一种基于海洋生物提取物的美容液及其制备方法

技术领域

本发明属于护肤品生产技术领域，具体地，涉及一种基于海洋生物提取物的美容液及其制备方法。

背景技术

皮肤是人体最大的器官，是人体的第一道防护，起到重要的保护作用。随着人们年龄的增长，皮肤屏障屏障受损，失去其原有的保湿和防护效果。护肤的概念已经深入人心，皮肤护理对于保持其外观和健康至关重要，但它也可以增强皮肤的屏障功能，随着社会的发展各种功能化护肤品逐渐涌入市场，以满足对皮肤调理和保护的需要。

目前，大多数出售的化妆品中都含有化学成分，用于稳定产品体系，增强肤感等，但部分化学添加剂长期使用对人体造成伤害，例如对羟基苯甲酸酯是化妆品中使用最广泛的防腐剂，可以模仿雌激素的作用，增加女性患乳腺癌的风险，并影响恶性黑色素瘤的发展。鉴于此，使用天然来源等无毒成分作为护肤品添加是大势所趋。此外，常规提取天然活性物质仍有需要改善的缺陷，如大量有机溶剂，提取时间更长，温度高等问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于海洋生物提取物的美容液及其制备方法，通过利用海洋来源的藻类提取物及胞外多糖和肾状软骨海绵中提取的胶原蛋白，赋予产品良好的保湿、美白和修复功能；同时搭配脉冲电场辅助提取的方法，降低植物提取的时间和温度，避免大量使用有机溶剂，造成产品成分对敏感肌肤造成的刺激，具有成分安全、功效明显的特点。

本发明要解决的技术问题：本发明解决了传统护肤品中使用的防腐剂或提取溶剂中对肌肤造成刺激和毒性的问题，并且降低了提取天然活性物质过程中使用大量有机溶剂问题和避免了提取时间长、提取温度高的缺陷。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种基于海洋生物提取物的美容液，包括以下质量份原料：3-15份植物提取物、5-7份植物精油、3-5份微藻胞外多糖、3-5份透明质酸、5-10份乳化剂、3-5份维生素C、3-5份维生素E、5-7份海源性胶原蛋白和70-80份去离子水。

进一步地，所述微藻胞外多糖由以下步骤制得：

使用人工海水培养基对眼叶楠绿球藻进行培养，通过0.2μm过滤对培养基进行灭菌，将眼叶楠绿球藻置于含有250mL培养基的烧瓶中，在24℃下以110rpm的速率进行搅拌，使用卤素灯进行人工照明，以16小时和8小时的间隔进行明暗交替，连续注射二氧化碳含量在0.5％-2％的无菌空气，培养七天后将培养液在20℃和无菌条件下以10000xg离心30分钟，过滤留固体备用；将上清液在超滤系统中使用100KDa膜进行过滤，直至电导率低于2μS/cm，随后将滤液进行冷冻干燥，即得微藻胞外多糖。

进一步地，所述人工海水培养基由氯化钠、氯化钾、CaCl

进一步地，所述海源性胶原蛋白由以下步骤制得：

将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍，切块后置于搅拌机中，加入100mM含有10mMEDTA、8M尿素和100mM2-巯基乙醇的Tris-HCl缓冲液，均质30-40分钟，使用NaOH将体系pH值调制9，随后在25℃下以50rpm的速率搅拌24小时，于2℃下以5000×g离心20分钟，弃去沉淀，使用乙酸溶液调节pH值至4，于2℃下以20000×g离心20分钟，弃去上清，将沉淀重悬于蒸馏水中，于2℃下以20000×g离心30分钟，冻干保存，即得海源性胶原蛋白。

进一步地，所述植物提取物由以下步骤制得：

将植物原料在25℃下浸泡于去离子水中，浸泡12小时后，于50℃下加热40分钟后，使用脉冲电场进行辅助提取，指数衰减脉冲宽度为0.96μs，幅度为18kV，使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分钟；随后通过恒温水浴锅在95℃下加热45分钟，冷却至室温后，使用20μm滤纸过滤，将滤液储存于4℃保存，即得植物提取物。

进一步地，植物提取物包括积雪草提取物、石榴提取物、眼叶楠绿球藻提取物和牛油果种子提取物。

进一步地，植物精油包括杏仁油、母菊花油、香叶天竺葵花油和白池花籽油。

进一步地，所述乳化剂为鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂基葡糖苷、花生醇、花生醇葡糖苷、椰油醇、椰油基葡糖苷、C12-C14烷基醇或C14-C22烷基糖苷中的一种或多种。

一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法，包括以下步骤：

(1)将配方量的维生素E、乳化剂和部分植物精油投入油相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到油相组分，保温备用；

(2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到水相组分，保温备用；

(3)预热乳化锅至60℃后，将水相组分加入乳化锅中，加热至80℃后，加入油相组分，以30rpm的速率搅拌10分钟后，降温至40℃，加入海源性胶原蛋白、植物精油、微藻胞外多糖、植物提取物和去离子水后，继续搅拌30分钟后，在37℃和4000rpm下保温均质搅拌20分钟，即得一种基于海洋生物提取物的美容液。

本发明的有益效果：

(1)本发明技术方案中，利用微藻中眼叶楠绿球藻及其胞外多糖和其他植物提取物的组合使用，通过胞外多糖的吸水和锁水能力和提取物中的低聚糖等成分通过氢键作用，与皮肤表面角蛋白结合，达到良好的保湿效果。此外，眼叶楠绿球藻和其他植物提取物还可以帮助促进胶原蛋白的合成，减少皱纹，且具有成分安全的特点。

(2)本发明技术方案中，利用眼叶楠绿球藻提取物、积雪草提取物和石榴提取物中黄酮和皂苷类活性物质，刺激皮肤成纤维细胞的增殖，抚平皮肤褶皱，改善皱纹；搭配，海源性胶原蛋白，提高胶原蛋白与细胞层纤连蛋白的含量，达到更好的抗皱效果。

(3)本发明技术方案中，通过植物精油、植物提取物和维生素C等物质，表现出良好的抗氧化效果，有效缓解皮肤暗沉；藻类提取物中含有的虾青素、玉米黄质等物质具有良好的抑制络氨酸酶活性效果，从而抑制黑色素的合成，达到深层的美白效果。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

微藻胞外多糖由以下步骤制得：

(1)将28.13g氯化钠、0.77g氯化钾、1.6gCaCl

(2)使用人工海水培养基对眼叶楠绿球藻进行培养，通过0.2μm过滤对培养基进行灭菌，将眼叶楠绿球藻置于含有250mL培养基的烧瓶中，在24℃下以110rpm的速率进行搅拌，使用卤素灯进行人工照明，以16小时和8小时的间隔进行明暗交替，连续注射二氧化碳含量在0.5％的无菌空气，培养七天后将培养液在20℃和无菌条件下以10000xg离心30分钟，过滤留固体备用；将上清液在超滤系统中使用100KDa膜进行过滤，直至电导率低于2μS/cm，随后将滤液进行冷冻干燥，即得微藻胞外多糖。

实施例2

微藻胞外多糖由以下步骤制得：

(1)将28.13g氯化钠、0.77g氯化钾、1.6gCaCl

(2)使用人工海水培养基对眼叶楠绿球藻进行培养，通过0.2μm过滤对培养基进行灭菌，将眼叶楠绿球藻置于含有250mL培养基的烧瓶中，在24℃下以110rpm的速率进行搅拌，使用卤素灯进行人工照明，以16小时和8小时的间隔进行明暗交替，连续注射二氧化碳含量在1％的无菌空气，培养七天后将培养液在20℃和无菌条件下以10000xg离心30分钟，过滤留固体备用；将上清液在超滤系统中使用100KDa膜进行过滤，直至电导率低于2μS/cm，随后将滤液进行冷冻干燥，即得微藻胞外多糖。

实施例3

微藻胞外多糖由以下步骤制得：

(1)将28.13g氯化钠、0.77g氯化钾、1.6gCaCl

(2)使用人工海水培养基对眼叶楠绿球藻进行培养，通过0.2μm过滤对培养基进行灭菌，将眼叶楠绿球藻置于含有250mL培养基的烧瓶中，在24℃下以110rpm的速率进行搅拌，使用卤素灯进行人工照明，以16小时和8小时的间隔进行明暗交替，连续注射二氧化碳含量在2％的无菌空气，培养七天后将培养液在20℃和无菌条件下以10000xg离心30分钟，过滤留固体备用；将上清液在超滤系统中使用100KDa膜进行过滤，直至电导率低于2μS/cm，随后将滤液进行冷冻干燥，即得微藻胞外多糖。

实施例4

一种基于海洋生物提取物的美容液，包括以下质量份原料：3g植物提取物、5g植物精油、3g实施例1制备的微藻胞外多糖、3g透明质酸、5g乳化剂、3g维生素C、3g维生素E、5g海源性胶原蛋白和70g去离子水。

一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法，包括以下步骤：

准备30g积雪草、16g石榴、50g眼叶楠绿球藻和15g牛油果种子植物原料，在25℃下浸泡于去离子水中，浸泡12小时后，于50℃下加热40分钟后，依次使用脉冲电场进行辅助提取，指数衰减脉冲宽度为0.96μs，幅度为18kV，使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分钟；随后通过恒温水浴锅在95℃下加热45分钟，冷却至室温后，使用20μm滤纸过滤，将滤液储存于4℃保存，即得植物提取物，保存备用。

将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍，切块后置于搅拌机中，加入100mM含有10mM EDTA、8M尿素和100mM 2-巯基乙醇的Tris-HCl缓冲液，均质40分钟，使用NaOH将体系pH值调制9，随后在25℃下以50rpm的速率搅拌24小时，于2℃下以5000×g离心20分钟，弃去沉淀，使用乙酸溶液调节pH值至4，于2℃下以20000×g离心20分钟，弃去上清，将沉淀重悬于蒸馏水中，于2℃下以20000×g离心30分钟，冻干保存，即得海源性胶原蛋白，备用。

(1)将配方量的维生素E、鲸蜡硬脂基葡糖苷和2g杏仁油投入油相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到油相组分，保温备用；

(2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到水相组分，保温备用；

(3)预热乳化锅至60℃后，将水相组分加入乳化锅中，加热至80℃后，加入油相组分，以30rpm的速率搅拌10分钟后，降温至40摄氏度，加入海源性胶原蛋白、1g母菊花油、1g香叶天竺葵花油和1g白池花籽油、实施例1制备的微藻胞外多糖、植物提取物和去离子水后，继续搅拌30分钟后，在37℃和4000rpm下保温均质搅拌20分钟，即得一种基于海洋生物提取物的美容液。

实施例5

一种基于海洋生物提取物的美容液，包括以下质量份原料：7g植物提取物、6g植物精油、4g实施例2制备的微藻胞外多糖、4g透明质酸、8g乳化剂、4g维生素C、5g维生素E、6g海源性胶原蛋白和75g去离子水。

一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法，包括以下步骤：

准备30g积雪草、16g石榴、50g眼叶楠绿球藻和15g牛油果种子植物原料，在25℃下浸泡于去离子水中，浸泡12小时后，于50℃下加热40分钟后，依次使用脉冲电场进行辅助提取，指数衰减脉冲宽度为0.96μs，幅度为18kV，使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分钟；随后通过恒温水浴锅在95℃下加热45分钟，冷却至室温后，使用20μm滤纸过滤，将滤液储存于4℃保存，即得植物提取物，保存备用。

将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍，切块后置于搅拌机中，加入100mM含有10mM EDTA、8M尿素和100mM 2-巯基乙醇的Tris-HCl缓冲液，均质40分钟，使用NaOH将体系pH值调制9，随后在25℃下以50rpm的速率搅拌24小时，于2℃下以5000×g离心20分钟，弃去沉淀，使用乙酸溶液调节pH值至4，于2℃下以20000×g离心20分钟，弃去上清，将沉淀重悬于蒸馏水中，于2℃下以20000×g离心30分钟，冻干保存，即得海源性胶原蛋白，备用。

(1)将配方量的维生素E、鲸蜡硬脂基葡糖苷和2g杏仁油投入油相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到油相组分，保温备用；

(2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到水相组分，保温备用；

(3)预热乳化锅至60℃后，将水相组分加入乳化锅中，加热至80℃后，加入油相组分，以30rpm的速率搅拌10分钟后，降温至40摄氏度，加入海源性胶原蛋白、1g母菊花油、1g香叶天竺葵花油和2g白池花籽油、实施例2制备的微藻胞外多糖、植物提取物和去离子水后，继续搅拌30分钟后，在37℃和4000rpm下保温均质搅拌20分钟，即得一种基于海洋生物提取物的美容液。

实施例6

一种基于海洋生物提取物的美容液，包括以下质量份原料：15g植物提取物、7g植物精油、5g实施例3制备的微藻胞外多糖、5g透明质酸、10g乳化剂、5g维生素C、5g维生素E、7g海源性胶原蛋白和80g去离子水。

一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法，包括以下步骤：

准备30g积雪草、16g石榴、50g眼叶楠绿球藻和15g牛油果种子植物原料，在25℃下浸泡于去离子水中，浸泡12小时后，于50℃下加热40分钟后，依次使用脉冲电场进行辅助提取，指数衰减脉冲宽度为0.96μs，幅度为18kV，使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分钟；随后通过恒温水浴锅在95℃下加热45分钟，冷却至室温后，使用20μm滤纸过滤，将滤液储存于4℃保存，即得植物提取物，保存备用。

将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍，切块后置于搅拌机中，加入100mM含有10mM EDTA、8M尿素和100mM 2-巯基乙醇的Tris-HCl缓冲液，均质40分钟，使用NaOH将体系pH值调制9，随后在25℃下以50rpm的速率搅拌24小时，于2℃下以5000×g离心20分钟，弃去沉淀，使用乙酸溶液调节pH值至4，于2℃下以20000×g离心20分钟，弃去上清，将沉淀重悬于蒸馏水中，于2℃下以20000×g离心30分钟，冻干保存，即得海源性胶原蛋白，备用。

(1)将配方量的维生素E、鲸蜡硬脂基葡糖苷和2g杏仁油投入油相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到油相组分，保温备用；

(2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到水相组分，保温备用；

(3)预热乳化锅至60℃后，将水相组分加入乳化锅中，加热至80℃后，加入油相组分，以30rpm的速率搅拌10分钟后，降温至40摄氏度，加入海源性胶原蛋白、1g母菊花油、2g香叶天竺葵花油和2g白池花籽油、实施例3制备的微藻胞外多糖、植物提取物和去离子水后，继续搅拌30分钟后，在37℃和4000rpm下保温均质搅拌20分钟，即得一种基于海洋生物提取物的美容液。

对比例1

一种基于海洋生物提取物的美容液，包括以下质量份原料：3g植物提取物、5g植物精油、3g透明质酸、5g乳化剂、3g维生素C、3g维生素E、5g海源性胶原蛋白和70g去离子水。

一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法，包括以下步骤：

准备30g积雪草、16g石榴、50g眼叶楠绿球藻和15g牛油果种子植物原料，在25℃下浸泡于去离子水中，浸泡12小时后，于50℃下加热40分钟后，依次使用脉冲电场进行辅助提取，指数衰减脉冲宽度为0.96μs，幅度为18kV，使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分钟；随后通过恒温水浴锅在95℃下加热45分钟，冷却至室温后，使用20μm滤纸过滤，将滤液储存于4℃保存，即得植物提取物，保存备用。

将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍，切块后置于搅拌机中，加入100mM含有10mM EDTA、8M尿素和100mM 2-巯基乙醇的Tris-HCl缓冲液，均质40分钟，使用NaOH将体系pH值调制9，随后在25℃下以50rpm的速率搅拌24小时，于2℃下以5000×g离心20分钟，弃去沉淀，使用乙酸溶液调节pH值至4，于2℃下以20000×g离心20分钟，弃去上清，将沉淀重悬于蒸馏水中，于2℃下以20000×g离心30分钟，冻干保存，即得海源性胶原蛋白，备用。

(1)将配方量的维生素E、鲸蜡硬脂基葡糖苷和2g杏仁油投入油相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到油相组分，保温备用；

(2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到水相组分，保温备用；

(3)预热乳化锅至60℃后，将水相组分加入乳化锅中，加热至80℃后，加入油相组分，以30rpm的速率搅拌10分钟后，降温至40摄氏度，加入海源性胶原蛋白、1g母菊花油、1g香叶天竺葵花油和1g白池花籽油、实施例1制备的微藻胞外多糖、植物提取物和去离子水后，继续搅拌30分钟后，在37℃和4000rpm下保温均质搅拌20分钟，即得一种基于海洋生物提取物的美容液。

对比例2

一种基于海洋生物提取物的美容液，包括以下质量份原料：3g植物提取物、5g植物精油、3g透明质酸、5g乳化剂、3g维生素C、3g维生素E和70g去离子水。

一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法，包括以下步骤：

准备30g积雪草、16g石榴和15g牛油果种子植物原料，在25℃下浸泡于去离子水中，浸泡12小时后，于50℃下加热40分钟后，依次使用脉冲电场进行辅助提取，指数衰减脉冲宽度为0.96μs，幅度为18kV，使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分钟；随后通过恒温水浴锅在95℃下加热45分钟，冷却至室温后，使用20μm滤纸过滤，将滤液储存于4℃保存，即得植物提取物，保存备用。

(1)将配方量的维生素E、鲸蜡硬脂基葡糖苷和2g杏仁油投入油相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到油相组分，保温备用；

(2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中，在85℃下以50rpm的速率搅拌40分钟，得到水相组分，保温备用；

(3)预热乳化锅至60℃后，将水相组分加入乳化锅中，加热至80℃后，加入油相组分，以30rpm的速率搅拌10分钟后，降温至40摄氏度，加入海源性胶原蛋白、1g母菊花油、1g香叶天竺葵花油和1g白池花籽油、实施例1制备的微藻胞外多糖、植物提取物和去离子水后，继续搅拌30分钟后，在37℃和4000rpm下保温均质搅拌20分钟，即得一种美容液。

现对实施例1-3与对比例1-2制备的美容液进行抗氧化效果测试。将7mM 2，2-叠氮双(3乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)水溶液与2.45mM K

表1实施例1-3与对比例1-2制备的美容液抗氧化效果测试

由上表1可知，实施例1-3中制备的美容液具有更好的抗氧化效果，由对比例2中的结果可知，微藻提取物与其他植物提取物在抗氧化方面具有协同作用。

现在对实施例1-3与对比例1-2中制备的美容液进行络氨酸酶活性抑制测试。将20μL样品、10μL蘑菇酪氨酸酶溶液和80μL磷酸盐缓冲液混合在微孔板中，并在37℃下预孵育5分钟。然后加入90μL 2mg/mL左旋多巴，在37℃的恒定温度下，磷酸盐缓冲液用作空白对照，在酶标仪中立即在475nm处检测吸光度。每个样品获得五个读数并取平均值，测试结果如下表2所示。

表2实施例1-3与对比例1-2中制备的美容液络氨酸酶活性抑制测试

从表2的结果来看，三个实施例中制备的美容液样品对络氨酸酶活性具有很好的抑制效果，从对比例1-2中的结果来看，可以证实微藻提取物和及其胞外多糖对络氨酸酶活性的抑制具有促进作用。

在说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

以上内容仅仅是对本发明所作的举例和说明，所属本技术领域的技术人员对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，只要不偏离发明或者超越本权利要求书所定义的范围，均应属于本发明的保护范围。