一种酵母水解物及其制法和应用

技术领域

本发明涉及生物发酵领域，具体涉及一种酵母水解物及其制备方法和应用。

背景技术

随着养殖业的蓬勃发展，家禽的早期营养越来越受到人们的关注，因为幼龄阶段的生长发育直接关系到家禽后续的生长。提高家禽出壳后一周龄的体增重，能明显缩短家禽上市时间。促进雏鸡的生长发育，增强雏鸡免疫保护，改善雏鸡健康，已成为家禽养殖关注的热点。

目前，与家禽饲料有关的酵母类产品多为酵母培养物、啤酒酵母和发酵废液。酵母培养物是利用酵母发酵代谢产品和变态培养基发酵培养得到；酿酒酵母是酿造啤酒酵母的副产物；发酵废液属于工业废液的深加工处理，上述产品的品质都不稳定，对家禽生长的改善效果不明显。而酵母水解物是通过纯品酵母乳深度酶解而得到的一种稳定、安全、优质的单细胞蛋白原料，其所含的核酸、蛋白质、甘露寡糖和β-葡聚糖是家禽幼龄阶段所必需的营养素，对家禽的肠道发育、免疫机能、生长速度有良好的改善效果。

酵母水解物营养物质丰富，含有多种必需氨基酸、维生素、矿物质、核酸、β-葡聚糖和甘露寡糖等成分。其中所含有的β-葡聚糖能刺激动物体产生对机体免疫功能起关键作用的巨噬细胞，可清除体内损伤、衰亡的细胞核侵入体内的病原微生物。甘露寡糖可以促进某些有益菌生长，抑制肠道致病菌，提高肠道内挥发性脂肪酸总量，并通过提高T淋巴细胞转化率、巨噬细胞吞噬指数以及禽流感抗体效价等来增强机体免疫力。

发明内容

本发明所解决的技术的问题是：目前酵母水解物种类繁多，产品质量参差不齐。本发明致力于提供一种能对雏鸡的肠道发育、免疫机能、生长速度有良好的改善效果的雏鸡饲料专用的酵母水解物。

将酵母水解物在雏鸡饲料的生产中的大量推广使用，能缓解饲用蛋白资源短缺，应用前景十分广阔。

具体来说，本发明提出了如下技术方案。

本发明提供了一种酵母水解物，按质量百分比计，包含下述质量分数的组分：甘露寡糖和β-葡聚糖总量为30-50％，核酸为4-8％，粗蛋白为35-50％。

优选的，其中，按质量百分比计，所述甘露寡糖和β-葡聚糖总量为31.5-50％，核酸为5-7％，粗蛋白为35-45％。

优选的，其中，所述甘露寡糖含量和所述β-葡聚糖含量比例1:4-4:1，优选甘露寡糖含量和所述β-葡聚糖含量比例为1:1.2。

本发明还提供了一种所述酵母水解物的制备方法，包括以下步骤：

(1)酵母发酵培养：将酵母菌株发酵培养，得到酵母乳；

(2)酵母自溶：将步骤(1)所得酵母乳进行自溶；

(3)酵母酶解：向步骤(2)所得产物中加入复合酶制剂，进行酶解后得到酵母水解物；

所述复合酶制剂选自木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶中的一种或两种以上。

优选的，其中，所述酵母菌株选自酿酒酵母菌FX-2(Saccharomyces cerevisiaeFX-2)和/或酿酒酵母菌Z2.1(Saccharomyces cerevisiae Hansen Z2.1)，优选为酿酒酵母菌FX-2(Saccharomyces cerevisiaeFX-2)。

优选的，其中，所述步骤(1)中酵母发酵培养采用含有碳源、氮源和磷源的培养基；

优选的，按质量百分比计，所述碳源的添加量占培养基的80％-90％，所述氮源的添加量占培养基的10％-15％，所述磷源的添加量占培养基的1％-5％；

进一步优选为，按质量百分比计，所述碳源的添加量占培养基的85％，所述氮源的添加量占培养基的12％，所述磷源的添加量占培养基的3％。

优选的，其中，所述碳源为糖蜜和/或淀粉水解糖，所述氮源为氨水和/或硫酸铵，所述磷源为磷酸；

优选的，所述碳源为糖蜜，所述氮源为氨水。

优选的，其中，步骤(1)中所述发酵温度为25-35℃，优选为29-32℃，发酵pH为5.0-7.0，优选为5.0-6.0，发酵时间为15-18小时。

优选的，其中，所述步骤(2)中，以质量百分比计，还需添加占培养基1‰-5‰的柠檬酸。

优选的，其中，在步骤(1)之后和步骤(2)之前，还包括将步骤(1)得到的酵母乳在85-95℃条件下热击的过程。

优选的，其中，所述步骤(3)中，以质量百分比计，加入的4-20‰的复合酶制剂；

优选的，所述复合酶制剂中木瓜蛋白酶的含量为1-5‰、碱性蛋白酶的含量为1-5‰、中性蛋白酶的含量为1-5‰和风味蛋白酶的含量为1-5‰。

优选的，其中，步骤(3)中酶解的时间为6-12h，优选10-12h。

优选的，其中，还包括将步骤(3)所得产物在70-80℃下进行干燥1-2h的过程。

本发明还提供了一种饲料，所述饲料包含所述的酵母水解物。

优选的，所述的饲料，其中，酵母水解物在饲料中的添加量为1-50kg/t。

优选的，其中，当雏鸡为肉雏鸡时，所述酵母水解物在饲料中的添加量为1-20kg/t；优选为5kg/t；

当雏鸡为蛋雏鸡时，所述酵母水解物在饲料中的添加量为5-50kg/t，优选为5-10kg/t。

本发明还提供了一种酵母水解物在饲料领域的应用，优选为鸡饲料领域的应用，更优选为雏鸡饲料领域的应用。

本发明所取得的有益效果是：

本发明中的酵母水解物可作为饲料原料使用，富含蛋白质、氨基酸、小肽、多糖、维生素等成分，可以为雏鸡提供生长所必需营养成分。本发明通过动物实验验证，证实酵母水解物作为雏鸡的饲料具有优势，能为雏鸡提供充足和均衡的营养成分，不仅能改善肠道发育、提高雏鸡生长速度，而且能提高雏鸡的免疫机能，保护幼禽健康。

菌株保藏信息

本发明所用的菌种酿酒酵母FX-2(Saccharomyces cerevisiae FX-2)于2016年8月1日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M2016418，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)-68754052，该菌株在申请号为CN201611141122.8的专利公开文本中已有记载。

本发明所用的酿酒酵母菌株Z2.1(Saccharomyces cerevisiae Hansen Z2.1)，于2005年10月25日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌株保藏编号为CCTCC NO:M205127，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学，邮编：430072，电话：(027)68752319，该菌株在申请号为CN201710522840.8的专利公开文本中已有记载。

具体实施方式

如上所述，本发明提供了一种酵母水解物，按质量百分比计，包含下述质量分数的组分：甘露寡糖和β-葡聚糖总量为30-50％，核酸为4-8％，粗蛋白为35-50％。

优选的，其中，按质量百分比计，所述甘露寡糖和β-葡聚糖总量为31.5-50％，核酸为5-7％，粗蛋白为35-45％。

优选的，其中，所述甘露寡糖含量和所述β-葡聚糖含量比例1:4-4:1，优选为甘露寡糖含量和所述β-葡聚糖含量比例为1:1.2。

本发明还提供了一种所述酵母水解物的制备方法，包括以下步骤：

(1)酵母发酵培养：将酵母菌株发酵培养，得到酵母乳；

(2)酵母自溶：将步骤(1)所得酵母乳进行自溶；

(3)酵母酶解：向步骤(2)所得产物中加入复合酶制剂，进行酶解后得到酵母水解物；

所述复合酶制剂选自木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶中的一种或两种以上。

优选的，其中，所述酵母菌株选自酿酒酵母菌FX-2(Saccharomyces cerevisiaeFX-2)和/或酿酒酵母菌Z2.1(Saccharomyces cerevisiae Hansen Z2.1)，优选为酿酒酵母菌FX-2(Saccharomyces cerevisiae FX-2)。

优选的，其中，所述步骤(1)中酵母发酵培养采用含有碳源、氮源和磷源的培养基；

优选的，按质量百分比计，所述碳源的添加量占培养基的80％-90％，所述氮源的添加量占培养基的10％-15％，所述磷源的添加量占培养基的1％-5％；

进一步优选为，按质量百分比计，所述碳源的添加量占培养基的85％，所述氮源的添加量占培养基的12％，所述磷源的添加量占培养基的3％。

优选的，其中，所述碳源为糖蜜和/或淀粉水解糖，所述氮源为氨水和/或硫酸铵，所述磷源为磷酸；

优选的，所述碳源为糖蜜，所述氮源为氨水。

优选的，其中，步骤(1)中所述发酵温度为25-35℃，优选为29-32℃，发酵pH为5.0-7.0，优选为5.0-6.0，发酵时间为15-18小时。

优选的，其中，所述步骤(2)中，以质量百分比计，还需添加占培养基1‰-5‰的柠檬酸。

优选的，其中，在步骤(1)之后和步骤(2)之前，还包括将步骤(1)得到的酵母乳在85-95℃条件下热击的过程。

优选的，其中，所述步骤(3)中，以质量百分比计，加入的4-20‰的复合酶制剂；

优选的，所述复合酶制剂中木瓜蛋白酶的含量为1-5‰、碱性蛋白酶的含量为1-5‰、中性蛋白酶的含量为1-5‰和风味蛋白酶的含量为1-5‰。

优选的，其中，步骤(3)中酶解的时间为6-12h，优选10-12h。

优选的，其中，还包括将步骤(3)所得产物在70-80℃下进行干燥1-2h的过程。

本发明还提供了一种饲料，所述饲料包含所述的酵母水解物。

优选的，所述的饲料，其中，酵母水解物在饲料中的添加量为1-50kg/t。

优选的，其中，当雏鸡为肉雏鸡时，所述酵母水解物在饲料中的添加量为1-20kg/t；优选为5kg/t；当雏鸡为蛋雏鸡时，所述酵母水解物在饲料中的添加量为5-50kg/t，优选为5-10kg/t。

本发明还提供了一种酵母水解物在饲料领域的应用，优选为鸡饲料领域的应用，更优选为雏鸡饲料领域的应用。

下面对本实施例所用的原料及设备的生产厂家，以及产品分析使用的设备和分析方法进行说明如下，其中所述的化学物质没有标明的均为常规试剂的化学纯级别。实施例所用到的原料的信息及实验设备如表1所示。

表1 实施例中所用到的原料和设备的信息表

本发明实施例和对比例中采用的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae FX-2)的菌体，通过以下方法扩大培养制备得到：

1)菌种活化：挑取菌落一环放入YPD液体培养基中，放入摇床中将菌种活化。

2)菌种纯化：将上一步活化后的菌液梯度稀释铺平板，以获取单个菌落。

3)菌种扩大培养：挑取上一步平板中单个菌落接种至200mLYPD液体培养基，在30℃下，220rpm转速下培养18h；二级种子培养，按照二级培养基体积的10％将一级培养的种子接入1L二级培养基，28℃下，200rpm转速下培养18h；其pH控制在5.5。

4)种子富集：5000rpm离心，用钙离子和镁离子含量低的去离子水洗涤3次，富集得到酿酒酵母种子，至酵母湿重为220g/L。

本发明实施例和对比例中采用的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae HansenZ2.1)的菌体，通过以下方法扩大培养制备得到：

1)菌种活化：挑取菌落一环放入YPD液体培养基中，放入摇床中将菌种活化。

2)菌种纯化：将上一步活化后的菌液梯度稀释铺平板，以获取单个菌落。

3)菌种扩大培养：挑取上一步平板中单个菌落接种至200mLYPD液体培养基，在30℃下，220rpm转速下培养18h；二级种子培养，按照二级培养基体积的10％将一级培养的种子接入1L二级培养基，28℃下，200rpm转速下培养18h；其pH控制在5.5。

4)种子富集：5000rpm离心，用钙离子和镁离子含量低的去离子水洗涤3次，富集得到酿酒酵母种子，至酵母湿重为220g/L。

实施例和对比例中，酵母水解物中蛋白质含量的测定参照GB/T6432-94；核酸含量的测定参考《饲料中总磷的测定分光光度法》(GB/T6437)测定，甘露寡糖和β-葡聚糖的测定采用液相色谱的方法进行测定。

实施例一 酵母水解物的制备

(1)酵母发酵培养

配制培养液，培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为糖蜜和淀粉水解糖，其中糖蜜的质量为4000g，其浓度为35％(质量)；淀粉水解糖2000g，其浓度为40％(质量)。氮源为氨水和硫酸铵，其中，氨水的质量为400g，其浓度为17％(质量)；硫酸铵质量为300g，磷源为磷酸，其质量为750g，其浓度为8％(质量)。120℃灭菌8min，上罐流加，接种50g扩大培养的酿酒酵母菌FX-2种子，发酵温度控制32℃，发酵时间15小时，发酵pH为6.0，获得纯培养液体发酵酵母乳。

(2)酵母自溶

将酵母乳在温度90℃进行热击40s，向所述酵母乳中加入2.5‰柠檬酸调节，升温至50℃，保持温度在50℃下进行自溶8h；

(3)酵母酶解：

调节自溶处理后的溶液pH为5.5，温度60℃，以酵母乳干物质计，加入含2.5‰木瓜蛋白酶、2.5‰碱性蛋白酶，2.5‰中性蛋白酶、2.5‰风味蛋白酶的复合酶制剂进行酶解反应8h。

酶解反应结束后，升温到75℃保温1.5h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品A。

将上述制备得到的酵母水解物产品A进行蛋白质含量、核酸的含量以及甘露寡糖和β-葡聚糖含量的测定。其中，蛋白质的含量为42％，核酸的含量为6％，得到甘露寡糖和β-葡聚糖的含量为40％，其中甘露聚糖含量为18.5％，β-葡聚糖含量为21.5％。

实施例二 酵母水解物的制备

(1)酵母发酵培养

配制培养液，培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为糖蜜和淀粉水解糖，其中糖蜜的质量为3000g，其浓度为45％(质量)；淀粉水解糖3000g，其浓度为30％(质量)。氮源为氨水和硫酸铵，其中，氨水的质量为450g，其浓度为15％(质量)；硫酸铵质量为200g，磷源为磷酸，其质量为700g，其浓度为10％(质量)。120℃灭菌8min，上罐流加，接种50g扩大培养的酿酒酵母菌FX-2种子，发酵温度控制29℃，发酵时间18小时，发酵pH为7.0，获得纯培养液体发酵酵母乳。

(2)酵母自溶

将酵母乳在温度85℃进行热击40s，向所述酵母乳中加入1‰柠檬酸调节，升温至45℃，保持温度在45℃下进行自溶12h；

(3)酵母酶解：

调节自溶处理后的溶液pH为6.0，温度55℃，以酵母乳干物质计，加入含1‰木瓜蛋白酶、1‰碱性蛋白酶，1‰中性蛋白酶、1‰风味蛋白酶的复合酶制剂进行酶解反应12h。

酶解反应结束后，升温到80℃保温2h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品B。

将上述制备得到的酵母水解物产品B进行蛋白质含量、核酸的含量以及甘露寡糖和β-葡聚糖含量的测定。其中，蛋白质的含量为35％，核酸的含量为5％，得到甘露寡糖和β-葡聚糖的含量为50％，其中甘露聚糖含量为22.5％，β-葡聚糖含量为27.5％。

实施例三 酵母水解物的制备

(1)酵母发酵培养

配制培养液，培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为糖蜜和淀粉水解糖，其中糖蜜的质量为3500g，其浓度为40％(质量)；淀粉水解糖2500g，其浓度为35％(质量)。氮源为氨水和硫酸铵，其中，氨水的质量为430g，其浓度为16％(质量)；硫酸铵质量为250g，磷源为磷酸，其质量为730g，其浓度为9％(质量)。120℃灭菌8min，上罐流加，接种50g扩大培养的酿酒酵母菌FX-2种子，发酵温度控制32℃，发酵时间12小时，发酵pH为5.0，获得纯培养液体发酵酵母乳。

(2)酵母自溶

将酵母乳在温度95℃进行热击40s，向所述酵母乳中加入5‰柠檬酸调节，升温至55℃，保持温度在55℃下进行自溶6h；

(3)酵母酶解：

调节自溶处理后的溶液pH为4.0，温度65℃，以酵母乳干物质计，加入含5‰木瓜蛋白酶、5‰碱性蛋白酶，5‰中性蛋白酶、5‰风味蛋白酶的复合酶制剂进行酶解反应6h。

酶解反应结束后，升温到70℃保温1h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品C。

将上述制备得到的酵母水解物产品C进行蛋白质含量、核酸的含量以及甘露寡糖和β-葡聚糖含量的测定。其中，蛋白质的含量为45％，核酸的含量为7％，得到甘露寡糖和β-葡聚糖的含量为31.5％，其中甘露聚糖含量为14.9％，β-葡聚糖含量为16.6％。

对比例一 酵母水解物的制备

(1)酵母发酵培养

配制培养液，培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为糖蜜和淀粉水解糖，其中糖蜜的质量为6000g，其浓度为40％(质量)；氮源为氨水和硫酸铵，其中，氨水的质量为400g，其浓度为17％(质量)；硫酸铵质量为300g，磷源为磷酸，其质量为750g，其浓度为10％(质量)。120℃灭菌8min，上罐流加，接种50g扩大培养的酿酒酵母菌Z2.1，发酵温度控制30℃，发酵时间15小时，发酵pH为5.6，获得纯培养液体发酵酵母乳。

(2)酵母自溶

将酵母乳在温度90℃进行热击40s，向所述酵母乳中加入2.5‰柠檬酸调节，升温至50℃，保持温度在50℃下进行自溶8h；

(3)酵母酶解：

调节自溶处理后的溶液pH为5.0，温度60℃，以酵母乳干物质计，加入含2.5‰木瓜蛋白酶、2.5‰碱性蛋白酶，2.5‰中性蛋白酶、2.5‰风味蛋白酶的复合酶制剂进行酶解反应8h。

酶解反应结束后，升温到75℃保温1.5h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品D。

将上述制备得到的酵母水解物产品D进行蛋白质含量、核酸的含量以及甘露寡糖和β-葡聚糖含量的测定。其中，蛋白质的含量为51％，核酸的含量为10％，得到甘露寡糖和β-葡聚糖的含量为27.3％，其中甘露聚糖含量为12.8％，β-葡聚糖含量为14.5％。

对比例二 酵母水解物的制备

(1)酵母发酵培养

配制培养液，培养液含有碳源、氮源、磷源，其中碳源为糖蜜和淀粉水解糖，其中糖蜜的质量为4000g，其浓度为35％(质量)；淀粉水解糖2000g，其浓度为40％(质量)。氮源为氨水和硫酸铵，其中，氨水的质量为400g，其浓度为17％(质量)；硫酸铵质量为300g磷源为磷酸，其质量为750g，其浓度为8％(质量)。120℃灭菌8min，上罐流加，接种50g扩大培养的酿酒酵母菌FX-2种子，发酵温度控制30℃，发酵时间8小时，发酵pH为6.0，获得纯培养液体发酵酵母乳。

(2)酵母自溶

将酵母乳在温度90℃进行热击40s，向所述酵母乳中加入2.5‰柠檬酸调节，升温至50℃，保持温度在50℃下进行自溶8h；

(3)酵母酶解：

调节自溶处理后的溶液pH为5.0，温度60℃，以酵母乳干物质计，加入含2.5‰木瓜蛋白酶、2.5‰碱性蛋白酶，2.5‰中性蛋白酶、2.5‰风味蛋白酶的复合酶制剂进行酶解反应8h。

酶解反应结束后，升温到75℃保温1.5h，灭活酶，并浓缩干燥，获得酵母水解物产品E。

对酵母水解物产品E进行蛋白质含量、核酸的含量及甘露寡糖和β-葡聚糖含量的测定。其中，蛋白质的含量为48％，核酸的含量为8％，得到甘露寡糖和β-葡聚糖的含量为25％，其中甘露聚糖含量为11.5％，β-葡聚糖含量为13.5％。

实施例和对比例制备得到的酵母水解物产品A-E的主要成分含量总结，见下表2。

表2 实施例和对比例中酵母水解物的主要成分含量

应用例一 酵母水解物对肉雏鸡的应用

1.酵母水解物对肉雏鸡生产性能的影响(死淘率；料重比；平均日增重)

选用1日龄ROSS 308肉雏鸡(购自湖北当阳市种鸡场)300只(公、母混养)，随机分为5个处理组，每个处理组60只肉雏鸡，试验期为42d。

各处理组饲喂不同的试验饲粮，分别饲喂基础日粮、基础日粮+1kg/t实施例一所得的酵母水解物A、基础日粮+5kg/t实施例一所得的酵母水解物A、基础日粮+5kg/t对比例一所得的酵母水解物D、基础日粮+5kg/t对比例二所得的酵母水解物E。基础日粮配方及营养水平如表3所示，试验肉雏鸡自由采食、饮水，采用保温灯取暖调控圈内温度，肉鸡的饲养管理、舍内环境控制依照肉鸡饲养管理标准进行。

表3 基础日粮配方及营养水平

测定指标如下：

死淘率：肉鸡中死亡或者淘汰的肉鸡的比率。

料重比(F/G)：以某一阶段存活的肉鸡增重+死亡和淘汰鸡体增重计算各阶段的料重比和全期料重比。

平均日增重：入栏前记录初始体重，于21、42日龄上午8：00开始，试验肉鸡全群称重(空腹，停料12h)，计算各阶段每只鸡的平均日增重。

酵母水解物对肉雏鸡死淘率和料重比的影响结果见下表4，酵母水解物对肉雏鸡平均体重的影响结果见下表5。

表4 酵母水解物对肉雏鸡死淘率和料重比的影响

同列数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下表同。

表5 酵母水解物对肉雏鸡平均体重的影响

结果表明：在日粮中添加1、5kg/t实施例一制备得到的酵母水解物A，ROSS 308肉雏鸡21日龄的平均体重分别提高了1.25％、2.77％，42日龄的平均体重分别提高了2.74％、3.49％，1～21日龄的料重比分别降低了0.06、0.10，1～42日龄的料重比分别降低了0.09、0.13，1～42日龄的死淘率分别降低了6.58、4.49个百分点。

在日粮中添加5kg/t对比例一所得的酵母水解物D，ROSS 308肉雏鸡21日龄的平均体重下降0.32％，42日龄平均体重下降0.40％；1～21日龄及1～42日龄的料重比分别降低0.03和0.01，死淘率分别下降-0.31和2.84个百分点。

在日粮中添加5kg/t对比例二所得的酵母水解物E，ROSS 308肉雏鸡21日龄和42日龄的平均体重分别上升0.32％和0.18％；1～21日龄及1～42日龄的料重比分别降低0.02和-0.01，死淘率分别下降-0.63和2.09个百分点。

由以上实验结果可以看出，肉雏鸡在食用本发明实施例制备得到的酵母水解物后，相较于仅食用基础日粮和对比例制备得到的酵母水解物的肉雏鸡，其死淘率，料重比(F/G)降低，平均日增重增加。

2.酵母水解物对肉雏鸡肠道形态结构的影响(绒毛高度)

以下是本实验中肉鸡肠道形态结构的测定，主要测定其绒毛高度(μm)，方法如下：

选取21日龄的雏鸡，称重后屠宰，取出肠道，分离十二指肠(U字型肠襻)、空肠(十二指肠远端到卵黄囊憩室)和回肠(卵黄囊憩室到回盲结合处)，剥离肠系膜和结缔组织，并剪开，用生理盐水冲洗后，用滤纸将液体吸干，然后分别剪下十二指肠(离胃幽门5cm处)、空肠中段和回肠中段约2cm的肠段组织，放入8％的福尔马林固定液中保存，用冰生理盐水冲洗肠内部食糜，用40g/L多聚甲醛磷酸缓冲液(0.1mol/L，pH7.4)固定48h，常规石蜡包埋，连续切片(厚6μm)，每隔10张取1张，进行常规HE和糖原及多糖高碘酸-Schiff氏剂(PAS)染色。

经HE染色后，用Leica-DFC450.C显微镜观察小肠黏膜结构，各段小肠取不相邻的5张切片，每张切片选取绒毛完整，走向平直处拍照，照片应用Image-Pro Plus 5.0图像分析系统进行分析，每张照片分别选取5根最长的绒毛高度和最深进行测量。酵母水解物对肉鸡肠道形态结构的影响测定结果如下表6。

表6 酵母水解物对肉鸡肠道形态结构的影响

结果表明：在日粮中添加1、5kg/t酵母水解物A，ROSS 308肉雏鸡十二指肠的肠绒毛高度分别提高了6.96％、13.48％，空肠的肠绒毛高度分别提高了19.94％、26.93％，十二指肠的肠绒毛高度分别提高了8.78％、12.66％.

在日粮中添加对5kg/t比例一所得的酵母水解物D及对比例二所得的酵母水解物E，ROSS 308肉雏鸡十二指肠的肠绒毛高度分别提高了2.68％、4.10％，空肠的肠绒毛高度分别提高了8.04％、4.88％，十二指肠的肠绒毛高度分别提高了6.79％、2.91％，且差异均不显著。

由以上实验结果可以看出，肉雏鸡在食用本发明实施例制备得到的酵母水解物后比食用对比例制备得到的酵母水解物的肉雏鸡肠绒毛高度提高的百分比例高。

3.酵母水解物对肉雏鸡传染性支气管炎阳性率、禽流感抗体效价的影响

肉鸡传染性支气管炎阳性率、禽流感抗体效价的测定方法如下：

肉鸡在1日龄接种新城疫疫苗，8日龄接种“新城疫-传染性支气管炎”二联疫苗及“新城疫-禽流感”二联疫苗。之后，30日龄、40日龄，每个重复随机抽取10羽，翼下静脉采血，3000r/min离心10min分离制备血清，-20℃保存，进行血凝和血凝抑制试验，测定传染性支气管炎阳性率/％、禽流感H

酵母水解物对肉鸡传染性支气管炎阳性率、禽流感抗体效价的影响的检测结果如下表7。

表7 酵母水解物对肉鸡传染性支气管炎阳性率、禽流感抗体效价的影响

结果表明：在日粮中添加1、5kg/t酵母水解物A，肉雏鸡30日龄的传染性支气管炎阳性率分别下降33.33、26.67个百分点，肉雏鸡40日龄的传染性支气管炎阳性率分别下降22.50、18.17个百分点，肉雏鸡30日龄的禽流感H

在日粮中添加5kg/t对比例一所得的酵母水解物D，5kg/t对比例二所得的酵母水解物E，肉雏鸡30日龄的传染性支气管炎阳性率分别下降31.62、24.54个百分点，肉雏鸡40日龄的传染性支气管炎阳性率分别下降20.32、21.58个百分点，肉雏鸡30日龄的禽流感H

应用例二 酵母水解物对蛋雏鸡的应用

1.酵母水解物对蛋雏鸡生长发育的影响

以下是本发明所述酵母水解物对蛋雏鸡生产性能影响的实验：

选用1日龄海兰褐商品代蛋雏鸡(购自湖北当阳市种鸡场)360只(公、母混养)，随机分为6个处理组，每个处理组50只蛋雏鸡试验期42d。

各处理组饲喂不同的试验饲粮，分别饲喂基础日粮、基础日粮+5kg/t实施例二制备得到的酵母水解物B、基础日粮+10kg/t实施例二制备得到的酵母水解物B、基础日粮+20kg/t酵母水解物实施例二制备得到的酵母水解物B、基础日粮+5kg/t对比例一所得的酵母水解物D、基础日粮+5kg/t对比例二所得的酵母水解物E。其中，基础日粮配方及营养水平如表8所示，试验蛋雏鸡自由采食、饮水，采用保温灯取暖调控圈内温度，蛋鸡的饲养管理、舍内环境控制依照蛋鸡饲养管理标准进行。

表8 基础日粮配方及营养水平

测定指标：

平均日增重：入栏前记录初始体重，于21、42日龄上午8：00开始，试验蛋雏鸡全群称重(空腹，停料12h)，计算各阶段每只鸡的平均日增重，检测结果见表9。

表9 酵母水解物对蛋雏鸡生长发育的影响

生长速度的结果表明：在日粮中添加5、10、20kg/t酵母水解物，蛋雏鸡21日龄的平均体重分别增加了4.04％、4.61％、1.89％，42日龄的平均体重分别增加了6.90％、6.06％、5.49％。

在日粮中添加5kg/t对比例一所得的酵母水解物D，蛋雏鸡21日龄的平均体重反而下降0.64％，42日龄平均体重上升1.06％；日粮中添加5kg/t对比例二所得的酵母水解物E，蛋雏鸡21日龄及42日龄的平均体重分别增加1.81％和4.41％。

2.酵母水解物对蛋雏鸡胫骨发育的影响

胫骨长度的测定方法如下：在21日龄，每个处理随机挑选10只蛋雏鸡，用游标卡尺测量“胫骨长度”：以禽腿无毛处的关节上端到第二脚趾(小趾骨)的长度(mm)为准，测定结果如下表10。

表10 酵母水解物对蛋雏鸡胫骨发育的影响

胫骨发育的结果表明：在日粮中添加5、10、20kg/t酵母水解物，蛋雏鸡21日龄的平均胫骨长度分别增加了5.38％、5.96％、2.69％.

在日粮中添加对5kg/t比例一所得的酵母水解物D，蛋雏鸡21日龄的平均胫骨长度反而下降1.54％；在日粮中添加5kg/t对比例二所得的酵母水解物E，蛋雏鸡21日龄的平均胫骨长度增加0.77％。

3.酵母水解物对蛋雏鸡新城疫苗抗体效价的影响

蛋雏鸡新城疫抗体效价的测定：

蛋雏鸡在1日龄接种新城疫疫苗，8日龄接种“新城疫-传染性支气管炎”二联疫苗及“新城疫-禽流感”二联疫苗。之后，21日龄、42日龄，每个重复随机抽取10羽，翼下静脉采血，3000r/min离心10min分离制备血清，-20℃保存，进行血凝和血凝抑制试验，测定新城疫抗体效价/log

表11 酵母水解物对蛋雏鸡新城疫抗体效价的影响

血液免疫的结果表明：在日粮中添加5、10、20kg/t酵母水解物，蛋雏鸡21日龄的新城疫抗体效价分别提高了0.44、0.55、0.89个log

在日粮中添加对5kg/t比例一所得的酵母水解物D，蛋雏鸡21日龄的新城疫抗体效价反而降低了0.21个log

综上，针对目前雏鸡养殖中存在的问题，本发明提供的饲用酵母水解物不仅能为雏鸡提供蛋白质、核酸、维生素等营养成分，而且能改善肠道发育、提高雏鸡生长速度，并且提高雏鸡的免疫机能，保护幼禽健康。

以上所述，仅是本发明实施的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡在本发明的精神和原则之内所做的修改、等同替换和改进等，均需要包含在本发明的保护范围之内。