基于阵列孔板珠打研磨的细胞前处理装置及方法

技术领域

本发明涉及技术领域，尤其涉及一种基于阵列孔板珠打研磨的细胞前处理装置及方法。

背景技术

目前现有的细胞前处理装置，将细胞处理的过程，分为多个阶段来实施，无法做到从细胞研磨到密封，一个全方位的解决方案。如CN201380017876.0的《微阵列处理装置、微阵列处理装置用孔板、微阵列架以及微阵列的清洗方法》为描述细胞的微处理装置，可以将微阵列孔板进行杂交处理，并可以实现自身装置的自清洁功能。但是该专利缺乏同时处理多组细胞样品的功能，无法将阵列孔板进行批次处理。CN201910597795.1的《一种球珠研磨机》主要描述为一组限位轴承通过升降板，并搭配研磨电机。搭配不同尺寸的球珠，具有较高的使用范围。但是该专利缺乏对多套细胞样品批次的处理方式，同时在研磨过程中，忽视了细胞微阵列孔板的密封与连接方式。

由此可见，目前关于阵列孔板珠打研磨的细胞前处理，现有的技术中均过分强调研磨机的传动过程、或者缺乏对细胞微阵列孔板的密封与连接过程，因此无法做到对批次细胞尤其是具有细胞壁的酵母细胞，实现同一批次的前处理，对于细胞的研磨效果，与研磨过程的一致性没有装置可以实现。

发明内容

根据上述提出的技术问题，而提供一种基于阵列孔板珠打研磨的细胞前处理装置。本发明采用的技术手段如下：

一种基于阵列孔板珠打研磨的细胞前处理装置，包括倒膜胶垫、阵列式细胞密封机构、连接导杆和研磨仪，所述倒模胶垫设置于阵列式细胞密封机构上方，所述阵列式细胞密封机构的底部通过所述连接导杆与研磨仪相连，所述阵列式细胞密封机构包括阵列式的孔板，孔板的上下可拆卸地连接有封闭板，所述阵列式的孔板上盛装细胞和研磨颗粒。

进一步地，所述阵列式的孔板包括96孔板。

进一步地，所述倒膜胶垫的底部匹配96孔板设有对应对量、对应位置的凸起，所述倒膜胶垫的上方为平面。

进一步地，所述阵列式细胞密封机构包括96阵列孔板底部支撑、96阵列孔板上盖、96阵列孔板顶部支撑、高度支撑铜件和紧固螺丝，所述96孔板的下方设置96阵列孔板底部支撑，所述96孔板的上方扣接所述倒膜胶垫，所述倒膜胶垫的上方设置所述96阵列孔板上盖，所述96阵列孔板上盖的上方设置所述96阵列孔板顶部支撑，所述96阵列孔板顶部支撑和96阵列孔板底部支撑的四个角部设有螺孔，高度支撑铜件穿过螺孔，根据孔板的高度，调节铜件的长度，通过安装在高度支撑铜件上的紧固螺丝完成阵列式细胞密封机构的密封。

本发明还公开了一种基于阵列孔板珠打研磨的细胞前处理方法，包括如下步骤：

步骤1、密封胶膜的制作：基于96孔板制作与其匹配的模具，向其中注入两液混合硬化胶，等待一定时间，胶膜凝固，从模具中将密封胶件从模具中取出；

步骤2、填装细胞与研磨颗粒：将细胞通过移液枪分别装入96孔板中，所述96孔板为底部为扁平的圆筒形状，将细胞从顶端加入孔板后，放置直径小于1mm的陶瓷研磨颗粒；

步骤3、装置的装配：通过连接导杆将阵列孔板底部支撑和研磨仪连接在一起，对阵列式细胞密封机构进行组装，

步骤4、调节研磨频率与研磨时间保证细胞均匀处理：调节研磨频率与研磨时间，在使用过程中研磨时间根据细胞的尺寸，细胞的种类，加入细胞的数量进行综合判断。

进一步地，所述步骤4中，对于细胞壁略厚直径大于5微米的细胞，选择频率高于50Hz研磨参数，单次研磨时间小于90秒，采用间歇式研磨，即研磨一定时间放置60秒；对于细胞壁不坚硬的细胞，采用时间更为持久，一次性的研磨，提高单次研磨的时间，选择频率40-50Hz，一次研磨时间大于120秒。

本发明提供一种基于阵列孔板珠打研磨的细胞前处理装置，可以实现微量细胞样的大批次前处理，可以实现对于酵母藻类等具有坚硬细胞壁的细胞，其细胞壁的研磨处理。利用商品化的96孔板为基准，提供一整套的细胞前处理方案。结合珠打研磨，保证细胞前处理过程中，每一个孔板批次间的一致性。本发明采用阵列式的处理方法，同时处理多个细胞培养皿的细胞，可以极大的提高操作者的工作效率。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图做以简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明爆炸图。

图2为本发明爆炸图正视图。

图3为本发明阵列孔板部件拆解示意图。

图4为本发明部件爆炸等轴侧视图。

图中：001、倒膜胶垫；002、96阵列孔板；003、高度支撑铜件；004、连接导杆；005、96阵列孔板底部支撑；006、96阵列孔板上盖；007、96阵列孔板顶部支撑；008、紧固锁定手拧螺丝；009、研磨仪。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

如图1～4所示，本实施例公开了一种基于阵列孔板珠打研磨的细胞前处理装置，以商品化96孔板为耗材，实现具有细胞壁细胞的快速高效研磨处理。包括倒膜胶垫001、阵列式细胞密封机构、连接导杆004和研磨仪009，所述倒模胶垫设置于阵列式细胞密封机构上方，所述阵列式细胞密封机构的底部通过所述连接导杆与研磨仪相连，所述阵列式细胞密封机构包括阵列式的孔板，孔板的上下可拆卸地连接有封闭板，所述阵列式的孔板上盛装细胞和研磨颗粒。

所述阵列式的孔板包括96孔板002。所述倒膜胶垫的底部匹配96孔板设有对应对量、对应位置的凸起，所述倒膜胶垫的上方为平面。

所述阵列式细胞密封机构包括96阵列孔板底部支撑005、96阵列孔板上盖006、96阵列孔板顶部支撑007、高度支撑铜件003和紧固螺丝008，所述96孔板的下方设置96阵列孔板底部支撑，所述96孔板的上方扣接所述倒膜胶垫，所述倒膜胶垫的上方设置所述96阵列孔板上盖，所述96阵列孔板上盖的上方设置所述96阵列孔板顶部支撑，所述96阵列孔板顶部支撑和96阵列孔板底部支撑的四个角部设有螺孔，高度支撑铜件穿过螺孔，根据孔板的高度，调节铜件的长度，通过安装在高度支撑铜件上的紧固螺丝完成阵列式细胞密封机构的密封。

本发明实施例公开了一种基于阵列孔板珠打研磨的细胞前处理方法，包括如下步骤：

步骤1、密封胶膜的制作：基于96孔板制作与其匹配的金属模具，向其中注入两液混合硬化胶(AB胶，A胶，B胶等比例混合)，利用刮板将模具上层的胶质刮去，等待一定时间，胶膜凝固，从模具中将密封胶件从模具中取出，其用于阵列细胞孔板的顶层盖板与底层孔板的密封；

步骤2、填装细胞与研磨颗粒：将细胞通过移液枪分别装入96孔板中，，为了便于细胞均匀研磨，所述96孔板选择底部为扁平的圆筒形状，将细胞从顶端加入孔板后，放置直径小于1mm的陶瓷研磨颗粒，研磨颗粒的添加放置为利用一个旋转容器从等份的取出，放置于孔板中；

步骤3、装置的装配：通过连接导杆将阵列孔板底部支撑和研磨仪连接在一起，对阵列式细胞密封机构进行组装，所述阵列孔板的部件装备方式为，底部基座为一个阵列孔板底部支撑件，上面链接放置有高低支撑铜件，其目的为在装配过程中，根据孔板的高度，调节铜件的长度，为孔板在盖上、倒模胶垫、阵列孔板上盖后，铜件的高度与三者一致。最后加装一个阵列孔板顶部支撑件。利用手拧螺丝从顶部拧上，其目的为阵列孔板，倒模胶垫，孔板上盖，三者实现一个很好密封。

步骤4、调节研磨频率与研磨时间保证细胞均匀处理：调节研磨频率与研磨时间，在使用过程中研磨时间根据细胞的尺寸，细胞的种类，加入细胞的数量进行综合判断。

所述步骤4中，对于细胞壁略厚直径大于5微米的细胞，选择频率高于50Hz研磨参数，单次研磨时间小于90秒，采用间歇式研磨，即研磨一定时间放置60秒；对于细胞壁不坚硬的细胞，采用时间更为持久，一次性的研磨，提高单次研磨的时间，选择频率40-50Hz，一次研磨时间大于120秒。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。