一种骨髓肽组合物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及骨髓肽制备技术领域，更具体的说是涉及一种骨髓肽组合物及其制备方法与应用。

背景技术

牛羊骨髓中含有很多维持人体生命所需要的营养，其中有人脑不可缺少的磷脂质、磷蛋白等，还有防止人体老化的骨胶原，软骨素、促进肝功能的蛋氨酸、各类氨基酸、维生素A、B1、B2及其它微量元素。

目前市面上以牛羊骨髓为原料的产品不多，基本以直接加热食用为主，而直接食用的同时也摄入了大量的脂肪类物质，在本质上也不能够改变原有蛋白质的大分子结构，很难被人体吸收和利用。

骨髓肽，是由牛或羊骨髓蛋白质酶解得到的蛋白质片段。骨髓肽可以直接被人体吸收，直接参与生命活动。并且骨髓肽具有修复受损细胞、刺激免疫球蛋白产生抗体，激活细胞内溶酶体系的活力等有益效果。目前制备骨髓肽的工艺大同小异，均为牛羊骨粉碎、高温蒸煮、酶解、脱色、超滤灭菌、干燥这样的传统工艺，但是其中高温蒸煮时间过长会导致所生产的骨髓肽粉微苦，口感较差，时间过短则会大大降低骨髓肽的提取效率；并且传统的干燥工艺干燥时骨髓肽内的水分含量较高，导致干燥效果不稳定，进而导致所生产的骨髓肽粉颜色品相较差，后期得到的成品易染菌，同时传统生产骨髓肽粉工艺还具有生产耗时长的问题。

因此，提供一种生产耗时短，品相高的骨髓肽是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种骨髓肽组合物及其制备方法与应用。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种骨髓肽的制备方法，包括以下步骤：

(1)清洗破碎；(2)高温高速离心提取；(3)酶解；(4)螯合；(5超滤)；(6)脱色脱腥过滤；(7)干燥杀菌；

(1)清洗破碎：选择一定量的经检验检疫合格的新鲜牛骨或羊骨，进行破碎，然后进行清洗；

(2)高温高速离心提取：将步骤(1)中清洗后的骨块与清水按照质量比1：1.8-2.5混合置于微波提取罐中进行加热，微波功率设定为5KW，加热至120-125℃，保持1.8-2.5h，接着将所述微波提取罐内的液体移送至静置罐中，静置60-80min，进行油汤分离，得到清液；

将清液高速离心10min，转速为15000-20000r/min，得到蛋白膏；

(3)酶解：将步骤(2)中的所述蛋白膏与蒸馏水按重量比1：20混匀得蛋白液，置于酶解罐中，升温至设定灭菌温度并按照设定灭菌时长进行保持，然后降温至设定酶解温度，加入配置液将蛋白液PH值调节至中性，投入蛋白酶制剂进行水解，并保持至设定酶解时长，酶解结束后升温至设定灭酶温度，并保持至设定灭酶时长，形成灭酶后的水解液；杀菌灭酶，离心分离，得到酶解液；

(4)螯合：将酶解液与蒸馏水按重量比1：10混匀，调节pH值为6.5-7.0，加入1％重量七水合硫酸锌，35-40℃震荡合成0.5-1h，于3-4℃温度下以10000-12000r/min离心浓缩20-30min，弃沉淀，取螯合肽上清液；

(5)超滤：对步骤(4)获得的螯合肽上清液进行超滤处理，得超滤螯合肽；所述超滤处理包括一级超滤处理和二级超滤处理，所述一级超滤处理的超滤膜孔径为180000～200000分子量，所述二级超滤处理的超滤膜孔径为5000～6000分子量；

(6)脱色脱腥过滤：将步骤(3)中的所述超滤螯合肽、硅藻土和活性炭按照质量比1000：6-8：4-5搅拌混合1-1.5h，得到混合料液；接着混合料液经过过滤得到滤液；

(7)干燥杀菌：将步骤(4)中的滤液送至双效浓缩器中进行浓缩，得到水分含量为55％-60％的骨髓肽液，接着对所述骨髓肽液进行喷雾干燥，得到骨髓肽粉。

进一步的，步骤(1)所述清洗破碎步骤中的设定破碎尺寸范围为10-20cm，然后将所述骨块置于洗骨机中用清水清洗30-40min，洗骨机的转速为40-60rpm，最后沥干所述骨块。

进一步的，步骤(2)中所述骨块与清水按照质量比为1：2，设定保温范围为121℃，设定保温时长范围为2h，将所述微波提取罐内的液体移送至静置罐中，静置罐内的液体静置70min后进行油汤分离，得到清液。

进一步的，所述清液的糖度为7％-8％。

进一步的，步骤(3)中的所述酶解具体包括以下步骤：

(a)一次酶解：将步骤(2)中加入骨胶原蛋白酶，碱性活性蛋白酶，所述清液，骨胶原蛋白酶，碱性活性蛋白酶按照质量比为1200-1300：5：1置于酶解罐中进行酶解，pH值为6-8，酶解3-4h，酶解的温度为55-60℃；得到一次酶解液；

(b)二次酶解：向步骤(a)中的所述一次酶解液中加入纤维蛋白酶与风味活性蛋白酶，所述一次酶解液，纤维蛋白酶，风味活性蛋白酶的质量比为14000：5：1，pH值为6-8，酶解0.5h，酶解的温度为55-60℃，得到二次酶解液。

进一步的，所述一次酶解与二次酶解的pH值为6.5-7.5，所述一次酶解与二次酶解的温度为55℃。

进一步的，步骤(3)中的所述杀菌灭酶的温度为85-90℃，所述杀菌灭酶的时间为10-15min。

进一步的，步骤(6)中的所述硅藻土的粒径为298目，密度为2.1-2.4g/cm

一种骨髓肽组合物，分子量为100-500Da。

一种骨髓肽在制备抗氧化、抗衰老药物中的应用。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明有效地解决了大分子蛋白质如何被人体有效吸收和利用的问题，并转化和提取蛋白质的小分子。本发明的牛和羊骨髓肽是从牛和羊的骨髓生物酶解提取得到的小分子肽材料。牛、羊骨髓肽的精华具有极强的活性，易被人体吸收，能全面调节人体免疫力。本发明不含任何化学成分或激素，对人体没有毒性或副作用，是一种非常纯的营养物质。它可以在不搅拌的情况下快速溶解在水中，水溶液清澈透明，使其成为白色或浅黄色的透明液体，不会沉淀任何杂质或沉淀物。它在人体的生长、发育、新陈代谢和繁殖等生理活动中起着至关重要的作用。

通过本发明制备的牛和羊骨髓肽的分子量低于1000道尔顿，并且它们具有高的消化率、吸收率和利用效率。它可以直接被人体吸收，而不需要经过胃肠道消化。它可以有效地保证人体蛋白质的补充。牛、羊骨髓肽活性强，易被人体吸收，能全面调节人体免疫系统。功能实验表明，牛和羊骨髓肽可以有效调节人TH/TS比率，防止该比率随着年龄的增长而降低。牛和绵羊骨髓肽具有改善免疫功能的作用。细胞学实验表明，牛、羊骨髓肽能有效防止自由基损伤人体细胞膜，减缓人体细胞衰老过程，并能有效提高SOD活性。它可以促进骨骼生长，预防儿童软骨病、老年骨质疏松症，缩短骨折患者的恢复期。

本发明公开的制备骨髓肽的方法使用了由硅藻土和活性炭组成的脱色剂，该脱色剂比其他类型的脱色剂具有明显更好的除臭效果，显著提高了滤液的澄清度。同时，由于活性炭与硅藻土之间的相互吸附，有效地保证了过滤滤液中没有活性炭残留，从而保证了干燥骨髓肽粉产品的质量。

本发明通过调节双效浓缩器的工艺参数来浓缩滤液，从而提高骨髓肽溶液的浓度。骨髓肽溶液进入干燥塔后，能快速去除水分，呈现良好的色泽和口感，显著改善了骨髓肽粉末产品的干燥效果和外观。本发明采用微波干燥杀菌机对干燥后的骨髓肽粉进行杀菌。杀菌效果好，速度快。在保留了骨髓肽粉中的营养成分和传统风味的同时，还可以延长骨髓肽粉的保质期，解决骨髓肽粉成品容易感染细菌的问题，大大提高加工质量和产品质量。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种骨髓肽的制备方法，包括以下步骤：

(1)清洗破碎：选择一定量的经检验检疫合格的新鲜牛骨或羊骨，进行破碎，破碎尺寸范围为10-20cm，将骨块置于洗骨机中用清水清洗30-40min，洗骨机的转速为40-60rpm，最后沥干骨块；

(2)高温高速离心提取：将步骤(1)中清洗后的骨块与清水按照质量比1：2混合置于微波提取罐中进行加热，微波功率设定为5KW，加热至121℃，保持2h，接着将所述微波提取罐内的液体移送至静置罐中，静置70min，进行油汤分离，得到清液(糖度为7％-8％)；

将清液高速离心10min，转速为20000r/min，得到蛋白膏；

(3)酶解：将步骤(2)中的所述蛋白膏与蒸馏水按重量比1：20混匀得蛋白液，置于酶解罐中，升温至设定灭菌温度并按照设定灭菌时长进行保持，温度为90℃，时间为10min；

酶解，具体包括以下步骤：

(a)一次酶解：将步骤(2)中加入骨胶原蛋白酶，碱性活性蛋白酶，所述清液，骨胶原蛋白酶，碱性活性蛋白酶按照质量比为1200：5：1置于酶解罐中进行酶解，pH值为6.5-7.5，酶解4h，酶解的温度为55℃；得到一次酶解液；

(b)二次酶解：向步骤(a)中的所述一次酶解液中加入纤维蛋白酶与风味活性蛋白酶，所述一次酶解液，纤维蛋白酶，风味活性蛋白酶的质量比为14000：5：1，pH值为6.5-7.5，酶解0.5h，酶解的温度为55℃，得到二次酶解液；

杀菌灭酶，温度为90℃，时间为10min，离心分离，得到酶解液；

(4)螯合：将酶解液与蒸馏水按重量比1：10混匀，调节pH值为6.5-7.0，加入1％重量七水合硫酸锌，40℃震荡合成0.5h，于4℃温度下以12000r/min离心浓缩20min，弃沉淀，取螯合肽上清液；

(5)超滤：对步骤(4)获得的螯合肽上清液进行超滤处理，得超滤螯合肽；所述超滤处理包括一级超滤处理和二级超滤处理，所述一级超滤处理的超滤膜孔径为180000～200000分子量，所述二级超滤处理的超滤膜孔径为5000～6000分子量；

(6)脱色脱腥过滤：将步骤(3)中的所述超滤螯合肽、硅藻土和活性炭按照质量比1000：6：4搅拌混合1h，得到混合料液；接着混合料液经过过滤得到滤液；硅藻土的粒径为298目，密度为2.1-2.4g/cm

(7)干燥杀菌：将步骤(4)中的滤液送至双效浓缩器中进行浓缩，得到水分含量为55％-60％的骨髓肽液，接着对所述骨髓肽液进行喷雾干燥，得到骨髓肽粉。

实施例2

(1)清洗破碎：选择一定量的经检验检疫合格的新鲜牛骨或羊骨，进行破碎，破碎尺寸范围为10-20cm，将骨块置于洗骨机中用清水清洗30-40min，洗骨机的转速为40-60rpm，最后沥干骨块；

(2)高温高速离心提取：将步骤(1)中清洗后的骨块与清水按照质量比1：2.5混合置于微波提取罐中进行加热，微波功率设定为5KW，加热至125℃，保持1.8h，接着将所述微波提取罐内的液体移送至静置罐中，静置80min，进行油汤分离，得到清液(糖度为7％-8％)；

将清液高速离心10min，转速为15000r/min，得到蛋白膏；

(3)酶解：将步骤(2)中的所述蛋白膏与蒸馏水按重量比1：20混匀得蛋白液，置于酶解罐中，升温至设定灭菌温度并按照设定灭菌时长进行保持，温度为85℃，时间为15min；

酶解，具体包括以下步骤：

(a)一次酶解：将步骤(2)中加入骨胶原蛋白酶，碱性活性蛋白酶，所述清液，骨胶原蛋白酶，碱性活性蛋白酶按照质量比为1300：5：1置于酶解罐中进行酶解，pH值为6.5-7.5，酶解3h，酶解的温度为60℃；得到一次酶解液；

(b)二次酶解：向步骤(a)中的所述一次酶解液中加入纤维蛋白酶与风味活性蛋白酶，所述一次酶解液，纤维蛋白酶，风味活性蛋白酶的质量比为14000：5：1，pH值为6.5-7.5，酶解0.5h，酶解的温度为60℃，得到二次酶解液；

杀菌灭酶，温度为85℃，时间为15min，离心分离，得到酶解液；

(4)螯合：将酶解液与蒸馏水按重量比1：10混匀，调节pH值为6.5-7.0，加入1％重量七水合硫酸锌，35℃震荡合成1h，于3℃温度下以10000r/min离心浓缩30min，弃沉淀，取螯合肽上清液；

(5)超滤：对步骤(4)获得的螯合肽上清液进行超滤处理，得超滤螯合肽；所述超滤处理包括一级超滤处理和二级超滤处理，所述一级超滤处理的超滤膜孔径为180000～200000分子量，所述二级超滤处理的超滤膜孔径为5000～6000分子量；

(6)脱色脱腥过滤：将步骤(3)中的所述超滤螯合肽、硅藻土和活性炭按照质量比1000：8：5搅拌混合1h，得到混合料液；接着混合料液经过过滤得到滤液；硅藻土的粒径为298目，密度为2.1-2.4g/cm

(7)干燥杀菌：将步骤(4)中的滤液送至双效浓缩器中进行浓缩，得到水分含量为55％-60％的骨髓肽液，接着对所述骨髓肽液进行喷雾干燥，得到骨髓肽粉。

对比例1

步骤(3)酶解步骤仅使用碱性活性蛋白酶进行一次酶解，所述清液与碱性活性蛋白酶按照质量比为1300：6，其余步骤同实施例1；

对比例2

步骤(6)脱色脱腥步骤将硅藻土替换为膨润土，其余步骤同实施例1；对比例3

不进行步骤(4)螯合步骤，其余同实施例1；

检测并比较实施例1-2，对比例1-2分子量，结果见表1；

表1：分子量比较

表1结果表明，本申请制备的骨髓肽中100-500Da小分子占比更多，更易被人体吸收利用，且提取率要显著高于对比例1-3。

人工检测实施例1-2，对比例1-2的颜色及口感，结果见表2；

表2：口感与颜色检测

表2结果表明，本发明制备的骨髓肽的方法中使用硅藻土与活性炭组合的脱色剂，脱腥脱色效果明显好于其他类型的脱色剂，显著改善了滤液的澄清度，同时由于活性炭与硅藻土相互吸附，因此有效的保证了过滤后的滤液中没有活性炭的残留，进而保证了后续干燥后骨髓肽粉成品的品质。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。