异甘草素在制备防治冠状病毒感染药物中的用途
文献发布时间：2023-06-19 19:28:50
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及异甘草素在预防和治疗冠状病毒感染性疾病中的药物用途。
背景技术
新冠肺炎(COVID-19)是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引发的以上呼吸道感染为主要特征的传染性疾病。美国ClinicalTrials.gov数据库已有6505条新冠药物临床试验(截至2021年9月6日)，目前还没有发现针对SARS-CoV-2的特效药。
新冠病毒变异毒株的出现，使得现有新冠疫苗的保护力均有不同程度的下降，因此，抗新冠病毒的药物研究仍然非常紧迫。
由于缺乏用于预防和治疗新冠病毒(SARS-CoV-2)、普通冠状病毒(α型、β型冠状病毒)的有效治疗方式，这些病毒感染的预防和治疗方法存在挑战。因此，需要寻找具有广谱抗冠状病毒作用的药物。
根据现有文献报道，异甘草素是药食同源中药甘草中的重要药效成分，具有抗炎免疫作用，肺损伤保护作用，神经损伤保护作用，心血管损伤保护作用，抗肿瘤作用等多种药理作用。对于冠状病毒感染引起的炎症和器官组织损伤，与异甘草素的药效作用具有高度一致性，可以有针对性的发挥防治冠状病毒感染的作用。
发明内容
本发明涉及式I预防和治疗新型冠状病毒、普通冠状病毒感染的方法和结果。
研究发现，异甘草素(Isoliquiritigenin)，在本文中称为化合物式I(LG0028)，表现出针对新冠病毒(SARS-CoV-2)、冠状病毒(HCoV-OC43)和冠状病毒 (HCoV-229E)的抗病毒活性。
本发明解决的技术问题是，提供异甘草素或其药学上可接受的盐在制备预防和治疗冠状病毒感染性疾病的药物作用。
具体而言，为解决本发明的技术问题，采用如下技术方案：
本发明技术方案的第一方面是提供了如结构式I所示的异甘草素或其药学上可接受的盐在制备预防或治疗冠状病毒感染的药物用途，
所述的异甘草素药学上可接受的盐，包括药学上可接受的有机盐或无机盐，其中，所述的有机盐包括磺酸盐、羧酸盐、氨基酸盐以及脂肪酸盐，无机盐包括盐酸盐、溴酸盐、碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐和硝酸盐。
所述的磺酸盐包括含1-15个碳原子的烷基磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、邻甲苯磺酸盐、间甲苯磺酸盐；羧酸盐包括酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、枸橼酸盐、苹果酸盐、肉桂酸盐、苯甲酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、戊二酸盐、己二酸盐、双羟萘酸盐及乳酸盐；氨基酸盐包括谷氨酸盐、天冬氨酸盐；脂肪酸盐包括含2-18个碳原子的长链脂肪酸盐。
其中，所述的冠状病毒包括新型冠状病毒SARS-CoV-2及其诱发引起的新冠肺炎COVID-19。
所述的冠状病毒感染包括HCoV-OC43、HCoV-229E冠状病毒诱发引起的感染性疾病。
本发明技术方案的第二方面提供了一种药物组合物在制备预防或治疗冠状病毒感染的药物中的应用，所述的药物组合物包含结构式I所示的五异甘草素或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体或赋形剂，
一般性描述
本发明首先对所涉及的名词术语进行详细描述，以便于更好地理解本发明。
本文所用的术语“抗病毒药物”，是指有效抑制病毒在人体中形成或复制的药物(化合物、粗提物或生物制剂)，包括但不限于在人体形成或复制过程中干扰病毒所必需的宿主蛋白或病毒机制的药物。
“预防”(prevention或preventing)是指阻止疾病或病症进一步发展的任何治疗。术语“预防”还包括在个体暴露于病毒前使用治疗有效量的本发明的化合物或组合物(即，暴露前预防)以预防出现疾病的症状和/或预防病毒在患者病毒采样中达到可检测的水平。
“治疗”(treatment或treating)是指逆转、减轻、抑制预防所适用的疾病的一种或多种症状。在某些实施例中，“治疗”是指根据本发明的化合物或组合物，以减轻或消除病毒感染的症状和/或减少患者的病毒采样的病毒载量。
“药物组合物”是指本发明所涉及的化合物，以任何比例与辅料或与其它活性成分混合制备的药物组合物。
以上提供的化合物名称是根据文献记载命名，本领域技术人员应理解，可以使用其他公认的命名系统和符号来命名或标识化合物结构。如，可以用通用名称、系统或非系统名称命名或标识化合物。化学领域中普遍认可的命名系统和符号包括但不限于化学文摘服务(CAS)以及国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)。
有益技术效果：本研究发现，异甘草素具有广谱抗病毒作用，其中包括新型冠状病毒(SARS-CoV-2)，冠状病毒HCoV-OC43和HCoV-229E，具有很好的临床应用前景。
附图说明
图1 LG0028抗新冠病毒诱导的细胞病变的药效曲线。
具体实施方式
实验例1异甘草素抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的作用评价
细胞：VeroE6细胞。
病毒株：SARS-CoV-2，滴度为TCID
实验材料与方法：
(1)样品处理：由DMSO配制的样品浓度10mg/ml为原液。样品临用前用病毒培养维持液稀释药物，第一个浓度为100μg/ml，再用培养液作5倍稀释，各5 个稀释度。病毒对照组为SARS-CoV-2病毒液，阳性药为瑞德西韦(Redesivir)。
(2)样品毒性评价：取指数生长期VeroE6细胞铺于96孔细胞培养板中(细胞数2×10
(3)无菌96孔培养板，每孔加入100μL浓度为2×10
(4)培养板实验组和病毒对照组加入100TCID
(5)2h后，弃去96孔培养板中细胞培养液；受试药物稀释成一系列浓度，每个浓度3个复孔，100μl/孔加入上述药液；
(6)同时设立细胞对照、空白对照(溶剂对照)、病毒对照(阴性对照)和阳性药物对照；
(7)细胞37℃，5％CO
(8)光学显微镜下观察细胞病变(CPE)，细胞出现病变程度按以下6级标准记录：“-”无病变出现；“±”为细胞病变少于10％；“+”为细胞病变约25％；“++”为细胞病变约50％；“+++”为约75％的细胞出现病变：“++++”为75％以上病变。采用Reed-Muench法或GraphPad Prism5.0计算半数有效浓度(IC
(9)实验条件：以上实验操作均在BSL-3实验室内完成。
实验结果见表1，药效曲线图见图1，其中横坐标concentration为浓度，纵坐标inhibition rate(％of control)是指药物对病毒复制的抑制率。
结果表明，异甘草素具有显著的抗新冠病毒的作用，EC
表1异甘草素在体外VeroE6细胞上对新型冠状病毒SARS-CoV-2诱导的细胞病变效应的抑制作用
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实验例2异甘草素抗冠状病毒HCoV-OC43的活性评价
以H460细胞为病毒宿主，测定样品抑制病毒引起细胞病变程度(CPE)。病毒株：冠状病毒HCoV-OC43，-80℃保存。样品处理：样品用DMSO配成母液，浓度为 10mg/ml，再用培养液作3倍稀释，各8个稀释度。阳性对照药：利巴韦林(RBV)，湖北天药药业股份有限公司(批号31712252)。
测试方法：H460细胞接种96孔培养板，置5％CO
结果表明，异甘草素抗冠状病毒HCoV-OC43的EC
表2异甘草素在体外H460细胞上对冠状病毒HCoV-OC43诱导的细胞病变效应的抑制作用
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实验例3异甘草素抗冠状病毒HCoV-229E的活性评价
以Huh7细胞为病毒宿主，测定样品抑制病毒引起细胞病变程度(CPE)。病毒株：冠状病毒HCoV-229E，-80℃保存。样品用DMSO配成母液，浓度为10mg/ml。再用培养液作3倍稀释，各8个稀释度。阳性对照药：利巴韦林(RBV)，湖北天药药业股份有限公司(批号31712252)。
测试方法：Huh7细胞接种96孔培养板，置5％CO
结果表明，异甘草素抗冠状病毒HCoV-229E的EC
表3异甘草素在体外Huh7细胞上对冠状病毒HCoV-229E诱导的细胞病变效应的抑制作用
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综上所述，异甘草素除了具有文献报道的抗炎免疫作用、肺损伤保护作用、神经损伤保护作用、心血管损伤保护作用以及抗肿瘤作用等多种药理作用，体外还具有明显的抗新型冠状病毒SARS-CoV-2作用、抗冠状病毒HCoV-OC43和 HCoV-229E的作用，具有广谱抗冠状病毒感染作用，有望成为防治冠状病毒感染性疾病的有效治疗药物。