬酸去氢酶(IDH)抑制剂。可用于本发明中的正在研究的IDH抑制剂包括AG120(Celgene；NCT02677922)；AG221(Celgene，NCT02677922；NCT02577406)；BAY1436032(Bayer，NCT02746081)；IDH305(Novartis，NCT02987010)。

在一些实施方案中，额外治疗剂为精氨酸酶抑制剂。可用于本发明中的正在研究的精氨酸酶抑制剂包括AEB1102(聚乙二醇化重组精氨酸酶，Aeglea Biotherapeutics)，其正在针对急性骨髓白血病及骨髓发育不良综合征(NCT02732184)及实体肿瘤(NCT02561234)的1期临床试验中进行研究；及CB-1158(Calithera Biosciences)。

在一些实施方案中，额外治疗剂为谷氨酰胺酶抑制剂。可用于本发明中的正在研究的谷氨酰胺酶抑制剂包括CB-839(Calithera Biosciences)。

在一些实施方案中，该额外治疗剂为结合于肿瘤抗原，即，表达于肿瘤细胞的细胞表面上的蛋白质的抗体。可用于本发明中的结合于肿瘤抗原的经批准抗体包括利妥昔单抗(rituximab)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为拓朴异构酶抑制剂。适用于本发明的经批准拓朴异构酶抑制剂包括伊立替康(irinotecan)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为核苷抑制剂或干扰正常DNA合成、蛋白质合成、细胞复制或将以其他方式抑制迅速增生细胞的其他治疗剂。此类核苷抑制剂或其他治疗剂包括曲贝替定(胍烷化剂，

在一些实施方案中，额外治疗剂为铂类治疗剂，还称作铂。铂引起DNA的交联，使得其主要抑制迅速再生细胞(诸如癌细胞)中的DNA修复和/或DNA合成。可用于本发明中的经批准铂类治疗剂包括顺铂(

在一些实施方案中，额外治疗剂为紫杉醇化合物，其引起微管的破坏，此为细胞分裂所必需。可用于本发明中的经批准紫杉醇化合物包括太平洋紫杉醇(

在一些实施方案中，额外治疗剂为抗细胞凋亡蛋白，诸如BCL-2的抑制剂。可用于本发明中的经批准抗细胞凋亡剂包括维奈托克(venetoclax)(

在一些实施方案中，本发明提供一种治疗前列腺癌的方法，其包含与干扰雄激素的合成或活性的额外治疗剂组合向有需要的患者给药有效量的本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。适用于本发明的经批准雄激素受体抑制剂包括恩杂鲁胺(enzalutamide)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为选择性雌激素受体调节剂(SERM)，其干扰雌激素的合成或活性。适用于本发明的经批准SERM包括雷诺昔芬(raloxifene)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为骨骼再吸收抑制剂。抑制骨骼再吸收的经批准治疗剂为德诺单抗(Denosumab)(

在一些实施方案中，额外治疗剂为两种主要p53抑制蛋白MDMX及MDM2之间的相互作用的抑制剂。可用于本发明中的正在研究的p53抑制蛋白的抑制剂包括ALRN-6924(Aileron)，一种等位结合于MDMX及MDM2且干扰MDMX及MDM2与p53的相互作用的切段肽。ALRN-6924当前正在针对AML、晚期骨髓发育不良综合征(MDS)及周边T细胞淋巴瘤(PTCL)(NCT02909972；NCT02264613)的治疗的临床试验中进行评估。

在一些实施方案中，额外治疗剂为转型生长因子β(TGF-β或TGFβ)的抑制剂。可用于本发明中的正在研究的TGF-β蛋白抑制剂包括NIS793(Novartis)，一种在临床中针对包括乳癌、肺癌、肝细胞癌、结肠直肠癌、胰脏癌、前列腺癌及肾癌的各种癌症(NCT 02947165)的治疗进行测试的抗TGF-β抗体。在一些实施方案中，TGF-β蛋白抑制剂为福莱索单抗(fresolimumab)(GC1008；Sanofi-Genzyme)，其正针对黑素瘤(NCT00923169)、肾细胞癌(NCT00356460)及非小细胞肺癌(NCT02581787)进行研究。另外，在一些实施方案中，额外治疗剂为诸如描述于Connolly等人(2012)Int'l J.Biological Sciences 8:964-978中的TGF-β捕获剂。

额外共同给药治疗剂-靶向治疗剂及免疫调节药物

在一些实施方案中，额外治疗剂选自靶向治疗药物或免疫调节药物。使用靶向治疗剂免疫调节免疫调节药物的辅助疗法已在单独给药时显示了有前景的效用，但受到肿瘤免疫性随时间推移的进展及免疫反应逃避的限制。

在一些实施方案中，本发明提供一种治疗癌症(诸如本文所描述的癌症)的方法，其包含与诸如靶向治疗药物或免疫调节药物的额外治疗剂组合向有需要的患者给药有效量的本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，免疫调节治疗剂特异性地诱导肿瘤细胞的细胞凋亡。可用于本发明中的经批准免疫调节治疗剂包括泊利度胺(pomalidomide)(

在其他实施方案中，免疫调节治疗剂为癌症疫苗。在一些实施方案中，癌症疫苗选自西普鲁塞-T(sipuleucel-T)(

在一些实施方案中，额外治疗剂选自JX-929(SillaJen/原称JennerexBiotherapeutics)，一种经工程改造以表达胞嘧啶脱胺酶的缺乏TK及痘疮生长因子的痘疮病毒，其能够将前药5-氟胞嘧啶转化成细胞毒性药物5-氟尿嘧啶；TG01及TG02(Targovax/原称Oncos)，靶向难以治疗的RAS突变的基于肽的免疫治疗剂；及TILT-123(TILTBiotherapeutics)，一种经工程改造的腺病毒，其称为：Ad5/3-E2F-δ24-hTNFα-IRES-hIL20；以及VSV-GP(ViraTherapeutics)，一种经工程改造以表达淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)的糖蛋白(GP)的水泡性口炎病毒(VSV)，其可进一步剂工程改造以表达经设计以产生抗原特异性CD8

在一些实施方案中，本发明包含与经工程改造以表达嵌合抗原受体或CAR的T细胞组合向该患者给药本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐。经工程改造以表达此类嵌合抗原受体的T细胞称为CAR-T细胞。

已构筑如下CAR，其由可来源于天然配体的结合域、来源于对细胞表面抗原具有特异性的单株抗体的单链可变片段(scFv)与作为T细胞受体(TCR)的功能末端的胞内域、诸如能够在T淋巴细胞中产生活化信号的来自TCR的CD3-ζ信号传导域融合组成。在抗原结合时，此类CAR连接至效应细胞中的内源性信号传导路径且产生类似于由TCR复合物引发的活化信号的活化信号。

举例而言，在一些实施方案中，CAR-T细胞为描述于美国专利8,906,682中(6月；以全文引用的方式并入本文中)的那些细胞中的一者，该专利揭示经工程改造以包含具有与T细胞抗原受体复合物ζ链(诸如CD3ζ)的胞内信号传导域融合的抗原结合域(诸如结合于CD19的域)的细胞外域的CAR-T细胞。当在T细胞中表达时，CAR能够基于抗原结合特异性重新引导抗原识别。就CD19而言，抗原表达于恶性B细胞上。当前超过200个在各种适应症中采用CAR-T的临床试验正在进展中。[https://clinicaltrials.gov/ct2/results？term＝chimeric+antigen+receptors&pg＝1]。

额外共同给药治疗剂-免疫刺激药物

在一些实施方案中，额外治疗剂为免疫刺激药物。举例而言，阻断PD-1及PD-L1抑制轴的抗体可释放活化的肿瘤反应性T细胞且已在临床试验中显示在数目增加的肿瘤组织结构(包括习知尚未认为对免疫疗法敏感的一些肿瘤类型)中诱导耐久的抗肿瘤反应。参见例如Okazaki,T.等人(2013)Nat.Immunol.14,1212-1218；Zou等人(2016)Sci.Transl.Med.8。抗PD-1抗体纳武单抗(

在一些实施方案中，本发明提供一种治疗癌症(诸如本文所描述的癌症)的方法，其包含与诸如免疫刺激药物(诸如免疫检查点抑制剂)的额外治疗剂组合向有需要的患者给药有效量的本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，同时或依序给药化合物及检查点抑制剂。在一些实施方案中，在初次投用免疫检查点抑制剂之前给药本文所揭示的化合物。在某些实施方案中，在初次投用本文所揭示的化合物之前给药免疫检查点抑制剂。

在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自PD-1拮抗剂、PD-L1拮抗剂或CTLA-4拮抗剂。在一些实施方案中，本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐与纳武单抗(抗PD-1抗体，

适用于本发明的其他免疫检查点抑制剂包括：REGN2810(Regeneron)，一种在患有基底细胞癌(NCT03132636)、NSCLC(NCT03088540)、皮肤鳞状细胞癌(NCT02760498)、淋巴瘤(NCT02651662)及黑素瘤(NCT03002376)的患者中测试的抗PD-1抗体；皮立珠单抗(CureTech)，还称为CT-011，一种在临床试验中用于弥漫性大型B细胞淋巴瘤及多发性骨髓瘤的结合于PD-1的抗体；阿维鲁单抗(

免疫刺激的另一范例为使用溶瘤病毒。在一些实施方案中，本发明提供一种用于通过与诸如溶瘤病毒的免疫刺激疗法组合给药本文所揭示的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物来治疗患者的方法。可用于本发明中的经批准免疫刺激溶瘤病毒包括拉赫塔里(活减毒单纯疱疹病毒，

在一些实施方案中，额外治疗剂为视黄酸受体相关孤儿受体γ(RORγt)的活化剂。RORγt为一种在CD4+(Th17)及CD8+(Tc17)T细胞的类型17效应亚群的分化及维持以及表达IL-17的先天性免疫细胞亚群(诸如NK细胞)的分化中起关键作用的转录因子。可用于本发明中的正在研究的RORγt的活化剂为LYC-55716(Lycera)，当前其正在用于治疗实体肿瘤(NCT02929862)的临床试验中进行评估。

在一些实施方案中，额外治疗剂为铎样受体(TLR)的促效剂或活化剂。适合的TLR活化剂包括TLR9的促效剂或活化剂，诸如SD-101(Dynavax)。SD-101为一种免疫刺激CpG，正对其进行研究以供用于B细胞、滤泡性及其他淋巴瘤(NCT02254772)。可用于本发明中的TLR8的促效剂或活化剂包括莫托莫特(motolimod)(VTX-2337,VentiRxPharmaceuticals)，正对其进行研究以供用于头颈部鳞状细胞癌(NCT02124850)及卵巢癌(NCT02431559)。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括含T细胞免疫球蛋白粘蛋白的蛋白质3(TIM-3)的抑制剂。可用于本发明中的TIM-3抑制剂包括TSR-022、LY3321367及MBG453。TSR-022(Tesaro)为在实体肿瘤(NCT02817633)中进行研究的抗TIM-3抗体。LY3321367(EliLilly)为在实体肿瘤(NCT03099109)中进行研究的抗TIM-3抗体。MBG453(Novartis)为在晚期恶性病(NCT02608268)中进行研究的抗TIM-3抗体。

可用于本发明中的其他检查点抑制剂包括具有Ig及ITIM域的T细胞免疫受体或TIGIT(某些T细胞及NK细胞上的一种免疫受体)的抑制剂。可用于本发明中的TIGIT抑制剂包括BMS-986207(Bristol-Myers Squibb)，一种抗TIGIT单株抗体(NCT02913313)；OMP-313M32(Oncomed)；以及TIGIT单株抗体(NCT03119428)。

可用于本发明中的检查点抑制剂还包括淋巴细胞活化基因-3(LAG-3)的抑制剂。可用于本发明中的LAG-3抑制剂包括BMS-986016及REGN3767以及IMP321。在神经胶母细胞瘤及神经胶质肉瘤(NCT02658981)中研究BMS-986016(Bristol-Myers Squibb)，一种抗LAG-3抗体。REGN3767(Regeneron)还为抗LAG-3抗体且在恶性病(NCT03005782)中进行研究。IMP321(Immutep S.A.)为LAG-3-Ig融合蛋白，在黑素瘤(NCT02676869)、腺癌(NCT02614833)及转移性乳癌(NCT00349934)中进行研究。

可与本文所揭示的化合物组合用于本发明中的其他免疫肿瘤学药剂包括乌瑞鲁单抗(BMS-663513，Bristol-Myers Squibb)，一种抗CD137单株抗体；瓦里木单抗(CDX-1127，Celldex Therapeutics)，一种抗CD27单株抗体；BMS-986178(Bristol-MyersSquibb)，一种抗OX40单株抗体；利瑞路单抗(IPH2102/BMS-986015，Innate Pharma，Bristol-Myers Squibb)，一种抗KIR单株抗体；莫纳珠单抗(IPH2201，Innate Pharma，AstraZeneca)，一种抗NKG2A单株抗体；安德西单抗(andecaliximab)(GS-5745，GileadSciences)，一种抗MMP9抗体；MK-4166(Merck&Co.)，一种抗GITR单株抗体。

可用于本发明中的其他额外治疗剂包括格勒巴图单抗-维多汀结合物-单甲基奥瑞他汀E(glembatumumab vedotin-monomethyl auristatin E；MMAE)(Celldex)，一种连接至细胞毒素MMAE的抗糖蛋白NMB(gpNMB)抗体(CR011)。gpNMB为由与癌症细胞的转移能力相关的多个肿瘤类型过度表达的蛋白质。

本发明的化合物还可有利地与其他抗增生化合物组合使用。此类抗增生化合物包括(但不限于)：检查点抑制剂；芳香酶抑制剂；抗雌激素；拓朴异构酶I抑制剂；拓朴异构酶II抑制剂；微管活性化合物；烷化化合物；组蛋白脱乙酰基酶抑制剂；诱导细胞分化过程的化合物；环加氧酶抑制剂；MMP抑制剂；mTOR抑制剂；抗赘生性抗代谢物；铂化合物；靶向/减小蛋白质或脂质激酶活性的化合物及其他抗血管生成化合物；靶向、减小或抑制蛋白质或脂质磷酸酶的活性的化合物；高那瑞林促效剂(gonadorelin agonist)；抗雄激素；甲硫氨酸氨基肽酶抑制剂；基质金属蛋白酶抑制剂；双膦酸盐；生物反应调节剂；抗增生性抗体；肝素酶抑制剂；Ras致癌同功异型物的抑制剂；端粒酶抑制剂；蛋白酶体抑制剂；用于治疗血液科恶性病的化合物；靶向、减小或抑制Flt-3的活性的化合物；Hsp90抑制剂，诸如来自Conforma Therapeutics的17-AAG(17-烯丙基氨基格尔德霉素，NSC330507)、17-DMAG(17-二甲基氨基乙基氨基-17-去甲氧基-格尔德霉素，NSC707545)、IPI-504、CNF1010、CNF2024、CNF1010；替莫唑胺

如本文所用的术语“检查点抑制剂”是指适用于防止癌细胞避开患者的免疫系统的药剂。抗肿瘤免疫破坏的主要机制的一称为“T细胞耗竭”，其由长期暴露于引起抑制受体的上调的抗原引起。这些抑制受体充当免疫检查点以便防止不受控制的免疫反应。

PD-1以及诸如细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)、B及T淋巴细胞衰减因子(BTLA；CD272)、T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3(Tim-3)、淋巴细胞活化基因-3(Lag-3；CD223)及其他受体的共抑制受体常常称为检查点调节因子。其充当允许细胞外信息指示细胞周期进程及其他细胞内信号传导过程是否将继续的分子“守门因子(gatekeeper)”。

在一个方面中，检查点抑制剂为生物治疗剂或小分子。在另一方面中，检查点抑制剂为单株抗体、人类化抗体、完全人类抗体、融合蛋白或其组合。在另一方面中，检查点抑制剂抑制选自以下的检查点蛋白：CTLA-4、PDLl、PDL2、PDl、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR、B-7家族配体或其组合。在一额外方面中，检查点抑制剂与选自以下的检查点蛋白的配体相互作用：CTLA-4、PDLl、PDL2、PDl、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR、B-7家族配体或其组合。在一方面中，检查点抑制剂为免疫刺激剂、T细胞生长因子、介白素、抗体、疫苗或其组合。在另一方面中介白素为IL-7或IL-15。在一特定方面中，介白素为糖基化IL-7。在一额外方面中，疫苗为树突状细胞(DC)疫苗。

检查点抑制剂包括以统计学上显著的方式阻断或抑制免疫系统的抑制路径的任何药剂。此类抑制剂可包括小分子抑制剂，或可包括结合于免疫检查点受体且阻断或抑制免疫检查点受体的抗体或其抗原结合片段，或结合于免疫检查点受体配体且阻断或抑制所述配体的抗体。可靶向以进行阻断或抑制的说明性检查点分子包括(但不限于)CTLA-4、PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、GAL9、LAG3、TIM3、VISTA、KIR、2B4(属于分子的CD2家族且表达于所有NK、γδ及记忆CD8

在某些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自PD-1拮抗剂、PD-L1拮抗剂及CTLA-4拮抗剂。在一些实施方案中，检查点抑制剂选自由以下组成的群：纳武单抗

在一些实施方案中，检查点抑制剂选自由以下组成的群：兰利珠单抗(lambrolizumab)(MK-3475)、纳武单抗(BMS-936558)、皮立珠单抗(CT-011)、AMP-224、MDX-1105、MEDI4736、MPDL3280A、BMS-936559、伊匹单抗、利瑞路单抗、IPH2101、派立珠单抗

如本文所用的术语“芳香酶抑制剂”是指一种抑制雌激素产生，例如底物雄烯二酮及睪固酮分别转化为雌酮及雌二醇的化合物。该术语包括(但不限于)类固醇，尤其阿他美坦(atamestane)、依西美坦及福美司坦(formestane)；及尤其非类固醇，尤其胺鲁米特(aminoglutethimide)、罗谷亚胺(roglethimide)、吡鲁米特(pyridoglutethimide)、曲洛司坦(trilostane)、睾内酯(testolactone)、酮康唑(ketokonazole)、伏罗唑(vorozole)、法屈唑(fadrozole)、阿那曲唑及来曲唑。依西美坦系以商品名Aromasin

如本文所用的术语“抗雌激素”是指在雌激素受体水平上拮抗雌激素效应的化合物。该术语包括(但不限于)他莫昔芬(tamoxifen)、氟维司群(fulvestrant)、雷诺昔芬及雷诺昔芬盐酸盐。他莫昔芬系以商品名Nolvadex

如本文所用的术语“抗雄激素”是指任何能够抑制雄激素的生物效应的物质且包括(但不限于)比卡鲁胺(bicalutamide)(Casodex

如本文所用的术语“拓朴异构酶I抑制剂”包括(但不限于)拓朴替康、吉马替康(gimatecan)、伊立替康、喜树碱及其类似物、9-硝基喜树碱及大分子喜树碱结合物PNU-166148。伊立替康可例如以其例如以商标Camptosar

如本文所用的术语“拓朴异构酶II抑制剂”包括(但不限于)蒽环霉素(anthracycline)，诸如小红莓(doxorubicin)(包括脂质调配物，诸如Caelyx

术语“微管活性剂”是指微管稳定化、微管去稳定化化合物及微管聚合抑制剂，包括(但不限于)紫杉烷，诸如太平洋紫杉醇及多西他赛；长春花生物碱，诸如长春碱或硫酸长春碱、长春新碱或硫酸长春新碱及长春瑞宾(vinorelbine)；迪斯德莫来(discodermolide)；秋水仙碱(cochicine)及埃博霉素(epothilone)及其衍生物。太平洋紫杉醇系以商品名Taxol

如本文所用的术语“烷化剂”包括(但不限于)环磷酰胺、异环磷酰胺(ifosfamide)、美法仑(melphalan)或亚硝基脲(nitrosourea)(BCNU或Gliadel)。环磷酰胺系以商品名Cyclostin

术语“组蛋白脱乙酰基酶抑制剂”或“HDAC抑制剂”是指抑制组蛋白脱乙酰基酶且具有抗增生活性的化合物。此化合物包括(但不限于)辛二酰苯胺氧肟酸(SAHA)。

术语“抗赘生性抗代谢物”包括(但不限于)5-氟尿嘧啶或5-FU、卡培他滨(capecitabine)、吉西他滨(gemcitabine)、DNA去甲基化合物(诸如5-氮杂胞苷(5-azacytidine)及地西他滨(decitabine))、甲胺喋呤(methotrexate)及依达曲沙(edatrexate)以及叶酸拮抗剂(诸如培美曲塞(pemetrexed))。卡培他滨系以商品名Xeloda

如本文所用的术语“铂化合物”包括(但不限于)卡铂、顺铂(cis-platin/cisplatinum)及奥沙利铂(oxaliplatin)。卡铂可例如以其例如以商标Carboplat

如本文所用的术语“靶向/减小蛋白质或脂质激酶活性或蛋白质或脂质磷酸酶活性的化合物；或其他抗血管生成化合物”包括(但不限于)蛋白质酪氨酸激酶和/或丝氨酸和/或苏氨酸激酶抑制剂或脂质激酶抑制剂，诸如a)靶向血小板衍生生长因子受体(PDGFR)、减小或抑制其活性的化合物，诸如靶向PDGFR、减小或抑制其活性的化合物，尤其抑制PDGF受体的化合物，诸如N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，诸如伊马替尼(imatinib)、SU101、SU6668及GFB-111；b)靶向纤维母细胞生长因子受体(FGFR)、减小或抑制其活性的化合物；c)靶向胰岛素样生长因子受体I(IGF-IR)、减小或抑制其活性的化合物，诸如靶向IGF-IR、减小或抑制其活性的化合物，尤其抑制IGF-I受体的激酶活性的化合物，或靶向IGF-I受体或其生长因子的细胞外域的抗体；d)靶向Trk受体酪氨酸激酶家族或肝配蛋白B4抑制剂(ephrin B4 inhibitor)、减小或抑制其活性的化合物；e)靶向AxI受体酪氨酸激酶家族、减小或抑制其活性的化合物；f)靶向Ret受体酪氨酸激酶、减小或抑制其活性的化合物；g)靶向Kit/SCFR受体酪氨酸激酶、减小或抑制其活性的化合物，诸如伊马替尼；h)靶向为PDGFR家族的部分的C-kit受体酪氨酸激酶、减小或抑制其活性的化合物，诸如靶向c-Kit受体酪氨酸激酶家族、减小或抑制其活性的化合物，尤其抑制c-Kit受体的化合物，诸如伊马替尼；i)靶向c-Abl家族的成员、其基因融合产物(例如BCR-Abl激酶)及突变体、减小或抑制其活性的化合物，诸如靶向c-Abl家族成员及其基因融合产物、减小或抑制其活性的化合物，诸如N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，诸如伊马替尼或尼罗替尼(AMN107)、PD180970、AG957、NSC680410、来自ParkeDavis的PD173955或达沙替尼(BMS-354825)；j)靶向蛋白激酶C(PKC)及丝氨酸/苏氨酸激酶的Raf家族的成员、MEK、SRC、JAK/pan-JAK、FAK、PDK1、PKB/Akt、Ras/MAPK、PI3K、SYK、TYK2、BTK及TEC家族的成员和/或周期素依赖性激酶家族(CDK)的成员、减小或抑制其活性的化合物，包括星形孢菌素衍生物，诸如米哚妥林(midostaurin)；其他化合物的实例包括UCN-01、沙芬戈(safingol)、BAY 43-9006、苔藓抑素1(Bryostatin 1)、哌立福新(Perifosine)、伊莫福新(llmofosine)、RO318220及RO 320432、GO 6976、lsis3521、LY333531/LY379196、异喹啉化合物、FTI、PD184352或QAN697(P13K抑制剂)或AT7519(CDK抑制剂)；k)靶向蛋白质酪氨酸激酶抑制剂、减小或抑制其活性的化合物，诸如靶向包括以下的蛋白质酪氨酸激酶抑制剂、减小或抑制其活性的化合物：甲磺酸伊马替尼(Gleevec

如本文所用的术语“PI3K抑制剂”包括(但不限于)对磷脂酰肌醇-3-激酶家族中的一或多种酶具有抑制活性的化合物，所述酶包括(但不限于)PI3Kα、PI3Kγ、PI3Kδ、PI3Kβ、PI3K-C2α、PI3K-C2β、PI3K-C2γ、Vps34、p110-α、p110-β、p110-γ、p110-δ、p85-α、p85-β、p55-γ、p150、p101及p87。适用于本发明的PI3K抑制剂的实例包括(但不限于)ATU-027、SF-1126、DS-7423、PBI-05204、GSK-2126458、ZSTK-474、布帕昔布、皮克特昔布、PF-4691502、BYL-719、达妥昔布、XL-147、XL-765及艾德昔布。

如本文所用的术语“Bcl-2抑制剂”包括(但不限于)对B细胞淋巴瘤2蛋白(Bcl-2)具有抑制活性的化合物，包括(但不限于)ABT-199、ABT-731、ABT-737、阿朴棉子酚(apogossypol)、Ascenta的pan-Bcl-2抑制剂、姜黄素(及其类似物)、Bcl-2/Bcl-xL双重抑制剂(Infinity Pharmaceuticals/Novartis Pharmaceuticals)、根纳三思(Genasense)(G3139)、HA14-1(及其类似物；参见WO2008118802)、纳维托克(及其类似物，参见US7390799)、NH-1(Shenayng Pharmaceutical University)、奥布托克(obatoclax)(及其类似物，参见WO2004106328)、S-001(Gloria Pharmaceuticals)、TW系列化合物(Univ.ofMichigan)及维奈托克。在一些实施方案中，Bcl-2抑制剂为小分子治疗剂。在一些实施方案中，Bcl-2抑制剂为肽模拟剂。

如本文所用的术语“BTK抑制剂”包括(但不限于)对布鲁顿氏酪氨酸激酶(Bruton's Tyrosine Kinase；BTK)具有抑制活性的化合物，包括(但不限于)AVL-292及依鲁替尼。

如本文所用的术语“SYK抑制剂”包括(但不限于)对脾酪氨酸激酶(SYK)具有抑制活性的化合物，包括(但不限于)PRT-062070、R-343、R-333、艾塞莱尔(Excellair)、PRT-062607及福他替尼(fostamatinib)。

BTK抑制化合物及可通过此类化合物与本发明化合物的组合治疗的病症的其他实例可见于WO2008039218及WO2011090760中，所述文献全部内容以引用的方式并入本文中。

SYK抑制化合物及可通过所述化合物与本发明化合物的组合治疗的病症的其他实例可见于WO2003063794、WO2005007623及WO2006078846中，所述文献的全部内容以引用的方式并入本文中。

PI3K抑制化合物及可通过所述化合物与本发明化合物的组合治疗的病症的其他实例可见于WO2004019973、WO2004089925、WO2007016176、US8138347、WO2002088112、WO2007084786、WO2007129161、WO2006122806、WO2005113554及WO2007044729中，所述文献的全部内容以引用的方式并入本文中。

JAK抑制化合物及可通过此类化合物与本发明化合物的组合治疗的病症的其他实例可见于WO2009114512、WO2008109943、WO2007053452、WO2000142246及WO2007070514中，所述文献的全部内容以引用的方式并入本文中。

其他抗血管生成化合物包括具有另一活性机制(例如与蛋白质或脂质激酶抑制无关的活性)的化合物，例如沙立度胺(Thalomid

适用于与本发明化合物组合使用的蛋白酶体抑制剂的实例包括(但不限于)硼替佐米、二硫龙(disulfiram)、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG)、盐孢菌素A、卡非佐米、ONX-0912、CEP-18770及MLN9708。

靶向蛋白质或脂质磷酸酶、减小或抑制其活性的化合物为例如磷酸酶1抑制剂、磷酸酶2A抑制剂或CDC25抑制剂，诸如冈田井酸(okadaic acid)或其衍生物。

诱导细胞分化过程的化合物包括(但不限于)视黄酸、α-γ-生育酚或δ-生育酚、或α-γ-生育三烯酚或δ-生育三烯酚。

如本文所用的术语环加氧酶抑制剂包括(但不限于)Cox-2抑制剂、经5-烷基取代的2-芳氨基苯乙酸及衍生物，诸如塞内昔布(celecoxib)(Celebrex

如本文所用的术语“双膦酸盐”包括(但不限于)依替膦酸(etridonic acid)、氯膦酸(clodronic acid)、替鲁膦酸(tiludronic acid)、帕米膦酸(pamidronic acid)、阿仑膦酸(alendronic acid)、伊班膦酸(ibandronic acid)、利塞膦酸(risedronic acid)及唑来膦酸(zoledronic acid)。依替膦酸系以商品名Didronel

如本文所用的术语“肝素酶抑制剂”是指靶向硫酸肝素、减少或抑制其降解的化合物。该术语包括(但不限于)PI-88。如本文所用的术语“生物反应调节剂”是指淋巴激素或干扰素。

如本文所用的术语“Ras致癌同功异型物(诸如H-Ras、K-Ras或N-Ras)的抑制剂”是指靶向Ras、减小或抑制其致癌活性的化合物；例如“法呢基转移酶抑制剂(farnesyltransferase inhibitor)”，诸如L-744832、DK8G557或R115777(Zarnestra

如本文所用的术语“甲硫氨酸氨基肽酶抑制剂”是指靶向甲硫氨酸氨基肽酶、减小或抑制其活性的化合物。靶向甲硫氨酸氨基肽酶、减小或抑制其活性的化合物包括(但不限于)苯胍麦(bengamide)或其衍生物。

如本文所用的术语“蛋白酶体抑制剂”是指靶向蛋白酶体、减小或抑制其活性的化合物。靶向蛋白酶体、减小或抑制其活性的化合物包括(但不限于)硼替佐米(Velcade

如本文所用的术语“基质金属蛋白酶抑制剂”或(“MMP”抑制剂)包括(但不限于)胶原蛋白肽模拟及非肽模拟抑制剂、四环素衍生物，例如氢草酰氨酸酯肽模拟抑制剂巴马司他(batimastat)及其经口生物可用类似物马立马司他(marimastat)(BB-2516)、普利司他(prinomastat)(AG3340)、美他司他(metastat)(NSC 683551)、BMS-279251、BAY 12-9566、TAA211、MMI270B或AAJ996。

如本文所用的术语“用于治疗血液科恶性病的化合物”包括(但不限于)FMS样酪氨酸激酶抑制剂，其为靶向FMS样酪氨酸激酶受体(Flt-3R)、减小或抑制其活性的化合物；干扰素，1-β-D-阿糖呋喃胞嘧啶(ara-c)及白消安(bisulfan)；及ALK抑制剂，其为靶向、减少或抑制多形性淋巴瘤激酶的化合物。

靶向FMS样酪氨酸激酶受体(Flt-3R)、减小或抑制其活性的化合物尤其为抑制Flt-3R受体激酶家族成员的化合物、蛋白质或抗体，诸如PKC412、米哚妥林、星形孢菌素衍生物、SU11248及MLN518。

如本文所用的术语“HSP90抑制剂”包括(但不限于)靶向HSP90、减小或抑制其固有ATP酶(ATPase)活性，经由泛素蛋白酶体路径降低、靶向、减少或抑制HSP90客户蛋白的化合物。靶向HSP90、减小或抑制其固有ATP酶活性的化合物尤其为抑制HSP90的ATP酶活性的化合物、蛋白质或抗体，诸如17-烯丙基氨基、17-去甲氧基格尔德霉素(17AAG)(一种格尔德霉素衍生物)；其他格尔德霉素相关化合物；根赤壳菌素(radicicol)；及HDAC抑制剂。

如本文所用的术语“抗增生性抗体”包括(但不限于)曲妥珠单抗(Herceptin

为治疗急性骨髓白血病(AML)，本发明化合物可与标准白血病疗法组合，尤其与用于治疗AML的疗法组合使用。详言之，本发明化合物可与例如法呢基转移酶抑制剂和/或其他适用于治疗AML的药物，诸如道诺霉素、阿德力霉素(Adriamycin)、Ara-C、VP-16、替尼泊苷、米托蒽醌、埃达霉素、卡铂及PKC412组合给药。

其他抗白血病化合物包括例如Ara-C，一种嘧啶类似物，其为脱氧胞苷的2'-α-羟基核糖(阿拉伯糖苷)衍生物。还包括次黄嘌呤、6-巯基嘌呤(6-MP)及磷酸氟达拉滨的嘌呤类似物。靶向诸如丁酸钠及辛二酰苯胺氧肟酸(SAHA)的组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)抑制剂、减小或抑制其活性的化合物抑制称为组蛋白脱乙酰基酶的酶的活性。特定的HDAC抑制剂包括MS275、SAHA、FK228(原称FR901228)、曲古霉素A(Trichostatin A)及US 6,552,065中揭示的化合物，包括(但不限于)N-羟基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其药学上可接受的盐，及N-羟基-3-[4-[(2-羟乙基){2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其药学上可接受的盐，尤其乳酸盐。如本文所用的生长抑素(somatostatin)受体拮抗剂是指靶向、处理或抑制生长抑素受体的化合物，诸如奥曲肽(octreotide)及SOM230。肿瘤细胞损伤方法是指诸如电离辐射的方法。上文及下文中所提及的术语“电离辐射”意味着以电磁射线(诸如X射线及γ射线)或粒子(诸如α粒子及β粒子)形式发生的电离辐射。电离辐射提供于(但不限于)辐射疗法中且在本领域中已知。参见Hellman,Principles of Radiation Therapy,Cancer,Principles andPractice of Oncology,Devita等人编，第4版，第1卷，第248-275页(1993)。

还包括EDG结合剂及核糖核苷酸还原酶抑制剂。如本文所用的术语“EDG结合剂”是指调节淋巴细胞再循环的一类免疫抑制剂，诸如FTY720。术语“核糖核苷酸还原酶抑制剂”是指嘧啶或嘌呤核苷类似物，其包括(但不限于)氟达拉宾和/或胞嘧啶阿拉伯糖苷(ara-C)、6-硫鸟嘌呤、5-氟尿嘧啶、克拉屈滨、6-巯基嘌呤(尤其与ara-C组合抗ALL)和/或喷司他汀。核糖核苷酸还原酶抑制剂尤其为羟基脲或2-羟基-1H-异吲哚-1,3-二酮衍生物。

还尤其包括VEGF的那些化合物、蛋白或单株抗体，诸如1-(4-氯苯氨基)-4-(4-吡啶基甲基)酞嗪或其药学上可接受的盐；1-(4-氯苯氨基)-4-(4-吡啶基甲基)酞嗪丁二酸盐；Angiostatin

如本文所用的光动力疗法是指使用某些称为光敏化合物的化学制品治疗或预防癌症的疗法。光动力疗法的实例包括使用诸如Visudyne

如本文所用的血管生成抑制性类固醇(angiostatic steroid)是指阻断或抑制血管生成的化合物，诸如阿奈可他(anecortave)、曲安西龙(triamcinolone)、氢化可体松(hydrocortisone)、11-α-表氢化皮质醇(11-α-epihydrocotisol)、脱氧皮醇(cortexolone)、17-羟基孕酮(17α-hydroxyprogesterone)、皮质酮(corticosterone)、脱氧皮质酮(desoxycorticosterone)、睾固酮(testosterone)、雌酮及地塞米松(dexamethasone)。

含有皮质类固醇的植入物是指诸如氟新龙(fluocinolone)及地塞米松的化合物。

其他化学治疗化合物包括(但不限于)植物碱、激素化合物及拮抗剂；生物反应调节剂，优选为淋巴因子或干扰素；反义寡聚核苷酸或寡聚核苷酸衍生物；shRNA或siRNA；或混杂化合物或具有其他或未知作用机制的化合物。

以编码序号、类属或商标名鉴别的活性化合物的结构可自正版标准概要“默克索引(The Merck Index)”或自数据库，例如专利国际组织(Patents International)(例如IMS世界公开案(IMS World Publications))获得。

本发明化合物还可与已知治疗方法(例如给药激素或辐射)组合使用。在某些实施方案中，所提供化合物用作放射增敏剂，尤其用于治疗对于放射线疗法展现不佳敏感性的肿瘤。

本发明化合物可单独或与一或多种其他治疗化合物组合给药，可能的组合疗法采用固定组合形式或交错或彼此独立地提供本发明化合物及一或多种其他治疗化合物的给药，或组合给药固定组合及一或多种其他治疗化合物。可此外或另外给药本发明化合物，尤其与化学疗法、放射线疗法、免疫疗法、光电疗法、手术干预或这些的组合进行组合以用于肿瘤治疗。如上文所描述，如其他治疗策略的情形下的辅助疗法一般，长期疗法同样为可能的。其他可能的治疗为在肿瘤消退后维持患者状态的疗法，或甚至为例如针对有风险的患者的化学预防疗法。

那些额外药剂可作为多次给药方案的一部分与含有本发明化合物的组合物分开给药。或者，那些药剂可为单一剂型的一部分，在单一组合物中与本发明化合物一起混合。若作为多次给药方案的一部分给药，那么两种活性剂可同时、依序或彼此间隔一定时间段(通常彼此间隔在5小时以内)提供。

如本文所用，术语“组合(combination/combined)”及相关术语是指同时或依序给药根据本发明的治疗剂。举例而言，本发明化合物可与另一治疗剂以分开的单位剂型或共同呈单一单位剂型同时或依次给药。因此，本发明提供一种包含本发明化合物、额外治疗剂及药学上可接受的载剂、辅助剂或赋形剂的单一单位剂型。

可与载剂物质组合产生单一剂型的本发明化合物及额外治疗剂(在包含如上文所描述的额外治疗剂的那些组合物中)的量将视所治疗的宿主及特定给药模式而变化。优选地，应调配本发明组合物以使得可给药剂量介于0.01-100毫克/公斤体重/天之间的本发明化合物。

在包含额外治疗剂的那些组合物中，彼额外治疗剂及本发明化合物可协同作用。因此，此类组合物中额外治疗剂的量将小于仅利用彼治疗剂的单一疗法中所需的量。在此类组合物中，可给药剂量介于0.01-1,000微克/公斤体重/天之间的额外治疗剂。

存在于本发明的组合物中的额外治疗剂的量将不超过通常会以包含彼治疗剂作为唯一活性剂的组合物给药的量。目前所揭示的组合物中额外治疗剂的量优选将在占通常存在于包含彼药剂作为唯一治疗活性剂的组合物中的量的约50％至100％的范围内。

本发明化合物或其药物组合物还可并入用于包覆可植入医疗装置的组合物中，所述可植入医疗装置诸如假体、人工瓣膜、血管移植物、支架及导管。血管支架例如已用于克服再狭窄(损伤后血管壁再变窄)。然而，使用支架或其他可植入装置的患者具有凝块形成或血小板活化的风险。可通过用包含激酶抑制剂的药学上可接受的组合物预包覆该装置来预防或减轻这些有害效应。用本发明化合物包覆的可植入装置为本发明的另一实施方案。

生物标记

本发明还提供预测患者对使用本文所描述的本发明化合物或其药学上可接受的盐的抗癌治疗的反应的似然度的方法。在一些实施方案中，该方法包含测量患者的肿瘤中的内质网(ER)压力或未折叠蛋白反应(UPR)的水平。不受特定理论限制，ER压力可产生UPR。ER压力或UPR可由例如细胞内钙稳态的破坏、糖基化的破坏和/或营养素可获得性的破坏引起。在一些实施方案中，在抗癌治疗之前进行ER压力或未折叠蛋白质反应的水平的测量。在一些实施方案中，ER压力或未折叠蛋白反应的水平为沃夫然综合征1(WFS1)或由WFS1编码的蛋白质的水平。

WFS1为表达wolframin蛋白的基因。由WFS1编码的蛋白质为wolframin。WFS1(基因ID 7466，寄存编号AF084481)编码蛋白质wolframin(寄存编号AAC64943)，该蛋白质为存在于ER中且发挥调节钙稳态的作用的跨膜蛋白。

在一些实施方案中，预测患者对使用本文所描述的本发明化合物或其药学上可接受的盐的抗癌治疗的反应的似然度的方法进一步包含判定是否使用本文所描述的本发明化合物或其药学上可接受的盐治疗患者，其中若WFS1或由WFS1编码的蛋白质的水平高于来自患有相同癌症的患者的参考值，则将使用该化合物治疗患者。“来自患有相同癌症的患者的参考值”为WFS1或由WFS1编码的蛋白质的表达水平或其评分(例如mRNA复本或免疫组织化学染色密度或其组合)的截止值(截止点或标准值)。

本发明还提供治疗患有癌症的患者的方法，其包含：测量患者的肿瘤中WFS1或由WFS1编码的蛋白质的表达水平；以及若WFS1或由WFS1编码的蛋白质的该表达水平高于来自患有相同癌症的患者的参考值，则向患者给药药学上有效量的本发明化合物。在一些实施方案中，方法进一步包含给药药学上有效量的本发明化合物，其中患者的肿瘤中WFS1或由WFS1编码的蛋白质的表达水平高于来自患有相同癌症的患者的参考值。

本发明还提供用于预测患者对使用本发明化合物的抗癌治疗的反应的似然度的活体外方法。方法包含a)测量获自患者的肿瘤样本中ER压力或未折叠蛋白质反应的表达水平。在一些实施方案中，ER压力或未折叠蛋白反应的表达水平为WFS1或由WFS1编码的蛋白质的水平。在一些实施方案中，方法进一步包含b)将获自患者的肿瘤样本中ER压力或未折叠蛋白反应的表达水平应用于数学方程式以便计算患者表达分数；以及c)对患者表达分数与参考水平进行比较；及鉴别更可能对使用本发明化合物的抗癌治疗有反应的患者高于参考水平。在一些实施方案中，高于参考水平的患者特征分数(signature score)指示患者对使用本发明化合物的治疗有反应的高似然度，而低于参考水平的患者特征分数指示该患者不大可能对彼治疗有反应。肿瘤样本可为取自患者的任何适合样本。实例包括血液样本、血浆样本及生物检体样本。

ER压力或未折叠蛋白反应的表达水平，诸如WFS1或由WFS1编码的蛋白质的表达水平可通过本领域中已知的任何方法，诸如RT-PCR、北方杂交(northern hybridization)、ELISA、免疫组织化学和/或免疫印迹测量。在一些实施方案中，WFS1的表达水平为mRNA表达水平。还可采用RNA测序或微数组测量(例如GeneChip Human Genome U133 Plus2.0Array)测量mRNA表达水平。

在一些实施方案中，患者表达分数可根据治疗前测量的log2转换mRNA表达水平的总和计算。在一些实施方案中，患者表达分数系基于通过RT PCR测量获得的mRNA表达水平来计算。使用RT PCR计算的患者表达分数可不同于基于微数组技术计算的值。然而，基于RTPCR的患者表达分数可通过在所述方法之间建立相关性转化成使用微数组技术时获得的值，如本领域技术人员所熟知。

本发明还提供用于预测患者对使用本发明化合物的抗癌治疗的反应的似然度的试剂盒及装置。该试剂盒或装置包含：a)用以测量患者的肿瘤中WFS1或由WFS1编码的蛋白质的表达水平的试剂；及b)指南，其包含关于患者是否将对使用本发明化合物的抗癌治疗有反应的说明书，其中WFS1或由WFS1编码的蛋白质的表达水平高于来自患有相同癌症的个体的参考值指示患者很可能对抗癌治疗有反应。该指南可为比较器模块，其包含与样本中WFS1的水平进行比较的参考值或参考值集合。比较器模块可呈任何适合的形式。在一些实施方案中，其呈显示设备形式，例如经设计以紧邻样本测量的读数置放以指示反应水平的彩色或数码材料条带。在一些实施方案中，患有癌症的患者的肿瘤中WFS1或由WFS1编码的蛋白质的表达水平用于预测彼患者对本文所描述的本发明化合物的反应的似然度。

范例

通用合成方法

以下实例意欲说明本发明，且不应解释为对其进行限制。除非另有说明，否则下文描述的实例的化合物的一或多种互变异构形式可当场制备和/或分离。下文描述的实例的化合物的所有互变异构形式均应视为所揭示的。温度以摄氏度为单位给出。若未另外提及，则所有蒸发均在减压下，优选在约15mm Hg与100mm Hg之间(＝20-133毫巴)进行。最终产物、中间体及起始物质的结构通过标准分析方法(例如微量分析)及光谱表征(例如MS、IR、NMR)来确认。所用缩写为本领域中习知的缩写。

用于合成本发明化合物的所有起始物质、建构嵌段、试剂、酸、碱、脱水剂、溶剂及催化剂均为市售的或可通过一般本领域技术人员已知的有机合成方法(Houben-Weyl第4版1952,Methods of OrganicSynthesis,Thieme,第21卷)来产生。此外，本发明化合物可通过如以下实例中所示的一般本领域技术人员已知的有机合成方法来产生。

实例1：中间体的制备

缩写清单

在下文实例中使用以下缩写：

Ac 乙酰基

AcOH 乙酸

Ac

aq 水溶液

ATP 腺苷三磷酸

BF

Bn 苯甲基

Br

ACN,CH

CD

CDCl

COD 1,5-环辛二烯

Conc. 浓缩

Cs

CuI 碘化铜(I)

CuSO

CV 柱体积

CA 市售

℃ 摄氏度

DBU 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯

DCM 氯化甲烷或二氯甲烷

DIPEA N,N-二异丙基乙胺

DMAP 4-二甲氨基吡啶

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO 二甲亚砜

DMSO-d6 氘代二甲亚砜

EA 乙酸乙酯

Equiv 当量

EtOAc 乙酸乙酯

g 克

HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基),N,N,N",N"-四甲基六氟磷酸盐

h 小时

HCl 盐酸

Hex 己烷

HPLC 高效液相色谱

LCMS 液相色谱质谱

M 摩尔

MHz 兆赫兹

mg 毫克

mL 毫升

mM 毫摩尔

MeOH 甲醇

MeONa 甲醇钠

min 分钟

MS 质谱仪

MTBE 甲基叔丁基醚

μM 微摩尔

N 标准(摩尔)浓度

NMO N-甲基吗啉-N-氧化物

ON 隔夜

Pd

Pd/C 钯/碳

Pd(OH)

叔丁基X-phos 2-二-叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯基

psi 磅/平方英寸

Py 吡啶

r.b.f.(rbf) 圆底烧瓶

RT(rt或r.t.) 室温

S-Phos 2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基联苯基

TBAF 氟化四丁铵

TBDMSOTf 三氟甲磺酸叔丁基二甲基硅烷酯

TBS 叔丁基二甲基硅烷基

TEA 三乙胺

Tf 三氟甲烷磺酰基

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TLC 薄层色谱

TMS 三甲基硅烷基

TMSI 三甲基硅烷基碘化物

TMSN

TMSOTf 三氟甲烷磺酸三甲基硅烷酯

TPAP 过钌酸四丙铵

UPLC 超高效液相色谱

A.二氢喋啶酮中间体制备：

A-1.(7S)-2-氯-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将2,4-二氯嘧啶-5-胺(30g，159.4mmol)、(2S)-2-(甲氨基)丙酸(29.59g，286.9mmol)及碳酸氢钠(48.20g，573.8mmol)溶解于EtOH(285mL)及水(15.00mL)中并加热至80℃，保持3小时。将反应物冷却至室温，随后于冰浴中冷却。通过真空过滤收集沉淀物并用水洗涤。将滤饼悬浮于水中且在室温下搅拌1小时。收集固体，用水洗涤且在真空烘箱中于50℃干燥隔夜以得到26g(75％产率)的所需产物。

A-2.(7S)-2-氯-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将2,4-二氯-6-甲基-嘧啶-5-胺(200g，1.123mol)、(2S)-2-(甲氨基)丙酸(208.4g，2.021mol)及碳酸氢钠(339.6g，4.043mol)溶解于EtOH(1.900L)及水(100.0mL)中并加热至回流隔夜。将混合物冷却至室温。过滤所得沉淀物且用水洗涤三次。将滤饼溶解于水(2L)中且搅拌0.5h。通过真空过滤收集固体，用EtOH(2×300ml)洗涤，且在真空下于50℃干燥隔夜以得到呈灰白色固体的产物，196.7g，77％产率。手性HPLC:(Chiralpak AD-H柱,20％EtOH/hex,20min运行,98％ee。

A-3.(7S)-2-氯-4,5,7,8-四甲基-7H-喋啶-6-酮.

将(7S)-2-氯-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(118g，521mmol)及碳酸钾(107.9g，791mmol)溶解于1.5L DMF中且冷却至0℃。将碘甲烷(32.4ml，520.6mmol)添加至反应混合物，且使反应物升温至室温。

将反应物倒入4.5L水中且用乙酸乙酯(2×1.5L)萃取。合并萃取物且经无水硫酸钠干燥、过滤且真空蒸发，得到粗产物。将粗产物通过柱色谱(1.5kg SiO

A-4.(7S)-2-氯-8-异丙基-4,7-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮

步骤1：(2S)-2-(异丙氨基)丙酸甲酯

向(2S)-2-氨基丙酸甲酯盐酸盐(2.8g，20.06mmol)于MeOH(60mL)及丙酮(10mL，136.2mmol)中的混合物中添加10％Pd/C(642.0mg，0.6033mmol)，接着添加3滴N-甲基吗啉。在氢气下于50psi下氢化混合物隔夜。经由硅藻土过滤反应物且真空蒸发滤液。将残余物溶解于100mL乙酸乙酯中且搅拌10分钟。通过真空收集白色固体以得到标题产物，重2.8g(77％产率)。[α]

步骤2：(7S)-2-氯-8-异丙基-4,7-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮

将(2S)-2-(异丙氨基)丙酸甲酯盐酸盐(1.41g，7.762mmol)悬浮于10mL环己烷中且用2M NaOH(4.4ml，8.800mmol)中和。分离有机层且添加至2,4-二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶(1.6g，7.7mmol)及NaHCO

A-5. 2-氯-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

将2,4-二氯-6-甲基-嘧啶-5-胺(5g，28.09mmol)、2-甲氨基乙酸(2.503g，28.09mmol)及NaHCO

A-6.(7S)-2-氯-7-环丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

步骤1：(S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-环丙基乙酸甲酯.

在10℃下经2小时向(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-2-环丙基-乙酸(408g，1.896mol)及氧化银(I)(879g，3.792mol)于DMF(5L)中的溶液中逐滴添加碘甲烷(550ml，8.835mol)。使混合物升温至室温，随后在45℃下加热18小时。将反应混合物冷却至室温且经硅藻土过滤。用1L甲基叔丁基醚(MTBE)洗涤硅藻土垫。用8L MTBE稀释滤液且用4L 0.5M硫代硫酸钠洗涤。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸镁干燥且真空浓缩以得到呈无色油状物的标题产物，重431.99g(93.6％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

步骤2：(S)-2-氨基-2-环丙基乙酸甲酯盐酸盐.

向(S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-环丙基乙酸甲酯(431.9g，1.775mol)于二氯甲烷(750mL)中的冷却(10℃)溶液添加4M HCl(3L，12mol)。使反应物升温至室温且搅拌隔夜(约18小时)。真空浓缩反应物，且用MTBE湿磨所得残余物。真空收集所得白色固体且干燥以得到标题产物，重286.85g(89.95％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,2H),3.76(s,3H),3.48(dd,J＝14.1,7.4Hz,1H),2.59(s,3H),1.23-1.07(m,1H),0.80-0.60(m,3H),0.55-0.41(m,1H)。

步骤3：2-((2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)(甲基)氨基)-2-环丙基乙酸甲酯.

在配备有迪安-斯塔克分水器的3颈12L烧瓶中添加(S)-2-氨基-2-环丙基乙酸甲酯盐酸盐(286.85g，1.597mol)、2,4-二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶(316.3g，1.521mol)及碳酸氢钠(636.3g，7.574mol)于环己烷(3.8L)中的混合物。使混合物回流3小时。使混合物冷却至70℃且经由硅藻土垫过滤，随后用2L热环己烷洗涤。真空浓缩滤液以得到含有ppt的粘稠油状物。将油状物再溶解于环己烷中且经由硅藻土过滤。真空浓缩滤液以得到呈澄清黄色粘稠油状物的产物，重498.56g。仍存在一些环己烷溶剂。假定产物产率为定量的。1H NMR(300MHz,CDCl

步骤4：(7S)-2-氯-7-环丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

于Parr设备上在40psi的氢气下将2-((2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)(甲基)氨基)-2-环丙基乙酸甲酯(478.7g，1.521mol)及Pt/C(50g，7.69mmol)的悬浮液振荡6小时。将VO(acac)

A-7. 2-氯-4,8-二甲基-7-丙基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将2,4-二氯-6-甲基-嘧啶-5-胺(2g，11.23mmol)、2-(甲氨基)戊酸(1.915g，14.60mmol)及碳酸氢钠(3.396g，40.43mmol)溶解于20ml 95％乙醇中。使反应物回流4天，随后冷却且倒至冰上并搅拌。收集固体且用水充分洗涤。将滤饼置于烧瓶中且在存在300ml水的情况下搅拌。用水及乙醇充分洗涤此混合物，随后在55℃下真空干燥24小时以得到标题产物，重2.05g(71.7％产率)；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.40(s,1H),4.21(dd,J＝6.2,4.2Hz,1H),3.01(s,3H),2.24(s,3H),1.89-1.64(m,2H),1.17(q,J＝7.5Hz,2H),0.85(t,J＝7.2Hz,3H)。ESMS(M+1)＝255.14。

A-8.(7S)-2-氯-7-乙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(2S)-2-(甲氨基)丁酸三氟乙酸盐(7.939g，23mmol)、2,4-二氯-6-甲基-嘧啶-5-胺(3g，16.85mmol)及碳酸氢钠(7.078g，84.25mmol)溶解于95％EtOH(95mL)中，且加热至回流，保持20小时。将反应物冷却至室温且使用1N HCl将溶液中和至pH 6。用二氯甲烷(3×30ml)萃取含水混合物。用水洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且蒸发以得到灰白色固体，通过柱色谱(SiO

A-9.(7S)-2-氯-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循用于中间体A-6(步骤3及4)的程序使二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶(25g，120mmol)及甲基甲基-L-缬氨酸(24.02g，132.2mmol)反应，接着进行还原及环化，得到标题产物，重22.81g(72％总产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

A-10.(7S)-2-氯-5,8-二甲基-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

步骤1：(7S)-2-氯-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将2,4-二氯-5-氨基-嘧啶(1g，6.1mmol)、(2S)-2-氨基戊-4-炔酸(1.035g，9.15mmol)及二异丙基乙胺(3.2mL，18.29mmol)溶解于乙醇(10mL)中且加热至120℃，保持22小时。将反应物冷却至室温，且通过真空过滤收集形成的沉淀物并用乙醇充分洗涤以得到所需产物，重780mg(57％产率)；ESMS(M+1)＝233.08

步骤2：(7S)-2-氯-5,8-二甲基-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将碘甲烷(335μl，5.39mmol)添加至(7S)-2-氯-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(500mg，2.25mmol)及碳酸铯(2.2g，6.74mmol)于DMF(5ml)中的混合物中，且在室温下搅拌20小时。将反应物倒入水(50ml)中且用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。用水(2×25ml)及盐水(25ml)洗涤合并的萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发以得到标题产物。重400mg(71％产率)；ESMS(M+1)＝251.09。

A-11. 2-氯-4,7,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将2-甲基-2-(甲氨基)丙酸(2g，17.07mmol)、2,4-二氯-6-甲基-嘧啶-5-胺(2g，11.23mmol)及碳酸钠(1.190g，11.23mmol)溶解于正丁醇(15mL)中且在微波中加热至165℃，保持75分钟。将反应物冷却至室温且真空蒸发溶剂。将水添加至残余物且形成沉淀物。通过真空过滤收集此沉淀物，且用水充分洗涤以得到650mg所需产物。用乙酸乙酯(3×100ml)萃取含水滤液。合并萃取物，经无水硫酸钠干燥、过滤且真空蒸发，额外得到1.3g产物。总共获得产物1.95g；1H NMR(300MHz,CDCl

A-12. 2-氯-4,5,7,7,8-五甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将氢化钠(60％油状分散液；9mg，0.22mmol)逐份添加至A-11. 2-氯-4,7,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(45mg，0.187mmol)及碘甲烷(14μL，0.22mmol)于DMF(2ml)中的冷却(0℃)溶液中。搅拌混合物1小时，随后升温至室温隔夜。通过添加水淬灭反应物，且用乙酸乙酯(10mL)萃取。萃取物经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到所需产物。1H NMR(300MHz,CDCl

A-13. 2-氯-7,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

步骤1：2-[(2-氯-5-硝基-嘧啶-4-基)氨基]-2-甲基-丙酸甲酯.

将2,4-二氯-5-硝基-嘧啶(4.61g，23.8mmol)于THF(50mL)中的溶液冷却至-78℃。将2-氨基-2-甲基-丙酸甲酯盐酸盐(3.650g，23.8mmol)添加至冷却溶液中，接着添加二异丙基乙胺(8.3mL，47.5mmol)。搅拌反应物30分钟，随后升温至室温。将水(100ml)添加至反应物且用乙酸乙酯萃取(3×50ml)。合并的萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

步骤2：2-氯-7,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将铁粉(4g，14.4mmol)添加至2-[(2-氯-5-硝基-嘧啶-4-基)氨基]-2-甲基-丙酸甲酯(4.03g，14.4mmol)于乙酸(50mL)中的溶液中且加热至100℃，保持1.5小时。真空蒸发溶剂且将残余物溶解于100ml饱和碳酸氢钠中，且用二氯甲烷(2×100mL)萃取。合并的萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到残余物，用二乙醚洗涤残余物以得到标题产物，重567mg。

用二氯甲烷(10％甲醇)进行第二次萃取，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发以额外得到1.08g产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.68(s,1H),8.50(s,1H),7.48(s,1H),1.34(s,3H),0.95(s,3H)；ESMS(M+1)＝212.82

A-14. 2-氯-5,7,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将氢化钠(60％油状分散液；103mg，4.29mmol)逐份添加至2-氯-7,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮A-13(320mg，1.43mmol)及碘甲烷(350μL，5.72mmol)于DMF(5ml)中的冷却(0℃)溶液中。将反应物升温至室温且搅拌2小时。将反应物倒入25ml水中且用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。用水(25ml)及盐水(50ml)洗涤合并的萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

A-15. 2-氯-5,8-二乙基-7,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将碘乙烷(158μl，1.98mmol)添加至(A-13)2-氯-7,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(308mg，0.7mmol)及碳酸铯(690mg，2.12mmol)于DMF(2ml)中的混合物中且在室温下搅拌12小时。将反应物倒入水(25ml)中且用乙酸乙酯(3×25ml)萃取。用盐水洗涤合并的萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

A-16. 2'-氯-4',8'-二甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

步骤1：1-(甲氨基)环丙烷-1-甲酸乙酯

将2M碳酸钠溶液(15mL，2M，29.89mmol)添加至1-氨基环丙烷甲酸乙酯盐酸盐(1.65g，9.963mmol)于THF中的混合物中，接着添加二碳酸二叔丁酯(3.3g，14.94mmol)。在室温下搅拌反应物16小时。将二乙醚(50mL)添加至反应物，且分离水层。用1N HCl(10mL)、水(10mL)及盐水洗涤有机层，经MgSO

向含1-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)环丙烷甲酸乙酯(3.7g，15.21mmol)的二氯甲烷(10mL)添加TFA(8mL，99.63mmol)。1h后，浓缩反应物，得到所需产物，中和该产物以得到呈淡黄色油状物的标题化合物，重900mg(63％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

步骤2：1-((2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)(甲基)氨基)环丙烷-1-甲酸乙酯.

将1-(甲氨基)环丙烷-1-甲酸乙酯(0.87g，6.1mmol)于THF中的溶液添加至2,4-二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶(1.264g，6.1mmol)及N,N-二异丙基乙胺(1.3mL，7.291mmol)于四氢呋喃(12mL)中的冷却(0℃)混合物中且搅拌1小时。用NH

步骤3：2'-氯-4',8'-二甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷1,7'-喋啶]-6'-酮

使1-((2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)(甲基)氨基)环丙烷-1-甲酸乙酯(570mg，1.8mmol)及Fe(607.0mg，10.87mmol)于乙酸(5.700mL)中的混合物回流1小时。真空移除溶剂且添加1N HCl(10ML)。滤出黄色沉淀物，且用碳酸钾将滤液中和至pH 10，随后用乙酸乙酯(3×10mL)及二氯甲烷/甲醇(20/1比率，3×10mL)萃取。合并的有机层经MgSO

A-17. 2'-氯-4',8'-二甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丁烷-1,7'-喋啶]-6'-酮.

步骤1：1-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]环丁烷甲酸.

将氢化钠(60％w/w油状分散液，1.200g，30.00mmol)添加至1-(叔丁氧羰基氨基)环丁烷-1-甲酸(2.153g，10.00mmol)于THF(100mL)中的冷却(0℃)溶液中。搅拌15min后，添加碘甲烷(7.296g，3.200mL，51.40mmol)。使混合物达到室温且搅拌隔夜。添加乙酸乙酯(100mL)及水(100mL)。搅拌10min后，减压蒸发溶剂且用使用饱和碳酸氢钠(3×50ml)洗涤的二乙醚替换。用1N硫酸氢钾将合并的水层调节至pH 3且用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥且真空蒸发以得到呈黄色固体的标题产物(1.4g，定量产率)。

步骤2：1-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)环丁烷甲酸甲酯.

将含1-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]环丁烷甲酸(2.293g，10mmol)的苯(15mL)及MeOH(5mL)(3:1比率)逐滴添加至(三甲基硅烷基)重氮甲烷(6.000mL，2M，12.00mmol)于二乙醚中的溶液中。1小时后，真空蒸发反应物以得到呈淡黄色液体的1-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]环丁烷甲酸甲酯(定量产率)。

步骤3：1-(甲氨基)环丁烷甲酸甲酯盐酸盐.

向含1-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]环丁烷甲酸甲酯(2.433g，10mmol)的二噁烷中添加含HCl(20mL，4M，80.00mmol)的二噁烷。搅拌2h后，LCMS中不再显示SM，且将溶液浓缩至干燥。用二乙醚(2×10mL)湿磨残余物以得到呈黄色粘性胶状物的所需产物，其用于下一步骤中。ESMS(M+1)＝144.06。

步骤4：1-[(2-氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶-4-基)-甲基-氨基]环丁烷甲酸甲酯.

在0℃下，将K

步骤5：2-氯-4,8-二甲基-螺[5H-喋啶-7,1'-环丁烷]-6-酮.

将含1-[(2-氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶-4-基)-甲基-氨基]环丁烷甲酸甲酯(200mg，0.6355mmol)、Zn(210.2mg，3.214mmol)及NH

A-18(7S)-2-氯-7-乙基-8-异丙基-5-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

步骤1：(7S)-2-氯-7-乙基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将2,4-二氯嘧啶-5-胺(5.4g，32.92mmol)、(R)-2-氨基丁酸(4.07g，39.5mmol)及二异丙基乙胺(23ml，131.7mmol)溶解于正丁醇(80ml)及水(40ml)中且加热至128℃，保持24小时。真空蒸发溶剂。将100ml水添加至残余物且用乙酸乙酯(3×80ml)萃取。合并萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到产物，用异丙醇湿磨产物以得到固体，通过真空过滤收集固体并干燥以得到2.46g产物。真空蒸发滤液，额外得到粗产物。通过柱色谱(SiO

步骤2：(7S)-2-氯-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

向(7S)-2-氯-7-乙基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(1.46g，6.65mmol)及碳酸钾(2.02g，14.6mmol)于20ml丙酮中的混合物中添加碘甲烷(0.5ml，8mmol)。在室温下搅拌反应物2天。真空蒸发溶剂，且将残余物溶解于水并搅拌。通过真空过滤收集沉淀物，用水充分洗涤，且真空干燥以得到标题产物，重1.41g(92％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(s,1H),7.80(s,1H),4.28(t,J＝4.8Hz,1H),3.21(s,3H),2.07-1.49(m,2H),0.84(t,J＝7.4Hz,3H)；ESMS(M+1)＝227.09。步骤3：(7S)-2-氯-7-乙基-8-异丙基-5-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-氯-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(205mg，0.9mmol)溶解于2ml DMF中。将氢化钠(60％油状分散液；72mg，1.8mmol)添加至溶液，接着添加2-碘丙烷(180μl，1.8mmol)。1小时后，将0.2ml甲醇添加至反应物，随后真空蒸发。通过柱色谱(SiO

A-19(7S)-2-氯-5-乙基-8-异丙基-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

步骤1：(7S)-2-氯-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：经由关于A-18步骤1报导的程序使2,4-二氯嘧啶-5-胺(11g，67mmol)与(2S)-2-氨基丙酸(7.17g，80.5mmol)反应，得到所需产物，重9.7g(72％产率)；ESMS(M+1)＝199.03

步骤2：(7S)-2-氯-5-乙基-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：经由关于A-18步骤2报导的程序使(7S)-2-氯-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与碘乙烷反应，得到所需产物，重3.31g(74％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.89(s,1H),4.30(q,J＝6.8Hz,1H),3.84(ddd,J＝14.1,7.0,2.2Hz,2H),3.32(s,1H),1.36(d,J＝6.8Hz,3H),1.09(t,J＝7.1Hz,3H)；ESMS(M+1)＝227.13。

步骤3：(7S)-2-氯-5-乙基-8-异丙基-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：经由见于A-18步骤3的相同程序得到所需产物，重515mg(52％产率)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.89(s,1H),4.30(q,J＝6.8Hz,1H),3.84(ddd,J＝14.1,7.0,2.2Hz,2H),3.32(s,1H),1.36(d,J＝6.8Hz,3H),1.09(t,J＝7.1Hz,3H)；ESMS(M+1)＝269.14。

A-20.(S)-2-氯-7-((R)-1-甲氧基乙基)-5,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

步骤1：(7S)-2-氯-7-((R)-1-甲氧基乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(2S,3R)-2-氨基-3-甲氧基-丁酸(1g，7.5mmol)、2,4-二氯嘧啶-5-胺(1000mg，6.1mmol)及N,N-二异丙基乙胺(3.2mL，18.23mmol)溶解于乙醇(15mL)且在100℃加热16小时。将反应物冷却至室温。冷却时形成沉淀物。通过真空过滤收集沉淀物，用己烷洗涤，且干燥以得到所需产物(800mg，54％)；ESMS(M+1)＝243.12。

步骤2：(7S)-2-氯-7-((R)-1-甲氧基乙基)-5,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-氯-7-((R)-1-甲氧基乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(0.75g，3.09mmol)及碳酸铯(3.02g，9.27mmol)及碘甲烷(470μl，7.42mmol)溶解于DMF(5ml)中且搅拌2小时。向反应混合物中加水且用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。用水及盐水洗涤合并的萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到所需产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.82(d,J＝21.5Hz,1H),4.39(dd,J＝14.6,2.7Hz,1H),3.81-3.61(m,1H),3.34(s,3H),3.23(d,J＝7.9Hz,3H),3.12(dd,J＝13.8,10.2Hz,6H),1.12(dd,J＝22.7,6.5Hz,3H)；ESMS(M+1)＝271.12

A-21.(7S)-2-氯-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

在128℃下将含2,4-二氯嘧啶-5-胺(11g，67.08mmol)、(2S)-2-氨基丙酸(7.172g，80.5mmol)及N,N-二异丙基乙胺(46mL，268mmol)的乙醇(100mL)加热14h。将反应物真空蒸发至一半体积。在室温下加水(100ml)至混合物且搅拌1小时。通过真空过滤收集所得沉淀物，用水充分洗涤，且干燥以得到所需产物，重9.56g。分析性SFC(柱：Cellulose 2(40％乙醇，60％CO

A-22.(7S)-2-氯-5,8-二乙基-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将碘乙烷(650μL，8.04mmol)添加至(7S)-2-氯-7-甲基-7,8-二氢-5H-喋啶-6-酮(577mg，2.87mmol)及碳酸铯(2.81g，8.6mmol)于DMF(5ml)中的混合物中且在室温下搅拌12小时。真空蒸发反应物，得到固体残余物。将水(50ml)添加至残余物且用乙酸乙酯萃取(3×50ml)。用盐水洗涤合并的萃取物，经硫酸钠干燥、过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

A-23.(7S)-2-氯-5,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

向含(7S)-2-氯-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(4.37g，21.76mmol)的丙酮(63.97mL)添加碳酸钾(6.616g，47.87mmol)及碘甲烷(1.625mL，26.1mmol)，且在室温下搅拌反应物2天。真空蒸发反应物，得到固体残余物。将水(6ml)添加至固体，过滤，且用水(2×)洗涤并干燥以得到所需产物：重4.0519g。分析性SFC(柱：Cellulose 2(40％乙醇，60％CO

A-24.(7S)-2-氯-8-乙基-5,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将碘乙烷(400μL，4.911mmol)添加至(7S)-2-氯-5,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及碳酸铯(2.1g；6.55mmol)于5ml DMF的混合物(6mL)中且在50℃搅拌1小时。真空蒸发反应物，得到固体残余物。添加水(30ml)且用乙酸乙酯(3×30ml)萃取溶液。用盐水洗涤合并的萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，得到胶状物，用醚/己烷湿磨胶状物以得到呈固体的所需产物，重0.7g。分析性SFC(柱：Cellulose 2(40％乙醇，60％CO

A-25.(7S)-2-氯-7-(2-羟乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将2,4-二氯嘧啶-5-胺(5g，30.5mmol)、(2S)-2-氨基-4-羟基-丁酸(5g，42mmol)及二异丙基乙胺(16mL，91.5mmol)溶解于乙醇(10mL)中且加热至120℃，保持22小时。将反应物冷却至室温且形成沉淀物。通过真空过滤收集沉淀物，用乙醇洗涤，且干燥以得到所需产物，重4.76g(68％产率)；ESMS(M+1)＝229.07；手性HPLC(ChiralPAK IC柱；50％/MeOH/50％乙醇)：Rt 6.625min.,81％ee。

A-26.(7S)-2-氯-5,8-二乙基-7-(2-羟乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将碘乙烷(1.5ml，19.25mmol)添加至(7S)-2-氯-7-(2-羟乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(2g，8.75mmol)及碳酸铯(8.55g，26.24mmol)于DMF(25mL)中的混合物中。在室温下搅拌反应物20小时。将水(10ml)添加至反应物，接着用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。用盐水(1×20mL)及水(2×20mL)洗涤合并的萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩至干，得到所需产物，ESMS(M+1)＝285.13。

A-27.(7R)-2-氯-7-乙基-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将2,4-二氯嘧啶-5-胺(8.677g，52.9mmol)、(2R)-2-氨基-2-甲基-丁酸(6.198g，52.9mmol)及N,N-二异丙基乙胺(36.86mL，212mmol)溶解于乙醇(100mL)中且在128℃下加热14小时。将反应混合物真空蒸发至一半体积，接着添加100ml水且在室温下搅拌1小时。通过真空过滤收集所得沉淀物且用水洗涤。于异丙醇中搅拌粗产物且过滤以去除不溶起始物质。真空浓缩滤液，于二氯甲烷中搅拌，且过滤以得到所需产物，重1.71g；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.68(s,1H),8.47(s,1H),7.51(s,1H),1.88(dd,J＝13.8,7.3Hz,1H),1.53(dd,J＝13.9,7.3Hz,1H),1.38(s,3H),0.82(t,J＝7.3Hz,3H)；ESMS(M+1)＝227.13。

A-28.(7R)-2-氯-5,7,8-三乙基-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将碘乙烷(363uL，4.54mmol)添加至(7R)-2-氯-7-乙基-7-甲基-5,8-二氢喋啶-6-酮(368mg，1.6mmol)及碳酸铯(1.59g，4.87mmol)于DMF(2.7mL)中的混合物中且在室温下搅拌12小时。真空蒸发反应物以得到残余物。添加水(50ml)，且用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。用盐水洗涤合并的乙酸乙酯萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发以得到粗产物。通过柱色谱、用10-100％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱来纯化粗产物以得到所需产物，重386mg；ESMS(M+1)＝283.55。

A-29.(7S)-2-氯-7-乙基-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：经由关于A-27报导的程序使2,4-二氯嘧啶-5-胺与(2S)-2-氨基-2-甲基丁酸反应，得到5.43g所需产物；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.68(s,1H),8.47(s,1H),7.51(s,1H),1.88(dd,J＝13.8,7.3Hz,1H),1.53(dq,J＝14.6,7.3Hz,1H),1.38(s,3H),0.83(t,J＝7.3Hz,3H)。ESMS(M+1)＝227.09。

A-30.(7S)-2-氯-5,7,8-三乙基-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：经由关于A-28报导的程序使中间体A-29与碘乙烷反应，得到643mg所需产物；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.87(s,1H),3.98(dd,J＝14.1,7.1Hz,1H),3.80(dd,J＝14.1,7.0Hz,1H),3.68(dd,J＝14.1,7.0Hz,1H),3.41(dt,J＝14.1,6.9Hz,1H),1.89(dq,J＝14.5,7.2Hz,2H),1.59(s,3H),1.14(dt,J＝27.7,7.0Hz,6H),0.68(t,J＝7.4Hz,3H)；ESMS(M+1)＝283.19。

A-31.(7S)-2-氯-7-乙基-5,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：经由关于A-28报导的程序使化合物A-29与碘甲烷反应，得到所需产物，246mg(66％产率)；ESMS(M+1)＝255.14。

A-32.(7R)-2-氯-7-乙基-5,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：经由关于A-28报导的程序使化合物A-27与碘甲烷反应，得到所需产物，263mg(70％产率)；ESMS(M+1)＝255.14。

A-33. 2'-氯-4',5',8'-三甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮.

将氢化钠(40.00mg，1.000mmol)添加至2-氯-4,8-二甲基-螺[5H-喋啶-7,1'-环丙烷]-6-酮A-16(120mg，0.5mmol)及碘甲烷(50μL，0.7500mmol)于DMF(10ml)中的冷却(0℃)溶液中。搅拌混合物1小时，随后升温至室温且搅拌16小时。用饱和NH4Cl淬灭反应物，随后倒入饱和NaHCO3溶液中，且用乙酸乙酯萃取。萃取物经MgSO

A-34.(7S)-2-氯-4-异丙基-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(2S)-2-(甲氨基)丙酸(500.3mg，4.852mmol)、2,4-二氯-6-异丙基嘧啶-5-胺(500mg，2.426mmol)及碳酸氢钠(713.3mg，8.491mmol)溶解于95％乙醇且加热至90℃，保持16小时。将水添加至反应混合物，接着用乙酸乙酯(3×150ml)萃取。用水及盐水洗涤合并的萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发以得到粗产物。通过制备型C18柱(10-100％乙腈/水(0.1％TFA))纯化粗产物。合并所需级分且真空蒸发以得到标题产物，重500mg(81％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

A-35.(7S)-2-氯-5,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-氯-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(化合物A-1；9.1g，40.15mmol)及碳酸钾(8.32g，60.22mmol)溶解于DMF(100ml)中且冷却至0℃。将碘甲烷(3ml，48.18mmol)添加至冷却溶液且搅拌隔夜。将反应物倒入水(200ml)中且用乙酸乙酯(3×150ml)萃取。用150ml水及盐水(200ml)洗涤合并的萃取物，随后经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

A-36. 2'-氯-5',8'-二甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

通过如A-16及A-33中所描述的相同方法得到标题产物来制备化合物。1H 1H NMR(300MHz,CDCl

A-37. 2'-氯-5',8'-二乙基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮.

步骤1：1-((2-氯-5-硝基嘧啶-4-基)氨基)环丙烷-1-甲酸乙酯

如下制备化合物：通过以与中间体A-16类似的方式使2,4-二氯甲烷-5-硝基嘧啶与1-氨基环丙烷-1-甲酸乙酯反应，得到呈黄色固体的标题化合物；重1.23g(99％产率)；ESMS(M+1)＝286.97。

步骤2：2'-氯-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮(A-53)

以与中间体A-13步骤2类似的方式得到标题化合物，重1.72g来制备化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.68(s,1H),8.50(s,1H),7.48(s,1H),1.34(s,2H),0.95(s,2H)。

步骤3：2'-氯-5',8'-二乙基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮.

将碘乙烷(600μl，7.3mmol)添加至2'-氯-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮(575mg，2.61mmol)及碳酸铯(2.55g，7.84mmol)于DMF(4ml)中的混合物中且加热至50℃，保持2小时。将水(50ml)添加至反应物且用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。用盐水洗涤合并的萃取物，经硫酸钠干燥、过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

A-38.(7S)-2-氯-4,7-二甲基-8-(甲基-d3)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

步骤1：N-((苯甲氧基)羰基)-N-(甲基-d3)-L-丙氨酸

在0℃，将NaH(537.5mg，13.44mmol)添加至(2S)-2-(苯甲氧羰基氨基)丙酸(1g，4.480mmol)于THF(100mL)中的溶液中。搅拌15分钟后，添加三氘(碘)甲烷(3.6g，24.83mmol)，且使混合物升温至室温并搅拌隔夜。添加乙酸乙酯(100mL)及水(100mL)。搅拌10min后，减压蒸发溶剂且用二乙醚替换。用饱和NaHCO

步骤2：

将含(甲基-d3)-L-丙氨酸(2S)-2-[苯甲氧羰基(三氘甲基)氨基]丙酸1(1.1g，4.578mmol)的甲醇添加至10％Pd/C(487.2mg，0.4578mmol)。在氢气(50Psi)下氢化混合物20小时。经由经MeOH洗涤的氟罗里硅土过滤反应混合物。真空蒸发且干燥滤液，得到呈白色固体的标题产物(477mg，98％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.09(q,J＝6.9Hz,1H),1.22(d,J＝7.1Hz,3H)。

步骤3：(S)-2-氯-4,7-二甲基-8-(甲基-d3)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

将(2S)-2-(三氘甲基氨基)丙酸2(477mg，4.494mmol)、2,4-二氯-6-甲基-嘧啶-5-胺(640.0mg，3.595mmol)及碳酸氢钠(1.087g，12.94mmol)溶解于EtOH(9.5mL)及水(0.5mL)中且回流隔夜。用6N HCl中和反应物，将溶液中和至pH 6，随后用二氯甲烷(30mL)萃取。分离水层，且用二氯甲烷(2×10mL)萃取两次。用水洗涤合并的有机萃取物且浓缩，得到粉色固体。将二氯甲烷(10mL)添加至固体且离心以分离固体。重复该步骤再次，且所得白色固体为清洁产物。通过柱色谱(SiO

A-39.(7S)-2-氯-4,8-二甲基-7-(甲基-d3)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：通过描述于A-2中的程序使甲基N-甲基-L-丙氨酸-3,3,3-d3与2,4-二氯-6-甲基嘧啶-5-胺反应，得到标题产物。83％产率；ESMS(M+1)＝231.07

A-40.N-(2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-甲基-L-丙氨酸甲酯.

将2,4-二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶(1.86g，8.96mmol)于20ml丙酮中的溶液逐滴添加至(2S)-2-(甲氨基)丙酸甲酯(1g，8.54mmol)及碳酸钾(1.77g，12.8mmol)于丙酮及水中的混合物中。在室温下搅拌反应物16小时。真空蒸发混合物，且将残余物溶解于水并用乙酸乙酯(3×75ml)萃取。合并经合并的萃取物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到呈粘稠黄色油状物的标题产物，重1.54g(62.5％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

A-41.(7S)-2-氯-7-乙基-8-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循关于中间体A-8报导的程序使(2S)-2-(甲氨基)丁酸三氟乙酸盐与2,4-二氯-6-甲基-嘧啶-5-胺反应，得到呈白色固体的标题产物，89％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.55(s,1H),4.34(dd,J＝5.5,3.5Hz,1H),3.16(s,3H),2.04(dtdd,J＝12.3,9.0,6.5,2.7Hz,2H),0.89(t,J＝7.5Hz,3H)。

A-42.(7S)-2-氯-7-乙基-5,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循关于中间体A-35报导的相同程序使中间体A-41与碘甲烷反应，得到呈黄色结晶固体的标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

A-43.(7S)-2-氯-5,7-二乙基-8-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循关于A-35报导的相同程序使中间体A-41与碘乙烷反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

A44.(7S)-2-氯-8-乙基-4,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

步骤1.N-(2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-乙基-L-丙氨酸甲酯

如下制备化合物：以与A-40相同的方式使2,4-二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶与(2S)-2-(乙氨基)丙酸甲酯反应，得到标题产物，重1.24g(61％产率)。ESMS(M+1)＝303.38。

步骤2：(7S)-2-氯-8-乙基-4,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过还原N-(2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-乙基-L-丙氨酸甲酯来制备化合物。将起始物质溶解于40ml THF中且在铂(351mg，0.054mmol)及双[(E)-1-甲基-3-氧代-丁-1-烯氧基]-氧代-钒(70.11mg，0.26mmol)的存在下氢化(50psi)隔夜。过滤且蒸发反应物以得到标题产物，其不经进一步纯化即使用。ESMS(M+1)＝241.42。

A-45.(7S)-2-氯-7-乙基-5-甲基-8-(2,2,2-三氟乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循关于A-24报导的程序使(7S)-2-氯-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢喋啶-6-酮(中间产物A-47)与1,1,1-三氟-2-碘-乙烷反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.74(s,1H),5.27-5.04(m,1H),4.29(dt,J＝17.2,8.6Hz,1H),3.55-3.33(m,1H),3.31(d,J＝4.2Hz,3H),2.04-1.82(m,1H),1.73(ddd,J＝23.1,15.2,7.9Hz,1H),0.86-0.73(m,3H)；ESMS(M+1)＝309.08。

A-46.(7S)-2-氯-7-乙基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将2,4-二氯嘧啶-5-胺(15g，91.47mmol)、(2S)-2-氨基丁酸(11.32g，109.8mmol)及二异丙基乙胺(64mL，366mmol)溶解于乙醇(120mL)中且加热至128℃，保持14小时。将反应物蒸发至一半体积，且将水(100ml)添加至混合物。通过真空过滤收集形成的沉淀物，得到作为S及R对映异构体的混合物的6.85g产物。浓缩滤液以去除水，且开始形成沉淀物。通过真空过滤收集沉淀物，用水充分洗涤，得到作为S对映异构体的9.16g产物。SFC层析(SW柱；40nm×16nm；25％甲醇/CO

A-47.(7S)-2-氯-7-乙基-5-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

向(7S)-2-氯-7-乙基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(1.46g，6.65mmol)于丙酮(21ml)中的溶液中添加碳酸钾(2.02g，14.6mmol)及碘甲烷(500ul，8mmol)且在室温下搅拌混合物2天。真空蒸发反应物以得到固体残余物。加水(10ml)且在室温下搅拌30分钟。通过真空过滤收集沉淀物并用水充分洗涤。在50℃下真空干燥固体，得到标题产物，重1.41g(92％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(s,1H),7.80(s,1H),4.28(t,J＝4.8Hz,1H),3.21(s,3H),2.07-1.49(m,2H),0.84(t,J＝7.4Hz,3H)。ESMS(M+1)＝227.09。SFC层析(SW柱；40nm×16nm；25％甲醇/CO2，等度；2ml/min)：Rt 0.671min.(95％ee)。

A-49.(7S)-2-氯-8-甲基-7-丙基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(S)-2-(甲氨基)戊酸盐酸盐(613mg，3.66mmol)及2,4-二氯嘧啶-5-胺(500mg，3.05mmol)溶解于乙醇(20ml)及二异丙基乙胺(2.7ml，15.24mmol)中且加热至120℃，保持24小时。将反应物冷却的室温且形成沉淀物。通过真空过滤收集沉淀物并用乙醇洗涤。在50℃下真空干燥固体，得到标题产物，重420mg(57％产率)；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.45(s,1H),4.18(d,J＝3.5Hz,1H),2.99(s,3H),1.91-1.66(m,2H),1.13(dt,J＝14.9,7.6Hz,2H),0.83(t,J＝7.3Hz,3H)；ESMS(M+1)＝241.09。

A-50.(7S)-2-氯-5,8-二甲基-7-丙基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-氯-8-甲基-7-丙基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮A-49(200mg，0.83mmol)、碘甲烷(62μl，1mmol)及碳酸钾(345mg，2.5mmol)溶解于丙酮中且在室温下搅拌16小时。真空蒸发反应物以得到固体，将该固体溶解于水中且用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到标题产物，重200mg(96％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

A-51. 2'-氯-5',8'-二氢-6'H-螺[氧杂环丁烷-3,7'-喋啶]-6'-酮.

将2,4-二氯嘧啶-5-胺(235mg，1.433mmol)、(2R)-2-氨基丁酸(155.6mg，1.509mmol)及DIPEA(779.9mg，1.051mL，6.034mmol)溶解于n-BuOH(20mL)及水(10mL)中且在128℃下加热24小时。真空蒸发溶剂。向残余物添加水(30ml)，用乙酸乙酯(2×)及二氯甲烷(2×)萃取。合并的有机层经MgSO

A-52. 2'-氯-5',8'-二甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[氧杂环丁烷-3,7'-喋啶]-6'-酮.

在0℃向含2-氯螺[5,8-二氢喋啶-7,3'-氧杂环丁烷]-6-酮(148mg，0.6481mmol)的DMF(2.4mL)中添加MeI(552.0mg，242.1μL，3.889mmol)，接着添加NaH(155.5mg，3.889mmol)。将反应温度升高至室温且搅拌2小时。蒸发溶剂，且将水(20ml)添加至残余物，接着用二氯甲烷(3×)萃取。合并萃取物，且经硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

A-53：2'-氯-4'-甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮.

参见A-37步骤2。

A-54：2-氯-5,7,7-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

以与中间体A-47相同的方式制备化合物。ESMS(M+1)＝227.71。

A-55.(7S)-7-(叔丁基)-2-氯-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

步骤1：(S)-2-((2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基丁酸甲酯

如下制备化合物：遵循A-4中的程序描述使(S)-3,3-二甲基-2-(甲氨基)丁酸甲酯盐酸盐与2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶(965mg，4.64mmol)反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

A-56.(7S)-2-氯-7-(2-羟乙基)-4-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

以与A-2类似的方式如下制备化合物：使2,4-二氯-6-甲基-嘧啶-5-胺(2g，11.23mmol)与(2S)-2-氨基-4-羟基-丁酸(1.338g，11.23mmol)反应，得到标题产物(1.2g，42％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.19(s,1H),8.18(s,1H),4.54(t,J＝5.0Hz,1H),4.18(td,J＝5.8,1.9Hz,1H),3.53(tdd,J＝6.5,4.8,1.8Hz,2H),2.22(s,3H),1.87(qd,J＝6.5,2.9Hz,2H)。ESI-MS m/z计算值242.05705，实验值243.1(M+1)

A-57.(S)-2-氯-4,8-二甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循A-6中的程序描述使3,3,3-三氟-2-(甲氨基)丙酸甲酯与2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶反应，得到标题产物；ESI-MS m/z 269.16(M+1)

A-59.(7S)-2-氯-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循A-6中的程序描述使(2S,3R)-3-甲氧基-2-(甲氨基)丁酸甲酯盐酸盐(14.07g，71.2mmol)与2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶(14.1g，67.8mmol)反应，得到标题产物(7S)-2-氯-7-[(1R)-1-甲氧基乙基]-4,8-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(10.5g，57％)。1H NMR(300MHz,CDCl

A-60.(7S)-2-氯-7-异丁基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循A-2中的程序描述使(2S)-4-甲基-2-(甲氨基)戊酸(1.15g，7.920mmol)与2,4-二氯-6-甲基-嘧啶-5-胺(1g，5.617mmol)反应，得到标题产物(7S)-2-氯-7-异丁基-4,8-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(570mg，29％)。1H NMR(300MHz,CDCl

A-61.(S)-2-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

步骤1.(S)-2-((2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)(甲基)氨基)-3-羟基-3-甲基丁酸甲酯.

将2,4-二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶(377mg，1.758mmol)、(2S)-3-羟基-3-甲基-2-(甲氨基)丁酸甲酯(三氟乙酸盐)(388mg，1.410mmol)及NaHCO

步骤2.(7S)-2-氯-7-(2-羟基丙-2-基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(S)-2-((2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)(甲基)氨基)-3-羟基-3-甲基丁酸甲酯(148mg，0.44mmol)及铂(58mg，0.008919mmol)置于含THF(5ml)的Parr瓶中，且置于50psi氢气下3天。将双[(Z)-1-甲基-3-氧代-丁-1-烯氧基]-氧代-钒(3mg，0.01131mmol)添加至反应物且置于50psi下的Parr上16小时。过滤反应物且用MeOH及DCM洗涤。真空移除挥发物且通过柱色谱(SiO

A-62. 2-氯-7-(2-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

A-63.(7S)-7-(叔丁氧基甲基)-2-氯-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循A-6中的程序描述使(2S)-3-叔丁氧基-2-(甲氨基)丙酸甲酯(2.56g，13,5mmol)与2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶(2.8g，13.46mmol)反应，得到标题产物(1.4g，86％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

A-64. 2'-氯-4',8'-二甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[氧杂环丁烷-3,7'-喋啶]-6'-酮

如下制备化合物：遵循A-6中的程序描述使3-(甲氨基)氧杂环丁烷-3-甲酸甲酯与2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶反应，得到标题产物(41％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.23(s,3H),3.36(s,3H),4.81(d,J＝7.6Hz,2H),5.01(d,J＝7.2Hz,2H),10.55(s,1H)。ESI-MS m/z计算值255.2(M+1)

A-65. 2'-氯-3,3-二氟-4',8'-二甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丁烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

如下制备化合物：遵循A-6中的程序描述使3,3-二氟-1-(甲氨基)环丁烷-1-甲酸甲酯与2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶反应，得到标题产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.72(s,1H),3.43-3.35(m,2H),3.35-3.28(m,2H),3.16(s,3H),2.28(s,3H)。ESI-MS m/z计算值289.2(M+1)

A-66.(7S)-2-氯-7-(1-甲氧基环丁基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循A-6中的程序描述使2-(1-甲氧基环丁基)-2-(甲氨基)乙酸甲酯(5.5g，24.6mmol)与2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶(5.56g，25.9mmol)反应，得到作为对映异构体对的标题产物。通过SFC(Cellulose-2，20×250mm；40％乙醇(5mM氨)/60％CO

A-67. 2'-氯-4',8'-二甲基-4,5,5',8'-四氢-2H,6'H-螺[呋喃-3,7'-喋啶]-6'-酮

如下制备化合物：遵循A-6中的程序描述使3-(甲氨基)四氢呋喃-3-甲酸甲酯与2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶反应，得到作为外消旋混合物的标题产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.22-2.30(m,4H),2.47(t,J＝4.0Hz,1H),3.01(s,3H),3.70(q,J＝7.6Hz,1H),4.02(d,J＝10.0Hz,1H),4.08-4.16(m,2H),10.59(s,1H)；ESI-MS m/z 269.1(M+1)

A-68.(7S)-2-氯-7-(1-甲氧基环丙基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循A-6中的程序描述使(2S)-2-(1-甲氧基环丙基)-2-(甲氨基)乙酸甲酯盐酸盐(840mg，4.006mmol)与2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶(820mg，3.942mmol)反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

A-69及A-70.(7R)-2-氯-7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-2-氯-7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

如下制备化合物：遵循A-4中的程序描述使3-甲氧基-2-甲基-2-(甲氨基)丙酸甲酯(6g，30.3mmol)与2,4-二氯-5-硝基-6-甲基嘧啶(6g，28.85mmol)反应，得到作为对映异构体混合物的标题产物。通过SFC(Cellulose-2，20×250mm；40％乙醇(5mM氨)/60％CO

对映异构体A：[α]D＝+34.32°，温度＝22.8℃(c＝1,MeOH)。手性SFC(Cellulose-2，4.6×100mm；40％乙醇(5mM氨)/60％CO

对映异构体B：[α]D＝-23.7°，温度＝23.7℃(c＝1,MeOH)。手性SFC(Cellulose-2，4.6×100mm；40％乙醇(5mM氨)/60％CO

A-71. 2-氯-4,8-二甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：遵循关于A-6报导的程序使2,4-二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶(1.04g，4.850mmol)与2-(甲氨基)-2-(1-甲基吡唑-4-基)乙酸甲酯盐酸盐(853mg，3.883mmol)反应，得到标题产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.46(s,1H),7.55(s,1H),7.21(t,J＝5.3Hz,1H),5.11(s,1H),3.69(s,3H),2.87(d,J＝17.1Hz,3H),2.24(s,3H)。ESI-

A-72.(S)-7-((S)-1-(叔丁氧基)乙基)-2-氯-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

步骤1：O-(叔丁基)-N-(2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-甲基-L-别苏氨酸甲酯.

将(2S,3R)-3-叔丁氧基-2-(甲氨基)丁酸甲酯(2.65g，13mmol)、2,4-二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶(4.85g，23.32mmol)及NaHCO3(3.3g，39.28mmol)在室温下搅拌16小时。过滤去除固体后，浓缩溶液且通过柱色谱(SiO

步骤2：(S)-7-((S)-1-(叔丁氧基)乙基)-2-氯-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

溶解O-(叔丁基)-N-(2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-甲基-L-别苏氨酸甲酯(2g)，接着添加铂(165mg，0.025mmol)/木且氢化4天。经由硅藻土过滤反应物以去除催化剂。真空蒸发滤液以得到呈白色固体的标题产物(1.7g)。1H NMR(300MHz,CDCl

A-73.(7S)-2-氯-7-(2-羟乙基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将碘甲烷(1.1ml，17.5mmol)添加至(7S)-2-氯-7-(2-羟乙基)-4-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(2g，8mmol)及碳酸铯(7.78g，23.9mmmol)于DMF(25ml)中的混合物中且搅拌16小时。向反应混合物中加水且用乙酸乙酯(3×10ml)萃取。用盐水(20ml)及水(2×20ml)洗涤合并的萃取物。有机萃取物经无水硫酸钠干燥、过滤且真空蒸发，得到标题产物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.60(t,J＝4.8Hz,1H),4.27(dd,J＝7.0,5.8Hz,1H),3.34(m,2H),3.24(s,3H),3.05(s,3H),2.40(s,3H),1.68(m,2H)。ESI-MS m/z计算值268.1091，实验值269.22(M+1)

A-74.(S)-7-((R)-1-(叔丁氧基)乙基)-2-氯-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

以与A-72类似的方式制备化合物。1H NMR(300MHz,CDCl

A-75.(7R)-2-氯-7-乙基-8-异丙基-5-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

以与中间体A-3相同的方式得到标题产物(7R)-2-氯-7-乙基-8-异丙基-5,7-二氢喋啶-6-酮(10.8g，77％)来制备化合物。1H NMR(300MHz,CDCl

A-76.(S)-2-氯-7-乙基-8-异丙基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

以与中间体A-4相同的方式得到标题产物来制备化合物。1H NMR(300MHz,CDCl

A.侧链胺中间体的制备

通过以下反应流程制备以下侧链胺。各流程遵循代表性程序。

流程A：

方法A：经由流程A合成(1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐(B-2)。

步骤1：1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯.

将氢化钠(60％油状分散液；(2.869g，71.7mmol))逐份添加至1H-吡唑-4-甲酸乙酯(6.7g，47.81mmol)于DMF(70mL)中的低温(0℃)溶液中。在0℃下搅拌混合物1小时，接着添加1-(溴甲基)-4-氟-苯(10.85g，57.38mmol)。使反应物升温至室温且搅拌18小时。将反应混合物倒入水中，且通过真空过滤收集所得沉淀物，用水洗涤并在50℃下真空干燥20小时，得到标题化合物，重8.3g(70％产率)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(d,J＝0.7Hz,1H),7.87(d,J＝0.7Hz,1H),7.34(dd,J＝8.6,5.6Hz,2H),7.18(t,J＝8.9Hz,2H),5.35(s,2H),4.20(q,J＝7.1Hz,2H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H)。

步骤2：(1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲醇.

将1-[(4-氟苯基)甲基]吡唑-4-甲酸乙酯(10g，40.28mmol)于THF(50mL)中的溶液逐滴添加至氢化锂铝(60mL，1M，60mmol)于THF中的冷却(0℃)溶液中。在0℃下搅拌1小时后，使反应物升温至室温，保持30分钟，随后用1N HCl淬灭直至获得澄清溶液为止。用乙酸乙酯(3×50ml)萃取澄清溶液。用水及盐水洗涤合并的萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发以得到粗产物，重7.5g(90％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.64(s,1H),7.49(s,1H),7.25(dd,J＝8.8,5.3Hz,2H),7.05(t,J＝8.8Hz,2H),5.28(s,2H),4.49(s,2H)；ESMS(M+11)＝207.0。

步骤3：4-(叠氮基甲基)-1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑.

将(1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲醇(8g，38.8mmol)及(叠氮基(苯氧基)磷酰基)羟苯(16.0g，12.5mL，58.2mmol)的混合物溶解于无水THF(100ml)中且在氮气下冷却至0℃。将DBU(8.7mL，58.2mmol)添加至反应物且在0℃搅拌2h，随后升温至室温，保持16小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物且用水(2×50mL)及5％HCl(10mL)洗涤。真空浓缩有机层且通过柱色谱、用10-35％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱来纯化以得到标题化合物，重7.2g(90％产率)；1H NMR(400MHz,CDCl

步骤4：(1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

将三苯基膦(13.6g，51.9mmol)及水(8ml)添加至4-(叠氮基甲基)-1-[(4-氟苯基)甲基]吡唑(8g，34.60mmol)于二氯甲烷(100mL)中的溶液中且在室温下搅拌16小时；将30mL1N HCl添加至反应混合物。分离有机层并将其丢弃。用二氯甲烷洗涤水层且分离。真空蒸发水层，得到白色固体。将产物的HCl盐溶解于甲醇中且通过二乙醚(甲醇体积的5倍)自溶液沉淀出来。通过真空过滤收集沉淀物且在50℃下真空干燥以得到所需产物，重6.4g(76％产率)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(brs,3H),7.88(s,1H),7.56(s,1H),7.32(dt,J＝8.0,3.3Hz,2H),7.18(td,J＝8.9,1.2Hz,2H),5.32(s,2H),3.87(q,J＝5.7Hz,2H)。流程B：

步骤1：((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将N-(1H-吡唑-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(6.07g，29.85mmol)溶解于60ml无水DMF(60ml)中，得到澄清浅色溶液。将溶液冷却至2℃，且将氢化钠(1.253g，31.34mmol)逐份添加至混合物并搅拌30min。经10分钟逐滴添加5-(溴甲基)-1,2,3-三氟-苯(7.540g，32.84mmol)。在2℃下搅拌反应物2小时，随后经2小时升温至室温。将反应物倒入180ml冷水中且用乙酸乙酯(2×200ml)萃取。用盐水洗涤合并的乙酸乙酯萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发以得到粗产物。通过柱色谱(SiO

步骤2：(1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(9.1g，26.66mmol)将溶解于二噁烷(64mL)中。将4N HCl(67ml，267mmol)溶液添加至该溶液且在55℃下加热3小时。形成白色沉淀物。真空蒸发大约2/3的二噁烷，接着添加二乙醚且搅拌30分钟。通过真空过滤收集白色沉淀物，且在50℃下真空干燥20小时，得到作为盐酸盐的7.4g产物。(100％产率)；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.27(s,3H),7.96(s,1H),7.62(s,1H),7.19(dd,J＝8.7,6.9Hz,2H),5.36(s,2H),3.88(q,J＝5.6Hz,2H)。

流程C：

步骤1：1-(2,3-二氢-1H-茚-2-基)-1H-吡唑-4-甲腈.

将(Z)-2-氰基-3,3-二乙氧基丙-1-烯-1-醇钠(298mg，1.54mmol)及(2,3-二氢-1H-茚-2-基)肼甲磺酸盐(343mg，1.40mmol)的混合物溶解于6ml乙醇中。将浓HCl(270μl，2.83mmol)添加至混合物且加热至80℃，保持2小时。去除1/2体积的溶剂，将水添加至混合物中，且收集并干燥所得固体，得到标题化合物，重246mg(87％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

步骤2：(1-(2,3-二氢-1H-茚-2-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

将1-(2,3-二氢-1H-茚-2-基)-1H-吡唑-4-甲腈(240mg，1.15mmol)溶解于甲醇(30ml)中。添加雷尼镍(40mg，0.68mmol)且在氢气(50psi)下氢化反应物3小时。过滤反应物且真空蒸发滤液，得到标题产物，237mg(97％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl

流程D：

方法D：(1-(3,4-二甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-3-基)甲胺盐酸盐。

步骤1：(E&Z)-2-(4-(二甲氨基)-2-氧代丁-3-烯-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮.

用微波在180℃下照射2-(2-氧代丙基)异吲哚啉-1,3-二酮(2.03g，10mmol)及1,1-二甲氧基-N,N-二甲基-甲胺(1.3ml，10mmol)的混合物20分钟。自乙醇再结晶所得固体以得到作为顺式异构体及反式异构体的混合物的标题产物2.34g(91％产率)。ESMS(M+1)＝259.10。

步骤2：2-((1-(3,4-二甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮.

将(E&Z)-2-(4-(二甲氨基)-2-氧代丁-3-烯-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮(1g)及(3,4-二甲氧基苯甲基)肼(1g)溶解于乙醇(10mL)及浓HCl(1ml)中且加热至回流，保持3小时。真空蒸发反应物且通过柱色谱(SiO

步骤3：(1-(3,4-二甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-3-基)甲胺盐酸盐.

使2-((1-(3,4-二甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.1g，2.92mmol)及甲胺(2M溶液于甲醇中；7.3ml，14.6mmol)于甲醇中的混合物回流2小时。真空移除溶剂。将化合物溶解于含2M HCl的甲醇中，且通过添加二乙醚进行沉淀以得到标题产物，重638mg(89％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.61(d,J＝2.0Hz,1H),6.91(d,J＝8.2Hz,1H),6.79(d,J＝2.1Hz,1H),6.72-6.64(m,1H),6.59-6.49(m,1H),5.40(s,2H),4.20(s,2H),3.80(s,3H),3.77(s,3H)。

B-1.(1-(4-氟-2-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.14(s,3H),7.76(s,1H),7.53(s,1H),7.05(dd,J＝8.3,6.9Hz,1H),6.96(dd,J＝11.3,2.4Hz,1H),6.74(td,J＝8.5,2.5Hz,1H),5.22(s,2H),3.86(dd,J＝10.1,4.3Hz,2H),3.84(d,J＝4.4Hz,3H)；ESMS(M+1)＝236.10。

B-2.(1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法A制备。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.20(s,3H),7.89(s,1H),7.57(s,1H),7.32(dd,J＝8.6,5.6Hz,2H),7.18(t,J＝8.9Hz,2H),5.32(s,2H),3.86(q,J＝5.8Hz,2H)；ESMS(M+1)＝206.36。

B-3.(1-(3-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.96(s,1H),7.73(s,1H),7.32(dt,1H),7.05(m,J＝3H),5.41(s,2H),4.06(s,2H)；ESMS(M+1)＝206.19。

B-4.(1-(1-(4-氟苯基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

通过方法A制备。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.17(s,3H),7.90(s,1H),7.58(s,1H),7.38-7.27(m,2H),7.16(td,J＝8.7,1.4Hz,2H),5.65(q,J＝7.1Hz,1H),3.86(q,J＝5.7Hz,2H),1.76(dd,J＝7.1,1.3Hz,3H)。

B-5.(1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝256.19

B-6.(1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝256.26

B-7.(1-(2-(三氟甲基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.90(s,1H),7.81-7.72(m,2H),7.64-7.45(m,2H),7.04(d,J＝7.6Hz,1H),5.62(s,2H),4.08(s,2H)；ESMS(M+1)＝256.17

B-8.4-((4-(氨基甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯甲腈盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.85(d,J＝0.8Hz,1H),7.67(d,J＝8.3Hz,2H),7.61(d,J＝0.8Hz,1H),7.39-7.28(m,2H),5.42(s,2H),4.01(s,2H)；ESMS(M+1)＝213.12

B-9.(1-(2-异丙基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝230.43

B-10.(1-(3-异丙基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝230.39

B-11.(1-(3,4-二氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝224.11

B-12.(1-(2,4-二氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝224.07

B-13.(1-(2-氯-4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.91(s,1H),7.71(s,1H),7.36-7.18(m,2H),7.17-7.04(m,1H),5.48(s,2H),4.06(s,2H)；ESMS(M+1)＝240.1

B-14.(1-(4-氟-2-甲基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.83(d,J＝14.2Hz,2H),7.15(dd,J＝8.5,5.8Hz,1H),7.05-6.86(m,2H),5.42(s,2H),4.06(s,2H),2.31(s,3H)；ESMS(M+1)＝220.2。

B-15.(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.88(s,1H),7.71(s,1H),7.55(dd,J＝9.0,2.7Hz,1H),7.36(td,J＝8.3,2.7Hz,1H),7.13(dd,J＝8.8,5.3Hz,1H),5.57(s,2H),4.07(s,2H)；ESMS(M+1)＝274.23。

B-16.(1-(4-氟-3-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.93(s,1H),7.71(s,1H),7.14-6.93(m,2H),6.84(ddd,J＝8.3,4.1,2.0Hz,1H),5.34(s,2H),4.05(s,2H),3.85(d,J＝1.2Hz,3H)；ESMS(M+1)＝236.09

B-17.(1-(3-氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝236.0

B-18. 2-((4-(氨基甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-5-氟苯甲腈盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝231.18

B-19.(1-(苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-基甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝232.18

B-20.(1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),8.33(s,3H),7.95(s,1H),7.61(s,1H),7.11-6.92(m,2H),5.31(s,2H),3.96(s,3H),3.78(m,2H)；ESMS(M+1)＝254.24。

B-21.(1-(2,4-二氟-3-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.60(s,1H),6.36(s,1H),5.78-5.62(m,2H),4.09(s,2H),2.76(s,2H),2.66(s,3H)；ESMS(M+1)＝254.15。

B-22.(1-(2,3,4-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.18(br.s,3H),7.92(s,1H),7.58(s,1H),7.41-7.26(m,1H),7.23-7.08(m,1H),5.43(s,2H),3.93(br.s,1H),3.87(q,J＝5.7Hz,2H)；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.66(s,1H),7.50(s,1H),7.15-6.94(m,2H),5.36(s,2H),3.69(s,2H)；ESMS(M+1)＝242.14。

B-23.(1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.22(s,3H),7.95(s,1H),7.61(s,1H),7.18(dd,J＝8.8,6.7Hz,2H),5.36(s,2H),3.88(q,J＝5.6Hz,2H)；ESMS(M+1)＝242.13。

B-24.(1-(2,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(s,3H),7.90(s,1H),7.65-7.58(m,1H),7.58(s,1H),7.37(ddd,J＝10.9,9.0,6.8Hz,1H),5.36(s,2H),3.88(q,J＝5.7Hz,2H)；ESMS(M+1)＝242.13。

B-25.(1-(4-氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝220.11

B-26.(1-(3,4-二氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝238.12

B-27.(1-(2,4-二氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝238.12

B-28.(1-(3,4,5-三氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝256.00。

B-29.(1-(2,4,6-三氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝256.00。

B-30.(1-(3,5-二氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝238.26。

B-31.(1-(4-乙氧基苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝246.18

B-32.(1-(3-(4-氟苯基)丙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝234.12。

B-33.(1-(2-(4-氟苯氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝236.14。

B-34.(1-((反式)-3-(4-氟苯基)环丁基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,CDCl

B-35.(1-(2-环己基乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.11(s,1H),7.96(s,1H),4.41-4.25(m,2H),4.11(s,2H),1.88-1.53(m,7H),1.25(dd,J＝15.2,8.2Hz,4H),1.01(t,J＝11.1Hz,2H)。

B-36.(1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.08(s,1H),7.93(s,1H),4.21(t,J＝6.8Hz,2H),3.92(s,2H),3.68(dd,J＝11.4,3.8Hz,3H),3.19-2.99(m,2H),1.65(q,J＝6.4Hz,2H),1.38(dd,J＝35.5,11.9Hz,4H),1.23-0.89(m,3H)。

B-37.(1-(2-(4,4-二氟环己基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.86(s,1H),7.69(s,1H),4.10(d,J＝7.2Hz,2H),4.05(s,2H),2.14-1.90(m,4H),1.89-1.71(m,1H),1.65(dd,J＝14.0,3.6Hz,2H),1.43-1.22(m,2H)。

B-38.(1-(环丁基甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝166.14。

B-39.(1-((3,3-二氟环丁基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.12(br s,3H),7.83(s,1H),7.55(d,J＝0.8Hz,1H),4.24(d,J＝6.3Hz,2H),3.87(q,J＝5.8Hz,2H),2.65-2.35(m,5H)；ESMS(M+1)＝202.10。B-40.(1-(2-环戊基乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝194.18。

B-41.(1-(2-环丙基乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝166.14B-42.(S)-(1-(2-甲基丁基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.02(s,1H),7.89(s,1H),4.12(dd,J＝13.9,6.7Hz,1H),4.01(d,J＝2.2Hz,2H),4.00-3.92(m,1H),1.98-1.76(m,1H),1.38-1.18(m,1H),1.18-0.95(m,1H),0.83(t,J＝7.4Hz,3H),0.77(d,J＝6.7Hz,3H)；ESMS(M+1)＝168.07。

B-43.(1-(双环[2.2.1]庚-2-基甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝206.25。

B-44.(1-(2,3-二氢-1H-茚-2-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法C制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35(s,1H),7.17(dd,J＝11.4,7.2Hz,5H),5.17-4.96(m,1H),3.75(s,1H),3.40(dd,J＝16.1,7.6Hz,2H),3.31-3.09(m,2H)；ESMS(M+1)＝214.22

B-45. 2-(4-(氨基甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-(4-氟苯基)乙-1-酮盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝234.07

B-46.(1-(6-氟-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝232.13

B-47.(1-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法C制备。ESMS(M+1)＝242.36。

B-48.(1-(2,4-二氟苯基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法C制备。ESMS(M+1)＝210.36

B-49.(1-(3,4-二甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法D制备。

B-50.(1-(2-(4-氟苯基)-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

通过方法A制备。40％产率。ESMS(M+1)＝248.16。

B-51.(1-(3-(4-氟苯基)环戊基)-1H-吡唑-4-基)甲胺的制备.

步骤1：3-(4-氟苯基)环戊-1-酮.

用氮气冲洗装有[Rh(cod)Cl]

1小时后，将反应物冷却至室温。将用乙酸乙酯(2×)萃取水性混合物，且再次用二氯甲烷(2×)萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，经由短硅胶塞(-8公克)过滤且浓缩以得到所需产物，重2.09g，96％产率。1H NMR(400MHz,CDCl

步骤2：3-(4-氟苯基)环戊-1-醇.

在0℃下将硼氢化钠(424.5mg，11.2mmol)添加至3-(4-氟苯基)环戊-1-酮(2.0g，11.22mmol)于无水甲醇(40.00mL)中的溶液中。将溶液保持在0℃下2小时。3小时后，真空蒸发混合物，且将粗物质分配于二氯甲烷与2N HCl之间。用二氯甲烷萃取水层，且合并的有机萃取物经Na

步骤3：1-(3-(4-氟苯基)环戊基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯.

经由3A分子筛将3-(4-氟苯基)环戊醇(1.87g，10.38mmol)及1H-吡唑-4-甲酸乙酯(1.631g，11.64mmol)于THF(46mL)中的搅拌溶液干燥约3小时以移除微量的水。将溶液转移至装有三苯基膦(4.03g，15.4mmol)的干燥小瓶，且在室温下搅拌溶液。

经20分钟逐滴添加偶氮二甲酸二乙酯(6.4mL，40w/v％，14.7mmol)。在室温下搅拌黄色溶液30分钟，随后加热至60℃，保持2小时。使反应物冷却至室温且搅拌隔夜。真空蒸发反应物。通过快速色谱(SiO

步骤4：(1-(3-(4-氟苯基)环戊基)-1H-吡唑-4-基)甲醇.

将氢化锂铝(14.00mL，14.00mmol)的1M溶液逐滴添加至1-(3-(4-氟苯基)环戊基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(2.09g，6.9mmol)于THF(27mL)中的冷却(0℃)溶液中。添加后，使混合物缓慢升温至室温。6小时后，通过添加水(0.5mL)、15％NaOH(0.5mL)及水(0.5mL)淬灭反应物。将二乙醚添加至反应物，且搅拌混合物约30分钟。经由硅柱过滤混合物以移除铝盐。真空蒸发滤液以得到呈无色粘稠油状物的产物(1.72g)。1H NMR(400MHz,CDCl

步骤5：4-(叠氮基甲基)-1-(3-(4-氟苯基)环戊基)-1H-吡唑.

向(1-(3-(4-氟苯基)环戊基)-1H-吡唑-4-基)甲醇(1.72g，6.608mmol)于无水THF(35mL)中的冷却(0℃)溶液添加DBU(1.257g，1.235mL，8.260mmol)，接着逐滴添加DPPA(2.18g，1.7mL，7.93mmol)。将混合物保持在0℃下2小时且升温至室温隔夜。

将反应物分配于二氯甲烷与饱和碳酸氢钠之间。用二氯甲烷萃取水层。合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤，且真空浓缩。通过快速色谱(SiO

步骤6：(1-(3-(4-氟苯基)环戊基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

在室温下经5分钟将4-(叠氮基甲基)-1-(3-(4-氟苯基)环戊基)吡唑(1.44g，5.047mmol)于无水四氢呋喃(7mL)中的溶液逐滴添加至氢化锂铝(10.17mL，1M，10.17mmol)于四氢呋喃中的溶液中(反应物在添加期间变为黄色)。

3小时后，通过添加0.1mL水、0.1mL 15％NaOH及0.3mL水淬灭反应物。用二乙醚(15mL)稀释混合物且在室温下搅拌。过滤反应物以移除铝盐，且用若干份二乙醚冲洗。真空蒸发滤液以得到所需产物，重586mg。1H NMR确认产物为非对映异构体的混合物。1H NMR(300MHz,CDCl

B-52.(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B以2个步骤制备

步骤1：((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将N-(1H-吡唑-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(18.9g，95.83mmol)及5-(氯甲基)-2-(三氟甲基)吡啶(19.67g，100.6mmol)溶解于190ml DMF中且冷却至0℃。将氢化钠(60％w/w油状分散液；4.22g，105.4mmol)逐份添加至混合物，将温度保持于10℃以下。搅拌混合物隔夜，使温度升温至室温。将水(1L)添加至反应混合物且形成白色沉淀物。搅拌混合物30min，随后过滤，且用水及庚烷洗涤滤饼并在50℃下真空干燥18小时，以得到标题化合物，重33.5g(98％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

步骤2：(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

将((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(33.5g，94mmol)溶解于200ml二噁烷中，且将含4M HCl的二噁烷(235ml)添加至溶液。在室温下搅拌溶液3小时，接着在50℃下加热2小时。真空蒸发二噁烷，得到粘稠胶状物。将二氯甲烷(300ml)添加至胶状物，且在室温下搅拌30min，引起固体形成。通过真空过滤收集固体，用二氯甲烷洗涤，且在50℃下真空干燥18小时，得到标题产物，重31.2g(90.8％产率)。

B-53.(1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.16(d,J＝2.4Hz,1H),7.96-7.82(m,2H),7.65(s,1H),7.08(dd,J＝8.5,2.6Hz,1H),5.42(s,2H),4.05(s,2H)。

B-54.(1-((6-氟-4-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.97(bs,4H),7.83(d,J＝0.8Hz,1H),7.55(d,J＝0.8Hz,1H),7.11-7.04(m,1H),5.39(s,2H),3.90(q,J＝5.7Hz,2H),2.34(d,J＝0.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝221.18。

B-55.(1-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝203.25。

B-56. 5-((4-(氨基甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)2-氰基吡啶盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.63(dd,J＝2.1,0.9Hz,1H),8.05(dd,J＝8.0,0.9Hz,1H),8.00(br,3H),7.96(d,J＝0.8Hz,1H),7.85(dd,J＝8.0,2.2Hz,1H),7.59(d,J＝0.8Hz,1H),5.54(s,2H),3.91(q,J＝5.7Hz,2H)。ESMS(M+1)＝214.16。B-57.(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲烷-d2-胺.

步骤1. 1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-甲腈.

将4-氰基吡唑(570mg，6.123mmol)及5-(氯甲基)-2-三氟甲基吡啶(1.257g，6.429mmol)溶解于DMF(10mL)中。搅拌混合物直至反应物溶解为止。将溶液冷却至0℃，接着逐份添加氢化钠(270mg，6.7mmol)。在室温下搅拌溶液2小时。用饱和NH

步骤2.(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲烷-d2-胺.

将1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-甲腈(261.1mg，1.031mmol)、六水合二氯化钴(54mg，0.2270mmol)及二碳酸二叔丁酯(270.0mg，1.24mmol)溶解于三氘甲醇(10ml)中且冷却至0℃。将硼氘化钠(130mg，3.1mmol)逐份添加至溶液。反应物变黑，搅拌2小时。真空蒸发溶剂，得到黑色残余物。向残余物添加二氯甲烷(10ml)及水(5ml)。收集有机层且过滤以移除固态悬浮物。用盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤，且真空蒸发以得到呈白色固体的所需产物(255mg，69％产率)，其不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz,CDCl

B-58.(1-((2-氟吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝207.15。

B-59.(1-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝257.17。

B-60.(1-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝257.12。

B-61.(1-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR-1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.00(t,J＝7.9Hz,1H),7.94(s,1H),7.74(d,J＝7.8Hz,1H),7.65(s,1H),7.39(d,J＝7.9Hz,1H),5.54(s,2H),4.06(s,2H)。ESMS(M+1)＝257.12。

B-62.(1-((3-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR-1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.91(s,1H),8.70(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(s,1H),7.72(s,1H),6.81(d,J＝5.1Hz,1H),5.67(s,2H),4.09(s,2H)。ESMS(M+1)＝257.21。

B-63.(1-((2-甲基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝271.22。

B-64.(1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.18-8.00(m,1H),7.83(d,J＝2.3Hz,1H),7.61(q,J＝4.7,2.9Hz,2H),6.84-6.66(m,1H),5.30(d,J＝2.7Hz,2H),4.13-3.96(m,2H),3.89(d,J＝2.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝219.25。

B-65.(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

通过方法C制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.60(s,1H),7.50(s,1H),4.45-4.30(m,1H),4.10(d,J＝12Hz,2H),3.80(s,2H),3.65-3.50(m,2H),2.10-1.90(m,4H)。ESMS(M+1)＝182.61。B-66.(1-((5-甲基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.42(d,J＝2.0Hz,1H),8.01-7.91(m,4H),7.82-7.74(m,1H),7.58(d,J＝0.8Hz,1H),5.48(s,2H),3.91(q,J＝5.6Hz,2H),2.89(s,3H)。ESMS(M+1)＝271.18。

B-67.(1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.37(d,J＝3.1Hz,1H),8.02(s,1H),7.90-7.77(m,1H),7.77-7.64(m,1H),7.52(dt,J＝8.4,2.2Hz,1H),5.48(t,J＝3.2Hz,2H),4.07(d,J＝3.3Hz,2H)。ESMS(M+1)＝223.16。

B-68.(1-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.83(s,1H),8.10(dd,J＝8.2,2.3Hz,1H),7.94(s,1H),7.65(s,1H),7.35(d,J＝8.3Hz,1H),5.56(s,2H),4.06(s,2H)。ESMS(M+1)＝257.21。

B-69.(1-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR-1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.77(d,J＝5.1Hz,1H),7.94(s,1H),7.66(s,1H),7.63(d,J＝5.1Hz,1H),7.46(s,1H),5.57(s,2H),4.06(s,2H)。ESMS(M+1)＝257.21.B-70.(1-((5-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.95(s,1H),8.80(d,J＝2.5Hz,1H),8.18(s,1H),7.98(s,1H),7.68(d,J＝2.0Hz,1H),5.57(s,2H),4.06(s,2H)。ESMS(M+1)＝257.13。

B-71.(1-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.88-3.92(m,2H),5.57(s,2H),3.90(s,2H),7.43(d,J＝4.4Hz,1H),7.68(s,1H),7.72(s,1H),8.04(s,1H),8.39(bs,3H),8.74(d,J＝4.8Hz,1H)。ESMS(M+1)＝256.92。

B-72.(1-((4-甲氧基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.21(s,1H),7.89(s,1H),7.63(s,1H),7.51(s,1H),5.44(s,2H),5.44(s,2H),4.04(s,5H)。ESMS(M+1)＝287.45。

B-73.(1-((6-(叔丁基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.53-8.45(m,1H),7.95(br,3H),7.90(d,J＝0.8Hz,1H),7.77-7.63(m,1H),7.55(d,J＝0.8Hz,1H),7.50(dd,J＝8.3,0.9Hz,1H),5.38(s,2H),3.90(q,J＝5.7Hz,2H),1.30(s,9H)。ESMS(M+1)＝245.24。B-74.(1-((5-氟-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝275.19。

B-75.(1-((2-甲氧基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.91(s,1H),7.67(s,1H),7.53(d,J＝7.4Hz,1H),7.35(d,J＝7.6Hz,1H),5.42(s,2H),4.20-3.81(m,5H)。ESMS(M+1)＝287.36。

B-76.(1-((6-甲氧基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.34(s,1H),7.92(s,1H),7.87(d,J＝2.6Hz,1H),7.62(d,J＝2.7Hz,1H),5.36(d,J＝2.7Hz,2H),4.13-3.80(m,5H)。ESMS(M+1)＝287.21。

B-77.(1-((5-甲氧基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.10(s,1H),7.99(s,1H),7.72(d,J＝11.2Hz,2H),5.65-5.43(m,2H),4.12(s,2H),4.02(d,J＝1.6Hz,2H)。ESMS(M+1)＝287.11。

B-78.(1-((5-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝207.13。

B-79.(1-((6-氟-4-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.87(s,1H),7.78-7.72(m,1H),7.63-7.53(m,1H),6.93(d,J＝1.4Hz,1H),5.38(s,2H),3.99(s,2H),2.32(d,J＝0.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝221.18

B-80.(1-(2,4,6-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.83(s,1H),7.56(d,J＝0.7Hz,1H),6.95(dd,J＝9.0,7.7Hz,2H),5.40(d,J＝1.2Hz,2H),4.01(s,2H)；ESMS(M+1)＝242.13。

B-81.(1-((2-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

步骤1：(2-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲醇

将(2-溴-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲醇(3.06g，11.95mmol)、2-异丙烯基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(3.4mL)及NaHCO

步骤2：3-(氯甲基)-2-异丙烯基-6-(三氟甲基)吡啶

将亚硫酰氯(1.5ml，20.6mmol)添加至(2-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲醇(2.2g，10.13mmol)于二氯甲烷(18mL)中的溶液中且在室温下搅拌3h。真空蒸发反应物，得到黄色油状物。将油状物溶解于80ml二氯甲烷中且用40ml饱和碳酸氢钠洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，且真空蒸发，得到呈淡黄色油状物的标题产物(2.3g，96％产率)，其直接用于步骤3中。1H NMR(300MHz,CDCl

步骤3：((1-((2-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将((1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.85g，9.380mmol)及3-(氯甲基)-2-异丙烯基-6-(三氟甲基)吡啶(2.30g，9.761mmol)溶解于无水DMF(20mL)中且冷却至0℃。将氢化钠(434mg，10.85mmol)逐份添加至混合物且在室温下搅拌隔夜。通过添加水(80mL)淬灭反应物，且迅速形成油状物。用乙酸乙酯(2×50ml)萃取混合物。合并有机萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

步骤4：(1-((2-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

将((1-((2-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(2g，5.04mmol)溶解于二氯甲烷(20ml)及TFA(4ml，3.9mmol)中且在室温下搅拌4小时。真空移除溶剂，且用乙烷洗涤残余物，过滤并干燥，得到标题产物(1.4g，90％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.17(br,3H),7.92(s,1H),7.80(d,J＝8.1Hz,1H),7.61(s,1H),7.57(d,J＝8.1Hz,1H),5.55(s,2H),5.54(s,1H),5.19(s,1H),3.90(q,J＝5.7Hz,2H),2.09(s,3H)。ESI-MS m/z计算值296.12488，实验值297.2(M+1)

B-82.(3,5-二甲基-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝285.21。

B-83.(1-((6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.17(d,J＝2.4Hz,1H),7.93(t,J＝6.3Hz,3H),7.88(s,1H),7.72(dd,J＝8.5,2.4Hz,1H),7.54(s,1H),6.99(d,J＝8.5Hz,1H),5.33(s,2H),4.98(q,J＝9.1Hz,2H),3.89(q,J＝5.7Hz,2H)；ESMS(M+1)＝287.24B-84.(1-((6-氟-5-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.92(d,J＝2.4Hz,1H),7.77-7.60(m,2H),7.62-7.49(m,1H),5.42(d,J＝2.4Hz,2H),4.09(s,2H),3.94(t,J＝2.4Hz,3H)。ESMS(M+1)＝237.50。

B-85.(1-((3,5-二甲基异噁唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.79(s,1H),7.59(s,1H),5.17(s,2H),4.02(s,2H),3.66(s,1H),2.42(s,3H),2.16(s,3H)；

B-86.(1-((1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.99(s,1H),7.87(s,1H),7.61(s,1H),5.28(s,2H),4.03(s,2H),3.98(s,3H),2.34(s,3H)。

B-87.(1-((3-乙基-5-甲基异噁唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(300MHz,CDCl

B-88.(1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.76(s,1H),7.73(s,1H),7.61(s,1H),5.31(s,2H),4.02(s,2H),3.92(s,3H)。ESMS(M+1)＝261.07。

B-89.(1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.87(s,1H),7.63(s,1H),6.56(s,1H),5.52(s,2H),4.04(s,2H),3.92(s,3H)；ESMS(M+1)＝261.15。

B-90.(1-((1-乙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.84(s,1H),7.61(s,1H),6.63(s,1H),5.35(s,2H),4.26(q,J＝7.2Hz,2H),4.03(s,2H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H)。

B-91.(1-((1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.87(s,1H),7.64(s,1H),6.67(s,1H),5.35(s,2H),4.04(s,2H),3.95(d,J＝0.6Hz,3H)。

B-92.(1-((1-乙基-1H-咪唑-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.10(s,1H),7.72(d,J＝2.1Hz,1H),7.67(s,1H),7.61(d,J＝2.1Hz,1H),5.83(s,2H),4.33(q,J＝7.3Hz,2H),4.07(s,2H),1.39(t,J＝7.3Hz,3H)；ESMS(M+1)＝206.14。

B-93.(1-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.90(s,1H),7.64(s,1H),6.95(dd,J＝3.4,1.1Hz,1H),6.66-6.54(m,1H),5.44(s,2H),4.04(s,2H)。ESMS(M+1)＝246.04。

B-94.(1-((2,5-二甲基噁唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.89(s,1H),7.65(s,1H),5.29(s,2H),4.04(s,2H),2.53(s,3H),2.39(s,3H)。B-95(1-(2-苯基丙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法A制备。ESMS(M+1)＝216.20。

B-96.(1-(2-(4-氟苯基)丙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法A制备。ESMS(M+1)＝233.13。

B-97.(1-(1-苯基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法A制备。ESMS(M+1)＝216.24。

流程E

B-98.(1-(4-氟苯甲基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐及(1-(4-氟苯甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

步骤1：1-(4-氟苯甲基)-3-甲基-1H-吡唑-4-甲腈及1-(4-氟苯甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲腈

将3-氰基-2-甲基吡唑及1-(溴甲基)-4-氟苯(964.0mg，5.100mmol)溶解于DMF(5ml)中且冷却至0℃。将氢化钠(240.0mg，6.000mmol)逐份添加至反应物。使反应升温至室温且搅拌12小时。(通过LC/MS观测到两种位置异构体)。用饱和NH

将来自步骤1的位置异构体(1-(4-氟苯甲基)-3-甲基-1H-吡唑-4-甲腈及1-(4-氟苯甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲腈的混合物(430.5mg，2.000mmol)、Boc

顶部斑点(比率1:1.3):1H NMR(400MHz,CDCl

底部斑点(比率1:3):NMR(400MHz,CDCl

步骤3：(1-(4-氟苯甲基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐及(1-(4-氟苯甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

将来自步骤2的位置异构体的混合物(1g，3.26mmol)溶解于1,4-二噁烷(2mL)中。将4M HCl(4mL，16mmol)于二噁烷中的溶液添加至溶液且在室温下搅拌3小时。将二乙醚(10mL)添加至溶液且形成黄色沉淀物。收集此沉淀物且干燥以得到不可分离的位置异构体的混合物。

B-99. 1-(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)乙-1-胺.

步骤1. 1-(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)乙-1-酮.

将氢化钠(60％油状分散液；800mg，20mmol)添加至1-(1H-吡唑-4-基)乙酮(2g，18.2mmol)于DMF(20ml)中的冷却(0℃)溶液中且在0℃下搅拌1小时。将5-(氯甲基)-2-(三氟甲基)吡啶(3.91g，20mmol)添加至反应物且使其升温至室温隔夜。将反应混合物倒入冰水中且用乙酸乙酯(3×75ml)萃取。合并的有机萃取物经硫酸镁干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤2. 1-(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)乙-1-醇.

将硼氢化钠(565mg，14.9mmol)添加至1-(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)乙-1-酮(4g，14.86mmol)于甲醇(100ml)中的溶液中且在室温下搅拌30分钟。通过添加水及1N HCl淬灭反应物。真空蒸发有机物，将水(50ml)添加至溶液且用乙酸乙酯(3×75ml)萃取。合并的有机萃取物经硫酸镁干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物，其通过柱色谱(SiO

步骤3. 5-((4-(1-叠氮基乙基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)吡啶.

在氮气下将1-(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)乙-1-醇(3.9g，14.4mmol)及二苯基磷酰基叠氮化物(5.94g，4.65mmol)的混合物溶解于无水THF(55ml)且冷却至0℃。将DBU(3.2ml，21.6mmol)添加至混合物且在0℃下搅拌2小时，随后升温至室温，保持20小时。用乙酸乙酯(200ml)稀释反应物，且用水(2×50ml)及5％HCl(10ml)洗涤。有机层经硫酸镁干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤4. 1-(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)乙-1-胺盐酸盐.

向5-[[4-(1-叠氮基乙基)吡唑-1-基]甲基]-2-(三氟甲基)吡啶(2.2g，7.426mmol)于二氯甲烷(20mL)中的溶液中添加三苯基膦(2.9g，11.14mmol)及水(7mL)，且在室温下搅拌混合物隔夜。反应不完全，因此在50℃下加热5小时。用二氯甲烷稀释混合物且用1N HCl(50ml)洗涤。收集水层且用二氯甲烷洗涤。冷冻且冻干水层以得到标题产物，重1.7g(66.7％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.66(s,1H),8.30(s,3H),8.02(s,1H),7.92(s,2H),7.65(s,1H),5.53(s,2H),4.58-4.24(m,1H),1.49(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝271.18。

流程F

用于合成表1中的中间体(如在流程F中所制备)的通用程序.

B-101.反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁-1-胺盐酸盐.

步骤1：反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

将顺式-N-(3-羟基环丁基)氨基甲酸叔丁酯(8.06g，43mmol)及三苯基膦(12.42g，11mL，47.4mmol)溶解于THF(120mL)中且冷却至0℃。将偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)(20.62g，21.6mL，40％w/w，47.4mmol)添加至溶液，接着添加3,4,5-三氟酚(7.01g，47.4mmol)。在室温下搅拌反应物1小时，随后在50℃下加热1h。移除溶剂且将反应物溶解于100ml二氯甲烷中并用2N氢氧化钠洗涤两次。蒸发有机层，且通过柱色谱(SiO

步骤2：反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁-1-胺盐酸盐.

将反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(12.18g，38.39mmol)溶解于50ml甲醇及75ml 2M HCl于二乙醚中的溶液中。在50℃下加热溶液40min。真空蒸发溶剂且用己烷湿磨残余物，得到呈白色固体的产物，重9.6g(99％产率)。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.72-6.53(m,2H),4.97-4.89(m,1H),4.06-3.88(m,1H),2.77-2.49(m,4H)。ESMS(M+1)＝218.17。

表1中的所有化合物系经由上文关于B-101所描述的相同反应程序制备：

表1.

流程G

用于合成表2中的中间体的通用程序(流程G).

以2个步骤如下制备化合物：(1)使反式-N-(3-羟基环丁基)氨基甲酸叔丁酯与苯硫醇、酚或吡唑衍生物反应，接着(2)使用关于流程F描述的程序去除保护基以得到中间体(参见关于B-101的程序)。

表2.

以2个步骤如下制备以下表3中的中间体：(1)使顺式-(N-(3-(羟甲基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯与酚、硫酚或吡唑衍生物反应，接着(2)该关于中间体B-101描述的程序去除保护基以得到所需中间体。

表3

流程H

B-141.反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊-1-胺.

步骤1：((反式)-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊基)氨基甲酸叔丁酯.

将(顺式-3-羟基环戊基)氨基甲酸叔丁酯(63.5g，315.5mmol)、三苯基膦(107.6g，410.2mmol)及3,4,5-三氟酚(60.74g，410.2mmol)于THF(750mL)中的混合物冷却至0℃。逐滴添加偶氮二甲酸二异丙酯(82mL，410.2mmol)，将反应温度维持在10℃以下。使反应物缓慢升温至室温且搅拌隔夜。真空蒸发溶剂，将残余物溶解于2L二氯甲烷中且用1N NaOH(2×1L)洗涤；有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。将残余物溶解于二氯甲烷中且经由1.5L硅胶塞洗脱。真空蒸发滤液且用二氯甲烷洗脱经由1L硅胶塞纯化。浓缩前2L滤液以得到呈白色固体的产物(90g，86％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

步骤2：反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊-1-胺盐酸盐.

将HCl于二噁烷中的4M溶液(100ml，400mmol)添加至((反式)-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊基)氨基甲酸叔丁酯(13.5g，40.7mmol)于二噁烷(80ml)中的溶液中。在室温下搅拌反应物18小时。将二乙醚添加至残余物且在室温下搅拌。通过真空过滤收集白色固体，用二乙醚洗涤，且在烘箱中干燥以得到标题产物，10.3g(95％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.27(s,3H),7.08-6.83(m,2H),5.06-4.86(m,1H),3.74-3.58(m,1H),2.35-1.90(m,4H),1.85-1.53(m,2H)。

B-142.反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环戊-1-胺

以与中间体B-141相同的方式得到呈反式异构体的非对映异构对形式的标题化合物来制备化合物。ESMS(M+1)＝247.13。

B-143.顺式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊-1-胺盐酸盐

以与关于中间体B-142报导的程序相同的方式得到呈顺式非对映异构体的混合物形式的标题化合物(82％产率)来制备化合物。1H NMR(300MHz,CDCl

B-144.(6-((4-氟苯甲基)氧基)吡啶-3-基)甲胺盐酸盐.

步骤1：6-((4-氟苯甲基)氧基)烟碱腈.

将氢化钠(60％油状分散液；640mg，16mmol)添加至(4-氟苯基)甲醇(1.9g，15mmol)于DMF(20ml)中的冷却溶液(0℃)中。搅拌30分钟后，添加6-氯烟腈(2.6g，19mmol)至混合物，且将反应物升温至室温并搅拌14小时。将混合物倒入饱和氯化铵溶液中且形成灰色沉淀物。通过真空过滤收集沉淀物并用水充分洗涤。在真空烘箱中在50℃下干燥收集的滤饼16小时以得到标题产物，重1.6g。1H NMR(400MHz,CDCl

步骤2：((6-((4-氟苯甲基)氧基)吡啶-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将6-((4-氟苯甲基)氧基)烟碱腈(1.23g，5.23mmol)、Boc

步骤3：(6-((4-氟苯甲基)氧基)吡啶-3-基)甲胺盐酸盐.

将((6-((4-氟苯甲基)氧基)吡啶-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.6g，4.81mmol)溶解于10ml二噁烷中。将HCl于二噁烷中的4M溶液(6ml，24mmol)添加至溶液中，且在室温下搅拌1小时(添加后10分钟形成沉淀物)。蒸发溶剂以得到残余物，用二乙醚湿磨该残余物且搅拌1小时，产生白色沉淀物。通过真空过滤收集固体，用二乙醚洗涤，且真空干燥以得到标题产物，重1.28g(定量产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.33(d,J＝24.6Hz,1H),8.09(s,1H),7.59-7.40(m,2H),7.20(d,J＝8.5Hz,1H),7.16-6.98(m,2H),5.42(d,J＝15.3Hz,2H),4.15(d,J＝16.2Hz,2H)；ESMS(M+1)＝233.03。

流程I

B-145.(6-((1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-3-基)甲胺

步骤1：1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-醇.

将硼氢化钠(535mg，14.1mmol)添加至1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-酮(1.94g，10.83mmol)于MeOH(12mL)中的冷却溶液(0℃)中且搅拌3小时。升温至室温后，通过添加水及饱和碳酸氢钠来淬灭反应物，接着用乙酸乙酯(3×75ml)萃取。用盐水洗涤合并的有机萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。用二乙醚湿磨所得残余物，获得呈固体的产物，重1.86g(81％产率)。ESMS(M+1)＝181.92。

步骤2：6-((1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)氧基)烟碱腈.

将氢化钠(97mg，2.21mmol)添加至1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-醇(400mg，2.43mmol)于DMF(4ml)中的溶液中且在室温下搅拌。将6-氟烟腈(295mg，2.43mmol)添加至反应物且在室温下搅拌隔夜。将水(75ml)添加至反应物且用乙酸乙酯(3×75ml)萃取。用盐水洗涤合并的萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤3：(6-((1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-3-基)甲胺.

将6-((1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)氧基)烟碱腈(410mg，1.45mmol)及镍的混合物溶解于含7N氨的甲醇(20ml)中且在3巴下氢化隔夜。过滤反应物且真空蒸发，得到标题产物，405mg(82.8％产率)；ESMS(M+1)＝285.16。

B-146.(6-(4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺

步骤1：6-(4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)烟碱腈.

将氢化钠(310mg，7.77mmol)添加至4-(三氟甲基)-1H-吡唑(877mg，6.45mmol)于无水DMF(5mL)中的溶液中。10分钟后，将4-(三氟甲基)-1H-吡唑(877mg，6.45mmol)添加至混合物且加热至80℃，保持1小时。将反应物冷却至室温且倒入水(125ml)中，使得形成沉淀物。过滤沉淀物，用水洗涤，且真空干燥以得到标题产物，重1.44g(88％产率)。ESMS(M+1)＝239.3。

步骤2：(6-(4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺.

在3巴下将6-(4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)烟碱腈(1.26g，5.27mmol)及镍(约300mg)于含7N氨的甲醇(25ml)中的混合物氢化隔夜。过滤混合物且浓缩滤液，得到标题产物，重1.26g(83％产率)。产物不经进一步纯化即使用。ESMS(M+1)＝243.35。

流程J

B-147.(6-((1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-3-基)甲胺

步骤1：1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-醇.

将硼氢化钠(535mg，14.1mmol)添加至1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-酮(1.94g，10.83mmol)于MeOH(12mL)中的冷却溶液(0℃)中且搅拌3小时。升温至室温后，通过添加水及饱和碳酸氢钠来淬灭反应物，且用乙酸乙酯(3×75ml)萃取。合并有机萃取物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。用二乙醚湿磨残余物，获得呈固体的产物，重1.86g(81％产率)。ESMS(M+1)＝181.92。

步骤2：6-((1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)氧基)烟碱腈.

将氢化钠(97mg，2.21mmol)添加至1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-醇(400mg，2.43mmol)于DMF(4ml)中的溶液中且在室温下搅拌。将6-氟烟腈(295mg，2.43mmol)添加至反应物且在室温下搅拌隔夜。将水(75ml)添加至反应物，接着用乙酸乙酯(3×75ml)萃取。用盐水洗涤合并的萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤3：(6-((1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-3-基)甲胺.

将6-((1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)氧基)烟碱腈(410mg，1.45mmol)及镍的混合物溶解于含7N氨的甲醇(20ml)中且在3巴下氢化隔夜。过滤反应物且真空蒸发，得到标题产物，405mg(82.8％产率)；ESMS(M+1)＝285.16。

B-148.(6-(4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺

步骤1. 6-(4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)烟碱腈.

将氢化钠(310mg，7.8mmol)添加至4-(三氟甲基)-1H-吡唑(877mg，6.45mmol)于DMF(5mL)中的溶液中且在室温下搅拌10分钟。将6-氟吡啶-3-甲腈(730mg，6mmol)添加至混合物，随后处于80℃下1小时。将反应物冷却至室温，随后倒入水(125ml)中。通过真空过滤收集沉淀物，用水充分洗涤，得到标题产物，重1.4g。ESMS(M+1)＝239.3.

步骤2.(6-(4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺.

将大约300mg镍(用甲醇洗涤)添加至6-(4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)烟碱腈于25ml含7N NH3的甲醇中的溶液中。且氢化(3巴)隔夜。反应经由硅藻土过滤且真空浓缩，得到标题产物。ESMS(M+1)＝243.35。

B-149. 5-(氨基甲基)-N-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺.

步骤1. 6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)氨基)烟碱腈.

将6-氟吡啶-3-甲腈(680mg，5.569mmol)、1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-胺(895mg，5.420mmol)及碳酸钾(1.74g，12.6mmol)溶解于10ml DMF中，且在160℃下微波处理30分钟。将反应物倒入水中且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机萃取物用水(2×20mL)及盐水(1×20mL)洗涤，且经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以得到标题产物，重1.4g；ESMS(M+1)＝268.01。

步骤2. 5-(氨基甲基)-N-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺.

向经甲醇洗涤的镍(约0.3g)于甲醇(50mL)中的混合物中添加6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)氨基)烟碱腈(1,600mg，5.988mmol)及含7N NH3的甲醇(20ml)。在3巴下将混合物氢化18小时。以磁性方式收回镍，且反应物经由硅藻土过滤。真空蒸发滤液，得到不经进一步纯化即使用的标题产物，重1.2g；ESMS(M+1)＝272.15。

B-150.(1-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

通过方法A制备。ESMS(M+1)＝271.13。

B-151.(1-((5-氟嘧啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.70(d,J＝0.8Hz,2H),8.08-8.03(m,1H),7.78-7.73(m,1H),5.65(d,J＝1.1Hz,2H),4.10(s,2H)。ESMS(M+1)＝208.18。

B-152.(1-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

通过方法B制备。ESMS(M+1)＝208.18。

B-153.(1-(5-甲基-2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.步骤A：((1-(5-甲基-2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将((1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(320mg，1.62mmol)及5-(氯甲基)-2-(三氟甲基)嘧啶(318mg，1.62mmol)溶解于6ml无水DMF中且冷却至0℃。将氢化钠(60％w/w油状分散液；85mg，2.12mmol)添加至溶液。将反应物升温至室温且搅拌16小时。将水添加至反应物且形成沉淀物。通过真空过滤收集沉淀物并用水充分洗涤。通过柱色谱(SiO

步骤B：(1-(5-甲基-2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

将((1-(5-甲基-2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(142mg，0.397mmol)溶解于5ml含4M HCl的二噁烷(20mmol)中且在室温下搅拌2小时。通过真空过滤收集所得沉淀物，用乙醚充分洗涤，且真空干燥以得到标题产物，重130mg(99％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)d 8.91(s,1H),8.87(s,1H),7.98(s,1H),4.17(s,2H),2.77(s,3H)。

B-154.N-甲基-1-(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸盐.

步骤1：((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁基甲酯.

将氢化钠(60％w/w油状分散液；675mg，16.84mmol)添加至((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(4g，11.23mmol)于DMF(100ml)中的冷却(0℃)溶液中且在氮气下搅拌30分钟。将碘甲烷(0.91ml，14.6mmol)添加至混合物。将反应物升温至室温且搅拌2小时。将溶液倒入至冰水(100ml)中且用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。合并的萃取物用饱和碳酸氢钠及盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

步骤2：N-甲基-1-(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸盐.

将三氟乙酸(4.2ml，54mmol)添加至((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁基甲酯(2g，5.4mmol)于15ml二氯甲烷中的溶液中，且在室温下搅拌2小时。真空移除溶剂，得到残余物，在50℃下将残余物真空干燥18小时，得到标题产物，重2.4g(89.2％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.66(br,3H),8.00(d,J＝0.8Hz,1H),7.91(d,J＝1.5Hz,2H),7.61(d,J＝0.8Hz,1H),5.55(s,2H),4.01(t,J＝5.6Hz,2H),2.54(t,J＝5.4Hz,3H)。ESMS(M+1)＝271.18。

B-155.反式-3-((5-氟嘧啶-2-基)氧基)环丁-1-胺盐酸盐.

步骤1：(反式-3-((5-氟嘧啶-2-基)氧基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

在室温下将氢化钠(480mg，12mmol)添加至(反式-3-羟基环丁基)氨基甲酸叔丁酯(2.04g，10.9mmol)及2-氯-5-氟嘧啶(1.45g，10.9mmol)于10ml无水DMF的溶液中，保持18小时。反应不完全，因此在90℃下加热反应物24小时。将反应物冷却至室温，随后倒入水(100ml)中且用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。用水(2×50ml)及盐水(50ml)洗涤合并的萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤2：反式-3-((5-氟嘧啶-2-基)氧基)环丁-1-胺盐酸盐.

将含4M HCl(50ml，200mmol)的二噁烷添加至(反式-3-((5-氟嘧啶-2-基)氧基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯于50ml二噁烷中的溶液中且在室温下搅拌2小时。通过真空过滤收集形成的沉淀物且用二乙醚及己烷洗涤，得到标题产物，重1.3g(98％产率)。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.54(d,J＝0.7Hz,1H),8.33(d,J＝0.6Hz,1H),5.25(dtd,J＝86.9,6.7,4.0Hz,1H),4.08-3.91(m,1H),2.79-2.56(m,4H)。

B-156：反式-4-(4-氟苯氧基)四氢呋喃-3-胺

步骤1：(反式-4-(4-氟苯氧基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯.

将(顺式-4-羟基四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯(600mg，2.95mmol)、4-氟苯酚(496mg，4.43mmol)及三苯基膦(1.16g，4.43mmol)溶解于5ml无水THF中且冷却至0℃。将偶氮二甲酸二异丙酯(0.9ml，4.43mmol)逐滴添加至混合物。将反应物升温至室温且搅拌18小时。真空移除溶剂，得到粗产物，通过柱色谱(SiO

步骤2：反式-4-(4-氟苯氧基)四氢呋喃-3-胺.

将三氟乙酸(1ml，12.8mmol)添加至(反式-4-(4-氟苯氧基)四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯(375mg，1.26mmol)于2ml二氯甲烷中的溶液中且在室温下搅拌16小时。真空蒸发反应物，且将残余物溶解于饱和碳酸氢钠(10ml)中并用二氯甲烷(2×10ml)萃取。合并的萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到呈澄清黄色油状物的标题产物，重234mg(94％产率)。ESMS(M+1)＝198.07。

B-157：顺式-3-(((4-氟苯甲基)氧基)甲基)环丁-1-胺盐酸盐.

步骤1：(顺式-3-(((4-氟苯甲基)氧基)甲基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

在0℃下将氢化钠(220mg，5.47mmol)添加至((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1g，4.97mmol)及4-氟苯甲基溴化物(940mg，5.47mmol)于THF(10ml)的溶液中。将反应物升温至室温且搅拌16小时。将水(50ml)添加至反应物，接着用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。用水(2×50ml)及盐水(50ml)洗涤合并的萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到标题产物，1.3g(98％产率)。ESMS(M+1)＝310.14。

步骤2：顺式-3-(((4-氟苯甲基)氧基)甲基)环丁-1-胺盐酸盐.

将(顺式-3-(((4-氟苯甲基)氧基)甲基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1.3g，4.2mmol)溶解于含4M HCl的二噁烷(50ml)中且在室温下搅拌2小时。真空蒸发反应物，得到粗产物，通过逆向MPLC(C18柱)、用10-100％乙腈/水(0.1％TFA)洗脱来纯化粗产物。真空蒸发所需级分，得到所需产物，将所需产物溶解于二氯甲烷中且通过添加二乙醚进行沉淀。通过真空过滤收集沉淀物，用二乙醚及己烷洗涤，且在50℃下真空干燥，得到标题产物，重600mg(58％产率)。ESMS(M+1)＝210.47。

B-158：反式-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环戊-1-胺盐酸盐

如下以与关于程序B-141所报导类似的方式制备化合物：使顺式-(3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环戊基)氨基甲酸叔丁酯与3-(三氟甲基)-1H-吡唑反应，接着去除保护基，得到标题产物。ESMS(M+1)＝220.11。

B-159：顺式-N-(3-氨基环戊基)-3,4,5-三氟苯甲酰胺

步骤1：顺式-(3-(3,4,5-三氟苯甲酰氨基)环戊基)氨基甲酸叔丁酯.

将3,4,5-三氟苯甲酰氯(70μl，0.38mmol)添加至顺式-N-(3-氨基环戊基)氨基甲酸叔丁酯(70mg，0.345mmol)于二氯甲烷(1.5ml)及三乙胺(60μl，0.41mmol)中的混合物中。在室温下搅拌混合物16小时。用饱和碳酸氢钠淬灭反应物，且用二氯甲烷萃取。真空蒸发有机层，得到粗产物。通过柱色谱、用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脱来纯化产物，得到标题产物，重92mg(74％产率)。ESMS(M+1)＝359.13。

步骤2：顺式-N-(3-氨基环戊基)-3,4,5-三氟苯甲酰胺.

将顺式-(3-(3,4,5-三氟苯甲酰氨基)环戊基)氨基甲酸叔丁酯(92mg，0.26mmol)溶解于二氯甲烷(1ml)及TFA(0.2ml，2.6mmol)中且在室温下搅拌16小时。真空蒸发反应物，得到呈TFA盐形式的标题产物，重95mg。ESMS(M+1)＝259.10。

B-160(R)-(1-(1-(4,4-二氟环己基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺二盐酸盐.

步骤1：(R)-3-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸苯甲酯.

将氢化钠(125mg，3.125mmol)添加至N-(1H-吡唑-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(454mg，2.302mmol)于DMF(5mL)中的溶液中且搅拌10分钟。将(3S)-3-(对甲苯基磺酰基氧基)吡咯烷-1-甲酸苯甲酯(1.04g，2.76mmol)添加至混合物且搅拌18小时。将反应混合物用EtOAc(100ml)稀释且用水(50ml)、饱和NaHCO

步骤2：(R)-((1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

向10％Pd/C(50mg)于甲醇(25mL)中的浆液中添加(3R)-3-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸苯甲酯(483mg，1.21mmol)，且在氢气球下搅拌所得浆料14小时。过滤混合物，用甲醇洗涤，且真空浓缩以得到261mg(81％产率)粗产物。ESMS(M+1)＝267.38(M+1)。

步骤3.(R)-((1-(1-(4,4-二氟环己基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

向(R)-((1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(360mg，1.35mmol)于THF的溶液中添加4,4-二氟环己酮(290mg，2.16mmol)及三乙酰氧基硼氢化钠(460mg，2.16mmol)，且搅拌反应物16小时。将饱和NaHCO

步骤4：(R)-(1-(1-(4,4-二氟环己基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺二盐酸盐.

向(R)-((1-(1-(4,4-二氟环己基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(515mg，1.340mmol)于二氯甲烷(8mL)中的溶液中添加含4M HCl的甲醇(4ml，16.00mmol)且搅拌混合物3小时。将反应物真空浓缩至干以得到550mg(100％产率)产物。ESMS(M+1)＝285.34。

B-161.(S)-(1-(1-(4,4-二氟环己基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺二盐酸盐

以与关于B-160所报导类似的方式得到标题产物，510mg(90％产率)来制备化合物。ESI-MS(M+1)＝285.38。

B-162.(S)-(1-(1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

步骤1：(S)-3-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸苯甲酯.

在10℃下将氢化钠(540mg，13.5mmol)添加至N-(1H-吡唑-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.78g，9.0mmol)于DMF(12mL)中的混合物中。搅拌混合物30分钟，随后升温至室温。将(3R)-3-(对甲苯基磺酰基氧基)吡咯烷-1-甲酸苯甲酯(4.4g，11.7mmol)添加至混合物且搅拌隔夜。用乙酸乙酯(300ml)稀释反应物，且用0.5N HCl(75ml)、饱和碳酸氢钠(75ml)及盐水(100ml)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤，且真空浓缩。通过柱色谱(SiO

步骤2：(S)-((1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

向10％Pd/C(100mg)于甲醇(20ml)中的浆液中添加含(S)-3-(4-(((叔丁氧羰基)-氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸苯甲酯(1.59mg，3.97mmol)的甲醇(20ml)。经由气球添加氢气氛围且搅拌反应物隔夜。过滤混合物，且在所提供的真空下浓缩至干，得到0.99g(94％产率)粗产物。ESMS(M+1)＝267.38。

步骤3：(S)-((1-(1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

向(S)-((1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(370mg，1.389mmol)、(4-氟苯基)硼酸(310.9mg，2.2mmol)、无水乙酸铜(379mg)及4A分子筛(700mg)于二氯甲烷(10mL)中的混合物中添加吡啶(170μL，2.1mmol)。在室温下于Drierite试管中搅拌所得混合物70小时。经硅胶垫过滤混合物、用10％甲醇/二氯甲烷洗脱且真空浓缩至干。通过柱色谱(SiO

向(S)-((1-(1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(236mg，0.65mmol)于二氯甲烷(3mL)中的溶液中添加含2M氯化氢(2.5ml，2M，5.000mmol)的二乙醚。搅拌所得混合物3小时。将反应物浓缩至干以得到133mg(68％产率)标题产物。ESMS(M+1)＝261.4。

B-163.(R)-(1-(1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐

以与关于B-162所报导类似的方式得到标题产物，510mg(90％产率)来制备化合物。ESI-MS(M+1)＝261.38。

B-164.(1-((6-氟-5-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸

化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.92(d,J＝2.4Hz,1H),7.77-7.60(m,2H),7.62-7.49(m,1H),5.42(d,J＝2.4Hz,2H),4.09(s,2H),3.94(t,J＝2.4Hz,3H)。ESMS(M+1)＝237.5。

用于B-165的流程：

B-165.(3-溴-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

步骤1：3-溴-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯.

将二(叔丁基)-偶氮二甲酸酯(1.98g，8.6mmol)逐滴添加至3-溴-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(1.57g，7.17mmol)、[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]甲醇(1.3g，7.34mmol)及三苯基膦(2.26g，8.6mmol)于二氯甲烷(40mL)中的冷却(0℃)溶液且搅拌30min。使反应物升温至室温且搅拌隔夜。随后将溶液倒入冰水(20ml)中，且用二氯甲烷萃取。真空蒸发反应物，得到粘稠油状物。通过柱色谱(SiO

步骤2：(3-溴-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲醇

将DIBAL(9.9ml，9.9mmol)于甲苯中的1M溶液添加至3-溴-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(1.25g，3.306mmol)于THF(10mL)中的冷却(-78℃)溶液中。将反应物升温至0℃且搅拌2小时。通过添加水EtOAc(30mL)淬灭反应物。搅拌15min后，添加罗谢尔盐溶液(Rochelle salt solution)(30mL)。添加乙酸乙酯(25ml)且分离有机层。用乙酸乙酯(2×20mL)萃取水层。合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤且蒸发，得到淡黄色粘性油状物(1.1g，100％产率)。此油状物不经进一步纯化即用于下一步骤。

步骤3：5-((4-(叠氮基甲基)-3-溴-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)吡啶.

将DBU(600μL，3.95mmol)逐滴添加至(3-溴-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲醇(1.1g，3.27mmol)及二苯基磷酰基叠氮化物(900μL，4.1mmol)于无水THF(20ml)中的冷却溶液(0℃)中。10min后，反应物变得混浊。将反应物升温至室温且搅拌隔夜。反应物变为澄清茶色溶液。用乙酸乙酯(30ml)稀释反应物且用氯化铵水溶液(10ml)及盐水(10ml)洗涤。有机层经MgSO

步骤4：(3-溴-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

将三苯基膦(860mg，3.24mmol)添加至5-((4-(叠氮基甲基)-3-溴-1H-吡唑-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)吡啶(782mg，2.16mmol)于THF(18mL)及水(2mL)中的溶液中且在室温下搅拌隔夜。浓缩反应物以移除大部分溶剂。将2N HCl水溶液(20mL)及二氯甲烷(20mL)添加至残余物。分离有机层且用二氯甲烷(10mL×2)洗涤水层。浓缩水层，得到白色固体，其在60℃下真空干燥16小时，得到标题产物(745mg，93％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.65-8.58(m,1H),7.98(d,J＝1.0Hz,1H),7.92(dd,J＝8.2,2.1Hz,1H),7.77(dd,J＝8.2,0.8Hz,1H),5.47(s,2H),3.95(s,2H)。ESI-MS m/z计算值334.0041，实验值335.03(M+1)

B-166.(1-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.22-8.10(m,1H),7.86(d,J＝0.8Hz,1H),7.81-7.70(m,1H),7.62(d,J＝0.8Hz,1H),7.76-7.27(t,J＝73.0Hz,1H),6.95(dd,J＝8.5,0.7Hz,1H),5.36(s,2H),4.03(s,2H)。ESMS(M+1)＝255.21。

B-167.(1-((2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸

该化合物通过方法B制备。ESMS(M+1)＝290.16。

B-168.(1-((6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.18-8.04(m,1H),7.95-7.82(m,1H),7.63(s,1H),7.59(dd,J＝8.9,2.0Hz,1H),5.42(s,2H),4.02(s,2H)。ESMS(M+1)＝241.07。

B-169.(1-((5-氟-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.18(s,1H),7.88(s,1H),7.62(d,J＝0.8Hz,1H),7.42(dd,J＝10.0,1.7Hz,1H),5.39(s,2H),4.02(s,2H),2.46(d,J＝2.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝221.11。

B-170. 5-((4-(氨基甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)2-氰基吡啶

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.64-8.54(m,1H),7.97(s,1H),7.87-7.79(m,2H),7.68(d,J＝3.8Hz,1H),5.51(d,J＝11.5Hz,2H),4.09(s,3H)。ESMS(M+1)＝214.13。

B-171.(1-((6-环丙基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.50(d,J＝2.0Hz,1H),8.21-8.09(m,1H),7.96(s,1H),7.66(s,1H),7.55(d,J＝8.5Hz,1H),5.51(s,2H),4.05(s,2H),2.32(tt,J＝8.7,4.9Hz,1H),1.53-1.30(m,3H),1.28-1.06(m,2H)。ESMS(M+1)＝229.22。

B-172.(1-(2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.52(s,1H),7.93(s,6H),7.82(d,J＝1.1Hz,1H),7.71(s,1H),7.52(s,1H),4.44(t,J＝6.9Hz,2H),3.85(dd,J＝7.1,4.4Hz,3H),3.23(t,J＝6.9Hz,2H)。ESMS(M+1)＝271.25。

B-173.顺式-3-((3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲基)环丁-1-胺盐酸盐步骤1：(顺式-3-(2-((((Z)-1-氨基-2,2,2-三氟亚乙基)氨基)氧基)-2-氧代乙基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

将羰基二咪唑(450mg，2.8mmol)添加至顺式-2-[3-(叔丁氧羰基氨基)环丁基]乙酸(527mg，2.3mmol)于二氯甲烷(8ml)中的溶液中且在室温下搅拌。5分钟后，添加2,2,2-三氟-N'-羟基-乙脒(300mg，2.3mmol)且在室温下搅拌反应物2小时。将反应物真空蒸发至干且进行至步骤2。

步骤2：(顺式-3-((3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

将来自步骤1的粗产物溶解于10ml甲苯中且回流12小时。真空蒸发反应混合物且通过柱色谱(SiO

步骤3：顺式-3-((3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲基)环丁-1-胺盐酸盐.

将(顺式-3-((3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(239mg，0.74mmol)溶解于甲醇(8ml)中，且添加HCl于二噁烷中的4M溶液，且在50℃下加热混合物20min。真空蒸发反应物，得到固体。用二乙醚及己烷洗涤此固体，过滤且干燥，得到呈白色固体的标题产物(171mg，89％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ3.71(p,J＝8.3Hz,1H),3.23(d,J＝7.1Hz,2H),2.76-2.55(m,3H),2.00(qd,J＝9.5,8.9,2.5Hz,2H)。ESI-MSm/z计算值221.07759，实验值222.1(M+1)

B-174.(1-((5-氟吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺

该化合物通过方法B制备。ESMS(M+1)＝207.28。

B-175.(1-(4-(三氟甲氧基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐

该化合物通过方法B制备。ESMS(M+1)＝272.17。

B-176.(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺

步骤A.((1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

在密封管中将叔丁醇钠(3.8ml，7.6mmol)于THF中的2M溶液添加至((1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，2.54mmol)及5-溴-2-(三氟甲基)吡啶(573mg，2.54mmol)于叔丁醇(12.5ml)中的悬浮液中。将混合物音波处理10min直至充分混合为止。用氮气使混合物脱气，接着添加t-BuXPhos钯环Gen 2(0.06当量)。密封反应且加热至60℃，保持1小时。通过柱色谱(SiO

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.26(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(s,1H),8.45(dd,J＝8.4,2.6Hz,1H),8.04(d,J＝8.6Hz,1H),7.78(s,1H),7.27(s,1H),4.08(d,J＝5.9Hz,2H),1.40(s,9H)。ESMS(M+1)＝343.32。

步骤B.(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸酯.

将((1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(105mg，0.03mmol)溶解于二氯甲烷中，且添加TFA(25μL，0.03mmol)并在室温下搅拌反应物3小时。真空蒸发反应物，得到109mg所需产物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.28(d,J＝2.6Hz,1H),8.77(s,1H),8.48(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),8.28-8.03(m,4H),7.99(s,1H),4.03(q,J＝5.7Hz,2H)。ESMS(M+1)＝243.23。

B-177.(1-((6-(叔丁基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,CDCl

B-178. 2-(5-((4-(氨基甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.49(d,J＝2.3Hz,1H),7.90(s,1H),7.75(dd,J＝8.2,2.4Hz,1H),7.68-7.52(m,2H),5.42(s,2H),4.04(s,2H),1.72(s,6H)。ESMS(M+1)＝256.21。

B-179.(1-((6-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺.

步骤A.((1-((6-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(970mg，3mmol)及异丙烯基硼酸(515mg，6mmol)溶解于15ml无水二噁烷中且用氮气进行脱气。将Pd(dppf)Cl2添加至混合物，且在80℃下加热反应物7天。真空蒸发溶剂。将所得残余物溶解于乙酸乙酯(20ml)中且用水(2×10ml)及盐水洗涤。收集有机层且经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发以得到粗产物，其通过柱色谱(SiO

步骤B.(1-((6-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸酯

通过经TFA处理而去除Boc保护基以得到所需产物来制备化合物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.52(s,1H),8.01(dd,J＝17.4,8.0Hz,2H),7.93(d,J＝3.4Hz,1H),7.66(d,J＝5.0Hz,1H),5.90(d,J＝2.3Hz,1H),5.57(d,J＝8.0Hz,2H),5.50(s,2H),2.23(dq,J＝1.5,0.7Hz,3H)。ESMS(M+1)＝229.18。

B-180.(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲胺

步骤A. 1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-甲腈

将1H-咪唑-4-甲腈(300mg，3.22mmol)及5-(氯甲基)-2-(三氟甲基)吡啶(662mg，3.385mmol)溶解于无水DMF(5ml)中且冷却至0℃。将氢化钠(150mg，3.7mmol)逐份添加该溶液且在室温下搅拌2小时。用饱和氯化铵(10ml)淬灭反应物，接着真空蒸发溶剂。将残余物悬浮于二氯甲烷(20ml)及水(20ml)中。另外用二氯甲烷(20ml)萃取水层。合并有机层，用水及盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发以得到粗产物，其通过柱色谱(SiO

步骤B.((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-甲腈(80mg，0.32mmol)、六水合二氯化钴(15mg，0.063mmol)及二碳酸二叔丁酯(83.5mg，0.3826mmol)溶解于甲醇中且冷却至0℃，接着逐份添加硼氢化钠(36.5mg，0.96mmol)。搅拌反应物2小时。蒸发反应物后，添加二氯甲烷及水，且收集有机层并过滤以移除固态悬浮物。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸镁干燥，且真空蒸发以得到粗产物，其通过柱色谱(SiO

步骤C.(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲胺

将((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(68mg，0.1822mmol)溶解于二氯甲烷及TFA(207.8mg，140.4μL，1.822mmol)中且在室温下搅拌1小时。真空蒸发反应物以得到残余物，用二乙醚湿磨残余物，得到呈白色固体的产物(67mg，100％产率)，其不经进一步纯化即使用。

B-181.(1-((2-氯噻唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.66(m,2H),7.36(d,J＝0.8Hz,1H),7.16(t,J＝5.7Hz,1H),5.52(s,2H),3.93(d,J＝6.0Hz,2H),1.37(s,9H)。ESMS(M+1)＝329.08。

B-182.(1-((6-(二氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺

该化合物通过方法B制备。ESMS(M+1)＝239.13。

B-183.(1-(3-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)丙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.62(d,J＝2.1Hz,1H),7.99(s,3H),7.93(dd,J＝8.2,2.1Hz,1H),7.87-7.78(m,2H),7.53(s,1H),4.14(t,J＝6.9Hz,2H),3.90(q,J＝5.7Hz,2H),2.67(t,J＝7.6Hz,2H),2.20-2.01(m,2H)。ESMS(M+1)＝285.21

B-184.(1-((6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.27(d,J＝2.5Hz,1H),7.95-7.91(m,1H),7.91-7.82(m,1H),7.67(s,1H),7.17(d,J＝8.5Hz,1H),5.46(s,2H),4.07(s,2H)。ESMS(M+1)＝273.23。

B-185.(1-((6-(1,1-二氟乙基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.65-8.54(m,1H),8.04-7.93(m,2H),7.80(dd,J＝8.2,0.8Hz,1H),7.67(s,1H),5.52(s,2H),4.05(s,2H),1.99(td,J＝18.7,0.6Hz,3H)。ESMS(M+1)＝253.14。

B-186.(1-((2-异丙基噁唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸

该化合物通过方法B制备。1H NMR(300MHz,CD

B-187.(1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲胺

步骤1： 1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-甲腈.

将1H-1,2,4-三唑-3-甲腈(2g，21.26mmol)、5-(溴甲基)-1,3-二氟-2-甲氧基-苯(5.55g，23.4mmol)及碳酸钾溶解于乙腈(20ml)中且在室温下搅拌3天。用20ml水稀释反应物且用乙酸乙酯(3×20ml)萃取。用盐水洗涤合并的萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到呈白色固体的粗产物，其通过柱色谱、用庚烷至100％乙酸乙酯的梯度洗脱来纯化，得到呈白色固体的标题产物(2.33g，43％产率)。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ9.01(s,1H),7.21(m,2H),5.5(s,2H),3.92(s,3H)。

步骤2：(1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲胺.

将1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-甲腈(1g，4mmol)添加至雷尼镍于甲醇及氨中的浆液中，且在50psi的氢气下置于Paar振荡器上。经由硅藻土过滤反应混合物且真空蒸发滤液。通过柱色谱(SiO

B-188.(1-(4-(三氟甲氧基)苯甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲胺

通过关于B-187报导的程序以2个步骤制备化合物。ESMS(M+1)＝273.12。

B-189.(1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲胺

通过关于B-187报导的程序以2个步骤制备化合物；ESMS(M+1)＝243.09。

B-190. 1-[3-[[4-(氨基甲基)吡唑-1-基]甲基]-6-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙酮盐酸盐.

步骤1：((1-((2-乙酰基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将过碘酸钠(4.32g，20.20mmol)添加至((1-((2-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯B-81(2g，5.045mmol)于THF(10.00mL)、丙酮(10.00mL)及水(10.00mL)中的溶液中且在冰浴中冷却。将单水合三氯化钌(46mg，0.204mmol)添加至混合物且搅拌2小时。经由硅藻土过滤反应物且真空蒸发滤液。将所得残余物溶解于二氯甲烷中并用盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤2：1-(3-((4-(氨基甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙-1-酮盐酸盐.

将((1-((2-乙酰基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.6g)溶解于二氯甲烷(10ml)及2.1ml TFA中且搅拌2小时。真空蒸发反应物，且将所得油状物溶解于二氯甲烷中并用10％碳酸钠洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且蒸发。将所得油状物溶解于二乙醚中，且添加5ml含1N HCl的二乙醚，产生白色固体，收集且干燥该固体，得到标题产物(1.03g，61％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.27(s,3H),8.09(d,J＝8.2Hz,1H),7.97(s,1H),7.67(s,1H),7.38(d,J＝8.2Hz,1H),5.76(d,J＝2.7Hz,2H),3.91(q,J＝5.6Hz,2H),2.68(s,3H)。ESI-MS m/z计算值298.10416，实验值299.13(M+1)+。

B-191.(反式-4-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环己基)甲胺

步骤1：((反式-4-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环己基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将偶氮二甲酸二异丙酯(500μL，2.59mmol)逐滴添加至((反式-4-(羟甲基)环己基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(525mg，2.16mmol)、6-(三氟甲基)吡啶-3-醇(410mg，2.514mmol)及三苯基膦(854mg，3.26mmol)于THF(15ml)中的溶液中且搅拌反应物隔夜。将水(25ml)添加至反应混合物，接着用乙酸乙酯(3×25ml)萃取。用盐水洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

步骤2：(反式-4-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环己基)甲胺二盐酸盐.

将((反式-4-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环己基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(670mg)溶解于10ml二氯甲烷中。将4M HCl(2mL，8mmol)于二噁烷中的溶液添加至溶液且搅拌1小时。真空蒸发反应物，得到固体，用二乙醚及己烷洗涤该固体，过滤且蒸发，得到标题产物(411mg)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.44(d,J＝2.8Hz,1H),7.83(d,J＝8.7Hz,4H),7.59(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),3.98(d,J＝6.3Hz,2H),2.66(s,2H),1.83(dd,J＝30.4,16.5Hz,5H),1.55(s,1H),1.21-0.80(m,4H)。ESI-MS m/z计算值288.14496，实验值289.57(M+1)

B-192.(1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲胺.

将5-(溴甲基)-1,2,3-三氟-苯(1g，4.44mmol)逐滴添加至叠氮化钠(315mg，4.85mmol)于DMSO(30ml)中的溶液中且在室温下搅拌15min。将炔丙基胺(245mg，4.44mmol)添加至溶液中，接着添加三乙胺(100μL，0.66mmol)及CuBr(637mg，4.44mmol)。在室温下搅拌反应物30min。将反应物倒入冰水(200ml)中，且过滤所得沉淀物并用稀释的氢氧化铵及水洗涤。通过制备型反相色谱(C18柱)、用0至100％乙腈/水(TFA改质剂)洗脱来纯化粗产物固体。合并所需级分且真空蒸发以得到呈黄色油状物的产物(930mg，86％产率)。ESMS(M+1)＝243.15

B-193.(1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲胺

通过与B-192相同的程序制备化合物以得到所需产物。ESMS(M+1)＝255.17。

B-194.(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲胺

步骤1：1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-甲腈.

将1H-咪唑-4-甲腈(300mg，3.22mmol)及氯甲基)-2-(三氟甲基)吡啶(662mg，3.385mmol)溶解于无水DMF(5ml)中且冷却至0℃。将氢化钠(150mg，3.72mmol)逐份添加至混合物，随后升温至室温。搅拌2小时后，用饱和氯化铵(10ml)淬灭反应物。用二氯甲烷(25ml)及水(20ml)稀释混合物且分离各层。用二氯甲烷(2×10ml)萃取水层。用水(10ml)及盐水(2×10ml)洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤2：((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-甲腈(79mg，0.32mmol)、六水合二氯化钴(15mg，0.063mmol)及Boc

步骤3：(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲胺.

将((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(68mg，0.182mmol)溶解于二氯甲烷(2ml)及TFA(140μL，1.82mmol)中且在室温下搅拌1小时。真空蒸发反应物。用二乙醚湿磨所得残余物，得到白色固体(68mg，定量产率)。化合物不经进一步特征化即使用。

B-195.顺式-3-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁-1-胺.

步骤1：(顺式-3-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)-环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

在室温下将偶氮二甲酸二乙酯(13mL，40％w/w，28mmol)逐滴添加至(顺式-3-(羟甲基)-环丁基)氨基甲酸叔丁酯(4.699g，23.35mmol)、6-(三氟甲基)吡啶-3-醇(4.2g，25.7mmol)及三苯基膦(7.349g，6.492mL，28.02mmol)于THF(80mL)中的溶液中且搅拌1小时。蒸发溶剂。将残余物溶解于二氯甲烷(100ml)中且用2N氢氧化钠(2×)洗涤。真空蒸发溶剂，得到油状物，其通过柱色谱(SiO

步骤2：顺式-3-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁-1-胺.

将(顺式-3-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)-环丁基)氨基甲酸叔丁酯(3.11g，9mmol)溶解于氯化氢(25mL，4M，100.0mmol)于二噁烷中的4M溶液中。搅拌2小时后，将二乙醚添加至混合物，且收集并干燥白色固体，得到白色固体：2.42g。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.46(d,J＝2.8Hz,1H),8.16(s,3H),7.85(d,J＝8.7Hz,1H),7.61(dd,J＝8.7,2.9Hz,1H),4.14(d,J＝6.2Hz,2H),3.63(s,1H),2.57(dt,J＝7.9,1.7Hz,0H),2.36(tdd,J＝9.4,6.1,2.2Hz,2H),2.04(d,J＝10.2Hz,2H)。ESI-MS m/z计算值246.09799，实验值247.13(M+1)

B-196.反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁-1-胺

步骤1：(反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁基)-氨基甲酸叔丁酯.

在室温下将偶氮二甲酸二乙酯(3.375g，3.530mL，40％w/w，7.752mmol)逐滴添加至(顺式-3-羟基环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1.33g，7.11mmol)、2-(三氟甲基)嘧啶-5-醇(1.06g，6.46mmol)及三苯基膦(2.033g，1.796mL，7.752mmol)于THF(20mL)中的溶液中。将反应物加热至50℃，保持1小时。真空蒸发反应物，且通过柱色谱(SiO

步骤2：反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁-1-胺.

向(反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁基)-氨基甲酸叔丁酯(1.77g，5.289mmol)添加氯化氢(27.58mL，4M，110.3mmol)于二噁烷中的溶液，且在室温下搅拌混合物16小时。形成沉淀物。将二乙醚添加至混合物且搅拌。收集白色固体，用二乙醚洗涤，且在50℃下真空干燥，得到呈白色固体的标题产物1.28g。1H NMR(300MHz,CD

B-197a.反式-3-(5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁-1-胺盐酸盐.

B-197b.反式-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁-1-胺盐酸盐.

步骤1：(反式-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯及(反式-3-(5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

将偶氮二甲酸二乙酯(27mL，40％w/w，59.29mmol)添加至(顺式-3-羟基环丁基)氨基甲酸叔丁酯(10.09g，53.89mmol)及三苯基膦(15.78g，60.16mmol)于THF(150mL)中的冷却(0℃)混合物中，接着添加3-(三氟甲基)-4H-吡唑(8.18g，60.11mmol)。在50℃下加热反应物12小时。移除溶剂，且通过柱色谱(SiO

作为(反式-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯的峰1(次要产物)(4.09g，24％产率)1H NMR(400MHz,CDCl

作为(反式-3-(5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯的峰2(主要产物)(10.82g，64％)1H NMR(400MHz,CDCl

步骤2：

B-197a.反式-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁-1-胺盐酸盐.

将(反式-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(4.22g，13.36mmol)溶解于甲醇(35mL)中。添加2M HCl于二乙醚中的溶液(31mL，62.00mmol)且在50℃下搅拌1小时。真空蒸发反应物，且用二乙醚及己烷洗涤所得固体，得到呈白色固体的标题产物(3.1g，96％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.67(d,J＝1.9Hz,1H),6.77(d,J＝1.9Hz,1H),5.34-5.27(m,1H),4.19-4.11(m,1H),3.09-2.99(m,2H),2.84-2.77(m,2H)。ESI-MS m/z 206.08(M+1)

B-197b.反式-3-(5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁-1-胺盐酸盐.

将(反式-3-(5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(10.82g，35.44mmol)溶解于甲醇(100mL)中。将2M HCl于二乙醚中的溶液(80mL，160mmol)添加至溶液中且在50℃下搅拌1小时。真空蒸发反应物，且用二乙醚及己烷洗涤所得固体，得到呈白色固体的标题产物(8.37g，98％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.82(dd,J＝2.4,1.1Hz,1H),6.60(d,J＝2.4Hz,1H),5.17(ddd,J＝13.9,9.0,5.1Hz,1H),4.17(ttd,J＝8.5,5.8,0.9Hz,1H),2.95(dddt,J＝14.0,8.5,5.5,1.8Hz,2H),2.87-2.69(m,2H)。ESI-MS m/z计算值205.08269，实验值219.85(M+1)

B-198.顺式-N1-甲基-N1-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)环丁烷-1,3-二胺

步骤1：(顺式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

将(顺式-3-氨基环丁基)氨基甲酸叔丁酯(2.0355g，10.93mmol)、2-氯-5-(三氟甲基)吡嗪(2.2g，12.05mmol)及二异丙基乙胺(2.86mL，16.42mmol)溶解于异丙醇(2mL)中且在150℃下于微波管中加热1小时。用100ml乙酸乙酯稀释反应物，且用盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到固体，用二乙醚湿磨该固体。通过真空过滤收集白色固体以得到呈白色固体的标题产物(3.32g，89％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

步骤2：(顺式-3-(甲基(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

将(顺式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(510mg，1.496mmol)、碳酸铯(975mg，2.992mmol)及碘甲烷(140μL，2.249mmol)于DMF(8mL)中的混合物在室温下搅拌24小时。真空蒸发反应混合物，且用等量水及乙酸乙酯(25ml)处理所得残余物。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发以得到产物(518mg，99％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl

步骤3：顺式-N1-甲基-N1-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)环丁烷-1,3-二胺.

将(顺式-3-(甲基(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(410mg，1.168mmol)溶解于甲醇(6mL)中。添加HCl(6mL，4M，24.00mmol)于二噁烷中的溶液，且在50℃下加热反应物。真空蒸发反应物，且用庚烷湿磨所得残余物，随后过滤以得到作为标题产物的白色固体(430mg，定量产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.45-8.33(m,1H),8.30-8.12(m,1H),4.77(tt,J＝9.6,7.4Hz,1H),3.61-3.54(m,1H),3.19(s,3H),2.83-2.70(m,2H),2.43(dt,J＝12.3,8.9Hz,2H)。ESI-MS 246.95(M+1)

B-199.反式-N1-甲基-N1-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)环丁烷-1,3-二胺

以与B-198类似的方式制备化合物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.39(s,1H),8.24(dt,J＝4.3,2.1Hz,1H),5.40(p,J＝8.4Hz,1H),3.99-3.83(m,1H),3.22(d,J＝1.5Hz,3H),2.93-2.78(m,2H),2.55(ddt,J＝11.8,5.1,2.9Hz,2H)。ESI-MS m/z 247.13(M+1)

B-200.(S)-(1-((1-(3,5-二氟苯基)吡咯烷-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

步骤1.(S)-(1-(3,5-二氟苯基)吡咯烷-2-基)甲醇.

向[(2S)-吡咯烷-2-基]甲醇(600mg，5.9mmol)及1,3,5-三氟苯(1.02g，7.7mmol)于DMSO(0.5mL)中的混合物中添加氟化铯(1.17g，7.7mmol)。将反应物加热至80℃且搅拌48小时。将水(75mL)添加至反应混合物，接着用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。用水(2×40mL)及盐水(1×40mL)洗涤合并的有机萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发以得到1.3g(100％产率)标题化合物，其用于各步骤中。ESMS(M+1)＝214.01。

步骤2.(S)-4-甲基苯磺酸(1-(3,5-二氟苯基)吡咯烷-2-基)甲酯.

向(S)-(1-(3,5-二氟苯基)吡咯烷-2-基)甲醇(1.1g，5.16mmol)及三乙胺(1.1g，10.87mmol)于二氯甲烷(15mL)中的溶液中添加4-甲基苯磺酰氯(1.1g，5.77mmol)，且搅拌反应物16小时。将二乙醚(100ml)添加至混合物且搅拌。滤出形成的沉淀物且用乙醚(50ml)冲洗。用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)及盐水(50ml)洗涤滤液有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发以得到1.8g(100％产率)标题产物，其不经进一步纯化即用于步骤3中。ESMS(M+1)＝368.32。

步骤3.(S)-((1-((1-(3,5-二氟苯基)吡咯烷-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯.

将氢化钠(92mg，2.29mmol)添加至N-(1H-吡唑-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(376mg，1.91mmol)于DMF(4mL)中的溶液中且搅拌1小时。逐滴添加含(S)-4-甲基苯磺酸(1-(3,5-二氟苯基)吡咯烷-2-基)甲酯(771mg，2.1mmol)的2ml DMF，且在室温下搅拌反应物16小时。将水(75mL)添加至反应混合物，接着用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。用水(2×40mL)及盐水(40mL)洗涤合并的萃取物，经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤4.(S)-(1-((1-(3,5-二氟苯基)吡咯烷-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐.

向(S)-((1-((1-(3,5-二氟苯基)吡咯烷-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(555mg，1.414mmol)于二氯甲烷(3ml)中的混合物中添加HCl(10ml，10mmol)于二乙醚中的1M溶液。搅拌反应物2小时，且再添加5ml含4M HCl(20mmol)的二噁烷。搅拌反应物隔夜，随后真空蒸发以得到标题化合物，104mg(22％产率)。ESMS(M+1)＝293.44。

B-201：反式-3-((3,4-二氟苯甲基)氧基)环丁-1-胺盐酸盐.

步骤1.(反式-3-((3,4-二氟苯甲基)氧基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

将氢化钠(329mg，8.23mmol)添加至(反式-3-羟基环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1.4g，7.48mmol)及3,4-二氟苯甲基溴化物(1.01g，7.48mmol)于DMF(10ml)中的冷却溶液(0℃)中且在室温下搅拌。将水添加至反应物，且通过真空过滤收集所得白色沉淀物，用水充分洗涤，并真空干燥以得到标题产物，2.01g(89％产率)。ESMS(M+1)＝314.21

步骤2.反式-3-((3,4-二氟苯甲基)氧基)环丁-1-胺盐酸盐

如下制备化合物：通过溶解于20mL含4M HCl(80.00mmol)的二噁烷中来去除(反式-3-((3,4-二氟苯甲基)氧基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(2.01g，6.415mmol)的保护基。搅拌反应物2小时，随后真空蒸发以得到呈盐酸盐形式的标题产物，重1.45g(90.51％产率)。ESMS(M+1)＝214.16。

B-202及B-203以与关于B-201所描述的程序类似的方式制备：

B-202反式-3-((3,4,5-三氟苯甲基)氧基)环丁-1-胺盐酸盐.

ESMS(M+1)＝232.22。

B-203顺式-3-甲基-3-((3,4,5-三氟苯甲基)氧基)环丁-1-胺盐酸盐.

ESMS(M+1)＝246.18。

B-204.(1R,3R)-N1-甲基-N1-(4-(三氟甲基)苯基)环戊烷-1,3-二胺盐酸盐及

B-205.(1S,3R)-N1-甲基-N1-(4-(三氟甲基)苯基)环戊烷-1,3-二胺盐酸盐

步骤1：((1R,3R)-3-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)氨基)-环戊基)氨基甲酸叔丁酯及((1R,3S)-3-(甲基(4-(三氟甲基)-苯基)氨基)环戊基)-氨基甲酸叔丁酯.

将乙酸(8ml)添加至(R)-(3-氧代环戊基)氨基甲酸叔丁酯(773mg，3.880mmol)及N-甲基-4-(三氟甲基)苯胺(710mg，4.06mmol)于甲醇(8mL)中的混合物中，且在室温下搅拌20min。将三乙基硅烷(1.25ml，7.83mmol)添加至混合物，接着添加氯化铟(III)(260mg，1.17mmol)且在室温下搅拌12小时。用饱和碳酸氢钠中和反应物，且用乙酸乙酯萃取。分离有机层，经硫酸镁干燥，过滤且蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

((1R,3R)-3-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)氨基)环戊基)-氨基甲酸叔丁酯

(296mg)：SFC Rt 0.646min。1H NMR(400MHz,CDCl

((1R,3S)-3-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)氨基)环戊基)-氨基甲酸叔丁酯

(312mg)：SFC Rt 0.79min。1H NMR(400MHz,CDCl

如下制备化合物：将((1R,3R)-3-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)氨基)环戊基)-氨基甲酸叔丁酯(296mg)于甲醇(6ml)及含4M HCl的二噁烷(6ml)中去除保护基。蒸发反应物，得到呈盐酸盐形式的标题产物(290mg)。1H NMR(400MHz,CD

B-205.(1S,3R)-N1-甲基-N1-(4-(三氟甲基)苯基)环戊烷-1,3-二胺盐酸盐

通过相同程序制备化合物以得到呈HCl盐形式的产物(320mg)。1H NMR(400MHz,CD

B-206.(1R,3S)-N1-甲基-N1-(4-(三氟甲基)苯基)环戊烷-1,3-二胺盐酸盐

以与B-204及B-205相同的方式得到产物来制备化合物。1H NMR(400MHz,CD

B-207.(1S,3S)-N1-甲基-N1-(4-(三氟甲基)苯基)环戊烷-1,3-二胺盐酸盐

以与B-204及B-205相同的方式得到产物来制备化合物。1H NMR(400MHz,CD

B-208.(1-((6-氟-2-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺三氟乙酸盐

以与关于中间体B-81所报导相同的方式制备化合物。ESI-MS m/z 247.13(M+1)

B-209.顺式-N1-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)环丁烷-1,3-二胺.

将HCl(22ml，88mmol)于二噁烷中的4M溶液添加至(顺式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(参见B-198步骤1的产物；2g，5.89mmol)于甲醇(25ml)中的溶液中且在室温下搅拌2小时。真空蒸发反应物且用二乙醚湿磨所得固体，过滤且在真空烘箱中于50℃下干燥以得到标题产物(1.98g，90％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.36(d,J＝1.2Hz,1H),8.26(s,1H),4.43-4.19(m,1H),3.83-3.69(m,1H),2.97(dtd,J＝10.1,7.3,2.9Hz,2H),2.39(qt,J＝8.9,2.5Hz,2H)。ESI-MS m/z计算值232.09358，实验值233.13(M+1)

B-210.顺式-3-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁-1-胺盐酸盐

以与B-197相同的方式以2个步骤得到标题产物来制备化合物。1H NMR(300MHz,CD

B-211.N-((顺式-3-氨基环丁基)甲基)-5-(三氟甲基)吡嗪-2-胺二盐酸盐

以与B-197相同的方式以两个步骤得到标题产物来制备化合物。

B-212.(1S,3R)-N1-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)环戊烷-1,3-二胺盐酸盐

以与B-197相同的方式得到标题产物来制备化合物。

B-213.(1S,3S)-3-(((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)甲基)环丁-1-胺

步骤1：((1s,3s)-3-(((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)甲基)-环丁基)氨基甲酸叔丁酯

在室温下向含顺式-N-[3-(羟甲基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(5.8g，28.8mmol)及三苯基膦(9.1g，34.7mmol)的THF(80mL)中添加偶氮二甲酸二乙酯(15.8mL，40％w/w，34.69mmol)，接着添加2-(三氟甲基)嘧啶-5-醇(5.0g，30.5mmol)。在室温下搅拌反应混合物1小时。移除THF，添加100mL二氯甲烷，用2N NaOH洗涤两次。真空浓缩有机相。通过硅胶层析使用EtOAc/庚烷纯化所得残余物，得到8.17g所需产物：

步骤2：(1S,3S)-3-(((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)甲基)环丁-1-胺

在室温下向含N-[3-[[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]氧基甲基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯3(8.17g，23.51mmol)的甲醇(20mL)中添加含氯化氢(27mL，4M溶液，108mmol)的二噁烷。在50℃下搅拌30分钟。蒸发有机物，且用醚-庚烷洗涤所得残余物，得到6.5g呈HCl盐形式的所需产物：

实例2.本发明化合物的制备

2A.表4的化合物的制备

表4.

A.方法A的通用程序：化合物46：(7S)-2-(((1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-氯-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(9.4g，41.5mmol)及(1-(3,5-二氟-4-甲氧基-5-甲基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐(13.8g，42.3mmol)溶解于170ml叔丁醇中且用氮气脱气。将叔丁醇钠(13.94g，145mmol)添加至混合物，接着添加t-BuXPhos苯乙胺氯化钯(II)(还称为tBuXPhos Pd Gen 1)(570mg，0.83mmol)。用氮气吹扫反应物5分钟，随后加热至50℃，保持2小时。真空蒸发溶剂，且将水(200ml)添加至残余物并用二氯甲烷(2×200ml)萃取。用盐水洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(330g SiO)、用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脱来纯化粗产物。合并所需级分且真空蒸发以得到绿色固体。将绿色固体溶解于二氯甲烷(100ml)中，在室温下将4.5g Biotage MP-TMT树脂搅拌16小时(以移除Pd)。经由氟罗里硅土及硅藻土过滤溶剂，获得澄清无色溶液。真空蒸发滤液，得到白色泡沫。将庚烷添加至残余物且搅拌1小时。通过真空过滤收集所得物质且在真空烘箱中于50℃下干燥20小时以得到标题产物，重15g(80.7％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.82(s,1H),7.68(s,1H),7.40(d,J＝0.5Hz,1H),7.06-6.87(m,2H),6.60(t,J＝5.9Hz,1H),5.21(s,2H),4.22(d,J＝6.0Hz,2H),4.00(q,J＝6.8Hz,1H),3.88(t,J＝0.9Hz,3H),2.94(s,3H),2.13(s,3H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H)；F19 NMRδ-128.50,-128.53ppm；ESMS(M+1)＝444.28。mp＝136-138℃。手性HPLC(AD-H柱；40％异丙醇/60％己烷/0.1％二乙胺)Rt＝8.906min.(98％ee)；[α]

B.方法B的通用程序：

化合物1：(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-氯-4,5,7,8-四甲基-7H-喋啶-6-酮(90g，373.9mmol)及(1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐(108.4g，448.7mmol)溶解于正丁醇(1.35L)中且在氮气下加热回流20小时。真空移除溶剂。将所得残余物溶解于饱和碳酸氢钠(1L)中且用乙酸乙酯(1.5L)萃取。用乙酸乙酯(1L)进一步萃取水层。合并萃取物，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

化合物53：(7S)-2-(((1-苯甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与(1-苯甲基-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐反应以得到标题化合物；产率41％；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.85(s,1H),7.68(s,1H),7.28-7.18(m,3H),7.18-7.10(m,2H),5.29(s,2H),4.43(s,2H),4.18(q,J＝6.8Hz,1H),3.08(s,3H),2.19(s,3H),1.40(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝378.34。

化合物27：(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-35与B-2反应以得到标题化合物；产率78％：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.44(s,2H),7.28(s,1H),7.11(dd,J＝8.5,5.4Hz,2H),6.94(t,J＝8.6Hz,2H),5.13(d,J＝10.9Hz,2H),4.96(d,J＝27.5Hz,1H),4.32(t,J＝7.4Hz,2H),4.05(q,J＝6.8Hz,1H),3.18(s,3H),2.94(s,3H),1.29(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝396.14。

化合物4：(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-2反应以得到标题化合物；产率68.8％；1H NMR(300MHz,CDCl

化合物41：(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与B-2反应以得到标题化合物；产率62％1H NMR(300MHz,CDCl

化合物22：(7S)-8-乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-24与B-2反应以得到标题化合物；产率62％1H NMR(300MHz,CDCl

化合物19：(7S)-5,7-二乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-8-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-43与B-2反应以得到标题化合物；

化合物32：(7S)-7-乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-8-异丙基-5-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-18与B-2反应以得到标题化合物；46％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物52：(7S)-7-乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-8-异丙基-5-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-19与B-2反应以得到标题化合物；47％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物24：(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,8-二甲基-7-丙基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-50与B-2反应以得到标题化合物；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.61(d,J＝0.8Hz,1H),7.53-7.44(m,2H),7.28-7.17(m,2H),7.10-6.97(m,2H),5.25(s,2H),4.37(s,2H),4.19(dd,J＝5.7,4.2Hz,1H),3.26(s,3H),3.05(s,3H),1.90-1.70(m,2H),1.18(dtt,J＝9.1,7.3,6.0Hz,2H),0.87(t,J＝7.3Hz,3H)；ESMS(M+1)＝424.23

化合物26：(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,8-二甲基-7-(丙-2-炔-1-基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-10与B-2反应以得到标题化合物；5％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.76(d,J＝0.8Hz,1H),7.57(d,J＝0.8Hz,1H),7.42(s,1H),7.33-7.22(m,2H),7.12-7.00(m,2H),5.29(s,2H),4.62-4.49(m,3H),3.28(d,J＝7.8Hz,6H),3.05(ddd,J＝17.7,4.8,2.7Hz,1H),2.90(dt,J＝17.7,2.8Hz,1H)；ESMS(M+1)＝420.22

化合物20：(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-5,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-20与B-2反应以得到标题化合物；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.78-7.66(m,2H),7.58-7.50(m,1H),7.42-7.21(m,2H),7.05(t,J＝8.7Hz,2H),5.28(s,2H),4.51(s,2H),4.44-4.22(m,1H),3.90-3.66(m,1H),3.29-3.14(m,9H),1.32-1.13(m,3H)；ESMS(M+1)＝440.21。

化合物30：(7S)-5,8-二乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-22与B-2反应以得到标题化合物；44％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物11：(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-(2-羟乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-25与B-2反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.77(d,J＝4.4Hz,1H),7.60(d,J＝2.6Hz,1H),7.32-7.13(m,3H),7.06(t,J＝8.7Hz,2H),5.30(s,2H),4.63-4.41(m,3H),3.81-3.68(m,2H),2.45-2.01(m,2H)；ESMS(M+1)＝398.24。

化合物38：(7S)-5,8-二乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-(2-羟乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-26与B-2反应以得到标题化合物；14％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.84(s,1H),7.70(t,J＝1.0Hz,1H),7.56-7.48(m,1H),7.32-7.21(m,2H),7.11-6.99(m,2H),5.28(s,2H),4.66-4.34(m,5H),4.22-3.77(m,4H),2.52-2.26(m,2H),1.32-1.12(m,6H)；ESMS(M+H)＝454.43。

化合物34：(7S)-5,7,8-三乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-30与B-2反应以得到标题化合物；43％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.31(s,1H),8.16(s,1H),7.54(s,1H),7.43(dd,J＝8.6,5.2Hz,2H),7.21-7.08(m,2H),5.56(s,2H),4.63(d,J＝2.8Hz,2H),3.99(dt,J＝14.0,7.0Hz,1H),3.82(tq,J＝14.0,6.9Hz,2H),3.52(dq,J＝13.9,6.9Hz,1H),3.31(dt,J＝3.3,1.6Hz,1H),2.16-1.92(m,2H),1.70(s,3H),1.20(m,6H),0.76(t,J＝7.4Hz,3H)；ESMS(M+H)＝452.27。

化合物221：2'-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4',8'-二甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-16与B-2反应以得到标题化合物；17％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.67(s,1H),7.49(s,1H),7.23(dd,J＝8.5,5.5Hz,2H),7.03(t,J＝8.7Hz,2H),5.25(s,2H),4.46(s,2H),2.94(s,3H),2.24(s,3H),1.61δ1.37(m,4H)；ESMS(M+H)＝408.42。

化合物222：2'-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4'-甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-53与B-2反应以得到标题化合物；23％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.02(s,1H),7.82(d,J＝6.0Hz,1H),7.20(dt,J＝8.7,5.9Hz,2H),7.06-6.92(m,2H),5.34(s,2H),4.33(s,2H),2.13(s,3H),1.45(dd,J＝8.0,4.9Hz,2H),1.03(dd,J＝8.0,5.0Hz,2H)；ESMS(M+1)＝394.38。化合物223：2'-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4',5',8'-三甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-33与B-2反应以得到标题化合物；32％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.78(br.s,1H),7.97(br.s,1H),7.78(s,1H),7.45(s,1H),7.32-7.24(m,2H),7.21-7.12(m,2H),5.27(s,2H),4.40(d,J＝5.7Hz,2H),3.40(br.s,1H),3.23(s,3H),2.98(s,3H),2.40(s,3H),1.52-1.43(m,2H),1.34-1.26(m,2H)；ESMS(M+H)＝422.18。

化合物227：2'-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5',8'-二甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-36与B-2反应以得到标题化合物；25％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.13(d,J＝13.9Hz,1H),7.94(s,1H),7.47-7.30(m,3H),7.21-6.99(m,2H),5.46(s,2H),4.56(s,2H),3.23(s,3H),2.96(d,J＝10.3Hz,3H),1.63-1.54(m,4H)；ESMS(M+H)＝408.2。

化合物232：5',8'-二乙基-2'-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-37与B-2反应以得到标题化合物；79％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.26(s,1H),8.10(s,1H),7.47(s,1H),7.45-7.35(m,2H),7.19-7.08(m,2H),5.54(s,2H),4.60(s,2H),3.85(q,J＝7.1Hz,2H),3.39(q,J＝6.9Hz,2H),1.65-1.44(m,4H),1.20(q,J＝7.5Hz,3H),1.10(t,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝436.25。

化合物228：2'-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5',8'-二甲基-5',8'-二氢-6'H-螺[氧杂环丁烷-3,7'-喋啶]-6'-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-52与B-2反应以得到标题化合物；40％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-14与B-2反应以得到标题化合物；27％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.09(s,1H),7.93(s,1H),7.44(s,1H),7.36(s,2H),7.11(t,J＝8.1Hz,2H),5.46(s,2H),4.58(s,2H),3.26(s,3H),3.24(s,3H),1.68(d,J＝14.7Hz,6H)；ESMS(M+H)＝409.89。

化合物225：2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,7,7-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-54与B-2反应以得到标题化合物；55％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.99(s,1H),7.81(s,1H),7.43(s,1H),7.31(dd,J＝8.5,5.3Hz,2H),7.08(td,J＝8.7,4.7Hz,2H),5.39(s,2H),4.49(s,2H),3.26(d,J＝6.4Hz,3H),1.56(s,6H)；ESMS(M+1)＝395.89。

化合物230：5,8-二乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-15与B-2反应以得到标题化合物；61％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.43(s,1H),8.28(s,1H),7.56(s,1H),7.47(dd,J＝8.6,5.3Hz,2H),7.15(t,J＝8.7Hz,2H),5.63(s,2H),4.65(s,2H),3.88(q,J＝7.1Hz,2H),3.73(q,J＝6.9Hz,2H),1.64(s,6H),1.18(dt,J＝9.4,7.1Hz,6H)；ESMS(M+H)＝438.27。

化合物9：(7S)-7-乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-8-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-41与B-2反应以得到标题化合物；61％产率。

化合物2：(7S)-7-乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-32与B-2反应以得到标题产物；44％。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-31与B-2反应以得到标题产物；45％。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物234：(7R)-5,7,8-三乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

以与上文描述类似的方式使用中间体A-28及B-2制备此化合物。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物69：(7S)-2-(((1-(3-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-3反应以得到标题产物；76％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-8反应以得到标题产物；49％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物382：(7S)-2-(((1-(1-(4-氟苯基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-4反应，得到呈非对映异构体的混合物形式的标题产物。通过SFC层析(Whelk-O2，10×250mm柱；40％MeOH(0.2％Et

化合物71：(7S)-2-(((1-((S)-1-(4-氟苯基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.76(s,1H),7.58(s,1H),7.29(dd,J＝8.6,5.4Hz,2H),7.08(t,J＝8.7Hz,2H),5.62-5.50(m,1H),4.53(s,2H),4.33(dd,J＝13.9,6.9Hz,1H),3.25(s,3H),2.31(s,3H),1.88(d,J＝7.1Hz,3H),1.55(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝410.27。分析性SFC层析(Whelk-O2柱，4.6×100mm；40％MeOH(0.2％Et

化合物72：(7S)-2-(((1-((R)-1-(4-氟苯基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.76(s,1H),7.58(s,1H),7.29(dd,J＝8.6,5.4Hz,2H),7.08(t,J＝8.7Hz,2H),5.62-5.50(m,1H),4.53(s,2H),4.33(dd,J＝13.9,6.9Hz,1H),3.25(s,3H),2.31(s,3H),1.88(d,J＝7.1Hz,3H),1.55(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝410.31。分析性SFC层析(Whelk-O2柱，4.6×100mm；40％MeOH(0.2％Et

化合物149：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-5反应以得到标题产物；48％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物147：(7S)-7,8-二甲基-2-(((1-(4-(三氟甲基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-5反应以得到标题产物；48％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物45：(7S)-7,8-二甲基-2-(((1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与B-6反应以得到标题产物；48％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-26与B-6反应以得到标题产物；14％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物47：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(3-(三氟甲基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-6反应以得到标题产物；65％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物68：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(2-(三氟甲基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-7反应以得到标题产物；48％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物78：(7S)-2-(((1-(2-异丙基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-9反应以得到标题产物；45％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物79：(7S)-2-(((1-(2-异丙基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-9反应以得到标题产物；48％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物80：(7S)-2-(((1-(3-异丙基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-10反应以得到标题产物；62％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物81：(7S)-2-(((1-(3-异丙基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-10反应以得到标题产物；60％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物14：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-23反应以得到标题产物；31％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.73(s,1H),7.43(s,1H),7.13(dd,J＝8.7,6.8Hz,2H),6.86(t,J＝5.6Hz,1H),5.27(s,2H),4.34-4.16(m,2H),4.02(q,J＝6.8Hz,1H),3.18(s,3H),2.92(s,3H),2.27(s,3H),1.05(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝446.31；[α]

化合物122：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-23反应以得到标题产物；44％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物42：(7S)-7,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-23反应以得到标题产物；65％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.66(s,1H),7.52(s,1H),7.37(s,1H),6.92(dd,J＝8.5,6.6Hz,2H),5.26(s,2H),4.38(s,2H),4.11(q,J＝6.9Hz,1H),3.05(s,3H),1.38(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝418.29；[α]

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-14与B-23反应以得到标题产物；91％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.77(s,1H),8.40(s,1H),7.87(s,1H),7.59(s,1H),7.52(s,1H),7.16(dd,J＝8.8,6.8Hz,2H),5.31(s,2H),4.44(d,J＝5.7Hz,2H),3.19(d,J＝4.2Hz,3H),3.17(s,3H),1.57(s,6H)；ESMS(M+H)＝446.4。

化合物15：(7S)-7-乙基-5,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-42与B-23反应以得到标题产物。

化合物36：(7S)-7-乙基-8-异丙基-5-甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-18与B-23反应以得到标题产物；38％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物33：(7S)-7-乙基-5-甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-8-(2,2,2-三氟乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-45与B-23反应以得到标题产物；30.4％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.98(d,J＝9.7Hz,1H),7.81(s,1H),7.68(s,1H),7.04(td,J＝7.9,5.0Hz,2H),5.38(d,J＝11.1Hz,2H),5.16-5.02(m,1H),4.71-4.50(m,2H),4.17(dt,J＝17.4,8.6Hz,1H),3.31(d,J＝1.1Hz,5H),2.10-1.90(m,3H),0.86(t,J＝7.4Hz,3H)；ESMS(M+1)＝514.12。

化合物51：(7S)-5-乙基-8-异丙基-7-甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-19与B-23反应以得到标题产物；80％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物31：(7S)-5,8-二乙基-7-甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-22与B-23反应以得到标题产物；75％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物231：5,8-二乙基-7,7-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-15与B-23反应以得到标题产物；42％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.69(d,J＝10.6Hz,1H),6.47(d,J＝8.9Hz,1H),5.82(dd,J＝8.2,6.8Hz,2H),4.16(s,2H),3.37(s,2H),2.63(dq,J＝27.4,6.7Hz,4H),0.44(d,J＝4.4Hz,6H),0.02(dt,J＝13.6,6.8Hz,6H)；ESMS(M+H)＝474.24。

化合物35：(7S)-5,7,8-三乙基-7-甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-30与B-23反应以得到标题产物；62％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.31(s,1H),8.08(d,J＝8.5Hz,1H),7.56(s,1H),7.20(dd,J＝13.3,5.9Hz,2H),5.57(s,2H),4.65(d,J＝2.6Hz,2H),4.02(dt,J＝14.3,7.1Hz,1H),3.96-3.77(m,2H),3.56(dq,J＝13.4,6.6Hz,1H),2.15-1.90(m,2H),1.70(s,3H),1.21(t,J＝7.0Hz,6H),0.76(d,J＝7.4Hz,3H)；ESMS(M+H)＝488.28。

化合物235：(7R)-5,7,8-三乙基-7-甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

以与上文描述类似的方式使用中间体A-28及B-28制备此化合物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.73(s,1H),6.58(s,1H),5.86(s,1H),5.78(dd,J＝8.5,5.3Hz,2H),5.45(t,J＝8.7Hz,2H),3.93(s,2H),2.96(d,J＝3.2Hz,2H),2.41-2.24(m,1H),2.20-2.01(m,2H),1.82(dq,J＝13.8,6.9Hz,1H),1.61(dd,J＝3.2,1.6Hz,1H),1.04(s,1H),0.61(s,2H),0.47-0.16(m,2H)；ESMS(M+1)＝452.31。

化合物39：(7S)-7-(2-羟乙基)-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-25与B-23反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.79(s,1H),7.59(d,J＝0.8Hz,1H),7.19(s,1H),6.95(dd,J＝8.4,6.6Hz,2H),5.29(s,2H),4.64-4.43(m,3H),3.74(dd,J＝6.8,5.5Hz,2H),2.31-2.00(m,2H)；ESMS(M+1)＝434.14。

化合物37：(7S)-5,8-二乙基-7-(2-羟乙基)-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-26与B-23反应以得到标题产物；4％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.76(s,1H),7.54(d,J＝14.2Hz,1.5H),7.42(s,0.5H),7.03-6.91(m,2H),5.29(s,2H),4.67-4.39(m,4H),4.24-3.77(m,4H),3.75-3.36(m,2H),2.53-2.21(m,2H),1.32-1.12(m,6H；ESMS(M+H)＝490.26。化合物233：5',8'-二乙基-2'-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-37与B-23反应以得到标题产物；46％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.13(s,1H),7.92(s,1H),7.47(d,J＝3.3Hz,1H),7.14-7.06(m,2H),5.47(s,2H),4.58(s,2H),3.85(q,J＝7.1Hz,2H),3.48-3.36(77m,2H),1.65-1.52(m,2H),1.53-1.42(m,2H),1.24-1.16(m,3H),1.16-1.06(m,3H)；ESMS(M+H)＝472.21。

化合物23：(7S)-5,8-二甲基-7-丙基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-50与B-23反应以得到标题产物；45％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.71-7.64(m,1H),77.52(d,J＝3.1Hz,2H),6.92(dd,J＝8.5,6.6Hz,2H),5.30-5.23(m,2H),4.40(s,2H),4.19(dd,J＝5.8,4.2Hz,1H),3.26(s,3H),3.06(s,3H),1.90-1.70(m,2H),1.30-1.09(m,2H),0.87(t,J＝7.3Hz,3H)；ESMS(M+H)＝460.19。

化合物25：(7S)-5,8-二甲基-7-(丙-2-炔-1-基)-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-10与B-23反应以得到标题产物；5％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.81(d,J＝0.8Hz,1H),7.63-7.56(m,1H),7.42(s,1H),6.98(dd,J＝8.4,6.6Hz,2H),5.30(d,J＝1.1Hz,2H),4.62-4.49(m,3H),3.29(d,J＝1.5Hz,6H),3.06(ddd,J＝17.6,4.8,2.7Hz,1H),2.90(dt,J＝18.0,2.9Hz,1H)；ESMS(M+H)＝456.19。

化合物21：(7S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-5,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-20与B-23反应以得到标题产物；6％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.78(s,1H),7.59(dd,J＝1.9,0.8Hz,1H),7.38(d,J＝13.5Hz,1H),7.03-6.91(m,2H),5.30(s,2H),4.54(s,2H),4.39(dd,J＝11.5,2.7Hz,1H),3.93-3.75(m,1H),3.35(s,3H),3.28-3.22(m,6H),1.24(dd,J＝23.0,6.5Hz,3H)；ESMS(M+H)＝476.17。

化合物140：(7S)-2-(((1-(3,4-二氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-11反应以得到标题产物；72％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物28：(7S)-2-(((1-(3,4-二氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-11反应以得到标题产物；4％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.80(s,1H),7.60(s,1H),7.31-7.01(m,3H),5.31(s,2H),4.54(s,2H),4.31(q,J＝6.9Hz,1H),3.32(s,3H),3.24(s,3H),2.46(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝428.23。

化合物141：(7S)-2-(((1-(3,4-二氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-11反应以得到标题产物；45％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物29：(7S)-2-(((1-(2,4-二氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-12反应以得到标题产物；4％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.76(s,1H),7.58(s,1H),7.29(td,J＝8.5,6.3Hz,1H),7.07-6.89(m,3H),5.35(s,2H),4.52(s,2H),4.38-4.22(m,1H),3.32(s,3H),3.24(s,3H),2.45(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝428.23。

化合物65：(7S)-2-(((1-(2-氯-4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-13反应以得到标题产物；6％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物66：(7S)-2-(((1-(4-氟-2-甲基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-14反应以得到标题产物；55％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物67：(7S)-2-(((1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-15反应以得到标题产物；76％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物17：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-(((1-(2,3,4-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-22反应以得到标题产物；53％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.14(s,1H),8.10(s,1H),7.84(s,1H),7.48(d,J＝0.8Hz,1H),7.32(dddd,J＝10.2,9.3,7.3,2.1Hz,1H),7.20-6.98(m,1H),5.44(s,2H),5.39(s,2H),4.42(d,J＝5.7Hz,2H),4.36(q,J＝7.0Hz,1H),3.22(s,3H),3.17(s,3H),2.42(s,3H),1.27(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝446.3。

化合物16：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-(((1-(2,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-24反应以得到标题产物；53％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物18：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-(((1-(2,4,6-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-80反应以得到标题产物；35％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.72(s,1H),7.50(d,J＝0.7Hz,1H),6.95(ddd,J＝9.0,7.8,4.7Hz,2H),5.36(d,J＝1.2Hz,2H),4.50(d,J＝1.8Hz,2H),4.38-4.19(m,1H),3.25(s,3H),2.45(s,3H),1.99(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝446.15。

化合物146：(7S)-2-(((1-(3-氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-17反应以得到标题产物；52％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物75：(7S)-2-(((1-(4-氟-3-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-16反应以得到标题产物；84％产率。1H NMR(400MHz,CDCl

化合物148：(7S)-2-(((1-(3-氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-17反应以得到标题产物；34％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物181：(7S)-2-(((1-(苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-基甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-19反应以得到标题产物；31％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物83：(7S)-2-(((1-(4-氟-2-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-1反应以得到标题产物；84％产率。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.79(s,1H),7.53(s,1H),7.34(s,1H),6.98-6.92(m,1H),6.93-6.87(m,1H),6.70(td,J＝8.5,2.5Hz,1H),6.52(t,J＝6.0Hz,1H),5.15(s,2H),4.18(dd,J＝8.4,6.5Hz,1H),3.99(q,J＝6.7Hz,1H),3.80(s,3H),3.08(s,1H),2.93(s,3H),2.12(s,3H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝426.3。

化合物84：(7S)-2-(((1-(4-氟-2-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-1反应以得到标题产物；30％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.36(s,2H),7.48(dt,J＝22.5,11.3Hz,1H),6.88(ddd,J＝9.7,7.4,2.4Hz,1H),6.80-6.69(m,1H),5.59(s,2H),4.62(d,J＝15.7Hz,2H),4.32(q,J＝6.9Hz,1H),3.86(s,3H),3.35-3.31(m,4H),3.21(s,3H),2.51(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝440.26。

化合物87：(7S)-2-(((1-(4-氟-2-羟基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-(((1-(4-氟-2-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(化合物83；350mg，0.765mmol)溶解于20ml二氯甲烷中。将1M三溴化硼溶液(4.6ml，4.6mmol)添加至溶液且在室温下搅拌18小时。通过添加甲醇淬灭反应物，接着真空蒸发反应混合物。通过制备型HPLC(C18柱；10-100％乙腈/水(0.1％TFA))纯化所得粗产物。真空蒸发所需级分，得到标题产物，重249mg(71％产率)。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.35(d,J＝3.7Hz,2H),7.46(dd,J＝8.4,6.6Hz,1H),6.76-6.56(m,2H),4.62(s,2H),4.33(q,J＝6.9Hz,1H),3.19(s,3H),2.34(s,3H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝412.21。

化合物44：(7S)-2-(((1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-20反应以得到标题产物；27％产率。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.74(s,1H),8.34(s,1H),7.83(s,1H),7.49(s,1H),7.27(s,1H),6.98(d,J＝8.9Hz,2H),5.25(s,2H),4.39(d,J＝5.6Hz,2H),4.31(q,J＝6.9Hz,1H),3.89(d,J＝1.0Hz,3H),3.15(s,3H),1.44(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝430.24。

化合物48：(7S)-2-(((1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,8-二乙基-7-(2-羟乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-26与B-20反应以得到标题产物；18％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物88：(7S)-2-(((1-(2,4-二氟-3-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-21反应以得到标题产物；75％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物63：(7S)-5-氟-2-((4-(((4,5,7,8-四甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯甲腈

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-18反应以得到标题产物；27％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物64：(7S)-5-氟-2-((4-(((4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯甲腈

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-18反应以得到标题产物；27％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物8：(7S)-2-(((1-(4-氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-25反应以得到标题产物；13％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.53(s,1H),7.34(s,1H),7.07-6.96(m,2H),6.95-6.82(m,2H),4.43(d,J＝2.4Hz,2H),4.32(tdd,J＝6.9,4.4,3.1Hz,3H),3.34(s,3H),3.21(s,3H),3.08(t,J＝6.8Hz,2H),2.46(s,3H),1.38(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝424.3。

化合物6：(7S)-2-(((1-(4-氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-25反应以得到标题产物；13％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.52(s,1H),7.36-7.29(m,1H),7.06-6.95(m,2H),6.94-6.81(m,2H),4.41(d,J＝2.0Hz,2H),4.39-4.24(m,3H),3.24(d,J＝19.9Hz,3H),3.08(t,J＝6.7Hz,2H),2.30(d,J＝2.7Hz,3H),1.55(dd,J＝8.1,7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝410.3。

化合物13：(7S)-2-(((1-(4-氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-(2-羟乙基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-25与B-25反应以得到标题产物。ESMS(M+1)＝412.24。

化合物123：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-28反应以得到标题产物；6％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-33反应以得到标题产物；57％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物109：(7S)-2-(((1-(2-(4-氟苯氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-33反应以得到标题产物；34％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物104：(7S)-2-(((1-(3-(4-氟苯基)丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-32反应以得到标题产物；50％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物110：(7S)-2-(((1-(3-(4-氟苯基)丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-32反应以得到标题产物；49％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物105：(7S)-2-(((1-(3,4-二氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-26反应以得到标题产物；52％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物111：(7S)-2-(((1-(3,4-二氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-26反应以得到标题产物；55％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物119：(7S)-2-(((1-(2,4-二氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-27反应以得到标题产物；26％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物106：(7S)-2-(((1-(2,4-二氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-27反应以得到标题产物；38％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物121：(7S)-2-(((1-(4-乙氧基苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-31反应以得到标题产物；37％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物108：(7S)-2-(((1-(4-乙氧基苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-31反应以得到标题产物；55％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物120：(7S)-2-(((1-(3,5-二氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-30反应以得到标题产物；8％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物107：(7S)-2-(((1-(3,5-二氟苯乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-30反应以得到标题产物；6.4％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物112：(7S)-2-(((反式-1-(3-(4-氟苯基)环丁基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-34反应以得到标题产物；80％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.71(s,1H),7.53(s,1H),7.40-7.29(m,2H),7.11-6.99(m,2H),5.01-4.89(m,1H),4.40(s,2H),4.08(q,J＝6.8Hz,1H),3.81-3.63(m,1H),3.08(s,3H),2.93(ddd,J＝13.0,6.5,3.0Hz,2H),2.71-2.56(m,2H),2.18(s,3H),1.33(d,J＝6.8Hz,4H)；ESMS(M+H)＝436.25。化合物137：(7S)-2-(((1-(3-(4-氟苯基)环戊基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-51反应以得到标题产物；82％产率。ESMS(M+1)＝450.17。

化合物113：(7S)-2-(((1-(2-环己基乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-35反应以得到标题产物；94％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-36反应以得到标题产物；21％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物58：(7S)-2-(((1-((4,4-二氟环己基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-37反应以得到标题产物；15％产率。1H NMR(400MHz,CDCl

化合物5：(7S)-2-(((1-(环丁基甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-38反应以得到标题产物；29％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.69(s,1H),7.56(s,1H),4.51(s,2H),4.31(q,J＝6.9Hz,1H),4.14(d,J＝7.3Hz,2H),3.26(s,3H),2.79(p,J＝7.6Hz,1H),2.29(s,3H),2.11-1.72(m,6H),1.58-1.49(m,3H)；ESMS(M+H)＝356.3。

化合物7：(7S)-2-(((1-(环丁基甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-38反应以得到标题产物；25％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.66(s,1H),7.51(s,1H),4.52(s,2H),4.32(q,J＝7.0Hz,1H),4.12(d,J＝7.3Hz,2H),3.33(s,3H),3.27(s,3H),2.86-2.70(m,1H),2.46(s,3H),2.11-1.71(m,6H),1.38(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝370.34。

化合物61：(7S)-2-(((1-((3,3-二氟环丁基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法AB如下制备化合物：使中间体A-2与B-39反应以得到标题产物；13％产率。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.80(s,1H),7.60(s,1H),7.36(s,1H),6.50(t,J＝6.0Hz,1H),4.21(dd,J＝6.0,2.1Hz,2H),4.15(d,J＝6.3Hz,2H),4.00(q,J＝6.8Hz,1H),2.95(s,3H),2.58(dddd,J＝17.9,9.3,4.8,1.8Hz,2H),2.46-2.26(m,2H),2.13(s,3H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝392.25。化合物133：(7S)-2-(((1-(2-环戊基乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-40反应以得到标题产物；42％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.55(s,1H),7.43(s,1H),4.37(s,2H),4.13-4.02(m,3H),3.07(s,3H),2.18(s,3H),1.88-1.43(m,9H),1.33(d,J＝6.8Hz,3H),1.20-1.02(m,2H)；ESMS(M+H)＝384.25。

化合物134：(7S)-2-(((1-(双环[2.2.1]庚-2-基甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-43反应，得到呈非对映异构体的混合物形式的标题产物；22％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.56(s,1H),7.42(s,1H),4.38(s,2H),4.18-4.02(m,2H),3.86(qd,J＝13.7,7.9Hz,1H),3.09(s,3H),2.47-2.31(m,1H),2.19(s,4H),1.95(d,J＝16.3Hz,1H),1.80-1.46(m,3H),1.36(t,J＝8.4Hz,6H),1.20(ddd,J＝23.4,14.1,4.7Hz,2H),0.78(ddd,J＝12.3,5.4,2.1Hz,1H)；ESMS(M+H)＝396.27。

首先通过SFC(柱：Chiralpak AD-H，10×250mm[30％MeOH(0.2％二乙胺)/70％CO

化合物150

峰C：滞留时间：1.193min(99％de)；重17mg

化合物151

峰D：滞留时间：1.375min(99.2％de)23mg

化合物156及157

(峰A及B)通过手性HPLC(柱：Chiralpak OJ-H；20％1:1MeOH:EtOH/80％己烷(0.2％DEA)，等度，20ml/min)分离。

化合物156

峰A：滞留时间：11.38分钟(100％de)9.3mg；ESMS(M+1)＝396.36。

化合物157

峰B：滞留时间：13.89min(96.4％de)8.0mgESMS(M+1)＝396.32

化合物114：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((S)-2-甲基丁基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-42反应以得到标题产物；18％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物118：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-65反应以得到标题产物；56％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.64(s,1H),7.46(s,1H),4.45-4.25(m,3H),4.14-3.93(m,3H),3.62-3.44(m,2H),3.07(s,3H),2.18(s,3H),2.02(ddd,J＝12.2,10.6,3.9Hz,4H),1.33(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝372.23。

化合物126：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-149反应以得到标题产物；8％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.07(d,J＝5.9Hz,2H),7.95(s,1H),7.62-7.45(m,2H),6.63(d,J＝8.5Hz,2H),6.33(s,1H),5.49(s,1H),4.57(s,1H),4.39(s,2H),4.06(d,J＝6.8Hz,1H),3.88(d,J＝1.0Hz,2H),3.57(s,1H),3.05(d,J＝7.6Hz,3H),2.17(s,3H),1.32(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝462.24。化合物91：(7S)-2-(((1-(2-(4-氟苯基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-45反应以得到标题产物；18％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.85(s,1H),8.09(dd,J＝8.9,5.5Hz,2H),7.58(d,J＝0.8Hz,1H),7.49-7.33(m,3H),6.65(d,J＝6.4Hz,1H),5.75(s,2H),4.25(dd,J＝6.1,3.4Hz,2H),4.00(q,J＝6.8Hz,1H),3.33(s,2H),2.14(s,3H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝424.24。手性HPLC 95.5％ee。化合物116：(7S)-2-(((1-(2,3-二氢-1H-茚-2-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-44反应以得到标题产物；53％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.31(s,1H),8.19(d,J＝9.9Hz,1H),7.29(t,J＝8.9Hz,2H),7.23(dd,J＝6.3,2.3Hz,2H),5.52(dd,J＝9.6,5.4Hz,1H),4.56(s,2H),4.34-4.24(m,1H),3.65(dd,J＝16.7,7.3Hz,2H),3.46-3.34(m,2H),3.13(d,J＝0.8Hz,3H),2.30(dd,J＝7.9,3.7Hz,3H),1.51(d,J＝6.2Hz,3H)；ESMS(M+1)＝404.2。

化合物117：(7S)-2-(((1-(6-氟-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-46反应以得到标题产物；61％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.61(dd,J＝12.0,6.1Hz,1H),7.61-7.52(m,1H),7.37-7.21(m,1H),7.03-6.89(m,1H),6.77-6.61(m,1H),5.84(d,J＝5.2Hz,1H),4.49(s,2H),4.25(dt,J＝15.2,7.4Hz,1H),3.37-3.26(m,1H),3.24-3.15(m,3H),3.17-3.01(m,1H),2.92(dd,J＝14.0,6.3Hz,1H),2.67(ddd,J＝16.7,10.5,5.9Hz,1H),2.39(dt,J＝21.8,7.9Hz,1H),2.31-2.25(m,3H),1.55-1.45(m,3H)；ESMS(M+1)＝422.2。

化合物97：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-47反应以得到标题产物；61％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.27(s,1H),8.13-7.91(m,2H),7.82-7.50(m,3H),4.49(s,2H),4.08(q,J＝6.8Hz,1H),3.09(s,3H),2.23(d,J＝19.0Hz,3H),1.34(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝432.17。95％ee。

化合物98：(7S)-2-(((1-(2,4-二氟苯基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-48反应以得到标题产物；61％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.97(d,J＝2.7Hz,1H),7.84-7.61(m,2H),7.33-6.90(m,2H),4.47(s,2H),4.08(q,J＝6.8Hz,1H),3.09(s,3H),2.19(s,3H),1.33(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝400.32。95％ee。

化合物76：(7S)-2-(((1-(3,4-二甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-49反应以得到标题产物；20％产率。1H NMR(400MHz,CDCl

化合物154及化合物155：(7S)-2-(((1-((1R,2R)-2-(4-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-2-(((1-((1S,2S)-2-(4-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与(1-((顺式)-2-(4-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺反应以得到呈非对映异构混合物形式(化合物144)的标题产物。通过SFC(柱：AD-H柱，20×250mm；35％IPA(0.2％二乙胺)，65％CO

非对映异构体A：滞留时间：1.023min.；97.4％ee；121mg；1H NMR(400MHz,CDCl

非对映异构体B：滞留时间1.214min.；96.2％ee；126mg；1H NMR(400MHz,CDCl

化合物152及化合物153：(7S)-2-(((1-((1R,2R)-2-(4-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-2-(((1-((1S,2S)-2-(4-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-3与(1-((顺式)-2-(4-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-4-基)甲胺反应以得到呈非对映异构混合物形式(化合物145)的标题产物。通过SFC(柱：AD-H柱，10×250mm；40％MeOH(0.2％二乙胺)，60％CO

非对映异构体A：滞留时间：0.919min.；99％ee；51mg；1H NMR(400MHz,CDCl

非对映异构体B：滞留时间：11.118min.；99％ee；52mg；1H NMR(400MHz,CDCl

化合物89及化合物90：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((S)-2-苯基丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((R)-2-苯基丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-95反应，得到呈非对映异构体(化合物85)的混合物形式的标题产物。通过手性HPLC(Chiralpak AD-H柱；30％1:1MeOH:EtOH/己烷0.2％DEA)分离所述非对映异构体。

非对映异构体A：滞留时间：13.37min；重55.5mg；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)d 7.42(s,1H),7.28-7.04(m,6H),4.28(s,2H),4.19(d,J＝7.6Hz,2H),4.08(q,J＝6.8Hz,1H),3.04(s,3H),2.17(s,3H),1.33(d,J＝6.8Hz,3H),1.21(d,J＝7.0Hz,3H),1.15(d,J＝6.1Hz,1H)；ESMS(M+1)＝406.22

非对映异构体B：滞留时间：18.23min.；重52.6mg；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.42(s,1H),7.28-7.05(m,6H),4.28(d,J＝6.1Hz,2H),4.19(dd,J＝7.6,2.2Hz,2H),4.08(q,J＝6.8Hz,1H),3.03(s,3H),2.17(s,3H),1.33(d,J＝6.8Hz,3H),1.21(d,J＝7.0Hz,3H)。ESMS(M+1)＝406.22。

化合物95及化合物96：(7S)-2-(((1-((S)-2-(4-氟苯基)丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-2-(((1-((R)-2-(4-氟苯基)丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-96反应，得到呈非对映异构体(化合物86)的混合物形式的标题产物。通过手性HPLC(Chiralpak AD-H 30％1:1MeOH:EtOH/己烷0.2％DEA)分离所述非对映异构体以得到：

非对映异构体A：滞留时间：14.96min.；99％ee；重20mg；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.97(s,1H),7.73(s,1H),7.25-7.08(m,2H),6.93(dd,J＝12.1,5.3Hz,2H),4.56-4.24(m,5H),3.19(s,3H),2.32(s,3H),1.54(dd,J＝6.9,2.2Hz,3H),1.30(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝424.23。

非对映异构体B：滞留时间：18.04min.；99％ee；重20mg；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.97(s,1H),7.73(s,1H),7.25-7.08(m,2H),6.93(dd,J＝12.1,5.3Hz,2H),4.56-4.24(m,5H),3.19(s,3H),2.32(s,3H),1.54(dd,J＝6.9,2.2Hz,3H),1.30(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝424.23。

化合物92：(7S)-2-(((1-(2-(4-氟苯基)-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-50反应以得到标题产物；92％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.42(s,1H),7.27(dd,J＝9.0,5.3Hz,2H),6.94(t,J＝8.9Hz,2H),6.86(s,1H),4.42-4.26(m,3H),4.23(s,2H),3.19(s,3H),2.29(s,3H),1.54(d,J＝6.9Hz,3H),1.34(d,J＝4.4Hz,6H)；ESMS(M+1)＝438.23。化合物101及化合物102：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((R)-1-苯基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((S)-1-苯基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-97反应，得到呈非对映异构体(化合物93)的混合物形式的标题产物。通过手性HPLC(Chiralpak OJ-H 30％1:1MeOH:EtOH(0.2％DEA)/70％己烷)分离所述非对映异构体以得到：

非对映异构体A：RT＝7.55min；重164.9mg；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.86(s,1H),7.20-7.07(m,2H),6.97(d,J＝6.9Hz,1H),4.46(d,J＝4.3Hz,1H),4.31(q,J＝6.9Hz,1H),3.14(dd,J＝11.8,5.5Hz,3H),2.31(s,2H),1.62(d,J＝5.8Hz,2H),1.52(d,J＝6.9Hz,2H)。ESMS(M+1)＝406.22。

非对映异构体B：RT＝13.30min.；重141.7mg；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.11(s,1H),8.05(s,1H),7.25-7.07(m,3H),7.01(dd,J＝7.7,1.6Hz,2H),4.51(s,2H),4.32(q,J＝6.9Hz,1H),3.26-3.04(m,5H),2.32(s,3H),1.65(d,J＝6.8Hz,3H),1.54(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝406.22。

化合物99：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.在0℃下向(7S)-4-(4-(((4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸异丙酯(88mg，0.193mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中添加BBr

向(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(化合物99；60mg，0.162mmol)及DIPEA(85uL，0.486mmol)于二氯甲烷(1ml)中的悬浮液中添加适当酸氯化物(0.162mmol)。在室温下搅拌所得溶液16小时，用水(2ml)淬灭。分离有机层且在氮气流下蒸发溶剂。通过反相色谱(C18柱；梯度5-95％ACN/水0.1％TFA)纯化残余物。蒸发所需级分，且将经纯化物质溶解于1ml甲醇中并使其穿过PL-HCO3树脂滤筒以得到所需产物。

化合物124：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(1-(3,4,5-三氟苯甲酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

自(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与3,4,5-三氟苯甲酰氯的反应获得15mg标题产物。

化合物125：(7S)-2-(((1-(1-(4-氟苯甲酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

自(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与4-氟苯甲酰氯的反应获得6.6mg标题产物。

化合物130：(7S)-2-(((1-(1-(4-氟苯基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

在室温下向(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(化合物99；100mg，0.270mg)及1-溴-4-氟苯(57.0mg，0.324mmol)于叔丁醇(3mL)中的悬浮液中添加NaOtBu(540mL，2M于THF中，1.08mmol)。用N

化合物179：(7S)-2-(((1-(1-(3,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

于放入1,3,5-三氟苯(化合物99；325mg，2.45mmol)的密封管中添加(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(140mg，0.3779mmol)于DMSO(1mL)及三乙胺(0.5ml)中的溶液，且在70℃下加热20小时。反应不完全，因此在170℃下加热2小时。将反应物冷却至室温，且倒入75ml水中并用乙酸乙酯(3×75ml)萃取。用盐水洗涤合并的萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

化合物131及132：(7S)-2-[[1-[(2S)-2-(4-氟苯基)-2-羟基-乙基]吡唑-4-基]甲氨基]-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮及(7S)-2-[[1-[(2R)-2-(4-氟苯基)-2-羟基-乙基]吡唑-4-基]甲氨基]-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮.

在室温下将硼氢化钠(36mg，0.9446mmol)添加至(7S)-2-[[1-[2-(4-氟苯基)-2-氧代-乙基]吡唑-4-基]甲氨基]-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(200mg，0.4723mmol)于甲醇(10mL)中的溶液中。搅拌反应物2小时，接着添加2ml丙酮以淬火反应物。真空移除溶剂，且将所得粗产物溶解于5ml水中并用乙酸乙酯(2×25ml)萃取。合并的萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物，其通过柱色谱、用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脱来纯化。真空蒸发所需级分，得到135mg(62％产率)呈非对映异构体(化合物100)的混合物形式的标题产物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,1H),7.47(d,J＝0.6Hz,1H),7.33(d,J＝0.7Hz,1H),7.32-7.25(m,2H),7.09(td,J＝9.0,0.9Hz,2H),6.53(t,J＝5.9Hz,1H),5.64(d,J＝4.7Hz,1H),4.89(q,J＝5.8Hz,1H),4.25-4.07(m,4H),4.05-3.91(m,1H),2.95(s,3H),2.13(s,3H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝426.36。

通过手性HPLC(OJ-H柱，20×250mm；70％己烷/15％甲醇/15％乙醇/0.2％二乙胺，等度；20ml/min流速)分离所述非对映异构体以得到18mg各非对映异构体：

非对映异构体A：Rt 8.897min.；90.8％ee

非对映异构体B：Rt 11.245min.；86％ee。

化合物128：(7S)-2-(((1-(2-(4-氟苯基)-2-羟丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

在-78℃下向(7S)-2-[[1-[2-(4-氟苯基)-2-氧代-乙基]吡唑-4-基]甲氨基]-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(125mg，0.29mmol)于无水THF中的溶液中添加MeMgBr(405.5mg，393.7μL，3M，1.18mmol)。在-78℃下搅拌反应物2小时。将反应物升温至室温且搅拌24小时。用饱和氯化铵淬灭反应物，且用二氯甲烷萃取。真空蒸发萃取物，得到粗产物。产物及未反应起始物质不可分离，因此将粗产物溶解于甲醇中，且将0.3ml肼添加至溶液并搅拌2小时。真空蒸发混合物，且通过柱色谱、用二氯甲烷至0-20％甲醇/二氯甲烷的梯度洗脱来纯化粗产物。蒸发所需级分以得到所需产物，重6.9mg(5％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.48(s,1H),7.79(brs,1H),7.45(s,1H),7.39(dd,J＝8.7,5.6Hz,2H),7.32(s,1H),7.04(t,J＝8.9Hz,2H),5.48(brs,1H),4.39-4.30(m,2H),4.24(s,2H),3.15(s,3H),2.26(s,3H),1.42(d,J＝6.9Hz,3H),1.36(d,J＝1.1Hz,3H)；ESMS(M+1)＝440.32。

化合物50：(7S)-2-(((1-(3,5-二氟-4-羟基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-(((1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(34mg，0.07781mmol)溶解于10ml二氯甲烷中。将三溴化硼(400μl；0.4mmol)于二氯甲烷中的1M溶液添加至溶液且在室温下搅拌18小时。将甲醇添加至混合物以淬火反应物。真空蒸发溶剂以得到残余物，将其溶解于DMSO中，过滤，且通过反相制备型HPLC(乙腈/水/TFA)纯化。通过穿过PL-HCO3MPSPE滤筒中和所需级分。蒸发溶剂，得到14mg所需产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.64(d,J＝0.8Hz,1H),7.52(d,J＝0.8Hz,1H),7.40(s,1H),6.83-6.74(m,2H),5.20(s,2H),4.40(s,2H),4.14(q,J＝6.9Hz,1H),3.08(s,3H),1.42(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝416.26。

化合物73及74：(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-98反应以得到呈位置异构体的混合物形式的标题产物。混合物不可通过柱色谱分离。通过SFC(柱：AD-H，110×250mm；40％甲醇(0.2％二乙胺/60％CO

峰A：Rt 0.783分钟。主要，(93mg，46％产率)1H NMR(300MHz,CDCl

峰B：Rt 1.595分钟。次要，(53mg，26％产率)1H NMR(400MHz,CDCl

2B.表5的化合物的制备

表5.

化合物138：(7S)-2-(((1-((3,5-二甲基异噁唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-85反应以得到标题产物；48％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.58(s,1H),7.47(s,1H),5.11(s,2H),4.36(s,2H),4.07(q,J＝6.9Hz,1H),3.04(s,3H),2.36(s,3H),2.17(s,3H),2.06(s,3H),1.32(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝397.15。手性HPLC(ChiralPAK IC柱；20％甲醇/30％乙醇/50％己烷，等度)Rt 13.781min.；98％ee。

化合物139：(7S)-2-(((1-((1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-86反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.49(s,1H),7.48(s,1H),7.43(s,1H),5.09(s,1H),4.35(s,2H),4.06(q,J＝6.8Hz,1H),3.77(s,3H),3.03(s,3H),2.16(s,3H),2.08(s,3H),1.32(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝396.16。手性HPLC(ChiralPAK IC柱；20％甲醇/30％乙醇/50％己烷，等度)Rt 15.157min.；97％ee。

化合物158：(7S)-2-(((1-((3-乙基-5-甲基异噁唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-87反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.54(s,1H),7.46(s,1H),5.10(s,2H),4.36(s,2H),4.07(q,J＝6.8Hz,1H),3.04(s,3H),2.47(q,J＝7.6Hz,2H),2.36(s,3H),2.17(s,3H),1.33(d,J＝6.8Hz,3H),1.05(t,J＝7.6Hz,3H)；ESMS(M+H)＝411.29。

化合物159：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-88反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.69(s,1H),7.60(s,1H),7.51(s,1H),5.25(s,2H),4.54-4.41(m,2H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),3.90(s,3H),3.23(s,3H),2.28(s,3H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+H)＝450.22。

化合物160：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-89反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.81(s,1H),7.67(s,1H),7.40(s,1H),6.68-6.51(m,2H),5.44(s,2H),4.30-4.12(m,2H),3.99(q,J＝6.8Hz,1H),3.88(s,3H),2.93(s,3H),2.12(s,3H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝450.17；手性HPLC(ChiralPAK IC柱；20％甲醇/30％乙醇/50％己烷，等度)Rt 7.083min.；97％ee。[α]

化合物189：(7S)-2-(((1-((1-乙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-90反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,CDCl

化合物190：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-91反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,CDCl

化合物191：(7S)-2-(((1-((1-乙基-1H-咪唑-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-92反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,CDCl

化合物192：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-93反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.64(s,1H),7.49(s,1H),6.95-6.86(m,1H),6.49(d,J＝3.4Hz,1H),5.35(s,2H),4.39(s,2H),4.07(q,J＝6.8Hz,1H),3.05(s,3H),2.17(s,3H),1.33(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝436.29。手性HPLC(ChiralPAK IC柱；20％甲醇/30％乙醇/50％己烷，等度)Rt 6.85min.；91.6％ee。

化合物193：(7S)-2-(((1-((2,5-二甲基噁唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-94反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.58(s,1H),7.44(s,1H),5.08(s,2H),4.37(s,2H),4.06(q,J＝6.8Hz,1H),3.05(s,3H),2.35(s,3H),2.23(s,3H),2.17(s,3H),1.32(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝397.31。手性HPLC(ChiralPAK IC柱；20％甲醇/30％乙醇/50％己烷，等度)Rt11.821min.；92％ee。

化合物40R

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与(5-(4-氟苯基)呋喃-2-基)甲胺反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.71-7.59(m,2H),7.16-7.03(m,2H),6.63(d,J＝3.3Hz,1H),6.33(dt,J＝3.3,0.8Hz,1H),4.63-4.56(m,2H),4.14(q,J＝6.9Hz,1H),3.13(s,3H),2.22(s,3H),1.39(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝382.31。

化合物43R

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与(5-(4-氟苯基)呋喃-2-基)甲胺反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与(4-苯基噻唑-2-基)甲胺反应以得到标题产物。ESMS(M+1)＝381.33。

化合物60：(S)-4,7,8-三甲基-2-(((2-(哌啶-1-基)吡啶-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与(2-(哌啶-1-基)吡啶-4-基)甲胺反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.85(d,J＝6.6Hz,1H),7.34(s,1H),6.94(d,J＝6.5Hz,1H),4.71(s,2H),4.28(q,J＝6.9Hz,1H),3.71(d,J＝5.5Hz,4H),3.14(s,3H),2.34(s,3H),1.76(s,6H),1.51(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝382.32。

化合物62：(S)-4,7,8-三甲基-2-(((2-吗啉基吡啶-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与(2-吗啉基吡啶-4-基)甲胺反应以得到标题产物。ESMS(M+1)＝384.39。

2C.表6的化合物的制备.

表6.

化合物161：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(5-甲基-2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-153反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物162：(7S)-2-(((1-((5-氟嘧啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-151反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物163：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-152反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物164：(7S)-7,8-二甲基-2-(((1-(5-甲基-2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与B-153反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物165：(7S)-2-(((1-((5-氟嘧啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与B-151反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物166：(7S)-7,8-二甲基-2-(((1-((2-甲基嘧啶-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与B-152反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

2D.表7的化合物的制备

通用流程

表7.

化合物136：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-氯-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(A-2；40g，176.5mmol)、(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐(B-52；78.4g，212mmol)及叔丁醇钠(59.4g，618mmol)溶解于叔丁醇(640ml)中且用氮气吹扫。将tBuXPhos Pd Gen 1(2.42g，3.53mmol)添加至混合物且观测到放热(温度升至48℃)。将反应温度维持在50℃达30分钟。真空移除溶剂，且将所得残余物溶解于水(1公升)中，并用二氯甲烷(2×600ml)萃取。用盐水洗涤萃取物，经无水硫酸钠干燥且过滤。将硅藻土(110g)添加至滤液，且真空蒸发溶剂。将固体残余物无水装载于1.5kg硅胶上且用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脱。真空蒸发所需级分，得到绿色泡沫。将泡沫产物溶解于600ml二氯甲烷中，且添加35g BiotageMp-TMT树脂并搅拌隔夜。经由氟罗里硅土垫过滤溶剂，且用乙酸乙酯洗涤。真空蒸发滤液。将庚烷(800ml)添加至所得物质且搅拌30分钟，接着真空过滤，随后用庚烷洗涤。用庚烷洗涤该物质，随后在真空烘箱中于55℃下干燥以得到标题产物，64g(80.4％产率)。

化合物177：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-52反应以得到标题产物。产率20％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.66-8.60(m,1H),7.97-7.81(m,2H),7.77(s,1H),7.44(s,1H),6.83(t,J＝6.0Hz,1H),5.45(s,2H),4.25(dd,J＝6.0,2.3Hz,2H),4.01(q,J＝6.7Hz,1H),3.18(s,3H),2.92(s,3H),2.27(s,3H),1.05(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝461.43；手性HPLC(ChiralPAK IC柱；20％MeOH/30％EtOH/50％己烷(0.1％二乙胺)，等度)Rt 10.137min.(99％ee)。

化合物77：(7S)-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-53反应以得到标题化合物；88mg，产率38.31％；1H NMR(400MHz,CDCl

化合物82：(7S)-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-53反应以得到标题化合物；产率58.05％；

化合物94：(7S)-2-(((1-((6-氟-4-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序A如下制备化合物：使A-2与B-54反应以得到标题化合物；产率32％；1H NMR(300MHz,CDCl

化合物129：(7S)-2-(((1-((6-异丙氧基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将氢化钠(12.48mg，0.5200mmol)添加至(S)-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(44mg，0.1040mmol)于异丙醇(1.5mL)中的溶液中。在60℃下加热混合物3小时。用饱和NH4Cl溶液淬灭反应物且用乙酸乙酯(2×15mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机萃取物，经MgSO4干燥且真空浓缩，得到粗产物，其通过柱色谱(SiO

通过如关于化合物129所报导的通用程序制备以下三种化合物，化合物135、167及168。

化合物135：(7S)-2-(((1-((6-异丙氧基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过关于化合物129所报导的程序如下制备化合物：使(7S)-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与异丙醇反应以得到标题化合物；产率93％；1H NMR(300MHz,CDCl

化合物167：(7S)-2-(((1-((6-(叔丁氧基)-4-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过关于化合物129所报导的程序如下制备化合物：使叔丁醇与(S)-2-(((1-((6-氟-4-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮反应以得到标题化合物；产率0.7％；1H NMR(300MHz,CDCl

化合物168：(7S)-2-(((1-((6-异丙氧基-4-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过关于化合物129所报导的程序如下制备化合物：使异丙醇与(7S)-2-(((1-((6-氟-4-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(化合物94)反应以得到标题化合物。产率1.4％。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物10：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((6-(甲氨基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(方法D).

向(7S)-2-[[1-[(6-氟-3-吡啶基)甲基]吡唑-4-基]甲氨基]-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(100mg，0.2486mmol)于MeOH(2mL)中的溶液中添加甲胺(68.26μL，4.37M，0.2983mmol)，将混合物在密封容器中加热过周末。LCMS指示反应完成。移除溶剂后，于反相C18层析(ACN/H2O 0-50％于20cv中)上纯化粗物质，得到所需产物。产率60％。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物173：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((6-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-55反应以得到标题化合物；产率82.5％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.17(s,1H),8.36(s,1H),7.73(s,1H),7.52(dd,J＝7.9,2.4Hz,1H),7.41(s,1H),7.20(d,J＝8.0Hz,1H),5.26(s,2H),4.30(d,J＝5.8Hz,2H),4.16(q,J＝6.9Hz,1H),3.04(s,3H),2.43(s,3H),2.19(s,3H),1.30(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝393.31。

化合物174及化合物175：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((S)-1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((R)-1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-150反应以得到非对映异构体(化合物172)的混合物；64％产率。通过SFC(IC柱，10×250mm；40％乙醇(0.2％二乙胺)/60％CO2，等度；10ml/min)分离所述非对映异构体以得到非对映异构体A及非对映异构体B。

非对映异构体A：手性HPLC(Chiral PAK IC柱，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)：Rt＝6.81分钟；99％ee。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.81(s,1H),8.62(s,1H),7.86(d,J＝1.5Hz,2H),7.79(d,J＝0.8Hz,1H),7.44(d,J＝0.8Hz,1H),6.58(brs,1H),5.77(q,J＝7.1Hz,1H),4.23(d,J＝6.0Hz,2H),4.00(q,J＝6.9Hz,1H),2.94(s,3H),2.13(s,3H),1.82(d,J＝7.1Hz,3H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝461.48。

非对映异构体B：手性HPLC(Chiral PAK IC柱，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)：Rt＝7.17分钟；99％ee。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.87(s,1H),8.62(s,1H),7.86(d,J＝1.5Hz,2H),7.80(d,J＝0.9Hz,1H),7.45(d,J＝0.8Hz,1H),6.68(brs,1H),5.78(q,J＝7.1Hz,1H),4.25(d,J＝5.9Hz,2H),4.02(q,J＝6.8Hz,1H),2.95(s,3H),2.14(s,3H),1.82(d,J＝7.1Hz,3H),1.21(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝461.48。

化合物176：(7S)-5-((4-(((4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)2-氰基吡啶

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-56反应以得到标题化合物；15％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.79(s,1H),8.59(d,J＝2.1Hz,1H),8.00(d,J＝8.0Hz,1H),7.83-7.70(m,2H),7.42(s,1H),6.56(t,J＝6.0Hz,1H),5.44(s,2H),4.22(dd,J＝6.2,1.5Hz,2H),3.99(q,J＝6.8Hz,1H),2.93(s,3H),2.13(s,3H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝404.3。

化合物178：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((2-甲基吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与(1-((2-甲基吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐反应以得到标题化合物；43％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.62(d,J＝6.2Hz,1H),7.89(s,1H),7.66(s,1H),7.58(s,1H),7.49(d,J＝6.2Hz,1H),5.65(s,2H),4.57(s,2H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),3.27(s,3H),2.75(s,3H),2.31(s,3H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝393.30。

化合物180：(7S)-2-(((1-((2-氟吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-58反应以得到标题化合物；14％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-59反应以得到标题化合物；51％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-60反应以得到标题化合物；56％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-61反应以得到标题化合物；41％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.95(t,J＝7.8Hz,1H),7.75(s,1H),7.70(d,J＝7.8Hz,1H),7.54(s,1H),7.20(d,J＝7.9Hz,1H),5.48(s,2H),4.43(s,2H),4.09(q,J＝6.9Hz,1H),3.08(s,3H),2.19(s,3H),1.35(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝447.28。

化合物187：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((3-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-62反应以得到标题化合物；48％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.86(s,1H),8.65(d,J＝5.3Hz,1H),7.75(s,1H),7.61(s,1H),6.66(d,J＝5.3Hz,1H),5.61(s,2H),4.45(s,2H),4.09(q,J＝6.8Hz,1H),3.08(s,3H),2.19(s,3H),1.34(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝447.32。手性HPLC(ChiralpakAD-H；50％(1:1MeOH-EtOH)/50％庚烷(0.2％二乙胺)：70％ee。

化合物188：(S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((2-甲基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-63反应以得到标题化合物；17％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物194：(7S)-2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

步骤1：N-(2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-甲基-L-丙氨酸甲酯

将中间体A-40(N-(2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-甲基-L-丙氨酸甲酯；400mg，1.39mmol)及中间体B-67((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐；482mg，1.45mmol)的混合物溶解于N-甲基吡咯烷-2-酮(5ml)及三乙胺(1ml，7mmol)中，且在60℃下加热2小时。将反应物冷却至室温且倒入冰中，产生黄色沉淀物。通过真空过滤收集沉淀物，随后通过柱色谱(SiO

步骤2：(7S)-2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将铂/碳(30mg)添加至N-(2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-甲基-L-丙氨酸甲酯(150mg，0.31mmol)于四氢呋喃(5ml)中的溶液中且置于50psi的氢气下16小时。经由硅藻土及氟罗里硅土过滤反应物并用二氯甲烷充分冲洗。真空蒸发溶剂，且通过柱色谱、用0-10％甲醇/二氯甲烷梯度洗脱来纯化粗产物。蒸发所需级分以得到标题产物，47mg(35％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物195：(7S)-7,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与B-52反应以得到标题化合物；15％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.53(s,1H),7.83-7.74(m,1H),7.72(s,1H),7.53(s,1H),7.37(s,1H),5.45(s,1H),4.38(s,1H),4.10(q,J＝6.9Hz,1H),3.05(s,1H),1.38(d,J＝6.9Hz,1H)。ESMS(M+1)＝433.28。手性HPLC(Chiral PAK IC柱，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)：Rt＝16.928min.(97.8％ee)。

化合物196：(7S)-2-(((1-((6-(二甲氨基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(200mg，0.4972mmol)及N,N-二甲胺(75.55μL，0.5966mmol)溶解于甲醇中且在70℃下于密封管中加热16小时。真空蒸发反应物，且通过柱色谱(SiO

化合物197：(7S)-2-(((1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-64反应以得到标题化合物；40％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物198：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将N-(2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-甲基-L-丙氨酸甲酯(化合物194，步骤1；75mg，0.13mmol)及10％钯/碳(13mg)溶解于甲醇(5ml)中且在50psi的氢气下氢化16小时。经由硅藻土过滤反应物且真空蒸发滤液。通过反相色谱(C18)纯化粗产物以得到标题产物，重16mg(33％产率)。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.81-8.67(m,1H),8.65(s,1H),8.30(d,J＝8.2Hz,1H),7.94(t,J＝7.1Hz,1H),7.80(s,1H),7.61-7.44(m,1H),5.49(d,J＝4.3Hz,2H),4.45(s,2H),4.30-4.09(m,1H),3.20-3.05(m,3H),2.30-2.04(m,3H),1.54-1.32(m,3H)；ESMS(M+1)＝379.39。化合物199：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((5-甲基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-66反应以得到标题化合物；69％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,1H),8.46-8.36(m,1H),7.74(s,1H),7.73-7.68(m,1H),7.41(d,J＝0.8Hz,1H),6.61(t,J＝6.0Hz,1H),5.39(s,2H),4.22(dd,J＝6.1,1.9Hz,2H),4.01(dd,J＝11.0,7.0Hz,1H),2.93(s,3H),2.41(d,J＝2.2Hz,3H),2.13(s,3H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝461.39。

化合物185：(7S)-2-(((1-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用方法B如下制备化合物：使中间体A-2与[1-[(2-氯-4-吡啶基)甲基]吡唑-4-基]甲胺盐酸盐反应以得到标题化合物；58％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.30(d,J＝5.1Hz,1H),7.78(d,J＝8.4Hz,1H),7.60(d,J＝7.4Hz,1H),7.13(d,J＝5.2Hz,1H),7.11(s,1H),5.40(s,2H),4.54(s,2H),4.29(t,J＝6.9Hz,1H),3.25(d,J＝3.6Hz,3H),2.29(s,3H),1.51(dd,J＝14.4,7.2Hz,3H)。ESMS(M+1)＝413.25。

化合物200：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-68反应以得到标题化合物；27％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.82(s,1H),8.05(dd,J＝8.3,2.1Hz,1H),7.74(s,1H),7.54(s,1H),7.15(d,J＝8.2Hz,1H),5.50(s,2H),4.42(s,2H),4.07(q,J＝6.8Hz,1H),3.06(s,3H),2.18(s,3H),1.32(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝447.28。

化合物201：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-69反应以得到标题化合物；11％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.76(d,J＝5.1Hz,1H),7.84(s,1H),7.64-7.55(m,2H),7.32(s,1H),5.52(s,2H),4.54(s,2H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),3.25(s,2H),2.28(s,2H),1.52(d,J＝6.9Hz,2H)。ESMS(M+1)＝447.28。

化合物12：(7S)-2-(((1-((2-(二甲氨基)吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用方法B如下制备化合物：使A-2与4-((4-(氨基甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-N,N-二甲基吡啶-2-胺二盐酸盐反应以得到标题化合物；46％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.85(d,J＝6.0Hz,1H),7.83(d,J＝6.7Hz,1H),7.63(s,1H),6.92(s,1H),6.61(dd,J＝6.7,1.4Hz,1H),5.45(s,2H),4.55(s,2H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),3.26(d,J＝6.3Hz,3H),3.25(s,6H),2.30(s,3H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝422.39。

化合物202：(7S)-2-(((1-((2-羟基吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用方法如下制备化合物：使中间体A-2与(1-((2-甲氧基-4-吡啶基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐反应。在反应条件下，失去甲氧基以得到标题化合物；52％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.79(s,1H),7.59(d,J＝7.2Hz,1H),7.42(d,J＝6.8Hz,1H),6.26(dd,J＝6.8,1.4Hz,1H),6.07(s,1H),5.25(d,J＝10.6Hz,2H),4.53(s,2H),4.30(p,J＝7.0Hz,1H),3.26-3.22(m,3H),2.29(s,3H),1.58-1.49(m,3H)；ESMS(M+1)＝395.35。

化合物203：(7S)-2-(((1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用方法A如下制备化合物：使A-2与(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐反应以得到标题化合物；21％产率。1H NMR(400MHz,CDCl

化合物204：(7S)-4-((4-(((4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)2-氰基吡啶

通过通用方法B如下制备化合物：使A-2与4-((4-(氨基甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)2-氰基吡啶盐酸盐反应以得到标题产物；34％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.63(d,J＝5.1Hz,1H),7.82(s,1H),7.62(s,1H),7.48(s,1H),7.40(d,J＝4.8Hz,1H),5.46(s,2H),4.56(d,J＝15.7Hz,2H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),3.25(s,3H),2.29(s,3H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝404.17。

化合物206：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((5-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-70反应以得到标题化合物；21％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-71反应以得到标题化合物；49％产率。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.62(d,J＝5.0Hz,1H),7.75(s,1H),7.58(s,1H),7.50(s,1H),7.33(d,J＝4.9Hz,1H),5.47(s,2H),4.44(s,2H),4.09(q,J＝6.9Hz,1H),3.07(s,3H),2.19(s,3H),1.34(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS＝447.28。手性HPLC(Chiralpak AD-H；50％(甲醇:乙醇/50％庚烷)：99.3％ee。

化合物210：(7S)-2-(((1-((4-甲氧基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-72反应以得到标题化合物；22％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.08(s,1H),7.67(s,1H),7.47(d,J＝15.8Hz,2H),5.49(s,1H),5.36(s,2H),4.39(s,2H),4.00(s,3H),3.05(s,3H),2.18(s,3H),1.32(d,J＝6.6Hz,3H)。ESMS(M+1)＝477.42。手性HPLC(Chiralpak IC，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)。Rt＝8.40min.；97.5％ee。

化合物211：(7S)-2-(((1-((6-(叔丁基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-73反应以得到标题化合物；89％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.82(s,1H),8.40(d,J＝2.3Hz,1H),7.77-7.65(s,1H),7.54(dd,J＝8.2,2.4Hz,1H),7.37(td,J＝4.1,3.6,0.9Hz,2H),6.58(t,J＝6.0Hz,1H),5.25(s,2H),4.21(s,1H),3.99(q,J＝6.8Hz,1H),2.93(s,3H),2.12(s,3H),1.27(s,9H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝435.45。手性HPLC(Chiralpak IC，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)。Rt＝8.59min.；97.9％ee。

化合物209：(7S)-2-(((1-((5-氟-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-74反应以得到标题化合物；29％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-75反应以得到标题化合物；18％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.70(s,1H),7.55(s,1H),7.33(s,2H),5.35(s,2H),4.43(s,2H),4.24-3.90(m,4H),3.08(s,3H),2.21(s,3H),1.35(d,J＝6.6Hz,3H)。ESMS(M+1)＝477.33。手性HPLC(Chiralpak IC，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)。Rt＝5.59min.；95.9％ee。

化合物215：(7S)-2-(((1-((6-甲氧基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-76反应以得到标题化合物；78％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物213：(7S)-2-(((1-((5-甲氧基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-77反应以得到标题化合物；44％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.12-7.97(m,1H),7.80(d,J＝2.6Hz,1H),7.62(d,J＝2.6Hz,1H),7.55(s,1H),5.60-5.33(m,2H),4.58-4.31(m,2H),4.15(tdd,J＝6.8,6.3,5.6,2.2Hz,1H),4.06-3.77(m,3H),3.12(dt,J＝3.6,1.7Hz,3H),2.26(dd,J＝2.5,1.1Hz,3H),1.51-1.19(m,3H)；ESMS(M+1)＝477.28。手性HPLC(Chiralpak IC，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)。Rt＝5.59min.；92％ee。

化合物208：(7S)-2-(((1-((5-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-78反应以得到标题化合物；12％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物205：(7S)-2-(((1-((6-氟-4-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-79反应以得到标题化合物；16％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物385：(7S)-8-异丙基-4,7-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-4与B-52反应以得到标题化合物；69％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.06(s,1H),10.49(s,1H),8.64(s,1H),7.99(s,1H),7.94-7.77(m,3H),7.49(s,1H),5.49(s,2H),4.61-4.38(m,3H),4.31(q,J＝6.8Hz,1H),2.29(s,3H),1.46-1.15(m,9H)；ESMS(M+1)＝475.24。手性HPLC(Chiralpak IC，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)。Rt＝6.045min.；95.7％ee。

化合物220：(7S)-4,8-二甲基-7-丙基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-7与B-52反应以得到呈对映异构体的混合物形式的标题产物，所述对映异构体通过SFC(柱AD-H，10×250mm；30％乙醇(0.2％二乙胺)/70％CO2，等度)分离以得到标题产物(峰A：Rt＝0.739min.；99.6％ee)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.87(s,1H),8.71-8.54(m,1H),7.87(td,J＝8.1,1.5Hz,2H),7.76(s,1H),7.42(s,1H),6.59(t,J＝5.9Hz,1H),5.45(s,2H),4.22(d,J＝6.0Hz,2H),4.00(dd,J＝6.8,4.0Hz,1H),2.96(s,3H),2.11(s,3H),1.81-1.48(m,2H),1.29-1.10(m,2H),0.83(t,J＝7.3Hz,3H)。ESMS(M+1)＝475.3。

化合物383：(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-9与B-52反应以得到标题化合物；66％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物384：(7S)-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-9与B-53反应以得到标题化合物；16％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.14-8.04(m,1H),7.92-7.77(m,2H),7.62(d,J＝0.7Hz,1H),7.09-6.99(m,1H),5.38(s,2H),4.52(s,2H),4.14(d,J＝3.8Hz,1H),3.24(s,3H),2.36-2.29(m,2H),2.27(s,3H),1.09(d,J＝7.0Hz,3H),0.85(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝425.32。手性HPLC(Chiralpak IC，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)。Rt＝9.887min.(98.4％ee)；[α]

化合物400：(7S)-4,7-二甲基-8-(甲基-d3)-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-38与B-52反应以得到标题化合物；84％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物386：(7S)-7-环丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A6与B-52反应以得到标题化合物；46％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.86(s,1H),8.63(d,J＝1.3Hz,1H),7.87(td,J＝7.8,1.5Hz,2H),7.77(s,1H),7.44(d,J＝0.7Hz,1H),6.64(t,J＝6.0Hz,1H),5.45(s,2H),4.24(dd,J＝6.0,3.1Hz,2H),3.31(d,J＝8.9Hz,1H),3.02(s,3H),2.14(s,3H),0.95-0.72(m,1H),0.60-0.26(m,4H)；ESMS(M+1)＝473.32。

化合物387：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((2-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使A-2与B-81反应以得到标题化合物；71％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.80(s,1H),7.74(d,J＝8.1Hz,1H),7.68(d,J＝0.8Hz,1H),7.49(d,J＝8.1Hz,1H),7.43(d,J＝0.8Hz,1H),6.56(t,J＝6.1Hz,1H),5.48(d,J＝7.6Hz,2H),5.46(s,1H),5.16(s,1H),4.24(dd,J＝6.0,2.4Hz,2H),3.99(q,J＝6.8Hz,1H),2.94(s,3H),2.13(s,3H),2.05(t,J＝1.2Hz,3H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝487.23。

化合物388：(7S)-2-(((1-((2-异丙基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

向(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((2-(丙-1-烯-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(220mg，0.44mmol)于20ml甲醇中的溶液添加10％Pd/C(100mg)。将反应物置于氢气氛围(1个大气压)下，且在室温下搅拌18小时。经由硅藻土过滤反应物且真空蒸发滤液。通过柱色谱、用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脱来纯化粗产物。蒸发所需级分，得到产物，重204mg(90％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.80(s,1H),7.69(d,J＝0.8Hz,1H),7.65(s,1H),7.49(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝0.8Hz,1H),6.56(t,J＝6.1Hz,1H),5.49(s,2H),4.23(dd,J＝6.1,2.6Hz,2H),3.99(q,J＝6.8Hz,1H),3.40(h,J＝6.7Hz,1H),2.92(s,3H),2.12(s,3H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H),1.11(d,J＝6.6Hz,6H)。ESMS(M+1)＝489.25。

化合物238：4,7,7,8-四甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法B如下制备化合物：使中间体A-11与B-52反应以得到标题化合物；12.6％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物237：5,7,7,8-四甲基-2-(((1-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-14与B-61反应以得到标题化合物；25％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物236：5,7,7,8-四甲基-2-(((1-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-14与B-59反应以得到标题化合物；35％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物186：(7S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-8与B-52反应以得到标题化合物；80％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.87(s,1H),8.63(s,1H),7.85(q,J＝8.1Hz,2H),7.75(s,1H),7.42(s,1H),6.55(t,J＝6.2Hz,1H),5.45(s,2H),4.22(d,J＝6.0Hz,2H),3.99(dd,J＝6.4,3.6Hz,1H),2.96(s,3H),2.11(s,3H),1.72(m,2H),0.74(t,J＝7.4Hz,3H)。ESMS(M+1)＝461.48。手性HPLC(Chiralpak IC，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)。Rt＝7.095min.；95.1％ee。

化合物392：(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.60(s,1H),7.48(s,1H),7.22(dd,J＝8.5,5.4Hz,2H),7.03(t,J＝8.8Hz,2H),5.25(s,2H),4.39(s,2H),4.03(q,J＝6.9Hz,1H),3.27(s,3H),3.00(s,3H),2.32(s,3H),1.15(d,J＝6.9Hz,3H)；F19 NMRδ118.04ppm；ESMS(M+1)＝410.36min。手性HPLC(IA柱；40％乙醇/60％己烷，等度)，Rt＝12.775min.(98％ee)[α]

化合物390：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-83反应以得到标题化合物；88％产率。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),8.13(d,J＝2.3Hz,1H),7.74-7.62(m,2H),7.37(s,1H),6.95(d,J＝8.5Hz,1H),6.60(t,J＝6.0Hz,1H),5.24(s,2H),4.97(q,J＝9.1Hz,2H),4.21(d,J＝6.0Hz,2H),3.99(q,J＝6.7Hz,1H),3.17(d,J＝4.9Hz,1H),2.93(s,3H),2.13(s,3H),1.18(d,J＝6.7Hz,3H)。ESMS(M+1)＝477.28。手性HPLC(ChiralpakIC，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)。Rt＝6.773min.；95.1％ee。化合物394：(7S)-7-乙基-2-(((1-((6-氟-5-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-8与B-84反应以得到标题化合物；59％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物391：(S)-7-环丙基-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-6与B-53反应以得到标题化合物；1H NMR(300MHz,CDCl

化合物389：(7S)-7-乙基-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-8与B-53反应以得到标题化合物；13％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物395：(7S)-8-乙基-4,7-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-44与B-52反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.53(s,1H),7.87-7.61(m,3H),7.52(s,1H),5.45(s,2H),4.40(s,2H),4.22-3.85(m,3H),2.17(s,3H),1.42-0.98(m,6H)。ESMS(M+1)＝461.52。手性HPLC(Chiralpak IC，4.6×250mm；50％己烷/30％乙醇/20％甲醇/0.1％二乙胺)Rt 6.831min.；98％ee。

化合物396：(7S)-7-环丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-6与B-89反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.82(s,1H),7.68(s,1H),7.41(s,1H),6.59(d,J＝7.8Hz,2H),5.44(s,2H),4.22(dd,J＝6.0,3.3Hz,2H),3.88(s,3H),3.39-3.26(d,1H),3.02(s,3H),2.14(s,3H),1.01-0.73(m,1H),0.64-0.23(m,4H)。ESMS(M+1)＝476.55。分析性SFC(AD-H柱，4.6×100mm；40％异丙醇(5mM氨)/60％CO

化合物397：(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-9与B-89反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物398：4',8'-二甲基-2'-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5',8'-二氢-6'H-螺[环丁烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-17与B-52反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物239：4',8'-二甲基-2'-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5',8'-二氢-6'H-螺[环丙烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-16与B-52反应以得到标题产物，53％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.28(s,1H),8.05(d,J＝8.6Hz,1H),7.55(s,1H),7.16(dd,J＝13.5,5.8Hz,2H),5.55(s,2H),4.64(d,J＝2.4Hz,2H),4.00(dq,J＝14.4,7.2Hz,1H),3.91-3.75(m,2H),3.56(dq,J＝14.0,6.9Hz,1H),2.20-1.91(m,3H),1.70(s,3H),1.21(t,J＝7.0Hz,6H),0.77(t,J＝7.3Hz,3H)；ESMS(M+1)＝459.41。

化合物212：(7S)-2-(((3,5-二甲基-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使A-2与B-82反应以得到标题化合物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物216及化合物217：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((S)-1-(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)乙基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((R)-1-(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)乙基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使A-2与B-99反应以得到非对映异构体(化合物214)的混合物。该非对映异构体对通过SFC(AD-H柱，10×250mm；40％EtOH(0.2％二乙胺)，60％CO2)分离：

非对映异构体A：SFC(Rt 0.627min.；99.2％ee)；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.81(s,1H),8.62(d,J＝1.9Hz,1H),7.95-7.79(m,2H),7.75(s,1H),7.43(s,1H),6.46(d,J＝8.7Hz,1H),5.44(s,2H),5.01(q,J＝7.3,6.8Hz,1H),3.99(q,J＝6.7Hz,1H),2.92(s,3H),2.12(s,3H),1.37(d,J＝6.8Hz,3H),1.17(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝461.34。

非对映异构体B：SFC(Rt 0.814min.；99.4％ee)；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.80(s,1H),8.63(d,J＝1.3Hz,1H),7.97-7.80(m,2H),7.75(s,1H),7.42(s,1H),6.46(d,J＝8.7Hz,1H),5.44(s,2H),5.17-4.91(m,1H),3.98(q,J＝6.8Hz,1H),2.92(s,3H),2.12(s,3H),1.38(d,J＝6.9Hz,3H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝461.39。

化合物403：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(甲基((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

将(7S)-2-氯-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(A-2；696.2mg，3.010mmol)及N-甲基-1-[1-[[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]甲基]吡唑-4-基]甲胺(三氟乙酸(2))(B-154；1.5g，3.010mmol)于n-BuOH(10.44mL)中的溶液在微波中于165℃下加热30min。用EtOAc稀释粗反应混合物，用饱和NaHCO3溶液洗涤，经MgSO4干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),8.63(s,1H),8.06-7.72(m,3H),7.43(s,1H),5.46(s,2H),4.73-4.40(m,2H),4.02(q,J＝6.7Hz,1H),2.97(s,6H),2.17(s,3H),1.20(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝461.34；手性HPLC(ChiralPAK IC柱；20％甲醇/30％乙醇/50％己烷，等度)Rt 5.410min.(87％ee)。

2E.表8的化合物的制备

化合物246：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-氯-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(A-2)(2.492g，10.99mmol)、3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁胺盐酸盐(B-101)(2.899g，11.43mmol)及t-BuXPhos苯乙胺氯化钯(II)(377.3mg，0.5495mmol)溶解于tBuOH(40mL)中且通过用氮气鼓泡来脱气。将叔丁醇钠(19mL，2M，38mmol)添加至反应物且在室温下于氮气氛围下搅拌反应物2小时。将水(100ml)添加至反应物且用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。合并的萃取物经硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物，其通过柱色谱(SiO2)、用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脱来纯化。真空蒸发所需级分且转化成盐酸盐。重3.9g。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),6.93-6.81(m,2H),6.79(d,J＝7.1Hz,1H),4.83(s,1H),4.39(dd,J＝13.4,6.7Hz,1H),4.00(q,J＝6.8Hz,1H),2.93(s,3H),2.43-2.27(m,4H),2.12(s,3H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝408.3。手性HPLC(IC柱；10％甲醇/10％乙醇/80％己烷(0.1％二乙胺)：Rt10.023min.,96％ee。[α]＝+57.2(c＝0.5,甲醇)。

表8.

化合物242：(7S)-2-((反式3-(4-氟苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-100反应以得到标题产物，138mg(59％产率)。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.00(t,J＝8.7Hz,2H),6.90-6.73(m,2H),4.87(dd,J＝10.4,6.1Hz,1H),4.68-4.50(m,1H),4.32(q,J＝6.8Hz,1H),3.23(s,3H),2.73-2.53(m,4H),2.36(s,3H),1.54(d,J＝6.9Hz,3H)。

化合物246：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-101反应以得到标题产物，22.2g(90.7％产率)；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.82(s,1H),6.85(dd,J＝10.0,6.0Hz,2H),6.77(d,J＝6.9Hz,1H),4.91-4.74(m,1H),4.39(dd,J＝13.1,6.5Hz,1H),4.00(q,J＝6.7Hz,1H),2.93(s,3H),2.47-2.23(m,4H),2.13(s,3H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS＝408.3(M+1)；96％ee(柱：IC柱；10％MeOH-10％EtOH/80％己烷-0.1％二乙胺)

化合物248：(7S)-2-((反式3-(3,4-二氟苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-102反应以得到标题产物，65mg(63％产率)；1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.17(dd,J＝19.5,9.2Hz,1H),6.78(ddd,J＝12.3,6.6,2.9Hz,1H),6.69-6.53(m,1H),4.69-4.50(m,1H),4.32(q,J＝6.9Hz,1H),3.24(s,3H),2.76-2.51(m,4H),2.35(s,3H),1.53(t,J＝9.2Hz,3H)；ESMS(M+H)＝390.29。

化合物262：(7S)-2-((反式-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-103反应以得到标题产物，91mg(27.6％产率)。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.68(s,1H),8.57(d,J＝1.9Hz,1H),8.19(d,J＝9.8Hz,1H),4.79-4.63(m,1H),4.38-4.25(m,1H),3.25(s,3H),2.78(s,4H),2.37(d,J＝6.7Hz,3H),1.54(dd,J＝9.2,5.5Hz,3H)。ESMS(M+H)＝373.23。

化合物276：(7S)-2-((反式-3-((5-氟嘧啶-2-基)氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-155反应以得到标题产物，4.5％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物287：(7S)-2-((反式-3-(3,5-二氟-4-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-104反应以得到标题产物，219mg(84％产率)；1H NMR(300MHz,CDCl

化合物291：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式3-(2,3,4-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-106反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物292：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式3-(2,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-107反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.17(td,J＝10.6,7.6Hz,1H),6.90(dt,J＝11.9,7.8Hz,1H),5.48(s,1H),4.90-4.84(m,1H),4.66-4.47(m,1H),4.07(dt,J＝10.6,4.8Hz,1H),3.06(d,J＝5.1Hz,3H),2.67-2.35(m,4H),2.18(s,3H),1.32(t,J＝5.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝408.42。

化合物295：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(2,4-二氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-108反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物315：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((5-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-110反应以得到标题产物。345mg(55％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ9.00(s,1H),8.89(d,J＝2.4Hz,1H),8.47(s,1H),5.39-5.27(m,1H),4.79-4.66(m,1H),4.33(q,J＝6.9Hz,1H),3.25(s,3H),2.91-2.65(m,4H),2.37(s,3H),1.54(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝423.17。

化合物324：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-112反应以得到标题产物。664mg(68％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.36(d,J＝2.7Hz,1H),7.82(d,J＝8.7Hz,1H),7.55(dd,J＝8.7,2.7Hz,1H),5.19-5.06(m,1H),4.73-4.60(m,1H),4.34(q,J＝6.9Hz,1H),3.26(s,3H),2.85-2.60(m,4H),2.39(s,3H),1.54(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝423.24。

化合物326：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)-环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-113反应以得到标题产物。309mg(61％产率)；1H NMR(400MHz,CDCl

化合物333：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-115反应以得到标题产物。234mg(99％产率)；1H NMR(400MHz,CDCl

化合物335：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-116反应以得到标题产物。314mg(91％产率)；1H NMR(400MHz,CDCl

化合物339：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(对甲苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-117反应以得到标题产物。204mg(64％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.05(d,J＝8.2Hz,2H),6.70(d,J＝8.3Hz,2H),4.57(dd,J＝14.0,7.2Hz,1H),4.28(q,J＝6.9Hz,1H),3.22(s,3H),2.57(dd,J＝10.6,4.7Hz,4H),2.28(d,J＝13.2Hz,3H),2.25(s,3H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝368.38。

化合物340：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(4-(三氟甲基)苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-118反应以得到标题产物。141mg(66％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.57(d,J＝8.5Hz,2H),6.98(d,J＝8.5Hz,2H),5.04-4.90(m,1H),4.61(p,J＝7.1Hz,1H),4.29(q,J＝6.9Hz,1H),3.22(d,J＝4.2Hz,3H),2.64(ddd,J＝6.4,4.1,1.5Hz,4H),2.31(s,3H),1.52(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝422.53。

化合物342：(7S)-2-((反式-3-(4-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-119反应以得到标题产物。131mg(64％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.78(dd,J＝29.6,7.8Hz,4H),4.57(s,1H),4.27(d,J＝6.5Hz,1H),3.73(s,3H),3.21(s,3H),2.71-2.38(m,4H),2.30(s,3H),1.52(d,J＝6.3Hz,3H)；ESMS(M+H)＝384.37。

化合物344：(7S)-2-((反式-3-(4-氟-2-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-120反应以得到标题产物。112mg(59％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.87-6.67(m,2H),6.57(ddd,J＝8.8,8.3,2.9Hz,1H),4.87-4.84(m,1H),4.66-4.52(m,1H),4.33-4.23(m,1H),3.84(s,3H),3.23(s,3H),2.70-2.57(m,2H),2.51(ddd,J＝18.7,12.5,7.2Hz,2H),2.30(d,J＝2.4Hz,3H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝402.3。

化合物347：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-121反应以得到标题产物。170mg(81％产率)；1H NMR(400MHz,CDCl

化合物350：(7S)-2-((反式-3-(3-氟-4-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与反式-3-(3-氟-4-甲氧基苯氧基)环丁-1-胺盐酸盐(Pharmablock)反应以得到标题产物，127mg(75％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.06-6.94(m,1H),6.68-6.60(m,1H),6.56(ddd,J＝9.0,2.9,1.6Hz,1H),4.62-4.52(m,1H),4.33-4.24(m,1H),3.80(s,3H),3.22(s,3H),2.62-2.49(m,4H),2.30(d,J＝3.4Hz,3H),1.55-1.48(m,3H)；ESMS(M+H)＝402.23。

化合物352：(7S)-2-((反式-3-(3,4-二甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-122反应以得到标题产物。2.69g(97％产率)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.76(s,1H),10.50(s,1H),8.37(d,J＝48.2Hz,1H),6.83(d,J＝8.8Hz,1H),6.50(t,J＝4.8Hz,1H),6.39-6.19(m,1H),4.87-4.71(m,1H),4.62-4.41(m,1H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),3.71(d,J＝15.7Hz,3H),3.68(s,3H),3.15(d,J＝14.3Hz,3H),2.29(s,3H),1.39(t,J＝7.1Hz,3H)；ESMS(M+H)＝414.28。

化合物354：(7S)-2-((反式-3-(2-氟-4-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-123反应以得到标题产物。185mg(83％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.86(t,J＝9.2Hz,1H),6.72(dt,J＝20.4,10.2Hz,1H),6.63(ddd,J＝9.0,2.9,1.5Hz,1H),4.88-4.83(m,1H),4.65-4.56(m,1H),4.28(q,J＝6.9Hz,1H),3.74(s,3H),3.23(s,3H),2.67-2.58(m,2H),2.57-2.44(m,2H),2.30(s,3H),1.52(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝402.26。

化合物357：(7S)-2-((反式-3-((6-氟吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-124反应以得到标题产物。124mg(45％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.73(dd,J＝3.0,1.6Hz,1H),7.49-7.39(m,1H),6.99(dd,J＝8.9,3.1Hz,1H),4.98-4.88(m,1H),4.61(p,J＝7.0Hz,1H),4.35-4.23(m,1H),3.22(s,3H),2.67-2.56(m,4H),2.31(s,3H),1.51(d,7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝373.31。

化合物359：(7S)-2-((反式-3-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-125反应以得到标题产物。171mg(53％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.30(td,J＝9.0,1.0Hz,1H),6.84-6.78(m,1H),6.75-6.65(m,1H),4.97-4.85(m,1H),4.66-4.55(m,1H),4.34-4.24(m,1H),3.22(s,3H),2.62(dt,J＝6.4,5.1Hz,4H),2.30(d,J＝3.6Hz,3H),1.52(dd,J＝6.9,3.6Hz,3H)；ESMS(M+H)＝456.31。

化合物361：(7S)-2-((反式-3-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

如下制备：使中间体A-2与B-126反应以得到标题产物，161mg(64％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.77(d,J＝2.9Hz,1H),7.39(dd,J＝8.6,2.8Hz,1H),7.28(T,J＝73.5Hz,1H),6.92(d,J＝8.9Hz,1H),4.97-4.88(m,1H),4.59(dt,J＝14.4,7.1Hz,1H),4.33-4.23(m,1H),3.22(s,3H),2.81-2.50(m,4H),2.31(s,3H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝421.18。

化合物370：(7S)-2-((反式-3-(4-氟-3-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-127反应以得到标题产物。161mg(70％产率)；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.96(dd,J＝11.2,8.9Hz,1H),6.58(dd,J＝7.2,2.9Hz,1H),6.30(dt,J＝8.9,3.1Hz,1H),4.57(dd,J＝13.8,7.2Hz,1H),4.31-4.24(m,1H),3.83(s,3H),3.22(s,3H),2.61-2.54(m,4H),2.30(s,3H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝402.36。

化合物303：(7S)-2-((反式-3-((4-氟苯基)硫基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-109反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.39-7.29(m,2H),7.12-7.02(m,2H),4.60(p,J＝7.5Hz,1H),4.28(q,J＝6.9Hz,1H),3.96-3.82(m,1H),3.21(s,3H),2.67-2.52(m,2H),2.41(ddd,J＝11.9,7.9,3.7Hz,2H),2.28(d,J＝3.1Hz,3H),1.51(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝388.17。

化合物317：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((4-(三氟甲基)苯基)硫基)-环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-111反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,CDCl

化合物329：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((3,4,5-三氟苯基)硫基)-环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-114反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.10-6.92(m,2H),4.68(p,J＝7.5Hz,1H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),4.09-3.97(m,1H),3.23(s,3H),2.82-2.63(m,2H),2.52-2.35(m,2H),2.33(s,3H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝424.23。

化合物349：(7S)-2-((反式-3-(3,5-二氟-4-羟基苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将1M三溴化硼溶液(1.9ml，1.9mmol)添加至化合物287(105mg，0.24mmol)且在室温下搅拌16小时。将甲醇添加至混合物，随后真空蒸发以得到粗产物。通过反相色谱纯化粗产物以得到5.5mg标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.50-6.37(m,2H),4.80-4.72(m,1H),4.62-4.51(m,1H),4.29(q,J＝6.9Hz,1H),3.22(d,J＝6.2Hz,3H),2.64-2.45(m,4H),2.33-2.28(m,3H),1.52(d,J＝7.0Hz,3H)。ESMS(M+1)＝406.18。

2F.表9A的化合物的制备

化合物253：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

将(7S)-2-氯-4,5,7,8-四甲基-7H-喋啶-6-酮(A-3)(2.15g，8.94mmol)及反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁-1-胺盐酸盐(B-101)(2.25g，8.89mmol)溶解于20ml正丁醇中且回流20小时。真空蒸发反应物，得到粗残余物。将粗产物溶解于二氯甲烷中(溶液中可见絮状物质)且用3％甲醇/二氯甲烷洗脱来经硅胶塞过滤。真空蒸发滤液，得到油状物，其变为易碎泡沫，重2.1g。1H(CDCl

表9A.

化合物353：(7S)-2-((反式-3-(3,4-二甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-122反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.83(d,J＝8.8Hz,1H),6.52(d,J＝2.8Hz,1H),6.31(dd,J＝8.7,2.8Hz,1H),4.84-4.79(m,1H),4.60(p,J＝7.0Hz,1H),4.28(q,J＝7.0Hz,1H),3.80(s,3H),3.76(s,3H),3.32(d,J＝3.3Hz,3H),3.22(s,3H),2.64-2.53(m,4H),2.48(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝428.31。

化合物343：(7S)-2-((反式-3-(4-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-119反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.86-6.80(m,2H),6.78-6.72(m,2H),4.84-4.76(m,1H),4.60(p,J＝7.0Hz,1H),4.28(q,J＝7.0Hz,1H),3.73(s,3H),3.34-3.31(m,3H),3.21(s,3H),2.54(tdd,J＝8.7,7.9,3.3Hz,4H),2.48(s,3H),1.36(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝398.37。

化合物355：(7S)-2-((反式-3-(2-氟-4-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-123反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.85(t,J＝9.3Hz,1H),6.70(dd,J＝12.9,2.9Hz,1H),6.66-6.52(m,1H),4.66-4.52(m,1H),4.27(q,J＝7.0Hz,1H),3.73(s,3H),3.34-3.31(m,3H),3.22(s,3H),2.66-2.49(m,4H),2.48(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝416.36。

化合物351：(7S)-2-((反式-3-(3-氟-4-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与(反式)-3-(4-氟-3-甲氧基苯氧基)环丁-1-胺盐酸盐反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.98(t,J＝9.3Hz,1H),6.68-6.60(m,1H),6.61-6.48(m,1H),4.83-4.77(m,1H),4.59(p,J＝7.0Hz,1H),4.28(q,J＝7.0Hz,1H),3.80(s,3H),3.34-3.31(m,3H),3.21(s,3H),2.58(dt,J＝8.3,4.9Hz,4H),2.48(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝416.29。化合物338：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-(对甲苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-117反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.11-7.00(m,2H),6.77-6.64(m,2H),4.60(p,J＝7.0Hz,1H),4.28(q,J＝7.0Hz,1H),3.33-3.31(m,3H),3.22(s,3H),2.63-2.51(m,4H),2.48(s,3H),2.25(s,3H),1.36(t,J＝5.9Hz,3H)；ESMS(M+H)＝382.38。

化合物358：(7S)-2-((反式3-((6-氟吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-124反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.73(dd,J＝2.8,1.7Hz,1H),7.53-7.40(m,1H),6.99(dd,J＝8.9,2.9Hz,1H),4.98-4.92(m,1H),4.64(p,J＝7.1Hz,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,1H),3.34(s,3H),3.23(s,3H),2.73-2.57(m,4H),2.49(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝387.32。

化合物345：(7S)-2-((反式-3-(4-氟-2-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-120反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ6.84-6.67(m,2H),6.57(td,J＝8.5,2.9Hz,1H),4.68-4.55(m,1H),4.34-4.22(m,1H),3.83(d,J＝7.4Hz,3H),3.34-3.30(m,3H),3.23(s,2H),2.71-2.50(m,4H),2.48(d,J＝2.4Hz,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝416.29。化合物346：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-((6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-121反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.71(d,J＝3.0Hz,1H),7.33(dd,J＝8.9,3.0Hz,1H),6.84(d,J＝9.0Hz,1H),4.76(q,J＝8.8Hz,2H),4.63(p,J＝7.0Hz,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,1H),3.36-3.32(m,3H),3.23(d,J＝4.5Hz,3H),2.71-2.53(m,4H),2.49(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝467.33。

化合物250：(7S)-2-((反式-3-(4-氟苯氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-109反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.07-6.95(m,2H),6.88-6.77(m,2H),4.95-4.83(m,1H),4.70-4.57(m,1H),4.32(q,J＝6.9Hz,1H),3.37-3.33(m,3H),3.24(s,3H),2.72-2.56(m,4H),2.53(s,3H),1.39(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝386.33。

化合物274：(S)-2-((反式-3-((5-氟嘧啶-2-基)氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-155反应以得到标题产物，5.2％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物314：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-((5-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-110反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.96(s,1H),8.85(d,J＝2.5Hz,1H),8.42(s,1H),5.36-5.22(m,1H),4.78-4.68(m,1H),4.32(q,J＝7.0Hz,1H),3.34(s,3H),3.24(s,3H),2.87-2.68(m,4H),2.52(s,3H),1.38(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝437.17。

化合物325：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-(4-(三氟甲氧基)苯氧基)-环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-113反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.19(d,J＝8.5Hz,2H),6.93-6.86(m,2H),4.99-4.87(m,1H),4.70-4.56(m,1H),4.36-4.25(m,1H),3.33(d,J＝6.8Hz,3H),3.23(s,3H),2.76-2.55(m,4H),2.52(s,3H),1.38(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝452.28。

化合物362：(7S)-2-((反式-3-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-126反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇)δ7.78(t,J＝5.7Hz,1H),7.38(ddd,J＝77.7,69.1,67.0Hz,2H),6.91(dt,J＝8.9,1.4Hz,1H),4.97-4.90(m,1H),4.70-4.54(m,1H),4.34-4.21(m,1H),3.34-3.29(m,3H),3.22(s,3H),2.70-2.55(m,4H),2.48(d,J＝3.5Hz,3H),1.37(d,J＝6.6Hz,2H)；ESMS(M+H)＝435.21。

化合物373：(7S)-2-((反式-3-(4-氟-3-甲氧基苯氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-127反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.94(t,J＝9.3Hz,1H),6.65-6.49(m,1H),6.30(dd,J＝6.1,2.4Hz,1H),4.97(d,J＝35.2Hz,4H),4.85(s,1H),4.58(s,1H),4.28(d,J＝5.6Hz,1H),3.83(s,3H),3.34(s,3H),3.22(s,3H),2.56(d,J＝19.1Hz,4H),2.49(s,3H),1.38(d,J＝5.5Hz,3H)；ESMS(M+H)＝416.31。

化合物337：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-116反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.51(d,J＝5.8Hz,1H),7.28(d,J＝2.4Hz,1H),7.15-7.05(m,1H),5.11(ddd,J＝23.4,13.9,11.1Hz,2H),4.67(p,J＝7.1Hz,1H),4.30(q,J＝7.0Hz,1H),3.37-3.32(m,3H),3.23(s,3H),2.82-2.67(m,4H),2.67(s,3H),2.50(d,J＝4.3Hz,3H),1.38(dd,J＝6.9,3.2Hz,3H)；ESMS(M+H)＝437.33。

化合物334：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-115反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.55(s,2H),5.17(p,J＝5.2Hz,1H),4.69(p,J＝7.1Hz,1H),4.30(q,J＝7.0Hz,1H),3.34(s,3H),3.24(s,3H),2.78-2.67(m,4H),2.50(s,3H),1.38(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝438.28。

化合物323：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-112反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.37(d,J＝2.7Hz,1H),7.83(d,J＝8.8Hz,1H),7.61-7.50(m,1H),5.21-5.10(m,1H),4.76-4.61(m,1H),4.38-4.26(m,1H),3.36(s,3H),3.25(s,3H),2.86-2.61(m,4H),2.55(s,3H),1.39(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝437.29。

化合物341：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-(4-(三氟甲基)苯氧基)-环丁基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-118反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.57(d,J＝8.7Hz,2H),6.98(d,J＝8.6Hz,2H),4.98(p,J＝5.2Hz,1H),4.64(p,J＝7.1Hz,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,1H),3.32(d,J＝5.4Hz,3H),3.22(s,3H),2.66-2.59(m,4H),2.49(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝436.33。化合物360：(7S)-2-((反式3-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-125反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.31(td,J＝9.0,1.0Hz,1H),6.88-6.77(m,1H),6.73(tdd,J＝9.1,2.9,1.6Hz,1H),4.91(p,J＝5.1Hz,1H),4.69-4.54(m,1H),4.34-4.24(m,1H),3.33-3.31(m,3H),3.31(dd,J＝3.3,1.6Hz,3H),3.22(d,J＝6.4Hz,3H),2.70-2.57(m,4H),2.48(d,J＝4.1Hz,3H),1.37(dd,J＝7.0,2.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝470.32。

化合物296：(7S)-2-((反式-3-(2,4-二氟苯氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-108反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.10-6.77(m,3H),4.91(td,J＝6.5,3.2Hz,1H),4.72-4.53(m,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,1H),3.32(d,J＝3.1Hz,3H),3.23(s,3H),2.74-2.52(m,4H),2.48(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝404.2。

化合物252：(7S)-2-((反式-3-(3,4-二氟苯氧基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-102反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.17(dd,J＝19.5,9.3Hz,1H),6.85-6.70(m,1H),6.67-6.57(m,1H),4.94-4.83(m,1H),4.66-4.53(m,1H),4.32(q,J＝6.9Hz,1H),3.37-3.33(m,3H),3.24(s,3H),2.71-2.57(m,4H),2.52(s,3H),1.38(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝404.38。

化合物253：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-101反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.01(d,J＝6.9Hz,1H),6.93-6.78(m,2H),4.84(dt,J＝6.7,3.2Hz,1H),4.42(q,J＝7.8,6.9Hz,1H),4.02(q,J＝6.8Hz,1H),3.18(s,3H),2.92(s,3H),2.49-2.31(m,4H),2.27(s,3H),1.05(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+H)＝422.22。化合物293：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-(2,3,4-三氟苯氧基)环丁基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-106反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.08-6.91(m,1H),6.79-6.66(m,1H),4.95(dt,J＝10.9,5.4Hz,1H),4.71-4.57(m,1H),4.35-4.22(m,1H),3.38-3.33(m,3H),3.24(s,3H),2.75-2.56(m,4H),2.50(s,3H),1.38(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝422.2。

化合物294：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-(2,4,5-三氟苯氧基)-环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-107反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.26-7.09(m,1H),6.94(dt,J＝11.8,7.8Hz,1H),4.93(dd,J＝10.3,5.4Hz,1H),4.72-4.55(m,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,1H),3.36-3.32(m,3H),3.23(s,3H),2.72-2.57(m,4H),2.49(s,3H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+H)＝422.2。化合物307：(7S)-2-((反式-3-((4-氟苯基)硫基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-109反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.43-7.26(m,2H),7.14-7.00(m,2H),4.62(p,J＝7.6Hz,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,1H),3.98-3.80(m,1H),3.31(s,3H),3.21(s,3H),2.62(ddd,J＝23.7,13.4,8.3Hz,2H),2.46(s,3H),2.45-2.34(m,2H),1.36(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+1)＝402.17。

化合物320：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-((4(三氟甲基)苯基)硫基)-环丁基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-111反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.55(d,J＝8.3Hz,2H),7.34(t,J＝8.5Hz,2H),5.07(d,J＝61.3Hz,3H),4.72(p,J＝7.4Hz,1H),4.34-4.21(m,1H),4.17-4.01(m,1H),3.33(s,3H),3.21(s,3H),2.85-2.69(m,2H),2.52-2.47(m,4H),2.47-2.38(m,1H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+1)＝452.2。

化合物330：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-((3,4,5-三氟苯基)硫基)-环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使中间体A-3与B-114反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.10-6.95(m,2H),4.71(p,J＝7.5Hz,1H),4.39-4.26(m,1H),4.14-3.98(m,1H),3.35(s,3H),3.25(s,3H),2.88-2.68(m,2H),2.52(d,J＝11.4Hz,3H),2.50-2.38(m,2H),1.39(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝438.23。

2G.表9B的化合物的制备

用于表9B中所制备的化合物的通用程序：

将化合物246(115mg，0.28mmol)、烷基卤化物(0.31mmol)及碳酸钾(150mg，1.08mmol)溶解于DMF(5mL)中且在室温下搅拌18小时。添加TFA(125μL，1.622mmol)。通过逆向MPLC：100g C18柱，用10-100％乙腈/水(0.1％TFA)洗脱进行纯化，合并所需级分且干燥以得到产物。通过使产物穿过PL-HCO3 MPSPE滤筒(500mg/6mL试管容量0.9mmol)中和回收的产物以得到所需产物。

表9B.

化合物312：(7S)-5-乙基-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)-环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

1H NMR(300MHz,CDCl

化合物381：(7S)-5-(2-氟乙基)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)-环丁基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

1H NMR(300MHz,CDCl

化合物313：(7S)-4,7,8-三甲基-5-(2,2,2-三氟乙基)-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

1H NMR(300MHz,CDCl

化合物327：(7S)-4,7,8-三甲基-5-(甲基-d3)-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)-环丁基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

1H NMR(400MHz,CDCl

化合物328：(7S)-5-(乙基-d5)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)-环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

1H NMR(400MHz,CDCl

2I.表10的化合物的制备

表10.

化合物243：(7S)-2-((顺式-3-(4-氟苯氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-128反应以得到标题化合物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.00(t,J＝8.7Hz,2H),6.85(dd,J＝9.0,4.3Hz,2H),4.57-4.41(m,1H),4.38-4.13(m,2H),3.26(d,J＝11.7Hz,3H),3.05(dd,J＝6.7,4.2Hz,2H),2.35(s,3H),2.24(dd,J＝18.8,8.5Hz,2H),1.55(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝372.28。

化合物247：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-129反应以得到标题化合物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.73-6.56(m,2H),4.51(p,J＝6.9Hz,1H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),4.18(dd,J＝16.0,8.1Hz,1H),3.26(s,3H),3.12-2.90(m,2H),2.30(s,3H),2.21(dt,J＝12.3,8.5Hz,2H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H),0.60-0.58(m,1H)；ESMS(M+1)＝408.29。

化合物304：(7S)-2-((顺式-3-((4-氟苯基)硫基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-130反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.41-7.23(m,2H),7.05(t,J＝8.6Hz,2H),4.46-4.22(m,2H),3.63(d,J＝11.9Hz,3H),3.62-3.46(m,1H),3.24(s,3H),2.99-2.78(m,2H),2.32(s,3H),2.11(dd,J＝20.3,9.2Hz,2H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H)。

化合物305：(7S)-2-((顺式-3-((4-氟苯基)硫基)环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-130反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.35(dd,J＝8.5,5.3Hz,2H),7.06(t,J＝8.7Hz,2H),4.48-4.33(m,1H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),3.70-3.49(m,1H),3.32(s,3H),3.24(s,3H),2.98-2.82(m,2H),2.50(s,3H),2.21-2.04(m,2H),1.37(d,J＝6.9Hz,3H)。

化合物321：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((4-(三氟甲基)苯基)硫基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-131反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,CDCl

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-131反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.55(d,J＝8.3Hz,2H),7.37(t,J＝8.7Hz,2H),4.93(s,4H),4.47(p,J＝8.5Hz,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,1H),3.88-3.71(m,1H),3.35-3.31(m,3H),3.26(s,3H),3.11-2.94(m,2H),2.48(s,3H),2.28-2.12(m,2H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)。

化合物332：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((3,4,5-三氟苯基)硫基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-132反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.12-7.00(m,2H),4.49-4.36(m,1H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),3.80-3.65(m,1H),3.25(s,3H),3.00(dt,J＝11.3,7.2Hz,2H),2.30(s,3H),2.14(dd,J＝20.2,9.1Hz,2H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)。

化合物331：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((顺式-3-((3,4,5-三氟苯基)硫基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-132反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.05(dd,J＝7.8,6.7Hz,2H),4.57-4.42(m,1H),4.40-4.26(m,1H),3.87-3.69(m,1H),3.35(s,3H),3.27(d,J＝12.2Hz,3H),3.03(s,2H),2.54(s,3H),2.29-2.12(m,2H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。

化合物336：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((4-(三氟甲氧基)苯基)硫基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-133反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,CDCl

化合物348：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((顺式-3-((4-(三氟甲氧基)苯基)硫基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-133反应以得到标题产物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.45-7.28(m,2H),7.26-7.11(m,2H),4.47-4.34(m,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,1H),3.69(tt,J＝9.3,7.4Hz,1H),3.33-3.31(m,4H),3.24(s,3H),3.05-2.86(m,2H),2.46(s,3H),2.24-2.06(m,2H),1.37(d,J＝7.0Hz,3H)。2J.表11的化合物的制备：

以与关于上表10的化合物的那些方式类似的方式制备化合物。

表11.

化合物240：(7S)-2-((反式-3-(4-氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与B-100反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.24(s,1H),7.06-6.94(m,2H),6.87-6.75(m,2H),4.87-4.78(m,1H),4.51(s,1H),4.33(q,J＝6.9Hz,1H),3.23(s,3H),2.58(dd,J＝12.1,6.5Hz,4H),1.56(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝358.28。

化合物241：(7S)-2-((顺式-3-(4-氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与B-128反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.23(s,1H),6.99(t,J＝8.7Hz,2H),6.84(dd,J＝9.1,4.3Hz,2H),4.50(p,J＝6.8Hz,1H),4.34(q,J＝6.8Hz,1H),4.14(s,1H),3.25(d,J＝9.2Hz,3H),3.04(d,J＝5.4Hz,2H),2.19(dd,J＝19.0,8.7Hz,2H),1.57(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝358.29。

化合物249：(7S)-7,8-二甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与B-101反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,EtOD)δ7.23(s,1H),6.70-6.54(m,2H),4.85(dd,J＝8.7,3.5Hz,1H),4.53(s,1H),4.34(q,J＝6.9Hz,1H),3.24(s,3H),2.61(dd,J＝6.9,5.4Hz,4H),1.57(d,J＝7.0Hz,3H)；ESMS(M+1)＝394.29。

化合物251：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(3,4-二氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与B-102反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.23(s,1H),7.16(dd,J＝19.4,9.3Hz,1H),6.76(ddd,J＝12.3,6.6,2.8Hz,1H),6.62(dd,J＝6.4,2.6Hz,1H),4.86(d,J＝5.0Hz,1H),4.55(d,J＝22.0Hz,1H),4.34(q,J＝6.7Hz,1H),3.24(s,3H),2.60(t,J＝5.9Hz,4H),1.57(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝376.24。

2K.表12的化合物的制备

表12.

化合物257：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((3,4,5-三氟苯氧基)甲基)环丁基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-134反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.72(dt,J＝13.5,6.7Hz,2H),4.46-4.37(m,1H),4.31(q,J＝6.9Hz,1H),3.95(d,J＝5.1Hz,2H),3.26(s,3H),2.66-2.45(m,3H),2.34(s,3H),2.09-1.91(m,2H),1.54(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝422.29。

化合物271：(7S)-2-((顺式-3-((3,4-二氟苯氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-138反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.25-7.05(m,1H),6.93-6.79(m,1H),6.77-6.61(m,1H),4.47-4.33(m,1H),4.28(dd,J＝13.8,6.9Hz,1H),3.93(d,J＝4.4Hz,2H),3.24(s,3H),2.68-2.43(m,3H),2.32(d,J＝16.1Hz,3H),2.05-1.88(m,2H),1.52(d,J＝6.0Hz,3H)；ESMS(M+1)＝404.29。

化合物261：(7S)-2-((顺式-3-((4-氟苯氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-135反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ5.51-5.30(m,4H),2.90-2.81(m,1H),2.76(q,J＝7.0Hz,1H),2.40(d,J＝5.4Hz,2H),1.71(s,3H),1.14-0.92(m,3H),0.78(s,3H),0.54-0.39(m,2H),-0.01(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝386.33。

化合物277：5-氟-2-((顺式-3-(((7S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)甲氧基)苯甲腈

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-140反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物263：(7S)-2-((顺式-3-(((5-氟吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-136反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.66(s,2H),8.30(d,J＝9.6Hz,1H),4.44(d,J＝25.4Hz,1H),4.32(s,3H),3.27(s,3H),2.66(s,3H),2.35(s,4H),2.10(d,J＝5.1Hz,2H),1.54(d,J＝6.4Hz,3H)。

化合物270：(7S)-2-((顺式-3-(((6-氟吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-137反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.82(d,J＝1.0Hz,1H),7.63-7.45(m,1H),6.98(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),4.38(dd,J＝15.4,7.7Hz,1H),4.35-4.20(m,1H),4.03(d,J＝4.5Hz,2H),3.25(s,3H),2.72-2.47(m,3H),2.30(s,3H),1.99(dd,J＝17.5,9.0Hz,2H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝387.36。

化合物275：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-139反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

2L.表13的化合物的制备

化合物284：(7S)-2-((顺式-3-((3,5-二氟-4-甲氧基苯氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

步骤1：(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-氯-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(2.96g，13.05mmol)、顺式-3-氨基环丁基)甲醇盐酸盐(1.796g，13.05mmol)及tBuXPhos钯环(358.5mg，0.5220mmol)溶解于叔丁醇(50mL)中并脱气。在氮气下将2M叔丁醇钠溶液(23mL，45.70mmol)添加至混合物。在室温下搅拌2小时后，将乙酸乙酯(100ml及水添加至反应混合物。)分离有机层，且用乙酸乙酯(3×50ml)萃取水层。合并的萃取物经无水硫酸钠干燥、过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

将(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(160mg，0.5mmol)、3,5-二氟-4-甲氧基苯酚(166mg，1.04mmol)及三苯基膦(272mg，1.04mmol)的混合物溶解于5ml THF中。将偶氮二甲酸二乙酯(1.038mmol)逐滴添加至混合物，随后加热至50℃，保持12小时。真空蒸发反应物，且通过柱色谱(C18 MPLC；0-100％乙腈/水(0.1％TFA))纯化所得残余物。冻干所需级分以得到45mg(18％产率)标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.66-6.50(m,2H),4.46-4.34(m,1H),4.28(q,J＝6.9Hz,1H),3.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.84(s,3H),3.22(d,J＝12.4Hz,3H),2.63-2.43(m,3H),2.29(s,3H),1.96(dd,J＝17.7,9.0Hz,2H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝434.26。

表13.

化合物282、281、285、258、367、369、366、365、364、363、356、283、280及279系以与在化合物284的程序中所报导类似的方式使(7S)-2-((反式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮或(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(参见化合物284，步骤1)与酚或吡唑衍生物反应来制备。

化合物282：(7S)-2-((顺式-3-((2-氯-4-氟苯氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与2-氯-4-氟苯酚反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.17(dd,J＝8.2,2.8Hz,1H),7.09-6.92(m,2H),4.43-4.33(m,1H),4.28(q,J＝7.0Hz,1H),4.01(d,J＝4.8Hz,2H),3.22(d,J＝10.9Hz,3H),2.66-2.51(m,3H),2.29(s,3H),2.12-1.96(m,2H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝420.18。

化合物281：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((2,3,4-三氟苯氧基)甲基)环丁基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与2,3,4-三氟苯酚反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.08-6.94(m,1H),6.95-6.80(m,1H),4.37(d,J＝8.0Hz,1H),4.29(dd,J＝13.9,6.9Hz,1H),4.05(d,J＝4.9Hz,2H),3.25(s,3H),2.68-2.51(m,3H),2.29(s,3H),1.97(d,J＝8.3Hz,2H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝422.2。化合物285：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((2,4,5-三氟苯氧基)甲基)环丁基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与2,4,5-三氟苯酚反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.14(ddt,J＝15.6,12.0,7.8Hz,2H),4.47-4.34(m,1H),4.29(q,J＝6.9Hz,1H),4.02(d,J＝5.2Hz,2H),3.24(s,3H),2.70-2.43(m,4H),2.29(s,3H),2.06-1.88(m,2H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝422.37。

化合物258：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((3,4,5-三氟苯氧基)甲基)-环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((反式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与3,4,5-三氟苯酚反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.72(dt,J＝13.5,6.7Hz,2H),4.46-4.37(m,1H),4.31(q,J＝6.9Hz,1H),3.95(d,J＝5.1Hz,2H),3.26(s,3H),2.66-2.45(m,3H),2.34(s,3H),2.09-1.91(m,2H),1.54(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝422.34

化合物367：(7S)-2-((顺式-3-(((6-氯-5-氟吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与3-羟基-5-氟-6-氯吡啶反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,CDCl

如下制备化合物：使(7S)-2-((反式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与2-羟基-4-三氟甲基吡啶反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.36(d,J＝5.3Hz,1H),7.20(d,J＝5.3Hz,1H),7.06(s,1H),4.57(p,J＝7.8Hz,1H),4.48(d,J＝6.8Hz,2H),4.29(q,J＝6.9Hz,1H),3.22(s,3H),2.78(dd,J＝8.7,4.5Hz,1H),2.42(ddd,J＝11.9,9.1,5.1Hz,2H),2.36-2.31(m,1H),2.30(s,3H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝437.29。化合物366：(7S)-2-((顺式-3-(((5-氯吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与3-羟基-5-氯吡啶反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.36(d,J＝5.3Hz,1H),7.20(d,J＝5.3Hz,1H),7.06(s,1H),4.57(p,J＝7.8Hz,1H),4.48(d,J＝6.8Hz,2H),4.29(q,J＝6.9Hz,1H),3.22(s,3H),2.78(dd,J＝8.7,4.5Hz,1H),2.42(ddd,J＝11.9,9.1,5.1Hz,2H),2.36-2.31(m,1H),2.30(s,3H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝403.25。

化合物365：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-(((6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-醇反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.60-7.45(m,1H),7.05(s,1H),6.85(s,1H),4.48-4.15(m,4H),3.25(d,J＝8.5Hz,3H),2.73-2.52(m,3H),2.51(s,3H),2.34(s,3H),2.10-1.90(m,2H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝451.29。

化合物364：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与6-(三氟甲基)吡啶-3-醇反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,CDCl

化合物363：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-(((5-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与5-(三氟甲基)吡啶-3-醇反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.56(s,1H),8.50(s,1H),7.73(d,J＝24.0Hz,1H),4.43(s,1H),4.27(t,J＝14.7Hz,1H),4.17(s,2H),3.25(s,3H),2.62(s,3H),2.31(s,3H),2.04(s,2H),1.53(d,J＝5.1Hz,3H)。ESMS(M+1)＝437.29。

化合物356：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-(((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与5-(三氟甲基)吡啶-2-醇反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.47(d,J＝6.1Hz,1H),7.44(d,J＝4.3Hz,2H),4.47(t,J＝5.8Hz,2H),4.46-4.40(m,1H),4.31(q,J＝6.9Hz,1H),3.25(d,J＝7.2Hz,3H),2.63(t,J＝5.9Hz,2H),2.33(s,3H),2.05(d,J＝8.1Hz,2H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝437.29。

化合物283：(7S)-2-((顺式-3-((3-乙炔基苯氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与3-乙炔基苯酚反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.23(t,J＝7.9Hz,1H),7.01(dd,J＝8.1,5.0Hz,2H),6.94(dd,J＝8.3,2.4Hz,1H),4.36(dd,J＝14.8,6.9Hz,1H),4.29(q,J＝6.9Hz,1H),3.97(d,J＝5.2Hz,2H),3.45(s,1H),3.22(d,J＝13.4Hz,3H),2.63-2.50(m,3H),2.29(s,3H),1.98(dd,J＝17.1,8.6Hz,2H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝392.18。

化合物280：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((3,4,5-三甲氧基苯氧基)甲基)-环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与3,4,5-三甲氧基苯酚反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.22(s,2H),4.45-4.33(m,1H),4.28(q,J＝6.9Hz,1H),3.94(d,J＝5.3Hz,2H),3.80(s,6H),3.68(s,3H),3.24(s,3H),2.68-2.46(m,3H),2.29(s,3H),1.98(dd,J＝17.0,8.0Hz,2H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)。ESMS(M+1)＝458.17。

化合物279.(7S)-2-((顺式-3-((4-氟-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与4-氟-1H-吡唑反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.63(d,J＝4.4Hz,1H),7.35(d,J＝4.0Hz,1H),4.38-4.22(m,3H),4.19-4.14(m,1H),4.11(d,J＝5.9Hz,2H),3.22(s,3H),2.61-2.39(m,4H),2.29(s,3H),1.96-1.73(m,3H),1.51(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝360.17.

化合物286：(7S)-2-((顺式-3-(((4-氟苯甲基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-157反应以得到标题产物，21.5％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物288：(7S)-2-((顺式-3-(((4-氟苯甲基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-157反应以得到标题产物，55％产率。1H NMR(300MHz,CDCl

2M.表14的化合物的制备

表14.

化合物254：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((3,4,5-三氟苯甲基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-202反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物255：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-((3,4,5-三氟苯甲基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-202反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物256：(7S)-7,8-二甲基-2-((反式-3-((3,4,5-三氟苯甲基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-202反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物265：(7S)-2-((反式-3-((3,4-二氟苯甲基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-201反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物289：(S)-7,8-二甲基-2-((顺式-3-甲基-3-((3,4,5-三氟苯甲基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-1与B-203反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物264：(7S)-2-((反式-3-((3,4-二氟苯甲基)氧基)环丁基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-201反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物266：(7S)-2-((反式-3-((3,4-二氟苯甲基)氧基)-环丁基)氨基)-4,5,7,8-四甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-201反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物290：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-甲基-3-((3,4,5-三氟苯甲基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-203反应以得到标题产物。ESMS(M+1)＝436.41。

化合物376及377：

(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1S,3S)-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使A-2与B-142反应以得到呈反式非对映异构体(化合物375)的混合物的标题产物。通过SFC(柱：Chiralpak IB，10×250mm：20％甲醇(0.2％二乙胺)/80％CO

峰A：Rt 0.604min.(88％ee)；1H NMR(300MHz,CDCl

峰B：Rt 0.963min.(89.2％ee)1H NMR(300MHz,CDCl

化合物259：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-143反应以得到呈反式非对映异构体的混合物形式的标题化合物，46％产率。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.85-6.71(m,2H),4.57-4.45(m,1H),4.32(q,J＝6.8Hz,1H),3.27(s,3H),2.60-2.42(m,1H),2.33(s,3H),2.28-2.15(m,1H),2.11-2.00(m,2H),1.98-1.82(m,2H),1.54(d,J＝6.9Hz,3H)。

化合物260：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使A-2与B-141反应以得到呈反式非对映异构体的混合物的标题产物，55％产率。通过手性HPLC(Chiralpak IF柱，4.6×250mm；15％乙醇/15％甲醇/70％己烷(0.2％二乙胺)，等度)分离所述非对映异构体以得到各个别反式非对映异构体：

化合物267:(S)-4,7,8-三甲基-2-(((1R,3R)-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

峰A：Rt 6.57min.；99％ee.1H NMR(300MHz,CDCl

化合物268:(S)-4,7,8-三甲基-2-(((1S,3S)-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

峰B：Rt 10.219min.；99％ee。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物269：(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-3与B-141反应以得到呈反式非对映异构体的混合物形式的标题化合物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.77-6.65(m,2H),4.94(d,J＝1.9Hz,1H),4.61-4.48(m,1H),4.32(q,J＝6.9Hz,1H),3.34(d,J＝5.1Hz,3H),3.23(s,3H),2.52(s,3H),2.42-2.20(m,4H),2.06(ddd,J＝20.5,13.7,6.8Hz,1H),1.97-1.65(m,2H),1.39(dd,J＝6.9,1.3Hz,3H)；ESMS(M+1)＝404.29。通过SFC(AD-H，4.6×100mm柱，10％甲醇(0.2％二乙胺)/90％CO

化合物272：(S)-4,5,7,8-四甲基-2-(((1R,3R)-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

峰A：Rt 0.488min.；99.2％de。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物273：(S)-4,5,7,8-四甲基-2-(((1S,3S)-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

峰B：Rt 0.553min.；96.8％de。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物57：(7S)-2-(((6-((4-氟苯甲基)氧基)吡啶-3-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-144反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,CDCl

化合物70：(S)-2-(((5-((4-氟苯甲基)氧基)吡啶-2-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与B-145反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物54：(7S)-2-(((6-(4-氟苯氧基)吡啶-3-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：经由方法B程序使中间体A-2与(6-(4-氟苯氧基)吡啶-3-基)甲胺反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.44(s,1H),8.37-8.16(m,1H),7.27(dt,J＝15.3,8.1Hz,4H),7.17-6.98(m,1H),4.72(s,2H),4.31(d,J＝5.8Hz,1H),3.21(s,3H),2.33(s,3H),1.63-1.39(m,3H)；ESMS(M+1)＝409.13。

化合物56：(7S)-2-(((6-(4-氟苯氧基)吡啶-3-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：经由程序方法B使中间体A-1与(6-(4-氟苯氧基)吡啶-3-基)甲胺反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.16(d,J＝2.4Hz,1H),7.87(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),7.18-7.05(m,4H),6.94(d,J＝8.5Hz,1H),4.60(s,2H),4.32(q,J＝6.9Hz,1H),3.23(s,3H),1.56(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝395.22。化合物143：(S)-4,7,8-三甲基-2-(((6-(4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序A如下制备化合物：使中间体A-2与B-148反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.95(s,1H),8.47(s,1H),8.08-7.89(m,3H),4.58(s,2H),4.05(q,J＝6.8Hz,1H),3.01(s,3H),2.18(s,3H),1.31(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝433.35化合物371：(7S)-2-(((S)-1-苯甲基吡咯烷-3-基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与(S)-1-苯甲基吡咯烷-3-胺反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.40-7.16(m,5H),4.50-4.39(m,1H),4.06(q,J＝6.8Hz,1H),3.64(s,2H),3.03(s,3H),2.94(dd,J＝9.8,7.0Hz,1H),2.73(dd,J＝14.8,8.7Hz,1H),2.57(dd,J＝15.7,8.2Hz,1H),2.47(dd,J＝9.9,5.1Hz,1H),2.32(ddd,J＝14.0,8.6,5.7Hz,1H),2.16(s,3H),1.67(ddd,J＝13.4,8.3,5.8Hz,1H),1.31(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝367.33。化合物372：(7S)-2-(((R)-1-苯甲基吡咯烷-3-基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与(R)-1-苯甲基吡咯烷-3-胺反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.38-7.20(m,5H),4.44(ddt,J＝10.0,6.9,5.1Hz,1H),4.05(q,J＝6.8Hz,1H),3.64(s,2H),3.03(s,3H),2.93(dd,J＝9.9,7.0Hz,1H),2.78-2.68(m,1H),2.57(dd,J＝15.4,8.3Hz,1H),2.46(dd,J＝9.9,5.0Hz,1H),2.38-2.26(m,1H),2.16(s,3H),1.68(ddd,J＝13.3,8.2,6.1Hz,1H),1.32(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝367.33。

化合物374：(7S)-2-(((S)-1-(4-氟苯甲基)吡咯烷-3-基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与(S)-1-(4-氟苯甲基)吡咯烷-3-胺反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.35(s,2H),7.04(dd,J＝8.3,7.2Hz,2H),4.44(s,1H),4.13-3.99(m,1H),3.61(s,2H),3.02(d,J＝0.8Hz,3H),2.91(s,1H),2.71(d,J＝6.1Hz,1H),2.60-2.37(m,2H),2.27(d,J＝13.6Hz,1H),2.15(d,J＝1.6Hz,3H),1.67(s,1H),1.31(dd,J＝6.6,1.7Hz,3H)；ESMS(M+1)＝385.27。

化合物278：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((2-(苯氧基甲基)环丙基)-氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与2-(苯氧基甲基)环丙-1-胺反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.37-7.20(m,2H),6.97(d,J＝6.6Hz,3H),4.30(q,J＝6.9Hz,1H),4.22-4.12(m,1H),3.89-3.74(m,1H),3.24(d,J＝1.4Hz,3H),2.86-2.73(m,1H),2.34(s,2H),1.53(dd,J＝6.9,1.2Hz,3H),1.06(dd,J＝13.1,5.3Hz,2H)；ESMS(M+1)＝354.37。

2N.化合物401、402、404至408的制备

化合物405：(7S)-N-((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-N-(4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)乙酰胺

向(7R)-4,7,8-三甲基-2-[[1-[[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]甲基]吡唑-4-基]甲氨基]-5,7-二氢喋啶-6-酮(250mg，0.5600mmol)于无水THF(3.750mL)中的溶液中添加乙酸乙酰酯(87mg，80μL，0.8400mmol)及DIEA(217mg，290μL，1.680mmol)，将混合物密封于微波管中且在加热浴中在100℃下加热24小时。通过蒸发移除溶剂，通过ISCO中的硅胶柱(40g)用DCM、20％MeOH/DCM洗脱来纯化残余物。收集所需级分并蒸发。所得物质经50℃真空干燥隔夜。手性HPLC(柱：ChiralPak IC)，ee>99.9％(206.0mg，74.55％产率)1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.30(s,1H),8.66-8.52(m,1H),7.94-7.77(m,2H),7.74(d,J＝0.8Hz,1H),7.35(d,J＝0.7Hz,1H),5.42(s,2H),4.93-4.80(m,2H),4.17(q,J＝6.8Hz,1H),2.98(s,3H),2.28(s,3H),2.24(s,3H),1.26(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)489.3。

化合物408：异丁酸1-((((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)((7S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)胺甲酰基)氧基)乙酯

向(7S)-4,7,8-三甲基-2-[[1-[[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]甲基]吡唑-4-基]甲氨基]-5,7-二氢喋啶-6-酮(200mg，0.4480mmol)于无水THF(2mL)中的溶液中添加2-甲基丙酸1-(4-硝基苯氧基)羰氧基乙酯(161.4mg，0.5376mmol)及DIEA(2当量)；将混合物密封于微波管中且在加热浴中在110℃下加热24小时。UPLC显示发现所需Mw，蒸发溶剂，通过柱色谱(SiO

用于制备化合物406及402的通用程序

(7S)-(2-氧代-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)(4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

向(S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(180mg，0.4032mmol)及DIPEA(140μL，0.8038mmol)于THF中的溶液添加(4-硝基苯基)2-(叔丁氧羰基氨基)乙酸酯及DIPEA(140μL，0.8038mmol)。在130℃下微波处理2h后，LCMS指示所需产物。浓缩后，通过硅胶层析纯化产物，得到产物(185mg，0.3037mmol，75.32％)。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物406：(7S)-2-氨基-N-((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-N-(4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)乙酰胺

向(S)-(2-氧代-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)(4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(173mg，0.2840mmol)于MeOH(0.5mL)中的溶液中添加含HCl(1mL，4M，4.000mmol)的二噁烷(1mL)。在室温下搅拌反应物1h。LCMS指示反应完成。移除溶剂，通过醚湿磨产物。(160mg，0.2740mmol，96.47％)1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.45(s,1H),7.98(s,1H),7.89(d,J＝8.5Hz,1H),7.77(d,J＝8.1Hz,1H),7.63(d,J＝4.8Hz,1H),5.57-5.35(m,3H),5.16(d,J＝3.3Hz,2H),4.35(d,J＝18.0Hz,3H),3.64(q,J＝1.2Hz,2H),3.19(d,J＝3.5Hz,3H),2.51-2.34(m,3H),1.52(t,J＝6.7Hz,3H)。ESMS(M+1)＝504.38。

化合物402：(S)-2-氨基-3-甲基-N-((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-N-((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)丁酰胺

以与上文所描述类似的方式制备，得到产物HCl盐。(41mg，0.06629mmol，67.94％产量)1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.49-8.32(m,1H),7.81(d,J＝2.7Hz,2H),7.76(d,J＝8.1Hz,1H),7.59(s,1H),5.45(s,2H),5.19-5.00(m,3H),4.25(q,J＝6.8Hz,1H),3.14(d,J＝2.3Hz,3H),2.36(s,3H),2.04(dt,J＝12.7,7.0Hz,1H),1.42(dd,J＝6.9,4.3Hz,3H),0.87(d,J＝6.9Hz,3H),0.77(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝546.25。

化合物407：(7S)-((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)(4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基甲酸甲酯

在0℃下，将氯甲酸甲酯(158.8mg，129.8μL，1.680mmol)逐滴添加至(S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(500mg，1.120mmol)及DIPEA(361.9mg，487.7μL，2.800mmol)于THF中的溶液中。搅拌过周末后，反应完成。浓缩后，通过硅胶层析纯化粗产物，得到产物(10％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl

化合物401及404

与上文关于化合物402、406、407及408所描述类似地制备这些化合物。

化合物401：(7S)-3-环己基-1-((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-1-(4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)脲.

1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.52(d,J＝1.7Hz,1H),7.87-7.67(m,3H),7.57(s,1H),5.45(s,2H),5.19(s,2H),4.19(q,J＝6.8Hz,1H),3.79-3.62(m,1H),3.11(s,3H),2.32(s,3H),1.95(d,J＝12.0Hz,2H),1.84-1.68(m,2H),1.61(s,2H),1.54-1.20(m,6H)；ESMS(M+1)＝572.32。

化合物404：(7S)-6-乙酰氨基-2-氨基-N-((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-N-((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)己酰胺.

1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.38(d,J＝4.3Hz,1H),7.97(s,1H),7.85(d,J＝8.3Hz,1H),7.72(dt,J＝8.2,4.8Hz,1H),7.59(d,J＝5.7Hz,1H),5.44(s,2H),4.72-4.45(m,1H),4.33(t,J＝6.3Hz,1H),3.61(m,2H),3.15(d,J＝3.4Hz,3H),3.09(s,2H),2.41(d,J＝2.3Hz,3H),2.10-1.87(m,3H),1.88-1.59(m,2H),1.50(dd,J＝6.9,2.8Hz,3H),1.33(d,J＝22.9Hz,4H)；ESMS(M+1)＝617.51。

2O.合物297、299、300、301、302、306、308、309、316、318及319的制备

化合物308及309：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((3S,5S)-5-((3,4,5-三氟苯氧基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((3R,5R)-5-((3,4,5-三氟苯氧基)甲基)-四氢呋喃-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

以3个步骤制备这些化合物。

步骤1：(7S)-2-((顺式-5-(((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

于氮气下向(7S)-2-氯-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(191.1mg，0.8429mmol)、(顺式)-5-[[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基甲基]四氢呋喃-3-胺(333mg，0.8429mmol)及tBuXPhos Pd G1(23mg，0.03349mmol)于tBuOH(5mL)中的混合物中添加叔丁醇钠(1.1mL，2M，2.11mmol)。在室温下搅拌反应物30min。将水(50ml)添加至反应物且用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤，且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤2：(7S)-2-((顺式-5-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

向(7S)-2-((顺式-5-(((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(279mg，0.5045mmol)于THF(6mL)中的溶液中添加氟化四丁铵(757.4μL，1M，0.7574mmol)。在室温下搅拌反应物12小时。真空蒸发反应物，且将20ml盐水添加至残余物，接着用乙酸乙酯(2×30ml)及二氯甲烷(2×10ml)萃取。合并的有机萃取物经MgSO4干燥，过滤且蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤3：(化合物308及309).(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((3S,5S)-5-((3,4,5-三氟苯氧基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((3R,5R)-5-((3,4,5-三氟苯氧基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

在室温下向顺式非对映异构体(7S)-2-[[(顺式)-5-(羟甲基)四氢呋喃-3-基]氨基]-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(150mg，0.3mmol)、3,4,5-三氟苯酚(133mg，0.9mmol)及三苯基膦(196mg，0.75mmol)于THF(4mL)中的溶液中添加偶氮二甲酸二乙酯(340μL，0.75mmol)。在50℃下搅拌反应物12小时。真空蒸发反应物，且通过反相色谱纯化残余物，得到标题产物，重74mg(48％产率)；ESMS(M+1)＝438.19。

通过SFC(柱：Chiralpak IC，10×250mm；40％甲醇(0.2％二乙胺)/60％CO

峰A：Rt 2.867min.(99％ee)；1H NMR(300MHz,CDCl

峰B：Rt 3.773min.(99％ee)；1H NMR(300MHz,CDCl

化合物306：(7S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-5-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-四氢呋喃-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将偶氮二甲酸二乙酯(0.15ml，0.32mmol)逐滴添加至(7S)-2-[[(顺式)-5-(羟甲基)四氢呋喃-3-基]氨基]-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(80mg，0.16mmol)、3-(三氟甲基)-1H-吡唑(65mg，0.48mmol)及三苯基膦(84mg，0.32mmol)于THF(2ml)中的溶液中。在50℃下搅拌反应物12小时，随后真空蒸发。通过制备型反相HPLC(C18柱)纯化粗产物，得到呈顺式非对映异构体的混合物形式的标题产物，重26mg。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.80(d,J＝1.3Hz,1H),6.59(d,J＝2.3Hz,1H),4.55-4.47(m,1H),4.41(dd,J＝8.4,3.8Hz,2H),4.36-4.23(m,2H),4.01-3.91(m,1H),3.89-3.80(m,1H),3.24(s,3H),2.52(dt,J＝7.0,5.5Hz,1H),2.30(s,3H),1.90-1.68(m,1H),1.52(d,J＝6.9Hz,3H)；ESMS(M+1)＝426.26。

化合物301及302：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((3R,5S)-5-((3,4,5-三氟苯氧基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((3R,5S)-5-((3,4,5-三氟苯氧基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过与关于化合物308及309所描述相同的方法以3个步骤如下制备这些化合物：使作为初始反应物的A-2与(反式)-5-[[叔丁基(二苯基)硅烷基]-氧基甲基]四氢呋喃-3-胺反应以得到反式异构体(化合物299)的混合物，所述反式异构体通过SFC(柱：ChiralpakIC，10×250mm；40％乙醇(0.2％二乙胺)/60％CO

峰A：Rt 0.570min.(99％ee)；1H NMR(400MHz,CDCl

峰B：Rt 0.856min.(99％ee)；1H NMR(400MHz,CDCl

化合物297：(7S)-2-((反式-4-(4-氟苯氧基)四氢呋喃-3-基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-156反应以得到呈反式异构体的混合物形式的标题产物，10％产率。1H NMR-1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ6.98(ddd,J＝13.7,9.2,3.4Hz,5H),4.96-4.86(m,1H),4.63(s,1H),4.33-4.15(m,3H),4.01-3.78(m,2H),3.05(d,J＝5.4Hz,3H),2.31(s,3H),1.50(dd,J＝6.9,2.0Hz,3H)；ESMS(M+1)＝388.22。

化合物300、316、318及319：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(反式-(5-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-5-((3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

如下制备化合物：使(7S)-2-((反式-5-(羟甲基)四氢呋喃-3-基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮与3-(三氟甲基)-1H-吡唑在针对化合物306执行的光延条件下反应，基于1H NMR得到反式非对映异构体以及位置异构体(化合物300)的混合物。通过SFC(Chiralpak IC柱(50％CO2/50％甲醇(0.2％二乙胺)，等度)；12ml/min分离混合物，得到

峰A(化合物318)：

Rt 5.33min.(>99％ee)；1H NMR(400MHz,CDCl

9.1,3.9Hz,1H),2.96(d,J＝8.9Hz,3H),2.11(s,3H),1.88(dt,J＝31.8,13.1Hz,1H),1.33(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝426.18。峰B(化合物319)：

Rt 7.15min.(>99％ee)；1H NMR(400MHz,CDCl

峰C及D(化合物316)：

Rt 9.95min.(观测到2个峰，不可分离)；1H NMR(400MHz,CDCl

2P.化合物的制备.

以与表1至表14的化合物所描述的那些方式类似的方式制备以下化合物。

化合物127：(7S)-2-(((1-((R)-1-(4,4-二氟环己基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-160反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.69(s,1H),7.44(s,1H),4.37(s,3H),4.07(q,J＝6.8Hz,2H),3.07(s,3H),3.05-2.82(m,3H),2.71(td,J＝8.5,6.3Hz,1H),2.49-2.23(m,3H),2.18(s,3H),2.15-1.49(m,11H),1.33(d,J＝6.8Hz,3H)；ESMS(M+1)＝475.3。

化合物142：(7S)-2-(((1-((S)-1-(4,4-二氟环己基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-161反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.69(s,1H),7.44(s,1H),4.51-4.21(m,2H),4.07(q,J＝6.8Hz,1H),3.39-3.21(m,2H),3.12-2.77(m,6H),2.69(td,J＝8.5,6.4Hz,1H),2.50-2.23(m,2H),2.22-1.48(m,12H),1.33(d,J＝6.8Hz,3H)。ESMS(M+1)＝475.24。

化合物169：(7S)-2-(((6-((1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-3-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体B-147与A-2反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.14(s,1H),7.68(d,J＝7.3Hz,1H),6.89(d,J＝8.5Hz,2H),6.72(d,J＝8.4Hz,1H),6.52(s,2H),5.59(s,1H),4.50(d,J＝27.5Hz,3H),4.06(d,J＝6.4Hz,1H),3.65(s,1H),3.48-3.32(m,5H),3.04(s,3H),2.47-2.06(m,5H),1.33(d,J＝6.5Hz,3H)；ESMS(M+1)＝478.45。

化合物170：(7S)-2-(((1-((R)-1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-163反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.53(d,J＝35.2Hz,2H),6.93(s,2H),6.57(s,2H),5.49(s,1H),5.05(s,1H),4.36(s,2H),4.04(s,1H),3.83-3.39(m,4H),3.03(s,3H),2.46(d,J＝34.0Hz,2H),2.16(s,2H),1.31(s,3H)；ESMS(M+1)＝451.48。

化合物171：(7S)-2-(((1-((S)-1-(4-氟苯基)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-162反应以得到标题产物。1HNMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.53(d,J＝35.2Hz,2H),6.93(s,2H),6.57(s,2H),5.49(s,1H),5.05(s,1H),4.36(s,2H),4.04(s,1H),3.83-3.39(m,4H),3.03(s,3H),2.46(d,J＝34.0Hz,2H),2.16(s,2H),1.31(s,3H)；ESMS(M+1)＝451.48。

化合物219：(7S)-2-(((1-(((S)-1-(3,5-二氟苯基)吡咯烷-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-200反应以得到标题产物，50mg(22.6％产率)的标题化合物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ7.79(s,1H),7.68(s,1H),6.40(ddd,J＝11.3,6.6,2.1Hz,3H),4.63(s,2H),4.58-4.30(m,4H),3.75-3.43(m,3H),2.49(s,3H),2.42-2.03(m,4H),1.97-1.48(m,6H)。ESMS(M+1)＝483.44。化合物244：(7S)-2-((1-苯甲基氮杂环丁-3-基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-2与1-苯甲基-3-氨基氮杂环丁烷反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物245：(7S)-2-((1-苯甲基氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法B如下制备化合物：使中间体A-1与1-苯甲基-3-氨基氮杂环丁烷反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,CDCl

化合物298：3,4,5-三氟-N-(顺式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环戊基)苯甲酰胺

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-159反应以得到标题产物。ESMS(M+1)＝449.28。

化合物310及311：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1S,3S)-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1R,3R)-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过程序方法A如下制备化合物：使中间体A-2与B-158反应以得到呈反式非对映异构体的混合物形式的标题产物。通过手性HPLC(Chiralpak AD-H柱；85％己烷/7.5％乙醇/7.5％甲醇(0.2％二乙胺)，等度，20ml/min)分离所述非对映异构体且任意指定为峰A及峰B。

峰A：Rt 6.486min.(>99％ee)；1H NMR(300MHz,CDCl

峰B：Rt 10.216min.(>99％ee)；1H NMR(300MHz,CDCl

步骤A：N-(2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-甲基-L-缬氨酸甲酯.

为装有含2,4-二氯-6-甲基-5-硝基嘧啶(10g，48.1mmol)、甲基-L-缬氨酸甲酯盐酸盐(9.61g，53mmol)及碳酸氢钠(20.2g，240.4mmol)的环己烷(100ml)的烧瓶配备迪安-斯塔克分水器且加热至回流。经由热硅藻土过滤热反应混合物。真空蒸发滤液，得到不经进一步纯化即使用的标题产物，重15.5g。1H NMR(300MHz,CDCl

将N-(2-氯-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-甲基-L-缬氨酸甲酯(12g，37.9mmol)、(1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺(B-67；16.54g，49.3mmol)及碳酸氢钠(9.88g，118mmol)溶解于120ml四氢呋喃中且回流6小时。经由硅藻土过滤反应物，且真空蒸发过滤，得到黄色油状物。经由硅胶塞、用乙酸乙酯洗脱来过滤粗产物。真空蒸发收集的级分，得到19g呈黄色油状物的标题产物。ESMS(M+1)＝503.23。步骤C：(S)-2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮盐酸盐.

将N-(2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-6-甲基-5-硝基嘧啶-4-基)-N-甲基-L-缬氨酸甲酯(19g，37.9mmol)溶解于200ml甲醇中，且将5％Pt/C(1.5g，0.384mmol)添加至溶液，且将混合物置于处于58psi氢气下的Parr振荡器上。5小时后，经由硅藻土过滤反应物，且真空蒸发无色滤液，得到粗产物。通过柱色谱(SiO

2Q.化合物的制备

表15提供通过方法A程序使中间体A-#与B-52反应(参见化合物46的程序)所制备的某些化合物，且还提供某些化合物的

表15

*化合物604通过在65℃下于含4M HCl的二噁烷及甲醇中去除化合物590的保护基来制备。

**化合物744通过以类似方式去除化合物742的保护基来制备。化合物436.(7S)-7-(叔丁基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物495.(S)-4,8-二甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物498.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物563.(S)-7-异丁基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物589.(S)-7-(2-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物590.(S)-7-(叔丁氧基甲基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物604.(S)-7-(羟甲基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物600. 4',8'-二甲基-2'-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5',8'-二氢-6'H-螺[氧杂环丁烷-3,7'-喋啶]-6'-酮

化合物601. 3,3-二氟-4',8'-二甲基-2'-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)氨基)-5',8'-二氢-6'H-螺[环丁烷-1,7'-喋啶]-6'-酮

化合物665. 7-(1-甲氧基环丙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物726.(S)-7-(2-羟基丙-2-基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物742.(S)-7-((S)-1-(叔丁氧基)乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物744.(S)-7-((R)-1-羟乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

1H NMR(300MHz,甲醇-d

化合物707. 7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物662. 4',8'-二甲基-2'-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,5',8'-四氢-2H,6'H-螺[呋喃-3,7'-喋啶]-6'-酮

化合物663.4',8'-二甲基-2'-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,5,5',8'-四氢-2H,6'H-螺[呋喃-3,7'-喋啶]-6'-酮

化合物497.(7S)-7-乙基-8-异丙基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过方法A的通用程序(参见化合物46)制备化合物497(7S)-7-乙基-8-异丙基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮：使中间体A-76与B-52反应，得到标题产物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.33(s,1H),8.63(s,1H),7.96-7.81(m,2H),7.76(s,1H),7.43(s,1H),7.35(s,1H),7.01(s,1H),5.45(s,2H),4.43-4.20(m,3H),4.11(dd,J＝6.7,2.9Hz,1H),1.88-1.54(m,2H),1.34-1.17(m,6H),0.78(t,J＝7.4Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值474.21033，实验值475.37(M+1)

实例2R

表16展示通过方法A使中间体A-#与B-89反应(参见用于化合物46的程序)而制备的某些化合物。还提供某些化合物的

表16

化合物656.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物666. 7-(1-甲氧基环丙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物670. 7-(1-甲氧基环丁基)-4,8-二甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物678.(S)-7-(2-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物709. 7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2S

表17展示通过方法A程序使中间体A-#与B-39反应(参见用于化合物46的程序)而制备的某些化合物。还提供某些化合物的

表17

化合物728.(S)-2-(((1-((3,3-二氟环丁基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物727.(S)-2-(((1-((3,3-二氟环丁基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2T

表18提供通过方法A程序使中间体A-#与B-#反应(参见用于化合物46的程序)而制备的某些化合物。还提供某些化合物的

表18

化合物417.(7S)-2-(((1-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-乙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物421.(7S)-7-环丙基-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物422.(7S)-2-(((1-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物423.(7S)-2-(((1-((6-氟-4-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物425.(7S)-2-(((1-((5-氟-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物427.(7S)-7-乙基-8-甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物429.(7S)-7-异丙基-2-(((1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物433.(7S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物435.(7S)-7-环丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物437.(7S)-7-(叔丁基)-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物439.(S)-7-(2-羟乙基)-4-甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物440.(7S)-7-(2-羟乙基)-4-甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物441.(7S)-7-环丙基-2-(((1-((6-环丙基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物442.(7S)-2-(((1-((6-环丙基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物444.(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

4.23(q,J＝6.8Hz,1H),3.21(t,J＝6.9Hz,2H),3.09(s,3H),2.22(s,3H),1.35(d,J＝6.9Hz,3H)。

化合物447.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物448.(S)-2-(((1-((2-(二甲氨基)吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物449.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物450.(S)-2-(((1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物454.(S)-2-(((1-((5-氟吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物455.(S)-7-环丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物456.(S)-7-环丙基-4,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物457.(S)-7-环丙基-2-(((1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物466.(S)-7-环丙基-2-(((1-((2-(二甲氨基)吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物467.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-(4-(三氟甲氧基)苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物468.(S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

6.77(t,J＝6.0Hz,1H),4.34(dd,J＝5.9,2.3Hz,2H),4.01(q,J＝6.7Hz,1H),2.96(s,3H),2.15(s,3H),1.20(d,J＝6.8Hz,3H)。化合物469.(S)-2-(((1-((6-(叔丁基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物470.(S)-2-(5-((4-(((7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈

化合物479.(S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

6.48(t,J＝6.1Hz,1H),5.23(s,2H),4.21(d,J＝6.1Hz,2H),3.91-3.77(m,1H),3.01(s,3H),2.10(s,3H),0.93(d,J＝6.9Hz,3H),0.75(d,J＝6.9Hz,3H)。

化合物480.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物492.(S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-(3-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)丙基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物500.(S)-2-(((1-((6-(二氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物501.(S)-7-环丙基-2-(((1-((6-(二氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物510.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物511.(S)-2-(((1-((6-(1,1-二氟乙基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物516.(S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-(((1-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物518.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物565.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物658.(S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物659.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物668. 7-(1-甲氧基环丁基)-4,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物729.(S)-7-(2-羟基丙-2-基)-4,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物741.(S)-7-(叔丁氧基甲基)-4,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物747.(S)-7-((S)-1-(叔丁氧基)乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2U

表19提供通过方法B程序使中间体A-#与B-#反应(参见用于化合物1的程序)而制备的某些化合物。还提供某些化合物的

表19

化合物414.(7S)-2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物415.(7S)-2-(((1-((5-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物418.(7S)-2-(((1-((2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物424.(7S)-2-(((1-((6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物426.(7S)-2-(((1-((6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-乙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物431.(7S)-5-((4-(((7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)2-氰基吡啶

化合物432.(7S)-2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-乙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物434.(7S)-2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-环丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物443.(7S)-7-(2-羟乙基)-4,5,8-三甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物445.(7S)-2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-(2-羟乙基)-4,5,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物446.(7S)-2-(((1-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物608.(S)-2-(((1-((2-氯吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-环丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物499.(S)-2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物491.(S)-2-(((1-((2-氯噻唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

4.10(d,J＝4.0Hz,1H),3.15(s,3H),2.27-2.10(m,1H),2.20(s,3H),0.99(d,J＝6.9Hz,3H),0.77(d,J＝6.9Hz,3H)。

化合物517.(S)-7-异丙基-2-(((1-((2-异丙基噁唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物513.(S)-7-乙基-2-(((1-((2-异丙基噁唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物550.(S)-2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丁基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2V

表20中的实例通过方法A程序使中间体A-9与B-#反应(参见用于化合物46的程序)而制备。

表20

化合物488.(S)-2-(((1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物489.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-(4-(三氟甲氧基)苯甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物490.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2W

表21提供通过方法A程序使中间体A-9与B-#反应(参见用于化合物46的程序)而制备的某些化合物。还提供某些化合物的

表21

化合物451.(S)-2-(((1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物452.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2X

表22提供通过方法A程序使中间体A-9与B-#反应(参见用于化合物46的程序)而制备的某些化合物。还提供某些化合物的

表22

化合物453.(S)-2-(((2,5-二甲基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-吡咯-3-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物508.(S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-2,5-二甲基-1H-吡咯-3-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

用于合成化合物430的流程.

化合物430.(7S)-2-(((1-((6-氟-2-异丙基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)(甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

以两个步骤制备该化合物。

步骤1.(7S)-2-(((1-((6-氟-2-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)(甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过通用程序(方法B；参见化合物46)如下制备此化合物：使A-9与B-208反应以得到不经进一步纯化即使用的标题产物。ESI-MS m/z 465.39(M+1)

步骤2.(7S)-2-(((1-((6-氟-2-异丙基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)(甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

在烧瓶中放入来自步骤1的产物(95mg，0.186mmol)及含10％Pd/C(50mg)的10ml甲醇且装入氢气球。在室温下搅拌反应物14小时。经由硅藻土过滤反应物且蒸发滤液。通过柱色谱(SiO

实例2Y

用于表23中的实例的通用流程及程序：

步骤1：(S)-3-((2-异丙基-1,5-二甲基-3-氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[3,4-b]吡嗪-7-基)氨基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

将(7S)-2-氯-7-异丙基-4,8-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(6.6g，25.91mmol)及3-氨基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(4.9g，28.45mmol)溶解于叔丁醇(70mL)及THF(65mL)中。将叔丁醇钠(12.5g，130mmol)添加至溶液，且通过使氮气在溶液中鼓泡来使混合物脱气20min。将tButylXPhos钯环(Gen 1；900mg，1.3mmol)添加至混合物且在50℃下加热1.5小时。用饱和氯化铵(80ml)淬灭反应物且用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。收集并合并有机层，且添加Pd清除剂(2g)并在室温下搅拌隔夜。过滤混合物且真空蒸发溶剂。用5％二氯甲烷/甲基叔丁基醚(25ml)湿磨所得物质，过滤且在40℃下真空干燥，得到标题产物(9.7g，95％产率)。

步骤2：(S)-7-(氮杂环丁-3-基氨基)-2-异丙基-1,5-二甲基-1,4-二氢吡啶并[3,4-b]吡嗪-3(2H)-酮

将(S)-3-((2-异丙基-1,5-二甲基-3-氧代-1,2,3,4-四氢吡啶并[3,4-b]吡嗪-7-基)氨基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(7.36g，18.42mmol)溶解于20ml二氯甲烷中。将三氟乙酸(10ml)添加至溶液且在室温下搅拌14小时。浓缩反应物，得到残余物，将残余物溶解于二氯甲烷(30ml)中且通过缓慢添加二乙醚进行湿磨。通过过滤收集沉淀物且在真空烘箱中于50℃下干燥，得到呈TFA盐形式的标题产物(9g，98％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ5.01(p,J＝7.6Hz,1H),4.46-4.31(m,2H),4.19(ddd,J＝16.9,10.2,5.6Hz,3H),3.26(s,3H),2.40-2.24(m,4H),1.11(d,J＝7.0Hz,3H),0.89(d,J＝6.9Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值290.18552，实验值291.26(M+1)

步骤3：用于形成下表中的酰胺衍生物的程序.

在室温下向(7S)-2-(氮杂环丁-3-基氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(双TFA盐)(50mg，0.1mmol)、甲酸(0.1mmol)及HATU(55mg，0.15mmol)于NMP(1mL)中的溶液中添加DIPEA(67mL，0.4mmol)。在室温下将反应物搅拌2小时。用DMSO将反应混合物稀释至2mL总体积且提供用于自动纯化(Ortho 2方法)。减压移除溶剂，得到酰胺。

表23提供经由上文报导的通用程序制备的某些化合物。还提供某些化合物的

表23

化合物496.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(3,4,5-三氟苯甲酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物542.(S)-2-((1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物543.(S)-2-((1-(4,4-二氟环己烷-1-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物544.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(2-(3,4,5-三氟苯基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物545.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(6-(三氟甲基)烟碱酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物548.(S)-2-((1-(4-氟苯甲酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物549.(S)-2-((1-(6-氯烟碱酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物594.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物595.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(2-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物596.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物597.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-3-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物605.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(噁唑-4-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物606.(S)-2-((1-(2-(3,3-二氟环丁基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物607.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(6-(三氟甲氧基)烟碱酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物609.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物610.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(2-甲基噁唑-4-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物611.(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(四氢-2H-吡喃-2-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物612.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(2-(2-(三氟甲基)苯氧基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物613.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(2-(三氟甲基)噻唑-4-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物614.(S)-2-((1-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-3-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物615.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(6-(2,2,2-三氟乙氧基)烟碱酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物616.(S)-2-((1-(2-(2,4-二氟苯基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物617.(S)-2-((1-(1,2,5-噁二唑-3-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物618.(S)-2-((1-(2-(4-氟苯基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物619.(S)-7-异丙基-2-((1-(5-异丙基异噁唑-3-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物620.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(3-甲基异噁唑-5-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物621.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(5-(三氟甲基)呋喃-2-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物623.(7S)-2-((1-(2-(双环[2.2.1]庚-2-基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物626.(S)-2-((1-(2-(3,4-二氟苯基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物627.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-((R)-2-苯基丙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物628.(S)-2-((1-(2-(2,5-二甲基噻唑-4-基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物629.(S)-2-((1-(2-(3,5-二氟苯基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物630.(S)-2-((1-(2-氯噻唑-4-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物631.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(吡嗪-2-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物632.(S)-2-((1-(2-(2,3-二氟苯基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物633.(S)-2-((1-(2-氯噻唑-5-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物635.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(3-(三氟甲基)苯甲酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物636.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-((R)-四氢呋喃-2-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物637.(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(5-甲基四氢呋喃-2-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物638.(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(2-甲基四氢呋喃-2-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物639.(7S)-2-((1-(双环[2.2.1]庚烷-2-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物640.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(嘧啶-2-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物641.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-((S)-2-苯基丙酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物699.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(3-(三氟甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-羰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物592.(7S)-2-((1-((4-氟苯基)磺酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-7-(氮杂环丁-3-基氨基)-2-异丙基-1,5-二甲基-1,4-二氢吡啶并[3,4-b]吡嗪-3(2H)-酮(在用于表H的流程的步骤2中制备)(200mg，0.495mmol)溶解于二氯甲烷(4ml)及二异丙基乙胺(0.35μL，1.98mmol)。将4-氟苯磺酰氯(106mg，0.545mmol)添加至混合物，且在室温下搅拌2小时。用5ml饱和碳酸氢钠淬灭反应物且搅拌30min。用相分离器滤筒分离各层且减压移除溶剂。通过柱色谱(SiO

化合物564.(7S)-3-((7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)-N-(3,4,5-三氟苯基)氮杂环丁烷-1-甲酰胺.

将1,2,3-三氟-5-异氰酸酯基苯(38mg，0.22mmol)添加至(7S)-7-(氮杂环丁-3-基氨基)-2-异丙基-1,5-二甲基-1,4-二氢吡啶并[3,4-b]吡嗪-3(2H)-酮(82mg，0.158mmol)及二异丙基乙胺(0.14μL，0.79mmol)于NMP(2ml)中的溶液中。在50℃下加热反应物1小时。通过制备型反相HPLC(C18柱；10-90％乙腈/水(HCl))纯化反应物。蒸发相关级分以得到呈盐酸盐形式的标题产物(27mg，29％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.21(dddd,J＝10.2,9.1,3.9,2.3Hz,2H),4.82-4.68(m,1H),4.40-4.04(m,1H),3.53-3.34(m,1H),3.31-3.27(m,3H),3.23(d,J＝5.9Hz,1H),2.33-2.24(m,3H),1.14-0.77(m,6H)。ESI-MS m/z计算值463.19437，实验值464.24(M+1)

实例2Z

用于表24中的实例的反应流程

以下表24中的实例系经由关于表23报导的通用程序由各种中间体A-#制备。

表24

化合物568.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((1-(3,4,5-三氟苯甲酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物675. 7-(1-甲氧基环丁基)-4,8-二甲基-2-((1-(3,4,5-三氟苯甲酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物721. 7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-2-((1-(3,4,5-三氟苯甲酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物722. 7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-2-((1-(3,4,5-三氟苯甲酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物739.(S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-((1-(3,4,5-三氟苯甲酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物740.(S)-4,7,8-三甲基-2-((1-(3,4,5-三氟苯甲酰基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物509.

(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((S)-1-(3,4,5-三氟苯甲酰基)吡咯烷-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

经由关于表H实例所记录的相同通用3步程序制备化合物以得到标题化合物。

化合物541

(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((R)-1-(3,4,5-三氟苯甲酰基)吡咯烷-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

经由关于表H实例所记录的相同通用3步程序制备此化合物以得到标题化合物。

实例2AA

用于表25中的实例的通用流程及程序：

用于表25中的实例的通用程序：

将三乙酰氧基硼氢化钠(184mg，0.87mmol)添加至(7S)-2-(氮杂环丁-3-基氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮三氟乙酸(300mg，0.579mmol)、3,4,5-三氟苯甲醛(102mg，0.64mmol)及乙酸(65μL，1.157mmol)于二氯甲烷(3ml)中的溶液中且在室温下搅拌12小时。用饱和碳酸氢钠(3ml)淬灭反应物。分离有机层且用10ml二氯甲烷萃取水层。干燥且蒸发合并的有机层，得到粗产物。通过反相色谱(C18，100g柱)、用5-90％乙腈/水(0.1％TFA)洗脱来纯化产物。蒸发且中和所需级分，得到所需产物。

以下表25的实例通过上文所描述的通用程序制备。

表25

化合物591.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(3,4,5-三氟苯甲基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物603.(S)-2-((1-(4-氟-2-甲氧基苯甲基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物649.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物650.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((1-(4-(三氟甲基)苯甲基)氮杂环丁-3-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2BB

用于表26中的实例的通用流程及程序：

用于表26中的实例的通用程序.

步骤1：(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(S)-2-氯-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(5g，19.5mmol)、顺式-(3-氨基环丁基)甲醇盐酸盐(2.95g，21.4mmol及叔丁醇钠(8.07g，84mmol)的混合物溶解于叔丁醇(80ml)及二噁烷(75ml)中且搅拌20min直至大部分固体溶解为止。用氮气吹扫混合物15分钟。将tBuXPhos钯环(Gen 1)(260mg，0.4mmol)添加至混合物，随后用氮气吹扫10分钟。在60℃下搅拌反应物1小时。真空蒸发反应混合物，且将所得残余物溶解于100ml水中并用二氯甲烷(2×80ml)萃取。合并萃取物，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(120g SiO

步骤2：通用程序.

将(7S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(1当量)、三苯基膦(2.1当量)及杂环(羟基杂环、吡唑或咪唑衍生物；1.6当量)的混合物溶解于THF(25体积当量)中。在室温下将偶氮二甲酸二乙酯(2.1当量)逐滴添加至混合物，随后加热至50℃，保持2小时。通过制备型反相HPLC(C18柱)、用10-95％乙腈/水(0.5mM HCl)洗脱来纯化粗产物以得到表26中描述的产物。

表26

化合物551.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物570.(S)-2-((顺式-3-(((6-氯吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

1H NMR(400MHz,甲醇-d

化合物571.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(((6-甲基吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物572. 5-((顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)甲氧基)2-氰基吡啶

化合物573.(S)-7-异丙基-2-((顺式-3-(((6-甲氧基吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物574.(S)-2-((顺式-3-(((6-氟吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物575.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(((1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物580.(S)-2-((顺式-3-((苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-基氧基)甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物581.(S)-2-((顺式-3-((3-环丙基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物582.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((3-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物583.(S)-2-((顺式-3-((3-氯-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物584.(S)-2-((顺式-3-((3-氨基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物585.(S)-2-((顺式-3-((5-氨基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物598.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(((6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物680.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((4-(三氟甲基)-1H-咪唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物690.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物693.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(((1-甲基-1H-吡唑-5-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物694.3-氟-5-((顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)甲氧基)2-氰基吡啶

化合物695. 5-氯-2-((顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)甲基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲腈

1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ4.59(d,J＝6.9Hz,2H),4.37(q,J＝8.2Hz,1H),4.14(d,J＝3.8Hz,1H),3.26(s,3H),2.78-2.67(m,1H),2.59(dddd,J＝11.5,6.1,4.8,2.1Hz,2H),2.39-2.33(m,0H),2.30(s,3H),1.95(dtd,J＝11.8,9.2,6.3Hz,2H),1.10(d,J＝6.9Hz,3H),0.88(d,J＝6.9Hz,3H)。

化合物696.(S)-2-((顺式-3-(((6-乙酰基吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2CC

用于表27中的实例的通用流程及程序：

用于表27中的实例的通用程序：

化合物646

使用微波反应器在150℃下将(7S)-2-氯-7-乙基-4,8-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(81mg，0.34mmol)、3-[[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]氧基甲基]环丁胺盐酸盐(79mg，0.28mmol)及TFA(40μL，0.56mmol)于n-BuOH(1mL)中的混合物加热90分钟。真空蒸发反应物，且通过反相色谱、用5-90％乙腈/水(5mM HCl)梯度洗脱来纯化粗产物。蒸发所需级分，得到呈HCl盐形式的产物(56mg，41％产率)。

表27中提供通过上文所描述的通用程序使中间体A-#与B-195反应而制备的实例。

表27

化合物646.(S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物643.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物671. 7-(1-甲氧基环丁基)-4,8-二甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物750.(1s,3s)-3-(((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)甲基)环丁-1-胺

实例2DD

用于表28中的实例的通用流程及程序：

用于表28中的实例的通用程序：

表28中的实例通过与关于表27所描述相同的程序使中间体A-#与中间体B-211反应来制备。

表28

化合物714.(S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-(((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物713.(S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物712.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物711.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2EE

用于表29中的实例的通用流程及程序：

用于表29中的实例的通用程序：

(S)-2-((顺式-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(S)-2-氯-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(1.17g，4.55mmol)、顺式-3-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁-1-胺盐酸盐(1.16g，21.4mmol)及2M叔丁醇钠溶液(8.07g，84mmol)于THF中的混合物溶解于叔丁醇(35ml)中且搅拌20min直至大部分固体溶解为止。用氮气吹扫混合物15分钟。将tBuXPhos钯环(Gen 1)(150mg，0.22mmol)添加至混合物，随后用氮气吹扫10分钟。在60℃下搅拌反应物1小时。真空蒸发反应混合物，且将所得残余物溶解于100ml水中并用二氯甲烷(2×80ml)萃取。合并萃取物，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(120g SiO

表29提供通过上文所描述的通用程序使中间体A-#与B-139反应而制备的实例。

表29

**化合物通过去除化合物723的叔丁基醚的保护基来制备化合物512.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物588.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物723.(S)-7-(叔丁氧基甲基)-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物743.(S)-7-(羟甲基)-4,8-二甲基-2-(((1s,3R)-3-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2FF

用于表30中的实例的通用流程及程序：

用于表30中的实例的通用程序：

表30中的实例通过与关于表29报导的相同程序使中间体A-#与中间体B-210反应来制备。

表30

化合物690.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物691.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2GG

用于表31中的实例的通用流程及程序：

用于表31中的实例的通用程序：

表31中的实例通过与关于表28报导的相同程序使中间体A-#与中间体B-197b反应来制备。

表31

化合物730.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物731.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((反式-3-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2HH

用于表32中的实例的通用流程及程序：

步骤1.(顺式-3-(((7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯.

在氮气下将叔丁醇钠的THF溶液(2M溶液；17ml，33.4mmol)添加至(7S)-2-氯-7-异丙基-4,8-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(2.446g，9.507mmol)、(反式-3-氨基环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1.773g，9.517mmol)及tBuXPhoS(Gen 1；261.4mg，0.3806mmol)于40ml叔丁醇中的混合物中。在50℃下搅拌反应物30min。用冰冷氯化铵(200ml)淬灭反应物且用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。合并萃取物，经无水硫酸钠干燥且过滤。将滤液与TMT清除剂树脂一起搅拌以移除Pd，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤2.(7S)-2-((顺式-3-氨基环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮二盐酸盐.

将(反式-3-(((7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(2.17g，5.36mmol)溶解于甲醇(30ml)中。将氯化氢(11ml，44mmol)于二噁烷中的4M溶液添加至溶液，且将混合物加热至50℃，保持30分钟。真空蒸发反应物，且用庚烷洗涤所得固体，过滤并在50℃下真空干燥，得到呈白色固体的标题产物，2.31g(定量产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ4.43-4.26(m,1H),4.15(d,J＝3.8Hz,1H),3.58(ddd,J＝22.7,16.2,7.5Hz,1H),3.28(s,3H),2.98-2.81(m,2H),2.38-2.31(m,1H),2.30(d,J＝3.5Hz,3H),2.25(d,J＝8.7Hz,1H),1.11(d,J＝7.0Hz,3H),0.89(d,J＝6.9Hz,3H)。ESI-MS m/z 305.22(M+1)

步骤3.通用程序.

将(7S)-2-((反式-3-氨基环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮二盐酸盐(1当量)、经卤素取代的芳环或杂芳环(1.1当量)及二异丙基乙胺(5当量)溶解于2ml异丙醇中且在微波管中于250℃下加热1小时。真空蒸发反应物且通过制备型柱色谱(C18)、用0至100％乙腈/水(TFA改质剂)洗脱来纯化。

表32中提供通过上文所描述的通用程序使中间体A-1(R

表32

化合物485.(S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((3,4,5-三氟苯基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物527.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物528.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物532.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物534.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物536.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((3,4,5-三氟苯甲基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物539.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物556.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((6-(三氟甲基)哒嗪-3-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物561.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物569.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-1,2,4-三唑-5-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物576.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲氧基)吡啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物577.(S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲氧基)吡啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物586.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物602. 5-((顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)吡嗪-2-甲腈

化合物715. 5-氟-6-((顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)烟碱腈

化合物716. 6-((顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)烟碱腈

化合物717. 2-((顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)嘧啶-5-甲腈

化合物732.(S)-2-((顺式-3-((5-氟吡啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物733.(S)-7-异丙基-2-((顺式-3-((5-甲氧基吡啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物734.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2II

用于表33中的实例的通用流程及程序：

酰胺形成(方法A至D).

方法A.

将二异丙基乙胺(4当量)添加至(7S)-2-((顺式-3-氨基环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮二盐酸盐(1当量)、羧酸衍生物(1.5当量)及HATU(1.5当量)于NMP(2ml)中的溶液中且在室温下搅拌。通过逆向层析(C18)、用乙腈/水(TFA改质剂)洗脱来纯化反应物。

方法B.

将酸氯化物或氯甲酸酯衍生物(1.3当量)添加至(7S)-2-((顺式-3-氨基环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮二盐酸盐(1当量)于吡啶(1ml)中的溶液中且在室温下搅拌1小时。真空蒸发反应物且通过逆向层析(C18)、用乙腈/水(TFA改质剂)洗脱来纯化残余物。

方法C.

将光气(15％w/w，800μL)于甲苯中的溶液添加至(7S)-2-((顺式-3-氨基环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮二盐酸盐及二异丙基乙胺(0.5ml，2.89mmol)于二氯甲烷(4ml)中的混合物中，且搅拌反应物30min。真空蒸发反应物，得到粗产物异氰酸酯衍生物。将胺(3当量)添加至异氰酸酯(1当量)及二异丙基乙胺(7当量)于二氯甲烷(3ml)中的溶液中及在50℃下加热隔夜。真空蒸发反应物，且通过反相色谱(C18)、用乙腈/水(0.5％TFA)洗脱来纯化。

方法D.

将1-氟-4-异氰酸酯基苯(35μL，0.31mmol)添加至(7S)-2-((顺式-3-氨基环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮二盐酸盐(91mg，0.25mmol)及二异丙基乙胺(175μL，1.02mmol)于异丙醇(2ml)中的溶液中。在室温下搅拌反应物1小时，随后真空蒸发，且通过反相色谱(C18)、用乙腈/水(0.5％TFA)洗脱来纯化残余物。得到67mg所需产物。

表33实例通过上文所描述的通用程序如下制备：使(7S)-2-((顺式-3-氨基环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(R

表33

化合物475. 3,4,5-三氟-N-(顺式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)苯甲酰胺

化合物514.N-(顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)-2-(3,4,5-三氟苯基)乙酰胺

化合物553.

化合物559.N-(顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙酰胺

化合物481. 3,4,5-三氟-N-(顺式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)苯磺酰胺

化合物458. 1-(4-氟苯基)-3-(顺式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物460. 1-(2,3,4-三氟苯基)-3-(顺式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物464.(顺式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸4-氟苯酯

化合物472. 1-(3,4,5-三氟苯基)-3-(顺式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物484.(顺式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸3,4,5-三氟苯酯

化合物473. 1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-3-(顺式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物477. 1-(2,4,5-三氟苯基)-3-(顺式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物525. 4,4-二氟-N-(顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)哌啶-1-甲酰胺

化合物526. 1-(4,4-二氟环己基)-3-(顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物538. 1-(4,4-二氟环己基)-3-(顺式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)-1-甲基脲

实例2JJ

用于表34中的实例的通用流程及程序：

步骤1.

经由与关于流程及表32如所描述相同的程序制备(反式-3-(((7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯及(反式-3-(((7S)-7-甲基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯且经去除保护基得到(7S)-2-((反式-3-氨基环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮二盐酸盐及(7S)-2-((反式-3-氨基环丁基)氨基)-7-甲基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮二盐酸盐。

表34中的实例系经由与关于表33所描述相同的程序制备。

表34

化合物476. 3,4,5-三氟-N-(反式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)苯甲酰胺

化合物554.N-(反式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)-2-(3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)乙酰胺

化合物560.N-(反式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙酰胺

化合物482. 3,4,5-三氟-N-(反式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)苯磺酰胺

化合物459. 1-(4-氟苯基)-3-(反式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物461. 1-(2,3,4-三氟苯基)-3-(反式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物463. 1-(6-氯吡啶-3-基)-3-(反式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物465.(反式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸4-氟苯酯

化合物474. 1-(3,4,5-三氟苯基)-3-(反式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物483.(反式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)氨基甲酸3,4,5-三氟苯酯

化合物471. 1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-3-(反式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物478. 1-(2,4,5-三氟苯基)-3-(反式-3-(((S)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物524. 1-(4,4-二氟环己基)-3-(反式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)脲

化合物537. 1-(4,4-二氟环己基)-3-(反式-3-(((S)-7-异丙基-4,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)环丁基)-1-甲基脲

实例2KK

用于制备表35中的实例的通用流程及程序

通用程序.

将(7S)-2-((反式-3-氨基环丁基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮二盐酸盐(1当量)、经卤素取代的芳环或杂芳环(1.1当量)及二异丙基乙胺(5当量)溶解于2ml异丙醇中且在微波管中于150℃下加热1小时。真空蒸发反应物且通过制备型柱色谱(C18)、用0至100％乙腈/水(TFA改质剂)洗脱来纯化。

表35

化合物486.(S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((3,4,5-三氟苯基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物529.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物530.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物531.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物533.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物535.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((3,4,5-三氟苯甲基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物540.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物555.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)哒嗪-3-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物558.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物579.(S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物587.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2LL

用于制备表36中的实例的通用流程及程序

用于表36中的实例的通用程序

如下制备所述化合物：经由关于表27中的实例所描述的程序使中间体A-#(1当量)与反式-N1-甲基-N1-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)环丁烷-1,3-二胺盐酸盐(B-199)(1.2当量)反应以得到所需产物。

表36

化合物655.(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-(甲基(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物681.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((反式-3-(甲基(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物682.(S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-(甲基(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物683.(S)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(甲基(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2MM

用于制备表37中的实例的通用流程及程序

用于表37中的实例的通用程序

如下制备所述化合物：经由关于表27中的实例所描述的程序使中间体A-#(1当量)与顺式-N1-甲基-N1-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)环丁烷-1,3-二胺盐酸盐(B-198)(1.2当量)反应以得到所需产物。

表37

化合物652.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(甲基(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物653.(S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-(甲基(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物651.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(甲基(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物654.(7S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-(甲基(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2NN

用于表38中的实例的通用程序

如下制备所述化合物：经由关于表L中的实例所描述的程序使中间体A-#(1当量)与顺式-N1-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)环丁烷-1,3-二胺盐酸盐B-209(1.2当量)反应以得到所需产物。

表38

化合物557.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物578.(S)-4,7,8-三甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物647.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物648.(S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物672. 7-(1-甲氧基环丁基)-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2OO

用于表39中的实例的通用程序

如下制备所述化合物：经由关于表L中的实例所描述的程序使中间体A-#(1当量)与顺式-N1-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)环丁烷-1,3-二胺盐酸盐B-212(1.2当量)反应以得到所需产物。

表39

化合物738.(S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-(((1R,3S)-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物737.(S)-4,7,8-三甲基-2-(((1R,3S)-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物736.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-(((1R,3S)-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物735.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1R,3S)-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2PP

用于制备表40中的实例的通用流程及程序

用于表40中的实例的通用程序：

表40的化合物通过方法A程序(参见化合物46)使中间体A-#与B-101反应而制备。

表40

化合物745.(S)-7-((S)-1-(叔丁氧基)乙基)-4,8-二甲基-2-(((1r,3S)-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物720. 7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物719. 7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物677.(S)-7-(羟甲基)-4,8-二甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物674.(S)-7-(叔丁氧基甲基)-4,8-二甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物667. 7-(1-甲氧基环丁基)-4,8-二甲基-2-((反式-3-(3,4,5-三氟苯氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2QQ

用于制备表41中的实例的通用流程及程序

表41中的化合物通过方法A程序(参见化合物46)使中间体A-#与B-112反应而制备。

表41

化合物748.(7S)-4,5,7,8-四甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物725.(S)-7-(叔丁氧基甲基)-4,8-二甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物669. 7-(1-甲氧基环丁基)-4,8-二甲基-2-((反式-3-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物685.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物684.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物724. 7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2RR

用于制备表42中的实例的通用流程及程序

表42中的实例通过方法A程序(参见化合物46)使中间体A-#与B-115反应而制备。

表42

化合物645.(S)-7-乙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物644.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((顺式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物657.(S)-7-((R)-1-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-((反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物710. 7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物706. 7-(甲氧基甲基)-4,7,8-三甲基-2-((反式-3-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2SS

以下表43中的化合物通过方法A程序使中间体A-9与中间体B-#反应而制备。

表43

化合物502.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1S,3R)-3-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)氨基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物503.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1S,3S)-3-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)氨基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物504.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1R,3R)-3-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)氨基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物505.(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1R,3S)-3-(甲基(4-(三氟甲基)苯基)氨基)环戊基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

实例2TT

以下表44的化合物通过方法A程序使中间体A-67与中间体B-#反应而制备。

表44

化合物687. 4',8'-二甲基-2'-((顺式-3-((5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)氨基)环丁基)氨基)-4,5,5',8'-四氢-2H,6'H-螺[呋喃-3,7'-喋啶]-6'-酮

化合物688. 4',8'-二甲基-2'-((反式-3-((5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)环丁基)氨基)-4,5,5',8'-四氢-2H,6'H-螺[呋喃-3,7'-喋啶]-6'-酮

化合物689. 4',8'-二甲基-2'-((反式-3-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)环丁基)氨基)-4,5,5',8'-四氢-2H,6'H-螺[呋喃-3,7'-喋啶]-6'-酮

1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.30(d,J＝2.8Hz,1H),7.75(d,J＝8.7Hz,1H),7.43(dd,J＝8.7,2.8Hz,1H),5.07(t,J＝5.2Hz,1H),4.64(t,J＝7.2Hz,1H),4.30-4.12(m,4H),3.83(td,J＝9.3,7.3Hz,1H),3.25(s,3H),2.68(dd,J＝7.2,5.2Hz,4H),2.62-2.58(m,0H),2.46-2.36(m,1H),2.32(s,3H)。

化合物697. 4',8'-二甲基-2'-((顺式-3-(((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-4,5,5',8'-四氢-2H,6'H-螺[呋喃-3,7'-喋啶]-6'-酮

实例2UU

化合物506及507.(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((反式)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)环-丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((顺式)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)环-丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

如下制备化合物503及化合物504：通过方法B程序(参见化合物1)使中间体A-2(220mg，0.975mmol)与3-(4-(三氟甲氧基)苯基)环丁-1-胺盐酸盐(261mg，0.975mmol)反应，得到顺式:反式异构体的混合物。通过SFC(OJ-H柱，20×250mm；20％甲醇(5mM氨)/80％CO2，等度；80ml/min)分离所述异构体：峰A Rt 0.506min及峰B(顺式)Rt 0.653min。

化合物506：峰A(反式异构体),37mg；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(s,1H),7.38-7.31(m,2H),7.21(t,J＝10.7Hz,2H),5.04(d,J＝6.3Hz,1H),4.58-4.43(m,1H),4.09(q,J＝6.9Hz,1H),3.73-3.58(m,1H),3.06(d,J＝5.2Hz,3H),2.59(dddd,J＝10.9,7.8,6.1,3.2Hz,2H),2.50-2.35(m,2H),2.24(s,3H),1.41(d,J＝6.9Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值421.17255，实验值422.28(M+1)

化合物507：峰B(顺式异构体),89mg；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.34(s,1H),7.24(d,J＝8.6Hz,2H),7.15(d,J＝8.1Hz,2H),5.48(s,1H),4.51-4.31(m,1H),4.09(q,J＝6.8Hz,1H),3.33-3.17(m,1H),3.08(s,3H),2.96-2.76(m,2H),2.29(s,3H),2.01(td,J＝11.7,2.5Hz,2H),1.43(d,J＝6.9Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值421.17255，实验值422.28(M+1)

实例2VV

化合物673.(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-((反式-3-(5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过方法A(化合物46)程序如下制备化合物：使中间体A-9与B-197a反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.43(s,1H),7.43(q,J＝1.1Hz,1H),6.46(d,J＝2.3Hz,1H),4.99-4.77(m,2H),4.51(tt,J＝8.5,4.7Hz,1H),3.81(dd,J＝4.4,1.6Hz,1H),3.03(d,J＝1.1Hz,3H),2.96-2.81(m,2H),2.50(ddd,J＝13.4,8.6,4.9Hz,2H),2.19-2.13(m,1H),2.13(t,J＝1.4Hz,3H),1.04-0.91(m,3H),0.84(d,J＝6.9Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值423.19943，实验值424.3(M+1)

实例2WW

通过关于化合物409所描述的相同程序经由相同流程制备以下化合物：

化合物567(R＝CF3).(7S)-7-环丁基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.61(s,1H),7.83(s,1H),7.75-7.62(m,2H),7.57(d,J＝0.7Hz,1H),7.44(d,J＝0.7Hz,1H),5.37(s,2H),4.87(d,J＝5.9Hz,1H),4.57-4.35(m,2H),3.86(d,J＝7.9Hz,1H),3.09(s,3H),2.67(h,J＝8.0Hz,1H),2.21(s,3H),2.05(qd,J＝8.9,3.3Hz,3H),1.99-1.60(m,3H)。ESI-MS m/z 487.23(M+1)

1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.30(d,J＝2.5Hz,1H),7.55(s,1H),7.51(dd,J＝8.5,2.9Hz,2H),7.39(s,1H),7.33(s,0H),5.27(s,2H),4.85(s,1H),4.43(d,J＝5.8Hz,2H),3.87(d,J＝7.9Hz,1H),3.09(s,3H),2.65(p,J＝8.3Hz,1H),2.20(s,3H),2.14-1.99(m,3H),1.99-1.74(m,3H)。ESI-MS m/z 453.41(M+1)

化合物660(R

通过方法B(化合物1)程序如下制备化合物：使A-9与B-173反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ4.38(p,J＝8.2Hz,1H),4.14(d,J＝3.8Hz,1H),3.27(s,3H),3.22(d,J＝7.2Hz,2H),2.79-2.64(m,2H),2.64-2.54(m,1H),2.34(dt,J＝6.9,3.5Hz,0H),2.30(s,3H),1.93(dtd,J＝10.9,9.0,5.9Hz,2H),1.11(d,J＝7.0Hz,3H),0.89(d,J＝6.9Hz,3H)；ESI-MS m/z计算值439.19437，实验值440.33。

化合物664(R

通过方法B(化合物1)程序如下制备化合物：使A-59与B-173反应以得到标题产物。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ4.40(q,J＝8.2Hz,1H),4.23(d,J＝3.8Hz,1H),3.79(qd,J＝6.4,3.7Hz,1H),3.34(s,3H),3.29(s,3H),3.23(d,J＝7.3Hz,2H),2.71(tt,J＝7.5,3.8Hz,2H),2.60(dt,J＝9.3,7.4Hz,1H),2.32(s,3H),2.01-1.90(m,2H),1.28(d,J＝6.5Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值455.18927，实验值456.27。[α]＝36.0°(c＝1.0,DMSO)，23℃。

化合物428.(S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过方法A(化合物46)程序如下制备化合物：使中间体A-1与B-180反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δ8.57(s,1H),8.44(s,1H),7.75(dd,J＝12.1,7.0Hz,2H),7.43(s,1H),7.32(d,J＝15.5Hz,0H),5.61(d,J＝28.3Hz,2H),4.65(q,J＝16.0Hz,1H),4.25(d,J＝6.9Hz,1H),4.12(s,1H),3.09(d,J＝18.5Hz,3H),2.20(d,J＝22.5Hz,3H),1.43(dd,J＝40.0,6.9Hz,3H)；ESI-MS m/z447.29。

化合物413.(7S)-2-(((1-((2-乙酰基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将1-(3-((4-(氨基甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙-1-酮盐酸盐(814mg，2.432mmol)、(7S)-2-氯-4,7,8-三甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(500mg，2.206mmol)及NaOtBu(742.0mg，7.721mmol)的混合物溶解于叔丁醇(10mL)中且加热至35℃。通过用氮气鼓泡将反应物吹扫30min。将tBuXPhosPd钯环(Gen 1；31mg，0.04514mmol)添加在反应物。用氮气吹扫反应物5min。随后在50℃下加热45分钟。真空移除叔丁醇，且将残余物溶解于二氯甲烷(20ml)加一些甲醇中并经由硅藻土过滤。真空蒸发滤液，且通过柱色谱(SiO2；40g)、用二氯甲烷至20％甲醇/二氯甲烷的梯度洗脱来纯化残余物。真空蒸发所需级分，得到产物(500mg，45％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.78-7.67(m,2H),7.60(s,1H),7.54(s,1H),7.23(d,J＝8.2Hz,1H),5.77(s,2H),4.88(t,J＝5.5Hz,1H),4.56-4.39(m,2H),4.10(q,J＝6.8Hz,1H),3.07(s,3H),2.80(s,3H),2.23(s,3H),1.42(d,J＝6.9Hz,3H)。ESI-MS m/z 489.14(M+1；[α]D＝+43.71°,9.7mg于1mL MeOH中，温度＝20.6℃。

化合物419及化合物420.(7S)-2-(((1-((2-((S)-1-羟乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-2-(((1-((2-((R)-1-羟乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将(7S)-2-(((1-((2-乙酰基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(310mg，0.6219mmol)溶解于甲醇(10ml)中且冷却至0℃。添加硼氢化钠(25mg，0.6608mmol)且经2小时升温至室温。真空蒸发反应物，得到残余物，将残余物溶解于水中，且用二氯甲烷(2×25ml)萃取。合并萃取物，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO2；12g)、用二氯甲烷至20％甲醇的梯度洗脱来纯化粗产物。合并所需级分且真空蒸发以提供230mg呈对映异构体混合物形式的所需产物。通过SFC(AD-H柱；20％异丙醇/80％CO2(5mM氨)等度)分离所述对映异构体以得到对映异构体A及B。

对映异构体A：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.94(s,1H),7.57(t,J＝4.0Hz,2H),7.48-7.35(m,2H),5.42(s,2H),5.14(q,J＝6.4Hz,1H),4.90(t,J＝5.7Hz,1H),4.55-4.35(m,2H),4.09(q,J＝6.9Hz,1H),3.05(s,3H),2.22(s,3H),1.50-1.32(m,6H),1.23(d,J＝6.1Hz,1H)。ESI-MS m/z 491.26(M+1)；[α]

对映异构体B：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.63(s,1H),7.58(t,J＝4.0Hz,2H),7.42(d,J＝7.1Hz,2H),5.42(s,2H),5.14(q,J＝6.5Hz,1H),4.93(s,1H),4.52-4.35(m,2H),4.09(q,J＝6.9Hz,1H),3.05(s,3H),2.22(s,3H),1.43(dd,J＝8.9,6.7Hz,6H)。ESI-MS m/z491.26(M+1)

化合物416.(7S)-2-(((1-((2-(2-羟基丙-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

将(7S)-2-(((1-((2-乙酰基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(184mg，0.3692mmol)溶解于THF(5mL)中且于N2下冷却至-78℃。将甲基氯化镁(400μL，3M，1.200mmol)逐滴添加至溶液。添加后，经2小时将反应物升温至室温。通过添加氯化铵溶液淬灭反应物，随后用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

化合物412.(S)-2-(((3-溴-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

通过方法B(化合物1)程序如下制备化合物：使中间体A-1与B-164反应以得到标题产物。1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.89(s,1H),8.66-8.49(m,1H),7.87-7.55(m,2H),7.38(s,1H),5.29(s,2H),5.03(t,J＝6.0Hz,1H),4.51-4.20(m,2H),4.04(q,J＝6.8Hz,1H),3.01(s,3H),2.23(s,3H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值524.08954，实验值525.36(M+1)

实例2XX

***用于WFS1结合移位分析中的放射性配体的合成(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基-3-三氚)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将10％钯/碳(1.0mg)添加至氚反应容器，接着添加(S)-2-(((3-溴-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(1.0mg)于DMF(0.3mL)及DIEA(0.1ml)中的溶液。容器连接到氚引线且在-200℃下用氚气加压至0.5个大气压。在室温下搅拌溶液1小时，冷却至-200℃且移除过量气体。用4×5mLCH3OH、使各份甲醇洗液穿过硅藻土垫来冲洗反应烧瓶。真空移除合并的甲醇洗液。粗产物产量：30mCi。通过半制备型反相HPLC纯化该物质。真空移除移动相，且将产物再溶解于纯乙醇中。产量：15mCi，纯度>99％。通过质谱测定比活性为19.9Ciimmol。

实例2YY

步骤1：2-((二甲氨基)亚甲基)环戊烷-1,3-二酮.

将环戊烷-1,3-二酮(10g，101.9mmol)及1,1-二甲氧基-N,N-二甲基-甲胺(16g，134.3mmol)溶解于二氯甲烷(90mL)且在室温下搅拌1小时。真空蒸发反应物，且用环己烷(2×25mL)湿磨残余物，得到所需产物的浅黄色固体(18g)。

步骤2：2-(((甲苯磺酰基甲基)氨基)亚甲基)环戊烷-1,3-二酮.

将2-((二甲氨基)亚甲基)环戊烷-1,3-二酮(18g，110％)及4-甲基苯磺酰肼(19.93g，107.0mmol)溶解于甲醇中且在室温下搅拌1小时。真空蒸发反应物，得到呈黄色固体的所需产物，用己烷洗涤该产物且过滤以得到所需产物(25.5g，82％)。

步骤3：5,6-二氢环戊并[c]吡唑-4(1H)-酮.

在110℃下将2-(((甲苯磺酰基甲基)氨基)亚甲基)环戊烷-1,3-二酮(5g，2mmol)、HCI(20mL，37％水溶液)及n-BuOH(40mL)的混合物搅拌12h。真空浓缩黑色反应混合物，得到深色粗产物，其通过MPLC(SiO2；40g)、用0-10％甲醇/二氯甲烷的梯度洗脱来纯化。合并相关级分且真空蒸发，得到呈黄色固体的产物(1.2g，48％)。

步骤4：1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-5,6-二氢环戊并[c]吡唑-4(1H)-酮及2-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-5,6-二氢环戊并[c]吡唑-4(2H)-酮.

将5,6-二氢环戊并[c]吡唑-4(1H)-酮(1.15g，9.357mmol)、5-(氯甲基)-2-(三氟甲基)吡啶(2.1g，10.74mmol)及K

步骤5：1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-醇及2-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-2,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-醇.

将来自步骤4的位置异构体混合物(1g，3.556mmol)溶解于甲醇中。将硼氢化钠(134.5mg，142.3μL，3.556mmol)添加至溶液且在室温下搅拌1小时。真空蒸发反应物。将残余物溶解于二氯甲烷中且用水洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤，且真空蒸发。通过柱色谱(SiO

将来自步骤5的产物(0.76g，2.683mmol)溶解于THF(10ml)中且冷却至0℃。将DBU(490μL，3.277mmol)及DPPA(886.1mg，693.9μL，3.220mmol)添加至溶液且在室温下搅拌3小时。真空蒸发反应物。将所得残余物溶解于二氯甲烷中且用水洗涤。有机层经Na

步骤7：1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-胺及2-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-2,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-胺.

将水(1ml，55.5mmol)添加至来自步骤6的两种位置异构体(4-叠氮基-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑及4-叠氮基-2-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-2,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑)(0.650g，2.11mmol)及三苯基膦(0.98g，3.736mmol)于THF(10ml)中的溶液中。在室温下搅拌反应物16小时。真空蒸发反应物。将残余物溶解于2N HCl(5ml)中且用乙酸乙酯(2×10ml)洗涤。用2N氢氧化钠碱化水层且用二氯甲烷(3×5ml)萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且蒸发以得到呈淡黄色油状物的呈位置异构体混合物的形式的产物(591mg，99％)。

步骤8：

制备以下最终产物，得到化合物519、520、521、522。如下制备这些化合物：经由方法A程序使(7S)-2-氯-7-异丙基-4,8-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮(A-3；250mg，0.9815mmol)与来自步骤7的位置异构体(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-胺及2-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-2,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-胺的混合物(305mg，1.081mmol)反应，得到呈各位置异构体的对映异构体混合物形式的产物(130mg，26％)。

手性HPLC显示四个峰：各位置异构体的R及S对映异构体以及含R、S对映异构体的各异构体。手性HPLC(Chiral PAK IC柱；方法20％甲醇/30％乙醇/50％己烷，等度；25min.)。通过SFC层析(IA柱，10×250mm；30％乙醇(5mM氨)/70％CO2，等度，15ml/min)分离四种异构体。峰A及B为一种位置异构体的非对映异构体对。峰C及D为另一位置异构体的另一非对映异构体对。此通过1H NMR基于吡唑的质子转变测定：峰A及B的场质子转变较高(7.2ppm)；峰C及D的场吡唑质子转变较低(7.4ppm)。

化合物519(异构体A)及化合物520(异构体B).

(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((S)-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((R)-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物519(异构体A)：

异构体A(26mg,20％)1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.69(s,1H),8.52(d,J＝2.0Hz,1H),7.72-7.52(m,2H),7.15(s,1H),5.25(s,2H),5.22(d,J＝6.8Hz,3H),3.81(d,J＝4.4Hz,1H),3.04(s,3H),2.81(ddt,J＝14.9,8.1,3.7Hz,2H),2.64(ddd,J＝15.0,9.4,5.9Hz,1H),2.27-2.03(m,6H),0.99(d,J＝6.9Hz,3H),0.85(d,J＝6.9Hz,3H),0.83-0.59(m,4H)。ESI-MS m/z计算值500.22598，实验值501.54(M+1)

手性HPLC(Chiral PAK IC柱；20％甲醇/30％乙醇/50％己烷，等度，25min)：Rt6.934min(98％ee)；[α]＝28.5°(c＝0.5,CHCl3)，22.2℃。

化合物520(异构体B)：

异构体B(28.5mg,22％)1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.99(s,1H),8.59(s,1H),7.68(q,J＝8.3Hz,2H),7.24(s,1H),5.62(s,1H),5.32(d,J＝10.2Hz,3H),3.91(d,J＝4.3Hz,1H),3.14(s,3H),2.91(tdd,J＝12.5,8.7,4.9Hz,2H),2.73(dt,J＝14.9,8.5Hz,1H),2.40-2.07(m,5H),1.27(s,1H),1.21(dd,J＝6.1,4.0Hz,1H),1.08(d,J＝6.9Hz,7H),0.94(d,J＝6.9Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值500.22598，实验值501.36(M+1)

手性HPLC(Chiral PAK IC柱；20％甲醇/30％乙醇/50％己烷，等度，25min)：Rt6.45min(98％ee)；[α]＝135.1°(c＝0.5,CHCl3)，22.2℃。

化合物521(异构体C)及化合物522(异构体D).

(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((S)-2-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-2,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((R)-2-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-2,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物521(异构体C)：

异构体C(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-[[2-[[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]甲基]-5,6-二氢-4H-环戊并[c]吡唑-4-基]氨基]-5,7-二氢喋啶-6-酮(24.5mg,19％)1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.78(s,1H),8.59(s,1H),7.88-7.58(m,2H),7.34(s,1H),5.44(s,1H),5.29(s,2H),5.26(s,1H),4.34-4.09(m,1H),3.89(d,J＝4.4Hz,1H),3.14(s,3H),3.01(p,J＝7.3,6.7Hz,1H),2.75(ddd,J＝14.5,8.4,5.1Hz,1H),2.55(ddd,J＝14.8,8.6,4.7Hz,1H),2.41(tt,J＝8.9,4.0Hz,1H),2.23(s,4H),1.07(d,J＝6.9Hz,3H),0.93(d,J＝6.8Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值500.22598，实验值501.27(M+1)

化合物522(异构体D)：

异构体D(7S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-[[2-[[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]甲基]-5,6-二氢-4H-环戊并[c]吡唑-4-基]氨基]-5,7-二氢喋啶-6-酮(31mg,24％)1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.76(s,1H),8.58(s,1H),7.81-7.57(m,2H),7.31(s,1H),5.39-5.22(m,5H),4.32-4.11(m,1H),3.87(d,J＝4.4Hz,1H),3.12(s,3H),3.03(qd,J＝8.3,5.1Hz,1H),2.74(ddd,J＝14.2,8.7,4.9Hz,1H),2.55(ddd,J＝14.9,8.7,5.0Hz,1H),2.39(ddt,J＝13.7,9.2,4.7Hz,1H),2.21(s,4H),1.17(d,J＝6.1Hz,3H),1.05(d,J＝6.9Hz,3H)。ESI-MSm/z计算值500.22598，实验值501.27(M+1)

实例2ZZ

化合物546、547、624及625

如下制备这些化合物：经由关于化合物46报导的方法A程序使A-2(390mg，1.72mmol)与位置异构体(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-胺及2-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-2,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-胺的混合物(585mg，2.073mmol)反应。

产物为各呈非对映异构体对形式的2种位置异构体的混合物。手性HPLC(ChiralPAK IC柱；20％甲醇/30％乙醇/50％己烷，等度，25min)。

通过SFC(IA柱，20×250mm；30％乙醇(0.2％二乙胺)/70％CO2，等度，80ml/min)分离混合物以得到峰A及B的不可分离混合物以及峰C及峰D的彻底分离。对峰A及B进行制备型手性HPLC(IC柱，20×250mm；70％己烷/30％乙醇/甲醇(0.2％二乙胺)，等度，20ml/min)以得到峰A及B的彻底分离。

异构体A及B：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((S)-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((R)-1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

(异构体A；化合物624)：

异构体A：1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.61(d,J＝1.9Hz,1H),7.69(qd,J＝8.8,8.1,2.2Hz,3H),7.23(s,1H),5.34(s,2H),5.33-5.26(m,1H),4.88(d,J＝7.6Hz,1H),4.10(q,J＝6.8Hz,1H),3.06(s,3H),3.02-2.83(m,2H),2.74(ddd,J＝15.2,9.3,6.1Hz,1H),2.29(dd,J＝8.4,5.3Hz,1H),2.22(s,3H),1.42(d,J＝6.9Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值472.1947，实验值473.12(M+1)

(异构体B；化合物625)：

异构体B：1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.61(s,1H),7.79-7.62(m,3H),7.23(s,1H),5.33(d,J＝8.7Hz,3H),4.88(d,J＝7.6Hz,1H),4.09(q,J＝6.8Hz,1H),3.06(s,3H),2.98-2.86(m,1H),2.91-2.65(m,2H),2.34-2.16(m,1H),2.23(s,3H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值472.1947，实验值473.07(M+1)

异构体C及D：(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((S)-2-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-2,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮及(7S)-4,7,8-三甲基-2-(((R)-2-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-2,4,5,6-四氢环戊并[c]吡唑-4-基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(异构体C；化合物546)：

异构体C：1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ9.31(s,1H),8.52(d,J＝1.9Hz,1H),7.78-7.48(m,2H),7.27(s,1H),5.23(s,2H),5.23-5.10(m,2H),4.96(d,J＝7.4Hz,1H),3.99(q,J＝6.8Hz,1H),2.98(s,4H),2.67(ddd,J＝14.1,8.6,5.0Hz,1H),2.49(ddd,J＝15.4,8.8,5.0Hz,1H),2.31(dq,J＝9.1,4.5Hz,1H),2.18(s,3H),1.32(d,J＝6.8Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值472.1947，实验值473.36(M+1)

异构体D：1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ9.21(s,1H),8.52(d,J＝1.9Hz,1H),7.70-7.52(m,2H),7.25(s,1H),5.23(s,2H),5.18(dt,J＝7.4,3.9Hz,1H),4.89(d,J＝7.5Hz,1H),3.99(q,J＝6.8Hz,1H),3.08-2.87(m,4H),2.76-2.57(m,1H),2.49(ddd,J＝15.4,8.7,5.2Hz,1H),2.30(ddt,J＝13.4,9.1,4.8Hz,1H),2.18(s,3H),1.32(d,J＝6.9Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值472.1947，实验值473.36(M+1)

实例2AAA

用于制备化合物494的流程.

化合物494.(7S)-7,8-二甲基-4-(甲基-d3)-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

步骤1：(S)-6-((1-(叔丁氧基)-1-氧代丙-2-基)(甲基)氨基)-2-氯-5-硝基-嘧啶-4-甲酸乙酯.

将4-2,6-二氯-5-硝基-嘧啶-4-甲酸乙酯(5g，18.8mmol)及甲基-L-丙氨酸叔丁酯盐酸盐(4.05g，20.67mmol)溶解于95％乙醇(50ml)及三乙胺(2.6ml，18.8mmol)中且在室温下搅拌2小时。将反应物倒入水中且用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。合并的萃取物经无水硫酸镁干燥，过滤且真空蒸发以得到标题产物(5.5g，75.3％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.87(q,J＝7.0Hz,1H),4.37(q,J＝7.1Hz,2H),2.86(s,3H),1.46(d,J＝7.1Hz,3H),1.40(s,9H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H)。

步骤2：(S)-6-((1-(叔丁氧基)-1-氧代丙-2-基)(甲基)氨基)-5-硝基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)嘧啶-4-甲酸乙酯.

将(1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺盐酸盐(935mg，3.2mmol)添加至(7S)-6-((1-(叔丁氧基)-1-氧代丙-2-基)(甲基)氨基)-2-氯-5-硝基-嘧啶-4-甲酸乙酯(1g，2.57mmol)及三乙胺(1.1ml，7.8mmol于乙醇(40ml)中的溶液中且加热回流3小时。将反应物冷却至室温，且倒入水中并用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。合并的萃取物经无水硫酸镁干燥，过滤且真空蒸发以得到呈黄色固体的标题产物(1.56g，99.6％产率)。1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.63(s,1H),7.69(t,J＝1.3Hz,2H),7.53(s,1H),7.45(d,J＝11.4Hz,1H),5.38(s,2H),4.78(d,J＝7.5Hz,1H),4.50-4.35(m,4H),2.92(s,3H),1.51(s,3H),1.43(s,9H),1.40(d,J＝7.1Hz,3H)。ESI-MS m/z 609.5(M+1)

步骤3：(S)-7,8-二甲基-6-氧代-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,6,7,8-四氢喋啶-4-甲酸乙酯.

将氯化锡(II)(1.6g，8.44mmol)添加至(7S)-6-((1-(叔丁氧基)-1-氧代丙-2-基)(甲基)氨基)-5-硝基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)嘧啶-4-甲酸乙酯于乙醇(40ml)中的溶液中且加热至回流。1小时后，再次将氯化锡(II)(1g)添加至反应物且回流2小时。真空蒸发反应物，且将残余物溶解于水中并用1M氢氧化钠碱化。用乙酸乙酯(2×40ml)萃取混合物。合并的萃取物经无水硫酸镁干燥，过滤且蒸发。通过柱色谱(SiO

步骤4：化合物493.(7S)-4-(羟甲基-d2)-7,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将氘化二异丁基铝(4ml，2.8mmol)于甲苯中的0.7M溶液逐滴添加至(S)-7,8-二甲基-6-氧代-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,6,7,8-四氢喋啶-4-甲酸乙酯(410mg，0.81mmol)于THF(10ml)中的溶液中且在室温下搅拌1小时。将水(1ml)缓慢添加至反应物。添加乙酸乙酯(10ml)，且经由硅藻土过滤混合物。真空蒸发滤液，得到黄色固体，其通过柱色谱(SiO2)、用0-10％甲醇/二氯甲烷梯度洗脱来纯化。蒸发所需级分，得到呈黄色固体的标题产物(350mg，91％产率)。1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.55(d,J＝1.9Hz,1H),7.74-7.59(m,3H),7.54(s,1H),7.45(s,1H),5.36(s,2H),5.11(t,J＝5.8Hz,1H),4.41(d,J＝5.8Hz,2H),4.05(q,J＝6.8Hz,1H),3.46(s,1H),3.03(s,3H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值464.18652，实验值464.52(M+1)

将HBr(5ml，33％w/w)添加至(7S)-4-(羟甲基-d2)-7,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(500mg，0.99mmol)于乙酸(2ml)中的溶液中且在110℃下加热1小时。真空蒸发反应物，得到呈深色固体的粗产物(188mg)，其立即用于步骤6中。

步骤6：化合物494.(7S)-7,8-二甲基-4-(甲基-d3)-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将硼氘化钠(12mg，0.29mmol)添加至(7S)-4-(溴甲基-d2)-7,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(75mg)于DMSO-d6(3ml)中的溶液中且在室温下搅拌隔夜。过滤粗反应物质，且通过反相HPLC(C18；10-95％乙腈/水，0.5mM HCl)纯化以得到产物。通过溶解于二氯甲烷中且经由PL-HCO3滤筒过滤来中和化合物，且蒸发滤液，得到标题产物(17.5mg，28％产率)。1H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.57(d,J＝1.8Hz,1H),7.81-7.71(m,2H),7.57-7.49(m,1H),7.42(d,J＝0.8Hz,1H),5.34(s,2H),4.49-4.31(m,2H),4.03(q,J＝6.9Hz,1H),3.01(s,3H),1.43-1.31(m,3H)。ESI-MS m/z计算值449.19788，实验值449.41(M+1)

实例2BBB

化合物487(7S)-4-(羟甲基)-7,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将氢化锂铝(300mL，0.6mmol)于THF中的2M溶液逐滴添加至(S)-7,8-二甲基-6-氧代-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,6,7,8-四氢喋啶-4-甲酸乙酯(参见化合物494，步骤3；252mg，0.5mmol)于5ml THF中的溶液中且在室温下搅拌1小时。通过逐滴添加水(1ml)淬灭反应物。将乙酸乙酯(10ml)添加至混合物，接着经由硅藻土过滤。真空蒸发滤液，得到粗产物，其通过柱色谱(SiO

实例2CCC

化合物410.(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4-(羟甲基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

步骤1：(S)-6-((1-(叔丁氧基)-1-氧代丙-2-基)(甲基)氨基)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5-硝基嘧啶-4-甲酸乙酯.

将(1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲胺(2.64g，12.86mmol)添加至(7S)-6-((1-(叔丁氧基)-1-氧代丙-2-基)(甲基)氨基)-2-氯-5-硝基-嘧啶-4-甲酸乙酯(2.5g，6.43mmol)及三乙胺(2.7ml，19.3mmol)于乙醇(100ml)中的溶液中且加热回流3小时。将反应物冷却至室温。将反应混合物倒入水(100ml)中，且用乙酸乙酯(3×150ml)萃取。合并的萃取物经硫酸镁干燥，过滤且真空蒸发以得到标题产物，其不经纯化即立即使用。

步骤2：(S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-4-甲酸乙酯.

将(S)-6-((1-(叔丁氧基)-1-氧代丙-2-基)(甲基)氨基)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5-硝基嘧啶-4-甲酸乙酯(3.5g，6.63mmol)放入Parr瓶且溶解于乙醇(50ml)及乙酸乙酯(25ml)中。将10％Pd/C(300mg)放入溶液中，且置于Parr振荡器上并装入50psi的氢气，保持20小时。经由硅藻土过滤反应物且蒸发滤液。通过柱色谱(SiO

步骤3：化合物410.(7S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4-(羟甲基)-7,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

将氢化锂铝(1.5mL，1.5mmol)于THF中的1M溶液逐滴添加至(S)-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-4-甲酸乙酯(700mg，1.45mmol)于THF(20ml)中的溶液中。在室温下搅拌反应物2小时。通过添加甲醇及水淬灭反应物且用乙酸乙酯萃取。合并的萃取物经硫酸镁干燥，过滤且蒸发。通过柱色谱(SiO

实例2DDD：合成化合物136B(化合物136的R异构体)：(7R)-4,7,8-三甲基-2-[[1-[[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]甲基]吡唑-4-基]甲氨基]-5,7-二氢喋啶-6-酮

化合物136B通过与化合物136相同的途径但使用对应R起始物质A-2制备的。(13.3g,84％)

实例2EEE：合成化合物1B(化合物1的R异构体)：(7R)-2-[[1-[(4-氟苯基)甲基]吡唑-4-基]甲氨基]-4,5,7,8-四甲基-7H-喋啶-6-酮

化合物1B系使用SFC分离自上文化合物1的制备中的外消旋混合物分离。

实例2FFF：合成化合物42B(化合物42的R异构体)：(R)-7,8-二甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物42B系使用SFC分离自上文化合物42的制备中的外消旋混合物分离。

实例2GGG：合成化合物46B(化合物46的R异构体)：(R)-2-(((1-(3,5-二氟-4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,7,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮

化合物46B系使用SFC分离自上文化合物46的制备中的外消旋混合物分离。

实例2HHH：合成化合物405B(化合物405的R异构体)：N-[[1-[[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]甲基]吡唑-4-基]甲基]-N-[(7R)-4,7,8-三甲基-6-氧代-5,7-二氢喋啶-2-基]乙酰胺

化合物405B系由化合物136B制备。向(7R)-4,7,8-三甲基-2-[[1-[[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]甲基]吡唑-4-基]甲氨基]-5,7-二氢喋啶-6-酮(250mg，0.560mmol)于无水THF(3.7mL)中的溶液中添加乙酸乙酰酯(大约87mg，80.06μL，0.84mmol)及DIEA(大约217mg，293μL，1.68mmol)，将混合物密封在微波管中且在100℃下加热24小时。通过蒸发移除溶剂，通过ISCO中的硅胶柱(40g)用DCM、20％MeOH/DCM洗脱来纯化残余物。收集所需级分并蒸发。灰白色固体经50℃真空干燥隔夜。(206mg，75％)。第一洗脱峰SFC:20％MeOH:30％EtOH:50％己烷(ChiralPac IC)

实例2III：合成表46的其他化合物

本文中描述的表46的化合物系以与上文关于在R

化合物9B.(R)-7-乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-8-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮/

1H NMR(300MHz,MeOD)δ7.66(s,1H),7.51(s,1H),7.24(dd,J＝8.6,5.4Hz,2H),7.05(dd,J＝12.1,5.4Hz,2H),5.26(s,2H),4.46(s,2H),4.18(q,J＝6.9Hz,1H),3.30(s,3H),3.13(s,3H),2.39(s,3H),1.27(d,J＝7.0Hz,3H)。[3],1H NMR(300MHz,甲醇-d4)？7.57(s,1H),7.44(s,1H),7.23-7.12(m,2H),7.05-6.92(m,2H),5.20(s,2H),4.34(s,2H),3.99(q,J＝6.9Hz,1H),3.22(s,3H),2.96(s,3H),2.27(s,3H),1.10(d,J＝6.9Hz,3H)。M+1410.215。

化合物14B.(R)-4,5,7,8-四甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

M+1 446.19。

化合物19B.(R)-5,7-二乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-8-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

M+1 424.23。

化合物22B.(R)-8-乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-5,7-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.63(d,J＝1.5Hz,2H),7.37(d,J＝0.8Hz,1H),7.26(dd,J＝8.5,5.7Hz,2H),7.14(t,J＝8.9Hz,2H),6.72(t,J＝6.0Hz,1H),5.24(s,2H),4.35-4.14(m,3H),3.97-3.80(m,1H),3.16(s,3H),3.13-3.01(m,1H),1.22(d,J＝6.7Hz,3H),1.12(t,J＝7.1Hz,3H)。[2],1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.45(d,J＝4.9Hz,2H),7.27(s,1H),7.16-7.09(m,2H),7.02-6.89(m,2H),5.15(s,2H),4.93(t,J＝5.1Hz,1H),4.32(t,J＝7.3Hz,2H),4.09(dd,J＝14.4,7.6Hz,1H),3.93(dq,J＝14.4,7.2Hz,1H),3.18(s,3H),3.01(tt,J＝12.2,6.1Hz,1H),1.28(d,J＝6.8Hz,3H),1.16-1.06(m,3H)。M+1 410.3。

化合物23B.(R)-5,8-二甲基-7-丙基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物30B.(R)-5,8-二乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物31B.(R)-5,8-二乙基-7-甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.49(d,J＝5.9Hz,1H),7.45(d,J＝10.3Hz,1H),7.33(s,1H),6.77-6.67(m,2H),5.12(s,2H),4.97(d,J＝5.2Hz,1H),4.36(d,J＝5.6Hz,2H),4.10(q,J＝6.8Hz,1H),4.00-3.62(m,3H),3.04(dq,J＝14.1,7.1Hz,1H),1.26(t,J＝7.7Hz,3H),1.14(dd,J＝13.5,7.1Hz,6H)。M+1 460.28。

化合物32B.(R)-7-乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-8-异丙基-5-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物36B.(R)-7-乙基-8-异丙基-5-甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物51B.(R)-5-乙基-8-异丙基-7-甲基-2-(((1-(3,4,5-三氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物52B.(R)-5-乙基-2-(((1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-8-异丙基-7-甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物186B.(R)-7-乙基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物177B.(R)-4,5,7,8-四甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物187B.(R)-4,7,8-三甲基-2-(((1-((3-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

M+1 447.28。

化合物220B.(R)-4,8-二甲基-7-丙基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物386B.(R)-7-环丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物396B.(R)-7-环丙基-4,8-二甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物421B.(R)-7-环丙基-2-(((1-((6-氟吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物422B.(R)-2-(((1-((6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物423B.(R)-2-(((1-((6-氟-4-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物445B.(R)-2-(((1-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-(2-羟乙基)-4,5,8-三甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物495B.(R)-4,8-二甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物497B.(R)-7-乙基-8-异丙基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物589B.(R)-7-(2-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物678B.(R)-7-(2-甲氧基乙基)-4,8-二甲基-2-(((1-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮.

化合物204B.(R)-4-((4-(((4,7,8-三甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢喋啶-2-基)氨基)甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)2-氰基吡啶.

M+1 424.14。

实例2JJJ：合成4,8-二甲基-7-亚甲基-2-(((1-((6-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(化合物749)

向烘箱干燥的烧瓶中装入(7S)-7-(羟甲基)-4,8-二甲基-2-[[1-[[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]甲氨基]-5,7-二氢喋啶-6-酮(25mg，0.05360mmol)，在氮气氛围下溶解于二氯甲烷(2mL)中，添加55mg(0.08178mmol)马丁氏硫氟烷(Martin's sulfurane)(二苯基-双[2,2,2-三氟-1-苯基-1-(三氟甲基)乙氧基]-λ4}-硫烷)。在环境温度下搅拌所得悬浮液1h。反应物仍混浊。再添加0.5当量的硫氟烷试剂，且溶液慢慢变得澄清并变为蓝色。30min后，其变为黄色。LCMS指定80％完成。再添加0.5当量硫氟烷。搅拌反应物20min且再次变为黄色。将粗产物直接装载至硅胶柱上(MeOH/DCM 0-50％)以得到呈白色固体的所需产物。

实例2KKK：合成(S)-2-(((1-(3,3-二氟环丁基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-乙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(化合物795)

(S)-2-氯-7-乙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(5)的形成

为2,4-二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶(26.0g，125.0mmol)、(2S)-2-(甲氨基)丁酸甲酯(HCl盐)(23.1g，137.5mmol)及NaHCO

将油状物溶解于300mL THF中且添加铂(6.5g，3％w/w，0.9996mmol)。将混合物置于Parr振荡器上且在50psi氢气下混合隔夜。LCMS仍显示一些羟基-中间体。向混合物添加双[(E)-1-甲基-3-氧代-丁-1-烯氧基]-氧代-钒(大约3.314g，12.50mmol)，且将混合物再次放入Parr振荡器并在50psi下再振荡2小时。滤出催化剂且真空浓缩所得滤液。将残余物溶解于氯仿(200mL)中且经由氟罗里硅土塞过滤。用50％EtOAc/二氯甲烷洗脱该塞子。将滤液真空浓缩成含有黑色杂质的固体。用TBME 500mL稀释混合物且搅拌1小时，过滤并用TBME洗涤两次，得到23g呈白色固体的产物：[α]

1-(3,3-二氟环丁基)-1H-吡唑-4-甲腈(6)的形成

步骤1：向1H-吡唑-4-甲腈(10.0g，107.4mmol)于二氯甲烷(80mL)中的溶液中添加吡啶(17.4mL，215.1mmol)。冷却混合物(0℃)。将三氟甲烷磺酸三氟甲磺酰酯(20mL，118.9mmol)于二氯甲烷(20mL)中的单独混合物缓慢添加至第一混合物，将内部温度保持在30℃以下。在此温度下搅拌混合物30分钟。用饱和NH

步骤2：向3,3-二氟环丁醇(1.06g，9.81mmol)于乙腈(10mL)中的溶液中添加Cs

(1-(3,3-二氟环丁基)-1H-吡唑-4-基)甲胺(7)的形成

向1-(3,3-二氟环丁基)吡唑-4-甲腈6(4.4g，22.82mmol)于MeO H(30mL)中的溶液中添加含7N氨的甲醇(30mL)。用水(约4×10mL)洗涤雷尼镍(750mg，12.78mmol)，随后添加至反应混合物。置于Parr振荡器上且加压至50psi氢气并使其反应4小时。经由硅藻土过滤，且减压移除溶剂。自二乙醚(3×100mL)汽提且置于真空下隔夜，得到4.6g所需产物：

(S)-2-(((1-(3,3-二氟环丁基)-1H-吡唑-4-基)甲基)氨基)-7-乙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(I-795)的形成

在氮气下向含(7S)-2-氯-7-乙基-4,8-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮5(1.94g，8.05mmol)、[1-(3,3-二氟环丁基)吡唑-4-基]甲胺7(1.51g，8.05mmol)、(tBuXPhos Pd G1)(200mg，0.29mmol)的tBuOH(50.77mL)中添加NaOtBu(大约15.1mL，2M，30.18mmol)。搅拌混合物20分钟。用饱和NH

实例2LLL：合成(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1s,3R)-3-(((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(化合物1417)

(S)-2-氯-7-异丙基-4,8-二甲基-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(1)的形成

向2-L圆底烧瓶添加2,4-二氯-6-甲基-5-硝基-嘧啶(55.0g，256.5mmol)、NaHCO

旋光度：CHCl

((1s,3s)-3-(((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)甲基)-环丁基)氨基甲酸叔丁酯(3)的形成

在室温下向含顺式-N-[3-(羟甲基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(5.8g，28.82mmol)及三苯基膦(9.1g，34.7mmol)的THF(80mL)添加(NE)-N-乙氧羰基亚氨基氨基甲酸乙酯(15.8mL，40％w/w，34.69mmol)，接着添加2-(三氟甲基)嘧啶-5-醇(5g，30.47mmol)。在室温下搅拌反应混合物1h。移除THF，添加100mL DCM，用2N NaOH洗涤两次。真空浓缩有机相。通过硅胶层析使用EtOAc/庚烷纯化所得残余物，得到8.17g所需产物：

(1s,3s)-3-(((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)甲基)环丁-1-胺(4)的形成

在室温下向含N-[3-[[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]氧基甲基]环丁基]氨基甲酸叔丁酯3(8.17g，23.51mmol)的甲醇(20mL)添加含氯化氢(27mL，4M溶液，108.0mmol)的二噁烷。在50℃下搅拌30分钟。蒸发有机物，且用醚-庚烷洗涤所得残余物，得到6.5g呈HCl盐形式的所需产物：

(S)-7-异丙基-4,8-二甲基-2-(((1s,3R)-3-(((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)甲基)环丁基)氨基)-7,8-二氢喋啶-6(5H)-酮(I-1417)的形成

在氮气氛围下向含(7S)-2-氯-7-异丙基-4,8-二甲基-5,7-二氢喋啶-6-酮1(1.43g，5.56mmol)、3-[[2-(三氟甲基)嘧啶-5-基]氧基甲基]环丁胺4(盐酸盐)(1.57g，5.52mmol)、(tBuXPhos Pd G1)(200mg，0.2913mmol)的

实例3：PLK1抑制分析

使用放射性磷酸酯并入分析来筛检化合物抑制Plk1的能力。在25mM HEPES(pH7.5)、10mM MgCl

45分钟通过添加含有10mM冷的ATP的25μL 30％三氯乙酸(TCA)停止反应。将完全淬灭的反应物转移至384孔玻璃纤维过滤盘(Millipore，目录号MZFBN0W50)。用3×5％TCA洗涤该盘。干燥后，在PerkinElmer TopCount中进行闪烁计数之前向孔中添加40μL UltimaGold液体闪烁混合液(Perkin Elmer)。

移除所有数据点的平均背景值之后，使用Prism软件包(GraphPad Prism，GraphPad Software，San Diego California，USA)自初始比率数据的非线性回归分析来计算Ki(app)数据。数据总结于表45中。

实例4：Colo 205报导子分析

使用下文描述的针对β-连环蛋白-TCF介导的报导子转录活性的分析程序筛检本文所描述的本发明化合物。

在具有活化WNT信号传导的细胞中，我们发现，ER压力通过这些化合物的机制的诱导促成此报导基因的活性的迅速降低，且分析中的活性与这些化合物作为ER压力及UPR的诱导剂的活性以及这些化合物的比活性的所有其他量度(包括钙释放、生存力及这些化合物的放射性标记形式从其在细胞中的特异性结合位点的移位)相关。

报导子细胞系通过用包括驱动萤火虫荧光素酶基因的表达的TCF/LEF启动子的质粒报导子构筑体(来自SABiosciences，QIAGEN公司)稳定转染癌细胞株(例如结肠癌)的细胞来产生。制备TCF/LEF报导子构筑体，其中TCF/LEF启动子(一种由SABiosceinces设计的具有最优选TCF/LEF结合位点数目的启动子)连接在萤火虫荧光素酶基因的上游。此构筑体还可包括作为可选标记物的嘌呤霉素抗性基因。此构筑体还可用于稳定转染Colo 205细胞，一种具有产生具有组成性活性的β-连环蛋白的突变APC基因的结肠癌细胞株。对照细胞株系使用含有荧光素酶基因的另一质粒构筑体在不由β-连环蛋白活化的CMV基础启动子的控制下产生。

将具有稳定转染的报导子构筑体的Colo 205培养细胞以每孔大约10,000个细胞涂铺至384孔多孔板中，保持二十四小时。随后使用二十微摩尔最高浓度以2倍连续稀释将测试化合物添加至所述孔中。用于每一细胞类型的一系列对照孔仅接受化合物溶剂。添加化合物五小时后，通过添加SteadyGlo荧光试剂(Promega)分析荧光素酶的报导子活性。使用Pherastar盘读取器(BMG Labtech)来测量报导子荧光活性。读数以仅经DMSO处理的细胞标准化，且随后将标准化活性用于IC50计算。Colo 205报导子分析数据总结于表45中：A<0.3μM；0.3μM≤B<1.0μM；1.0μM≤C<5.0μM；D≥5.0μM。

表45：PLK1及Colo 205报导子分析数据

实例5

还已获得式(I)的某些R异构体的Colo 205报导子分析数据，在式(I)中，R

R立体异构体的这些分析数据总结于以下表46中，其中A<0.3μM；0.3μM≤B<1.0μM；1.0μM≤C<5.0μM；D≥5.0μM。

表46：Colo 205报导子分析数据

实例6：HepG2 XBP1报导子分析

HepG2肝肿瘤细胞经未经剪接(u)的XBP1的编码cDNA的反转录病毒转导，未经剪接(u)的XBP1含有与萤火虫荧光素酶的cDNA融合的未处理内含子。在诱导ER压力后，XBP1(u)的未处理内含子通过活性IRE1α核酸内切酶剪接。所得经剪接(s)的XBP1现与荧光素酶同框，此使得产生活性荧光素酶蛋白，从而引起生物发光。

以每孔大约30,000个细胞将HepG2 XBP1(u)-Luc细胞涂铺Colo 205培养细胞涂铺至96孔多孔板中，保持二十四小时。随后使用二十七微摩尔最高浓度以3倍连续稀释将测试化合物添加至所述孔中。用于每一细胞类型的一系列对照孔仅接受化合物溶剂。添加化合物六小时后，通过添加SteadyGlo荧光试剂(Promega)分析荧光素酶的报导子活性。使用Pherastar盘读取器(BMG Labtech)来测量报导子荧光活性。读数以仅经DMSO处理的细胞标准化，且随后将标准化活性用于IC50计算。HepG2 XBP1报导子分析数据总结于表47中：A<0.6μM；0.6μM≤B<2.0μM；2.0μM≤C<10.0μM；D≥10.0μM。

表47

实例7：钙通量分析

本文所描述的化合物通过产生细胞内钙通量来诱导ER压力。使用

实例8：膜提取方案

将细胞团粒以15倍填充细胞体积再悬浮于4℃低渗透压裂解缓冲液(10mM HEPES，pH 7.5，含有1×蛋白酶抑制剂、0.5mM EDTA及2mM DTT)中。在杜恩斯均质机(douncehomogenizer)中保持于冰上以6至8个冲程将再悬浮的细胞均质化。裂解物在不制动减缓转子的情况下于500×g下在4℃下离心15分钟。离心之后，将上清液移至新试管且置于冰上(上清液1)。使用0.5初始体积的低渗透压裂解缓冲液对经裂解的细胞团粒重复以上步骤，且移除500×g上清液(上清液2)并与上清液1合并。将合并的上清液转移至45-Ti超离心管且在100,000×g下离心30分钟。超离心之后，小心地移除上清液且丢弃。将100,000×g团粒再悬浮于低温再悬浮缓冲液(10mM HEPES，pH 7.5，含有1×蛋白酶抑制剂、1×EDTA及2mMDTT的300mM NaCl)中。在不制动的情况下将样本在500×g下离心10分钟，且移除所有混浊、絮状物质。将团粒再悬浮于再悬浮缓冲液中，以达到大约2mg/mL的蛋白浓度以供用于放射性配体结合分析及免疫印迹。

实例9：放射性配体移位分析.

放射性标记化合物136(氚化化合物136)显示出特异性结合于过度表达WFS1的细胞膜提取物。通过自过度表达WFS-1的经纯化HEK293膜测量氚化化合物136探针的竞争性移位来测定化合物的结合亲和力。放射性配体移位分析的数据总结于表47中：A<0.06μM；0.06μM≤B<0.6μM；0.6μM≤C<3.0μM；D≥3.0μM。

在含有最终浓度的20mM HEPES(pH 7.5)、300mM NaCl、1mM DTT、0.5％DMSO、0.15μg/mL经纯化膜及Kd下的氚化化合物136探针的50μl分析体积中进行分析。通过在标准分析条件下加减过量未标记探针以滴定氚化探针及将所得数据与Graphpad Prism 6.0版(SanDiego，CA，US)中的“One site-Total and nonspecific binding”模型拟合来测定探针Kd。首先，将以不同浓度溶解于DMSO中的0.25μl化合物分配至384孔板。膜及探针皆以2×其最终浓度于如上文所描述的1×分析缓冲液中制备。将25μL膜添加至孔中且培育10分钟。随后将25μL经稀释的探针添加至孔中。在室温下将分析物培育90分钟。随后将整个分析体积转移至用15μL 0.5％PEI预处理的Millipore GF/B 384孔板。用75μL 25mM TRIS，ph7.5，0.1％BSA将过滤盘洗涤3×，随后干燥隔夜。添加45μL UltimaGold闪烁体之后，在PerkinElmer Topcount中对样本进行计数。剩余放射活性为所结合探针的量度。根据化合物滴定曲线的经结合探针与浓度，通过使用Graphpad Prism 6.0版(San Diego，CA，US)或使用GeneData分析器(Basel，Switzerland)将数据与标准3参数IC50模型拟合来测定IC50。

实例10.WFS1基因剔除、基因表达阻断及过度表达研究

10A.材料及实验

稳定过度表达WFS1的细胞的产生

WFS1 cDNA通过引物5'-TCC GCG GCC CCA AGC TTA TCG CCA TGG ACT CCA ACACTG C-3',5'-GAT GGG CCC AGA TCT CGA GTC AGG CCG CCG ACA GGA ATG-3'自克隆(clone)RC202901(Origene Technologies)扩增且使用HD Infusion(CLONTECH)在Hind3-Xho1位点处使用标准程序克隆至反转录病毒哺乳动物表达载体pCLPCX中。所得克隆经鉴别为pCLPCX_WFS1。

将HEK293(ATCC，目录号#CRL-1573)细胞以每个培养皿3×10

以每孔1×10

稳定阻断WFS1的基因表达的细胞的产生

以每10cm细胞培养板(Corning，产品号#430167)3×10

通过CRISPR/Cas9进行WFS1基因剔除的细胞的产生

将双重裂解策略用于自WFS1基因座移除较大片段。首先使用CRISPR设计软件选择WFS1外显子8中的适合靶点以将适合的靶点分级且在计算上预测各期望标靶的脱靶位点。使用Surveyor Mutation检测试剂盒(Integrated DNA Technologies)针对活性鉴别及筛检前六个向导RNA序列。随后，将最优选的2个向导RNA分别克隆至GeneArt OFP CRISPR核酸酶载体(Thermofisher，目录号#A21174)中且使用核转染(4D Nucleofector X，Lonza)共转染至HepG2细胞中。48小时后通过FACS分选细胞以富集OFP阳性细胞群体。以0.5-5个细胞/孔将OFP阳性细胞群体涂铺至96孔板中以分离克隆细胞株。使细胞扩增2-3周后，检验盘是否存在菌落。当菌落变得70％以上汇合时，使用胰蛋白酶使其离散并进一步扩增。通过PCR检测具有WFS1外显子8的同种接合双重裂解的细胞克隆且通过DNA测序进行确认。

细胞WFS1蛋白水平的测定

通过使用低温裂解缓冲液(20mM Tris-HCl(pH 7.5)、150mM NaCl、1mM Na2EDTA、1mM EGTA、1％Triton、2.5mM焦磷酸钠、1mMβ-甘油磷酸酯、1mM Na3VO4、1μg/ml抗纤维蛋白溶酶肽(leupeptin)、0.05％SDS)进行全细胞裂解或通过使用Mem-PER

化合物对活体外细胞生存力的作用的测定

以每孔1,000个(HEK293)或5,000个(HepG2)细胞将含有空白pCLPCx载体的HEK293细胞(HEK293空白)、稳定过度表达WFS1的HEK293细胞(HEK293 WFS1)、HepG2及其中WFS1由CRISPR/Cas9耗减的HepG2细胞(HepG2 WFS1 KO)涂铺至96孔黑色盘(Corning，产品号#3904)中的100微升完全DMEM细胞培养基[补充有10％FBS(Hyclone，目录号#SH30071.03)、抗霉剂/抗生素(Life Technologies，产品号#15240-062)及Glutamax(LifeTechnologies，产品号#35050-061)的DMEM(Life Technologies，产品号#11960-051)培养基]中。使细胞附着及生长隔夜，之后以各种浓度添加化合物。在化合物添加后96小时，通过CellTiter-Glo试剂(Promega，目录号#G7570)根据制造商的方案评定细胞生存力，且在Pherastar荧光盘读取器(BMG Labtech)上进行测量。

10B结果及论述

通过CRISPR/Cas9对WFS1进行基因剔除阻断了化合物产生钙通量、诱导ER压力标记物、诱导全局基因表达变化及抑制细胞生存力的能力。

CRISPR/Cas9用于通过WFS1基因缺失产生HepG2细胞。相较于亲本HepG2细胞(图2，泳道1)，经历WFS1基因缺失的HepG2细胞(图2，泳道2)完全不存在WFS1蛋白表达。图2还展示WFS1的单体及多聚体形式的存在，所述形式皆不存在于WFS1基因缺失细胞中。亲本HepG2与HepG2 WFS1基因剔除细胞(图2，分别为泳道1及2)之间的微管蛋白水平无差异。

本文所描述的化合物显示如图5A中所示及通过含有XBP1-Luc报导子的HepG2细胞中的荧光素酶的诱导所例示的钙通量诱导(表47)。为了判定WFS1是否参与化合物诱导的钙通量，亲本HepG2细胞及经CRISPR/Cas9介导的WFS1基因剔除(KO)的HepG2细胞经浓度增加的化合物136处理，且在添加化合物30分钟后测量细胞内钙水平。相较于亲本HepG2细胞，WFS1自HepG2细胞的缺失完全消除了化合物136诱导钙通量的能力(图5A)，表明WFS1表达水平与化合物诱导钙通量的能力有关。

此外，为了判定WFS1是否参与化合物诱导的ER压力，将亲本HepG2细胞及经CRISPR/Cas9介导的WFS1基因剔除(KO)的HepG2细胞暴露于化合物136或毒胡萝卜素达6小时，6小时后制备细胞裂解物并进行免疫印迹。图6展示WFS1缺失阻止化合物136诱导ER压力标记物蛋白XBP1及ATF4。相比的下，WFS1的缺失对毒胡萝卜素(thaps)诱导的XBP1及ATF4的影响小得多。这些结果进一步指示，WFS1表达水平与化合物诱导钙通量的能力有关。此外，WFS1自HepG2细胞的缺失阻止化合物136引起暴露6小时后的全局基因表达的变化(图7)。相比的下，WFS1缺失对全局基因表达中毒胡萝卜素诱导的变化无影响(图7)。

为判定WFS1缺失对化合物介导的细胞生存力抑制的影响，将亲本HepG2细胞及通过CRISPR/Cas9使WFS1缺失的HepG2细胞暴露于浓度增加的化合物136或化合物253达96小时，96小时后使用Cell Titer Glo试剂(Promega)测定生存力。WFS1自HepG2细胞的缺失针对化合物136引起IC50的超过100倍的转变且针对化合物253引起IC50的超过5倍的转变，表明WFS1为本文所描述的化合物抑制细胞生存力所需(表47及表48)。HepG2亲本及WFS1基因剔除细胞两者的生存力的IC50总结于表47中：A<0.5μM；0.5μM≤B<2.0μM；2.0μM≤C<10.0μM；D≥10.0μM。

表48.

为了判定WFS1过度表达对于化合物介导的对钙通量及细胞生存力的作用的影响，Hek293细胞经空白反转录病毒载体或表达全长WFS1 cDNA的反转录病毒载体转导。经编码反转录病毒的WFS1转导的Hek293细胞表达的WFS1蛋白的量比空白载体Hek293细胞大100倍(图3)。图5B中展示WFS1过度表达对由化合物136诱导的钙通量诱导的影响。WFS1的过度表达引起化合物136的EC50的大约10倍降低，表明WFS1参与本文所描述的化合物的作用机制。

此外，表49(在下文)中展示WFS1过度表达对于化合物136及253对细胞生存力的抑制的影响。WFS1在Hek293细胞中的过度表达引起这些化合物两者的IC50的超过1000倍的降低，表明单独的WFS1足以赋予无反应细胞对本文所描述的化合物的敏感度。Hek293空白载体及WFS1过度表达细胞两者的生存力的IC50总结于表47中：A<0.06μM；0.06μM≤B<0.6μM；0.6μM≤C<3.0μM；D≥3.0μM。

表49.

通过经RNAi降低的化合物抑制TCF/LEF报导子活性及细胞生存力的能力阻断WFS1的基因表达

相较于经编码非靶向对照shRNA的慢病毒转导的细胞，HepG2细胞(图4)、DU4475细胞(图4)及Colo-205(未展示)细胞经编码靶向WFS1的shRNA的慢病毒转导引起WFS1蛋白水平的超过75％的降低，如通过免疫印迹所测定(图4)。相较于对照细胞，含有TC-Luc报导子的DU4475及Colo-205细胞中WFS1蛋白水平的稳定基因表达阻断引起化合物253及化合物136在阻断TCF报导子活性中的IC

表50：靶向WFS1的shRNA的表达降低化合物253及化合物136抑制TCF报导子活性的能力。

表51：靶向WFS1的shRNA的表达降低化合物253及化合物136抑制细胞生存力的能力。

化合物136与细胞膜提取物的结合力与WFS1蛋白的水平相关。

图8中展示如通过免疫印迹所测定的放射性标记化合物136与来源于表达不同量的WFS1的细胞的细胞膜的结合亲和力。如图所示，化合物136的Bmax(pg/mol)与细胞膜中WFS1蛋白的水平相关。此相关性与化合物136一致，且本文所描述的化合物直接结合于WFS1或结合于WFS1相关复合物或与WFS1有紧密化学计量的蛋白复合物。

实例11.肿瘤中的TCF/LEF报导子活性的活体内抑制

化合物对活体内肿瘤TCF/LEF报导子活性的作用的测定

在含有1ug/ml嘌呤霉素的完全DMEM细胞培养基[补充有10％FBS(Hyclone，目录号#SH30071.03)、抗霉剂/抗生素(Life Technologies，产品号#15240-062)及Glutamax(Life Technologies，产品号#35050-061)的DMEM(Life Technologies，产品号#11960-051)培养基]中扩增Colo205-TCF/LEF-荧光素酶(Luc)肿瘤细胞。达到汇合度/高密度后，将培养基中松散地附着的细胞从烧瓶转移至50ml锥形管。用胰蛋白酶剥离粘附于塑料的肿瘤细胞且与锥形管中的细胞合并。对肿瘤细胞进行湿磨、计数且通过离心进行集结。将细胞团粒再悬浮于0.9％可注射盐水中(6×10

将肿瘤于冰上解冻且使用密闭组织磨碎器系统(Fisher Scientific，目录号#02-542-09)于冰上根据制造商的说明书在低温裂解缓冲液(20mM Tris-HCl(pH 7.5)、150mMNaCl、1mM Na2EDTA、1mM EGTA、1％Triton、2.5mM焦磷酸钠、1mMβ-甘油磷酸酯、1mM Na3VO4、1μg/ml抗纤维蛋白溶酶肽、0.05％SDS)中均质化。100mg肿瘤使用500uL裂解缓冲液。将肿瘤裂解物转移至预先冷却的微量离心管且在10,000×g下于4℃下离心10分钟。将上清液转移至新的预先冷却的微量离心管且立即用于蛋白质含量及荧光素酶活性的分析。

使用BCA分析(Life Technologies目录号#23225)测定肿瘤裂解物上清液的蛋白质含量。通过添加Steady-Glo荧光试剂(Promega，目录号#E2550)根据制造商的说明书及在Pherastar荧光盘读取器(BMG Labtech)上进行测量来测定肿瘤裂解物上清液的荧光素酶活性。荧光素酶活性以蛋白质含量标准化。

Colo-205肿瘤中的TCF/LEF报导子活性的活体内抑制总结于表53中。

表53：Colo-205肿瘤中的TCF/LEF报导子活性的活体内抑制.

实例12.活体内功效

用氯胺酮-甲苯噻嗪(Ketamine-Xylazine)(140mg/kg至14mg/kg ip)对雌性免疫缺乏小鼠(Charles River，4-6周龄)进行麻醉且刮毛。将Puralube眼软膏施用于眼睛以预防角膜干化。将必妥碘(Betadine)及70％乙醇施用于经刮毛位置以对切口位置处的皮肤进行灭菌。在手术持续时间内将动物置于生物安全柜中。使用剪刀在侧腹的皮肤处形成8至10mm的切口。使用镊子在切口部位处将重量在50与150mg之间的肿瘤碎片置于皮肤下，且使用钉子闭合切口。术后5至7天移除钉子。注入后开始大约两周，对动物进行称重，且使用测径规将肿瘤每周测量两次。可使用等式：体积＝长度×宽度

当异种移植物达到大约100-300mm

表54.NSCLC患者来源的异种移植物OD33966的活体内功效

*[1-(del T/del C)]x100％

表55展示化合物136对各种肿瘤异种移植物模型的功效。如表55所示，化合物136抑制来源于多种癌症类型的肿瘤异种移植物的生长。将肿瘤移植于SCID或裸小鼠中。以100mg/kg一天一次(QD)经口给药化合物136。赋形剂对照由0.5％甲基纤维素/0.1％月桂基硫酸钠组成。通过测径规测量将肿瘤体积一周测定两次。TGI：治疗结束时的肿瘤生长抑制。CR：完全消退(对处理的主要反应为肿瘤变得不可检测)，PR：部分消退(对处理的主要反应为肿瘤缩小至少33％)。

表55.化合物136在各种肿瘤异种移植物中的活体内功效

实例13.对多组癌细胞株中的单一疗法反应的评定

进行此研究以识别可预测对化合物136的活体外反应的候选基因表达标记物。

表56.缩写

缩写 术语

AML 急性骨髓性白血病

ATPlite 腺苷三磷酸荧光素酶

BH 本杰明-霍赫贝格(Benjamini-

Hochberg)

DNA 脱氧核糖核酸

FDR 假发现率

GI 生长抑制

NSCLC 非小细胞肺癌

CORID 肿瘤学有反应者ID

材料

表57：膀胱癌细胞株清单

表58：428癌细胞株清单

细胞培养方法

自液氮储存器取出细胞，解冻且在适当生长培养基中扩增。在扩增之后，以500个细胞/孔将细胞接种于经组织培养物处理的384孔板中。24小时后，用化合物136(在100nM及2uM的浓度下)将细胞处理0小时或处理96小时。0小时或96小时结束时，使用ATPLite(Perkin Elmer)分析细胞状态以评定细胞对药物组合的生物反应。

生长抑制

在此研究中，使用生长抑制(GI)作为主要评估指标。使用ATPLite进行ATP监测，其允许监测药物对细胞的杀细胞性、细胞生长抑制性及增生性作用。

a.单变量基因表达分析

以无偏向及偏向方式进行转录物表达水平及协同值相关性的分析。无偏向过程涉及挑选在多测试校正之后p值小于0.06或0.1的所有基因。以偏向方式添加其他基因，考虑生物功能及与相关路径的关系。

I.结果

WFS1基因表达与对化合物136的反应之间的关联性

在一组9个膀胱癌细胞株(表57)中评估WFS1基因表达与对化合物136的反应之间的关系。对化合物136的反应与反应相关(图9)，且关联性在统计学上显著(Spearman rho0.68，p值0.048)。

另外，在一组428个癌细胞株(表58)中进一步评估对化合物136的反应与反应之间的关系。如所预期，WFS1基因表达与对2μM的化合物136的反应相关(图10)，且此关联性在统计学上显著(Spearman rho 0.42，p值0.0056)。

最后，进行活体内研究以评估患者来源的异种移植物(PDX)中的WFS1表达之间的关系。为此，自Oncotest compendium选择具有最高WFS1基因表达的10个肺PDX模型及具有最低WFS1基因表达的10个肺PDX模型。PDX模型中，WFS1基因表达与对化合物136的反应之间存在很强的关联性(图11)。

结论

WFS1在癌细胞株中及患者来源的异种移植物中对作为单一药剂的化合物136的反应为预测性的。在实验使用PDX模型系统保存WFS1表达/化合物反应的关系。

尽管已出于清楚理解的目的通过说明及实例相当详细地描述前述发明，但根据本发明的教导，显而易见的是一般本领域技术人员可在不背离随附权利要求的精神或范围的情况下对其进行某些变化及修改。

本文提供的所有参考文献以全文引用的方式并入本文中。如本文所用，所有缩写、符号及惯例符合当代科学文献中所用的缩写、符号及惯例。参见例如Janet S.Dodd编,TheACS Style Guide:A Manual for Authors and Editors,第2版,Washington,D.C.:American Chemical Society,1997。