一种缓解由原发性痛经引起的疼痛的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种缓解由原发性痛经引起的疼痛的药物组合物及其制备方法。

背景技术

痛经是指每于行经前后或行经期间出现下腹疼痛，并伴有腰部酸胀、恶心、呕吐、头痛或腹泻等症状，程度较重时，影响工作和生活，是妇科临床最常见的疾患之一。痛经可归于中医“痛经”、“经行腹痛”范畴，其中生殖器无明显器质性病变者称为原发性痛经。近些年随着生活、工作环境的改变，痛经发病率有逐步上升的趋势。

痛经的发病原因虽然很多，其主要是多种病因最终造成气血运行不畅，气机阻滞，不通则痛，可见气血运行不畅是最主要的病理基础，故临床上则以气滞血瘀证型的痛经最多见。痛经多于月经来潮前数小时即感疼痛，经时疼痛逐步或迅速加剧，疼痛常呈阵发性或痉挛性，严重者可发生晕厥。甚至部分痛经患者因担心痛经，在月经前7～14天出现头痛、乳房胀痛、全身乏力、紧张、压抑或易怒、烦躁、失眠等一系列症状，称为经前期紧张综合征。月经来过以后，诸症即自然消失。但仍有少数患者表现精神症状及性格行为改变，严重者影响生活、学习或工作。

西医对该病的治疗目前多采用镇痛、镇静、解痉类药物及前列腺素合成酶抑制剂、钙拮抗剂等对症治疗，或用甾体激素类药物抑制排卵、5-脂氧化酶抑制剂、甚至手术治疗。以上方式虽然可以快速止痛，但常导致月经周期紊乱或伴有明显副作用，而无法广泛被患者所接受。中医早在东汉时期便对痛经有了初步的认识，张仲景《金匾要略·妇人杂病脉证并治》记载：“带下，经水不利，少腹满痛……”，经过上千年的总结和归纳，中医药学在本病的治疗方面积累了丰富的经验，临床上近期疗效显著、远期疗效好、副作用小，与西药和西医手术疗法相比具有明显优势，具有广阔的开发和应用前景，以及良好的经济和社会效益。

公开号为CN1768820A的专利由当归、香附、白芍、丹参、延胡索、川楝子、川穹、炙甘草和红花加适量辅料制成胶囊剂，具有调经止痛的作用。但是药物组分较多。

因此，提供一种组分简单、近期疗效显著、远期疗效好、副作用小的缓解原发性痛经的药物组合物及其制备方法，是本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容

有鉴于此，本发明一方面提供一种缓解由原发性痛经引起的疼痛的药物组合物，具有理气活血、调经止痛、调肝化淤的作用，主治因气滞血瘀而导致胞脉淤阻不通所引起的痛经和月经前期紧张综合症。包括以下重量的原料：白芍900～1500g，当归600～800g，延胡索500～800g，川芎500～800g，香附500～800g和炙甘草100～450g。

本发明药物组合物的处方中，白芍入肝、脾经，为气分、血分之共同要药，功善养血敛阴，柔肝缓急，调冲止痛，既可解郁滞，止腹痛，又善走血海而通血脉，兼补阴血，防过用活血药经量过多，一药多用，缓行而力强，是为君药。当归辛甘而温，能使血分各归其所，功专补血活血，又能止痛，其性动而主走，和性静而主守之芍药止痛以治标，养血以治本；延胡索既入血分又走气分，相辅相成，止痛力最强，两者共为臣药。川芎辛香走窜，温通经脉，畅行全身，行气活血止痛，和芍药、当归调血以柔肝止痛；香附辛行苦泄，善于疏理肝气，调经止痛，为妇科调经之要药，共为佐药。炙甘草缓急止痛，使诸药调和，各归其所，是为使药。且甘草、芍药同用以增强止痛之效。综观全方，白芍、当归、炙甘草调和气血以治本，延胡索、川芎、香附活血行气以止痛，六药配伍，共湊行气活血、调经止痛之功。

优选的，所述药物组合物包括以下重量的原料：白芍1000～1400g，当归700～740g，延胡索540～660g，川芎550～650g，香附550～650g和炙甘草300～420g。

优选的，所述药物组合物包括以下重量的原料：白芍1200g，当归720g，延胡索600g，川穹600g，香附600g和炙甘草360g。

优选的，本发明的药物组合物为口服制剂，优选为丸剂、糖浆剂、颗粒剂、胶囊剂或片剂，更为优选的，所述口服制剂为胶囊剂。

另一方面，本发明还提供一种缓解由原发性痛经引起的疼痛药物组合物的制备方法，包括如下步骤：

S1.将所述延胡索加乙醇回流提取两次，过滤，回收滤液中的乙醇并减压浓缩至相对密度为1.10～1.15的浸膏Ⅰ；

S2.将所述延胡索药渣、川芎、当归、白芍、炙甘草和香附加水回流提取两次，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.15～1.20的浓缩液，向所述浓缩液中加入乙醇室温放置后过滤，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.15～1.20的浸膏Ⅱ；

S3.将所述浸膏Ⅰ与浸膏Ⅱ混合，干燥后加入辅料制成药物组合物。

优选的，步骤S1中，延胡索加5倍量80％乙醇回流提取两次，每次1小时。

优选的，步骤S2中，所述延胡索药渣、川芎、当归、白芍、炙甘草和香附加5倍量水回流提取两次，第一次2小时，第二次1小时。

优选的，步骤S2中，向所述浓缩液中加入乙醇使含醇量达80％，并室温放置12～24h后在过滤。

另一方面，本发明还提供一种药物组合物，在缓解原发性痛经引起的疼痛的药物中的用途。

相对于市面上品种繁多的缓解痛经的药物，本发明的药物组合物具有以下优势：

(1)本发明药物组合物为天然纯中药制剂，原料易得，遵循中医的处方用药原则，处方来源于临床经验方，且只有六味药，经过临床反复使用和观察，疗效确切，能够快速缓解痛经症状；

(2)本发明药物组合物主要活性成分含量明显增加，药效也明显提高，能缓解由原发性痛经引起的疼痛，以调和气血，缓急止痛为主，其疗效确切，副作用小，有效率高；

(3)由于痛经病程较长，而且临床辩证分型多种多样，采用中药汤剂需要长时间的煎煮，给患者带来诸多不便。本发明药物组合物临床疗效好，疗程短，易被广大患者接受，同时用药方便，能缓解妇女痛经带来的痛苦。

附图说明

图1为视觉模拟评分VAS评分的标准

具体实施方式

以下通过具体实施例进一步描述本发明，但是不仅仅限于以下实施例。在本发明的范围内或者在不脱离本发明的内容，对本发明进行的组合、替换和变更，对于本领域技术人员来说是显而易见的，其包含在本发明的范围之内。本发明药物组合物的制剂可以为胶囊剂、片剂、丸剂等口服制剂，在实施例中仅仅列出胶囊剂。

本发明所用小鼠体重18～20g，质量合格证编号201600013735。大鼠体重220～250g，质量合格证编号：201600015178。由长春市亿斯实验动物技术有限公司提供，生产合格证号：SCXK(吉)2011～0004。

实施例1

按下列重量份称取本发明各原料：白芍1200g，当归720g，延胡索600g，川芎600g，香附600g和炙甘草360g。

制备工艺如下：将延胡索加5倍量80％乙醇回流提取两次，每次1小时，过滤获得滤液和延胡索药渣。将滤液回收乙醇并减压浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)得浸膏Ⅰ；将延胡索药渣、川芎、当归、白芍、炙甘草和香附，加5倍量水回流提取两次，第一次2小时，第二次1小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.15～1.20(60℃)的浓缩液；向浓缩液中加入乙醇使浓缩液的含醇量达80％，室温放置20小时，过滤，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.15～1.20(60℃)得浸膏Ⅱ；浸膏Ⅰ与浸膏Ⅱ混合获得原料药，所述原料药在温度60～80℃，真空度-0.08～-0.09MPa条件下微波干燥，粉碎至80目，加入4％二氧化硅、1％硬脂酸镁及适量玉米淀粉至530g，混匀，装入胶囊，制得1000粒本发明药物组合物胶囊。

实施例2

称取白芍900g，当归600g，延胡索500g，川穹500g，香附500g和炙甘草100g。按实施例1的制备工艺和常规的制片工艺制备片剂。

实施例3

称取白芍1500g，当归800g，延胡索800g，川穹800g，香附800g和炙甘草450g。按实施例1的制备工艺制备胶囊。

实施例4

称取白芍1000g，当归700g，延胡索540g，川穹550g，香附550g和炙甘草300g。按实施例1的制备工艺制备胶囊。

实施例5

称取白芍1400g，当归740g，延胡索660g，川穹650g，香附650g和炙甘草420g。按实施例1的制备工艺制备胶囊。

实施例6

称取白芍1200g，当归720g，延胡索620g，川穹630g，香附580g和炙甘草400g。按实施例1的制备工艺制备胶囊。

实施例7

按下列重量份称取本发明各原料：白芍1200g，当归720g，延胡索600g，川芎600g，香附600g和炙甘草360g。

制备工艺如下：将处方量的延胡索粉碎后加入10倍量的去离子水混合均匀，然后加入2g的纤维素酶，继续搅拌1小时。所述纤维酶的酶活范围为CMC120万u/ml(g)～130万u/ml(g)。

搅拌结束后，加5倍量80％乙醇混匀，并回流提取两次，每次1小时，过滤获得滤液和延胡索药渣。将滤液回收乙醇并减压浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)得浸膏Ⅰ；将延胡索药渣、川芎、当归、白芍、炙甘草和香附，加5倍量水回流提取两次，第一次2小时，第二次1小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.15～1.20(60℃)的浓缩液，向所述浓缩液中加入乙醇使浓缩液的含醇量达80％，室温放置20小时，过滤，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.15～1.20(60℃)得浸膏Ⅱ；浸膏Ⅰ与浸膏Ⅱ混合获得原料药，所述原料药在温度60～80℃，真空度-0.08至-0.09MPa条件下微波干燥，粉碎至80目，加入4％二氧化硅、1％硬脂酸镁及适量玉米淀粉至530g，混匀后压片，制得1000粒本发明药物组合物片剂。

对比例1

对比例1的原料和制备方法同实施例1。区别之处在于，药物组合组的制备过程中将延胡索醋制，而并非是采用加乙醇回流提取两次。

对比例2

对比例2的原料和制备方法同实施例1。区别之处在于，药物组合组的制备过程中，延胡索药渣、川芎、当归、白芍、炙甘草和香附加水回流提取一次，共3小时。

对比例3

采用CN1768820A中实施例1的方法制备药物制剂，所用原料药材为：酒炒当归、醋制香附、炒白芍、丹参、醋制延胡索、炒川楝子、炒川穹、炙甘草和红花。

将实施例1～7和对比例1～3的药物组合物用于观察对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响。具体操作方法如下：

取雌性ICR小鼠110只，将小鼠随机分为11组，每组10只，实验组按照0.22g/kg的量分别给予实施例1～7和对比例1～3的药物，空白对照组给予相同量的生理盐水。于末次给药后0.5h，将二甲苯0.05ml均匀涂于小鼠左耳前后两面，4小时后将小鼠处死，沿耳廓基线剪下两耳，用9mm直径打孔器，分别在同一部位打下圆耳片，称重，按下列公式计算肿胀程度和肿胀抑制率，结果见表1。

肿胀程度和肿胀抑制率计算公式：

肿胀程度＝左耳重量-右耳重量，

肿胀抑制率(％)＝(对照组平均肿胀程度-给药组平均肿胀程度)/对照组平均肿胀程度×100％。

表1对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响(

注：与模型对照组比较*p＜0.05，**p＜0.01

由表1可知，与空白对照组相比，实施例1～7的药物组合物可以抑制二甲苯所致小鼠的耳肿胀度，提高肿胀抑制率。但是改变制备方法后，如对比例1～2，耳肿胀程度提高，肿胀抑制率下降。对比例1中的延胡索采用醋制，而并非是实施例1～7中的乙醇回流提取两次。虽然醋制延胡索也可以提纯延胡索的有效成分，提高有效利用率从而增加药效。但是本发明的药物组合物需要考虑不同组分协同作用的效果，申请人意外的发现采用将延胡索加5倍量80％乙醇回流提取两次后，和白芍、当归、香附、川穹和炙甘草配伍后，对抑制小鼠耳肿胀的效果最好。

对比例2中延胡索渣、川芎、当归、白芍、炙甘草和香附加水回流提取一次，共3小时。实施例1～7中采用两次回流提取的方法，两次回流提取的总时间也是3小时。在回流提取的时间相同的情况下，发现采用两次回流提取后，对抑制二甲苯导致的小鼠耳肿胀的效果最好，说明各组分药物的有效成分含量最高，更有效的缓解痛经带来的疼痛。

对比例3中采用了多于本申请6种成分的中药原料，肿胀抑制率为69.2％，略低于本申请实施例1～7中73.1％～85.1％的抑制率。本申请中药成分少，却能取得更好的效果。尤其是实施例7，肿胀程度最小，肿胀抑制率最高。延胡索在处理的过程中，将中药常用的提取方法和生物酶解法相结合，先采用纤维素酶进行处理，可以破坏延胡索的细胞结构，促进有效成分的溶出，并且提高后续的提取效率和提取量，得到更多的有效成分，提高药效。

实验例1药理学研究

本发明药物组合物临床拟用剂量为1.7g/日。大鼠实验组大、中、小剂量分别为0.30g/kg、0.15g/kg和0.075g/kg(相当于临床拟用剂量12倍、6倍和3倍)；小鼠实验组大、中、小剂量分别为0.44g/kg、0.22g/kg和0.11g/kg(相当于临床拟用剂量18倍、9倍和4.5倍)。阳性对照组尽可能选择功能主治相近，给药途径和剂型相同的临床疗效公认的同类新药，据此本实验研究选择了调经止痛片和田七痛经胶囊作为阳性对照药。田七痛经胶囊，由山西华康药业股份有限公司生产，批号：20141101，小鼠等效剂量为0.5g/kg；调经止痛片，由吉林亚泰明星制药有限公司生产，批号：20141001，小鼠等效剂量为1.0g/kg。

1.1对缩宫素所致小鼠实验性痛经模型的影响

取74只雌性ICR小鼠，将小鼠随机分为七组，每组10只，分别为正常对照组、模型对照组、田七痛经胶囊组、调经止痛片组、本发明小剂量组、中剂量组和大剂量组。灌胃给药，每日一次，连续七日。正常对照组与模型对照组给予相同体积的0.5％CMC-Na。于灌胃给药第3日开始，除正常对照组外，其余各组均于灌胃给药后注射苯甲酸雌二醇20mg/kg，体积为10ml/kg，每日1次，连续5日。于末次给药后1h，各鼠均注射缩宫素20U/kg，体积为10ml/kg，记录各鼠30min内扭体次数、扭体百分率及出现扭体反应的潜伏期(30min内无扭体反应的潜伏期以30min计算)，结果见表2。

表2对缩宫素所致小鼠实验性痛经模型的影响(

注：1.与正常对照组比较△p＜0.05，△△p＜0.01，△△△p＜0.001

2.与模型对照组比较*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001(下表同)

由表2可知，大、中剂量可显著减少小鼠实验性痛经模型的扭体次数，小剂量有一定减少扭体次数作用，阳性对照组田七痛经胶囊和调经止痛片亦可明显减少小鼠扭体次数；且大剂量0.44g/kg能显著降低小鼠扭体百分率，中、小剂量对扭体百分率有一定的降低作用，两个阳性对照组对扭体百分率则无影响；大、中、小剂量均显著延长扭体潜伏期，且有一定的量效关系，大剂量作用强于阳性组。

1.2对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

采用醋酸扭体法，取雌性ICR小鼠随机等分为六组，具体见表3。灌胃给药，每日1次，连续7日，体积均为20ml/kg，正常对照组给予相同体积的0.5％CMC-Na。于末次给药后1h，每鼠腹腔注射0.7％醋酸10ml/kg，记录5～15min内的扭体次数，结果见表3。

表3对醋酸所致小鼠扭体反应的影响(

注：与正常对照组比较*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001

由表3知不同剂量本发明药物组合物能明显减少醋酸引起的小鼠扭体反应次数，对化学性刺激引起的疼痛具有显著的抑制作用。大剂量作用最佳，且优于阳性对照组。

1.3对未成年小鼠子宫、卵巢发育的影响

取雌性ICR幼鼠90只，在清洁级观察室内适应环境3天后，取合格78只随机等分为六组，每组13只，分组方法如表4所示。灌胃给药，每日1次，连续15日，体积均为20ml/kg，正常对照组给予相同体积的0.5％CMC-Na。末次给药后24小时称体重，处死小鼠，摘取子宫和卵巢，迅速在精密电子秤上称重，计算脏器系数，结果见表4。

表4对未成年小鼠子宫、卵巢发育的影响(

注：与正常对照组比较*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001

由表4结果可见，本发明大、中、小剂量及阳性对照药对未成年小鼠子宫、卵巢发育均无明显影响。

1.4作用机制研究

取Wistar大鼠，体重220～250g，质量合格证编号：201600015178。由长春市亿斯实验动物技术有限公司提供，生产合格证号：SCXK(吉)2011-0004。参照文献方法(汪明德，姜萍，陈素红等，痛经宁颗粒治疗原发性痛经的实验研究.中医药学刊.2006；24(3)：444-447；朋芝配，腾久祥，党海珍.九气拈痛胶囊对缩宫素所致痛经大鼠镇痛作用机制的研究.湖南中医学院学报.2005；25(2)：2767-2769.)，采用“对苯甲酸雌二醇增敏大鼠痛经模型的影响”实验动物，待观察记录扭体潜伏期与扭体次数完毕，于给予缩宫素1h后，将大鼠以3％的水合氯醛0.3g/kg麻醉，腹主动脉取血3.5ml后，分别置于备有肝素抗凝试管中，分离血浆，测定血栓素B2(TXB

表5大鼠血浆中TXB

注：与正常对照组比较△P＜0.05；△△P＜0.01；△△△P＜0.001与模型对照组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001

由表5结果可见，模型对照组TXB

模型对照组大鼠子宫组织中NO含量明显降低、ET-1含量升高、ET-1/NO比值显著增大。本发明大剂量可明显增加NO含量、减小ET-1/NO比值，小剂量可明显降低ET-1含量、增加NO含量、减小ET-1/NO比值。调经止痛片与本发明大剂量作用相近，田七痛经胶囊则无明显影响；与正常对照组比较，模型对照组大鼠血浆中β-EP含量显著降低，本发明大剂量可明显升高β-EP含量，与模型对照组比较有显著性差异，中、小剂量及两个阳性对照药对β-EP含量则无明显影响。

本发明药物组合物可调节TXB

实验例2毒理学研究

2.1急性毒性试验

本试验设4个组，分别为对照组及5、10和20g/kg的本发明组(分别相当于临床拟用剂量的176倍、352倍和704倍，分别为药效学起效剂量的33.3倍、66.6倍和133.3倍，每组10只SD雌性大鼠。各组大鼠按40mL/kg的体积单次经口灌胃给予对照制剂(0.5％CMC-Na)或本发明药物组合物，给药后观察14天。

在观察期间，各组雌鼠一般状态良好，体重及摄食量、血液学、血液生化学及大体解剖观察均未见异常改变，自主活动正常，未见明显毒性反应。在本试验条件下，SD雌鼠最大耐受剂量(MTD)大于20g/kg。由此可见，本发明药物组合物一次灌胃MTD＞20g/kg，相当于临床拟用剂量的704倍，未见急性毒性反应，表明本品毒性较低。

2.2长期毒性试验

本试验设4个组，分别为对照组及0.75、1.5和5g/kg本发明组(分别约为临床拟用剂量的26.8、53.6和178.6倍，为药效学起效剂量的5倍、10倍和33.3倍)，每组30只雌性大鼠。各组大鼠均按10mL/kg的体积经口灌胃给予对照品(0.5％CMC-Na)或相应剂量的本发明药物组合物，每天给药1次、连续给药26周，停药恢复观察4周。

5g/kg组大鼠主要毒性表现为体重增长缓慢、摄食减少，外周血RBC、HGB、HCT轻度降低，血清TBIL及Urea轻度升高，尿液胆红素、酮体、比重、蛋白、尿胆原等级升高及酸碱值等级降低，肝脏重量及脏器系数升高，肝细胞轻微～轻度肥大。停药后，除体重外上述改变均恢复正常。1.5g/kg组大鼠仅见摄食轻度减少、血清TBIL轻度升高，停药后可恢复正常。0.75g/kg组大鼠一般状况、体重及摄食、临床病理学检查、激素检查、脏器重量及系数、大体解剖观察等均明显异常。

在本试验条件下，本发明药物组合物的无毒性反应剂量(NOAEL)为1.5g/kg(相当于临床拟用剂量的53.6-178.6倍)。长期服用的主要毒副作用靶器官可能为肝脏、肾脏及骨髓的轻度影响，但该种不良影响具有可恢复性。

2.3生殖毒性试验

将192只SD大鼠随机分为对照组及本发明药物组合物0.75、1.5、5g/kg组，每组48只，雌雄各半。各组大鼠均按10ml/kg的体积经口灌胃给予对照品(0.5％CMC-Na)或相对浓度的本发明混悬液。各组雄鼠自交配前开始给药至交配结束解剖，雌鼠自交配前2周开始给药至妊娠第7天，每天给药1次。雄、雌鼠各自首次给药当天定义为给药第1天，雄、雌鼠按1:1合笼交配，首次合笼当天定义为交配第0天，雌鼠交配成功当天定义为妊娠第0天。每天观察各组大鼠的一般状态。

SD雄鼠自交配前4周至交配结束、SD雌鼠自交配前2周至妊娠第7天，每天1次经口灌胃给予0.75、1.5和5g/kg组本发明药物组合物，5g/kg组雌/孕鼠可见轻微的亲代毒性、生殖毒性，主要表现为体重增重、摄食量、黄体数、着床腺数、卵巢绝对重量/脏脑系数降低。0.75、1.5g/kg组雄鼠、雌/孕鼠和5g/kg组雄鼠一般状态、体重、摄食量、病理学检查、生殖功能及早期胚胎发育均未见明显异常改变。本发明对亲代雄鼠及其生殖功能的无毒性反应剂量(NOAEL)为5g/kg，对亲代雌鼠及其生殖功能的NOAEL为1.5g/kg，对早期胚胎发育的NOAEL为5g/kg。

实验例3药效研究

以下为本发明药物组合物缓解痛经引起的疼痛的临床观察。本研究有两个阶段，包括筛选期0～6天，用药期3天。

3.1病例资料

160例受试者均为妇科病房及门诊就诊的符合原发性痛经诊断标准的患者。其中14～20岁46例，21～30岁88例，31～40岁26例。病例中病程最长的为21年，最短的为1年。

3.2诊断依据

3.2.1西医诊断标准

参照《妇产科学》(谢幸，孔北华，段涛著.人卫出版社.2018年版)。

原发性痛经指生殖器官无器质性的病变的痛经。原发性痛经特点：①原发性痛经在青春期多见，常在初潮后1～2年内发病；②疼痛多来自月经来潮后开始，最早出现在经前12小时，以行经第1日疼痛最剧烈，持续2～3日后缓解，疼痛常呈痉挛性，通常位于下腹部耻骨上，可放射至腰骶部和大腿内侧；③可伴有恶心，呕吐，腹泻，头晕，乏力等症状，严重时面色发白、出冷汗；④妇科检查无异常发现；⑤妇科B超检查无异常发现。

3.2.2中医辨证分型标准

参照《中药新药治疗痛经的临床指导原则》(卫生部发布.1993年版)，《全国高等中医药院校规划教材第十版.中医妇产科学》(谈勇著.全国中医药出版社.2017版)，《中医妇科常见病诊疗指南.痛经》(中国中医药出版社.2012年版)。

原发性痛经气滞血瘀证的诊断标准：

主症：经前或经期小腹胀痛、拒按；次症：①经血量少，经行不畅；②血色黯红或紫暗、有块、块下痛减；③乳房胀痛；④胸闷不舒；舌脉：舌质紫暗或有瘀点，苔薄白，脉弦或涩。

辩证标准：主症必备，次症具备2项或2项以上者，参照舌脉即可确诊。

3.3疾病量化标准及判定方法

视觉模拟评分法(VAS)是用来测定疼痛强度，它是由一条100mm直线组成。线左端表示“无痛”，线右端表示“无法忍受的痛”。患者将自己感受的疼痛强度标记在直线上，线左端至标记之间的距离为该患者的疼痛强度，长度为40mm，则评分为4。1～3为轻度，4～6为中度，7～10为重度。如图1所示。

受试者首次进行视觉模拟评分法进行评分前，研究者需对VAS评分的评分标准及计分方式进行讲解，讲解内容至少含以下2方面内容：

(1)VAS评分定义：视觉模拟评分法(VAS)是用来测定疼痛强度，它是由一条100mm直线组成。线左端表示“无痛”，线右端表示“无法忍受的痛”，中间部分表示不同程度的疼痛，请根据自身疼痛程度标记在直线上。

(2)评分规则：

0分：无痛；

0＜分值≤4：轻微疼痛，能忍受；

4＜分值≤7：疼痛并影响睡眠，尚能忍受，需口服止痛药物；

7＜分值≤10：较强烈的疼痛，疼痛剧烈或难忍，难以入睡或痛醒。

每次测定前，让病人在未画过的直线上再做标记，以避免患者比较前后标记而产生主观性误差。由患者记录数据，每天早晚服药后，在直线上标记出两次服药间发生的最大疼痛程度，研究者根据患者在直线上的标记，测量0端至标记的距离即为VAS疼痛评分。

3.4纳入病例标准

(1)符合原发性痛经西医诊断标准者；

(2)符合中医辨证(气滞血瘀证)的诊断标准；

(3)既往6个月内有连续4个月的痛经史，月经周期在28±7天范围；

(4)未有孕产史女性；

(5)受试者自愿参加并已签署知情同意书。

3.5排除病例标准

(1)月经量≥80ml患者；

(2)经检查证实由于子宫内膜异位症、盆腔炎、子宫肌瘤、卵巢等病变所致继发性痛经患者；

(3)使用药物宫内节育器、6个月内计划妊娠、哺乳期的患者；

(4)4周内服用过功能主治相似的中药者，12周内经过阴道或者口服雌激素或者雌孕激素者，24周内使用过宫内节育器或者注射激素者；

(5)血红蛋白＜90g/L，具有严重的原发性心、肝、肺、肾、血液或影响其生存的严重疾病，研究者判断不宜参加该临床试验者；

(6)谷丙转氨酶ALT和/或谷草转氨酶AST大于正常值范围上限2倍者、血清肌酐Scr大于正常值范围上限者；

(7)过敏体质，对两种或以上药物或食物过敏者，或对本药己知成分过敏者；

(8)患有任何严重的心理异常和精神异常，无法依从临床试验步骤与规范者；

(9)近一月内参加其他临床试验者。

3.6剔除病例标准

“剔除”是指不应入组但已入组的受试者应予剔除，包括：

(1)误纳；

(2)误诊；

(3)全未用药；

(4)无任何检测记录者。

3.7给药方案

每次饭后口服本申请实施例1制备的胶囊4粒(其中均为本发明药物组合物4粒)，每日2次。在整个治疗过程中，研究者应要求患者按方案要求服药，并将空包装和未用完的药物交回研究医师，并记录用药开始时间、服用剂量、用药次数、回收数量等。再由申办单位收回统计。痛经出现开始服药，连续服药3天。

3.8疗效评价指标及评价方法

(1)按照国家卫生部关于治疗痛经的中药新药的有关规定制定，痊愈：用药后积分恢复至0分，腹痛及其他症状消失，停药三个月经周期未复发者；显效：治疗后积分降低至治疗前积分的1/2以下，腹痛明显减轻，其余症状好转；有效：治疗后积分降低至治疗前积分的1/2～3/4，腹痛减轻，其余症状好转；无效：腹痛及其它症状无改变，治疗后积分降低不足治疗前积分的3/4。

(2)试验组患者服药前后的各项实验室指标检查：血常规(RBC、WBC、NEUT％、HGB、PLT)、凝血功能(凝血酶原时间PT、活化部分凝血活酶时间APTT、血浆凝血酶时间TT、国际标准化比值INR)、肝功能(ALT、AST、ALP、TBil、GGT)、肾功能(尿常规(ERY、LEU、PRO)+尿沉渣、Scr、eGFR)和常规12导联心电图(重点关注心律不齐、ST段改变及QT/QTc延长情况)。

3.9治疗效果

本组病例全部为原发性痛经，无排除和剔除者。病例构成情况为：VAS评分0＜分值≤4轻度疼痛共39例，占24.37％，4＜分值≤7中度疼痛共85例，占53.13％，7＜分值≤10重度疼痛共36例，占22.5％。其中，痊愈44例，痊愈率为27.5％；显效91例，显效率为56.88％，有效22例，有效率13.75％；无效3例，无效率为1.87％，总有效率为98.13％。

对比例4为按照CN102526675B中实施例1方法制备的汤剂，并选择160名符合标准的受试者，按照本申请的疾病量化标准及判定方法进行判定治疗效果。

表6是本发明与对比例3和对比例4的治疗痛经的药物制剂的治疗效果对比表。

表6治疗效果对比表

与对比例3相比，本发明用于缓解原发性痛经的药物组合物痊愈率为27.5％，而对比例3中仅有18.2％，对比例4为25.3％；本发明的显效率为56.88％，高于对比例中的52.7％和55.5％；本发明无效率仅为1.87％，低于对比例的6.7％和2.4％。因为本申请的药物组合物痊愈率和显效率高于对比专利，有效率自然下降，但是总的来说，总有效率为98.13％，高于对比例中的93.3％和97.6％。

在服药过程中，试验组患者生命体征平稳且无恶心呕吐、过敏等不良反应，说明本发明药物组合物的临床运用是安全可靠的。