一种提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于农业技术领域，具体涉及一种提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物及其制备方法与应用。

背景技术

藏药喉毛花（

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物；第二目的在于提供所述的提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物的制备方法；第三目的在于提供所述的提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物的应用。

本发明的第一目的是这样实现的，是以龙胆科喉毛花属植物藏药喉毛花(

该化合物为浅黄色油状物，命名为：(Z)-6-乙氧基-5-亚乙基-4,5,6,8-四氢-1H,3H-吡喃并[3,4-c]吡喃-1-酮，英文名为：(

本发明的第二目的是这样实现的，是以龙胆科喉毛花属植物藏药喉毛花(

A、前处理：将原料龙胆科喉毛花属植物藏药喉毛花(

B、浸膏提取：将物料a中加入物料a质量2~4倍的提取溶剂，于常温下浸泡提取36~72h，提取3~5次，合并提取液，过滤浓缩得到浸膏b；

C、硅胶柱层析：将浸膏b中加入浸膏b重量2.5~5倍的100~200目硅胶干法装柱后，以体积配比为20:1~5:5的氯仿-丙酮溶液进行梯度洗脱，经TLC监测，合并相同的部分；

D、高压液相色谱分离：将以9:1配比的氯仿-丙酮溶液进行洗脱得到的洗脱液经高压液相色谱分离纯化得到目标物提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物。

所制备的提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物结构是通过以下方法进行鉴定：

提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物为浅黄色油状物，HRESI-MS显示其准分子离子峰为m/z247.0944[M+Na]

其红外光谱显示1710cm

化合物的母核确定后，通过进一步分析其HMBC谱的相关性，可确定乙氧基的位置。通过乙氧基亚甲基氢H

化合物的红外、紫外和质谱数据：紫外光谱(甲醇)，

表-1化合物的

本发明的第三目的是这样实现的，所述的提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物在制备抑菌药物中的应用。

本发明提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物是首次被分离出来的，通过核磁共振和质谱测定方法确定了为环烯醚萜化合物，并表征了其具体结构。本发明还对对化合物进行了大肠杆菌（

附图说明

图1为化合物的核磁共振碳谱；

图2为化合物的核磁共振氢谱；

图3为化合物的主要HMBC相关。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。

本发明所述的提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物，是以龙胆科喉毛花属植物藏药喉毛花(

本发明所述的提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物的制备方法，是以龙胆科喉毛花属植物藏药喉毛花(

A、前处理：将原料龙胆科喉毛花属植物藏药喉毛花(

B、浸膏提取：将物料a中加入物料a质量2~4倍的提取溶剂，于常温下浸泡提取36~72h，提取3~5次，合并提取液，过滤浓缩得到浸膏b；

C、硅胶柱层析：将浸膏b中加入浸膏b重量2.5~5倍的100~200目硅胶干法装柱后，以体积配比为20:1~5:5的氯仿-丙酮溶液进行梯度洗脱，经TLC监测，合并相同的部分；

D、高压液相色谱分离：将以9:1配比的氯仿-丙酮溶液进行洗脱得到的洗脱液经高压液相色谱分离纯化得到目标物提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物。

A步骤中所述的粉碎是粉碎过10目筛；所述的切段是切成0.5~1.5cm的小段。

B步骤中所述的提取溶剂为质量浓度80%~100%甲醇水溶液、质量浓度80%~100%的乙醇水溶液或质量浓度70%~100%的丙酮水溶液。

C步骤上柱前还包括用物料b重量1.2~3倍的有机溶剂溶解后加入物料b重量1~1.5倍的80~100目硅胶进行拌样步骤。

所述的有机溶剂为纯甲醇、纯乙醇或纯丙酮。

C步骤中所述的氯仿-丙酮溶液体积配比为20:1、9:1、8:2、7:3、6:4和5:5。

D步骤中高压液相色谱分离纯化是采用规格为21.2mm×250mm，5

D步骤中高压液相色谱分离纯化后还包括进一步纯化步骤，具体是将所得化合物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用凝胶柱进行层析分析得到目标物提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物。

本发明所述的提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物的应用为所述的提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物在制备抑菌药物中的应用。

本发明所用原料不受地区和品种限制，均可以实现本发明，下面以来源于云南和西藏各地的藏药喉毛花原料对本发明做进一步说明：

实施例1

藏药喉毛花样品来源于云南省丽江市玉龙县，将藏药喉毛花样品2.5kg粉碎过10目筛，以质量浓度90%的甲醇水溶液常温下浸泡提取4次，每次提取48h，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏122g。浸膏用重量2.0倍量的纯甲醇溶解后用180g的80目粗硅胶拌样，0.75kg的200目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比为20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分，得到6个部分，其中体积配比为9:1的氯仿-甲醇洗脱部分用安捷仑1200制备高效液相色谱分离，以70％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5μ

实施例2

藏药喉毛花样品来源于云南省迪庆州德钦县，将藏药喉毛花取样1.8kg切碎过10目筛，以质量浓度95%的乙醇水溶液常温浸泡提取5次，每次提取36h，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏93g。浸膏用重量比2.0倍量的纯甲醇溶解后用100g的100目粗硅胶拌样，0.5kg的200目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比为20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的氯仿-甲醇梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分，得到6个部分，其中体积配比为9:1的氯仿-丙酮洗脱部分用安捷仑1200制备高效液相色谱分离，以70％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5

实施例3

藏药喉毛花样品来源于西藏昌都地区左贡县，将藏药喉毛花样品1.5kg切成0.5~1.5cm的小段，以质量浓度80%的丙酮水溶液常温浸泡提取4次，每次提取60h，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏82g。浸膏用重量比1.6倍量的纯甲醇溶解后用120g的100目粗硅胶拌样，0.4kg的180目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比为20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的氯仿-甲醇梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分，得到6个部分，其中体积配比为9:1的氯仿-丙酮洗脱部分用安捷仑1200制备高效液相色谱分离，以70％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5

实施例4

取实施例1制备的化合物，为浅黄色油状物。

化合物为浅黄色油状物，HRESI-MS显示其准分子离子峰为m/z247.0944[M+Na]

其红外光谱显示1710cm

化合物的母核确定后，通过进一步分析其HMBC谱的相关性，可确定乙氧基的位置。通过乙氧基亚甲基氢H

实施例5

取实施例2制备的化合物，为浅黄色油状物。测定方法与实施例4相同，确认实施例2制备的化合物为所述的环烯醚萜化合物：(Z)-6-乙氧基-5-亚乙基-4,5,6,8-四氢-1H,3H-吡喃并[3,4-c]吡喃-1-酮。

实施例6

取实施例3制备的化合物，为浅黄色油状物。测定方法与实施例4相同，确认实施例3制备的化合物为所述的环烯醚萜化合物：(Z)-6-乙氧基-5-亚乙基-4,5,6,8-四氢-1H,3H-吡喃并[3,4-c]吡喃-1-酮。

实施例7

取实施例1制备的环烯醚萜化合物进行抑菌试验，试验情况如下：

采用二倍稀释法，以氨苄为阳性对照药，选用处于对数生长期的大肠杆菌（

实施例8

分别取实施例2和实施例3制备得到环烯醚萜化合物进行抑菌试验，方法同实施例7，结果均表明，本发明所述的提取自藏药喉毛花中的环烯醚萜化合物对大肠杆菌和表皮葡萄球菌的抑制率较好（均达到了89%以上），对金黄色葡萄球菌的抑制率相对较弱（49%以上）。