Remdesivir二聚体及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于药物合成技术领域，具体涉及Remdesivir二聚体及其制备方法和应用。

背景技术

Remdesivir是一种核苷类抗病毒药物，为核苷类RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)竞争性抑制剂，其三磷酸核苷酸产物Remdesivir-TP可以与RdRp竞争底物ATP，因此可以干扰病毒vRNA合成。Remdesivir对于多种冠状病毒感染有效，包括非典型肺炎冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合症相关冠状病毒(MERS-CoV)，在世界多个国家用于治疗新型冠状病毒肺炎(covid-19)的临床实验。但其疗效和安全性并没有完全证实，因此，合成Remdesivir的类似物，对其毒副性进行研究是及其重要的事情，对病毒药物的开发以及Remdesivir的临床应用有着重要的参考意义。但目前，Remdesivir类似物的合成较少，且存在合成方法复杂，后处理工序繁琐，产率低等问题。

因此，亟需提供Remdesivir类似物，以及简单易行的制备方法。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出Remdesivir二聚体，能够有助于病毒药物的开发，且其制备方法简单，不需要复杂的后处理工序。

Remdesivir二聚体，结构式如式(Ⅰ)所示，

本发明还提供所述Remdesivir二聚体的制备方法，

具体的，所述Remdesivir二聚体的制备方法，包括以下步骤：

(1)将化合物1、二异氰酸酯和吸附材料溶解于第一反应溶剂中，搅拌反应，生成中间体2；所述化合物1的结构如式(Ⅱ)所示，所述中间体2的结构如式(Ⅲ)所示；

(2)将所述中间体2溶于第二反应溶剂中，加入酸，反应，制得所述Remdesivir二聚体。

优选的，在步骤(1)中，所述吸附材料为分子筛、硅胶或活性炭中的至少一种。

进一步优选的，所述吸附材料为4A分子筛。4A分子筛能够干燥溶剂里面微量的水分，且为反应提供合适的孔隙，对反应起促进作用。

优选的，在步骤(1)中，所述二异氰酸酯为含亚甲基结构的二异腈酸酯；进一步优选的，步骤(1)中所述二异氰酸酯选自六亚甲基二异腈酸酯、五亚甲基二异腈酸酯、四亚甲基二异腈酸酯、三亚甲基二异腈酸酯、八亚甲基二异腈酸酯、十亚甲基二异腈酸酯中的一种。

优选的，在步骤(1)中，所述第一反应溶剂为有机溶剂；进一优选的，所述有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二甲亚砜或乙腈中的至少一种。

优选的，在步骤(1)中，所述搅拌反应的温度为20-50℃，所述搅拌反应的时间为5-20h；进一步优选的，在步骤(1)中，所述搅拌反应的温度为20-40℃，所述搅拌反应的时间为8-15h。

优选的，在步骤(2)中，所述第二反应溶剂选自甲醇、乙醇、N,N-二甲基甲酰胺或N,N-二甲基乙酰胺中的至少一种。

优选的，在步骤(2)中，所述酸选自盐酸、甲酸、醋酸或三氟乙酸中的至少一种。

优选的，在步骤(2)中，所述反应的温度为20-70℃，所述反应的时间为5-20h；进一步优选的，在步骤(2)中，所述反应的温度为20-60℃，所述反应的时间为8-15h。

一种药物，包括所述Remdesivir二聚体。

优选的，所述药物还包括药学上可接受的载体或辅料；优选为包括稀释剂、吸收剂、湿润剂崩解剂、润滑剂、崩解抑制剂和粘合剂中的至少一种；进一步优选为包括淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝、水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮、干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯、山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素、蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油、滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇中的至少一种。

优选的，所述药物的剂型选自口服剂型；进一步优选的，所述口服剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂中的至少一种。

优选的，所述药物中还包含其他治疗成分。

Remdesivir结构中有多个活性反应位点，如胺基、羟基和磷酸酯键等，因此要得到本发明提供的二聚体，需要控制Remdesivir结构中的多个反应位点的活性，无形中增加了反应的步骤，以及后处理纯化的过程。在条件筛选过程中也发现，如果用反应活性高的试剂，比如双酰氯试剂，不能够得到二聚体，而是得到双酰氯跟碱基环外胺上的氮反应生成产物二酰亚胺。而本发明通过对反应物的选择，以及对反应条件的控制，能够在极短的反应路线中制得该Remdesivir二聚体。且反应条件温和，不需要复杂的后处理，产率高。

相对于现有技术，本发明的有益效果如下：

本发明提供的Remdesivir二聚体，其制备路线短，反应条件温和，后处理简单，产率可以达到75％，能够有助于病毒药物的开发以及Remdesivir的临床应用的研究，也是一种潜在的药物。

附图说明

图1为实施例1制备Remdesivir二聚体的工艺流程图。

具体实施方式

为了让本领域技术人员更加清楚明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例对本发明要求的保护范围不构成限制作用。

以下实施例中所有有机试剂均购自上海的九鼎化学。质谱试验的条件为：运行XWINNMR软件包的Bruker Ascend 600 NMR光谱仪(

其他原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。

实施例1

Remdesivir二聚体，结构式如式(Ⅰ)所示，

Remdesivir二聚体的制备方法，包括以下步骤(其工艺流程图见图1)：

(1)将化合物1(15.5mg，0.024mmol，结构式如式(Ⅱ)所示)溶于无水DCM(1mL)中，加入六亚甲基二异腈酸酯(1.0uL，0.006mmol)和4A分子筛(4A MS)，混合物在25℃下搅拌过夜(12h)，过滤，旋干，柱层析分离混合物得到中间体2(6.3mg，产率为72％，结构式如式(Ⅲ)所示)，中间体2为白色粉末。

中间体2的核磁表征结果以及质谱如下：

(2)将中间体2(12.9mg，0.009mmol)溶于MeOH(1mL)中，加入100μL浓HCl，混合物在室温(25℃)搅拌过夜(12h)，过滤，旋干，柱层析分离混合物得到Remdesivir二聚体(9.1mg，75％)，白色粉末。

Remdesivir二聚体的核磁表征结果以及质谱如下：

产品效果测试

评价实施例1制得的Remdesivir二聚体的药物毒性。

(1)实验材料

Vero E6(非洲绿猴肾细胞)细胞购自美国ATCC。

(2)Remdesivir二聚体对细胞的毒性实验

将Remdesivir及实施例1制得的Remdesivir二聚体用DMSO(二甲基亚砜)溶解，超声过滤后，加入DMEM培养液稀释至5mg/mL，经0.22μm滤膜过滤后置4℃保存，96孔板单层Vero E6细胞弃去培养液，加入不同稀释度的药物100μL/孔，正常细胞对照孔加入等体积DMEM培养液，于37℃、5％CO

表1 Remdesivir二聚体对Vero E6细胞致CPE的抑制作用