柏科植物提取物及其在制备心律失常的预防和治疗药物中的应用

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及柏科植物提取物及其在制备心律失常的预防和治疗的应用。

背景技术

心律失常是指心脏冲动的频率、节律、起源部位、传导速度或激动次序的异常，是心血管疾病中重要的一组疾病。心律失常按发生时心率的快慢临床上常分为快速型心律失常和缓慢型心律失常；快速型心律失常有窦速、房性早搏(房速、房扑、房颤)、室性早搏(二三联律、室扑、室颤等)，缓慢型心律失常有窦房停搏、Ⅰ度房室阻滞、Ⅱ度房室阻滞、Ⅲ度房室阻滞等。心律失常的临床表现主要为心悸、心慌、胸闷、胸痛、气短、乏力、呼吸困难、头晕等症状。主要危害是导致心脏的射血减少，严重的心律失常甚至可以导致患者出现低血压、休克等。有些可以导致阿斯综合征发作，引起患者昏迷、意识不清、肢体抽搐，甚至导致患者猝死。心脏性猝死(最严重的心率失常)的救治成功率不足1％，即使在发达国家，在有良好的救治设备和训练有素的专业人员的条件下，心脏性猝死救治成功率也低于5％。因此，寻求安全、快速、有效的抗心律失常药至关重要。

目前临床上常用的抗心律失常药物有四类，Ⅰ类药阻滞快速钠通道，根据对钠通道阻滞强度和阻滞后通道的复活时间常数又分为Ⅰa、Ⅰb、Ⅰc、个亚类，分别以奎尼丁、利多卡因和普罗帕酮和为代表，Ⅱ类药阻断β肾上腺素能受体，美托洛尔、阿替洛尔为代表，Ⅲ类药阻滞钾通道与延长复极，以胺碘酮和索他洛尔为代表，Ⅳ类药阻滞慢钙通道，以维拉帕米和地尔硫卓为代表。在这四类中，胺碘酮是目前临床上较为广泛使用的抗心律失常药，主要适用于各种室上性(包括心房扑动与心房纤颤)与室性心律失常；尤其适用于器质性心脏病、心肌梗死后伴心功能不全的心律失常，其作用机理主要是阻滞多个离子通道，首先可以阻滞钾通道，抑制复极过程，延长心肌细胞的有效不应期和动作电位的时程。同时可以轻度阻滞钠离子信道和钙离子信道，另外具有轻度拮抗α、β肾上腺素素能受体，扩张血管，可以用于改善心绞痛的症状。胺碘酮在抗心律失常治疗时常出现以下的不良反应：1、心血管的不良反应，常见的有窦性心动过缓、房室传导阻滞、Q-T间期延长及低血压，甚至心功能不全；2、胃肠道反应，如恶心、呕吐、畏食、便秘、肝功能异常(转氨酶升高)3、皮肤对光敏感及面部色素沉着；4、少数人可发生甲状腺功能亢进或减退；5、最为严重又罕见的是肺间质纤维化改变；此外可能会出现低血钾，使用时要密切检测血清中钾的含量。

目前，柏科植物在心律失常的预防和治疗方面的应用及药理功效，尚未有任何报导及文献公开。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了柏科植物提取物及其在制备心律失常的预防和治疗药物中的应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是：

一种柏科植物提取物，所述柏科植物包括侧柏、日本扁柏或叉子圆柏中的至少一种，所述提取物为所述柏科植物的叶片的醇提物。

优选地，所述提取物为所述柏科植物的叶片的70～80％乙醇提取物，通过以下方法制备得到：取所述柏科植物的叶片，加入70～80％乙醇浸泡提取后，对提取液进行干燥，即得所述柏科植物提取物。

优选地，所述柏科植物的叶片与所述70～80％乙醇的配方比例为90～110g：450～550mL。

优选地，所述浸泡提取时间为3～7天。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是：

一种心律失常的预防药物，所述药物包括上述的柏科植物提取物。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之三是：

一种心律失常的治疗药物，所述药物包括上述的柏科植物提取物。

优选地，在所述心律失常的预防药物中，所述药物的用药剂量按所述柏科植物提取物的重量计算，为250～350mg/60kg体重；在所述心律失常的治疗药物中，所述药物的用药剂量按所述柏科植物提取物的重量计算，为250～350mg/60kg体重。

优选地，所述药物为口服给药剂型。

优选地，将所述柏科植物提取物溶于植物油(优选为橄榄油)，得到所述药物；或者将所述柏科植物提取物与药学上可接受的辅料或载体配合，采用药学上可接受的工艺，制成粉剂、锭剂、胶囊或膏剂等。

在本发明的一个优选实施方案中，侧柏、日本扁柏、叉子圆柏的提取物制备方法包括：从侧柏、日本扁柏、叉子圆柏的树上剪下的树枝、洗净、晾干后，摘下树叶，分别称取100克侧柏、日本扁柏、叉子圆柏的树叶，分别加入70～80％乙醇450～550mL的浸泡后、超声，取出浸泡液用干燥箱烘干。成人按照为300mg/60kg的剂量，溶于植物油(优选为橄榄油)成为液体状服用。也可以制成粉剂、锭剂、胶囊、膏剂。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之四是：

所述的柏科植物提取物在制备心律失常的预防药物中的应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之五是：

所述的柏科植物提取物在制备心律失常的治疗药物中的应用。

本发明涉及的柏科(Cupressaceae)植物具体包括：

侧柏Platycladus orientalis

日本扁柏Chamaecyparis obtusa

叉子圆柏Juniperus sabina，又称新疆圆柏

福建柏Fokienia hodginsii

塔柏Juniperus chinensis'Pyramidalis'

圆柏Sabina chinensis

龙柏Juniperus chinensis

本发明所涉及的设备、试剂、工艺、参数等，除有特别说明外，均为常规设备、试剂、工艺、参数等，不再作实施例。

本发明的“药学上可接受的辅料或载体”中，所述辅料包括但不限于稀释剂、溶剂、赋形剂、吸收剂、润湿剂、黏合剂、崩解剂、润滑剂、增溶剂、乳化剂、助悬剂、表面活性剂、成膜剂、抛射剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、杀菌剂、防腐剂等；所述载体指具有改变化合物进入人体的方式和在体内的分布，控制释放速度达到控释或缓释，靶向输送至靶器官等作用的体系，包括但不限于脂质体、微球、微囊、固体分散体、胶束、微乳液、凝胶、缓释型载体、控释型载体、靶向型载体、纳米颗粒材料等。

本发明所列举的所有范围包括该范围内的所有点值。

本发明所述“大约”、“约”或“左右”等指的是所述范围或数值的±20％范围内。

本发明中，％在表示浓度时，除有特别说明外，溶质为液体时％代表体积百分比，溶质为固体时％代表g/100mL。

本技术方案与背景技术相比，它具有如下优点：

本发明发现侧柏、日本扁柏、叉子圆柏的叶片的70～80％乙醇提取物在抗心律失常的预防和治疗上均有明显的功效，可以用于制备相应的药物，以预防、救治心律失常的患者。

附图说明

图1为小鼠正常心电图及日本扁柏空白对照，可见给予0.10mL/10g日本扁柏的75％乙醇提取物未诱发小鼠心律失常。

图2为给予橄榄油后的小鼠心电图，可见橄榄油对于小鼠心律没有明显影响，未诱发心律失常。

图3为给予氯化钡后的小鼠心电图，可见氯化钡诱发了小鼠心律失常二联律。

图4用于说明给予0.10mL/10g侧柏的75％乙醇提取物可以预防氯化钡诱发的心律失常。

图5用于说明给予0.05mL/10g日本扁柏的75％乙醇提取物没有预防氯化钡诱发的心律失常，因剂量过小。

图6用于说明给予0.075mL/10g日本扁柏的75％乙醇提取物没有预防氯化钡诱发的心律失常，因剂量小，达不到预防作用。

图7用于说明给予0.10mL/10g日本扁柏的75％乙醇提取物可以预防氯化钡诱发的心律失常。

图8用于说明给予0.15mL/10g日本扁柏的75％醇提取物可以预防氯化钡诱发的心律失常。

图9用于说明给予0.10mL/10g叉子圆柏的75％乙醇提取物可以预防氯化钡诱发的心律失常。

图10用于说明给予0.10mL/10g福建柏的75％乙醇提取物后，对于氯化钡诱发的心律失常没有明显预防作用。

图11用于说明给予0.10mL/10g塔柏的75％乙醇提取物后，对于氯化钡诱发的心律失常没有明显预防作用。

图12用于说明给予0.10mL/10g龙柏的75％乙醇提取物后，对于氯化钡诱发的心律失常没有明显预防作用。

图13用于说明给予0.10mL/10g圆柏的75％乙醇提取物后，对于氯化钡诱发的心律失常没有明显预防作用。

图14用于说明给予0.10mL/10g橄榄油对于氯化钡诱发的心律失常没有明显的治疗作用。

图15用于说明给予0.6％胺碘酮0.10mL/10g可以治疗氯化钡诱发的心律失常。

图16用于说明给予0.10mL/10g侧柏的75％乙醇提取物可以治疗氯化钡诱发的心律失常。

图17用于说明给予0.05mL/10g日本扁柏的75％乙醇提取物不能治疗氯化钡诱发的心律失常。

图18用于说明给予0.075mL/10g日本扁柏的75％乙醇提取物不能治疗氯化钡诱发的心律失常。

图19用于说明给予0.10mL/10g日本扁柏的75％乙醇提取物可以治疗氯化钡诱发的心律失常。

图20用于说明给予0.15mL/10g日本扁柏的75％乙醇提取物可以治疗氯化钡诱发的心律失常。

图21用于说明给予0.20mL/10g日本扁柏的75％乙醇提取物不能治疗氯化钡诱发的心律失常。

图22用于说明给予0.10mL/10g叉子圆柏的75％乙醇提取物可以治疗氯化钡诱发的心律失常。

图23用于说明给予0.10mL/10g福建柏的75％乙醇提取物对于氯化钡诱发的心律失常没有明显的治疗作用。

图24用于说明给予0.10mL/10g塔柏的75％乙醇提取物对于氯化钡诱发的心律失常没有明显的治疗作用，注射氯化钡后出现二联律、室速，塔柏灌胃后解救效果不好。

图25用于说明给予0.10mL/10g龙柏的75％乙醇提取物对于氯化钡诱发的心律失常没有明显的治疗作用，氯化钡诱发心律失常后出现室早、室颤，给予龙柏的75％乙醇提取物0.10mL/10g后仍未见好转。

图26用于说明给予0.10mL/10g圆柏的75％乙醇提取物对于氯化钡诱发的心律失常没有明显的治疗作用。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。

实施例

1.材料

1.1实验动物：清洁级的ICR雄性小鼠60只，体重30±2g，购自上海吴氏实验动物中心，给予正常的饮食、饮水饲养，以适应环境1周。

1.2试剂与仪器：异氟烷，橄榄油，0.8％氯化钡溶液，侧柏、日本扁柏、叉子圆柏、福建柏、塔柏、龙柏、圆柏；气麻机，BL-420I集成化、信息化采集处理系统(成都泰盟软件有限公司)。

2.方法与结果

2.1柏科提取物：取从侧柏、日本扁柏、叉子圆柏、福建柏、塔柏、龙柏、圆柏的树上剪下的树枝，洗净、晾干后，摘下树叶；分别称取100g侧柏、日本扁柏、叉子圆柏、福建柏、塔柏、龙柏、圆柏的树叶，分别加入75％乙醇500mL，浸泡3～7天后，超声处理(温度25℃，振动频率100kHz)，取出浸泡液用干燥箱烘干，烘干后的残余物再用1mL的橄榄油溶解，得到侧柏、日本扁柏、叉子圆柏、福建柏、塔柏、龙柏、圆柏的75％乙醇提取物。

2.2动物分组：将实验小鼠按照随机分组的原则分为正常组、对照组(又分为阴性对照组和阳性对照组)、实验组(根据考察的目的不同又分为预防组和治疗组)，每组6只。所有小鼠给予正常的饮食、饮水。

2.3预防效果考察：小鼠称重、用异氟烷气麻后，仰卧位保定在鼠板上，用BL-420I集成化、信息化采集处理系统描记标准Ⅱ导联心电图。正常组给予生理盐水，阴性对照组给予橄榄油，实验组(即预防组)分别给予侧柏、日本扁柏、叉子圆柏、福建柏、塔柏、龙柏、圆柏的75％乙醇提取物，依体重以0.05mL/10g、0.075mL/10g、0.10mL/10g、0.15mL/10g、0.20mL/10g灌胃，10分钟后，不同组别的小鼠均腹腔注射BaCl

重复实验，用胺碘酮作为阳性对照组，侧柏、日本扁柏、叉子圆柏的75％乙醇提取物作为实验组(即预防组)，分别给予0.05mL/10g、0.075mL/10g、0.10mL/10g、0.15mL/10g、0.20mL/10g剂量，10分钟后，不同组别的小鼠均腹腔注射BaCl

2.4治疗效果考察：小鼠称重、用异氟烷气麻后，仰卧位保定在鼠板上，用BL-420I集成化、信息化采集处理系统描记标准Ⅱ导联心电图。阴性对照组腹腔注射BaCl

实验结果显示，阴性对照组橄榄油无法救治氯化钡诱发的心律失常(图14)；阳性对照组0.6％胺碘酮0.10mL/10g可以救治氯化钡诱发的心律失常(图15)；实验组(即治疗组)中，0.05mL/10g剂量的侧柏、日本扁柏、叉子圆柏的75％乙醇提取物均无法使小鼠心率失常恢复正常，但随着剂量增大，对心律失常的救治的效果(起效的时间快慢、恢复正常维持的时间长短)明显增高，且具有显著性差异(p<0.05)，0.10mL/10g的侧柏、0.10～0.15mL/10g的日本扁柏、0.10mL/10g的叉子圆柏的75％乙醇提取物对氯化钡诱发的心律失常有治疗作用(图16至图22)，但0.10mL/10g的福建柏、塔柏、龙柏、圆柏的75％乙醇提取物对氯化钡诱发的心律失常没有明显的治疗作用(图23至图26)。

以上所述，仅为本发明较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。