一种含抗初老组合物的面霜及其制备方法

技术领域

本发明属于化妆品生产与应用技术领域，具体涉及一种含抗初老组合物的面霜及其制备方法。

背景技术

细胞衰老是一个细胞进入永久性细胞周期阻滞的过程。细胞衰老常伴随着许多病理学特证，炎症便是其中之一。其中，炎症衰老的概念在2000年首次被提出，炎症衰老成为了衰老研究中一个新的方向。正常的炎症反应是用来保护人类不受致命伤害的一种非特异性免疫反应，而过度的炎症反应除了会导致肌肤衰老外，还参与了许多衰老相关疾病的病理过程。正常机体内的免疫系统可识别衰老细胞并将其清除，组织内的母细胞分化形成年轻的细胞代替衰老细胞，但随着机体老化，损伤，细胞衰老加速，免疫系统对衰老细胞的清除速度减慢，从而造成体内的衰老细胞增多。

肤色暗黄是肌肤衰老的临床表现症状之一。内因是与五脏虚损、气血失调及痰浊瘀阻等因素相关，最为密切的是肾、脾、肝的功能失调。外因：自由基衰老、非酶糖基化、羰基应激。糖化反应是人体自身产生的，随着年龄增长，人的新陈代谢会放缓，体内摄入的糖分就容易堆积，再和蛋白质结合氧化，最后形成AGEs，这类物质会交联胶原蛋白，降低胶原溶解度和通透性，造成皮肤弹性下降致衰老。

CN107468585A公开了一种改善脸色暗沉暗黄组合物及其制备和在化妆品中的应用。包括以下重量组分：艾蒿提取物5-13份、伸长海条藻提取物7-13份、透明质酸钠3-7份、葡糖基橙皮苷0.5-5.5份、纳米二氧化钛1-3份、保湿剂8-12份、乳化剂5-10份、增稠剂0.1-0.9份、防腐剂0.6-1份、表面活性剂0.8-5份、pH值调节剂适量，水加至100份。该发明的改善脸色暗沉暗黄组合物，能扫除肌肤暗沉，但仅仅是以简单的保湿修护为主，忽略了对于初期衰老的预防。

CN110693778A公开了一种面霜，其A相包含小果咖啡籽提取物；B相包含稻糠油、椰子油、牛油果树果脂、油橄榄果水；C相包含三乙醇胺；D相包含肌肽；E相包含丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物；F相包含猴面包树果肉提取物、黄龙胆根提取物、苦参根提取物、胀果甘草根提取物、黄芩根提取物、巴拉圭茶叶提取物、盐生杜氏藻提取物、酵母菌溶胞物提取物、棕榈酰六肽-12、乙酰基七肽-4、欧洲越桔果提取物，该产品同样是以衰老产生后再来维护，而然而忽略了对于初期衰老的预防。

因此，开发一种具有高效抗炎、抗糖化和滋润修护的护肤品是本领域研究的重点。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种含抗初老组合物的面霜及其制备方法。本发明所述含抗初老组合物的面霜具有抗炎、抗糖化和滋润修护的功效。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种含抗初老组合物的面霜，所述含抗初老组合物的面霜的制备原料包括抗初老组合物、皮肤调理剂、乳化剂、保湿剂和水；

所述抗初老组合物包括姜花根提取物、黄岑根提取物和可可籽提取物；

所述皮肤调理剂包括肌肽、阿魏酸、腺苷和小球藻提取物。

在本发明中，所述抗初老组合物通过调节细胞氧化还原平衡，调节细胞自噬，促进细胞排毒来提高皮肤的耐受力，可与面霜的皮肤调理剂中各成分相互配合，协同增效，从而提高面霜的抗炎、抗氧化、赋能抗压的功效。

其中，姜花根提取物，可以调节成纤维细胞的自噬作用，以此实现细胞本身的代谢需要、某些细胞器的更新以及维持细胞稳态；即使在蓝光压力下也可以保护成纤维细胞的溶酶体网络，帮助皮肤提高自身天然防护力从而抵御蓝光/UV损伤，促进细胞排毒，促进皮肤新生等进程。黄岑根提取物能抑制弹性蛋白酶，干扰分泌，可以消除自由基，从而增加皮肤新陈代谢、增加皮肤弹性和抗皱性，可以抗初老；促进脑酰胺，改善皮脂使皮肤柔润；能抑制皮炎、增强皮肤的抵抗力，具有抗炎性；能中和释放的组胺，具有防止过敏的能力。可可籽提取物富含分子肽、糖类和多酚，蓝光压力下减少活性氧，蓝光压力下保护视蛋白光感受器，提高胶原蛋白I，原纤蛋白-1和syndecan-4的含量，显著改善弹性蛋白纤维网状结构，从而改善皮肤弹性，明显改善皮肤皱纹。

其中，肌肽能够抑制由金属离子、血红蛋白、脂酶和活性氧催化的脂质氧化。肌肽很容易被醛糖和酮糖糖基化并能保护蛋白质对抗由MDA和HOCL引起的糖基化和交联，是天然的抗糖基化剂。阿魏酸对体系产生的CML和荧光性AGEs的抑制率达90％。并且阿魏酸在290～330nm附近有良好的紫外线吸收，而305～315nm的紫外线最易诱发皮肤红斑，阿魏酸及其衍生物能减轻高剂量UVB对黑素细胞的细胞毒作用，对表皮起一定的光保护作用。腺苷是环磷酸腺苷(cAMP)的构建单元，cAMP是信号传导中重要的第二信使，参与多种生物学过程；可以通过代谢活性细胞释放到微环境中，实现调节细胞增殖的多种功能。小球藻提取物源自日本的蓝色尼约多河中的绿藻，富含氨基酸与微量元素，尤其富含叶黄素，对抗慢性炎症衰老，促进新生，促进表皮-真皮链接处DEJ屏障修复；增加弹性胶原蛋白，显著减少肌肤衰老迹象，抚平肌肤纹理，令肌肤更加柔软、平滑、细腻；减少皱纹数量和面积。

优选地，在所述抗初老组合物中，所述姜花根提取物、黄岑根提取物和可可籽提取物的质量比为(3-8):(5-15):(2-7)；

其中，“3-8”可以为3、4、5、6、7、8等；

其中，“5-15”可以为5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15等；

其中，“2-7”可以为2、3、4、5、6、7等。

优选地，在所述皮肤调理剂中，所述肌肽、阿魏酸、腺苷和小球藻提取物的质量比为(1-5):(1-5):(1-5):(1-2)；

其中，三个“1-5”可以独立为1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5等；

其中，“1-2”可以为1、1.2、1.4、1.6、1.8、2等。

优选地，以所述含抗初老组合物的面霜的制备原料的质量为100％计，所述含抗初老组合物的面霜的制备原料按质量百分含量计包括抗初老组合物0.01-5％、皮肤调理剂0.01-10％、乳化剂1-5％和保湿剂1-20％，余量为水。

其中，抗初老组合物的含量为0.01-5％，例如可以是0.01％、0.02％、0.05％、0.1％、0.15％、0.2％、0.4％、0.5％、0.6％、0.8％、1％、2％、3％、4％、5％等。

其中，皮肤调理剂的含量为0.01-10％，例如可以是0.01％、0.02％、0.05％、0.1％、0.15％、0.2％、0.4％、0.5％、0.6％、0.8％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％等。

其中，乳化剂的含量为1-5％，例如可以是1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％等。

其中，保湿剂的含量为1-20％，例如可以是1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％等。

优选地，所述皮肤调理剂还包括苦参根提取物、胀果甘草根提取物、向日葵籽油不皂化物、迷迭香叶提取物、烟酰胺、酵母菌/川谷籽发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、动物脐带提取物、动物胎盘蛋白或动物胎盘酶中的任意一种或至少两种的组合。

优选地，优选地，以所述含抗初老组合物的面霜的制备原料的质量为100％计，所述皮肤调理剂包括肌肽0.1-0.5％、阿魏酸0.1-0.5％、腺苷0.1-0.5％、小球藻提取物0.01-0.2％、苦参根提取物0.01-0.1％、胀果甘草根提取物0.01-0.1％、向日葵籽油不皂化物0.01-0.1％、迷迭香叶提取物0.01-0.1％、烟酰胺0.1-1％、酵母菌/川谷籽发酵产物滤液0.01-0.1％、二裂酵母发酵产物溶胞物0.01-0.3％、动物脐带提取物0.01-0.1％、动物胎盘蛋白0.01-0.1％和动物胎盘酶0.01-0.1％。

其中，肌肽的含量为0.1-0.5％，例如可以是0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％、0.5％等。

其中，阿魏酸的含量为0.1-0.5％，例如可以是0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％、0.5％等。

其中，腺苷的含量为0.1-0.5％，例如可以是0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％、0.5％等。

其中，小球藻提取物的含量为0.01-0.2％，例如可以是0.01％、0.02％、0.05％、0.08％、0.1％、0.12％、0.15％、0.17％、0.2％等。

其中，苦参根提取物的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。

其中，胀果甘草根提取物的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。

其中，向日葵籽油不皂化物的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。

其中，迷迭香叶提取物的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。

其中，烟酰胺的含量为0.1-1％，例如可以是0.1％、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1％等。

其中，酵母菌/川谷籽发酵产物滤液的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。

其中，二裂酵母发酵产物溶胞物的含量为0.01-0.3％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％等。

其中，动物脐带提取物的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。

其中，动物胎盘蛋白的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。

其中，动物胎盘酶的含量为0.01-0.1％，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。

优选地，所述乳化剂包括丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、异十六烷、聚山梨醇酯-80、C20-22醇、C20-22醇磷酸酯、聚丙烯酰胺、C13-14异链烷烃或月桂醇聚醚-7中的任意一种或至少两种的组合。

优选地，以所述含抗初老组合物的面霜的制备原料的质量为100％计，所述乳化剂包括丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物0.5-0.7％、异十六烷0.3-0.4％、聚山梨醇酯-800.01-0.02％、C20-22醇0.5-0.7％、C20-22醇磷酸酯0.5-0.7％、聚丙烯酰胺0.2-0.3％、C13-14异链烷烃0.1-0.2％和月桂醇聚醚-70.02-0.04％。

其中，丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物的含量为0.5-0.7％，例如可以是0.5％、0.55％、0.6％、0.65％、0.7％等。

其中，异十六烷的含量为0.3-0.4％，例如可以是0.3％、0.32％、0.34％、0.36％、0.38％、0.4％等。

其中，聚山梨醇酯-80的含量为0.01-0.02％，例如可以是0.01％、0.012％、0.014％、0.016％、0.018％、0.02％等。

其中，C20-22醇的含量为0.5-0.7％，例如可以是0.5％、0.55％、0.6％、0.65％、0.7％等。

其中，C20-22醇磷酸酯的含量为0.5-0.7％，例如可以是0.5％、0.55％、0.6％、0.65％、0.7％等。

其中，聚丙烯酰胺的含量为0.2-0.3％，例如可以是0.2％、0.22％、0.24％、0.26％、0.28％、0.3％等。

其中，C13-14异链烷烃的含量为0.1-0.2％，例如可以是0.1、0.12％、0.14％、0.16％、0.18％、0.2％等。

其中，月桂醇聚醚-7的含量为0.02-0.04％，例如可以是0.02％、0.025％、0.03％、0.035％、0.04％等。

优选地，所述保湿剂包括丁二醇、甘油聚醚-26、海藻糖、透明质酸钠或1,2-己二醇中的任意一种或至少两种的组合。

优选地，以所述含抗初老组合物的面霜的制备原料的质量为100％计，所述保湿剂包括丁二醇5-10％、甘油聚醚-262-5％、海藻糖2-4％、透明质酸钠0.15-0.25％和1,2-己二醇0.4-0.6％。

其中，丁二醇的含量为5-10％，例如可以是5％、6％、7％、8％、9％、10％等。

其中，甘油聚醚-26的含量为2-5％，例如可以是2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％等。

其中，海藻糖的含量为2-4％，例如可以是2％、2.5％、3％、3.5％、4％等。

其中，透明质酸钠的含量为0.15-0.25％，例如可以是0.15％、0.17％、0.2％、0.23％、0.25％等。

其中，1,2-己二醇的含量为0.4-0.6％，例如可以是0.4％、0.45％、0.5％、0.55％、0.6％等。

优选地，所述面霜的制备原料中还包括润肤剂、增稠剂、pH调节剂、螯合剂、抗氧化剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合。

优选地，以所述含抗初老组合物的面霜的制备原料的质量为100％计，所述面霜的制备原料中还包括润肤剂5-10％、增稠剂0.5-1％、pH调节剂0.31-0.75％、螯合剂0.01-0.05％、抗氧化剂0.1-1％和芳香剂0.01-0.05％。

其中，润肤剂的含量为5-10％，例如可以是5％、6％、7％、8％、9％、10％等。

其中，增稠剂的含量为0.5-1％，例如可以是0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％等。

其中，pH调节剂的含量为0.31-0.75％，例如可以是0.31％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.75％等。

其中，螯合剂的含量为0.01-0.05％，例如可以是0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％等。

其中，抗氧化剂的含量为0.1-1％，例如可以是0.1％、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1％等。

其中，芳香剂的含量为0.01-0.05％，例如可以是0.01％、0.015％、0.02％、0.025％、0.03％、0.04％、0.05％等。

优选地，所述润肤剂包括角鲨烷、异壬酸异壬酯或霍霍巴籽油中的任意一种或至少两种的组合。

优选地，所述增稠剂包括丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物和/或卡波姆。

优选地，所述pH调节剂为精氨酸。

优选地，所述螯合剂为EDTA二钠。

优选地，所述抗氧化剂为对羟基苯乙酮。

优选地，所述芳香剂为香精。

第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的含抗初老组合物的面霜的制备方法，所述面霜的制备方法包括以下步骤：

(1)将保湿剂和水进行水相混合，得到水相混合液；将乳化剂进行油相混合，得到油相混合液；

(2)将步骤(1)得到的水相混合液和油相混合液混合均质，得到均质液；

(3)将步骤(2)得到的均质液、抗初老组合物和皮肤调理剂，混合搅拌，得到所述含抗初老组合物的面霜。

优选地，步骤(1)中所述水相混合的温度为80-85℃，例如可以是80℃、81℃、82℃、83℃、84℃、85℃等，所述水相混合的时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min、10min等。

优选地，步骤(1)中所述油相混合的温度为78-80℃，例如可以是78℃、78.5℃、79℃、79.5℃、80℃等，所述油相混合的时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min、10min等。

优选地，步骤(1)中，所述水相混合还需增稠剂。

优选地，步骤(1)中，所述油相混合还需添加润肤剂。

优选地，步骤(2)中所述混合均质的温度为80-82℃，例如可以是80℃、80.5℃、81℃、81.5℃、82℃等，所述混合均质的时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min、10min等。

优选地，步骤(3)中所述混合搅拌的温度为40-50℃，例如可以是40℃、42℃、44℃、46℃、48℃、50℃等，所述混合搅拌的时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min、10min等。

优选地，步骤(3)中，所述混合搅拌还需添加pH调节剂、螯合剂、抗氧化剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合。

相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明所述抗初老组合物和皮肤调理剂中各组分协同增效，可有效减少因外界环境导致的皮肤脆弱敏感的状态，增强肌肤抵抗力，改善皮肤弹性，减少皱纹，减少肌肤发红，增加皮肤水分，使肌肤保持光泽细腻的健康状态；

(2)本发明所述面霜中的活性成分能够有效抑制AGEs的生成，减少糖基化反应，长期使用可以显著改善暗黄肌肤，让肌肤恢复以前的光泽，减少肌肤衰老迹象。

具体实施方式

下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。

以下制备例中各组分均可由市售购得。

制备例1

本制备例提供一种姜花根提取物，所述姜花根提取物由以下制备方法制备得到：

(1)将姜花根部在-15℃下冷冻18h后，再在-2℃下进行低温粉碎后过筛，得到150目的姜花根粉；

(2)将步骤(1)得到的姜花根粉和正丁醇混合，在25℃浸提2h后，将浸提得到的溶液浓缩，得到浓缩液；再将浓缩液和乙醇混合，在40℃浸提1h后过滤，得到姜花根粗提取液；

其中，姜花根粉、正丁醇和乙醇的质量比为1:10:8；

(3)将步骤(2)得到的姜花根粗提取液过大孔吸附树脂AB-8，先用去离子水水洗涤后弃去水液，再用60wt％的乙醇水溶液洗涤，收集洗涤得到的乙醇水溶液部分，进行浓缩，得到姜花根提取物。

制备例2

本制备例提供一种黄岑根提取物，所述黄岑根提取物由以下制备方法制备得到：

(a)将黄岑根部粉碎后过筛，得到200目的黄岑根粉；

(b)以质量比为1:10的比例将步骤(a)得到的黄岑根粉和浓度为60wt％的乙醇水溶液混合，并以600W的功率微波提取8min后浓缩，得到黄岑根粗提取物；

(c)采用浓度为10wt％的乙醇水溶液将步骤(b)得到的黄岑根粗提取物溶解，再采用大孔树脂凝胶柱D101纯化，并采用浓度为60wt％的乙醇水溶液洗脱，浓缩，得到所述黄岑根提取物。

制备例3

本制备例提供一种可可籽提取物，所述可可籽提取物由以下制备方法制备得到：

(A)将可可籽粉碎至粒径为100目后，以1:10的质量比将粉碎后的可可籽与正己烷混合，在30℃下浸泡3h后，过滤并干燥，得到脱脂可可籽粉；

(B)将步骤(A)得到的脱脂可可籽粉和水混合后加热至45℃，再与生物酶和酸混合，所述脱脂可可籽粉、水和纤维素酶的质量比为1:15:0.006，在45℃、pH为5的条件下进行酶解反应1.5h后灭活，得到可可籽酶解产物；

(C)以质量比为1:10的比例将步骤(B)得到的可可籽酶解产物和浓度为60wt％的乙醇水溶液混合，以300W的功率进行超声提取50min，过滤后浓缩，得到所述可可籽粗提取物。

除姜花根提取物、黄岑根提取物和可可籽提取物由上述制备方法制备得到，下述实施例和对比例中其余组分均可由市售购得。

实施例1

本实施例提供一种抗初老组合物，所述抗初老组合物包括6份姜花根提取物、10份黄岑根提取物和4份的可可籽提取物。

实施例2

本实施例提供一种抗初老组合物，所述抗初老组合物按重量份数计包括5份的姜花根提取物、9份的黄岑根提取物和6份的可可籽提取物。

实施例3

本实施例提供一种抗初老组合物，所述抗初老组合物按重量份数计包括7份的姜花根提取物、8份的黄岑根提取物和5份的可可籽提取物。

实施例4

本实施例提供一种抗初老组合物，所述抗初老组合物按重量份数计包括3份的姜花根提取物、15份的黄岑根提取物和2份的可可籽提取物。

实施例5

本实施例提供一种抗初老组合物，所述抗初老组合物按重量份数计包括8份的姜花根提取物、5份的黄岑根提取物和7份的可可籽提取物。

对比例1

本对比例提供一种组合物，所述组合物按重量份数计包括8份的姜花根提取物、12份的黄岑根提取物。

对比例2

本对比例提供一种组合物，所述组合物按重量份数计包括11份的姜花根提取物、9份的可可籽提取物。

对比例3

本对比例提供一种组合物，所述组合物按重量份数计包括8份的黄岑根提取物、12份的可可籽提取物。

应用例1

本应用例提供一种含抗初老组合物的面霜，所述含抗初老组合物的面霜的制备原料按质量百分含量计包括如下组分：

本应用例所述含抗初老组合物的面霜的制备方法包括以下步骤：

(1)将上述保湿剂、增稠剂和水在82℃下搅拌混合8min，得到水相混合液；将上述润肤剂和乳化剂在80℃下搅拌混合8min，得到油相混合液；

(2)将步骤(1)得到的水相混合液和油相混合液在80℃下混合均质8min，得到均质液；

(3)将步骤(2)得到的的均质液、抗初老组合物、皮肤调理剂、pH调节剂、螯合剂、抗氧化剂和芳香剂，在45℃下混合搅拌6min，得到所述面霜。

应用例2

本应用例提供一种含抗初老组合物的面霜，所述含抗初老组合物的面霜的制备原料按质量百分含量计包括如下组分：

本应用例所述含抗初老组合物的面霜的制备方法同应用例1。

应用例3

本应用例提供一种含抗初老组合物的面霜，所述含抗初老组合物的面霜的制备原料按质量百分含量计包括如下组分：

本应用例所述含抗初老组合物的面霜的制备方法同应用例1。

应用例4

本应用例提供一种含抗初老组合物的面霜，所述含抗初老组合物的面霜的制备原料按质量百分含量计包括如下组分：

本应用例所述含抗初老组合物的面霜的制备方法同应用例1。

应用例5

本应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，将实施例1提供的抗初老组合物替换为等质量的实施例4提供的抗初老组合物，其他组分含量及制备方法同应用例1。

应用例6

本应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，将实施例1提供的抗初老组合物替换为等质量的实施例5提供的抗初老组合物，其他组分含量及制备方法同应用例1。

应用例7

本应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，不添加苦参根提取物，胀果甘草根提取物含量增至0.1％，其他组分含量及制备方法同应用例1。

应用例8

本应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，不添加胀果甘草根提取物，苦参根提取物含量增至0.1％，其他组分含量及制备方法同应用例1。

应用例9

本应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，不添加迷迭香叶提取物，向日葵籽油不皂化物含量增至0.1％，其他组分含量及制备方法同应用例1。

应用例10

本应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，不添加向日葵籽油不皂化物，迷迭香叶提取物含量增至0.1％，其他组分含量及制备方法同应用例1。

应用例11

本应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，不添加二裂酵母发酵产物溶胞物，酵母菌/川谷籽发酵产物滤液含量增至0.4％，其他组分含量及制备方法同应用例1。

应用例12

本应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，不添加动物脐带提取物、动物胎盘蛋白和动物胎盘酶，二裂酵母发酵产物溶胞物含量增至0.5％，其他组分含量及制备方法同应用例1。

对比应用例1

本对比应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，将实施例1提供的抗初老组合物替换为等质量的对比例1提供的组合物，其他组分含量及制备方法同应用例1。

对比应用例2

本对比应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，将实施例1提供的抗初老组合物替换为等质量的对比例2提供的组合物，其他组分含量及制备方法同应用例1。

对比应用例3

本对比应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，将实施例1提供的抗初老组合物替换为等质量的对比例3提供的组合物，其他组分含量及制备方法同应用例1。

对比应用例4

本对比应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，不添加肌肽，阿魏酸含量增至0.3％、腺苷含量增至0.4％、小球藻提取物含量增至0.3％，其他组分含量及制备方法同应用例1。

对比应用例5

本对比应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，不添加阿魏酸，肌肽含量增至0.5％、腺苷含量增至0.35％、小球藻提取物含量增至0.15％，其他组分含量及制备方法同应用例1。

对比应用例6

本对比应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，不添加腺苷，肌肽含量增至0.5％、阿魏酸含量增至0.3％、小球藻提取物含量增至0.2％，其他组分含量及制备方法同应用例1。

对比应用例7

本对比应用例提供一种面霜，与应用例1的区别在于，不添加腺苷，肌肽含量增至0.44％、阿魏酸含量增至0.24％、腺苷含量增至0.32％，其他组分含量及制备方法同应用例1。

试验例1

安全性能测试

对应用例1-12提供的面霜和对比应用例1-7提供的面霜进行安全性能测试，方法如下：

(1)红细胞溶血实验

红细胞悬液的制备：选择健康家兔，心脏取血9mL，加入2％的草酸钾溶液1mL，离心，弃去上清液，用20mmol/L的PBS溶液将沉淀物稀释至20mL，4℃保存备用。选择样品用PBS溶液稀释至不同浓度，每个样品设置5个浓度梯度。取10mL待测样品的稀释液，加入200μL上述红细胞悬液(控制样品终浓度分别为5、10、20、50、100mg/mL)，以蒸馏水作为全溶血对照，PBS溶液作为阴性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计测试其在560nm处的吸光度(A

绘制溶血率-样品浓度标准曲线，计算50％红细胞发生溶血时的样品浓度(HD

(2)蛋白变性实验：

将样品用PBS溶液稀释至10g/L，取10mL待测样品的稀释液，加入200μL上述红细胞悬液，以蒸馏水作为空白对照，1mg/mL十二烷基硫酸钠(SDS)溶液作为阳性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计分别测试其在540nm和575nm处的吸光度A

其中，R

根据L/D值对待测样品的刺激性进行评价，其中L/D值为HD

表1

上述红细胞溶血实验和蛋白变性实验的测试结果如下表2所示：

表2

由安全性能测试可知，由上述试验结果可知，本发明应用例1-12所制备的面霜温和无刺激；本发明所制备的面霜的50％红细胞发生溶血时的样品浓度HD

试验例2

抗炎试验

对应用例1-12提供的面霜和对比应用例1-7提供的面霜进行抗炎测试，方法如下：

(1)细胞收集：将血液样本与取等比例的血球分离液混合，在20℃离心40min，取人外周血单核细胞层，用缓冲溶液清洗细胞后，以培养基RPMI-1640悬浮细胞；然后用CD14+微球(MiniMACS system)纯化人外周血单核细胞中的CD14+单核细胞；以细胞激素IL-4及生长激素GM-CSF刺激细胞分化成树突状细胞，37℃、5％CO

(2)分别将各组合物以2μg/mL的浓度加入孔板中，并设置加入等体积培养基的孔为空白对照，37℃、5％CO

具体测试结果如表3所示：

表3

由表3数据可知，培养基中为本发明应用例1-12提供的面霜白介素的含量IL-10在150％以上，白介素IL-12水平在15％以下，这充分说明本发明所述抗初老组合物能够显著上调抗炎细胞因子白介素IL-10的水平，抑制促炎细胞因子白介素IL-12的表达水平；所述抗初老组合物通过调节细胞氧化还原平衡，调节细胞自噬，可与面霜的皮肤调理剂中各成分相互配合，协同增效，从而进一步提高抗炎能力。

试验例3

抗糖化和抗光老化测试

(1)根据AGEs的荧光性测试抗糖化作用：用葡萄糖-β-Lg模拟体系评价各组组合物对AGEs形成的抑制作用。根据AGEs的荧光性，采用F-4600荧光光谱仪在激发波长325nm，发射波长440nm条件下，测定空白对照组及加入组合物试验组反应7d后荧光AGEs的荧光强度，计算对荧光AGEs的抑制率(其中每组测试样品采用磷酸盐缓冲液稀释至5.0wt％)，计算方法如下：

抑制率(％)＝[(F0-F1)/F0]×100％；

其中，F0—空白对照组的荧光强度；F1—试验组的荧光强度；；

(2)蓝光下表皮角质形成细胞氧化应激测试，具体测试方法为：使用蓝光辐射氧化Organotypical皮肤模型，经测试样品抗光老化组合物预处理后进行蓝光照射，蓝光强度为15J/cm

具体测试结果如表4所示：

表4

由表4测试数据可知，本发明的应用例1-12制备的面霜对荧光AGEs的抑制率达到92％以上，ROS表皮角质形成细胞积累量在10％以下，较应用对比例1-7制备的面霜能明显改善光老化，帮助细胞糖化逆转。这充分说明所述抗初老组合物通过可与面霜的皮肤调理剂中各成分相互配合，协同增效，帮助细胞糖化逆转，减少糖基化反应，长期使用可以显著改善暗黄肌肤，让肌肤恢复以前的光泽，减少肌肤衰老迹象，且蓝光压力下减少活性氧，达到蓝光的功效。

试验例4

促进弹性蛋白生成实验

对应用例1-12提供的面霜和对比应用例1-7提供的面霜进行促进弹性蛋白生成实验，方法如下：

(1)将人成纤维细胞按照每孔20000枚的密度接种在96孔板上，加入培养基，在37℃培养箱中培养24小时，待细胞贴壁后，更换新的培养基，并分别加入各测试样品(控制样品终浓度为50mg/mL)，以20mmol/L的PBS溶液作为空白对照，然后在37℃培养箱中培养2天。

(2)培养结束后，利用细胞裂解液将细胞洗脱下来，并超声破碎。采用Biocolor弹性蛋白检测试剂盒对弹性蛋白的含量进行检测：用弹性蛋白沉淀剂处理样本，使弹性蛋白沉淀下来，离心分离，去除上清液，向沉淀中加入染料和反应液，反应形成弹性蛋白-染料复合物，离心分离并用PBS溶液洗涤三次，去除未结合的染料，添加染料释放剂，使弹性蛋白-染料复合物中的染料释放出来，采用分光光度计测定样品在513nm处的吸光度，根据吸光度-染料浓度标准曲线计算弹性蛋白的表达量(以空白组的表达量为1)；

具体测试结果如下表5所示：

表5

由表5测试数据可知，本发明的应用例1-12提供的面霜的弹性蛋白的表达量为在4.5以上，这充分说明所述抗初老组合物通过可与面霜的皮肤调理剂中各成分相互配合，协同增效，能够促进弹性蛋白的表达，通过刺激细胞生长，增加皮肤弹性，从而使皱纹变浅、变短，改善肌肤状态。

试验例5

抗皱效果实验

对应用例1-12提供的面霜和对比应用例1-7提供的面霜进行抗皱效果实验；具体测试方法如下所示：

(1)实验对象：选取190名皮肤健康的35-55岁的女性志愿者，男女比例各占一半，随机分成19组；

(2)实验仪器：德国CK公司的皮肤皱纹测试仪VL650；

(3)测试方法：采用德国CK公司的皮肤皱纹测试仪VL650并使用硅胶套取额头进行皱纹深度测量，分别对受测者额头皱纹进行测试，并取三次测试数据的平均值；面霜具体使用方法为早上8点进行洁面，洁面后分别在面部使用0.4g的各测试样品面霜；晚上8点进行洁面，洁面后分别在面部使用0.4g的各测试样品面霜，实验周期持续时间为60天；最后计算处理30天和60天后的皱纹深度减小的百分比；

具体测试结果如下表6所示：

表6

由表6测试数据可知，试验本发明的应用例1-12提供的面霜60天后的皱纹深度减小的百分比达到19％以上，这充分说明所述抗初老组合物通过可与面霜的皮肤调理剂中各成分相互配合，协同增效，能够有效对抗皮肤皱纹减缓皮肤老化的过程，减少静态纹的产生，通过促进皮肤弹性蛋白的表达和细胞的增殖生长改善皮肤的动态纹。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明所述含抗初老组合物的面霜及其制备方法，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。