嗅觉受体在识别4-乙基愈创木酚中的用途和检测4-乙基愈创木酚的方法

分案信息

本申请是2023年02月08日向中国国家知识产权局提交的、专利申请号为202310141341.X、专利名称为嗅觉受体在识别4-乙基愈创木酚中的用途和检测4-乙基愈创木酚的方法的专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及化学检测技术领域，具体地，本发明涉及一种嗅觉受体在识别4-乙基愈创木酚中的用途和检测4-乙基愈创木酚的方法，更具体地，本发明涉及一种嗅觉受体在识别4-乙基愈创木酚中的用途、4-乙基愈创木酚在激活嗅觉受体中的用途、检测4-乙基愈创木酚的方法、评估酱油产品品质的方法和判断酱油产品加工工艺的方法。

背景技术

4-乙基愈创木酚，又名4-乙基-2-甲氧基苯酚，简称4-EG(4-ethylguaiacol，CAS号2785-89-9)，为无色至淡黄色液体，微带酚的气息，通常被描述为一种酱香味、烟味和丁香味的物质，是一种天然的呈香化合物。

4-乙基愈创木酚的含量与酱油的品质密切相关，其不仅是酱油的主要香气成分，还具有缓和咸味的作用，1～5mg/L的4-乙基愈创木酚便可以明显改善酱油的风味品质。除此之外，4-乙基愈创木酚还是区别酱油高盐稀态发酵工艺和低盐固态发酵工艺酱油的关键香气成分。近年来，就有利用不同菌株混合培养或通过在发酵过程中添加菌株纯培养物的方式来提高酱油发酵工程中4-乙基愈创木酚含量的例子。

哺乳动物具有优异的嗅觉感知能力，可以灵敏快速地识别区分食物中的气味，其主要是因为气味剂可激活人的嗅觉受体(ORs)触发神经冲动，将有关气味的信息传递到大脑。但是，目前尚未出现有关检测4-乙基愈创木酚的嗅觉受体的报道。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提供了一种采用嗅觉受体检测4-乙基愈创木酚的方法，本发明的方法可快速识别出4-乙基愈创木酚，可用于辅助评估酱油的品质与风味。

在本发明的一个方面，本发明提出了一种嗅觉受体在识别4-乙基愈创木酚中的用途，所述嗅觉受体包括选自下列中的至少之一：MOR170-15、MOR179-7、MOR125-5_p、MOR106-4、OR2W1、OR2J2、OR9Q2和OR10H3。发明人经过实验发现，用4-乙基愈创木酚分别刺激上述嗅觉受体后，上述嗅觉受体均可被激活，由此，可利用上述嗅觉受体有效地鉴定出4-乙基愈创木酚，为4-乙基愈创木酚的鉴定以及含有4-乙基愈创木酚的样品检测奠定基础。

需要说明的是，若4-乙基愈创木酚刺激嗅觉受体后，嗅觉受体被激活，即为“嗅觉受体可识别4-乙基愈创木酚”；若4-乙基愈创木酚刺激嗅觉受体后，嗅觉受体未被激活，即为“嗅觉受体不可识别4-乙基愈创木酚”。

在本发明的一个优选实施例中，所述嗅觉受体为MOR170-15和/或MOR179-7。

根据本发明的实施例，所述识别是通过嗅觉受体的活性变化体现的。

根据本发明的实施例，所述活性变化包括如下信号变化的至少之一：荧光素酶、分泌性碱性磷酸酶、荧光蛋白、荧光探针、cAMP、IP3、钙离子、电流和pH。

示例性地，所述识别是通过嗅觉受体下游的cAMP增加体现的。发明人经过实验发现，4-乙基愈创木酚刺激表达嗅觉受体的细胞，嗅觉受体被激活后，细胞内的cAMP浓度升高，通过检测cAMP浓度变化，即可确定嗅觉受体是否能够识别4-乙基愈创木酚。

在本发明的另一方面，本发明提出了一种4-乙基愈创木酚在激活嗅觉受体中的用途，所述嗅觉受体包括选自下列中的至少之一：MOR170-15、MOR179-7、MOR125-5_p、MOR106-4、OR2W1、OR2J2、OR9Q2和OR10H3。发明人经过实验发现，用4-乙基愈创木酚分别刺激上述嗅觉受体后，上述嗅觉受体均可被激活，由此，可利用上述嗅觉受体有效地鉴定出4-乙基愈创木酚，为4-乙基愈创木酚的鉴定以及含有4-乙基愈创木酚的样品检测奠定基础。

在本发明的一个优选实施例中，所述嗅觉受体为MOR170-15和/或MOR179-7。

根据本发明的实施例，所述激活是通过嗅觉受体的活性变化体现的。

根据本发明的实施例，所述活性变化包括如下信号变化的至少之一：荧光素酶、分泌性碱性磷酸酶、荧光蛋白、荧光探针、cAMP、IP3、钙离子、电流和pH。

示例性地，所述识别是通过嗅觉受体下游的cAMP增加体现的。发明人经过实验发现，4-乙基愈创木酚刺激表达嗅觉受体的细胞，嗅觉受体被激活后，细胞内的cAMP浓度升高，通过检测cAMP浓度变化，即可确定嗅觉受体是否能够识别4-乙基愈创木酚。

在本发明的又一方面，本发明提出了一种检测4-乙基愈创木酚的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测样品与嗅觉受体接触，确定接触后所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测样品中是否含有4-乙基愈创木酚；其中，所述嗅觉受体包括选自下列中的至少之一：MOR170-15、MOR179-7、MOR125-5_p、MOR106-4、OR2W1、OR2J2、OR9Q2和OR10H3。由前可知，4-乙基愈创木酚可激活上述嗅觉受体，由此，将待测样品与上述嗅觉受体接触，若待测样品中含有4-乙基愈创木酚，上述嗅觉受体可被激活，并得到嗅觉受体激活后的响应值，根据响应值可确定待测样品中是否含有4-乙基愈创木酚。

需要说明的是，本文中的“接触”应做广义理解，可为直接接触，也可为间接接触，具体不受限制。

示例性地，通过液体状态的待测样品(本身为液体或采用溶剂制备成液体)和嗅觉受体混合后进行接触(即为待测样品和嗅觉受体进行直接接触)；也可为直接将待测样品和嗅觉受体放置于同一空间内，待测样品中自身释放的气味分子(4-乙基愈创木酚)与嗅觉受体进行接触(即为待测样品和嗅觉受体进行间接接触)。

在本发明的一个优选实施例中，所述嗅觉受体为MOR170-15和/或MOR179-7。

根据本发明的实施例，所述嗅觉受体存在响应值是所述待测样品中含有4-乙基愈创木酚的指示；或者，所述嗅觉受体不存在响应值是所述待测样品中不含有4-乙基愈创木酚的指示。

需要说明的是，“不含有4-乙基愈创木酚的指示”是指待测样品中完全不存在4-乙基愈创木酚；或者待测样品中存在少量的4-乙基愈创木酚，但不能被检测出来。

在本发明的一个实施例中，所述嗅觉受体选自MOR170-15，所述嗅觉受体存在响应值是所述待测样品中含有4-乙基愈创木酚的指示或含有不低于3μM的4-乙基愈创木酚的指示；或者，所述嗅觉受体不存在响应值是所述待测样品中不含有4-乙基愈创木酚的指示或含有低于3μM的4-乙基愈创木酚的指示。

在本发明的一个实施例中，所述嗅觉受体选自MOR179-7，所述嗅觉受体存在响应值是所述待测样品中含有4-乙基愈创木酚的指示或含有不低于10μM的4-乙基愈创木酚的指示；或者，所述嗅觉受体不存在响应值是所述待测样品中不含有4-乙基愈创木酚的指示或含有低于10μM的4-乙基愈创木酚的指示。

根据本发明的实施例，所述方法进一步包括：基于标准曲线，确定所述待测样品中4-乙基愈创木酚的含量，所述标准曲线为预定量4-乙基愈创木酚与嗅觉受体响应值对应曲线。由此，可对待测样品中4-乙基愈创木酚的含量进行检测。

根据本发明的实施例，所述嗅觉受体是表达所述嗅觉受体的细胞或转基因细胞提供的。

根据本发明的实施例，所述细胞或转基因细胞为真核细胞或原核细胞。

在本发明的一些可选实施例中，所述真核细胞包括但不限于从嗅觉基板分离的细胞群组中选出的细胞、HEK293细胞、CHO细胞、爪蟾卵母细胞、Hela细胞、COS细胞和酵母细胞等。

根据本发明的实施例，所述原核细胞选自细菌。

根据本发明的实施例，所述响应值是通过检测所述嗅觉受体的活性变化获得。

根据本发明的实施例，所述活性变化是通过如下检测方法的至少之一确定的：荧光素酶检测法、分泌性碱性磷酸酶检测法、荧光蛋白检测法、荧光探针检测法、Ca2+浓度检测法、电流检测法、同位素标记法、抗体检测法和pH检测法。

示例性地，荧光素酶检测法的检测为，采用4-乙基愈创木酚或含有4-乙基愈创木酚的样品刺激含有嗅觉受体的细胞时，若嗅觉受体被激活，则细胞内cAMP浓度升高，cAMP结合CRE-luciferase的启动子区，并促使荧光素酶的转录和翻译，因此，通过检测荧光素酶的活性，即可表征嗅觉受体的响应情况，确定嗅觉受体是否可识别4-乙基愈创木酚。

根据本发明的实施例，所述响应值是通过检测所述细胞中cAMP浓度的变化获得的。

示例性地，所述细胞中cAMP浓度的变化通过采用GloSensorTM cAMP检测试剂盒获得。GloSensor-20F cAMP基因构建物可预先表达一种荧光素酶变体，cAMP浓度升高可引起荧光素酶变体的构象变化，使得荧光素酶从无活性状态转变为活性状态，GloSensorTMcAMP检测试剂盒提供了荧光素酶变体的底物，该方法可实时测定cAMP的浓度变化，可快速、灵敏地检测待测样品中4-乙基愈创木酚的含量。

在本发明的又一方面，本发明提出了一种评估酱油产品品质的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测酱油产品与嗅觉受体接触，确定接触后所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测酱油产品的品质；其中，所述嗅觉受体包括选自下列中的至少之一：MOR170-15、MOR179-7、MOR125-5_p、MOR106-4、OR2W1、OR2J2、OR9Q2和OR10H3。由前可知，4-乙基愈创木酚可激活上述嗅觉受体，由此，将待测酱油产品与上述嗅觉受体接触，若待测酱油产品中含有4-乙基愈创木酚，上述嗅觉受体可被激活，并得到嗅觉受体激活后的响应值，根据响应值的大小可确定待测酱油产品的品质。

根据本发明的实施例，所述接触之前，预先将所述待测酱油产品进行稀释处理，稀释倍数为10～1000倍，例如为10～500倍、10～400倍、10～300倍、10～200倍、10～100倍、10～90倍、20～80倍、30～70倍等。

在本发明的一个优选实施例中，所述嗅觉受体为MOR170-15和/或MOR179-7。

根据本发明的实施例，所述响应值高于第一预定阈值，是待测酱油产品品质合格的指示。

在本文中，“预定阈值”可通过采用本发明的嗅觉受体对大量酱油产品(例如20种、50种、100种、150种、200种及以上)进行检测，基于大量酱油产品获得的响应值进行统计得到的。其中，“预定阈值”可为直接获得的响应值，可以为相对于对照组的相应倍数，具体类型不受限制。

需要说明的是，本领域技术人员可知，酱油发酵过程中如果产生4-乙基愈创木酚会显著提高酱油的品质，当酱油产品含有约1-2mg/L的4-乙基愈创木酚可明显改变酱油的品质，一般酱油产品中4-乙基愈创木酚的浓度不能超过5mg/L。基于此，第一预定阈值不低于6.5μM，当然该阈值可根据实际情况继续调整，第一预定阈值的设定范围为6.5μM-33μM，例如可为6.57μM-32.89μM、13.14μM-32.89μM、6.57μM-13.14μM中的任意点值。

示例性地，所述第一预定阈值约为6.57μM或13.14μM。

根据本发明的实施例，所述待测酱油产品的品质与所述响应值成正比。

在本发明的一些可选实施例中，将多个所述待测酱油产品分别与嗅觉受体接触，确定接触后所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测酱油产品的品质，其中，所述响应值更高，是待测酱油产品的品质更高的指示。

示例性的，如图4所示，采用本发明的嗅觉受体对好记有机鲜酱油、李锦记味极鲜和金狮黄豆酱油的品质进行检测，有机鲜酱油的响应值>李锦记味极鲜的响应值>金狮黄豆酱油的响应值，因此，好记有机鲜酱油的品质最好，其次为李锦记味极鲜，最后为金狮黄豆酱油。

根据本发明的实施例，所述嗅觉受体是表达所述嗅觉受体的细胞或转基因细胞提供的。

根据本发明的实施例，所述细胞或转基因细胞为真核细胞或原核细胞。

在本发明的一些可选实施例中，所述真核细胞包括但不限于从嗅觉基板分离的细胞群组中选出的细胞、HEK293细胞、CHO细胞、爪蟾卵母细胞、Hela细胞、COS细胞和酵母细胞等。

根据本发明的实施例，所述原核细胞选自细菌。

根据本发明的实施例，所述响应值是通过检测所述嗅觉受体的活性变化获得。

根据本发明的实施例，所述活性变化是通过如下检测方法的至少之一确定的：荧光素酶检测法、分泌性碱性磷酸酶检测法、荧光蛋白检测法、荧光探针检测法、Ca2+浓度检测法、电流检测法、同位素标记法、抗体检测法和pH检测法。

示例性地，荧光素酶检测法的检测为，采用4-乙基愈创木酚或含有4-乙基愈创木酚的样品刺激含有嗅觉受体的细胞时，若嗅觉受体被激活，则细胞内cAMP浓度升高，cAMP结合CRE-luciferase的启动子区，并促使荧光素酶的转录和翻译，因此，通过检测荧光素酶的活性，即可表征嗅觉受体的响应情况，确定嗅觉受体是否可识别4-乙基愈创木酚。

根据本发明的实施例，所述响应值是通过检测所述细胞中cAMP浓度的变化获得的。

示例性地，所述细胞中cAMP浓度的变化通过采用GloSensorTM cAMP检测试剂盒获得。GloSensor-20F cAMP基因构建物可预先表达一种荧光素酶变体，cAMP浓度升高可引起荧光素酶变体的构象变化，使得荧光素酶从无活性状态转变为活性状态，GloSensorTMcAMP检测试剂盒提供了荧光素酶变体的底物，该方法可实时测定cAMP的浓度变化，可快速、灵敏地检测待测样品中4-乙基愈创木酚的含量。

在本发明的又一方面，本发明提出了一种判断酱油产品加工工艺的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测酱油产品与嗅觉受体接触，确定接触后所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测酱油产品的加工工艺；其中，所述嗅觉受体包括选自下列中的至少之一：MOR170-15、MOR179-7、MOR125-5_p、MOR106-4、OR2W1、OR2J2、OR9Q2和OR10H3。由前可知，4-乙基愈创木酚可激活上述嗅觉受体，由此，将待测酱油产品与上述嗅觉受体接触，若待测酱油产品中含有4-乙基愈创木酚，上述嗅觉受体可被激活，并得到嗅觉受体激活后的响应值，根据响应值的大小可确定4-乙基愈创木酚的含量，进而判断酱油产品加工工艺。

根据本发明的实施例，所述加工工艺包括高盐稀态发酵工艺或低盐固态发酵工艺。本领域技术人员可知，4-乙基愈创木酚还是区别酱油高盐稀态发酵工艺和低盐固态发酵工艺酱油的关键香气成分，因此，采用本发明的方法，将待测酱油产品与上述嗅觉受体接触，若待测酱油产品中含有4-乙基愈创木酚，上述嗅觉受体可被激活，并得到嗅觉受体激活后的响应值，根据响应值的大小可确定4-乙基愈创木酚的含量，进而判断酱油产品加工工艺。

根据本发明的实施例，所述接触之前，预先将所述待测酱油产品进行稀释处理，稀释倍数为10～1000倍，例如可为10～500倍、10～400倍、10～300倍、10～200倍、10～100倍、10～90倍、20～80倍、30～70倍等。

在本发明的一个优选实施例中，所述嗅觉受体为MOR170-15和/或MOR179-7。

根据本发明的实施例，所述响应值高于第二预定阈值，是待测酱油产品是通过高盐稀态发酵工艺获得的指示。

根据本发明的实施例，第二预定阈值不低于1mg/L。

示例性地，第二预定阈值约为6.5μM。

根据本发明的实施例，所述嗅觉受体是表达所述嗅觉受体的细胞或转基因细胞提供的。

根据本发明的实施例，所述细胞或转基因细胞为真核细胞或原核细胞。

在本发明的一些可选实施例中，所述真核细胞包括但不限于从嗅觉基板分离的细胞群组中选出的细胞、HEK293细胞、CHO细胞、爪蟾卵母细胞、Hela细胞、COS细胞和酵母细胞等。

根据本发明的实施例，所述原核细胞选自细菌。

根据本发明的实施例，所述响应值是通过检测所述嗅觉受体的活性变化获得。

根据本发明的实施例，所述活性变化是通过如下检测方法的至少之一确定的：荧光素酶检测法、分泌性碱性磷酸酶检测法、荧光蛋白检测法、荧光探针检测法、Ca2+浓度检测法、电流检测法、同位素标记法、抗体检测法和pH检测法。

示例性地，荧光素酶检测法的检测为，采用4-乙基愈创木酚或含有4-乙基愈创木酚的样品刺激含有嗅觉受体的细胞时，若嗅觉受体被激活，则细胞内cAMP浓度升高，cAMP结合CRE-luciferase的启动子区，并促使荧光素酶的转录和翻译，因此，通过检测荧光素酶的活性，即可表征嗅觉受体的响应情况，即可确定嗅觉受体是否可识别4-乙基愈创木酚。

根据本发明的实施例，所述响应值是通过检测所述细胞中cAMP浓度的变化获得的。

示例性地，所述细胞中cAMP浓度的变化通过采用GloSensorTM cAMP检测试剂盒获得。GloSensor-20F cAMP基因构建物可预先表达一种荧光素酶变体，cAMP浓度升高可引起荧光素酶变体的构象变化，使得荧光素酶从无活性状态转变为活性状态，GloSensorTMcAMP检测试剂盒提供了荧光素酶变体的底物，该方法可实时测定cAMP的浓度变化，可快速、灵敏地检测待测样品中4-乙基愈创木酚的含量。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：

图1为本发明实施例1中4-乙基愈创木酚刺激人类及鼠类400个嗅觉受体(OR)的响应图谱；

图2为本发明实施例1中MOR170-15、MOR179-7及MOR139-3响应4-乙基愈创木酚的剂量依赖曲线；

图3为本发明实施例2中MOR170-15及MOR179-7对李锦记味极鲜的响应情况；

图4为本发明实施例3中MOR170-15及MOR179-7对李锦记味极鲜、好记有机鲜抽酱油、金狮黄豆酱油的响应情况。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。进一步地，在本发明的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。

在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。

为了更容易理解本发明，以下具体定义了某些技术和科学术语。除显而易见在本文件中的它处另有明确定义，否则本文中使用的所有其它技术和科学术语都具有本发明所属领域的一般技术人员通常理解的含义。

在本文中，术语“包含”或“包括”为开放式表达，即包括本发明所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。

在本文中，术语“任选地”、“任选的”或“任选”通常是指随后所述的事件或状况可以但未必发生，并且该描述包括其中发生该事件或状况的情况，以及其中未发生该事件或状况的情况。

在本文中，术语“约”在本文中用来对在其前面的精确数值以及接近或近似之前有该术语的数值提供文字支持。在确定数值是否接近或近似具体陈述的数值中，该接近或近似的未陈述数值可以是这样的数值，在提供其的上下文中，其提供该具体陈述数值的实质性等同。术语“约”或“大约”是指由本领域技术人员确定的对于特定值可接受的误差，其部分取决于如何测量或确定该值。在某些实施方案中，术语“约”或“大约”指在1、2、3或4个标准偏差之内。在某些实施方案中，术语“约”或“大约”指在给定值或范围的30％、25％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％或0.05％之内。

下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1：嗅觉受体的筛选

本实施例中利用双荧光素酶法(Dual-Glo

以往研究报道，4-乙基愈创木酚可以激活嗅觉受体MOR139-3，基于此，发明人采用不同浓度的4-乙基愈创木酚刺激分别含有MOR139-3、MOR170-15和MOR179-7嗅觉受体的细胞，并观察不同浓度下，上述4种嗅觉受体响应4-乙基愈创木酚的剂量曲线，结果如图2所示，其中，横轴为4-乙基愈创木酚浓度(M)的对数，纵轴为相对于空白对照(不加4-乙基愈创木酚)的响应变化倍数。

结果发现，MOR139-3对4-乙基愈创木酚的响应最弱，在300μM时仅为3倍左右，而在同等浓度下，本发明中的MOR170-15对4-乙基愈创木酚的响应倍数可以达到24倍左右，MOR179-7对4-乙基愈创木酚的响应倍数也可达到15倍左右，显然，相较于MOR139-3，本发明新发现的MOR170-15和MOR179-7的响应倍数更高。其中，4-乙基愈创木酚的灵敏度为3μM，MOR179-7的灵敏度为10μM时起始反应这两种嗅觉受体对低浓度的4-乙基愈创木酚响应更为灵敏。

实施例2：不同嗅觉受体对酱油产品的检测

本实施例中采用实施例1的方法，通过分别表达MOR170-15和MOR179-7的细胞对李锦记味极鲜酱油产品进行检测。发明人采用CD293培养基对酱油进行50倍稀释，然后采用实施例1的方法将表达MOR170-15和MOR179-7的细胞分别对稀释后的酱油进行检测。检测结果参见图3，其中横轴嗅觉受体种类，纵轴为相对于空白对照(不添加酱油)的响应变化倍数。

结果表明，MOR170-15和MOR179-7嗅觉受体都能检测到激活信号，其中，MOR170-15的响应最高，为9倍左右，MOR179-7为3倍左右。

实施例3：不同嗅觉受体对不同加工工艺生产的酱油进行检测

本实施例中采用实施例1的方法，通过分别表达MOR170-15和MOR179-7的细胞对不同加工工艺生产的酱油进行检测，其中，高盐稀态发酵酱油为李锦记味极鲜(普通酱油)和好记有机鲜抽酱油(有机酱油)；低盐稀态发酵酱油为金狮黄豆酱油。

发明人采用CD293培养基对上述2种酱油分别进行50倍稀释，然后采用实施例1的方法将表达MOR170-15和MOR179-7的细胞分别对稀释后的酱油进行检测。检测结果参见图3，其中横轴嗅觉受体种类及酱油品牌，纵轴为相对于空白对照(不添加酱油)的响应变化倍数，其中，黑色柱形图表示李锦记味极鲜，深灰灰色柱形图为好记有机鲜抽酱油，浅灰色柱形图为金狮黄豆酱油。

结果表明，上述2种嗅觉受体均可检测到酱油中的4-乙基愈创木酚；2种嗅觉受体都可检测到高盐稀态酱油中的4-乙基愈创木酚的含量要高于低盐稀态酱油，呈现出一致的趋势。因此，进一步证明采用上述2种嗅觉受体可对酱油的加工工艺进行判断。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。