免疫调节剂及其组合物和制备方法

技术领域

本发明涉及药物活性化合物。本发明提供了该化合物及其组合物和应用方法。化合物可调节PD-1/PD-L1蛋白质/蛋白质相互作用，并且可用于治疗包括传染病和癌症在内的各种疾病。

背景技术

免疫系统在控制和消除癌症等疾病中起着重要作用。但是，癌细胞通常会通过一些策略逃逸或抑制免疫系统，从而促进其生长。其中一种机制是改变免疫细胞上共刺激和共抑制分子的表达(Postowetal，J.Clinical Oncology 2015，1-9)。事实证明，阻断PD-1等抑制性免疫检查点的信号是一种有希望的，有效的治疗方式。

PD-1和PD-L1之间的相互作用导致肿瘤浸润淋巴细胞的减少，T细胞受体介导的细胞增殖的减少以及癌细胞的免疫逃逸(Dong et al，J.Mol Med.，81:281-287(2003)；Blanket al，Cancer Immunol Immunother.，54:307-314(2005)；Konishi et al，Clin.CancerRes..10:5094-5100(2004))。可以通过阻断PD-1与PD-L1的局部相互作用来逆转这种免疫抑制作用，并且当PD-1与PD-L2的相互作用被阻断时效果更加明显(Iwai et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，99:12293-12297(2002)；Brown et al，J.Immunol，170:1257-1266(2003))。

程序性死亡受体1，也被称作CD279，是在活性T细胞，自然杀伤细胞，B细胞和巨噬细胞上表达的细胞表面受体(Greenwald et al，Annu.Rev.Immunol 2005，23:515-548；Okazaki and Honjo，Trends Immunol 2006，(4):195-201)。具有负反馈调节系统的功能，可以阻止T细胞的活化来降低自身免疫性同时增强自我耐受性。另外，还已知PD-1在诸如癌症和病毒感染的疾病中在抑制抗原特异性T细胞应答中起关键作用。(Sharpe et al，NatImmunol 2007 8，239-245；Postow et al，J.Clinical Oncol 2015，1-9)。

PD-1由细胞外免疫球蛋白可变样结构域，跨膜区和细胞内结构域组成(Parry etal，Mol Cell Biol 2005，9543-9553)。细胞内结构域包含位于基于免疫受体酪氨酸的抑制基序和基于免疫受体酪氨酸的开关基序中的两个磷酸化位点，这表明PD-1负调节T细胞受体介导的信号。PD-1具有两个配体PD-L1和PD-L2(Parry等，Mol Cell Biol 2005，9543-9553；Latchman等，Nat Immunol 2001，2，261-268)，它们的表达方式不同。在脂多糖和GM-CSF处理后，PD-L1蛋白在巨噬细胞和树突状细胞上表达上调，并在T细胞受体和B细胞受体信号传导后在T细胞和B细胞上调。PD-L1几乎在所有肿瘤细胞中高度表达，并且在IFN-γ处理后表达进一步增加(Iwai等，PNAS2002，99(19)：12293-7；Blank等，Cancer Res 2004，64(3)：1140-5)。实际上，已经证明肿瘤PD-L1表达状态在多种肿瘤类型中是预后的(Wang等人，Eur J Surg Oncol 2015；Huang等人，Oncol Rep 2015；Sabatier等人，Oncotarget2015，6(7)：5449-5464)。相反地，PD-L2的表达更受限制并且主要由树突细胞表达(Nakae等人，J Immunol 2006，177：566-73)。PD-1及其配体PD-L1和PD-L2在T细胞上的连接可产生相关信号来抑制IL-2和IFN-γ的产生以及T细胞受体激活后诱导的细胞增殖(Carter等，EurJ Immunol 2002，32(3)：634-43；Freeman等，J Exp Med 2000，192(7)：1027-34)。该机制涉及募集SHP-2或SHP-1磷酸酶以抑制T细胞受体信号转导例如Syk和Lck的磷酸化(Sharpe etal，Nat Immunol 2007，8，239-245)。PD-1信号轴的激活还减弱了PKC-θ激活环的磷酸化，这对于NF-κΒ和API途径的激活以及IL-2，IFN-γ和TNF等细胞因子的产生是必不可少的(Sharpe等人，Nat Immunol 2007，8，239-245；Carter等，Eur J Immunol2002，32(3)：634-43；Freeman等，J Exp Med 2000，192(7)：1027-134)。

临床前动物研究的一些证据表明，PD-1及其配体会对免疫反应产生负调节作用。PD-1敲除小鼠会发展出狼疮样肾小球肾炎和扩张性心肌病(Nishimura等，Immunity 1999，11：41-151；Nishimura等，Science 2001，291：319-322)。在慢性LCMV病毒感染模型中，已显示PD-1/PD-L1相互作用可抑制病毒特异性CD8 T细胞的效应子功能的激活，扩展和获得(Barber等，自然2006，439，682-7)。

这些数据支持我们开发一种通过阻断PD-1介导的抑制性信号传导级联反应来增强或“拯救”T细胞反应的治疗方法。目前在免疫疗法中批准的大多数药物都是单克隆抗体。但是，直接靶向PD-1或PD-L1的小分子抑制剂仍未被批准，只有CA170进行了临床评估。

因此仍然强烈需要针对PD-1和PD-L1蛋白/蛋白相互作用的更有效更易于施用的治疗药物。在本发明中，申请人发现了一种有效的小分子可以作为PD-L1与PD-1的相互作用的抑制剂，因此可用于治疗性给药以增强针对癌症和/或传染病的免疫力。这些小分子有望成为具有良好稳定性，溶解性，生物利用度，治疗指数和毒性值的药物，这对于成为促进人类健康的有效药物至关重要。

发明内容

本发明涉及用作PD-L1和PD-1相互作用抑制剂的化合物。PD-1和PD-L1相互作用抑制剂可以用于治疗癌症和其他感染病。

本发明的化合物具有如式I所示的一般结构。一种式I所示的化合物，或其立体异构体，互变异构体，药学上可接受的盐，前药，螯合物，非共价复合物或溶剂化物，

其中，

环A为5-至6-元杂环；所述杂环任选地包含1、2或3个独立选自N，S或O的杂原子；

R

R

R

R

R

R

q为0，1，2或3。

在式(Ⅰ)的一些实施例中，环A为包含1、2或3个独立选自N或S的杂原子的5-元杂环。

在式(Ⅰ)的一些实施例中，R

在式(Ⅰ)的一些实施例中，该化合物如式Ⅱ所示：

其中，

环A和环B分别独立地选自5-至6-元杂环；所述杂环任选地包含1、2或3个独立选自N，S或O的杂原子；

R

R

R

R

R

n，p和q分别独立地选自0，1，2或3。

在式Ⅱ的一些实施例中，环A为5-元杂环。

在式Ⅱ的一些实施例中，环B为6-元杂环。

在式Ⅱ的一些实施例中，R

在式Ⅱ的一些实施例中，R

在式Ⅰ的一些实施例中，R

在式Ⅱ的一些实施例中，R

在式Ⅱ的一些实施例中，R

在式Ⅱ的一些实施例中，n，p和q分别独立地选自0或1。优选地，n为1；p为1；q为1。

在式Ⅱ的一些实施例中，

在式Ⅱ的一些实施例中，其中

在式Ⅰ的一些实施例中，该化合物如式Ⅲ所示：

其中，

环A和环B分别独立地选自5-至6-元杂环；所述杂环任选地包含1、2或3个独立选自N，S或O的杂原子；

R

R

n和p分别独立地选自0，1，2或3。

在式Ⅲ的一些实施例中，R

在式Ⅲ的一些实施例中，

在式Ⅲ的一些实施例中，R

在式Ⅲ的一些实施例中，R

关于式I或式II的化合物，本发明进一步提供了一些优选的技术方案，其中所述化合物为：

1)2-(2-(1'-甲基-[4,4'-二吲哚啉]-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

2)2-(2-(1'-乙酰基-[4,4'-二吲哚啉]-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

3)2-(2-(4-(3-甲氧基苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

4)2-(2-(4-苯基吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

5)2-(2-(4-(o-甲苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

6)2-(2-(1'-(3-吗啉代丙基)-[4,4'-二吲哚啉]-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

7)2-(2-(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

8)2-(2-(4-(3-(2-(3-羟基吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

9)2-(2-(4-(3-(4-(3-羟基吡咯烷-1-基)丁氧基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

10)2-(2-(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

11)2-(2-(1'-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-[4,4'-二吲哚啉]-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

12)2-(2-(1'-(2-(3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)-[4,4'-二吲哚啉]-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

13)2-(2-(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙酰胺基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

14)2-(2-(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙酰胺基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

15)2-(2-(4-(3-(3-吗啉代丙氧基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

16)2-(2-(4-(3-(4-吗啉代丁基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

17)2-(2-(4-(3-(3-吗啉代丙基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

18)(E)-2-(2-(4-(3-(3-吗啉丙酸-1-烯-1-基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

19)2-(2-(4-(3-(2-吗啉代乙基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

20)2-(2-(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙酰胺基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-羰基)-3-甲基-3,4,6,7-四氢-5H-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)乙酸；

21)2-(3-甲基-2-(4-(2-甲基-3-(3-吗啉代丙氧基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-3,4,6,7-四氢-5H-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)乙酸；

22)2-(2-(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙酰胺基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢恶唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

23)2-(2-(4-(2-甲基-3-(3-吗啉代丙氧基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢恶唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

24)2-(2-(1'-(噻唑-2-羰基)-[4,4'-二吲哚啉]-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

25)2-(2-(1'-吡啶甲酰基-[4,4'-二吲哚啉]-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

26)2-(2-(4-(2-甲基-3-(噻唑-2-羧酰胺)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

27)2-(2-(4-(2-甲基-3-(吡啶甲酰胺基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

28)2-(2-(5-苯基-1,2,3,4-四氢喹啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

29)2-(2-(4-(2-甲基-3-(吡啶并[3,4-b]吡嗪-5-氨基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

30)2-(2-(4-(1-甲基-1H-吲唑-4-基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

31)2-(2-(4-(2-甲基-3-(3-甲基-4,5,6,7-四氢-3H-咪唑[4,5-c]吡啶-2-羧酰胺基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

32)2-(2-(4-(2-甲基-3-(1-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-羧酰胺基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

33)2-(2-(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙酰胺基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-羰基)-3-甲基-3,4,6,7-四氢-5H-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)乙酸；

34)3-(3-羟基吡咯烷-1-基)-N-(2-甲基-3-(1-(3-甲基-4,5,6,7-四氢-3H-咪唑[4,5-c]吡啶-2-羰基)吲哚啉-4-基)苯基)丙酰胺；

35)2-(2-(1'-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙酰基)-[4,4'-二吲哚啉]-1-羰基)-3-甲基-3,4,6,7-四氢-5H-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)乙酸；

36)2-(2-(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-羰基)-3-甲基-3,4,6,7-四氢-5H-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)乙酸；

37)2-(2-(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-羰基)-1-甲基-1,4,6,7-四氢-5H-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)乙酸；

38)(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-基)(1-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲酮；

39)(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-基)(3-甲基-4,5,6,7-四氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲酮；

40)(1'-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-[4,4'-二吲哚啉]-1-基)(1-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲酮；

41)(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-基)(5,6,7,8-四氢咪唑并[1,2-a]吡嗪-2-基)甲酮；

42)3-(3-羟基吡咯烷-1-基)-1-(1'-(5,6,7,8-四氢咪唑并[1,2-a]吡嗪-2-羰基)-[4,4'-二吲哚啉]-1-基)丙烷-1-酮；

43)(5-(氨基甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基)(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-基)甲酮；

44)(4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)吲哚啉-1-基)(5-((S)-吡咯烷-2-

基)-1,3,4-噻二唑-2-基)甲酮；

45)(5-(((2-羟乙基)氨基)甲基)噻唑-2-基)(4-(2-甲基-3-(3-(吡咯烷丁-1-基)丙氧基)苯基)吲哚啉-1-基)甲酮；

46)1-(1'-(5-(((2-羟乙基)氨基)甲基)-4-甲基噻唑-2-羰基)-[4,4'-二吲哚啉]-1-基)-3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙烷-1-酮；

47)(4-(1-(3-吗啉代丙基)-1H-吲唑-4-基)吲哚啉-1-基)(5,6,7,8-四氢咪唑并[1,2-a]吡嗪-2-基)甲酮；

48)(4-(1-甲基-1H-吲唑-4-基)吲哚啉-1-基)(5,6,7,8-四氢咪唑并[1,2-a]吡嗪-2-基)甲酮；

49)2-(2-(4-(4-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙酰胺基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

50)2-(2-(4-(4-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)苯基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

51)2-(3-甲基-2-(5-(3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)-1,2,3,4-四氢喹啉-1-羰基)-3,4,6,7-四氢-5H-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)乙酸；

52)2-(1-甲基-2-(5-(3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)-1,2,3,4-四氢喹啉-1-羰基)-1,4,6,7-四氢-5H-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)乙酸；

53)(5-(2-羟乙基)-4,5,6,7-四氢恶唑并[5,4-c]吡啶-2-基)(5-(3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)-3,4-二氢喹啉-1(2H)-基)甲酮；

54)3-(2-(5-(3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)-1,2,3,4-四氢喹啉-1-羰基)-6,7-二氢恶唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)丙酸；

55)2-(2-(4-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)吲哚啉-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸；

56)(4-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)吲哚啉-1-基)(5-(2-羟乙基)-4,5,6,7-四氢噻唑并[5,4-c]吡啶-2-基)甲酮；

57)(4-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)吲哚啉-1-基)(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻唑并[5,4-c]吡啶-2-基)甲酮；

58)(S)-1-((8-((2-甲基-3-(1-(4,5,6,7-四氢噻唑并[5,4-c]吡啶-2-羰基)吲哚啉-4-基)苯基)氨基)-1,7-萘啶-3-基)甲基)哌啶-2-羧酸。

本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含本发明任意一种化合物和一种药学上可接受的辅料。比如羟丙基甲基纤维素。在药物组合物中所述化合物与所述辅料的重量比范围是0.0001-10。

本发明还提供了包含式I或式II的药物组合物在制备用于治疗受试者疾病的药物中的用途。

关于上述用途，本发明还提供了一些优选的技术方案。

在一些实施例中，制备的药物可以用于预防或治疗，或者用于延缓或防止癌症，癌症转移，免疫系统相关疾病的发生或进展。所述癌症包括结肠癌，胃癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，胰腺癌，黑色素瘤，多发性黑色素瘤，脑癌，肾癌，前列腺癌，卵巢癌或乳腺癌。

本发明提供了可以抑制PD-1/PD-L1之间结合的方法，所述方法包括向患者施用含有本发明的化合物或者其药学上可接受的盐或其立体异构体。

本发明提供了一种治疗与抑制PD-1/PD-L1相互作用有关的疾病的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体。所述疾病为结肠癌，胃癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，胰腺癌，黑色素瘤，多发性黑色素瘤，脑癌，肾癌，前列腺癌，卵巢癌或乳腺癌。

本发明提供了一种可以增强，刺激或者增加患者免疫应答的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体。

本发明还提供了本发明化合物或其药物组合物在制备药物中的用途。

在一些实施例中，所述药物用于治疗或预防癌症。

在一些实施例中，所述癌症为结肠癌，胃癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，胰腺癌，黑色素瘤，多发性黑色素瘤，脑癌，肾癌，前列腺癌，卵巢癌或乳腺癌。

在一些实施例中，所述药物用作PD-1/PD-L1相互作用抑制剂。

上式中使用的一般化学术语具有其通常的含义。例如，除非另有说明本文所使用的术语“卤素”，指的是氟，氯，溴或碘。优选地卤素为F，Cl和Br。

除非另有说明本文使用的其他术语，烷基包括具有直链，支链或环状部分的饱和一价烃基。例如，烷基包括甲基，乙基，丙基，异丙基，环丙基，正丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，环丁基，正戊基，3-(2-甲基)丁基，2-戊基，2-甲基丁基，新戊基，环戊基，正己基，2-己基，2-甲基戊基和环己基。类似地，C

烯基和炔基包括直链，支链或环状的烯烃和炔烃。同样地，“C

烷氧基是由前述直链，支链或环状烷基形成的氧醚。

除非另有说明，本文使用的术语“芳基”包括含有碳环原子的未取代或取代的单环或多环系统。优选的芳基是单环或双环的6-10元芳族环系统。苯基和萘基是优选的芳基。最优选的芳基是苯基。

除非另有说明，本文使用的术语“杂环基”表示未取代或取代的稳定的三至八元单环饱和环系统，其由碳原子和选自N，O或S的1-3个杂原子组成，并且其中氮或硫杂原子可任选被氧化，并且氮杂原子可任选被季铵化。杂环基可以连接在任何杂原子或碳原子上，以形成稳定的结构。这些杂环包括但不限于氮杂环丁烷基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，氧哌嗪基，氧哌啶基，氧杂庚基，庚啶基，四氢呋喃基，二氧戊环基，四氢咪唑基，四氢噻唑基，四氢恶唑基，四氢吡喃基，吗啉基，硫代吗啉基，噻吗啉基亚砜，噻吗啉基砜和恶二唑基。

除非另有说明，本文使用的术语“杂芳基”表示未取代或者取代的稳定的5至6元单环芳族环系或未取代或者取代的稳定的9至10元苯并稠合杂芳族环系或双环杂芳族环系，其有碳原子或者选自N，O或S的1-4个杂原子组成。其中氮或硫杂原子可任选被氧化，而氮杂原子可任选被季铵化。杂芳基可以连接在任何杂原子或碳原子上，以形成稳定的结构。杂芳基包括但不限于噻吩基，呋喃基，咪唑基，异恶唑基，恶唑基，吡唑基，吡咯基，噻唑基，噻二唑基，三唑基，吡啶基，哒嗪基，吲哚基，氮杂吲哚基，吲唑基，苯并咪唑基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，苯并异恶唑基，苯并恶唑基，苯并吡唑，苯并噻唑基，苯并噻二唑，苯并三唑基腺嘌呤基，喹啉基或异喹啉基。

术语“烯基氧基”是指-O-烯基基团，其中烯基如上定义。

术语“炔基氧基”是指-O-炔基基团，其中炔基如上定义。

术语“环烷基”是指具有3至12个碳原子的环状饱和烷基链，例如环丙基，环丁基，环丁基，环丁基。

术语“取代”是指基团中的一个或多个氢原子被分别独立地被相同或不同的取代基取代。常见的取代基包括但不限于卤素(F，Cl，Br或I),C

本文中术语“组合物”是指包含指定数量的指定成分的产品，以及直接或间接地由指定量的指定成分的组合产生的任何产品。含有本发明化合物作为活性成分或者化合物制备方法的均属于本发明。另外，化合物的一些晶体形式会以多晶型形态存在，这也包括在本发明范围内。还有一些情况下该化合物会和水或其他常见有机溶剂形成溶剂化物，这些溶剂化物也包括在本发明范围内。

被取代的烷基包括但不限于2-氨基乙基，2-羟乙基，五氯乙基，三氟甲基，甲氧基甲基，五氟乙基和哌嗪基甲基。

被取代的烷氧基包括但不限于氨基甲氧基，三氟甲氧基，2-二乙基氨基乙氧基，2-乙氧基羰基乙氧基，3-羟基丙氧基。

本发明化合物也可以药学上可接受的盐形式存在，医药用途中，本发明化合物的盐形式是指无毒的药学上可接受的盐。药学上可接受的盐形式包括药学上可接受的酸性/阴离子或碱性/阳离子盐。药学上可接受的酸性/阴离子盐通常采用碱性氮被无机或有机酸质子化的形式。代表性的有机或无机酸包括盐酸，氢溴酸，氢氟酸，高氯酸，硫酸，硝酸，磷酸，乙酸，丙酸，乙醇酸，乳酸，琥珀酸，马来酸，富马酸，苹果酸，酒石酸，柠檬酸，苯甲酸，扁桃酸，甲磺酸，羟基乙磺酸，苯磺酸，草酸，帕莫酸，2-萘磺酸，对甲苯磺酸，环己烷氨基磺酸，水杨酸，糖精或三氟乙酸。药学上可接受的碱性/阳离子盐包括但不限于铝，钙，氯普鲁卡因，胆碱，二乙醇胺，乙二胺，锂，镁，钾，钠和锌。

在本发明领域内还包括了本发明化合物的前药。通常，前药是该化合物的功能性衍生物，可以在体内转化为所需的化合物。因此，在本发明中的治疗方法中，术语“施用”应包括应用已公开的具体化合物或可能未具体公开但是在患者体内可以转化成特定化合物的化合物来治疗各种疾病。选择和制备常规的前药的常规方法描述于例如“Design ofProdrugs”,ed.H.Bundgaard,Elsevier,1985。

化合物分子中特定位置的取代基或者变量的定义独立于该分子中的其他位置。这可以理解为化合物的取代基或者取代方式由本领域普通技术人员决定以提供一个稳定的化合物，并且该化合物可以通过本领域已知的技术方法合成。

本发明描述的化合物可以包含一个或者多个不对称中心，并因此可产生非对应异构体和旋光异构体。本发明包括所有这些可能的非对映异构体及其外消旋混合物，其基本上纯的拆分的对映异构体，所有可能的几何异构体及其药学上可接受的盐。

上述式Ⅰ和式Ⅱ没有一个确定的立体化学结构。本发明包括式Ⅰ和式Ⅱ的所有立体异构体和其药学上可接受的盐。而且，立体异构体的混合物或者已经分离的特定异构体也包括在本发明范围内。在用于制备此类化合物的合成过程中，或在使用本领域技术人员已知的外消旋化或差向异构化方法的过程中，此类过程的产物可以是立体异构体的混合物。

当存在式Ⅰ和Ⅱ的化合物的互变异构体时，除非另有具体说明，本发明包括任何可能的互变异构体和其药学上可接受的盐，以及它们的混合物。

当本发明化合物药学上可接受的盐以溶剂化物或者多晶型形态存在时，本发明包括任何一种溶剂化物或者多晶型物。形成溶剂化物的溶剂只要是药理学上可接受的在本发明中没有特别地限制。例如，水，乙醇，丙醇，丙酮等均可应用。

术语“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒的酸或碱制备得来的。当本发明化合物是酸性时，其相对应的盐可由药学上可接受的无毒的碱来制备，包括无机碱和有机碱。衍生自无机碱的盐包括铝，铵，钙，铜(一价和二价)，铁，亚铁，锂，镁，锰(一价和二价)，钾，钠，锌等盐。特别优选地为铵，钙，镁，钾和钠盐。衍生自药学上可接受的有机无毒碱的盐包括伯，仲和叔胺的盐，以及环胺和取代的胺，例如天然存在的和合成的取代的胺。可以形成盐的其他药学上可接受的有机无毒碱包括离子交换树脂，例如精氨酸，甜菜碱，咖啡因，胆碱，N'，N'-二苄基乙二胺，二乙胺，2-二乙基氨基乙醇，2-二甲基氨基乙醇，乙醇胺，乙二胺，N-乙基吗啉，N-乙基哌啶，葡糖胺，葡糖胺，组氨酸，肼苯胺，异丙胺，赖氨酸，甲基葡糖胺，吗啉，哌嗪，哌啶，聚胺树脂，普鲁卡因，嘌呤，可可碱，三乙胺，三甲胺，三丙胺，丙胺等。

当该化合物为碱性时，其相应的盐可由药学上接受的无毒的酸来制备，包括无机酸和有机酸。例如说这些酸包括醋酸，苯磺酸，苯甲酸，樟脑磺酸，柠檬酸，乙磺酸，甲酸，富马酸，葡萄糖酸，谷氨酸，氢溴酸，盐酸，等离子，乳酸，马来酸，苹果酸，扁桃酸，甲磺酸，粘胶，硝酸，帕莫酸，泛酸，磷酸，琥珀酸酒石酸，对甲苯磺酸等。优选的是柠檬酸，氢溴酸，甲酸，盐酸，马来酸，磷酸，硫酸和酒石酸，特别优选的是甲酸和盐酸。由于式I化合物旨在用于药物用途，因此它们优选以基本上纯的形式提供，例如至少60％的纯度，更合适地至少75％的纯度，尤其是至少98％的纯度(％为重量计)基础)。

本发明的药用组合物包含式Ⅰ所示的化合物(或其药学上可接受的盐)作为活性成分，药学可接受的载体和任选的其他有治疗作用的成分或者佐剂。该药用组合物可口服，直肠，局部和肠胃外(包括皮下，肌内和静脉内)给药，尽管在任何给定情况下最合适的活性成分给药途径将取决于特定的宿主，以及疾病的性质和严重程度。药物组合物可以方便地以单位剂型存在，并且可以通过药学领域公知的任何方法制备。

在实践中，本发明的由式Ⅰ表示的化合物或其前药，代谢物或药学上可接受的盐可以作为活性成分与药物载体按照常规药物混合技术紧密混合。载体可以采取多种形式，这取决于给药所需的制剂形式，例如口服或肠胃外(包括静脉内)。因此，本发明的药物组合物可以以适合口服的离散单位存在，例如分别含有预定量的活性成分的胶囊，扁囊剂或片剂。此外，组合物可以粉末，颗粒，溶液，在水性液体中的悬浮液，非水液体，水包油型乳剂或油包水形式存在。液体乳液。除上述常见剂型外，式Ⅰ代表的化合物或其药学上可接受的盐也可以通过控释装置和/或递送装置给药。所述组合物可以通过任何药学方法制备。通常，这样的方法包括使活性成分与构成一种或多种必要成分的载体结合的步骤。通常，通过将活性成分与液体载体或细分的固体载体或两者均匀和紧密地混合来制备组合物。然后可以将产品方便地成形为所需的外观。

因此，本发明的药用组合物包括药学上可接受的载体和式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐。式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐也可包括在与一种或多种其他有治疗作用的化合物联合治疗的药用组合物中。

药用载体可以为例如固体，液体或气体。固体载体的实例包括例如乳糖，石膏粉，蔗糖，滑石粉，明胶，琼脂，果胶，阿拉伯胶，硬脂酸镁和硬脂酸。液体载体的实例包括例如糖浆，花生油，橄榄油和水。气态载体的实例包括例如二氧化碳和氮气。在制备口服剂型的组合物中，可以使用任何方便的药物介质。例如，水，乙二醇，油，醇，矫味剂，防腐剂，着色剂等可用于形成口服液体制剂，例如混悬剂，酊剂和溶液；或用于制备口服液体制剂。载体如淀粉，糖，微晶纤维素，稀释剂，制粒剂，润滑剂，粘合剂，崩解剂等可用于形成口服固体制剂，如粉剂，胶囊剂和片剂。由于易于给药，使用固体药物载体的片剂和胶囊剂是优选的口服剂量单位。任选地，片剂可以通过标准的水性或非水性技术进行包衣。

含有本发明组合物的片剂可以通过压制或模制来制备，任选地与一种或多种辅助成分或佐剂一起制备。可以通过在合适的机器中将自由流动形式的活性成分例如粉末或颗粒压缩，任选地与粘合剂，润滑剂，惰性稀释剂，表面活性剂或分散剂混合来制备压制片剂。模制片剂可以通过将用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物在合适的机器中模制来制备。每个片剂优选包含约0.05mg至约5g的活性成分，每个扁囊剂或胶囊优选包含约0.05mg至约5g的活性成分。例如，打算对人口服给药的制剂可含有约0.5mg至约5g的活性剂，与适当和方便量的载体材料混合，所述载体材料的量可为总组合物的约5％至约95％。单位剂型通常包含约1mg至约2g的活性成分，通常为25mg，50mg，100mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，800mg或1000mg。

适用于肠胃外给药的本发明药物组合物可以制备成活性化合物在水中的溶液或悬浮液。可以包含适当的表面活性剂，例如羟丙基纤维素。分散剂也可以在甘油，液体聚乙二醇及其在油中的混合物中制备。此外，也可以包含防腐剂以防止微生物的有害生长。

适用于注射用途的本发明药物组合物包括无菌水溶液或分散液。此外，该组合物可以是用于临时制备这种无菌注射溶液或分散液的无菌粉末形式。在所有情况下，最终的可注射形式必须是无菌的，并且必须有效地流动以易于注射。药物组合物在生产和储存条件下必须稳定。因此，最好保存起来以防微生物如细菌和真菌的污染。载体可以是含有例如水，乙醇，多元醇(例如甘油，丙二醇和液态聚乙二醇)，植物油及其合适混合物的溶剂或分散介质。

本发明的药物组合物可以是适合局部使用的形式，例如气雾剂，乳膏，软膏剂，洗剂，撒粉剂等。此外，该组合物可以是适用于透皮装置的形式。这些包含本发明的式I所示化合物或其药学上可接受的盐的制剂可以通过常规加工方法制备。例如，乳膏剂或软膏剂可以通过将亲水性材料和水以及约5wt％至约10wt％的化合物混合以制备具有所需稠度的乳膏或软膏来制备。

本发明的药物组合物可以是适于直肠给药的形式，其中载体是固体。优选混合物形成单位剂量的栓剂。合适的载体包括可可脂和本领域常用的其他材料。通过首先将组合物与软化或熔融的载体混合，然后在模具中冷却和成形，可以方便地形成栓剂。

除上述载体成分外，上述药物制剂还可酌情包括一种或多种其他载体成分，例如稀释剂，缓冲剂，调味剂，粘合剂，表面活性剂，增稠剂，润滑剂，防腐剂(包括抗氧化剂)等等。此外，可以包含其他佐剂以使制剂与预期接受者的血液等渗。含有式I描述的化合物或其药学上可接受的盐的组合物也可以以粉末或液体浓缩物的形式制备。

通常，每天约0.01mg/kg至约150mg/kg的剂量水平可用于治疗上述病症，或者每位患者每天可选约0.5mg至约7g的剂量。例如，结肠癌，直肠癌，套细胞淋巴瘤，多发性骨髓瘤，乳腺癌，前列腺癌，胶质母细胞瘤，鳞状细胞食管癌，脂肪肉瘤，T细胞淋巴瘤黑素瘤，胰腺癌，胶质母细胞瘤或肺癌可以通过以下方法有效治疗：每天每公斤体重施用约0.01至50mg化合物，或者每人每天施用约0.5mg至约3.5g化合物。

但是，应理解，可能需要比上述剂量更低或更高的剂量。任何特定受试者的具体剂量水平和治疗方案将取决于多种因素，包括所用特定化合物的活性，年龄，体重，一般健康状况，性别，饮食，给药时间，给药途径，排泄速度，药物联用，，正在接受治疗的特定疾病的严重程度和病程，该乳膏剂或软膏剂可以以及治疗医师的判断。

这些和其他方面将从本发明的以下书面描述中变得显而易见。

提供以下实施例以更好地说明本发明。除非另有明确说明，所有份数和百分比均以重量计，所有温度均为摄氏度。

将通过具体实施例更详细地描述本发明。以下实施例仅用于说明性目的，不以任何方式限制本发明。本领域技术人员将容易地认识到可以改变或修改以产生基本相同结果的各种非关键参数。实施例的化合物可以根据本文所述的至少一种测定法，以发现其抑制PD-1/PD-L1蛋白/蛋白相互作用的活性。

具体实施方式

制备本发明化合物的实验步骤如下所述。利用开放获取制备型LCMS在Waters质量导向分馏系统上纯化了一些制备的化合物。用于这些系统操作的基本设备设置，协议和控制软件已在文献中进行了详细描述。参见，例如，Blom，“用于制备型LC-MS的两泵在柱稀释配置中”，K.Blom，J.Combi.Chem，2002，4，295-301；Blom等人，“优化用于平行合成纯化的制备型LC-MS配置和方法”，J.Combi.Chem，2003，5，670-83；和Blom等人，“制备型LC-MS纯化：改进的化合物特异性方法优化”，J.Combi.Chem，2004，6，874-883

实施例中使用了下列缩略语：

Boc：t-叔丁氧羰基；

BSA：牛血清白蛋白；

DCM：二氯甲烷；

DIEA：二异丙基乙胺；

DMF：N，N-二甲基甲酰胺；

DMSO：二甲基亚砜；

Et

EtOAc：乙酸乙酯；

h或hrs：小时；

HATU：O-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯；

HTRF：均相时间分辨荧光；

MeCN：甲基氰；

min：分钟；

Pd(dppf)Cl.CH

rt or r.t.：室温；

TFA：三氟乙酸；

THF：四氢呋喃。

制备1

叔丁基(S)-2-(5-((3-溴-2-甲基苯基)氨基甲酰基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸酯

向Boc-L-脯氨酸(2.15g)和2-肼基-2-氧代乙酸乙酯(1.98g)的干燥DMF溶液中添加DIPEA(2.60g)。室温下分批加入HATU(5.70g)。同样温度下搅拌混合物两小时。减压蒸馏去除DMF。将残余物直接通过RP柱纯化(流动相：MeCN:水＝30:70)，得到叔丁基(S)-2-(2-(2-(2-乙氧基-2-氧代乙酰基)肼-1-羰基)吡咯烷-1-羧酸盐为白色固体(2.42g)。

向含有叔丁基(S)-2-(2-(2-(2-乙氧基-2-氧代乙酰基)肼-1-羰基)吡咯烷-1-羧酸酯(2.31g)的THF溶液中加入劳森试剂(3.40g)。所得混合物加热回流2小时。通过饱和Na

向含有乙基(S)-5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷丁-2-基)-1,3,4-噻二唑-2-羧酸酯(1.61g)的THF/水＝1:1的溶液(20ml)中加入LiOH(0.86g)。将所得产物在室温下搅拌3小时。通过2M HCl淬灭反应，然后调节pH至4-5。蒸发去除水和THF。所得固体通过硅胶柱纯化(流动相：用MeCN-水以10:90到30:70进行梯度洗脱)，得到(S)-5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1,3,4-噻二唑-2-羧酸为白色固体(0.9g)。

向含有3-溴-2-甲基苯胺(0.84g)和(S)-5-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1,3,4-噻二唑-2-羧酸(0.90g)的干燥DMF(20.0ml)溶液中加入DIPEA(0.85g)，室温下分批加入HATU(1.93g)。同样温度下搅拌混合物3小时。通过饱和Na

制备2

(8-((3-溴-2-甲基苯基)氨基)-1,7-萘啶-3-基)甲醇

向含有3-溴-8-氯-1,7-萘啶(2.43g)的甲苯(30ml)中加入EtOH(10mL)，10％Na

向含有8-氯-3-乙烯基-1,7-萘啶(380mg)的1,4-二氧六环(20ml)中和水(20ml)的溶液中加入OsO

将上述醛溶于20mL MeOH中。一次性加入NaBH

向微波反应瓶中加入3-溴-2-甲基苯胺(370mg)，(8-氯-1,7-萘啶-3-基)甲醇(98mg，0.37mmol)，LiHMDS(1.0M的THF溶液，4.0mL)和四氢呋喃(3.5mL)。将小瓶加盖，并将反应混合物在60℃下加热4小时。将其用20mL水稀释，然后用DCM(20mL×2)萃取。合并的有机萃取物用盐水洗涤，经MgSO

制备3

步骤1

向含有3-溴-2-甲基苯酚(50mg)的ACN(20mL)溶液中加入DCE(100mg)和K

步骤2

向含有1-溴-3-(2-氯乙氧基)-2-甲基苯(50mg)的DMF(20mL)溶液中加入(S)-吡咯烷丁-3-醇(100mg)和K

步骤3

向含有(S)-1-(2-(3-溴-2-甲基苯氧基)乙基)吡咯烷-3-醇(200mg)的二氧六环(6mL)溶液中，加入4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼烷)(180mg)，KOAC，Pd(dppf)Cl

实施例1化合物1的合成

2-(2-(1'-甲基-[4,4'-二吲哚啉]-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸

向含有4-溴吲哚(50mg)的ACN(20mL)的溶液中加入碘甲烷(100mg)和K

向含有4-溴-1-甲基吲哚啉(100mg)的二氧六环(6mL)溶液中加入4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼烷)(100mg)，KOAC(50mg)，Pd(dppf)Cl

将化合物1-2(50mg),化合物4-3(40mg)，K

实施例4化合物4的合成

2-(2-(4-苯基二氢吲哚-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸

步骤一：叔丁基2-(4-溴吲哚-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-乙酸酯的制备

向5-(叔丁氧羰基)-4,5,6,7-四氢噻唑并[5,4-c]吡啶-2-羧酸(200mg)的干燥二氯甲烷溶液中加入HATU(200mg)和DIEA(5mL)。搅拌混合物10分钟。加入4-溴吲哚啉。室温下搅拌混合物两小时。加入100mL EA后用盐水洗涤(4X20mL)。有机相用Na

步骤2(4-溴吲哚-1-基)(4,5,6,7-四氢噻唑并[5,4-c]吡啶-2-基)甲酮的制备

向含有叔丁基2-(4-溴吲哚-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-乙酸酯(300mg)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入TFA(3mL)。搅拌混合物12小时。然后浓缩反应物料，并用正己烷洗涤，得到(4-溴吲哚-1-基)(4,5,6,7-四氢噻唑并[5,4-c]吡啶-2-基)甲酮(180mg)。步骤3叔丁基2-(2-(4-溴吲哚-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸酯的制备

向(4-溴吲哚-1-基)(4,5,6,7-四氢噻唑并[5,4-c]吡啶-2-基)甲酮(90mg)的CH

步骤4叔丁基2-(2-(4-苯基二氢-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸酯(化合物4-4)的制备

将叔丁基2-(2-(4-溴吲哚-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸酯(50mg)，4,4,5,5-四甲基-2-苯基-1,3,2-二氧杂硼烷(40mg)，K

步骤5 2-(2-(4-苯基二氢吲哚-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸(化合物4)的制备。

向叔丁基2-(2-(4-苯基二氢-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸酯(50mg)的甲苯(5mL)溶液中加入TFA(5mL)。混合物在50℃下加热回流2小时。将反应物料浓缩后得到2-(2-(4-苯基二氢吲哚-1-羰基)-6,7-二氢噻唑并[5,4-c]吡啶-5(4H)-基)乙酸(35mg)。

基本上如实施例1、2、3或4所述，使用相应的起始原料或中间体制备以下实施例(表1所示)。

表1

均相时间分辨荧光(HTRF)结合试验

测试在标准黑色384孔聚苯乙烯平板中进行，最终体积为20μL。首先在DMSO中连续稀释抑制剂，然后在添加其他反应组分之前将其添加到板孔中。测定DMSO的最终浓度为1％。该测定是在25℃，含0.05％吐温-20和0.1％BSA的PBS缓冲液(pH 7.4)中进行的。C端带有His-标签的重组人PD-L1蛋白(19-238)购自AcroBiosy stems(PD1-H5229)。C末端带有Fc标签的重组人PD-1蛋白(25-167)同样购自AcroBiosy stems(PD1-H5257)。在测定缓冲液中稀释PD-L1和PD-1蛋白，并向板孔中加入10μL。将板离心，并将蛋白质与抑制剂预孵育40分钟。孵育后，添加10μL HTRF检测缓冲液，该缓冲液中补充了对Fc有特异性的加密标记的抗人IgG(PerkinElmer-AD0212)和与

如实施例中所例示的，本发明的化合物的IC 50值在以下范围内：“*”代表“IC

表2