一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法

技术领域

本发明涉及食用菌栽培领域，特别涉及一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法。

背景技术

冬荪鬼笔（

发明内容

本发明的目的在于筛选及优化二级种与三级种菌棒的碳源、氮源、无机盐等，为冬荪鬼笔种植技术提供一种液体菌种配方与一种优质菌棒配方，宗旨在于生产优质高产的冬荪鬼笔菌棒，提高冬荪鬼笔发菌效率，缩短发菌时间。

本发明的技术方案是：一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，包括以下步骤：

（1）二级种液体菌种培养基的制备：按质量比称取25% 蔗糖，1% 黄豆粉，1.5% 磷酸二氢钾，1.5% 七水硫酸镁，1% 硫酸铵，VB1 50mg，用蒸馏水混合定溶至1000mL，液体培养基；

（2）二级种液体菌种灭菌与接种：121 ℃ 高温灭菌大于30 min，冷却至20-30℃后，接入冬荪鬼笔菌母种；

（3）二级种液体菌培养：冬荪鬼笔菌种接种后在20 ℃，110r/min的恒温摇床中暗培养8d得到菌球大小均匀、培养基清澈的二级液体菌种；

（4）三级种固体菌棒培养基制备：按重量比称取原料制作三级菌种培养基：70% 主料（构树木屑）、10 % 辅料（黄豆茎秆碎屑）、3 % 玉米芯碎屑，2 % 硫酸镁，2 %磷酸二氢钾，1 % 碳酸钙，1% 白糖，1 % VB1；

（5）三级种固体菌棒灭菌与接种：将步骤（4）中得到的培养基在121℃、101kpa环境下进行3小时高温高压灭菌；待菌袋冷却至30℃ 以下；在超净工作台上打开菌袋透气盖，将步骤（3）中获得的二级种液体菌种用5 mL无菌注射器接种5 mL到菌袋中间部位，盖好透气盖；

（6）三级种固体菌棒培养：将步骤（5）接菌完成后的菌袋避光通风培养，待菌丝发满菌后，得到可移入林下覆土栽培的菌棒。

上述步骤（1）中所述二级种液体菌种培养基浓度为30.05g/L。

上述步骤（1）中所述二级种液体菌种培养基pH 6.0。

上述步骤（2）中，121 ℃ 高温灭菌30 min，冷却至25℃后，接入冬荪鬼笔母种。

上述步骤（4）中，按重量比称取三级菌种培养基的原料后进行均匀搅拌，配制成湿度55%-65%，pH 6.0，之后装入规格15*18*0.005cm的聚丙烯菌袋中，盖好透气盖。

上述步骤（5）中：将步骤（4）中得到的培养基在121℃、101kpa环境下进行3小时高温高压灭菌；待菌袋冷却至20-30℃；打开菌袋透气盖，将步骤（3）中获得的二级液体菌种接种5 mL到菌袋中间部位。

上述步骤（6）是将步骤（5）接菌完成后的菌袋于室温 18-25 ℃，湿度保持在40%-60%避光通风培养。

采用上述技术工艺，本发明与现有技术相比具有的优点：冬荪鬼笔二级种液体菌种培养时间短、纯度高、发菌齐、菌丝强壮更有利于三级种的接种，种植出的菇质优且产量高。由此方法制成的三级种菌棒不需要堆料发酵，可节约时间，减少人工成本，经过筛选优化碳源、氮源、无机盐等有助于冬荪鬼笔产量与品质的提高。

说明书附图

图1为本发明的冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法示意图。图中：a:木屑, b-d:装袋, e:灭菌, f:冷却, g:接液体菌种, h:培养, i:菌棒成品。

具体实施方式

一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法包括以下步骤：

（1）二级种液体菌种培养基的制备：按质量比称取25% 蔗糖，1% 黄豆粉，1.5% 磷酸二氢钾，1.5% 七水硫酸镁，1% 硫酸铵，VB

（2）二级种液体菌种灭菌与接种：121 ℃ 高温灭菌30 min，冷却至25℃后，接入冬荪鬼笔母种。

（3）二级种液体菌种培养：冬荪鬼笔菌种接种后在20 ℃，110r/min的恒温摇床中暗培养8d得到菌球大小均匀、培养基清澈的二级液体菌种。液体菌种培养时间仅需要8d，而固体菌种培养的时间至少两个月才能长满菌袋，液体菌种培养污染率低、纯度高、发菌齐、菌丝强壮更便于三级种的接种，二级种液体种在接种过程直接注射到三级种中，污染率小；而二级种固体菌种还需要把菌棒掰成小碎块，再放入三级种中，操作过程复杂时间长，污染率大。

（4）三级种固体菌棒培养基制备：按重量比称取三级菌种培养基：70%主料（构树）、10 % 辅料（黄豆茎秆碎屑）、3 % 玉米芯碎屑，2 % 硫酸镁，2 %磷酸二氢钾，1 % 碳酸钙，1%白糖，1 % VB

（5）三级种固体菌棒灭菌与接种：将步骤（4）中得到的培养基在121℃、101kpa环境下进行3小时高温高压灭菌。待菌袋冷却至30℃以下。打开菌袋透气盖，将步骤（3）中获得的二级液体菌种用5 mL无菌注射器接种5 mL到菌袋中间部位，盖好透气盖。

（6）三级种固体菌棒培养：将步骤（5）接菌完成后于室温 18-25 ℃，湿度保持在40%-60% 避光通风培养，待菌丝发满菌后，得到可移入林下覆土栽培的菌棒。

（7）菌棒成品的营养成分测定结果显示，其蛋白质含量为4.17 g/100g；含有20种氨基酸，其中含量最高的是谷氨酰胺，达3.36 g/100g，含量最低的为蛋氨酸0.01 g/100g；水份为66.20 g/100g；灰分为2.40 g/100g；重金属含量中铅（Pb）为0.477 mg/kg、砷（As）为0.105 mg/kg、镉（Cd）为0.186 mg/kg、汞（Hg）为0.00282 mg/kg；微量元素中，铁（Fe）的含量最高达137.00 mg/kg，最低的是钴（Co）仅0.084 mg/kg。

以上所述仅为本发明的技术特点,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。