一种具有防治肺损伤功效的药物组合物及其制备方法和其应用

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种具有防治肺损伤功效的药物组合物及其制备方法和其应用。

背景技术

肺损伤包括胸部外伤、肺部吸入有害物、肺部感染等因素所导致的肺组织损伤，进而损害肺脏结构完整性及肺功能等病症。大气污染物易被吸入肺深部而引发呼吸道损伤，诱发或加重多种疾病，引起机体炎症反应、氧化应激、免疫功能失调等。肺损伤与组织细胞氧化性损伤密切相关，临床常用抗炎药、抗氧化剂、调节免疫功能类药物加以防治。已有研究证实，葡萄籽提取物具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、保护心血管等作用。但现有产品防治肺损伤效果有待提升，且起效较慢。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有防治肺损伤功效的药物组合物，组合物中葡萄粉的含量为1-25％(w/w)、葡萄籽提取物的含量为0.5-15％(w/w)、精氨酸的含量为0.5-10％(w/w)、维生素C的含量为0.5-10％(w/w)和药学上可接受的载体。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄粉的含量为5-20％，优选为10-15％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述葡萄粉中白藜芦醇的含量为1-10％(w/w)，优选为5-8％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄籽提取物的含量为1-10％(w/w)，优选为2-5％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述葡萄籽提取物中的原青花素含量为90-100％(w/w)，优选为95-98％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述原花青素为低聚原花青素。

本发明的优选技术方案中，所述低聚原花青素的平均聚合度为2-6，优选为3-4。

本发明的优选技术方案中，组合物中精氨酸的含量为1-5％，优选为2-4％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述精氨酸为L-精氨酸。

本发明的优选技术方案中，组合物中维生素C的含量为1-5％，优选为2-4％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述药学上可接受的载体选自填充剂、矫味剂中的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，组合物中填充剂的含量为55-90％(w/w)，优选为65-85％(w/w)，更优选为70-80％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述填充剂选自麦芽糊精、淀粉、乳糖、羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉、纤维素、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙、山梨醇、甘氨酸的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，组合物中矫味剂的含量为0.5-5％(w/w)，优选为0.8-4％(w/w)，还优选为1-2％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述矫味剂选自三氯蔗糖、葡萄香精、赤藓糖醇、葡萄香精、木糖醇、蜂蜜、蔗糖、葡萄糖、罗汉果甜苷、苹果酸、富马酸、柠檬酸、磷酸、乙基麦芽酚、柠檬酸钠、苹果酸钠、醋酸、醋酸钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、碳酸、碳酸钠、磺酸、磺酸钠、谷氨酸、酒石酸、酒石酸钠、乳酸、乳酸钠、富马酸、富马酸钠、衣康酸、抗坏血酸、抗坏血酸钠、烟酸、烟酸钠、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸、果酸钠、乙酸、草酸、琥珀酸、二氧化碳、枸橼酸、枸橼酸钠中的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄粉的含量为1-25％(w/w)、葡萄籽提取物的含量为0.5-15％(w/w)、麦芽糊精的含量为55-90％(w/w)、L-精氨酸的含量为0.5-10％(w/w)、维生素C的含量为0.5-10％、矫味剂的含量为0.5-5％(w/w)，其中，所述矫味剂选自柠檬酸、乙基麦芽酚、葡萄香精、三氯蔗糖中的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄粉的含量为10-20％(w/w)、葡萄籽提取物的含量为1-10％(w/w)、麦芽糊精的含量为65-85％(w/w)、L-精氨酸的含量为1-5％(w/w)、维生素C的含量为1-5％和矫味剂的含量为1-3％(w/w)，其中，所述矫味剂选自柠檬酸、乙基麦芽酚、葡萄香精、三氯蔗糖中的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄粉的含量为12-15％(w/w)、葡萄籽提取物的含量为2-5％(w/w)、麦芽糊精的含量为70-80％(w/w)、L-精氨酸的含量为2-4％(w/w)、维生素C的含量为2-4％和矫味剂的含量为1-2％(w/w)，其中，所述矫味剂选自柠檬酸、乙基麦芽酚、葡萄香精、三氯蔗糖中的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述组合物的制剂形式选自粉剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、滴丸、合剂、露剂、泡腾剂、糊剂、乳剂、茶剂的任一种。

本发明的另一目的在于提供一种具有防治肺损伤功效的药物组合物的制备方法，将所需量的葡萄粉、葡萄籽提取物、精氨酸、维生素C和药学上可接受的载体，均匀混合，即得。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄粉的含量为1-25％(w/w)、葡萄籽提取物的含量为0.5-15％(w/w)、精氨酸的含量为0.5-10％(w/w)、维生素C的含量为0.5-10％(w/w)和药学上可接受的载体。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄粉的含量为5-20％，优选为10-15％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述葡萄粉中白藜芦醇的含量为1-10％(w/w)，优选为5-8％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄籽提取物的含量为1-10％(w/w)，优选为2-5％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述葡萄籽提取物中的原青花素含量为90-100％(w/w)，优选为95-98％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述原花青素为低聚原花青素。

本发明的优选技术方案中，所述低聚原花青素的平均聚合度为2-6，优选为3-4。

本发明的优选技术方案中，组合物中精氨酸的含量为1-5％，优选为2-4％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述精氨酸为L-精氨酸。

本发明的优选技术方案中，组合物中维生素C的含量为1-5％，优选为2-4％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述药学上可接受的载体选自填充剂、矫味剂、润滑剂中的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，组合物中填充剂的含量为55-90％(w/w)，优选为60-85％(w/w)，更优选为70-80％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述填充剂选自麦芽糊精、淀粉、乳糖、羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉、纤维素、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙、山梨醇、甘氨酸的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，组合物中矫味剂的含量为0.5-5％(w/w)，优选为1-4％(w/w)，更优选为1-2％(w/w)。

本发明的优选技术方案中，所述矫味剂选自三氯蔗糖、葡萄香精、赤藓糖醇、木糖醇、蜂蜜、蔗糖、葡萄糖、罗汉果甜苷、苹果酸、富马酸、柠檬酸、磷酸、乙基麦芽酚、柠檬酸钠、苹果酸钠、醋酸、醋酸钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、碳酸、碳酸钠、磺酸、磺酸钠、谷氨酸、酒石酸、酒石酸钠、乳酸、乳酸钠、富马酸、富马酸钠、衣康酸、抗坏血酸、抗坏血酸钠、烟酸、烟酸钠、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸、果酸钠、乙酸、草酸、琥珀酸、二氧化碳、枸橼酸、枸橼酸钠中的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄粉的含量为1-25％(w/w)、葡萄籽提取物的含量为0.5-15％(w/w)、麦芽糊精的含量为55-90％(w/w)、L-精氨酸的含量为0.5-10％(w/w)、维生素C的含量为0.5-10％、矫味剂的含量为0.5-5％(w/w)，其中，所述矫味剂选自柠檬酸、乙基麦芽酚、葡萄香精、三氯蔗糖中的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄粉的含量为10-20％(w/w)、葡萄籽提取物的含量为1-10％(w/w)、麦芽糊精的含量为65-85％(w/w)、L-精氨酸的含量为1-5％(w/w)、维生素C的含量为1-5％和矫味剂的含量为1-3％(w/w)，其中，所述矫味剂选自柠檬酸、葡萄香精、乙基麦芽酚、三氯蔗糖中的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，组合物中葡萄粉的含量为12-15％(w/w)、葡萄籽提取物的含量为2-5％(w/w)、麦芽糊精的含量为70-80％(w/w)、L-精氨酸的含量为2-4％(w/w)、维生素C的含量为2-4％和矫味剂的含量为1-2％(w/w)，其中，所述矫味剂选自柠檬酸、乙基麦芽酚、葡萄香精、三氯蔗糖中的任一种或其组合。

本发明的另一目的在于提供药物组合物在制备防治肺损伤的制品中的应用。

本发明的优选技术方案中，所述肺损伤选自急性肺损伤、吸入性肺损伤、烟雾引起的肺损伤、PM2.5引起的肺损伤、氧化损伤、缺血性肺损伤中的任一种或其并发症。

本发明的另一目的在于提供药物组合物在制备防治缺氧所致损伤的制品中的应用。

本发明的优选技术方案中，本发明组合物的用量与患者的年龄、性别、健康状况、治疗现状、合并用药等因素相关，推荐用量为5g/次，1-3次/日。

本发明所用的葡萄粉、葡萄籽提取物采用本领域的提取方法制备得到。

除非另有说明，本发明涉及液体与液体之间的百分比时，所述的百分比为体积/体积百分比；本发明涉及液体与固体之间的百分比时，所述百分比为体积/重量百分比；本发明涉及固体与液体之间的百分比时，所述百分比为重量/体积百分比；其余为重量/重量百分比。

与现有技术相比，本发明有益的技术效果包括：

1.本发明的药物组合物科学筛选葡萄粉、葡萄籽提取物、L-精氨酸和维生素C的配比，具有优异的抗氧化效果，且抗氧化作用起效快且持久，利于防治肺损伤及缺氧所致损伤等病症。

2.本发明的药物组合物显著提高了机体抗氧化损伤能力，例如机体肝组织SOD活力和肝组织GSH含量，显著降低了机体肝脏中的MDA和蛋白羰基含量，具有优异的防治肺损伤、氧化损伤、抑制肺纤维化、调控脂代谢等作用，显著降低肺损伤、缺氧损伤及其对肺功能的不利影响，显著降低PM2.5所致肺组织病理学改变和肺部炎症反应，对因PM2.5导致的呼吸功能具有改善作用。

3.本发明组合物的制备方法操作简便，适用于工业化生产。

附图说明

图1各组小鼠体重变化对比；

图2各组小鼠MDA值对比；

图3各组小鼠SOD值对比；

图4各组小鼠GSH值对比；

图5各组大鼠体重变化；

图6各组大鼠细胞数；

图7各组大鼠关键mRNA及PM2.5所致机体炎症反应应答。

具体实施方式

以下参照实施例说明本发明。但本发明不局限于实施例。

具体实施方式中所用的葡萄粉、葡萄籽提取物均为商购，其中，葡萄粉中的白藜芦醇含量为5％，葡萄籽提取物中的原青花素含量为95％。

实施例1本发明组合物的制备

称取麦芽糊精65g，葡萄粉20g、葡萄籽提取物5g，L-精氨酸5g，维生素C 5g，均匀混合后，即得。

实施例2本发明组合物的制备

称取麦芽糊精65g，葡萄粉15g、葡萄籽提取物10g，L-精氨酸5g，维生素C 5g，均匀混合后，即得。

实施例3本发明组合物的制备

称取玉米淀粉65g，葡萄粉20g、葡萄籽提取物10g，L-精氨酸2g，维生素C 3g，均匀混合后，即得。

实施例4本发明组合物的制备

称取玉米淀粉75g，葡萄粉10g、葡萄籽提取物5g，L-精氨酸5g，维生素C 5g，均匀混合后，即得。

实施例5本发明组合物的制备

称取麦芽糊精75g，葡萄粉15g、葡萄籽提取物1g，L-精氨酸5g，维生素E 4g，均匀混合后，即得。

实施例6本发明组合物的制备

称取麦芽糊精75g，葡萄粉10g、葡萄籽提取物10g，L-精氨酸2g，维生素E 3g，均匀混合后，即得。

实施例7本发明组合物的制备

称取抗性糊精75g，葡萄粉5g、葡萄籽提取物10g，L-精氨酸5g，维生素C 5g，均匀混合后，即得。

实施例8本发明组合物的制备

称取抗性糊精85g，葡萄粉5g、葡萄籽提取物5g，L-精氨酸2g，维生素C 3g，均匀混合后，即得。

实施例9本发明组合物的制备

称取麦芽糊精85g，葡萄粉10g、葡萄籽提取物1g，L-精氨酸2g，维生素C 2g，均匀混合后，即得。

实施例10本发明组合物的制备

称取麦芽糊精65g，葡萄粉12g、葡萄籽提取物10g，L-精氨酸5g，维生素C 5g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖1g，均匀混合后，即得。

实施例11本发明组合物的制备

称取麦芽糊精75g，葡萄粉10g、葡萄籽提取物10g，L-精氨酸1g，维生素C 1g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖1g，均匀混合后，即得。

实施例12本发明组合物的制备

称取麦芽糊精75g，葡萄粉15g、葡萄籽提取物5g，L-精氨酸1g，维生素C 1g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖1g，均匀混合后，即得。

实施例13本发明组合物的制备

称取麦芽糊精85g，葡萄粉10g、葡萄籽提取物1g，L-精氨酸1g，维生素C 1g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚0.5g、三氯蔗糖0.5g，均匀混合后，即得。

实施例14本发明组合物的制备

称取麦芽糊精85g，葡萄粉10g、葡萄籽提取物1g，L-精氨酸1g，维生素C 1g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚0.5g、三氯蔗糖0.5g，均匀混合后，即得。

实施例15本发明组合物的制备

称取麦芽糊精77g，葡萄粉14g、葡萄籽提取物5g，L-精氨酸2g，维生素C 2g，均匀混合后，即得。

实施例16本发明组合物的制备

称取麦芽糊精92g，原青花素3g、白藜芦醇1g、精氨酸2g，维生素C 2g，均匀混合后，即得。

实施例17本发明组合物的制备

称取麦芽糊精80g，原青花素5g、白藜芦醇5g、精氨酸5g，维生素C 5g，均匀混合后，即得。

实施例18本发明组合物的制备

称取麦芽糊精80g，原青花素5g、白藜芦醇5g、精氨酸5g，维生素C 5g，均匀混合后，即得。

实施例19本发明组合物的制备

称取麦芽糊精86g，原青花素3g、白藜芦醇1g、精氨酸5g，维生素C 5g，均匀混合后，即得。

实施例20本发明组合物的制备

称取麦芽糊精90.5g，原青花素3g、白藜芦醇0.68g、精氨酸2g，维生素C 2g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚0.32g、三氯蔗糖0.5g，均匀混合后，即得。

实施例21本发明组合物的制备

称取麦芽糊精81g，原青花素5g、白藜芦醇1g、精氨酸5g，维生素C 5g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖1g，均匀混合后，即得。

实施例22本发明组合物的制备

称取葡萄粉1g、葡萄籽提取物15g，L-精氨酸10g，维生素C 10g，麦芽糊精60g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖2g，均匀混合后，即得。

实施例23本发明组合物的制备

称取葡萄粉25g、葡萄籽提取物0.5g，L-精氨酸0.5g，维生素C 0.5g，麦芽糊精70g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖1.5g，均匀混合后，即得。

实施例24本发明组合物的制备

称取葡萄粉15g、葡萄籽提取物10g，L-精氨酸3g，维生素C 3g，麦芽糊精65g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖2g，均匀混合后，装入胶囊，即得。

实施例25本发明组合物的制备

称取葡萄粉10g、葡萄籽提取物10g，L-精氨酸1g，维生素C 1g，麦芽糊精75g，柠檬酸1g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖1g，均匀混合后，即得。

实施例26本发明组合物的制备

称取葡萄粉20g、葡萄籽提取物10g，L-精氨酸1g，维生素C 1g，麦芽糊精75g，柠檬酸0.5g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖0.5g，均匀混合后，即得。

实施例27本发明组合物的制备

称取葡萄粉14g、葡萄籽提取物5g，L-精氨酸2g，维生素C 2g，麦芽糊精75g，柠檬酸0.5g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖0.5g，均匀混合后，即得。

实施例28本发明组合物的制备

称取葡萄粉12g、葡萄籽提取物8g，L-精氨酸4g，维生素C 4g，麦芽糊精70g，柠檬酸0.5g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖0.5g，均匀混合后，即得。

实施例29本发明组合物的制备

称取葡萄粉15g、葡萄籽提取物5g，L-精氨酸2g，维生素C 2g，麦芽糊精74g，柠檬酸0.5g、乙基麦芽酚1g、三氯蔗糖0.5g，均匀混合后，即得。

实施例30本发明组合物的制备

称取葡萄粉13g、葡萄籽提取物6g，L-精氨酸3g，维生素C 3g，麦芽糊精73.5g，柠檬酸0.5g、乙基麦芽酚0.5g、三氯蔗糖0.5g，均匀混合后，即得。

1材料和方法

选用北京维通利华实验动物技术有限公司提供的SPF级雄性ICR小鼠75只,体重25-28g。适应期结束，按体重随机分成5组，每组15只。动物饲养管理条件：小鼠喂以维持饲料，食水自由摄入，动物房温度20-26℃，湿度为40％-70％。

多功能酶标仪、离心机、匀浆器、电子天平(感量O.Olg)、电子天平(感量O.OOlg)、紫外分光光度计。丙二醛(MDA)测定试剂盒(南京建成)、还原型谷胱甘肽(GSH)测定试剂盒(南京建成)，总蛋白(TP)测定试剂盒(南京建成),SOD试剂盒(南京建成),无水乙醇(分析纯，西陇科学)。

称取500g药物组合物，用去离子水配制。试验动物按照低剂量组【给药剂量为0.4g/kg(体重)】、中剂量组【1.2g/kg(体重)】、高剂量组【给药剂量为4.0g/kg(体重)】三个剂量组、空白对照组和模型对照组(灌胃去离子水)及20mL/kg(体重)灌胃给药，每日1次，连续灌胃30d。其中，模型对照组灌胃去离子水。药物组合物的制备方法为：称取葡萄粉14份、葡萄籽提取物5份，L-精氨酸2份，维生素C 2份，均匀混合后，即得。

末次灌胃后，模型组对照组和三个剂量组禁食16h(过夜)，再一次性灌胃给予50％乙醇12ml/kg(体重),6h后处死取肝(空白对照组不作处理，不禁食取材),测定MDA含量、GSH含量和SOD活力、体重变化(终体重-初始体重)。

试验数据以EXCEL软件建立数据库，釆用SPSS软件进行统计分析。

2结果

2.1动物体重的影响

由图1可见，灌胃给予小鼠不同剂量的药物组合物30d，与模型对照组相比，各剂量组小鼠的体重变化(P>0.05)。

2.2小鼠肝脏MDA含量的影响

由图2可见，灌胃给予小鼠不同剂量的药物组合物30d，与空白对照组比较，模型对照组肝脏MDA含量升高(P<0.01)。与模型对照组相比，各剂量组肝脏MDA含量降低(P<0.01)。

2.3对小鼠肝脏SOD活力的影响

由图3可见，灌胃给予小鼠不同剂量的药物组合物30d，与空白对照组比较，模型对照组肝脏SOD活力降低(P<0.05)。与模型对照组比较，各剂量组肝组织SOD活力均升髙(P<0.01。

2.4小鼠肝脏GSH含量的影响

由图4可见，灌胃给予小鼠不同剂量的药物组合物30d，与空白对照组比较，模型对照组肝脏GSH降低(P<0.05)。与模型对照组比较，各剂量组肝组织GSH含量升高(P<0.01)。

采用HOPE-MED 8052粉尘类口鼻动式染毒设备模拟大气污染环境，构建细颗粒物慢性染毒大鼠模型。

SPF级SD大鼠(180～200g)48只，购自北京维通利华生物。口鼻部暴露于染毒舱内，染毒仓设有一个进气系统和排气系统。将适量细颗粒物放入设备药粉盒中，通过进气系统雾化至整个染毒舱，通过采样系统计算细颗粒物浓度及染毒剂量，并测定染毒状态下可吸入颗粒物的粒径分布。

染毒同时进行药物干预，每天给药1次，给药剂量为0.2g/kg，给予连续染毒与给药至4周、8周。染毒期结束前一日禁食，戊巴比妥钠(40mg/kg,i.p.)麻醉，放血处死动物，收集大鼠血液、肺泡灌洗液和肺组织。

设置对照组、PM2.5干预组、PM2.5+葡萄粉组、PM2.5+药物组合物组。药物组合物的制备方法为：称取葡萄粉14份、葡萄籽提取物5份，L-精氨酸2份，维生素C 2份，均匀混合后，即得。

本发明组合物对PM2.5所致大鼠整体毒性的保护作用研究，连续8周测定大鼠体重至观察期结束，各组体重变化结果见图5。

本发明组合物对减轻PM2.5所致肺部炎症的影响研究，测定大鼠、淋巴细胞(LYM)、单核细胞(MON)、中性粒细胞(NEUT)、嗜酸性粒细胞(EOS)和嗜碱性粒细胞(BAS)数，结果见图6。

本发明组合物调节PM2.5所致的炎症相关基因表达改变研究，测定肺组织炎症反应中的关键mRNA及PM2.5所致机体炎症反应应答，结果见图7。

以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明权利要求保护的范围。