一种立他司特无定型晶型的制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种立他司特无定型晶型的制备方法，其中，立他司特的化学名为：(S)-2-(2-(苯并呋喃-6-羰基)-5,7-二氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酰胺基)-3-(3-(甲基磺酰基)苯基)丙酸。

背景技术

立他司特(Lifitegrast)，化学名：(S)-2-(2-(苯并呋喃-6-羰基)-5,7-二氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酰胺基)-3-(3-(甲基磺酰基)苯基)丙酸，其结构式如下，是SARcodeBioscience设计开发的一种用于治疗干眼症的药物，2016年7月11日FDA批准该药上市并用于干眼部干燥综合征，LIF是一种新型小分子整合素(integrin)抑制药，可与整合素的淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte function-associated antigen-1，LFA-1)结合，阻断LFA-1与同源配体胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule 1，ICAM-1)的相互作用。

LFA-1是存在于白细胞表面的一种蛋白，在干眼病患者中，ICAM-1在角膜和结膜组织中过度表达，LFA-1与ICAM-1相互作用促进免疫突触的形成，导致T细胞激活并迁移至目标组织，干扰引起干眼病的角膜与结膜组织的ICAM-1过度表达。体外研究显示，在人的T细胞系中，LIF能抑制T细胞黏附至ICAM-1，并抑制人外周血单核细胞中炎性细胞因子的分泌。通过抑制中性粒细胞的募集而减少小鼠角膜的炎症，1μmol·L

目前，专利CN104797574A报道了LFA-1抑制剂及其多晶型物，具体报道了立他司特的一水合物晶型，以及5种晶型的晶型数据(DSC、溶残、引湿性、溶解性、TG等数据)，另外专利WO2009139817A2详细报道了上述5种晶型的制备方法和特征数据其中包括无定型，其中晶型A为通道水合物晶型，TG失重2.47％，晶型B为无水物，TG 0-200℃(0.87％)，晶型C为一水合物，TG失重0-120℃(2.37％)、120-220℃(3.86％)，晶型D为多水合物，TG失重0-170℃(23.5％)，晶型E为一水合物，TG失重0-200℃(14.15％)，无定型TG失重0-120℃(2.45％)，120-180℃(2.80％)，180-250℃(2.10％)，以上几种晶型除无水物外都存在TG失重大于2％，存在明显结晶水不易干燥去除的问题，而且部分晶型水分偏高，TG失重大于20％。由此可知，立他司特的A晶型、C晶型和D晶型的水分含量较高，作为原料药进行研究时，难以控制其水分在1.0％以下。

另外，上述专利中立他司特无晶型和B晶型的溶残较高，不利于其作为原料药制成制剂，例如，以MIBK-甲苯作为析晶溶剂制备的立他司特无晶型，在MIBK中的溶残为4.0％，在甲苯中的溶残为0.1％；以乙酸乙酯为析晶溶剂制备的立他司特B晶型，在乙酸乙酯中的溶残为0.4％。

因此，提供一种新的立他司特无晶型的制备方法，具有水分含量低、溶残偏低和良好的溶解性，对于相关制剂的开发及提高立他司特的生物利用度具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一种立他司特无定型晶型的制备方法。

本发明的技术方案如下：

一种立他司特无定型晶型的制备方法，它包括如下步骤：

(1)将立他司特和丙酮混合均匀，在搅拌的过程中升温至回流使得固体溶解，再降温至25～35℃，得到含立他司特的丙酮溶液；

(2)在0-10℃的条件下，向甲叔醚中滴加步骤(1)中所得含立他司特的丙酮溶液，进行搅拌析晶，过滤，干燥后，得到立他司特无定型晶型。

本领域的技术人员公知，在制备不同晶型时，结晶溶剂的种类对制成的目标物质的晶型有不可忽视的影响，调整溶剂的种类，很容易制备不同种类的晶型。本发明以丙酮和甲叔醚作为结晶溶剂，并严格控制结晶溶剂中丙酮和甲叔醚的添加量，得到立他司特无定型晶型，制备方法简单，与现有技术中的无定型晶型相比，收率高，水分含量低，溶残较低，溶解性较好，因而有利于药物的工艺处理、物化性能的改善，和成药性能的提高。

在本发明中，在步骤(1)中，立他司特和丙酮的质量体积比为1:1.5～4.5g/ml，可以但不局限于1:1.5g/ml、1:1.8g/ml、1:2.0g/ml、1:2.3g/ml、1:2.5g/ml、1:2.8g/ml、1:3.0g/ml、1:3.2g/ml、1:3.5g/ml、1:4.0g/ml或1:4.5g/ml，为了获得更好的效果，立他司特和丙酮的质量体积比为1:2.5～3.5g/ml，进一步优选地，立他司特和丙酮的质量体积比为1:3.0g/ml。

对于本发明而言，在步骤(2)中，立他司特与甲叔醚的体积比为1:6.0～9.0g/ml，可以但不局限于1:6.0g/ml、1:6.5g/ml、1:7.0g/ml、1:7.5g/ml、1:8.0g/ml、1:8.5g/ml或1:9.0g/ml、，为了获得更好的效果，丙酮与甲叔醚的体积比为1:7.5～8.5g/ml，进一步优选地，丙酮与甲叔醚的体积比为1:8.0g/ml。

在本发明中，在步骤(2)中，搅拌析晶时间为20～60min，可以但不局限于20min、30min、40min、50min或60min，优选地，搅拌析晶时间为30min。

在步骤(2)中，干燥方式为真空干燥，干燥温度为40℃-80℃，可以但不局限于40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、70℃或80℃，优选地，干燥温度为55℃。

采用本发明的技术方案，优势如下：

本发明提供一种立他司特无定型晶型的制备方法，以丙酮和甲叔醚作为结晶溶剂，并严格控制结晶溶剂丙酮与甲叔醚的添加量，其制备方法简单，收率高，易于干燥，水分含量低，无明显溶剂残留，溶残极低，并具有较高的溶解性，因而有利于药物的工艺处理、物化性能的改善，和成药性能的提高。

附图说明

图1是本申请中实施例1获得的立他司特无定型的X-射线粉末衍射图；

图2是本申请中对比例1获得的立他司特A晶型的X-射线粉末衍射图。

具体实施方式

以下通过具体实施例与对比例对本发明作进一步解释说明，但这并非是对本发明的限制。本领域的专业技术人员根据本发明的基本思想，可以进行任何修改、等同替换或改进，均应包含在本发明的范围之内。

实施例1立他司特无定型的制备

(1)向100ml三口反应瓶中，加入10g立他司特，30ml丙酮，在搅拌的过程中升温至回流使得固体溶解，再降温至30℃，过滤，得黄色至红色溶液；

(2)向250ml三口反应瓶中加入80ml甲叔醚，降温至0-10℃，滴加步骤(1)中所得含立他司特的丙酮溶液，立即析出粉末状固体，滴加完毕，搅拌析晶30min，过滤，甲叔醚洗涤，所得产物在55℃的条件下抽真空干燥8小时，得立他司特无定型9.4g，收率94％。具体XRD图谱见图1。

实施例2立他司特无定型的制备

(1)向100ml三口反应瓶中，加入10g立他司特，35ml丙酮，在搅拌的过程中升温至回流使得固体溶解，再降温至30℃，过滤，得黄色至红色溶液；

(2)向250ml三口反应瓶中加入85ml甲叔醚，降温至0-10℃，滴加步骤(1)中所得含立他司特的丙酮溶液，立即析出粉末状固体，滴加完毕，搅拌析晶30min，过滤，甲叔醚洗涤，所得产物在55℃的条件下抽真空干燥8小时，得立他司特无定型8.5g，收率85％。

实施例3立他司特无定型的制备

(1)向100ml三口反应瓶中，加入10g立他司特，25ml丙酮，在搅拌的过程中升温至回流使得固体溶解，再降温至30℃，过滤，得黄色至红色溶液；

(2)向250ml三口反应瓶中加入75ml甲叔醚，降温至0-10℃，滴加步骤(1)中所得含立他司特的丙酮溶液，立即析出粉末状固体，滴加完毕，搅拌析晶30min，过滤，甲叔醚洗涤，所得产物在55℃的条件下抽真空干燥8小时，得立他司特无定型9.1g，收率91％。

对比例1立他司特A晶型的制备

向100ml三口反应瓶中，加入10g立他司特，35ml丙酮和35ml水，在搅拌的过程中升温至回流使得固体溶解，再降温至30℃，搅拌析晶24小时，过滤，水洗涤，所得产物在55℃的条件下抽真空干燥8小时，得立他司特A晶型5.2g，收率52％。具体XRD图谱见图2。

对比例2立他司特无定型的制备

向100ml三口反应瓶中，加入10g立他司特，50ml MIBK，在搅拌的过程中升温至70℃，使得固体溶解，向所得混合溶液中加入50ml甲苯，降温至20-30℃，搅拌析晶2小时，过滤，甲苯洗涤，所得产物在55℃的条件下抽真空干燥8小时，得立他司特无定型8.2g，收率82％。

对比例3立他司特B晶型的制备

向100ml三口反应瓶中，加入5g立他司特，50ml乙酸乙酯，在室温打浆4天，过滤，得立他司特B晶型4.2g，收率84％。

对比例4立他司特无定型的制备

(1)向100ml三口反应瓶中，加入10g立他司特，30ml丙酮，在搅拌的过程中升温至回流使得固体溶解，再降温至30℃，过滤，得黄色至红色溶液；

(2)向250ml三口反应瓶中加入80ml异丙醚，降温至0-10℃，滴加步骤(1)中所得含立他司特的丙酮溶液，立即析出粉末状固体，滴加完毕，搅拌析晶30min，过滤，异丙醚洗涤，所得产物在55℃的条件下抽真空干燥8小时，得立他司特无定型7.0g，收率70％。

对实施例和对比例中不同晶型的立他司特的溶残、水分和溶解性进行考察，具体如下表1所示：

表1实施例和对比例中溶残、水分和溶解性数据

由以上结果可以看出，本发明中制备的立他司特无定型相对于对比例1中A晶型而言，水分含量较低，溶解性较好；相对于对比例2中无定型而言，溶残极低，在溶残方面，具有明显的优越性；相对于对比例2中B晶型而言，溶残较低，在溶解性较好；相对于对比例4中的无定型(丙酮-甲叔醚)而言，收率较高，溶残含量偏低。

因此，本申请中制备的立他司特无定型晶型，收率高，水分含量较低，溶残含量极低，溶解性较好。

其中，溶残、水分和溶解性的测试方法如下：

(1)水分的测定方法：卡尔费休测定法。

(2)溶残的测定方法：采用气相检测方法，具体色谱条件如下：以6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定液的脉细管柱为色谱柱，起始温度为40℃，维持8分钟，以每分钟15℃的速率升温至220℃，维持5分钟；进样口温度220℃，检测器温度250℃；顶空，平衡温度为90℃，平衡时间为30℃。

(3)溶解性的测定方法：参考中国药典溶解性测定方法。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可能对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。