一种壳聚糖界面修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体及其制备方法

技术领域

本发明涉及食品加工技术中的载体系统技术领域，具体涉及一种壳聚糖界面修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体及其制备方法。

背景技术

鞣花酸(EA)是广泛存在于各种软果、坚果等植物组织中的一种天然多酚组分，是没食子酸的二聚衍生物，呈反式没食子酸单宁结构。它不仅能以游离的形式存在，而且更多的是以缩合形式(如鞣花单宁)存在于自然界。纯鞣花酸外观为黄色针状晶体，熔点高于360℃，微溶于水、醇，溶于碱、吡啶，不溶于醚。

鞣花酸具有多种药理活性，人体及动物实验表明，鞣花单宁和鞣花酸均具有抗氧化、抗炎、抗癌及调节肠道菌群等多种生物活性，对癌症、糖尿病、心脑血管疾病和神经性病变等慢性疾病具有潜在的预防或治疗功效。除此之外，鞣花酸还具有美白清除自由基、抗皱等活性，因此，被广泛地应用于护肤品中，鞣花酸能清除过氧化氢、二氧化氮和过氧亚硝酸盐等反应性氧自由基(ROS)和氮自由基(RNS)，可作为亲脂性的抗氧化剂。最新研究表明，鞣花酸还可以抑制3T3-L1脂肪细胞内脂肪酸合成酶活性，减少脂肪生成，预防和治疗肥胖。

现阶段已经对鞣花酸饮食资源的开发，国外以鞣花酸为功能性成分的保健食品销量日增，利用鞣花酸的抗氧化性将其应用到化妆品行业也已见报道，高纯度的鞣花酸主要用于药品，保健食品及化妆品的添加剂，作为抗氧化、对人体免疫缺陷病毒抑制、皮肤增白等功能因子。

然而，鞣花酸存在水溶性差、溶液稳定性差、透皮渗透性差等缺点使鞣花酸的应用受到了限制，这些缺点亟待解决。鞣花酸作为多酚类物质，溶解性差、不稳定、受热易氧化、不易吸收，难以稳定、长期地发挥作用，且鞣花酸的生物利用度极低，最终分布于组织及血液中的鞣花酸浓度往往低于其发挥生物学功效的有效浓度，部分未被吸收的鞣花酸则在哺乳动物胃肠道菌群的作用下代谢成更易吸收的尿石素类物质。

纳米结构脂质载体(nanostructured lipid carrier，NLC)是采用混合脂质为载体，将常温下为液态的脂质加入到固态脂质中，从而晶体的混乱度增加，使载体具有较高的晶体缺陷，因而可以运载更多的药物分子，降低储存过程中药物泄漏率。这种特殊的纳米结构能够容纳更多的药物分子，提高药物的载药量与包封率，避免储存过程中包封药物的泄露，增加了体系的稳定性，更好地控制药物的释放效果。纳米结构脂质载体组成包括固体脂质、液体脂质、乳化剂、包埋物质及分散介质水，但传统纳米结构脂质载体仍存在长时间储存稳定性变差的问题，因此本发明考虑采用壳聚糖对纳米结构脂质载体进行界面修饰，以进一步增强体系稳定性，且考虑在复合乳化剂中增大天然成分比例，从而达到提高产品安全性的目的。

本发明将一种壳聚糖界面修饰的纳米结构脂质载体作为鞣花酸的载体，以增加鞣花酸的体内吸收，提高其生物利用度，增强其在食品、化妆品中的稳定性。聚糖界面修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体为鞣花酸提供了可供选择的新型稳定递送系统，具有重要意义。

经查询专利及文献，目前尚无采用壳聚糖界面修饰的纳米结构脂质载体作为鞣花酸的载体的任何报道。

发明内容

本发明的目的就是解决背景技术中的问题，提出一种壳聚糖界面修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体及制备方法，以提高鞣花酸的稳定性和生物利用度，提升鞣花酸的水分散性，扩大其在食品及化妆品领域的应用范围。

本发明是通过如下技术方案实现的：

本发明所述的壳聚糖修饰的稳定的鞣花酸纳米结构脂质载体包含壳聚糖、活性物质鞣花酸、固体脂质材料、液体脂质材料、乳化剂、水，各成分的质量浓度(wt％)为：壳聚糖0.1～2％，鞣花酸0.1～5％，总脂质材料2％～20％，乳化剂2～10％，其余为水；

其中水为蒸馏水；

作为优选，所述液体脂质选自以下成分一种或多种的化合物：大豆油、核桃油、亚麻籽油、葵花籽油、亚麻籽油、杏仁油、茶籽油、牛油果油；述固体脂质材料选自至少一种以下的化合物：黄油、蜂蜡、硬脂酸、月桂酸、单月桂酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、双硬脂酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、山嵛酸甘油酯；所述乳化剂为酪蛋白酸钠。

本发明还提出了一种壳聚糖界面修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体的制备方法，包括以下几个步骤：

步骤(1)将一定比例的壳聚糖溶解在1％乙酸溶液中制备壳聚糖溶液。

步骤(2)，将液体脂质和固体脂质按照一定比例混合后，水浴加热至固体脂质熔点，搅拌直至完全熔化，形成混合油相；

步骤(3)，将一定比例的鞣花酸加入到步骤(1)所述的混合油相，通过搅拌使其充分溶解在混合油相中；

步骤(4)，将一定浓度的两种乳化剂按比例磁力搅拌混合，预热到油相相同温度后迅速加入到步骤(2)所述的混合油相中，搅拌形成分散液；

步骤(5)，将步骤(3)所述的分散液通过高速剪切机初步均质形成预乳液；

步骤(6)，将步骤(1)所述的壳聚糖溶液按一定比例滴加至预乳液中，再通过高速剪切均质机均质形成壳聚糖预乳液。

步骤(7)，将步骤(6)所述的壳聚糖预乳液通过超声波细胞破碎仪处理一定时间后，得到鞣花酸纳米结构脂质载体热乳液；

步骤(8)，将步骤(7)所述的鞣花酸纳米结构脂质载体热乳液冷却处理，乳液迅速冷却结晶，得到壳聚糖修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体乳液(EA-NLC)，密封，置于冰箱冷藏保存。

作为优选，所述壳聚糖占体系质量浓度为0.1～1.5％。

作为优选，所述液体脂质和固体脂质质量浓度比为2:8～7:3。

作为优选，所述乳化剂的质量浓度为1～3％。

作为优选，所述高速剪切机初步均质转速为10000～13000r/min，搅拌时间为2～5min。

作为优选，所述壳聚糖溶液与预乳液比例为2:3。

作为优选，所述超声处理功率设置为400～550W，超声时间为5～12min。

本发明制备的鞣花酸纳米结构脂质载体，粒径为100nm～500nm，多分散指数为0.1～0.35，粒度小且分布良好，包封率达92％～98％。

本发明具备以下有益效果：制备的壳聚糖界面修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体，材料组成简单，安全可靠，增强了常规纳米结构脂质载体的PH、离子稳定性，有效增强了鞣花酸对光、胃肠道等环境的耐受性，有效降低了鞣花酸的释放速率，提高了鞣花酸的生物利用度。以上优点使本发明的复合乳化剂稳定的鞣花酸纳米结构脂质载体在化妆品及食品领域具有良好的应用前景。此外，本发明的制备方法简单可控、重复性好，可扩大生产。

附图说明

下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。

图1为本发明的制备方法流程图；

图2为本发明的制得的壳聚糖界面修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体的粒径分布图。

具体实施方式

以下结合具体实施例对上述方案做进一步说明。这些实施例是用于说明本发明二不限于限制本发明的范围。实施例中采取的实施条件可以根据具体条件做进一步的调整。

实施例1：

一种壳聚糖界面修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体，配方中含有的各组分的重量组成比为：

制备步骤：

1.称取0.8g壳聚糖溶于10ml 1％乙酸溶液中制备壳聚糖溶液。

2.称取0.4g酪蛋白酸钠、17.5g蒸馏水放入烧杯中磁力搅拌30min使乳化剂溶解均匀，磁力搅拌后在75℃下预热。

3.称取1.2g花生油、0.8g硬脂酸、放入烧杯中于75℃下熔融。

4.称取0.1g鞣花酸，将其加入步骤3所述的混合油相，通过搅拌使其充分溶解在混合油相中。

5.将步骤2获得的水溶液趁热逐滴加入到步骤3获得的熔融态混合油相中，滴加完毕后，使用高速剪切机初步均质，均质转速为10000r/min，剪切时间为2min，获得初乳。

6.将步骤1所述的壳聚糖溶液8ml按一定比例滴加至12ml初乳中，再通过高速剪切均质机均质形成壳聚糖预乳液。

7.将步骤6获得的壳聚糖预乳液迅速使用超声波细胞破碎仪进行超声处理，超声功率500W，超声时间10min，获得高温乳液。

8.将步骤7获得的高温乳液于室温下降温，即获得壳聚糖修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体的水分散液。

9.实施例1制备所得的鞣花酸纳米结构脂质载体的平均粒径为268nm，PDI为0.149。

实施例2：

一种壳聚糖界面修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体，配方中含有的各组分的重量组成比为：

制备步骤：

1.称取0.6g壳聚糖溶于10ml 1％乙酸溶液中制备壳聚糖溶液

2.称取0.24g酪蛋白酸钠，16.96g蒸馏水放入烧杯中磁力搅拌30min使乳化剂溶解均匀，磁力搅拌后在65℃下预热。

3.称取1.6g茶籽油，0.6g棕榈酸放入烧杯中于65℃下熔融。

4.称取0.2g鞣花酸，将其加入步骤3所述的混合油相，通过搅拌使其充分溶解在混合油相中。

5.将步骤2获得的水溶液趁热逐滴加入到步骤3获得的熔融态混合油相中，滴加完毕后，使用高速剪切机初步均质，均质转速为10000r/min，剪切时间为2.5min，获得初乳。

6.将步骤1所述的壳聚糖溶液8ml按一定比例滴加至12ml初乳中，再通过高速剪切均质机均质形成壳聚糖预乳液。

7.将步骤6获得的壳聚糖预乳迅速使用超声波细胞破碎仪进行超声处理，超声功率400W，超声时间10min，获得高温乳液。

8.将步骤5获得的高温乳液于室温下降温，即获得壳聚糖修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体的水分散液。

9.实施例2制备所得的鞣花酸纳米结构脂质载体的平均粒径为462.1nm，PDI为0.197。

实施例3：

一种壳聚糖界面修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体，配方中含有的各组分的重量组成比为：

制备步骤：

1.称取1g壳聚糖溶于10ml 1％乙酸溶液中制备壳聚糖溶液

2.称取0.6g酪蛋白酸钠，17.2g蒸馏水放入烧杯中磁力搅拌30min使乳化剂溶解均匀，磁力搅拌后在85℃下预热。

3.称取1.4g大豆油，0.6g单硬脂酸甘油酯放入烧杯中于85℃下熔融。

4.称取0.2g鞣花酸，将其加入步骤3所述的混合油相，通过搅拌使其充分溶解在混合油相中。

5.将步骤2获得的水溶液趁热逐滴加入到步骤3获得的熔融态混合脂质中，滴加完毕后，使用高速剪切机初步均质，均质转速为12000r/min，剪切时间为3min，获得初乳。

6.将步骤1所述的壳聚糖溶液8ml按一定比例滴加至12ml初乳中，再通过高速剪切均质机均质形成壳聚糖预乳液。

7.将步骤5获得的壳聚糖预乳迅速使用超声波细胞破碎仪进行超声处理，超声功率500W，超声时间8min，获得高温乳液。

8.将步骤6获得的高温乳液于室温下降温，即获得壳聚糖修饰的鞣花酸纳米结构脂质载体的水分散液。

9.实施例3制备所得的鞣花酸纳米结构脂质载体的平均粒径为314.7nm，PDI为0.23。