一种新型磁珠及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种新型磁珠及磁珠的制备方法。

背景技术

随着分子生物学技术的不断广泛应用，分子生物学技术已从以往的小规模的实验室研究逐渐转变成诸如疾病诊断、基因组测序、疾病基因的流行病学调研等需要大规模的程序化的操作的实用手段。以人类基因组测序为例，需要年复一年的核酸提取、纯化、测序。许多优秀的高级科研人员的大量的时间被花费在简单的重复劳动之中，实在是一种巨大的浪费。同时手工操作的不可避免的不规范性容易造成误差，人类基因组测序一般要重复3次以上，又进一步加重工作强度。

目前游离DNA的提取方法主要有磁珠法，磁珠法提取核酸技术其原理为：采用超顺磁性纳米颗粒，利用在高盐条件低pH下吸附核酸，然后在低盐高pH下分离核酸的原理进行样本核酸的分离纯化，因其只需要在磁场作用下就高效简易地将核酸分离纯化出来，故其能实现高通量自动化标准化操作。

磁珠(ImpetiCbead，IMB)将固化试剂特有的优点与免疫学反应的高度特异性结合于一体，以免疫学为基础，渗透到病理、生理、药理、微生物、生化以及分子遗传学等各个领域，其在免疫检测、细胞分离、生物大分子纯化和分子生物学等方面得到了越来越广泛的应用。目前市面上用于核酸提取的磁珠大部分采用传统溶胀法制备而得。基本思路为采用高分子微球(例如：聚苯乙烯微球)在特定有机溶剂环境中，微球发生溶胀，通透性变好。此条件下，Fe

金纳米粒子，尤其是金纳米球具有优良的电学、光学性质和良好的生物相容性，易与生物大分子(如蛋白质、核酸、肽)稳定结合，在分子识别和生物标记方面有广泛应用。近年来，金纳米球的制备工艺趋近成熟，颗粒均已，尺寸可控的金纳米球已可以大批量制备，市场上也出现了不同尺寸的金纳米球销售。

将磁性粒子与金粒子结合起来的金-磁复合粒子，由于兼具了纳米磁与纳米金的优点而具有更为广阔的应用前景，目前已成为研究的热点。但当前金粒子和Fe

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型核酸提取用磁珠，并提供磁珠的制备方法。解决现有磁珠粒径大小不均匀，表面能小，核酸吸附效率低的问题。

为了实现上述目的，本发明提供一种Au-Fe

本发明还提供了一种Au-Fe

步骤1，取适量金纳米球分散于去离子水中得到金纳米球溶液；

步骤2，取适量水性纳米Fe

步骤3，向所述金纳米球溶液中加入适量表面活性剂，混合均匀；

步骤4，再向金纳米球溶液中加入纳米Fe

步骤5，使用硅烷水解法在Au-Fe

其中，所述金纳米球的粒径为40-500nm；所述纳米Fe

使用硅烷水解法在Au-Fe

其中，所述表面活性剂为十六烷基三甲基溴化铵或聚乙烯吡咯烷酮。

本发明提供一种新型Au-Fe

具体实施方式

下面通过实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

步骤1，取适量粒径40nm的金纳米球分散于去离子水中得到10ml，浓度为5mM金纳米球溶液；

步骤2，取适量粒径15nm的水性纳米Fe

步骤3，向所述金纳米球溶液中加入100mM的CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)20ml，混合均匀；

步骤4，再向金纳米球溶液中加入上述纳米Fe

步骤5，将固相Au-Fe

实施例2

步骤1，取适量粒径500nm的金纳米球分散于去离子水中得到10ml，浓度为1mM金纳米球溶液；

步骤2，取适量粒径5nm的水性纳米Fe

步骤3，向所述金纳米球溶液中加入100mM的CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)10ml，混合均匀；

步骤4，再向金纳米球溶液中加入上述纳米Fe

步骤5，将固相Au-Fe

实施例3

步骤1，取适量粒径50nm的金纳米球分散于去离子水中得到10ml，浓度为10mM金纳米球溶液；

步骤2，称取0.9g油酸铁、0.156g油酸、5g 1-十八烯加入50mL三颈烧瓶中，加热至320℃(以18℃/min的升温速度)，反应1h后快速冷却至室温，取反应后固相以丙酮和正己烷的混合洗涤剂洗涤三次，得约为0.2g的表面油酸包覆的四氧化三铁颗粒。取0.2g表面油酸包覆的四氧化三铁颗粒分散于72mL四氢呋喃中，形成Fe

步骤3，向所述金纳米球溶液中加入100mM的CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)20ml，混合均匀；

步骤4，再向金纳米球溶液中加入上述纳米Fe

步骤5，将固相Au-Fe

实施例4

步骤1，取适量粒径50nm的金纳米球分散于去离子水中得到10ml，浓度为5mM金纳米球溶液；

步骤2，取适量粒径45nm的水性纳米Fe

步骤3，向所述金纳米球溶液中加入5％wt的聚乙烯吡咯烷酮溶液(PVP)1ml，混合均匀；

步骤4，再向金纳米球溶液中加入上述纳米Fe

步骤5，将固相Au-Fe

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。