预防和治疗糖尿病周围神经病变的中药组合物的工业级制备方法及其产品

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种预防和治疗糖尿病周围神经病变的中药组合物的工业级制备方法及其产品和用途。

背景技术

近年来糖尿病发病率逐年增高，周围神经病变(Diabetes PeripheralNeuropathy，DPN)是糖尿病患者最常见的慢性并发症之一，其给患者带来沉重的生活负担，逐渐成为医学热点。糖尿病周围神经病变临床表现多样，患者除有多饮、多尿、血糖升高症状外，伴随肢体麻木、感觉减退、持续性疼痛等特殊表现，可发展为肌肉萎缩和糖尿病足。糖尿病周围神经病变过程具有隐匿性、渐进性特点，是造成非外伤性截肢的主要原因之一。

关于糖尿病周围神经病变的发病机制有很多学说，尚无统一定论，目前认为糖尿病周围神经病变的发生与代谢异常、微血管病变、氧化应激、神经营养因子缺乏以及自身免疫等多种因素有关。临床上主流的观点认为，糖尿病周围神经病变的发病机制为体内胰岛素不足，机体处于高糖状态，糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱，进而致使血液粘稠度增高，脂质沉积在血管壁，微血管狭窄或阻塞，导致神经营养因子缺乏，产生神经纤维退行性变和脱髓鞘改变。该病的核心发生机制在于糖、脂肪、蛋白质等营养物质的代谢失调，血管病理产物堆积。

有关糖尿病周围神经病变的治疗，西医一般采用控制血糖、修复神经、抗氧化、改善微循环等方法，采用针对症状的多种药物联用，而多种药物的联合应用，短时间内效果明显，但容易复发，同时也增加了药物不良反应发生的机率，最终患者不得不截肢以保全性命。中医观点认为，糖尿病周围神经病变继发于糖尿病，机体阴虚燥热，日久不愈，阴精大量丢失，伤及气血，气虚及阳，血虚及阴。糖、脂肪、蛋白质归属于“精气”范畴，阴阳气血不足时则精气吸收转输受阻，精气不利亦加重气血阴阳亏虚。

申请人“河北中唐医药有限公司”以及发明人王钢柱多年来一致力于开发防治糖尿病及其相关并发症的中药组合物产品，其治疗糖尿病周围神经病变的纯中药“芪丹通络颗粒”填补了该治疗领域的空白。此外，发明人围绕着治疗糖尿病周围神经病变的中药组合物及其制备方法申请了多项专利，例如，CN1151800C、CN108524832A等。

但是，目前本发明人以及其他研究人员开发的治疗糖尿病周围神经病变的中药组合物的制备方法更多适用于实验室的小剂量制备，或者存在将实验室制备方法直接放大到工业级后会产生中药组合物产品的活性降低、收率降低或者成本提高并造成浪费的问题，这极大制约着治疗糖尿病周围神经病变的中药组合物在临床上的大量应用。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明开发了一种尤其适合于工业化生产治疗糖尿病周围神经病变的中药组合物的制备方法，所述制备方法的整体效率高，有效成分收率得到了显著的提高，同时所述工业制备方法使整体加工成本降低。

具体地，通过以下几个方面的技术方案实现了本发明：

在第一个方面中，一种预防和治疗糖尿病周围神经病变的中药组合物的工业级制备方法，所述中药组合物包括以下重量份的原料组分：黄芪6-100份、细辛1-50份、丹参3-50份、桂枝3-50份、土茯苓3-40份、当归1-30份、川芎3-30份、麻黄1-20份、制附子3-40份、赤芍1-25份、牛膝3-40份和知母3-50份；

所述制备方法包括以下步骤：按重量份称取的中药原料混匀，第一煎加水量为中药原料总重量的6-10倍量，煎煮1-2小时，第二、三煎分别加水量为中药原料总重量的6-10倍量，煎煮0.5-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩得到浓缩膏；将浓缩膏转入醇沉罐中，在搅拌的情况下，在夹层罐中充入循环冷凝水加速降温，2-4个小时达到室温；然后在高速搅拌状态下加入95％乙醇进行醇沉操作，取上清液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10-1.25g/cm

作为可选方式，对于所述工业级制备方法，所述制备方法包括以下步骤：按重量份称取的中药原料混匀，第一煎加水量为中药原料总重量的6-10倍量，煎煮1-2小时，第二、三煎分别加水量为中药原料总重量的6-10倍量，煎煮0.5-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩得到浓缩膏；将水提取药膏中加入乙醇搅拌完成后通过防爆式离心过滤机除去大分子沉淀物，然后回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10-1.25g/cm

作为可选方式，对于所述工业级制备方法，所述制备方法包括以下步骤：按重量份称取的中药原料混匀，第一煎加水量为中药原料总重量的8倍量，煎煮1小时，第二、三煎分别加水量为中药原料总重量的6倍量，煎煮40分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩得到浓缩膏；将浓缩膏转入醇沉罐中，在搅拌的情况下，在夹层罐中充入循环冷凝水加速降温，2-4个小时达到室温；然后在高速搅拌状态下加入95％乙醇进行醇沉操作，随后通过防爆式离心过滤机将上清液与大分子沉淀物分离，取上清液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10-1.25g/cm

作为可选方式，对于所述工业级制备方法，将煎出液进行循环套用，将第一罐次的第二煎出液用于第二罐次第一煎时所用的加水进行煎煮；将第二罐次的第三煎出液用于第二罐次第二煎时所用的加水进行煎煮；后续罐次的提取以此类推。

作为可选方式，对于所述工业级制备方法，所述喷雾干燥控制进风温度25-40℃、相对湿度50-70％下进行。

作为可选方式，对于所述工业级制备方法，所述中药组合物包括以下重量份的原料组分：黄芪5-45份、细辛3-20份、丹参20-25份、桂枝5-20份、土茯苓5-15份、当归4-20份、川芎5-15份、麻黄5-10份、制附子5-20份、赤芍3-10份、牛膝15-25份和知母5-20份。

作为可选方式，对于所述工业级制备方法，所述中药组合物包括以下重量份的原料组分：黄芪42份、细辛11.5份、丹参21份、桂枝12份、土茯苓6.5份、当归16份、川芎13份、麻黄6份、制附子18份、赤芍3份、牛膝20份和知母17份。

在第二个方面中，本发明涉及采用上述第一个方面所述的工业级制备方法制备得到的中药组合物产品。

在第三个方面中，本发明涉及上述第二个方面所述的中药组合物产品在制备预防和治疗糖尿病周围神经病变的药物中的用途。

在第四个方面中，本发明涉及上述第二个方面所述的中药组合物产品在制备预防和治疗糖尿病足或糖尿病相关血管病变或糖尿病相关周围神经炎或糖尿病相关坐骨神经痛的药物中的用途。

本发明的治疗糖尿病周围神经病变的中药组合物的工业制备方法相对于现有技术，具有以下有益效果：

(1)采用将煎出液进行循环套用的方法，将第一罐次的第二煎出液用于第二罐次第一煎时所用的加水进行煎煮；将第二罐次的第三煎出液用于第二罐次第二煎时所用的加水进行煎煮；后续罐次的提取以此类推，这样，每罐次的提取液仅进行两次提取液的浓缩，实际操作后，提取膏的整体收率与传统方式的收率一致。可以减少浓缩蒸汽用量达到节能降耗的目的，同时还可以缩短生产周期20％，提高生产效率20％。

(2)采用将浓缩膏直接转入醇沉罐中进行冷却，而不是传统的将浓缩膏在冷库中冷却的方式。浓缩膏在醇沉罐中在搅拌的情况下，同时在醇沉罐的夹层中充入循环冷凝水加速降温，2-4个小时可以达到室温，然后加入95％乙醇进行醇沉操作，整体工艺时间可以降低10-14小时，同时可以减少转入转出冷库的操作过程，达到了提高工作效率、缩短生产周期的目的，更适合批量生产。此外，将水提取药膏中加入乙醇搅拌完成后通过防爆式离心过滤机除去大分子沉淀物；然后回收乙醇，可节省沉降时间18-20小时，减少生产周期，更加提高了工作效率。

(3)本发明的制备方法中，还增加了喷雾干燥前膏的预处理过程，采用将提取膏加入10％的95％乙醇进行混合，采用此工艺，更有利于工艺的标准化执行，提高喷雾效率，脂溶性成分的收率提高了20％，更进一步保证和提高了本发明中药组合物产品预防和治疗糖尿病周围神经病变的有效性。

(4)本发明通过喷雾干燥制粒机采风口控制空气温湿度标准达到温度在25-40℃，相对湿度在50-70％，使喷雾干燥工艺参数稳定，在保证工艺标准的基础上，提高产品效率30％以上。

总之，本发明的技术方案，尤其是制备方法更加适合于工业化的生产，本发明中所记载的制备方法的整体效率高，并且有效成分的收率得到了显著的提高，本发明所记载的工业制备方法整体加工成本得到了降低。

图1：传统水提取工艺的流程图。

图2：采用将煎出液进行循环套用的本发明改进的水提取工艺的流程图。

图3：诱发糖尿病60天时，糖尿病模型大鼠神经有脱髓鞘现象，银染20×10倍。

图4：诱发糖尿病60天时，正常对照组大鼠坐骨神经、神经外膜、索膜清晰，神经纤维包括轴突和髓鞘，银染10×10倍。

图5：诱发糖尿病120天时，糖尿病模型大鼠神经呈明显脱髓鞘现象。HE染色40×10倍。

图6：经糖脉康3.5g生药/kg治疗60天后，脱髓鞘现象未见明显改善。银染10×10倍。

图7：经原工艺制备的本发明中药组合物3.5g生药/kg治疗60天后，脱髓鞘现象有所改善。银染20×10倍。

图8：经新工艺实施例4中制备的药组合物组3.5g生药/kg治疗60天后，脱髓鞘现象有明显好转。银染40×10倍。

具体实施方式

下面参照具体的实施例对本发明做进一步说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明，并不用于限定本发明的范围。

实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道购买得到的常规产品。

下面实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为市售产品。

第一部分：工业级制备方法的实施例

实施例1：

制附子19.6Kg、桂枝6.6Kg、黄芪5.0Kg、丹参23.0Kg、川芎6.8Kg、当归19.5Kg、赤芍3.5Kg、麻黄7.0Kg、细辛13.3Kg、土茯苓7.8Kg、牛膝23.2kg、知母19.5Kg。

取上述味药材加水煎煮三次，第一煎加水1238.5Kg，煎煮1小时，第二煎和第三煎分别加水928.8Kg，煎煮40分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩后得到浓缩膏。将浓缩膏直接转入醇沉罐中，在搅拌的情况下，在夹层罐中充入循环冷凝水加速降温，2-4个小时达到室温；然后加入95％乙醇进行醇沉操作，取上清液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10-1.25g/cm

实施例2

制附子18Kg、桂枝12Kg、黄芪42Kg、丹参21Kg、川芎13Kg、当归16Kg、赤芍3Kg、麻黄6Kg、细辛11.5Kg、土茯苓6.5Kg、牛膝20Kg、知母17Kg。

取上述味药材加水煎煮三次，第一煎加水1488Kg，煎煮1小时，第二煎和第三煎分别加水1116Kg，煎煮40分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩后得到浓缩膏。将浓缩膏直接转入醇沉罐中，在搅拌的情况下，在夹层罐中充入循环冷凝水加速降温，2-4个小时达到室温；然后加入95％乙醇进行醇沉操作，取上清液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10-1.25g/cm

实施例1和实施例2的工艺中采用将浓缩膏直接转入醇沉罐中，在搅拌的情况下，在夹层罐中充入循环冷凝水加速降温，2-4个小时可以达到室温，整体工艺时间可以降低10-14小时。

在实际工业生产中，本发明人在实施例1和实施例2的基础上对于水提工艺也进行改进：传统水提取，加水分别提取三次，每次加水8倍，三次提取液共为药材总量的24倍，然后进行三次提取液的浓缩，浓缩量较大。因第三次提取液中含有的有效成分只有提取总量的5％左右，浓度较低(见图1)。本发明采用将煎出液进行循环套用的方法，将第一罐次的第二煎出液用于第二罐次第一煎时所用的加水进行煎煮；将第二罐次的第三煎出液用于第二罐次第二煎时所用的加水进行煎煮；后续罐次的提取以此类推，这样，每罐次的提取液仅进行两次提取液的浓缩，实际操作后，提取膏的整体收率与传统方式的收率一致(见图2)。可以减少浓缩蒸汽用量达到节能降耗的目的(节约能源20％)，同时还可以缩短生产周期20％，提高生产效率20％。

实施例3

制附子18Kg、桂枝12Kg、黄芪42Kg、丹参21Kg、川芎13Kg、当归16Kg、赤芍3Kg、麻黄6Kg、细辛11.5Kg、土茯苓6.5Kg、牛膝20Kg、知母17Kg。

取上述味药材加水煎煮三次，第一煎加水1488Kg，煎煮1小时，第二煎和第三煎分别加水1116Kg，煎煮40分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩后得到浓缩膏。将浓缩膏直接转入醇沉罐中，在搅拌完成后通过防爆式离心过滤机快速分离出醇沉液体，2-4个小时即可完成醇沉分离；取分离液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10-1.25g/cm

实施例3的工艺中采用将浓缩膏直接转入醇沉罐中，在搅拌完成后采用离心过滤机2-4个小时可以分离完成液体，整体工艺时间可以降低18-20小时。将水提取药膏中加入乙醇搅拌完成后通过防爆式离心过滤机除去大分子沉淀物，大大缩短沉降时间(由原来约20小时缩短为2小时)缩短生产周期，提高生产效率50％以上。

对比例1

制附子18Kg、桂枝12Kg、黄芪42Kg、丹参21Kg、川芎13Kg、当归16Kg、赤芍3Kg、麻黄6Kg、细辛11.5Kg、土茯苓6.5Kg、牛膝20Kg、知母17Kg。

取上述味药材加水煎煮三次，第一煎加水1488Kg，煎煮1小时，第二煎和第三煎分别加水1116Kg，煎煮40分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩后，置于冷库中静置降至室温；然后转入醇沉罐中加入乙醇进行醇沉，取上清液回收乙醇，并于70℃浓缩至相对密度为1.10-1.25g/cm

该工艺中从浓缩完毕到开始醇沉需要12-18个小时进行冷却操作，冷却过程包括浓缩膏进出冷库的操作以及冷库中的冷却时间。

实施例1、实施例2和实施例3与对比例1的区别在于醇沉工艺的不同，对比例1的方法是水提取浓缩后的浓缩膏，温度在70℃，置于冷库中静置降至室温，然后转入醇沉罐中，加95％的乙醇进行醇沉操作，整体工艺时间从浓缩完毕到开始醇沉需要12-18个小时。实施例1、实施例2和实施例3是采用将浓缩膏直接转入醇沉罐中，在搅拌的情况下，在夹层罐中充入循环冷凝水加速降温，2-4个小时可以达到室温，然后加入95％乙醇进行醇沉操作，整体工艺时间可以降低10-14小时。

计算公式：提取膏收率＝提取膏重量/投入药材重量×100％

水提取出膏率：60℃检测膏相对密度为1.10-1.15，出膏率合格标准为70-85％。

现采用改进后工艺：提取膏重量/投入原料重量×100％＝81.2％。

表1：原提取工艺和改进后的提取工艺的生产效率比较

实施例4

随后，本发明人又在实施例3所述优选工业级制备方法的基础上，进一步考察了醇沉后喷雾干燥前的预处理过程是否会对中药组合物产品中活性成分的含量产生有益影响。

具体制备方法为：在实施例3制备的清膏中，加入10％量的95％乙醇进行混合，过滤，再加入混合物重量2-5倍的乳糖或糊精喷雾干燥制粒。所述喷雾干燥在进风温度25-40℃，湿度50-70％下进行。

采用实施例3制备的同一批膏分成两部分进行实验，一部分直接制粒，另一部分经过乙醇预处理后制粒(实施例4产品)。共进行三次实验，对生产后颗粒含膏量统计结果见下表2。

表2：未经预处理和经预处理中药组合物中含膏量变化情况比较

结果表明，在喷雾干燥前，增加了膏的预处理过程，采用将提取膏加入10％的95％乙醇进行混合，减少喷雾干燥前对提取膏过滤过程中造成脂溶性成分的损失，采用此工艺，更有利于工艺的标准化执行，提高喷雾效率，脂溶性成分的收率提高了20％，更进一步保证和提高了本发明中药组合物产品预防和治疗糖尿病周围神经病变的有效性。

本发明通过喷雾干燥制粒机采风口控制空气温湿度标准达到温度在25-40℃，相对湿度在50-70％，使喷雾干燥工艺参数稳定，在保证工艺标准的基础上，提高产品效率30％以上。

第二部分：采用本发明工业级制备方法制备得到的中药组合物的效果实施例

注释：在以下实验中使用的“原工艺本发明中药组合物”是在制备过程中未使用将煎出液循环套用的方式，不是通过防爆式离心过滤机除去大分子沉淀物，在冷库中冷却以及在制粒前未经乙醇前处理，但采用的其他制备方法和工艺参数与实施例4相同制备得到的中药组合物。

一、在链脲佐菌素(STZ)诱导的大鼠糖尿病模型中对糖尿病周围神经病变的影响

1.本发明中药组合物对链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠血糖的影响

表3：本发明中药组合物对链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠血糖的影响(X±SD，mmol/L)

注：

与正常对照组比较■■P<0.01；与给药前比较*P<0.05，**P<0.01

与模型组比较▲p<0.05，▲▲p<0.01

由表3看出，采用本发明新工业化制备方法制备得到的本发明中药组合物(实施例4)在链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠模型中对于糖尿病大鼠血糖的降低作用显著高于采用原工艺制备的相同组方的中药组合物。

2.本发明中药组合物对STZ诱发糖尿病大鼠神经传导速度的影响

表4：本发明中药组合物对STZ-DM大鼠体重、血糖、神经传导速度的影响(X±SD)

注：和给药前比##P<0.01

和正常对照组比**P<0.01；*P<0.05

和模型组比▲▲P<0.01；▲P<0.05

和糖脉康组比★★P<0.01；★P<0.05

由表4看出，采用本发明新工业化制备方法制备得到的本发明中药组合物(实施例4)在链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠模型中对于糖尿病大鼠神经传导速度的增加作用显著高于采用原工艺制备的相同组方的中药组合物和已上市的同类药物糖脉康。

在造糖尿病大鼠模型后的第60天时，随机抽取部分糖尿病模型大鼠，解剖分离新鲜坐骨神经作组织学切片观察。其组织学切片标本中神经纤维束呈粗细不一现象，部分神经纤维有脱髓鞘现象(图3)，而正常对照大鼠的坐骨神经则坚实，有光泽，组织学切片中可见纤维粗细、大小均匀，有完整的髓鞘(图4)。在诱发糖尿病模型后的第120天(即开始给药治疗后的第60天)时，糖尿病模型大鼠神经脱髓鞘现象更加明显(图5)。经糖脉康(3.5g生药/kg)治疗60天后，大鼠神经组织切片无明显改善(图6)；原工艺本发明中药组合物组(3.5g生药/kg)神经组织切片结构脱髓鞘现象有所改善(图7)；新工艺实施例4中药组合物组(3.5g生药/kg)神经组织切片结构与糖尿病模型组(图5)比较可见明显改善(图8)。

二、临床实验数据

糖尿病周围神经病变(Diabetes Peripheral Neuropathy，DPN)是指在排除其他原因的情况下，糖尿病患者出现周围神经功能障碍，包含脊神经、颅神经及植物神经病变，主要症状包括：肢体发凉、疼痛、麻木、感觉异常等。

糖尿病周围神经病变类型包括：1.、远端对称性多发性神经病变：双侧肢体疼痛、麻木、感觉异常等。2、近端运动神经病变：一侧下肢近端严重疼痛为多见，可与双侧远端运动神经同时受累，伴迅速进展的肌无力和肌萎缩。3、局灶性单神经病变(或称为单神经病变)：可累及单颅神经或脊神经。颅神经损伤以上睑下垂(动眼神经)最常见，其次为面瘫(面神经)、眼球固定(外展神经)、面部疼痛(三叉神经)及听力损害(听神经)。4、非对称性的多发局灶性神经病变：同时累及多个单神经的神经病变称为多灶性单神经病变或非对称性多神经病变。可出现麻木或疼痛。5、多发神经根病变：最常见为腰段多发神经根病变，主要为L2、L3和L4等高腰段的神经根病变引起的一系列单侧下肢近端麻木、疼痛等症状。6、自主神经病变：可累及心血管、消化、呼吸、泌尿生殖等系统，还可出现体温调节、泌汗异常及神经内分泌障碍。

1.临床资料：

采用本发明中药组合物和对照药物治疗糖尿病周围神经病变(DPN)患者872例，其中DPN并发症类型包括见表5。

表5：临床资料中糖尿病周围神经病变并发症类型(例)

采用原工艺本发明中药组合物组作为治疗组290例，其中治疗组男149例，女141例；

采用新工艺实施例4中药组合物组作为治疗组290例，其中治疗组男151例，女139例；

采用硫辛酸作为对照组292例，其中对照组男150例，女142例。

2.诊断标准：

(一)DPN诊断标准：

1、明确的糖尿病病史或至少有糖代谢异常的证据。2、临床症状和体征与DPN的表现相符。3、以下5项检查中：如果有2项或2项以上异常则诊断为DPN：a.温度觉异常；b.尼龙丝检查(足部感觉减退或消失)；c.振动觉异常；d.踝反射消失；e.神经传导速度。4.排除其他病变如脑梗塞、格林--巴利综合征、严重动静脉血管病变等，尚需鉴别药物尤其是化疗药物引起的神经毒性作用以及肾功能不全引起的代谢毒物对神经的损伤。

2、诊断设备清单：(1)10g尼龙丝；(2)温度棒；(3)128Hz音叉或美国BioThesiometerB10型；(4)叩诊锤；(5)丹麦丹迪Keypoint4型肌电图诱发电位仪。

(二)对于肢体凉、麻、疼、无力等症状评分标准：采用中医临床症状半定量积分量化标准。见表6。

表6：中医临床症状半定量积分量化标准

(三)、肢体凉、麻、疼、无力轻重程度诊断标准：

表7：

在后续对照治疗时采用上述诊断标准对疗效进行评判，通过统一标准能够使对照结果更加可靠，采用量化评分的方式简单实用。

3.治疗方案：

(一)治疗方案：

治疗组1：采用原工艺本发明中药组合物组制备的颗粒剂，每次8克，每天三次，餐后40分钟温开水送服；

治疗组2：采用新工艺实施例4中药组合物组制备的颗粒剂，每次8克，每天三次，餐后40分钟温开水送服；

对照组：硫辛酸胶囊，每次0.2克，每天三次，餐前30分钟温开水送服。

(二)疗程：8周为一个疗程。

(三)8周后复查肢体凉、麻、疼、无力评分，复查神经电生理(肌电图)。4.疗效判定标准:

临床治愈：症状、体征消失，肌电图检查：神经传导速度正常

显效：四肢感觉障碍麻木、发凉、疼痛大部分消失，四肢末端稍有麻木。震动觉(128HZ)、轻触觉(棉絮、10g尼龙丝)、针刺觉、温度觉、腱反射明显恢复。肌电图：神经传导速度显著改善

有效：四肢感觉障碍麻木、发凉、疼痛明显减轻，震动觉(128HZ)、轻触觉(棉絮、10g尼龙丝)、针刺觉、温度觉、腱反射有所恢复。肌电图：神经传导速度有所改善。

无效：症状、体征，肌电图无改善

5.统计学方法：

采用SPSS19.0统计软件进行统计，中医证候评价采用计数资料采用频数(构成比)进行统计描述；肌电图采用t检验，对比治疗前后积分改善情况和肌电图改善情况。

6.结果：

(一)治疗后肢体凉、麻、疼、无力症状改善情况：见表8

表8：治疗后肢体凉、麻、疼、无力症状改善情况例(％)

(二)治疗后感觉神经传导速度改善情况：见表9

表9：

注：与治疗前比较，*P<0.05，具有显著统计学意义；与治疗组1治疗后比较，ΔP<0.05，具有显著统计学意义。

以上结果表明，采用本发明改进的工业化制备方法制备得到的中药组合物在改善凉、麻、疼、无力症状以及改善感觉神经传导速度方面显著优于采用原制备方法制备得到的中药组合物，且采用本发明改进的工业化制备方法制备得到的中药组合物的疗效显著优于阳性对照组。

用药期间，采用本发明改进的工业化制备方法制备得到的中药组合物安全、可靠、无任何毒副作用，是治疗糖尿病周围神经病变的有效药物。

综上所述，本发明所述制备方法尤其适合于工业化生产，所述制备方法的整体效率高，有效成分收率得到了显著的提高，所述工业制备方法整体加工成本降低。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。