一种羊肚菌菌种培育方法

技术领域

本发明涉及羊肚菌菌种培育技术领域，具体为一种羊肚菌菌种培育方法。

背景技术

羊肚菌是一种珍稀食用菌品种,因其菌盖表面凹凸不平、状如羊肚而得名；羊肚菌又称羊肚菜、羊蘑、羊肚蘑。用于食积气滞、脘腹胀满、痰壅气逆喘咳；羊肚菌又称羊肚菜、羊蘑。

羊肚菌对生长发育所要求的环境比较严格，因此实现人工种植有一定的难度；目前，羊肚菌的通用栽培方法主要有：(1)栽培料配方栽培；(2)室内脱袋栽培；(3)室外脱袋栽培。

羊肚菌在栽培前，需要进行羊肚菌菌种培育，但是现有的羊肚菌菌种培育得到的菌种生长不均匀，并且菌种吸收养分的能力较差，不利于菌种的后期栽培。

发明内容

本发明的目的在于提供一种羊肚菌菌种培育方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种羊肚菌菌种培育方法，所述方法包括：

步骤一：母种的培育，选择野生环境中生长健壮、个大的羊肚菌子实体，然后将羊肚菌子实体的菌柄去除，并将余下的菌盖均分成四份，然后使用体积浓度为70％的酒精对均分后的四份菌盖表面进行灭菌处理，接着将灭菌后的四份菌盖分别放置在四个相同的母种培养基中，然后将四个带有菌盖的母种培养基转移到培养箱内培养7天，得到母种；

步骤二：原种的培育，将母种和原种培养基移至接种箱内，然后在接种箱内将母种接种到原种培养基中，并在接种箱内培养17天，得到原种；

步骤三：栽培种的培育，在接种箱内，将原种连带原种培养基加入到栽培培养基中，并在接种箱内培养27天，得到栽培种；

其中，所述母种培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖20-25份、细胞分裂素5-10份、赤霉素5-10份、硫胺素5-10份、玉米粉20-25份、琼脂40-45份、无菌水120-130份；

所述原种培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖20-25份、甘蔗汁5-10份、麦糠5-10份、豆饼5-10份、尿素40-45份、无菌水120-130份；

所述栽培培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖20-25份、双岐菌2-5份、乳酸菌2-5份、芽孢杆菌2-5份、放线菌2-5份、无菌水120-130份。

其中，所述步骤一中，所述培养箱的培育温度为16℃-18℃，所述步骤二中，所述接种箱的培育温度为16℃-18℃，所述步骤三中，所述接种箱的培育温度为26℃-28℃。

其中，所述母种培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、细胞分裂素、赤霉素、硫胺素、玉米粉、琼脂和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，接着将反应釜的温度调节至65℃-80℃，并且不断的搅拌，直至琼脂完全融化，得到混合液，然后将混合液取出灭菌，得到母种培养基。

其中，所述原种培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、甘蔗汁、麦糠、豆饼、尿素和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，接着将反应釜的温度调节至65℃-80℃，并且不断的搅拌，直至尿素完全融化，得到混合液，然后将混合液取出灭菌，得到原种培养基。

其中，所述栽培培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、双岐菌、乳酸菌、芽孢杆菌、放线菌和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，然后将混合液取出，得到栽培培养基。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明通过科学合理的培育方法，培育方法简单；依次经过母种培养基、原种培养基和栽培培养基培育得到菌种，保证菌种均匀生长，保持菌种的稳定性，并且提高了菌种吸收养分的能力，提高了菌种抑制有害菌的能力，避免栽培时有害菌对菌种造成伤害，便于菌种的后期栽培。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1，本发明提供一种技术方案：一种羊肚菌菌种培育方法，所述方法包括：

步骤一：母种的培育，选择野生环境中生长健壮、个大的羊肚菌子实体，然后将羊肚菌子实体的菌柄去除，并将余下的菌盖均分成四份，然后使用体积浓度为70％的酒精对均分后的四份菌盖表面进行灭菌处理，接着将灭菌后的四份菌盖分别放置在四个相同的母种培养基中，然后将四个带有菌盖的母种培养基转移到培养箱内培养7天，得到母种；

步骤二：原种的培育，将母种和原种培养基移至接种箱内，然后在接种箱内将母种接种到原种培养基中，并在接种箱内培养17天，得到原种；

步骤三：栽培种的培育，在接种箱内，将原种连带原种培养基加入到栽培培养基中，并在接种箱内培养27天，得到栽培种。

其中，步骤一中，培养箱的培育温度为16℃-18℃，步骤二中，接种箱的培育温度为16℃-18℃，步骤三中，接种箱的培育温度为26℃-28℃。

其中，母种培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖22份、细胞分裂素7份、赤霉素7份、硫胺素7份、玉米粉23份、琼脂44份、无菌水125份。

其中，母种培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、细胞分裂素、赤霉素、硫胺素、玉米粉、琼脂和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，接着将反应釜的温度调节至65℃-80℃，并且不断的搅拌，直至琼脂完全融化，得到混合液，然后将混合液取出灭菌，得到母种培养基。

其中，原种培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖22份、甘蔗汁7份、麦糠7份、豆饼7份、尿素44份、无菌水125份。

其中，原种培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、甘蔗汁、麦糠、豆饼、尿素和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，接着将反应釜的温度调节至65℃-80℃，并且不断的搅拌，直至尿素完全融化，得到混合液，然后将混合液取出灭菌，得到原种培养基。

其中，栽培培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖22份、双岐菌3份、乳酸菌3份、芽孢杆菌3份、放线菌3份、无菌水125份。

其中，栽培培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、双岐菌、乳酸菌、芽孢杆菌、放线菌和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，然后将混合液取出，得到栽培培养基。

实施例2，本发明提供一种技术方案：一种羊肚菌菌种培育方法，所述方法包括：

步骤一：母种的培育，选择野生环境中生长健壮、个大的羊肚菌子实体，然后将羊肚菌子实体的菌柄去除，并将余下的菌盖均分成四份，然后使用体积浓度为70％的酒精对均分后的四份菌盖表面进行灭菌处理，接着将灭菌后的四份菌盖分别放置在四个相同的母种培养基中，然后将四个带有菌盖的母种培养基转移到培养箱内培养7天，得到母种；

步骤二：原种的培育，将母种和原种培养基移至接种箱内，然后在接种箱内将母种接种到原种培养基中，并在接种箱内培养17天，得到原种；

步骤三：栽培种的培育，在接种箱内，将原种连带原种培养基加入到栽培培养基中，并在接种箱内培养27天，得到栽培种。

其中，步骤一中，培养箱的培育温度为16℃-18℃，步骤二中，接种箱的培育温度为16℃-18℃，步骤三中，接种箱的培育温度为26℃-28℃。

其中，母种培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖22份、细胞分裂素7份、赤霉素7份、硫胺素7份、玉米粉23份、琼脂44份、无菌水125份。

其中，母种培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、细胞分裂素、赤霉素、硫胺素、玉米粉、琼脂和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，接着将反应釜的温度调节至65℃-80℃，并且不断的搅拌，直至琼脂完全融化，得到混合液，然后将混合液取出灭菌，得到母种培养基。

其中，原种培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖22份、甘蔗汁7份、麦糠7份、豆饼7份、尿素44份、无菌水125份。

其中，原种培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、甘蔗汁、麦糠、豆饼、尿素和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，接着将反应釜的温度调节至65℃-80℃，并且不断的搅拌，直至尿素完全融化，得到混合液，然后将混合液取出灭菌，得到原种培养基。

其中，栽培培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖24份、双岐菌4份、乳酸菌4份、芽孢杆菌4份、放线菌4份、无菌水120份。

其中，栽培培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、双岐菌、乳酸菌、芽孢杆菌、放线菌和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，然后将混合液取出，得到栽培培养基。

对比例1，本发明提供一种技术方案：一种羊肚菌菌种培育方法，所述方法包括：

步骤一：母种的培育，选择野生环境中生长健壮、个大的羊肚菌子实体，然后将羊肚菌子实体的菌柄去除，并将余下的菌盖均分成四份，然后使用体积浓度为70％的酒精对均分后的四份菌盖表面进行灭菌处理，接着将灭菌后的四份菌盖分别放置在四个相同的母种培养基中，然后将四个带有菌盖的母种培养基转移到培养箱内培养7天，得到母种；

步骤二：原种的培育，将母种和原种培养基移至接种箱内，然后在接种箱内将母种接种到原种培养基中，并在接种箱内培养17天，得到原种；

步骤三：栽培种的培育，在接种箱内，将原种连带原种培养基加入到栽培培养基中，并在接种箱内培养27天，得到栽培种。

其中，步骤一中，培养箱的培育温度为16℃-18℃，步骤二中，接种箱的培育温度为16℃-18℃，步骤三中，接种箱的培育温度为26℃-28℃。

其中，母种培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖22份、细胞分裂素7份、赤霉素7份、硫胺素7份、玉米粉23份、琼脂44份、无菌水125份。

其中，母种培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、细胞分裂素、赤霉素、硫胺素、玉米粉、琼脂和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，接着将反应釜的温度调节至65℃-80℃，并且不断的搅拌，直至琼脂完全融化，得到混合液，然后将混合液取出灭菌，得到母种培养基。

其中，原种培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖22份、甘蔗汁7份、麦糠7份、豆饼7份、尿素44份、无菌水125份。

其中，原种培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、甘蔗汁、麦糠、豆饼、尿素和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，接着将反应釜的温度调节至65℃-80℃，并且不断的搅拌，直至尿素完全融化，得到混合液，然后将混合液取出灭菌，得到原种培养基。

其中，栽培培养基与母种培养基相同。

对比例2，本发明提供一种技术方案：一种羊肚菌菌种培育方法，所述方法包括：

步骤一：母种的培育，选择野生环境中生长健壮、个大的羊肚菌子实体，然后将羊肚菌子实体的菌柄去除，并将余下的菌盖均分成四份，然后使用体积浓度为70％的酒精对均分后的四份菌盖表面进行灭菌处理，接着将灭菌后的四份菌盖分别放置在四个相同的母种培养基中，然后将四个带有菌盖的母种培养基转移到培养箱内培养7天，得到母种；

步骤二：原种的培育，将母种和原种培养基移至接种箱内，然后在接种箱内将母种接种到原种培养基中，并在接种箱内培养17天，得到原种；

步骤三：栽培种的培育，在接种箱内，将原种连带原种培养基加入到栽培培养基中，并在接种箱内培养27天，得到栽培种。

其中，步骤一中，培养箱的培育温度为16℃-18℃，步骤二中，接种箱的培育温度为16℃-18℃，步骤三中，接种箱的培育温度为26℃-28℃。

其中，母种培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖22份、细胞分裂素7份、赤霉素7份、硫胺素7份、玉米粉23份、琼脂44份、无菌水125份。

其中，母种培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、细胞分裂素、赤霉素、硫胺素、玉米粉、琼脂和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，接着将反应釜的温度调节至65℃-80℃，并且不断的搅拌，直至琼脂完全融化，得到混合液，然后将混合液取出灭菌，得到母种培养基。

其中，原种培养基以重量份数计包括以下组份：葡萄糖22份、甘蔗汁7份、麦糠7份、豆饼7份、尿素44份、无菌水125份。

其中，原种培养基的制备方法为：按重量份分别称取葡萄糖、甘蔗汁、麦糠、豆饼、尿素和无菌水，然后将称取后的原料依次加入到反应釜内，通过反应釜搅拌15-20份，使用原料均匀混合到一起，接着将反应釜的温度调节至65℃-80℃，并且不断的搅拌，直至尿素完全融化，得到混合液，然后将混合液取出灭菌，得到原种培养基。

其中，栽培培养基与原种培养基相同。

经过实施例1、实施例、对比例1、对比例2得到四组不同的菌种，每组有四份菌种，观察每组菌种的生长情况，并记录下表：

由上表可以看出，依次经过母种培养基、原种培养基和栽培培养基培育得到菌种健壮个人；将栽培培养基换成母种培养基或原种培养基得到的菌种柔弱细小，因此通过葡萄糖、双岐菌、乳酸菌、芽孢杆菌、放线菌和无菌水制备的栽培培养基能够提高菌种吸收养分的能力，提高了菌种抑制有害菌的能力，避免栽培时有害菌对菌种造成伤害，便于菌种的后期栽培，并保证得到的菌种健壮个人。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。