一种用于治疗类风湿性关节炎的中药及保健鞋垫

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种用于治疗类风湿性关节炎的中药及保健鞋垫。

背景技术

类风湿关节炎(RA)是一种以滑膜炎为主要病理改变的自身免疫性疾病，累及多个关节并伴有持续性疼痛。病程后期可导致软骨破坏、骨质侵蚀、关节畸形和功能丧失。RA属复杂慢病，至今病理尚未完全明晰，治愈十分困难，实际中主要是依靠药物或理疗手段来控制病情，提高生活质量。

中药是目前治疗类风湿性关节炎的一个重要手段，一般可分为三类：一是利用雷公藤多苷、白芍总苷等中药有效成分调节免疫系统或者降低关节炎症；二是服用中药汤剂，利用中药复方多靶点的优势，调理免疫系统，活血通络化瘀，从而起到治疗和控制病情的作用；三是利用中药贴膏减轻疼痛。

第一类手段存在的问题是：一，中药有效成分的获取依赖于制备色谱等复杂的分离制备技术，成本很高，对于类风湿性关节炎这样需要长期服药的患者，花费难以承受；二，和西药类似，有效成分单一，药效有限。第二类手段存在的问题是：一，中药复方成份复杂，绝大多数情况下都具有毒性成分，实际中是靠控制剂量，加入佐药等，从而最大程度的发挥药效，同时最大程度控制副作用，而且随着病程发展，剂量和药方都需要实时调整，该策略依赖于中医高超的问诊技术和丰富的经验，但是目前的现实是，相对于海量的病患，经验丰富的老中医数量太少；二，口服中药水体验不佳，而对于类风湿性关节炎这个慢病，通常需要长期服用，病人往往难于坚持。第三类存在的问题是指标不治本，难以对病情发展进行有效控制。

总体而言，在治疗类风湿性关节炎上，传统中药并未发挥其最大潜能，而且缺乏体验良好的用药方式。

发明内容

本发明基于中药现代化理论，从整体上提高中药治疗类风湿性关节炎的功效，提出了一种新的治疗类风湿性关节炎的中药复方，复方中每一种药材都有单独治疗类风湿性关节炎的作用，而且药理机制不尽相同，因此该复方是目前所有治疗类风湿性关节炎复方中，包含活性成分种类比较全的复方，然后利用组分中药技术去除该复方的毒性成分，消除副作用。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

本发明第一方面提供了一种中药，由按重量份计的以下中药材的总提取液中分离出的高效低毒组分组成：麻黄1份、防风1份、川乌1份、细辛1份、粉防己1-3份、地乌1-3份、雷公藤1份、苦参1份、薏苡仁1-3份、青蒿1-3份、紫草1份、没药1份、川芎1-3份、乳香1份、清风藤1份、伸筋草1-3份、姜黄1-3份、人参1-3份、党参1-3份和天南星1份。

上述中药成分治疗类风湿性关节炎的药理及毒性分别如表1-2所示。

表1本发明采用的中药材的药理

表2本发明采用的中药材的毒性或副作用

本发明的中药中，超过半数的成分含有多种毒性化合物，有比较明显的副作用(表2)，传统中医的减毒理论是君臣佐使理论，而本发明利用中药现代化理论减毒，首先利用制备色谱将该中药的水提物分段制备，如果分段条件适当，在某一段或某几段组分内，会含有大量的有效化合物，少量甚至没有毒性化合物，和其他一些无关化合物，通过药效和毒性评价手段，可以将这样的组分筛出来，该组分相对于总药，药效更好，毒性更低，剂量更少，质控容易，而相对于纯化合物，又能保持多靶点的优势，而且制备成本大幅降低。

进一步地，所述高效低毒组分的提取和筛选方法包括以下步骤：

(1)取配方量的各中药材，混合后加水煎煮，收集药液，得到总提取液；

(2)利用制备色谱将总提取液分割为20个组分；

(3)测定每种组分的急性毒性，筛选出LD

(4)对步骤(3)筛选出来的组分再进行慢性毒性实验，筛选出与对照组毒性无统计性差异的组分；

(5)测定步骤(4)筛选出来的组分与总提取液的抗类风湿性关节炎药效N，筛选出药效大于总提取液的组分，即为本发明的中药。

进一步地，步骤(1)中，所述总提取液的提取方法为：取等量的各中药材，混合后加水煮两次，每次各一个半小时，合并药液后得到总提取液。

进一步地，步骤(2)中，所述制备色谱的条件如下：色谱柱为反相C

进一步地，步骤(3)中，所述急性毒性实验的方法为：取体重为20±2g的小鼠50支，随机分为5组，每组10只，雌雄各半，分别作为5个剂量组，相邻两组剂量的比值设为1:0.7；灌胃给药，按改良寇氏法公式计算LD

进一步地，步骤(4)中，所述慢性毒性实验的方法包括以下步骤：

(i)取成年SD大鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，每组10只，分别作为纯水空白对照组以及高、中、低三种剂量组；其中，高、中、低剂量组的给药量分别是急性毒性LD

(ii)对各组大鼠每日灌胃给药1次，连续给药3个月；在给药期满后，全部处死，从大鼠腹股沟骼外静脉放血，收集血液，进行生化检查；

(ii)对对照组和给药组各项生化指标值进行统计学检验，筛选出各给药组与对照组均无显著性差异的组分。

进一步地，步骤(5)中，测定抗类风湿性关节炎药效的方法包括以下步骤：

(a)取健康成年SD大鼠60只，随机分为6组，每组10只，分别为对照组、模型组、阳性药组以及低、中、高剂量组；其中，低、中、高剂量组给药为步骤(4)筛选出来的组分或总提取液，剂量分别为50、250、500mg/kg，阳性药组给药为雷公藤多苷，剂量为30mg/kg；

(b)除对照组外，其余各组每只受试大鼠右后足跖皮下注射弗氏完全佐剂0.1ml，制备RA模型大鼠；建模7天后开始灌胃给药，记为0天，然后每天给药1次，连续给药28天，对照组和模型组给予等量的生理盐水；

(c)测定各组大鼠多个类风湿性关节炎疾病指标T

本发明第二方面提供了所述的一种中药在制备用于治疗类风湿性关节炎的药物中的应用。

中药水的口服体验不佳，导致病人难于坚持长期服药，很大程度上影响到类风湿关节炎病人的治疗。实际上，中药的给药方式可以借鉴常见的保健鞋垫模式，即将药材负载在鞋垫内，让这些药物通过脚部皮肤进入人体，从而起到治疗的作用，它极易长期坚持，从而实现良好的治疗效果。但是现有的保健鞋垫设计存在两个主要问题：(1)多只注重了药物的种类，而忽略了鞋垫中的药物必须经过透皮才能被吸收，才能入血、发挥疗效的特性。例如，负载在鞋垫内的药物或者保健品由于袜子材质的阻隔，无法直接接触皮肤，只能挥发为气体后穿过袜子材质的孔隙，再与脚部皮肤接触。而多数药物或功能物质的挥发性不强，因此绝大多数负载在鞋垫的药物不能与脚部的皮肤接触，这既降低了治疗或保健的疗效，又浪费了药物的成本；(2)负载在鞋垫里的保健药物以中药提取物居多，缺乏质量控制方法，无法对产品的疗效或副作用进行很好地管控。

因此，本发明第三方面提供了一种用于治疗类风湿性关节炎的保健鞋垫，所述保健鞋垫中嵌入了一个或多个凝胶药物缓释片，所述凝胶药物缓释片中包埋了第一方面所述的中药和透皮促进剂。其中，凝胶药物缓释片嵌入的位置为脚在鞋垫上的着力点。

进一步地，所述凝胶药物缓释片由高分子缓释材料制成，所述高分子缓释材料包括但不限于硅橡胶，乙烯-醋酸乙烯共聚物，乙烯-乙烯醇共聚物，高聚物水凝胶，壳聚糖，纤维蛋白胶，聚异丁烯，聚丙烯酸酯，硅酮压敏胶，互穿网络聚合物材料，聚丙烯酰胺，聚丙烯酸，明胶，羧甲基纤维素，聚酯，聚碳酸酯，聚原酸酯，聚亚胺，聚乳酸-丙氨酸，聚乳酸-赖氨酸，聚缩醛，聚乳酸，聚磷脂，聚α-羟基乙酸，乳酸-羟基乙酸共聚物，聚N-异丙基丙烯酰胺和线型聚醚氨酯脲半互穿网络聚合物，聚氨酯/聚乙二醇半互穿网络聚合物，海藻酸钠，明胶中的一种或多种的组合。

进一步地，所述透皮促进剂包括化学合成的透皮吸收剂、中药成分的透皮吸收剂、中药挥发油或者三者的混合物，包括但不限于薄荷醇、冰片、樟脑、氮酮、PEG400、丙二醇、桉叶油、石菖蒲挥发油、芦柑挥发油、荜橙茄挥发油、肉桂挥发油、丁香油、高良姜油、当归挥发油、砂仁挥发油、草果挥发油、豆蔻挥发油、吴茱萸挥发油、连翘籽挥发油、蛇床子挥发油中的一种或多种的组合。

进一步地，所述凝胶药物缓释片中还含有香料，所述香料包括动物性天然香料，植物性天然香料，单离香料或人工合成香料，这些香料可以为烃、卤化烃、醇、酚、醚、酸、酯、内酯、醛、酮、缩醛(酮)、腈、杂环等，譬如玫瑰油，茉莉浸膏，香荚兰酊，白兰香脂，吐鲁香树脂，水仙净油，麝香、龙涎香、灵猫香，海狸香，丁酸、丁二酮、苯甲醛，精油，乙酸乙酯，香豆素，芳樟醇，柠檬醛，柏木脑，紫罗兰酮，松油醇，香叶醇，鸢尾酮，蒎烯，香茅醛，香兰素，橙花醇，香叶醇，顺反式玫瑰醚，洋茉莉醛，人造檀香，香茅油、山苍籽油、芳樟油、黄樟油、柏木油、松节油、蓖麻油、杂醇油、芳烃、酚类，肉蔻，小茴香等，以及这些香料的混合物。

进一步地，所述凝胶药物缓释片中还含有干燥剂，所述干燥剂包括活性炭，硅胶，活性氧化铝，硫酸钙，氯化钙，杜邦纸，蒙脱石，矿物干燥剂等，以及这些干燥剂的混合物。

进一步地，所述凝胶药物缓释片中还含有抑菌除臭的成分，所述抑菌除臭的成分包括活性炭，中药配方，精油，A.SAP，醋酸洗必泰，丁香、薰衣草、迷迭香、鼠尾草和百里香等精油，苦参，地肤子，香精，天然树脂，苦楝皮，罗布麻根，榴莲皮，蝴蝶兰花瓣，君子兰叶，蛇床子，冰片，天然蛋白石，抗菌除臭纳米材料，硅溶胶-凝胶，有机硅季铵盐，DC-5700，SAQ-1，SA-4，STU-AM101,Nonstac,Danfresh,peachfresh,Irgasan DP-300,CG-1抗菌乳剂，Permox整理液，747/BCA，硫化铜，和有机硅咪唑抗菌剂等，以及这些除菌剂的组合。

本发明中，所述凝胶药物缓释片的形状可以为圆形，方形，三角形，以及其他不规则的形状。鞋垫上的药物缓释片可以为一个或多个，当为多个时，多个药物缓释片里可以装载相同的药物或者不同的药物。优选地，鞋垫上的药物缓释片可更换。

本发明中，所述保健鞋垫可以通过3D打印，针织，棉纺，压印等工艺制造。进一步地，所述保健鞋垫可以放入各类鞋中使用，包括不局限于运动鞋、皮鞋、帆布鞋、棉鞋和拖鞋。

进一步地，所述鞋垫优选地与配套的保健袜子搭配使用，所述保健袜子的袜底具有多处镂空结构。当穿上所述保健袜子并踩在上述保健鞋垫上时，脚底的皮肤可以通过镂空结构直接与保健鞋垫上的凝胶药物缓释片接触，从而保证了凝胶药物缓释片内包埋的组分能够高效地经皮吸收进入人体，凝胶药物缓释片中的透皮吸收促进剂可以更好地促进缓释片中的组分通过皮肤高效的传输到人体内。

本发明中，所述保健袜子可以为五指袜或者普通的平头袜，材质可以为棉，棉纱，亚麻，真丝，羊毛线，人造纤维，譬如尼龙，苞芯丝，天鹅绒，竹碳纤维，木纤维，碧卡纤维，莱卡弹性纤维，莫代尔纤维，大豆蛋白纤维，甲壳质抗菌纤维，天丝，天然彩色棉，高伦棉，氨纶，锦纶，腈纶，丙纶，涤纶，以及上述任意材质的组合。

进一步地，本发明这种袜子和鞋垫的组合也可用于常见的足底保健以及其他病症的足底给药。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

1.本发明提供了一种新的抗类风湿性关节炎的中药组分，该组分相对于总提取液，药效更好，无毒，剂量更少，质控容易，而相对于纯化合物，又能保持多靶点的优势，而且制备成本大幅降低。

2.本发明提供了一种新的足部治疗类风湿性关节炎模式，基于鞋垫、袜子和中药组分的配合使用使得药物能直接接触到脚底皮肤，从而通过脚底皮肤进入人体，起到治疗的效果，由于人每天长时间的脚和鞋垫的接触，保证了药物能长时间缓释进人体，治疗作用更持久更好；当药物释放完全后，可以直接更换凝胶药物缓释片，而不用整体更换鞋垫，这样大大降低了用户的使用成本，节约了资源。这种模式成本低，实现了类风湿性关节炎病人的无感理疗体验，及正常走走路，不用服药，不用输液和打针，就能控制病情，而且极易长期坚持，甚至为类风湿性关节炎的治愈都提供了可能。

附图说明

图1为中药提取物分离的色谱图；

图2中药组分对大鼠体质量的影响；

图3中药组分对大鼠关节炎评分的影响；

图4中药组分对大鼠关节肿胀度的影响；

图5中药组分对大鼠外周血液炎症因子IL-6水平的影响；

图6中药组分对大鼠外周血液炎症因子TNF-α水平的影响；

图7中药组分对大鼠外周血液炎症因子IL-1β水平的影响；

图8中药组分对滑膜组织炎症因子TNF-α水平的影响；

图9中药组分对滑膜组织炎症因子IL-6水平的影响；

图10中药组分对滑膜组织炎症因子IL-1β水平的影响；

图11中药组分对滑膜组织TLR4表达的影响；

图12中药组分对滑膜组织p-p65/p65表达的影响；

图13中药组分、袜子和鞋垫的配合使用原理图；

其中：1、鞋垫主体；2-4、凝胶药物缓释片；5、保健袜子；6-7、镂空结构。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法，所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1：中药的制备

1.取等量的麻黄、防风、川乌、细辛、粉防己、地乌、雷公藤、苦参、薏苡仁、青蒿、紫草、没药、川芎、乳香、清风藤、伸筋草、姜黄、人参、党参和天南星药材进行混合，水煮两次，合并提取液。

2.将合并的提取液用制备色谱进行分离，使提取液分割成20个组分。色谱条件如下：创新通恒DAC100色谱仪，色谱分离图见图1，制备色谱柱为反相C18柱(100×250mm,10μm,Acchrom)，流动相：A-MeOH，B-0.1％FA/H

3.将分离制备的20个组分(每个组分3.6分钟)减压干燥，然后进行急性毒性实验，测定急性毒性的方法如下：取小鼠50支，体重20g左右，随机分为5组，一组10只鼠，雌雄各半，相邻两组剂量的比值设为1：0.7，分为5个剂量组，灌胃给药，按改良寇氏法公式计算LD

表3各个组分LD

从表3中可以看出，组分1和组分9的LD

4.分别测试组分1和9的慢性毒性，进一步确认其无毒性。测定慢性毒性的方法如下：

(1)分组与剂量

取成年SD大鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，每组10只，分别作为纯水空白对照组以及高、中、低三种剂量组(给药量分别是急性毒性LD

(2)给药与检测

对各组大鼠每日灌胃给药1次，连续给药3个月。在给药期满后，全部处死，从大鼠腹股沟骼外静脉放血，收集血液，进行生化检查。所得结果分别如表4和表5所示。

表4大鼠连续给药3个月(组分1)的血液生化检查结果(n＝10)

表5大鼠连续给药3个月(组分9)的血液生化检查结果(n＝10)

从表4-5中可以看出，采用组分1和9的高、中、低三种剂量对大鼠连续灌胃3个月，对大鼠15项血液生化指标的数值均无明显的影响。对照组和给药组指标值经统计学检验，其差异均无显著性。因此可以认为组分1和9对大鼠的血液生化指标均无明显毒性影响。

5.对组分1和组分9进行活性评价，活性实验的方法具体如下：

(1)动物分组

取健康成年SD大鼠60只，随机分为6组，每组10只，分别为正常对照组、模型组、阳性对照组(雷公藤多苷30mg/kg)以及组分低、中、高剂量组(50、250、500mg/kg)。

(2)建模和干预

除正常对照组外，其余各组每只受试大鼠右后足跖皮下注射弗氏完全佐剂0.1ml，制备RA模型大鼠。建模7天后开始灌胃给药，记为0天，然后每天给药1次，连续给药28天，正常对照组和模型组给予等量的生理盐水。

(3)组分1对大鼠体质量和关节炎评分的影响

关节炎评分的方法为：观察大鼠每只脚的状态，并进行评分，0分为正常，1分为轻微肿胀和红斑，2分为明显肿胀，3分为出现严重的红肿，4分为出现溃烂，每只老鼠总计16分；然后统计每组大鼠的评分，计算得出各组的关节炎评分。

表6为组分1的的药效数据列表(第21天)

从表6中可以看出，组分1几乎没有药效，故淘汰掉组分1，考察组分9的药效。

(4)组分9对大鼠体质量、关节炎评分和肿胀度的影响

关节肿胀度的测试方法：拍摄实验组大鼠的照片，测量大鼠关节的直径，与对照组的比值，即为关节肿胀度。

从图2可以看出，模型组大鼠的体质量从第21天开始明显小于对照组，但灌胃给予上述中药组分会增加大鼠的体质量，而且这种增加呈现剂量依赖性。从图3可以看出，从第7天开始，模型组大鼠的关节炎评分显著增加，而且持续至实验结束，而给药组大鼠的关节炎评分呈剂量依赖性减小。第28天给药结束时，测量实验大鼠关节的肿胀程度，发现模型组大鼠的踝关节、脚掌及指头均有肿胀，而给药组能明显缓解CIA大鼠的踝关节、脚掌及指头的肿胀症状，差异有统计学意义(图4)。

(5)组分9对外周血炎症因子的影响

从图5-7可以看出，与对照组相比，模型组大鼠外周血液炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β的含量显著增加，给药组显著降低了大鼠外周血液炎症因子水平，这种降低呈现剂量依赖关系和统计学差异。

(6)组分9对滑膜组织炎症因子的影响

采用组织匀浆和RT-PCR法检测滑膜组织炎症因子的表达水平，结果如图8-10所示。与对照组相比，模型组大鼠滑膜组织中TNF-α-mRna、IL-6-mRna和IL-1β-mRna的表达水平显著上调，而给药组显著下调了组织中炎症因子的表达水平，差异具有剂量依赖性和统计学意义。

(7)组分9对滑膜组织TLR4-NF-κB信号通路的影响

测定TLR4-NF-κB通路相关信号分子的蛋白表达水平，结果表明：与对照组相比，模型组TLR4和p-p65/p65的表达水平显著上调，但给药组下调了TLR4和p-p65/p65的表达水平，差异有统计学差异(图11和12)。

6.组分9和总提取液药效的比较

表7组分9和总提取液的药效指标测量值

根据公式T＝[(S

实施例2：用于治疗类风湿性关节炎的保健鞋垫与保健袜子

如图13所示，本发明提供了一种保健鞋垫以及与之配套的保健袜子5，其中保健鞋垫包括鞋垫主体1以及可拆卸地安装在鞋垫主体上的凝胶药物缓释片2-4，且凝胶药物缓释片2-4所在的位置是脚与鞋垫主体1的紧密触点。

保健袜子5的袜底处设置有镂空结构6-7，其位置与凝胶药物缓释片2-3相对应。当人穿上保健袜子5踩在保健鞋垫上时，人体脚部皮肤通过镂空结构6-7直接与药物缓释片2-3接触，从而凝胶药物缓释片中的药物或者保健品可以通过皮肤释放到人体内，凝胶药物缓释片4也对应着保健袜子5上一个镂空结构，但图中未示出。

本发明对于药物缓释片2-4与鞋垫主体1之间具体的拆卸连接结构不做限定。示例的，可在鞋垫主体1上加工三个卡槽，药物缓释片2-4放在卡槽内，从而得到固定。

本发明中，凝胶药物缓释片2-4中可以装载各种药物，除了抗类风湿关节炎中药组分外，还可以装载协同治疗的西药以及治疗其他病症的药物，从而实现多病同治。药物缓释片的形状可以是任意形状，本发明对此不做限定。在实际应用中，药物缓释片的形状优选地与脚和鞋垫触点的形状一致。

实施例3：壳聚糖/羧甲基壳聚糖药物缓释片的制备

本实施例提供了一种壳聚糖/羧甲基壳聚糖药物缓释片的制备方法，具体如下：

一定温度下，将一定量壳聚糖溶解在体积分数为2％的醋酸溶液中配制成壳聚糖醋酸溶液。准确称取一定量GST加入壳聚糖醋酸溶液中并于50℃下搅拌5min。在磁力搅拌下，加入2.5mL液体石蜡，乳化一段时间。加入一定量Span80，并以0.2mL/min的速度缓慢滴加一定质量分数的三聚磷酸钠溶液2.5mL，反应一段时间。逐滴滴加含一定质量的羧甲基壳聚糖水溶液，继续搅拌反应一段时间，离心，冷冻干燥保存样品。

壳聚糖/羧甲基壳聚糖载药材料含有大量羟基，可以通过氢键作用吸附药物，如含有羟基的药物。制备的载药缓释片具有一定pH响应性，当与人体皮肤接触，特别是在略微酸性的汗液作用下，药物释放量增加，从而有利于提高药物的利用率。

实施例4：壳聚糖复合海绵药物缓释片的制备

本实施例提供了一种壳聚糖复合海绵药物缓释片的制备方法，具体如下：

采用预冷冻-冷冻干燥法制备壳聚糖复合海绵，主要原料为壳聚糖、海藻酸钠和明胶。以干基的物料重量计，由如下重量比的组分组成：壳聚糖：海藻酸钠：明胶＝5：0.8-1.2：1-5。

首先称取一定量的壳聚糖溶解在醋酸溶液中，壳聚糖-醋酸-水溶液重量百分比为1-3％：1-3％：96-98％。然后分别配制质量分数为2％和4％的明胶水溶液和海藻酸钠水溶液待用，再取一定量的海藻酸钠水溶液与壳聚糖醋酸溶液混合，进行预交联，接着将其与一定量的明胶溶液混合均匀，形成粘稠状的混合物。最后，将制得的粘稠状的混合物与药物溶液进行混合，倒入与鞋垫卡槽形状相似的模具中，简单脱泡，放在预先降至零下25℃的板层上冷冻24h。冷冻完成后，将其置于真空冷冻干燥箱中，于-45℃干燥48h，真空度20pa，即得壳聚糖复合海绵。

该复合材料既可保证壳聚糖的可降解性、灭菌性和较好的机械强度，又可利用海藻酸钠较好的吸水性和明胶的生物相容性，具有释药功能。

以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。