Linrodostat在制备用于治疗膀胱癌的药物中的用途

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，特别涉及Linrodostat在制备用于治疗膀胱癌的药物中的用途。

背景技术

膀胱癌是泌尿系最常见的肿瘤之一。年龄、吸烟等因素是膀胱癌的危险因素，随着我国工业化的发展，膀胱癌发病率逐年上升。

膀胱癌分为非肌层浸润性膀胱癌和肌层浸润性膀胱癌，二者治疗方式差异较大。非肌层浸润性膀胱癌的治疗主要为经尿道膀胱肿瘤切除术，根据风险分级确定是否行膀胱灌注化疗或免疫治疗及灌注时间和频次；肌层浸润性膀胱癌的治疗主要为膀胱切除术加尿流改道术。尽管膀胱癌的治疗涌现了多种手段，但其预后仍不甚理想。非肌层浸润性膀胱癌复发率极高，高达75％；肌层浸润性膀胱癌术后五年生存率仍低于50％。

因此，临床急需寻找膀胱癌有效治疗的药物。

发明内容

本发明目的是提供Linrodostat在制备用于治疗膀胱癌的药物中的用途，本发明通过研究，发现Linrodostat对膀胱癌细胞具有良好的体外抗肿瘤效应，对膀胱癌细胞增殖具有明显的抑制作用；也能抑制膀胱癌细胞的迁移和侵袭，抑制抑制膀胱癌细胞迁移相关蛋白表达。表明Linrodostat为治疗膀胱癌提供新的治疗方案。

为实现所述目的，本发明采用如下技术方案：

在本发明的第一方面，提供了Linrodostat在制备用于治疗膀胱癌的药物中的用途。

进一步地，所述用途选自以下一种或多种：

(A)Linrodostat抑制膀胱癌细胞的生长和增殖；

(B)Linrodostat抑制膀胱癌细胞的迁移和侵袭；

(C)Linrodostat抑制膀胱癌细胞的凋亡；

(D)抑制膀胱癌细胞的凋亡相关蛋白的表达，所述凋亡相关蛋白包括Slug、Vim、Snail、N-cad和MMP9中的一种。

进一步地，所述Linrodostat的添加浓度为12.5μM～50μM。

本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：

本发明提供Linrodostat在制备用于治疗膀胱癌的药物中的用途，本发明通过研究，发现Linrodostat对膀胱癌细胞5637和T24具有良好的体外抗肿瘤效应，对膀胱癌细胞5637和T24增殖具有明显的抑制作用，并随着药物浓度的增加而抑制作用增强；也能抑制膀胱癌细胞5637和T24的迁移和侵袭，并促进膀胱癌细胞5637和T24，抑制抑制膀胱癌细胞5637和T24迁移相关蛋白表达。本发明为治疗膀胱癌提供新的治疗方案。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。

图1为Linrodostat处理膀胱癌细胞5637和T24后的形态；

图2为Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637和T24增殖；

图3为Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637和T24克隆形成；

图4为Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637迁移；

图5为Linrodostat抑制膀胱癌细胞T24迁移；

图6为Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637和T24侵袭；

图7为Linrodostat促进膀胱癌细胞5637和T24凋亡；

图8为Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637和T24凋亡相关蛋白表达。

具体实施方式

下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本发明，本发明的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本发明，而非限制本发明。

在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾，本说明书优先。

除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买获得或者可通过现有方法获得。

本申请实施例的技术方案为解决上述技术问题，总体思路如下：

本申请通过实验发现：

Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637和T24生长和增殖。

Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637和T24迁移和侵袭。

Linrodostat促进膀胱癌细胞5637和T24凋亡。

Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637和T24迁移相关蛋白表达。

其中，Linrodostat的CAS编号为1923833-60-6，结构式如下：

综上可知，Linrodostat可用于制备用于治疗膀胱癌的药物。

下面将结合实施例及实验数据对本申请的Linrodostat在制备用于治疗膀胱癌的药物中的用途进行详细说明。

实施例1、Linrodostat抑制膀胱癌细胞的生长和增殖

1、将膀胱癌细胞5637和T24接种于96孔板细胞培养板中，每孔中100μL细胞悬液(含1～2×10

2、将膀胱癌细胞5637和T24接种于6孔板细胞培养板中，每孔中加入2mL含1～2×10

3、Linrodostat处理膀胱癌细胞5637和T24后的形态如图1所示，Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637和T24增殖的结果如图2所示，Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637和T24克隆形成的结果如图3所示；由图1、图2和图3可知，Linrodostat对膀胱癌细胞5637和T24生长和增殖具有明显的抑制作用，并随着药物浓度的增加而抑制作用增强。

实施例2、Linrodostat抑制膀胱癌细胞的迁移和侵袭

1、将膀胱癌细胞5637和T24接种于6孔板细胞培养板中，向每孔中加入2mL含1～2×10

2、将膀胱癌细胞5637和T24接种于6孔板细胞培养板中，6孔板铺板加药(步骤同上)。制备细胞悬液：制备细胞悬液前可先让细胞撤血清饥饿2～6h，进一步去除血清的影响，但这一步并不是必须的；消化细胞，终止消化后用600μl无血清培养基重悬。接种细胞：取细胞悬液100μl加入Transwell小室(24孔板下室一般加入600μl含10％FBS的培养基，特别注意的是，下层培养液和小室间常会有气泡产生，一旦产生气泡，下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了，在种板的时候要特别留心，一旦出现气泡，要将小室提起，去除气泡，再将小室放进培养板)；培养细胞：常规培养24～48h(主要依癌细胞侵袭能力而定)。24h较常见，时间点的选择除了要考虑到细胞细胞侵袭力外，处理因素对细胞数目的影响也不可忽视。固定染色：取出Transwell小室，用PBS洗1遍，4％多聚甲醛固定液或甲醇固定20分钟；再用PBS洗1遍，0.1％结晶紫染色15～20min；最后用PBS洗1遍，用棉签轻轻擦掉上层未迁移细胞；400倍显微镜下随即五个视野观察细胞，记数。

3、Linrodostat处理膀胱癌细胞5637和T24迁移的结果如图4和图5所示，Linrodostat抑制膀胱癌细胞5637和T24侵袭的结果如图6所示；由图4、图5和图6可知，Linrodostat对膀胱癌细胞5637和T24侵袭和迁移具有明显的抑制作用，并随着药物浓度的增加而抑制作用增强。

实施例3、Linrodostat抑制膀胱癌细胞的凋亡

1、将膀胱癌细胞5637和T24接种于6cm细胞培养皿中，向每孔中加入5mL含1～2×10

2、Linrodostat处理膀胱癌细胞5637和T24后凋亡的结果如图7所示；由图7可知，Linrodostat对膀胱癌细胞5637和T24凋亡具有明显的抑制作用，并随着药物浓度的增加而抑制作用增强。

实施例4、抑制膀胱癌细胞的迁移相关蛋白的表达

1、将膀胱癌细胞5637和T24接种于6孔板细胞培养板中，向每孔中加入2mL含1～2×10

2、Linrodostat处理膀胱癌细胞5637和T24后迁移相关蛋白的表达结果如图8所示；由图8可知，Linrodostat对膀胱癌细胞5637和T24迁移具有明显的抑制作用，并随着药物浓度的增加而抑制作用增强。

最后，还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。