一种布舍瑞林注射液及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及布舍瑞林注射液的技术领域，特别涉及一种布舍瑞林注射液及其制备方法和应用。

背景技术

布舍瑞林(Buserelin)是根据促性腺激素释放激素(GnRH)改造的多肽类药物，可促使黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和性激素的分泌增加，其促进LH和FSH释放的作用效力分别为天然促性腺激素释放激素的18至322倍。布舍瑞林在母猪中使用可以作为单次固定人工授精程序的一部分来诱导同步排卵。

申请号为202011636863的专利，公开了一种无菌布舍瑞林注射液及其制备方法和应用。该专利的处方为布舍瑞林、脱氢乙酸、葡聚糖、蛋白胨、醋酸、叶酸、兽医学上可接受的锌离子、柠檬酸盐、丹参和pH调节剂，于2-8℃条件下保存效果最佳，可以看出该处方极其复杂，本身多肽化合物不稳定，复杂的处方增加其不稳定的因素，也导致该专利的制剂只适宜在2-8℃条件下保存，保存条件比较苛刻。

国外上市的由Intervet UK Ltd研发的产品Porceptal(布舍瑞林注射液)说明书中的保存条件为“储存在冰箱中(2℃-8℃)”，同样可以看出，布舍瑞林注射液不稳定，不适宜常温保存，这无疑增加了运输、储存、使用过程中的不方便性。

布舍瑞林注射液的浓度仅为4ug/mL，临床应用中每只猪每次只使用10ug。国外产品Porceptal说明书中强调，“不按推荐方案使用本产品可能会导致卵泡囊肿的形成，并可能影响生育能力和繁殖能力”。给药剂量的精准对于此产品非常重要，而制剂的稳定性直接影响其含量，进而影响给药剂量。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明提供了布舍瑞林注射液及其制备方法和应用。本发明在布舍瑞林注射液中引入了新的稳定体系，在长期储存条件下(温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％)放置24个月，依然可以满足质量标准的要求，稳定性良好，解决现有技术无法在常温保存的问题，便于产品的运输，降低使用过程中储存的成本，更利于应用过程中给药剂量的精准。

本发明提供了一种布舍瑞林注射液，包括布舍瑞林、缓冲盐、稳定剂、止痛剂，所述缓冲盐包括磷酸二氢钠、所述稳定剂包括氯化钠、所述止痛剂包括苯甲醇，所述磷酸二氢钠、所述氯化钠和所述苯甲醇共同构成了所述布舍瑞林注射液的溶液稳定体系。本发明所述的溶液稳定体系是指作为缓冲盐的磷酸二氢钠、作为稳定剂的氯化钠和作为止痛剂的苯甲醇，三者同时添加的情况下，布舍瑞林注射液的稳定性明显高于仅添加其中一种或两种或不添加时的稳定性，所述稳定性是指布舍瑞林注射液在存储、运输过程中其布舍瑞林含量的保持。

优选的是，所述溶液稳定体系由磷酸二氢钠1-5g/L，氯化钠3-9g/L，苯甲醇10-30g/L组成，即所述布舍瑞林注射液包含磷酸二氢钠1-5g/L，氯化钠3-9g/L，苯甲醇10-30g/L组成。

上述任一项优选的是，所述布舍瑞林注射液中磷酸二氢钠、氯化钠、苯甲醇的质量比为1:(1-3)：(4-10)，进一步优选为1：1：4，1：1：6，1：1：8，1：1：10，1：2：4，1：2：6，1：2：8，1：2：10，1：3：4，1：3：6，1：3：8，1：3：10。

优选的是，所述布舍瑞林的含量为4mg/L，所述缓冲盐的含量为1-5g/L，所述稳定剂的含量为3-9g/L，所述止痛剂的含量为10-30g/L。进一步优选的，所述缓冲盐的含量为1、2、3、4、5g/L，所述稳定剂的含量为3、4、5、6、7、8、9g/L，所述止痛剂的含量为10、15、20、25、30g/L。

上述任一项优选的是，所述缓冲盐还包括磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾中的至少一种。

上述任一项优选的是，所述稳定剂还包括氯化钾。

上述任一项优选的是，所述布舍瑞林注射液包括布舍瑞林4mg，磷酸二氢钠1-5g，氯化钠3-9g，苯甲醇10-30g，无菌注射用水定容至1L。进一步优选为，磷酸二氢钠1、2、3、4、5g；进一步优选为，氯化钠3、4、5、6、7、8、9g；进一步优选为，苯甲醇10、15、20、25、30g。

上述任一项优选的是，所述布舍瑞林注射液pH为4.5-6.5。进一步优选为，pH4.5、5.0、5.5、6.0、6.5。

本发明还提供了上述任一项所述的布舍瑞林注射液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

取磷酸二氢钠、氯化钠、苯甲醇，依次加入到注射用水中，搅拌至溶解；氢氧化钠溶液/盐酸溶液调节pH值；取布舍瑞林加入到上述溶液中，搅拌至溶解；注射用水补齐至1L。

本发明还提供了上述任一项所述的布舍瑞林注射液用于母猪单次固定人工授精程序中的诱导同步排卵。所述母猪单次固定人工授精程序为现有技术中已公开的技术，本发明获得的布舍瑞林注射液适用于现有技术已公开的所有母猪单次固定人工授精程序。

与现有技术相比，本发明至少存在以下优点：

(1)在本发明中，磷酸二氢钠为缓冲盐，氯化钠为稳定剂，苯甲醇为止痛剂，采用磷酸二氢钠/氯化钠/苯甲醇体系，意外的发现，比起单独用一个成分或两个成分，可以显著地提高布舍瑞林注射液的稳定性。苯甲醇起初是作为注射给药制剂中止痛剂加入的，但是意想不到的是，也起到了稳定剂的作用。

(2)本发明的布舍瑞林注射液在长期储存条件下(温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％)放置24个月依然可以保持稳定，保证临床给药剂量的精准，从而确保使用过程的有效性和安全性。

本发明的布舍瑞林注射液的制备方法工艺简单，各组分原料易得，大大降低了生产时间和生产成本，适于现代化的规模生产。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例与对比例中采用的原料，如果没有特别限定，那么均是现有技术公开的，例如可直接购买获得或者根据现有技术公开的制备方法制得。

实施例1

布舍瑞林注射液包括布舍瑞林4mg，磷酸二氢钠3g，氯化钠6g，苯甲醇20g，无菌注射用水定容至1L。

注射液的制备方法为：

(1)取处方量磷酸二氢钠、氯化钠、苯甲醇，依次加入到注射用水中，搅拌至溶解。(2)用氢氧化钠溶液/盐酸溶液调节“(1)”的pH值至6.0±0.1。(3)取处方量的布舍瑞林加入到“(2)”中，搅拌至溶解。(4)注射用水补齐至1L。(5)检测合格后，过滤除菌，分装，充氮、压塞、轧盖、封口。

实施例2

布舍瑞林注射液包括布舍瑞林4mg，磷酸二氢钠5g，氯化钠9g，苯甲醇20g，无菌注射用水定容至1L。

注射液的制备方法为：

(1)取处方量磷酸二氢钠、氯化钠、苯甲醇，依次加入到注射用水中，搅拌至溶解。(2)用氢氧化钠溶液/盐酸溶液调节“(1)”的pH值至6.0±0.1。(3)取处方量的布舍瑞林加入到“(2)”中，搅拌至溶解。(4)注射用水补齐至1L。(5)检测合格后，过滤除菌，分装，充氮、压塞、轧盖、封口。

实施例3

布舍瑞林注射液包括布舍瑞林4mg，磷酸二氢钠1g，氯化钠3g，苯甲醇10g，无菌注射用水定容至1L。

注射液的制备方法为：

(1)取处方量磷酸二氢钠、氯化钠、苯甲醇，依次加入到注射用水中，搅拌至溶解。(2)用氢氧化钠溶液/盐酸溶液调节“(1)”的pH值至6.0±0.1。(3)取处方量的布舍瑞林加入到“(2)”中，搅拌至溶解。(4)注射用水补齐至1L。(5)检测合格后，过滤除菌，分装，充氮、压塞、轧盖、封口。

实施例4

布舍瑞林注射液包括布舍瑞林4mg，磷酸二氢钠3g，氯化钠9g，苯甲醇20g，无菌注射用水定容至1L。

注射液的制备方法为：

(1)取处方量磷酸二氢钠、氯化钠、苯甲醇，依次加入到注射用水中，搅拌至溶解。(2)用氢氧化钠溶液/盐酸溶液调节“(1)”的pH值至6.0±0.1。(3)取处方量的布舍瑞林加入到“(2)”中，搅拌至溶解。(4)注射用水补齐至1L。(5)检测合格后，过滤除菌，分装，充氮、压塞、轧盖、封口。

实施例5

布舍瑞林注射液包括布舍瑞林4mg，磷酸二氢钠5g，氯化钠6g，苯甲醇20g，无菌注射用水定容至1L。

注射液的制备方法为：

(1)取处方量磷酸二氢钠、氯化钠、苯甲醇，依次加入到注射用水中，搅拌至溶解。(2)用氢氧化钠溶液/盐酸溶液调节“(1)”的pH值至6.0±0.1。(3)取处方量的布舍瑞林加入到“(2)”中，搅拌至溶解。(4)注射用水补齐至1L。(5)检测合格后，过滤除菌，分装，充氮、压塞、轧盖、封口。

对比例1

与实施例1的制备方法基本相同，区别在于pH为7.0±0.1。

对比例2

与实施例1的制备方法基本相同，区别在于没有氯化钠和苯甲醇。

对比例3

与实施例1的制备方法基本相同，区别在于没有磷酸二氢钠和苯甲醇。

对比例4

与实施例1的制备方法基本相同，区别在于没有苯甲醇。

对比例5

与实施例1的制备方法基本相同，区别在于没有氯化钠。

对比例6

与实施例1的制备方法基本相同，区别在于没有磷酸二氢钠。

对比例7

国外的布舍瑞林注射液Porceptal。

将各实施例以及对比例于高温60℃的条件下放置10天，分别于第0、10天取样测定，以性状、含量及pH值作为考察指标，考察各制剂的稳定性。实验结果如下：

表1各实施例与对比例高温60℃的稳定性结果

结果显示，单独使用磷酸二氢钠、氯化钠时，无法起到稳定性的作用，将磷酸二氢钠、氯化钠、苯甲醇2个一组，组合应用时，效果也不是很明显，而当3者联合应用时，起到了意想不到的效果，特别是苯甲醇的加入，对制剂稳定性的提升作用明显。布舍瑞林为多肽类制剂，对高温的稳定性较差，但通过3种辅料的联合应用，达到了在60℃条件下放置10d稳定的效果。

将实施例1与对比例7在光照(照度4500lx±500lx)、高温(温度60℃)条件下放置10天，于第5天和第10天取样，按稳定性考察项目进行检测。在加速条件(温度30℃±2℃、相对湿度65％±5％)下放置6个月，在试验期间分别于第0、1、2、3、6个月取样，对稳定性重点考察项目进行检验。在长期条件(温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％)下放置24个月，在试验期间分别于第0、3、6、9、12、18、24个月取样，对稳定性重点考察项目进行检验。结果如表2-4所示。试验结果如下：

表2实施例1与对比例7在影响因素条件下的稳定性研究

表3实施例1与对比例7在加速条件下的稳定性研究

表4实施例1与对比例7在长期条件下的稳定性研究

从上述实施例的结果可以看出，实施例1无论是影响因素试验、加速试验还是长期条件，含量降低少，产品稳定性良好。而对比例7在影响因素的条件下，尤其是高温条件下，含量降低明显，说明本发明的磷酸二氢钠/氯化钠/苯甲醇体系，对于多肽类布舍瑞林注射液稳定性有明显的作用。苯甲醇在本产品中，除了本身的止痛剂的作用，还在体系内发挥了稳定剂的作用，从而保证临床给药的精准性。

实施例6

实施例1至实施例5得到的布舍瑞林注射液用于母猪单次固定人工授精程序中的诱导同步排卵。

具体的，采用肌内注射。一次量，母猪断奶后83～89h使用所述布舍瑞林注射液2.5ml。给药后30～33h对出现发情表现的母猪进行单次人工输精，未发情的母猪可等出现发情表现时再进行单次人工输精。

实施例7

实施例7与实施例1-5的制备方法相似，不同的是所述磷酸二氢钠、氯化钠、苯甲醇质量比为1：1：4，优选的，所述布舍瑞林注射液由布舍瑞林4mg/L，磷酸二氢钠3g/L，氯化钠3g/L，苯甲醇12g/L及余量的水组成。所得布舍瑞林注射液加速条件下保存6个月以及长期条件下保存24个月后产品为无色澄明液体，pH 6.00的产品中布舍瑞林含量大于99％。

将2.5mL注射液应用于母猪单次固定人工授精程序中(具体方法如实施例6)，能够有效诱导母猪排卵。

实施例8

实施例8与实施例1-5的制备方法相似，不同的是所述磷酸二氢钠、氯化钠、苯甲醇质量比为1：3：10，优选的，所述布舍瑞林注射液由布舍瑞林4mg/L，磷酸二氢钠3g/L，氯化钠9g/L，苯甲醇30g/L及余量的水组成。所得布舍瑞林注射液加速条件下保存6个月以及长期条件下保存24个月后产品为无色澄明液体，pH 6.00的产品中布舍瑞林含量大于99％。

将2.5mL注射液应用于母猪单次固定人工授精程序中(具体方法如实施例6)，能够有效诱导母猪排卵。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。