一种中药提取物及其制备方法和在制备具有祛痘作用的产品中的应用

技术领域

本发明涉及天然产物技术领域，具体涉及一种中药提取物及其制备方法和在制备具有祛痘作用的产品中的应用。

背景技术

痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)，也称痤疮杆菌、疮疱丙酸杆菌，是造成青春痘的主要细菌。因此，开发一种能够抗痤疮丙酸杆菌的有效成分，是开发祛痘产品活性物质的思路之一。

中药木蝴蝶为紫葳科植物木蝴蝶的干燥成熟种子；常用于肺热咳嗽、喉痹、音哑以及肝胃气痛。中国专利CN 102366428 A公开了一种中草药木蝴蝶的水提取物或醇提取物在制备减肥降脂药物或制备具有脂肪酶活性抑制作用的药物中的应用。中国专利CN102698271A公开了一种降糖药物组合物及其应用，其中公开了木蝴蝶种子提取物具有降血糖的作用。

综上所述，现有技术更未公开中药木蝴蝶具有抗痤疮丙酸杆菌作用；更未公开如何从中药木蝴蝶制备具有抗痤疮丙酸杆菌作用的提取物。因此，以中药木蝴蝶为原料，从中制备出一种具有抗痤疮丙酸杆菌作用的提取物具有重要的应用价值。

发明内容

为了克服现有技术中存在的至少之一的技术问题，本发提供一种中药提取物的制备方法；由该方法制备得到的中药提取物具有抗痤疮丙酸杆菌作用。

本发明的技术方案如下：

一种中药提取物的制备方法，具体为：取中药木蝴蝶，用乙醇进行加热回流提取，将提取液浓缩干燥得木蝴蝶乙醇提取物，即所述的中药提取物。

发明人在研究过程中，惊奇的发现，由乙醇提取得到的木蝴蝶乙醇提取物具有一定的抗痤疮丙酸杆菌作用；木蝴蝶乙醇提取物的抗痤疮丙酸杆菌活性为发明人首次研究得到的成果。

优选地，所述的乙醇为体积分数为70％～95％的乙醇。

本发明中提取用的乙醇是指乙醇水溶液；如体积分数为70％的乙醇是指乙醇水溶液中乙醇的体积占70％，水的体积占30％。

优选地，所述的加热回流提取的时间为1～2h。

进一步地，将木蝴蝶乙醇提取物上ODS柱，先用体积分数为5％～10％的甲醇进行洗脱除杂；再用体积分数为15％～20％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为15％～20％的甲醇洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得木蝴蝶提取物；即所述的中药提取物；

优选地，将木蝴蝶乙醇提取物上ODS柱，先用体积分数为8％的甲醇进行洗脱除杂；再用体积分数为18％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为18％的甲醇洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得木蝴蝶提取物；即所述的中药提取物。

进一步优选地，将木蝴蝶乙醇提取物上ODS柱，先用3～5倍柱体积的体积分数为5％～10％的甲醇进行洗脱除杂；再用5～8倍柱体积的体积分数为15％～20％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为15％～20％的甲醇洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得木蝴蝶提取物；即所述的中药提取物；

最优选地，将木蝴蝶乙醇提取物上ODS柱，先用4倍柱体积的体积分数为8％的甲醇进行洗脱除杂；再用6倍柱体积的体积分数为18％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为18％的甲醇洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得木蝴蝶提取物；即所述的中药提取物。

本发明中洗脱用的甲醇是指甲醇水溶液；如体积分数为18％的甲醇是指甲醇水溶液中甲醇的体积占18％，水的体积占82％。

为了获得具有更好抗痤疮丙酸杆菌作用的中药提取物；发明人经过大量实验研究摸索发现：将木蝴蝶乙醇提取物上ODS柱并在上述ODS柱洗脱条件下制备得到的木蝴蝶提取物，其抗痤疮丙酸杆菌作用远远优于木蝴蝶乙醇提取物；然而在其它ODS柱洗脱条件下制备得到的木蝴蝶提取物的抗痤疮丙酸杆菌作用并不明显，甚至不具有抗痤疮丙酸杆菌作用。

优选地，所述的中药提取物为具有抗痤疮丙酸杆菌作用的中药提取物。

本发明还提供了一种中药提取物，其由上述制备方法制备得到。

优选地，所述的中药提取物，是由上述方法制备得到的木蝴蝶乙醇提取物或木蝴蝶提取物和胡桃叶提取物形成的组合；所述的木蝴蝶乙醇提取物或木蝴蝶提取物与胡桃叶提取物的质量比为1～3:1～3；

所述的胡桃叶提取物通过如下方法制备得到：取胡桃叶，用乙醇进行加热回流提取，将提取液浓缩干燥得胡桃叶提取物；所述的乙醇为体积分数70％～95％的乙醇；所述的加热回流提取的时间为1～2h。

发明人在研究中进一步发现，木蝴蝶乙醇提取物与胡桃叶提取物组合后以及木蝴蝶提取物与胡桃叶提取物组合后，其抗痤疮丙酸杆菌作用与组合前相比有了进一步提高；木蝴蝶乙醇提取物或木蝴蝶提取物与胡桃叶提取物组合后产生了协同抗痤疮丙酸杆菌作用。

本发明还提供了一种上述中药提取物在制备具有抗痤疮丙酸杆菌作用的产品中的应用。

本发明还提供了一种上述中药提取物在制备具有祛痘作用的产品中的应用。

优选地，所述的产品具体为药物、化妆品或护肤品。

有益效果：本发明首次研究发现木蝴蝶通过乙醇提取得到的中药提取物在制备具有抗痤疮丙酸杆菌作用；首次提供了以木蝴蝶乙醇提取物在制备具有抗痤疮丙酸杆菌作用的产品中的应用。进一步地，本发明通过ODS柱层析技术，并在本发明所述的ODS柱洗脱条件下制备得到的木蝴蝶提取物其抗痤疮丙酸杆菌作用与木蝴蝶乙醇提取物相比进一步大幅提高，取得了预料不到的抗痤疮丙酸杆菌作用。由于所述的中药提取物具有抗痤疮丙酸杆菌作用；因此，可以将本发明所述的中药提取物作为祛痘有效成分用于制备具有祛痘作用的药物、化妆品或护肤品。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明做进一步详细的说明，但实施例对本发明不做任何形式的限定。

实施例1中药提取物的制备

取中药木蝴蝶，用体积分数为80％的乙醇进行加热回流提取1.5h，将提取液浓缩干燥得木蝴蝶乙醇提取物，即得所述的中药提取物；

其中，中药木蝴蝶与体积分数为80％的乙醇的料液比为1g:10mL。

实施例2中药提取物的制备

取中药木蝴蝶，用体积分数为70％的乙醇进行加热回流提取2h，将提取液浓缩干燥得木蝴蝶乙醇提取物，即得所述的中药提取物；

其中，中药木蝴蝶与体积分数为70％的乙醇的料液比为1g:10mL。

实施例3中药提取物的制备

取中药木蝴蝶，用体积分数为95％的乙醇进行加热回流提取1h，将提取液浓缩干燥得木蝴蝶乙醇提取物，即得所述的中药提取物；

其中，中药木蝴蝶与体积分数为95％的乙醇的料液比为1g:10mL。

实施例4中药提取物的制备

取中药木蝴蝶，用体积分数为80％的乙醇进行加热回流提取1.5h，将提取液浓缩干燥得木蝴蝶乙醇提取物；其中，中药木蝴蝶与体积分数为80％的乙醇的料液比为1g:10mL。

进一步地，将木蝴蝶乙醇提取物上ODS柱(ODS柱是指在玻璃柱中装有ODS填料的层析柱；其中，ODS柱中ODS填料的质量用量为木蝴蝶乙醇提取物质量的30倍)，先用4倍柱体积的体积分数为8％的甲醇进行洗脱除杂；再用6倍柱体积的体积分数为18％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为18％的甲醇洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得木蝴蝶提取物；即所述的中药提取物。

实施例5中药提取物的制备

取中药木蝴蝶，用体积分数80％的乙醇进行加热回流提取1.5h，将提取液浓缩干燥得木蝴蝶乙醇提取物；其中，中药木蝴蝶与体积分数为80％的乙醇的料液比为1g:10mL。

进一步地，将木蝴蝶乙醇提取物上ODS柱(ODS柱是指在玻璃柱中装有ODS填料的层析柱；其中，ODS柱中ODS填料的质量用量为木蝴蝶乙醇提取物质量的30倍)，先用3倍柱体积的体积分数为10％的甲醇进行洗脱除杂；再用5倍柱体积的体积分数为20％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为20％的甲醇洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得木蝴蝶提取物；即所述的中药提取物。

实施例6中药提取物的制备

取中药木蝴蝶，用体积分数80％的乙醇进行加热回流提取1.5h，将提取液浓缩干燥得木蝴蝶乙醇提取物；其中，中药木蝴蝶与体积分数为80％的乙醇的料液比为1g:10mL。

进一步地，将木蝴蝶乙醇提取物上ODS柱(ODS柱是指在玻璃柱中装有ODS填料的层析柱；其中，ODS柱中ODS填料的质量用量为木蝴蝶乙醇提取物质量的30倍)，先用5倍柱体积的体积分数为5％的甲醇进行洗脱除杂；再用8倍柱体积的体积分数为15％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为15％的甲醇洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得木蝴蝶提取物；即所述的中药提取物。

实施例7中药提取物的制备

所述的中药提取物是由木蝴蝶乙醇提取物与胡桃叶提取物按质量比为1:1混合而成；

所述的木蝴蝶乙醇提取物是按实施例1方法制备得到的木蝴蝶乙醇提取物；

所述的胡桃叶提取物通过如下方法制备得到：取胡桃叶，用体积分数为80％的乙醇进行加热回流提取1.5h，将提取液浓缩干燥得胡桃叶提取物；其中，胡桃叶与体积分数为80％的乙醇的料液比为1g:10mL。

实施例8中药提取物的制备

所述的中药提取物是由木蝴蝶提取物与胡桃叶提取物按质量比为1:1混合而成；

所述的木蝴蝶提取物是按实施例4方法制备得到的木蝴蝶乙醇提取物；

所述的胡桃叶提取物通过如下方法制备得到：取胡桃叶，用体积分数为80％的乙醇进行加热回流提取1.5h，将提取液浓缩干燥得胡桃叶提取物；其中，胡桃叶与体积分数为80％的乙醇的料液比为1g:10mL。

对比例1中药提取物的制备

取中药木蝴蝶，用体积分数80％的乙醇进行加热回流提取1.5h，将提取液浓缩干燥得木蝴蝶乙醇提取物；其中，中药木蝴蝶与体积分数为80％的乙醇的料液比为1g:10mL。

进一步地，将木蝴蝶乙醇提取物上ODS柱(ODS柱是指在玻璃柱中装有ODS填料的层析柱；其中，ODS柱中ODS填料的质量用量为木蝴蝶乙醇提取物质量的30倍)，先用水进行洗脱除杂；再用6倍柱体积的体积分数为5％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为5％的甲醇洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得木蝴蝶提取物；即所述的中药提取物。

对比例1与实施例4的区别在于，ODS柱的洗脱条件不同；对比例1先用水进行洗脱除杂；再用6倍柱体积的用体积分数为5％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为5％的甲醇洗脱下来的洗脱液；而实施例4则是：先体积分数为8％的甲醇进行洗脱除杂；再用体积分数为18％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为18％的甲醇洗脱下来的洗脱液。

对比例2中药提取物的制备

取中药木蝴蝶，用体积分数80％的乙醇进行加热回流提取1.5h，将提取液浓缩干燥得木蝴蝶乙醇提取物；其中，中药木蝴蝶与体积分数为80％的乙醇的料液比为1g:10mL。

进一步地，将木蝴蝶乙醇提取物上ODS柱(ODS柱是指在玻璃柱中装有ODS填料的层析柱；其中，ODS柱中ODS填料的质量用量为木蝴蝶乙醇提取物质量的30倍)，先用体积分数为15％的甲醇进行洗脱除杂；再用6倍柱体积的体积分数为25％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为25％的甲醇洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得木蝴蝶提取物；即所述的中药提取物。

对比例2与实施例4的区别在于，ODS柱的洗脱条件不同；对比例2先用水进行洗脱除杂；再用6倍柱体积的用体积分数为15％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为25％的甲醇洗脱下来的洗脱液；而实施例4则是：先用体积分数为8％的甲醇进行洗脱除杂；再用体积分数为18％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为18％的甲醇洗脱下来的洗脱液。

实验例1中药提取物抗痤疮丙酸杆菌实验

在无菌条件下往培养基中加入0.15mL痤疮丙酸杆菌菌液(浓度为1×10

所述的待测药液分别为含实施例1～8制备得到的中药提取物以及对比例1～2制备得到的中药提取物的药液以及含按实施例7中方法制备得到的胡桃叶提取物的药液。

表1.中药提取物抗痤疮丙酸杆菌实验结果

由表1试验可以看出，实施例1～3制备得到的木蝴蝶乙醇提取物其抑菌圈直径均大于20mm，这说明木蝴蝶乙醇提取物具有一定的抗痤疮丙酸杆菌作用；而实施例4～6制备得到的木蝴蝶提取物其抑菌圈直径要远远大于实施例1的抑菌直径，这说明在木蝴蝶乙醇提取物基础上进一步采用本发明所述的ODS柱层析方法可以浓缩富集得到更多的抗痤疮丙酸杆菌有效成分，使得制备得到的木蝴蝶提取物其抗痤疮丙酸杆菌作用进一步增强。

由表1试验还可以看出，实施例7由木蝴蝶乙醇提取物和胡桃叶提取物1:1的组合其抑菌直径要大于单独使用实施例1制备得到的木蝴蝶乙醇提取物或胡桃叶提取物测试得到的抑菌直径；这说明木蝴蝶乙醇提取物和胡桃叶提取物组合后，其抗痤疮丙酸杆菌作用进一步增强，二者组合后取得了协同抗痤疮丙酸杆菌作用。

由表1试验还可以看出，实施例8由木蝴蝶提取物和胡桃叶提取物1:1的组合其抑菌直径要大于单独使用实施例4制备得到的木蝴蝶提取物或胡桃叶提取物测试得到的抑菌直径；这说明木蝴蝶提取物和胡桃叶提取物组合后，其抗痤疮丙酸杆菌作用进一步增强，二者组合后取得了协同抗痤疮丙酸杆菌作用。

由表1试验还可以看出，对比例1和2制备得到的木蝴蝶提取物其抑菌圈要远远小于实施例4木蝴蝶提取物，同时也小于实施例1木蝴蝶乙醇提取物；而对比例1和2与对比例4的不同之处在于ODS柱层析的洗脱条件不同；这说明ODS柱的洗脱条件对于是否能够进一步制备得到具有更好抗痤疮丙酸杆菌作用的木蝴蝶提取物起着决定性作用；现有研究表明，只有在本发明所述的ODS柱洗脱条件下(即先用体积分数为5％～10％的甲醇进行洗脱除杂；再用体积分数为15％～20％的甲醇进行洗脱，收集由体积分数为15％～20％的甲醇洗脱下来的洗脱液浓缩干燥)才能制备得到具有更好抗痤疮丙酸杆菌作用的木蝴蝶提取物；而在其它ODS洗脱条件下，制备得到的木蝴蝶提取物其抗痤疮丙酸杆菌作用甚至会小于原始的木蝴蝶乙醇提取物。