一种用于抑制前列腺癌的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于中医药技术领域，尤其涉及一种用于抑制前列腺癌的中药组合物及其制备方法。

背景技术

目前，前列腺癌(prostate cancer，PCa)是老年男性常见的恶性肿瘤之一，在欧洲，每年新确诊的PCa多达260万，占男性肿瘤的11％，占欧盟死亡人数的9％。在美国前列腺癌发病率在所有男性恶性肿瘤中居第一位，死亡率居第二位。我国前列腺癌患者的发病率虽低于西方国家，但近年来其发病率已跃居泌尿生殖系恶性肿瘤的第3位。根治性手术与放疗仍然是早期前列腺癌的主要治疗手段，但是由于PCa的发病临床早期症状少，50～80％以上患者就诊时往往已到晚期，失去了手术根治时机。内分泌治疗是目前晚期前列腺癌的主要治疗方法，但经过中位时间14～30个月治疗后，几乎所有患者病变都逐渐发展为激素非依赖性前列腺癌，这为晚期前列腺癌的临床治疗提出了难题。

前列腺癌是老年男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤，其发病率在美国所有男性恶性肿瘤中居第一位，占男性癌症死亡的第二位，我国前列腺癌的发病率近年来呈明显增高趋势，严重影响着老年男性的生活质量和预期寿命。内分泌治疗是晚期前列腺癌的主要治疗方法，但经过中位时间14～30个月，几乎所有患者都将逐渐进展为雄激素非依赖性前列腺癌，放疗、化疗等均不能有效地控制肿瘤进展，其中位生存期小于20个月。化疗药物的毒副作用也是难以被患者与临床医师难以接受的重要原因。TSD是紫杉醇的衍生物，紫杉醇是从紫杉的树皮中提取的一种化合物，具有抗癌作用。美国临床肿瘤学会于2014年年会上报道了TAX327和SWOG9916这2个Ⅲ期临床试验结果，从而确立了TSD作为HRPC治疗的核心地位。临床试验中，应用TSD的患者不良反应较为明显，表现为胃肠道的症状(如恶心、呕吐)加重，心血管系统的不良事件(如静脉血栓、肺栓塞等)增多。赵强研究发现多西紫杉醇联合雌二醇氮芥治疗晚期雄激素非依赖性前列腺癌常见的毒副反应为恶心、呕吐、白细胞减少、血红蛋白减少及血小板减少等，未出现严重肝肾功能损害及心脏功能受损情况。最新的研究表明晚期前列腺癌M0与M1阶段治疗与否疗效无差别。

面对医学难题与社会需求，现代中医的参与为攻克这一难点做出了积极的努力。古代中医学并无PCa的明确诊断，但是按临床症状辨证论治，参考“癃闭”、“血尿”、“癥瘕”等治疗PCa仍然显示中医药对晚期前列腺癌的优势与特点。首先，中医将人体看做一个有机的整体，从调节整体的阴阳，协调各个脏腑的功能入手，调节人体免疫机制，增强机体抵抗力，可以达到治疗肿瘤的目的。其次，研究证明，中医药治疗可与现代医学治疗产生协同作用，增强抗肿瘤的能力；中医药治疗在减轻西医手术、内分泌治疗、放疗、化疗等副作用方面效果明显，可以提高患者对治疗的耐受性和依从性，改善患者生活质量。

针对前列腺癌的治疗难点，近10年来，我们对前列腺癌的病因病机、系统辨证及中西医结合诊疗等方面也进行了积极的探索，提出该病的病机特点主要是“正虚邪实、虚实夹杂、以虚为主”，临床应用中医扶正抑瘤法治疗晚期前列腺癌，在延长晚期前列腺癌患者生存期、延缓病情进展等方面，取得较好的临床疗效，初步显示出中医药治疗前列腺癌的良好前景。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：

(1)前列腺癌是最常见的老年男性恶性肿瘤之一，近年发病率不断上升，临床早期症状少，约50～80％的前列腺癌患者确诊时已处于晚期，容易发生骨转移，在初次确诊的前列腺癌患者中，骨转移发生率10％～20％；而在进展期，其发生率超过80％。

(2)晚期前列腺癌主要治疗方法是内分泌治疗，雄激素非依赖性前列腺癌是目前治疗难点。内分泌治疗可以延缓肿瘤进展，但几乎都发展为雄激素非依赖性前列腺癌，中位转化时间14～30个月，同时内分泌治疗具有潮热、并发脊髓压迫、乳房疼痛、肥胖及发生心血管疾病、骨质疏松、性欲缺失、勃起功能障碍等副作用。

解决以上问题及缺陷的难度为：晚期前列腺癌主要治疗方法是内分泌治疗，雄激素非依赖性前列腺癌是目前治疗难点。西医内分泌治疗是目前一线治疗方案，但由于其副作用大具有缺陷。

解决以上问题及缺陷的意义为：近10年来，对前列腺癌的病因病机、系统辨证及中西医结合诊疗等方面进行了积极的探索，临床应用抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方)治疗晚期前列腺癌，在延长晚期前列腺癌患者生存期、延缓病情进展，改善不良反应等方面，取得较好的临床疗效，具有临床实践意义。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种用于抑制前列腺癌的中药组合物及其制备方法。

本发明是这样实现的，一种用于抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方)，所述用于抑制前列腺癌的中药组合物由生地黄20～30g、知母15～30g、生黄芪 30～80g、淫羊藿10～20g、巴戟天15～30g、全蝎3～10g、白术15～30g、茯苓15～30g、甘草6～20g、黄柏9～20g、西洋参10～20g、龟甲30～60g、白花蛇舌草10～30g组成。

进一步，所述用于抑制前列腺癌的中药组合物的制剂剂型为胶囊剂、片剂、口服液、汤剂或丸剂。

本发明的另一目的在于提供一种用于抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方)在抑制前列腺癌中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种应用所述的用于抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方)的用于抑制前列腺癌的中药组合物的制备方法，所述用于抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方)的制备方法包括以下步骤：

步骤一，按比例称取生地黄、黄柏，第一次加8～10倍量水，浸泡20～40min，加热煎煮1～2h，过滤；第二次加6～9倍量的水，煎煮1～2h，过滤，滤液合并，浓缩至60℃热测相对密度1.15～1.20，放冷，加适量乙醇使含醇量达50～70％，充分搅拌，冷藏24～36h，过滤得滤液A，备用。

步骤二，按比例称取生黄芪、西洋参，加6～10倍量40～60％乙醇，浸泡 20～40min，回流提取2～3次，每次1～3h，过滤，合并滤液得滤液B，备用。

步骤三，按比例称取茯苓、甘草，加6～9倍量70～90％乙醇，浸泡10～30min，回流提取2～3次，每次1～3h，过滤，合并滤液得滤液C，备用。

步骤四，将滤液A、滤液B和滤液C合并，减压回收乙醇，继续浓缩至60℃热测相对密度为1.25～1.30的清膏。

步骤五，按比例称取知母、淫羊藿、巴戟天、全蝎、白术、龟甲、白花蛇舌草，粉碎成120～140目粉，加入上述清膏中，搅拌均匀，真空干燥，干浸膏粉碎成80～120目粉，备用。

步骤六，取干膏粉和淀粉，混和均匀，用70～90％乙醇为粘合剂制软材，筛网制粒，整粒，即得用于抑制前列腺癌的中药组合物。

结合上述的所有技术方案，本发明所具备的优点及积极效果为：本发明提供的用于抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方)，根据中医药理论和前列腺癌发病机制选取原料配伍制成，各组分配比严谨，邪正兼顾，有显著的抗肿瘤作用，能抑制前列腺癌生长，延缓前列腺癌疾病发展，提高患者生活质量，减少不良反应的发生。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明实施例提供的用于抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方) 的制备方法流程图。

图2是本发明实施例提供的前列腺癌荷瘤裸鼠四组瘤体照片示意图。

图3是本发明实施例提供的前列腺癌荷瘤裸鼠四组肿瘤瘤体质量示意图。

图4是本发明实施例提供的前列腺癌荷瘤裸鼠四组肿瘤生长曲线示意图。

图5是本发明实施例提供的前列腺癌荷瘤裸鼠四组PC3细胞活性情况(OD 值)。

图6是本发明实施例提供的A.四组细胞增殖的PCNA免疫染色；B.四组细胞凋亡的TUNEL法评估。与对照组相比，*P<0.05和**P<0.01。

图7是本发明实施例提供的每组差异表达的miRNA的热图分析(每行代表一个miRNA，红色表示较高表达，绿色表示较低表达)；B.每组改变的miRNA 重叠部分的维恩图。

图8是本发明实施例提供的注：组间治疗后相比，*P<0.05；同组治疗前后比较**P<0.05。

图9是本发明实施例提供的生活质量评价森林图。

图10是本发明实施例提供的不良反应评价森林图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种用于抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方)及其制备方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。

本发明实施例提供的用于抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方)由生地黄20～30g、知母15～30g、生黄芪30～80g、淫羊藿10～20g、巴戟天15～30g、全蝎3～10g、白术15～30g、茯苓15～30g、甘草6～20g、黄柏9～20g、西洋参10～20g、龟甲30～60g、白花蛇舌草10～30g组成。

本发明实施例提供的用于抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方)的制剂剂型为胶囊剂、片剂、口服液、汤剂或丸剂。

如图1所示，本发明实施例提供的用于抑制前列腺癌的中药组合物(扶正抑瘤方)及其制备方法包括以下步骤：

S101，按比例称取生地黄、黄柏，第一次加8～10倍量水，浸泡20～40min，加热煎煮1～2h，过滤；第二次加6～9倍量的水，煎煮1～2h，过滤，滤液合并，浓缩至60℃热测相对密度1.15～1.20，放冷，加适量乙醇使含醇量达50～70％，充分搅拌，冷藏24～36h，过滤得滤液A，备用。

S102，按比例称取生黄芪、西洋参，加6～10倍量40～60％乙醇，浸泡20～40min，回流提取2～3次，每次1～3h，过滤，合并滤液得滤液B，备用。

S103，按比例称取茯苓、甘草，加6～9倍量70～90％乙醇，浸泡10～30min，回流提取2～3次，每次1～3h，过滤，合并滤液得滤液C，备用。

S104，将滤液A、滤液B和滤液C合并，减压回收乙醇，继续浓缩至60℃热测相对密度为1.25～1.30的清膏。

S105，按比例称取知母、淫羊藿、巴戟天、全蝎、白术、龟甲、白花蛇舌草，粉碎成120～140目粉，加入上述清膏中，搅拌均匀，真空干燥，干浸膏粉碎成80～120目粉，备用。

S106，取干膏粉和淀粉，混和均匀，用70～90％乙醇为粘合剂制软材，筛网制粒，整粒，即得用于抑制前列腺癌的中药组合物。

下面结合附图对本发明的技术效果作详细的描述。

图2是本发明实施例提供的前列腺癌荷瘤裸鼠四组瘤体照片示意图。

图3是本发明实施例提供的前列腺癌荷瘤裸鼠四组肿瘤瘤体质量示意图。

图4是本发明实施例提供的前列腺癌荷瘤裸鼠四组肿瘤生长曲线示意图。

图5是本发明实施例提供的前列腺癌荷瘤裸鼠四组PC3细胞活性情况(OD 值)。

相关论文：[1]FuWei，Hong Zhiming，You Xujun，Din Jing，Chen Baishu， ZhaoBeibei，Yuan Gengyan，Li Qixin.Enhancement of anticancer activity of docetaxelby combination with Fuzheng Yiliu decoction in a mouse model of castration-resistant prostate cancer[J].Biomedicine&Pharmacotherapy，2019， 118:109374.

[2]傅伟，李其信，陈柏书，赵贝贝，远庚彦，蔡昌龙，林伟明，杨林，张邦球，游旭军，丁劲.扶正抑瘤方对前列腺癌荷瘤裸鼠的抑癌作用及血清IL-2表达的研究[J].中医药导报，2018，24(23):24-27+30。

如图6所示，A每组差异表达的miRNA的热图分析(每行代表一个miRNA，红色表示较高表达，绿色表示较低表达)；B.每组改变的miRNA重叠部分的维恩图。

临床方面，前期采用扶正抑瘤方联合内分泌治疗晚期前列腺癌患者46例，治疗后治疗组(扶正抑瘤方+内分泌治疗)副作用的总发生率为21.4％，对照组 (内分泌治疗)的副作用总发生率为72.2％，具有统计学差异(P<0.05)，见表 1。AMS、I-PSS量表可以进行治疗前后患者生活质量变化的评估，两组间治疗前无统计学差异；治疗后组间比较，具有统计学差异(P<0.05)，见表2、3。联合组在减少夜尿次数、增加最大尿流率方面优于单纯内分泌治疗组(P<0.05)，见图7。

表1：两组患者副作用总发生率比较

注：X

表2：治疗前后AMS量表总分比较

注：同组治疗前后比较，*P<0.05；组间治疗前比较，#P﹥0.05；组间治疗后比较，△P<0.05。

表3：治疗前后的I-PSS评分比较

注：同组治疗前后比较，*P<0.05；组间治疗前比较，#P﹥0.05；组间治疗后比较，△P<0.05。

如图8所示，注：组间治疗后相比，*P<0.05；同组治疗前后比较**P<0.05。

表4：扶正抑瘤方、多西他赛和联合处理的肿瘤组织中与对照组肿瘤组织相比，排名前20的差异表达miRNA列表

表5各组裸鼠IL-2含量比较(

注：与对照组比较，

表6各组裸鼠PC-3细胞活性比较(

注：与对照组比较，

相关论文：[1]傅伟，王树声，李其信，远庚彦，游旭军，丁劲.扶正抑瘤方对前列腺癌内分泌治疗影响的Meta分析[J].中国中西医结合外科杂志，2018， 24(04):390-395。

前期通过CNKI、CHKD、CBM、PubMed等搜索扶正抑瘤方联合内分泌治疗前列腺癌的RCT研究，结果共纳入7个RCT研究，共401例患者。荟萃分析结论提示：与单纯内分泌治疗相比，扶正抑瘤中药复方联合内分泌治疗能够提高肿瘤患者生活质量且减少患者不良反应的发生率。6篇文献报道了肿瘤患者的生活质量。异质性检验显示，X

4篇文献报道了肿瘤患者的不良反应情况。异质性检验显示，贫血方面 X

下面结合药理学分析对本发明的技术方案作进一步的描述。

扶正抑瘤方组比多西紫杉醇组效果显著，联合用药组效果最佳(见表7)。

表7前列腺癌荷瘤裸鼠各组瘤体体质量数据(g)

和对照组比较各实验处理组的小鼠肿瘤生长具有不同程度的抑制作用，且差异明显；联合用药组的肿瘤体积增长最慢，多西紫杉醇组和联合用药组抑癌作用差异显著(p<0.01)，扶正抑瘤方组次之(p<0.05)(见表8、表9)。

表8前列腺癌荷瘤裸鼠各组不同阶段体重(g)

表9前列腺癌荷瘤裸鼠各组不同阶段体积(mm3)

分离各组小鼠脾脏细胞，与靶细胞PC-3共培养，MTS检测靶细胞增殖情况， 24、48、72h后前列腺癌荷瘤裸鼠各组PC-3细胞活性情况详见表10。

表10 24、48、72h后前列腺癌荷瘤裸鼠各组PC-3细胞活性情况

收集各组小鼠血清，ELISA法检测IL-2的水平；和对照组比较，各个实验处理组的IL-2水平均有不同程度的下降，扶正抑瘤方组和多西紫杉醇组的IL-2 有一定程度的表达下调，但无统计学意义；联合用药组的IL-2水平下降显著 (p<0.01)(见表11)。

表11前列腺癌荷瘤裸鼠各组IL-2水平表达情况(pg/ml)

本发明的结果发现各组带瘤小鼠脾脏细胞和PC-3细胞共培养，PC-3细胞活力最好的是对照组，活力最差的是扶正抑瘤中药复方组，各实验处理组和对照组比较均有统计学意义，说明扶正抑瘤中药复方可能具有促进小鼠脾脏细胞对肿瘤细胞PC-3细胞的杀伤作用。

下面结合临床数据对本发明的技术效果作详细的描述。

患者，男，78岁，2010年查TPSA：160.8ng/ml，外院完善检查诊断为前列腺腺癌伴骨转移、双肺转移，Gleason评分：3+4＝7；予以诺雷德+康士得治疗， 2011年4月查TPSA：0.056ng/ml，胸部CT：明显好转；2010年～2013年门诊一直坚持间歇内分泌治疗+扶正抑瘤中医药调理，坚持扶正抑瘤中医药内服，睾酮波动于0.167nmol/L～10.75nmol/L，2012年3月26日查睾酮为0.306nmol/L，全身一般情况良好。

男，78岁，2010年查TPSA：160.8ng/ml，外院完善检查诊断为前列腺腺癌伴骨转移、双肺转移，Gleason评分：3+4＝7；予以诺雷德+康士得治疗，2011 年4月查TPSA：0.056ng/ml，胸部CT：明显好转；2010年～2013年门诊一直坚持间歇内分泌治疗+扶正抑瘤中医药调理，TPSA波动于0.016ng/ml～1.650ng/ml；2013年4月22日复查TPSA为0.068ng/ml，FPSA为0.037ng/ml，全身一般情况良好。

表12原始数据

本发明扶正抑瘤法治疗晚期前列腺癌的临床疗效，对213例晚期前列腺癌患者进行回顾性分析，初步探索扶正抑瘤法对晚期前列腺癌生存期的影响，并探讨生存期与患者疾病发展阶段、病理分期的相关性，探索中医扶正抑瘤法的治疗效果及生存预后因素。方法：建立前列腺癌数据库，回顾性分析2002年12 月至2013年5月广东省中医院213例晚期前列腺癌患者，并对资料库病人进行随访追踪，记录其生存时间，对随访患者Gleason评分、疾病发展阶段进行数据分析，运用SPSS 18.0统计软件进行统计分析。结果：1.应用中医扶正抑瘤法治疗晚期前列腺癌患者中位生存时间为56.81个月，5年累积生存率为44％，标准误为3％，患者5年累积生存率的95％置信区间为44％±1.96×3％，即(38.12％， 49.88％)。AIPC的中位生存时间为27个月，HRPC的中位生存时间为22个月。 2.Gleason评分﹤8分组的中位生存时间为68个月，Gleason评分≥8分组的中位生存时间为45个月，对两个组的生存率进行Log rank检验的结果：X2＝25.19， P＝0.000<0.05。结论：扶正抑瘤法可延长晚期前列腺癌患者的生存期，Gleason 评分越高，生存期越短；Gleason评分越低，生存期越长，Gleason评分可作为预测评判前列腺癌生存的一个重要因子。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。