抑制脂肪酸合酶(FASN)

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年10月10日提交的美国临时申请62/744,071的权益，所述临时申请以引用的方式整体并入。

技术领域

本公开涉及用于抑制脂肪酸合酶(FASN)的新型化学组合物。

背景技术

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是具有不同程度的炎症和纤维化的慢性肝病，其可以进展为肝硬化和终末期肝脏并发症。该疾病在美国影响超过1600万人并且在美国是肝脏移植的第二主要原因。此外，NASH是2型糖尿病、心血管疾病和终末期肾病的强预测因子。目前不存在已批准用于治疗NASH的药理学药剂，这是一个巨大的医疗负担。NASH的发病机制与肥胖或异常代谢综合征相关。与所提出的作为脂肪变性和肝脏损伤的介质的增加的脂肪从头合成(DNL)作用一致，FASN表达在NASH患者的肝脏中显著提高，其中FASN mRNA表达水平相比于正常对照超过17倍。因此，FASN是用于通过调节DNL途径和减少脂肪变性来治疗NASH的有吸引力的治疗性目标。

发明内容

本文公开可用于抑制FASN的新型化合物，包括FASN抑制剂化合物。本公开的第一方面涉及式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

m为0-4；并且

n为0-6。

本公开的另一方面涉及一种包含式(I)化合物或药学上可接受的盐的药物组合物。药学上可接受的载剂还可以包括赋形剂、稀释剂或表面活性剂。药物组合物可以有效地治疗有需要的受试者的与FASN调节相关的疾病或病症。药物组合物可以包含用于治疗本文所描述的疾病的本公开化合物。组合物可以包含至少一种本公开化合物和药学上可接受的载剂。

本公开的另一方面涉及一种抑制FASN的方法。所述方法可以包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

附图说明

图1为根据本公开的实施方案的化合物的表。

图2为根据本公开的实施方案的化合物以及此类化合物的IC

图3为根据本公开的实施方案的化合物以及此类化合物的IC

具体实施方式

本公开涉及能够调节FASN活性的化合物和组合物。本公开提供治疗、预防或改善FASN在其中起作用的疾病或病症的方法，其通过向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐来实现。本公开的方法可以用于通过抑制FASN活性来治疗多种FASN依赖性疾病和病症。对FASN的抑制提供治疗包括但不限于NASH的疾病的新型方法。

在某些实施方案中，提供新型FASN抑制剂化合物。除非另外指示，否则如本文所使用的“FASN抑制剂化合物”是指当根据下面实施例3的生物化学测定方案测试时具有以下特征中的一种或多种的化合物：(1)FASN IC

除非另外指示，否则式(I)化合物可以其互变异构形式(例如作为酰胺或亚氨基醚)存在。本文涵盖所有此类互变异构形式作为本公开的一部分。

除非另外指示，否则式(I)化合物可含有不对称或手性中心，并且因此以不同立体异构形式存在。除非另外指示，否则旨在式(I)化合物的所有立体异构形式以及其混合物(包括外消旋混合物)形成本公开的一部分。此外，本公开涵盖所有几何和位置异构体。例如，如果式(I)化合物掺有双键或稠环，那么顺式形式和反式形式两者以及混合物涵盖在本公开的范围内。本文所公开的各化合物包括符合化合物通式结构的所有对映异构体。化合物可呈外消旋或对映异构性纯形式，或就立体化学而言的任何其他形式。测定结果可反映所收集的关于外消旋形式、对映异构性纯形式或就立体化学而言的任何其他形式的数据。

非对映异构体混合物可以基于其物理化学差异通过本领域技术人员熟知的方法(诸如通过层析和/或分步结晶)来分离成其各自非对映异构体。对映异构体可以通过以下方式分离：通过与适当光学活性化合物(例如手性助剂，诸如手性醇或Mosher酸氯化物(Mosher's acid chloride))反应将对映异构混合物转化为非对映异构混合物，分离非对映异构体并且将各个非对映异构体转化(例如水解)为对应的纯对映异构体。此外，一些式(I)化合物可以是阻转异构体(例如取代的联芳基)并且视为本公开的一部分。对映异构体也可以通过使用手性HPLC(chiral HPLC)柱来分离。

式(I)化合物可形成也在本公开范围内的盐。除非另外指示，否则本文提及式(I)化合物理解为包括提及其盐。

本公开涉及如本文所述的化合物以及其药学上可接受的盐。本公开还包括药物组合物，其包含一种或多种如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，本文所报道的药物组合物可以单位剂型(例如胶囊、片剂或其类似剂型)提供。在一些实施方案中，本文所报道的药物组合物可以口服剂型提供。在一些实施方案中，式(I)化合物的口服剂型可以是胶囊。在一些实施方案中，式(I)化合物的口服剂型是片剂。在一些实施方案中，口服剂型包含一种或多种填充剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、抗粘剂和/或抗静电剂。在一些实施方案中，口服剂型通过干燥共混来制备。在一些实施方案中，口服剂型是片剂并且通过干法制粒来制备。

在一些实施方案中，本公开的化合物可以1mg至1g以治疗有效频率(例如一天一次至一周一次)给药。

本公开的化合物

本公开涉及能够调节FASN的化合物或其药学上可接受的盐，其可用于治疗与FASN的调节相关的疾病和病症。本公开还涉及可用于抑制FASN的化合物或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(I)：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

m为0-4；并且

n为0-6。

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(I)，或其药学上可接受的盐，其中式(I)具有下式

其中：

R

其中R

各R

各R

其中R

环A、R

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(I-a)：

或其药学上可接受的盐，

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

R

m为0-4；并且

n为0-6。

在一些实施方案中，提供式(I-a)化合物，其中R

在一些实施方案中，提供式(I)化合物，其中：

环A为苯基或萘基；

R

R

各R

各R

R

R

R

各R

m为0-1；并且

n为0-3。

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(II)：

或其药学上可接受的盐，

其中环A、R

在一些实施方案中，提供式(II)化合物，其中：

环A为6-10元芳基或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

各R

其中R

各R

各R

各R

各R

m为0-4；并且

n为0-6。

在一些实施方案中，提供式(II)化合物，其中：

环A为6-10元芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

各R

其中R

各R

m为0-4；并且

n为0-6。

在一些实施方案中，提供式(II)化合物，其中：

环A为苯基或萘基；

R

R

各R

R

R

R

各R

m为0-1；并且

n为0-3。

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(III)：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

其中R

R

其中R

各R

各R

其中R

各R

n为0-4。

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(IV)：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

其中R

各R

各R

其中R

各R

n为0-4。

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(V)：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

各R

各R

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(VI-A)：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

各R

各R

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(VI-B)：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

各R

各R

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(VII-A)：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环B为苯基、稠合双环8-10元芳基或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的稠合双环8-10元杂芳基；

R

各R

各R

在一些实施方案中，本公开的化合物具有式(VII-B)：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环B为苯基、稠合双环8-10元芳基或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的稠合双环8-10元杂芳基；

R

各R

各R

应了解，在本公开通篇中，除非另外指示，否则提及式(I)化合物旨在还包括式(I)、(I-a)、(II)、(III)、(IV)和(V)以及本文所公开的此类式的化合物物类1-276。另外，应了解，除非另外指示，否则在本公开通篇中，提及式(I)化合物旨在还包括本文所述的子式中的任一者的化合物，包括式(I)、(I-a)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI-A)、(VI-B)、(VII-A)和(VII-B)以及本文所公开的物类。

在式(I)化合物的一些实施方案中，R

在一些实施方案中，本公开的化合物为其中R

在一些实施方案中，本公开的化合物为其中R

在一些实施方案中，环A为6-10元芳基。在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，各R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，环A为苯基。在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在式(I)、(II)、(III)、(IV)和(V)化合物的一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

其中R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，本公开涉及选自图2的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，在对应实例中指定的条件下，化合物为第一洗脱异构体。在一些实施方案中，在对应实例中指定的条件下，化合物为第二洗脱异构体。在一些实施方案中，在对应实例中指定的条件下，化合物为第三洗脱异构体。在一些实施方案中，在对应实例中指定的条件下，化合物为第四洗脱异构体。

在一些实施方案中，本公开涉及选自图3的化合物或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及一种下式的化合物

或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及化合物4-{4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}-3-甲基苯甲酸或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及一种下式的化合物

或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及化合物(S)-4'-(6-(1-羟基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲基-[1,1'-联苯]-3-羧酸或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及一种下式的化合物

或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及化合物((S)-1-(4'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及一种下式的化合物

或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及化合物6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及一种下式的化合物

或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及化合物5-氯-6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及一种下式的化合物

或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及化合物((S)-1-(2'-甲氧基-4'-(2H-四唑-5-基)-1',2',3',4',5',6'-六氢-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及一种下式的化合物

或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及化合物4-[4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基]喹啉-2-羧酸或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及选自由以下组成的组的化合物：4-{4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}-3-甲基苯甲酸；(S)-4'-(6-(1-羟基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲基-[1,1'-联苯]-3-羧酸；((S)-1-(4'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮；6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸；5-氯-6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸；((S)-1-(2'-甲氧基-4'-(2H-四唑-5-基)-1',2',3',4',5',6'-六氢-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮；以及4-[4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基]喹啉-2-羧酸；或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开涉及：

1.一种式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

m为0-4；并且

n为0-6。

2.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(I-a)化合物：

或其药学上可接受的盐，

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

m为0-4；并且

n为0-6。

3.如实施方案2所述的化合物，其中环A为6-10元芳基。

4.如实施方案3所述的化合物，其中R

5.如实施方案4所述的化合物，其中各R

6.如实施方案5所述的化合物，其中各R

7.如实施方案6所述的化合物，其中

R

R

R

8.如实施方案7所述的化合物，其中各R

9.如实施方案8所述的化合物，其中

m为0-1；并且

n为0-3。

10.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(II)化合物：

或其药学上可接受的盐，

环A为6-10元芳基或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

各R

其中R

各R

各R

各R

各R

m为0-4；并且

n为0-6。

11.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(III)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

其中R

R

其中R

各R

各R

其中R

各R

n为0-4。

12.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(IV)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

其中R

各R

各R

其中R

各R

n为0-4。

13.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(V)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

各R

各R

14.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物选自表1。

15.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物选自由以下组成的组：

16.一种药物组合物，其包含如实施方案1至15中任一项所述的化合物。

17.一种式(I)的FASN抑制剂：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

m为0-4；并且

n为0-6。

18.一种通过本文所公开的方法获得的式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

m为0-4；并且

n为0-6。

在一些实施方案中，本公开涉及：

1.一种式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

m为0-4；并且

n为0-6。

2.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是下式化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

R

其中R

各R

各R

其中R

3.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(I-a)化合物：

或其药学上可接受的盐，

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

R

m为0-4；并且

n为0-6。

4.如实施方案3所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R

5.如实施方案4所述的化合物，其中环A为6-10元芳基。

6.如实施方案5所述的化合物，其中R

7.如实施方案6所述的化合物，其中各R

8.如实施方案7所述的化合物，其中各R

9.如实施方案8所述的化合物，其中

R

R

R

10.如实施方案9所述的化合物，其中各R

11.如实施方案10所述的化合物，其中

m为0-1；并且

n为0-3。

12.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(II)化合物：

或其药学上可接受的盐，

环A为6-10元芳基或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

各R

其中R

各R

各R

各R

各R

m为0-4；并且

n为0-6。

13.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(III)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

其中R

R

其中R

各R

各R

其中R

各R

n为0-4。

14.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(IV)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

其中R

各R

各R

其中R

各R

n为0-4。

15.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(V)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

各R

各R

16.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(VI-A)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

各R

各R

17.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(VI-B)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

各R

各R

18.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(VII-A)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环B为苯基、稠合双环8-10元芳基或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的稠合双环8-10元杂芳基；或环A为稠合双环8-10元芳基或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的杂芳基；

R

各R

各R

19.如实施方案1所述的化合物，其中所述化合物是式(VII-B)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环B为苯基、稠合双环8-10元芳基或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的稠合双环8-10元杂芳基；或环A为稠合双环8-10元芳基或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的杂芳基；

R

各R

各R

20.如实施方案14-19中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R

21.如实施方案14-20中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R

22.如实施方案1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自图1。

23.如实施方案1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自图2。

24.如实施方案1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自图3。

25.如实施方案1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自由以下组成的组：

26.如实施方案1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自由以下组成的组：

27.一种药物组合物，其包含如实施方案1-26中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。

28.一种式(I)的FASN抑制剂化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

m为0-4；并且

n为0-6。

29.如实施方案28所述的FASN抑制剂化合物，其中所述化合物是下式化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

R

其中R

各R

各R

其中R

30.一种通过本文所公开的方法获得的式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

m为0-4；并且

n为0-6。

31.如实施方案30所述的化合物，其中所述化合物是下式化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

R

其中R

各R

各R

其中R

32.一种抑制患者中的FASN的方法，其包括向患者施用治疗有效量的如实施方案1-26和28-31中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或如实施方案27所述的药物组合物。

33.一种治疗患者的FASN依赖性疾病或病症的方法，其包括向患者施用治疗有效量的如实施方案1-26和28-31中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或如实施方案27所述的药物组合物。

34.一种下式的化合物

或其药学上可接受的盐。

35.一种化合物4-{4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}-3-甲基苯甲酸或其药学上可接受的盐。

36.一种下式的化合物

或其药学上可接受的盐。

37.一种化合物4-[4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基]喹啉-2-羧酸或其药学上可接受的盐。

38.一种药物组合物，其包含如实施方案34至37中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。

39.一种抑制患者的FASN的方法，其包括向患者施用治疗有效量的如实施方案34至37中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或如实施方案38所述的药物组合物。

40.一种治疗患者的FASN依赖性疾病或病症的方法，其包括向患者施用治疗有效量的如实施方案34至37中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或如实施方案38所述的药物组合物。

合成化合物的方法

本公开的化合物可通过多种方法，包括标准化学方法制备。合适的合成途径描绘于下文给出的实施例中。

本公开的化合物(即式(I)化合物)或其药学上可接受的盐可通过如部分地由以下合成方案所阐述的有机合成领域已知的方法来制备。在下文所述的方案中，应充分理解，在必要时根据一般原理或化学方法采用敏感或反应性基团的保护基。根据有机合成的标准方法(T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“Protective Groups in Organic Synthesis”,第三版,Wiley,New York 1999)操纵保护基。使用对于本领域技术人员显而易见的方法在化合物合成的便利阶段移除这些基团。选择方法以及其反应条件和执行顺序应与式(I)化合物的制备一致。

本领域技术人员将认识到式(I)化合物中是否存在立构中心。因此，本公开包括两种可能的立体异构体(除非另外指示和/或在合成中指定)并且不仅包括外消旋化合物，而且还包括各个对映异构体和/或非对映异构体。除非另外指示，否则当期望化合物呈单一对映异构体或非对映异构体形式时，其可通过立体特异性合成或通过拆分最终产物或任何便利的中间体而获得。可通过本领域已知的任何合适的方法实现对最终产物、中间体或起始物质的拆分。参见例如E.L.Eliel,S.H.Wilen,和L.N.Mander的“Stereochemistry ofOrganic Compounds”(Wiley-lnterscience,1994)。

用于合成式(VII-A)化合物的说明性方法概述于方案1中。用甲苯磺酰肼处理可商购获得的4-溴苯甲醛(1-1)，得到对应的腙1-2。烯烃1-3的环丙烷化得到6-氮杂螺[2.5]辛烷化合物1-4。超临界流体层析(Supercritical fluid chromatography，SFC)分离得到S-异构体1-5。用双(频哪醇合)二硼处理1-5，产生硼酸酯1-6并且随后用于与溴化物1-7的钯催化的铃木偶合中以提供联芳基中间体1-8。移除N-BOC保护基，得到胺中间体1-9，其与羧酸1-10偶合得到式VII-A化合物。应理解，合适的保护基可以用于方案1中所概述的合成中。可以通过类似方法通过采用SFC分离中获得的R对映异构体来获得式VII-B化合物。本公开的其他化合物，即式(I)化合物，可以通过类似方法制备。

方案1.

在一些实施方案中，本公开涉及可用作本公开化合物(即式(I)化合物)的合成中的中间体的化合物。

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物是下式的化合物

其中环B和R

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物是下式的化合物

其中环B和R

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

在一些实施方案中，化合物为：

使用所公开化合物的方法

本公开的一个方面涉及一种用于药物的式(I)化合物。本公开的另一方面涉及一种调节FASN的方法，其包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物。本公开的另一方面涉及一种调节FASN的方法，其包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。本公开的另一方面涉及一种抑制FASN的方法，其包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物。本公开的另一方面涉及一种抑制FASN的方法，其包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在另一方面，本公开涉及一种抑制FASN的方法，其包括向有需要的患者施用治疗有效量的包含式(I)化合物的药物组合物。在另一方面，本公开涉及一种抑制FASN的方法，其包括向有需要的患者施用治疗有效量的包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。本公开的另一方面涉及一种治疗与FASN调节相关的疾病或病症的方法，其包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

因此，优选实施方案包括包含具有本文所公开和/或以其他方式描述的化学结构的FASN抑制剂的药物组合物。药物组合物可以是包含FASN抑制剂的胶囊、片剂或其他合适的剂型，所述FASN抑制剂可以是式(I)、式(I-a)、式(II)、式(III)、式(IV)和/或式(V)化合物或其药学上可接受的盐。药物组合物可以是包含FASN抑制剂的胶囊、片剂或其他合适的剂型，所述FASN抑制剂可以是式(I)、式(I-a)、式(II)、式(III)、式(IV)、式(V)、式(VI)或式(VII)化合物或其药学上可接受的盐。可以在整个治疗过程中以治疗有效量向有需要的患者(例如，被诊断患有据信对FASN抑制剂起反应的癌症形式的患者)施用包含FASN抑制剂的药物组合物以向患者提供期望疗效。

本发明还涉及用于在本文所公开的治疗和预防方法中使用的本文所公开的化合物和组合物。

药物制剂

式(I)化合物可以配制成各种药学上可接受的制剂(例如，配制为胶囊以用于口服递送或配制为溶液以用于肠胃外施用)。为了在疗法中使用，可作为药物组合物的活性药物成分(API)施用式(I)化合物以及其盐、溶剂化物和生理功能衍生物。因此，药物组合物可以包含式(I)化合物或其盐、溶剂化物和生理功能衍生物，以及一种或多种药学上可接受的载剂、稀释剂和/或赋形剂。一种或多种载剂、稀释剂或赋形剂可以经过选择以与制剂的其他成分相容并且对于预期疗法是适当地安全且有效的。

药物组合物可以每单位剂量含有预先确定量的包含式(I)化合物的API的单位剂量形式提供。这样的单位可包含期望量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，取决于所治疗的病状、施用途径以及患者的年龄、体重和状况。因此，此类单位剂量可以期望的给药间隔施用。

药学上可接受的组合物在配方批料中可以包含作为活性药物成分(API)的期望重量浓度的式(I)化合物与其他成分的组合，以形成药物物质(DS)。可以将DS配方批料分成单位剂型。药学上可接受的组合物可以被配制用于以单位剂型通过适当的途径进行施用，例如通过口服递送(包括作为胶囊或片剂)。可通过将包含式(I)化合物的活性药物成分(API)与一种或多种载剂或赋形剂混合来制备此类组合物。被配制用于口服递送的包含式(I)化合物的药物组合物可以制备成式(I)化合物的期望剂量强度的单位剂型，诸如胶囊。为了以液体形式口服施用，可以将口服药物组分与任何口服非毒性的药学上可接受的惰性载剂(诸如乙醇、甘油、水等)组合。

包含式(I)化合物的药学上可接受的组合物可以通过各种程序制备。例如，可以将式(I)化合物与合适的赋形剂、稀释剂或载剂配制在一起，并且成形为片剂或胶囊以及其他合适的剂型。为了以片剂或胶囊的形式口服施用，可以将式(I)化合物与口服无毒性的药学上可接受的惰性载剂组合。适用于此类制剂的赋形剂、稀释剂和载剂的其他实例包括以下：填充剂和增量剂，诸如淀粉和糖；以及粘合剂，诸如纤维素衍生物。此外，在期望或必要时，也可以将合适的粘结剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺入混合物中。合适的粘结剂包括淀粉、天然糖、天然和合成树胶等。润滑剂和/或助流剂可以在这些剂型中使用。

还可以将化合物配制为适用于肠胃外施用的溶液，例如通过肌内、皮下或静脉内途径。例如，可以将式(I)化合物以pH 8溶解于合适的缓冲液(例如，50mM磷酸盐缓冲溶液或具有EtOH/PEG400的溶液)中。包含期望浓度的式(I)化合物的药物组合物可以配制为可注射药物溶液(例如可用于临床前动物研究中)。

实施例

用于以下方案和本文其他地方的定义为：

缩写：

ACN 乙腈

AcOH 乙酸

CH

CH

CO 一氧化碳

CO

Cs

CuI 碘化铜(I)

DCM 亚甲基氯、二氯甲烷

DCE 1,2-二氯乙烷

DIEA 二异丙基乙胺

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲亚砜

DBU 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯

Et3N 三乙胺

Et

EtOAc 乙酸乙酯

EtOH 乙醇

FA 甲酸

H

H

HCl 盐酸

IPA 异丙醇

K

K

MeOH 甲醇

MgSO

MTBE 甲基叔丁基醚

Na

NH

NH

NaH 氢化钠

NaHCO

NH

NaI 碘化钠

NaOH 氢氧化钠

Pd(dppf)Cl

Pd(dppf)Cl

Pd(OAc)

Pd

PE 石油醚

t-BuOK 叔丁醇钾

TFA 三氟乙酸

XantPhos 4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧杂蒽材料

除非另外说明，否则所有材料均从商业供应商获得并且不经进一步纯化即使用。无水溶剂获自Sigma-Aldrich(Milwaukee，WI)并且直接使用。所有涉及对空气或湿度敏感的试剂的反应均在氮气气氛下进行，并且所有利用微波辐照的反应均在BiotageInitiator EXP EU仪器上进行。

除非另外指出，否则使用以下任一者来测量质量触发的HPLC纯化和/或纯度和低分辨率质谱数据：(1)具有220nm UV检测和低共振电喷雾正离子模式(ESI)的WatersAcquity超高效液相层析(UPLC)系统(具有样品处理器和Waters Micromass ZQ质谱仪的Waters Acquity UPLC)。

实施例1-制备共同中间体

制备共同中间体1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯并且手性分离成单一对映异构体。

步骤1.(E)-N'-(4-溴苯亚甲基)-4-甲基苯磺酰肼。在室温下将4-溴苯甲醛(21.00g，0.10mol)和4-甲基苯-1-磺酰肼(21.22g，0.11mol)在甲醇(100mL)中的溶液搅拌1h。过滤所得混合物，并且用甲醇(3×50mL)洗涤滤饼。在减压下干燥固体，得到呈白色固体状的(E)-N'-(4-溴苯亚甲基)-4-甲基苯磺酰肼(38.05g，94％)。

步骤2. 1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。在0℃下向(E)-N'-(4-溴苯亚甲基)-4-甲基苯磺酰肼(30.00g，84.93mmol)在二氯甲烷(500mL)中的溶液中添加氢化钠(8.49g，0.21mol，60％)。搅拌混合物1h。随后缓慢添加4-亚甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(20.11g，0.10mol)并且搅拌15分钟，随后添加三氟甲烷磺酸银(5.46g，21.233mmol)。在40℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物过夜。在0℃下通过饱和氯化铵(200mL)淬灭反应物。有机层用盐水(200mL×3)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱用石油醚/乙酸乙酯(10:1)洗脱来纯化粗产物，得到呈白色固体状的1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(14g，43％)。

步骤3.(S)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯和(R)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(10g，27.25mmol)通过在以下条件下的Prep-SFC纯化：柱：CHIRALPAK AD-3 3×100mm，3μm；流动相：EtOH(20mM NH

(S)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯:

(R)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯:

制备共同中间体(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮并且手性分离成单一对映异构体。

步骤1. 1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷硫酸盐。在50℃下将1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(30.00g，81.90mmol)和硫酸(12mL)在四氢呋喃(120mL)中的溶液搅拌1h。将混合物冷却至室温并且搅拌2h。通过过滤收集沉淀固体并且用四氢呋喃(3×20mL)洗涤，在减压下干燥，得到呈白色固体状的1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷硫酸盐(29.1g，97％)。LCMS(ES,m/z):266,268[M+H]

步骤2. 1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷。在室温下向1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷硫酸盐(29.1g，79.95mol)在叔丁基甲基醚(300mL)中的溶液中添加氢氧化钠(128mL，0.32mol，2.5M)。在室温下搅拌混合物2h。有机层经硫酸镁干燥，过滤并且浓缩，得到呈无色油状的1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷(21.1g，99％)。LCMS(ES,m/z):266,268[M+H]

步骤3.(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮。在室温下将(R)-四氢呋喃-2-羧酸(13.85g，119.43mmol)、1-羟基苯并三唑(12.90g，95.54mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(18.34g，95.54mmol)和1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷(21.1g，79.62mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(150mL)中的混合物搅拌2h。通过添加冰水(300mL)淬灭反应物。用乙酸乙酯(3×300mL)萃取所得混合物。合并有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且在真空下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:2)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(28g，95％)。

步骤4.((S)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮和((R)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮。(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(200mg，0.55mmol)通过在以下条件下的Chiral HPLC(Agela High-pressure Flash)纯化：柱：CHIRALPAK IG，20×250mm，5μm；流动相：正己烷和异丙醇(在20分钟内保持40％异丙醇)；检测器：UV 254nm，得到第一洗脱峰((S)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(64.9mg，32.13％)和第二洗脱峰(R)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(73.5mg，36％)，其呈黄色油状。

((S)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮:

((R)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮:

制备共同中间体((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮。

在90℃下在氮气气氛下将(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(12.00g，32.94mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(15.06g，59.30mmol)、乙酸钾(9.70g，98.84mmol)和1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(2.69g，3.29mmol)在二噁烷(60mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温。在真空下浓缩所得混合物。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈白色固体状的((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(120g，84％)。LCMS(ES,m/z):412[M+H]

制备共同中间体1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸6-苯甲酯1-叔丁酯。

步骤1 2-(4-溴苯基)-2-重氮乙酸叔丁酯。将DBU(0.903ml，5.99mmol)逐滴添加到4-甲基苯磺酰基叠氮化物(8.59g，4.79mmol，11％在甲苯中)和2-(4-溴苯基)乙酸叔丁酯(0.971g，3.99mmol)在乙腈(20mL)中的溶液中。在室温下搅拌混合物2天。在真空下浓缩反应物，并且通过正相柱层析使用Biotage(柱：50g KP-SIL，用0至10％己烷/乙酸乙酯洗脱)纯化残余物，得到呈黄色固体状的2-(4-溴苯基)-2-重氮乙酸乙酯(1.02g，92％)。

步骤2. 1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸6-苯甲酯1-乙酯。通过注射泵(0.1mL/min的添加速率)将2-(4-溴苯基)-2-重氮乙酸叔丁酯(0.538g，2mmol)添加到乙酸铑(II)二聚体(0.027g，0.060mmol)和4-亚甲基哌啶-1-羧酸苯甲酯(0.555g，2.400mmol)在二氯甲烷(10mL1)中的回流溶液中。在回流下搅拌反应混合物过夜。将反应物冷却至室温并且在真空下浓缩。直接通过正相柱层析使用Biotage(柱：25g KP-SIL，用5％至40％己烷/乙酸乙酯洗脱)来纯化残余物，得到呈黄色油状的1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸6-苯甲酯1-叔丁酯(0.584g，62％)。

制备共同中间体(1S)-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷

步骤1.(E)-N'-(4-溴苯亚甲基)-4-甲基苯磺酰肼。在室温下将4-溴苯甲醛(50.00g，0.27mol)和4-甲基苯-1-磺酰肼(50.5g，0.27mol)在甲醇(200mL)中的溶液搅拌1小时。通过过滤收集固体，用甲醇(100mL×3)洗涤并且在减压下干燥，得到呈白色固体状的(E)-N'-(4-溴苯亚甲基)-4-甲基苯磺酰肼(90g，94％)。LCMS(ES,m/z):353,355[M+H]

步骤2.(S)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯和(R)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。在0℃下向(E)-N'-(4-溴苯亚甲基)-4-甲基苯磺酰肼(30.0g，84.9mmol)在二氯甲烷(500mL)中的溶液中逐份添加氢化钠(8.49g，0.21mol，60％)。搅拌混合物1小时。随后缓慢添加4-亚甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(20.11g，0.10mol)并且搅拌混合物15分钟。随后添加三氟甲磺酸银(5.46g，21.2mmol)，并且在40℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物过夜。通过在0℃下添加氯化铵饱和水溶液(200mL)来淬灭反应物。分离有机层并且用盐水(200mL×3)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(10:1)洗脱来纯化粗产物，得到呈白色固体状的1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(外消旋体，14g，43％)。(重复反应以产生16个批次，总计200g期望产物)。外消旋产物(200g)通过Anal-SFC(柱，CHIRALPAK AD-3 3×100mm，3μm；流动相，EtOH(20mM NH

(S)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯:

(R)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯:

步骤3.(1S)-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。向(1S)-1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(41.3g，113mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(34.4g，135mmol)在1,4-二噁烷(300mL)中的溶液中添加乙酸钾(22.0g，224mmol)和Pd(dppf)Cl

步骤4.(1S)-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷。在0℃下向(1S)-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(10.0g，21.8mmol)在二氯甲烷(40mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加三氟乙酸(5mL)。在室温下搅拌所得混合物1小时。在0℃下用饱和碳酸氢钠溶液使混合物达到pH 8。所得混合物用二氯甲烷(2×50mL)萃取，并且合并的有机层经无水硫酸钠干燥。在过滤后，在减压下浓缩滤液，得到呈淡黄色固体状的(1S)-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷(7.57g，99％)。LCMS(ES,m/z):314[M+H]+。

实施例2-制备化合物1-716

方法1：制备化合物60和61：2-氯-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸和2-氯-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸

向(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(450mg，1.17mmol)、4-(二羟基硼烷基)-3-甲基苯甲酸(237.06mg，1.29mmol)和水(2mL)在二噁烷(10mL)中的混合物中添加双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(86.80mg，0.12mmol)和磷酸钾(770.42mg，3.52mmol)。在70℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物1h。冷却至室温后，过滤所得混合物并且在减压下浓缩。通过反相柱层析用水(0.1％FA)/ACN(5％至50％，经35分钟)纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：(R,R)Whelk-01，21.1×250mm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和IPA(在30分钟内保持50％IPA)；检测器：UV 254nm，得到为化合物60(82.8mg，31％)的第一洗脱峰和为化合物61(82.4mg，30％)的第二洗脱峰。

化合物60：

化合物61：

方法2：制备化合物62和63：6-氯-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-氯-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸

6-氯-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-氯-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在90℃下在氮气气氛下将(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(300mg，0.74mmol)、5-羧基-2-氯苯基硼酸(200mg，1.1mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(59mg，0.082mmol)和磷酸钾(472mg，2.22mmol)在二噁烷(10mL)和水(3mL)中的混合物搅拌1h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相层析用水(含有10mmol/L NH

化合物62:

化合物63:

方法3：制备化合物82和83：2-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-5-羧酸和2-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-5-羧酸

步骤1.苯并[d]噁唑-5-羧酸叔丁酯。在50℃下将苯并[d]噁唑-5-羧酸(4.0g，22.1mmol)、4-二甲基氨基吡啶(1.5g，12.0mmol)和二碳酸二叔丁酯(8.0g，34.8mmol)在叔丁醇(100mL)中的混合物搅拌过夜。将混合物冷却至室温。所得混合物用水(80mL)稀释并且用己烷(3×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(3:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的苯并[d]噁唑-5-羧酸叔丁酯(900mg，17％)。LCMS(ES,m/z):220[M+H]

步骤2. 2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-5-羧酸叔丁酯。

在110℃下在氮气气氛下将(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(400mg，0.99mmol)、苯并[d]噁唑-5-羧酸叔丁酯(290mg，1.19mmol)、碳酸铯(898mg，2.70mmol)、XantPhos(128mg，0.22mmol)、碘化铜(42mg，0.22mmol)和乙酸钯(26mg，0.054mmol)在甲苯(20mL)中的混合物搅拌过夜。将混合物冷却至室温。过滤所得混合物。用乙酸乙酯(3×10mL)洗涤滤饼。在减压下浓缩滤液。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(2:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-5-羧酸叔丁酯(260mg，47％)。LCMS(ES,m/z):503[M+H]

步骤3. 2-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-5-羧酸和2-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-5-羧酸。在室温下将2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-5-羧酸叔丁酯(260mg，0.47mmol)和三氟乙酸(2mL)在二氯甲烷(6mL)中的溶液搅拌1h。在真空下浓缩所得混合物。将残余物与水(0.1％FA)/ACN(5％至50％，经30分钟)一起施加到反相柱层析上。产物通过Chiral HPLC(柱：CHIRALPAK IA，2.12×15cm，5μm；流动相：A：MTBE(0.1％FA)和B：EtOH(在18分钟内保持50％EtOH)；检测器：UV254nm)分离，得到为呈白色固体状的化合物82(66.9mg，64％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物83(64.2mg，61％)的第二洗脱峰。

化合物82:

化合物83:

方法4：制备化合物58和59：6-甲基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-甲基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸

6-甲基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-甲基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在90℃下在氮气气氛下将(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(450mg，1.24mmol)、1-(4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙-1-酮(386mg，1.48mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(87mg，0.124mmol)、磷酸钾(524mg，2.47mmol)在二噁烷(10mL)和水(2mL)中的混合物搅拌2h。将所得混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相柱层析用水(含有10mmol/L NH

化合物58:

化合物59:

方法5：制备化合物78和79：5-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)噻吩-2-羧酸和5-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)噻吩-2-羧酸。

在90℃下在氮气气氛下将(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(400mg，1.10mmol)、5-硼噻吩-2-羧酸(227mg，1.32mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(77.8mg，0.11mmol)、磷酸钾(466mg，2.20mmol)在二噁烷(10mL)和水(2mL)中的混合物搅拌2h。将所得混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相柱层析用水(含有10mmol/L NH

化合物78:1H-NMR(d6-DMSO,400MHz)δ(ppm):13.14(br,1H),7.69(d,J＝4.0Hz,1H),7.65(d,J＝4.0Hz,2H),7.54(d,J＝8.0Hz,1H),7.33(d,J＝7.6Hz,2H),4.80-4.45(m,1H),3.88-3.62(m,2H),3.62-3.48(m,2H),3.48-3.38(m,1H),3.22-3.00(m,1H),2.19-2.08(m,1H),2.08-1.91(m,2H),1.89-1.67(m,2H),1.66-1.30(m,2H),1.29-0.97(m,3H),0.96-0.80(m,1H).LCMS(ES,m/z):412[M+H]

化合物79:1H-NMR(d6-DMSO,400MHz)δ(ppm):13.12(br,1H),7.69(d,J＝3.6Hz,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,2H),7.55(d,J＝3.6Hz,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,2H),4.76-4.46(m,1H),3.89-3.67(m,2H),3.65-3.45(m,2H),3.44-3.35(m,1H),3.20-3.00(m,1H),2.18-2.09(m,1H),2.08-1.89(m,2H),1.88-1.68(m,2H),1.62-1.35(m,2H),1.34-1.02(m,3H),1.00-0.75(m,1H).LCMS(ES,m/z):412[M+H]

方法6：制备化合物214和215：1-甲基-2-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-6-羧酸和1-甲基-2-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-6-羧酸。

步骤1. 2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-1,6-二羧酸1-叔丁酯6-甲酯。在90℃下在氮气气氛下将(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(1.0g，2.75mmol)、(1-(叔丁氧羰基)-6-(甲氧羰基)-1H-吲哚-2-基)硼酸(876mg，2.75mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(194mg，0.28mmol)和磷酸钾(1.17g，5.49mmol)在二噁烷(20mL)和水(4mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(含有10mmol/LNH

步骤2. 2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯。在室温下将2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-1,6-二羧酸1-叔丁酯6-甲酯(550mg，0.98mmol)在三氟乙酸(3mL)和DCM(10mL)中的溶液搅拌40分钟。在减压下浓缩所得混合物，得到呈黄色油状的2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(400mg，粗产物)。LCMS(ES,m/z):459[M+H]

步骤3. 1-甲基-2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯。在0℃下将2-(4-[6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(500mg，1.09mmol)和氢化钠(131mg，3.27mmol，60％)在二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物搅拌30分钟。随后添加碘甲烷(170mg，1.20mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。反应混合物用水(50mL)淬灭并且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(3:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的1-甲基-2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(400mg，74％)。LCMS(ES,m/z):473[M+H]

步骤4. 1-甲基-2-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-6-羧酸和1-甲基-2-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-6-羧酸。在40℃下将1-甲基-2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(350mg，0.74mmol)和氢氧化锂(53mg，2.22mmol)在甲醇(15mL)中的溶液搅拌2h。将混合物冷却至室温。用盐酸(1M)将混合物酸化至pH 5。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取所得混合物。合并有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用二氯甲烷/甲醇(10:1)洗脱来纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IG，2×25cm，5μm；流动相：MTBE(0.1％FA)和EtOH(15分钟内保持30％EtOH)；检测器：UV 254，得到为呈灰白色固体状的化合物214(92.5mg，27％)的第一洗脱峰和为呈灰白色固体状的化合物215(100.6mg，29％)的第二洗脱峰。

化合物214:

化合物215:

方法7：制备化合物166和167：2-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和2-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

2-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和2-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在90℃下在氮气气氛下将(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(600mg，1.657mmol)、3-(二羟基硼烷基)-2-甲氧基苯甲酸(323mg，1.65mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(117mg，0.17mmol)和磷酸钾(699mmol，3.29mmol)在二噁烷(20ml)和水(4mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(含有0.1％FA)和ACN(10％至50％，经25分钟)纯化残余物。产物通过在以下条件下的Prep-SFC分离：柱：CHIRALPAK AS-H，2.0cm×25cm L(5μm)；流动相：CO

化合物166:

化合物167:

方法8：制备化合物70和71：4-氯-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和4-氯-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

4-氯-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和4-氯-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在90℃下在氮气气氛下将(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(450mg，1.17mmol)、5-硼-2-氯苯甲酸(237mg，1.29mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(87mg，0.12mmol)和磷酸钾(770mg，3.52mmol)在二噁烷(20ml)和水(4mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(含有0.1％FA)和ACN(10％至55％，经30分钟)纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：(R,R)Whelk-01，21.1×250mm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和IPA(在30分钟内保持50％IPA)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物70(62.6mg，26％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物71(64mg，27％)的第二洗脱峰。

化合物70:

化合物71:

方法9：制备化合物98和99：2-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)环己-1-基)-3H-1l3-苯并[d]噁唑-6-羧酸和2-{4-[(1R)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}-1,3-苯并噁唑-6-羧酸。

步骤1.苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯。在室温下在氮气气氛下向1,3-苯并噁唑-6-羧酸(5g，30.0mmol)和4-二甲基氨基吡啶(1.83g，15.02mmol)在叔丁醇(50mL)中的混合物中添加二碳酸二叔丁酯(13.1g，60.07mmol)。在50℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物过夜。用水(100mL)稀释所得混合物。用乙酸乙酯(3x100 mL)萃取混合物。合并有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(10:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯(3.8g，55％)。LCMS(ES,m/z):220[M+H]

步骤2. 2-(4-[6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基)-1,3-苯并噁唑-6-羧酸叔丁酯。在110℃下在氮气气氛下将苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯(250mg，1.08mmol)、(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(483mg，1.30mmol)、碘化铜(42mg，0.22mmol)、XantPhos(126mg，0.22mmol)、碳酸铯(891mg，2.70mmol)和乙酸钯(12mg，0.054mmol)在甲苯(10mL)中的混合物搅拌过夜。在减压下浓缩所得混合物。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯(170mg，30％)。LCMS(ES,m/z):503[M+H]

步骤3. 2-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)环己-1-基)-3H-1l3-苯并[d]噁唑-6-羧酸和2-{4-[(1R)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}-1,3-苯并噁唑-6-羧酸。在室温下将2-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯(170mg，0.29mmol)和三氟乙酸(3mL)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌1h。将混合物在减压下进行。通过反相快速层析用水(含有0.1％FA)和ACN(10％至45％，经35分钟)纯化残余物。产物通过Chiral HPLC(柱：(R,R)Whelk-01，21.1×250mm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和IPA(在30分钟内保持50％IPA)；检测器：UV 254nm)分离，得到为呈白色固体状的化合物98(53mg，44％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物99(58.7mg，48％)的第二洗脱峰。

化合物98:

化合物99:

方法10：制备化合物68和69：6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

在90℃下在氮气气氛下将(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(450mg，1.24mmol)、4-甲氧基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酸(409mg，1.48mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(87mg，0.12mmol)和磷酸钾(770mg，3.52mmol)在二噁烷(15mL)和水(3ml)中的混合物搅拌2h。将所得混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(含有0.1％FA)和ACN(10％至55％，经30分钟)纯化残余物。通过在以下条件下的Chiral HPLC分离产物：柱：CHIRALPAK IC，2×25cm，5μm；流动相：(己烷:DCM＝3:1)(0.1％FA)和IPA(在25分钟内保持50％IPA)；检测器：UV 254nm，得到为化合物68(68.9mg，13％)的第一洗脱峰和为化合物69(95.7mg，17％)的第二洗脱峰，其呈白色固体状。

化合物68:

化合物69:

方法11：制备化合物164和165：5-氟-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和5-氟-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

5-氟-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和5-氟-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在80℃下在氮气气氛下将(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮(500mg，1.37mmol)、3-(二羟基硼烷基)-5-氟苯甲酸(379mg，2.06mmol)、磷酸钾(583mg，2.75mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(97.2mg，0.14mmol)在1,4-二噁烷(15.00mL)和水(3.00mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过Prep-HPLC用水(含有0.1％FA)和ACN(35％至65％，经7分钟)纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IC，2×25cm，5μm；流动相：己烷(含有0.1％甲酸)和2-丙醇(在16分钟内保持50％2-丙醇)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物164(129mg，33％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物165(116.7mg，31％)的第二洗脱峰。

化合物164:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):13.42(br,1H),8.03(s,1H),7.86-7.79(m,1H),7.72-7.59(m,3H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),4.76-4.51(m,1H),3.81-3.52(m,4H),3.25-3.14(m,2H),2.15-1.88(m,3H),1.87-1.67(m,2H),1.59-1.47(m,2H),1.28-1.03(m,3H),0.94-0.88(m,1H).LCMS(ES,m/z):424[M+H]

化合物165:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):13.40(br,1H),8.03(s,1H),7.86-7.78(m,1H),7.73-7.58(m,3H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),4.75-4.51(m,1H),3.80-3.55(m,4H),3.27-3.10(m,2H),2.14-1.90(m,3H),1.87-1.69(m,2H),1.63-1.47(m,2H),1.25-1.06(m,3H),0.93-0.88(m,1H).LCMS(ES,m/z):424[M+H]

方法12：制备化合物150和151：4-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和4-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸

4-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和4-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在70℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(800mg，1.95mmol)、5-溴-2-甲氧基苯甲酸(447.7mg，1.95mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(137.81mg，0.195mmol)、磷酸钾(825mg，3.90mmol)和水(2mL)在二噁烷(10mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相柱层析用水(0.1％FA)/ACN(5％至55％，经30分钟)纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IE，2×25cm，5μm；流动相：(己烷和DCM 3:1)(0.1％FA)和EtOH(在9分钟内保持3％EtOH)，得到为呈白色固体状的化合物150(150mg，15％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物151(150.2mg，13％)的第二洗脱峰。

化合物150:

化合物151:

方法13：制备化合物152和153：2-甲基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和2-甲基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

2-甲基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和2-甲基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在70℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(800mg，1.95mmol)、3-溴-2-甲基苯甲酸(408.22mg，1.95mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(137.71mg，0.20mmol)、磷酸钾(825.64mg，3.90mmol)和水(2mL)在二噁烷(10mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相柱层析用水(0.1％FA)/ACN(5％至55％，经35分钟)纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IE，2×25cm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和EtOH(在23分钟内保持50％EtOH)，得到为呈白色固体状的化合物152(141.9mg，18％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物153(141.5mg，18％)的第二洗脱峰。

化合物152:

化合物153:

方法14：制备化合物128和129：7-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-4-羧酸和(R)-7-(4-(6-(环戊烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-4-羧酸。

7-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-4-羧酸和(R)-7-(4-(6-(环戊烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-4-羧酸。在100℃下在氮气气氛下将7-溴喹啉-4-羧酸(300mg，1.14mmol)、((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(982mg，2.15mmol)、碳酸钠(390mg，3.61mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(180mg，0.24mmol)在二噁烷(15mL)和水(3ml)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相柱层析在以下条件下纯化粗产物：水(含有10M NH

化合物128:

化合物129:

方法15：制备化合物156和157：6-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1-萘甲酸和6-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1-萘甲酸。

步骤1. 6-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1-萘甲酸甲酯。在70℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(332mg，0.81mmol)、6-溴萘-1-羧酸甲酯(1.06g，4.00mmol)、磷酸钾(0.80g，3.75mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(172.1mg，0.25mmol)在二噁烷(20mL)和水(4mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过硅胶层析(用1:1乙酸乙酯/石油醚洗脱)纯化残余物，得到呈白色固体状的6-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1-萘甲酸甲酯(194mg，49％)。LCMS:(ES,m/z):470[M+H]

步骤2. 6-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1-萘甲酸和6-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1-萘甲酸。在25℃下将6-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1-萘甲酸甲酯(194.0mg，0.38mmol)和氢氧化锂(49.8mg，2.00mmol)在四氢呋喃(10mL)和水(5mL)中的混合物搅拌16h。在真空下浓缩所得混合物。通过反相柱层析在以下条件下纯化粗产物：水(含有10M NH

化合物156:

化合物157:

方法16：制备化合物74和75：1-甲基-6-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲唑-3-羧酸和1-甲基-6-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲唑-3-羧酸。

1-甲基-6-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲唑-3-羧酸和1-甲基-6-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲唑-3-羧酸。在70℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(280mg，0.65mmol)、6-溴-1-甲基-1H-吲唑-3-羧酸(260mg，0.97mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(46mg，0.065mmol)和磷酸钾(411.3mg，1.94mmol)在二噁烷(12mL)和水(3mL)中的溶液搅拌1h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离(柱：CHIRALPAK IG，2×25cm，5μm；流动相A：MTBE(0.1％FA)、流动相B：EtOH(在5.5分钟内保持20％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物74(74.5mg，24％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物75(74.8mg，24％)的第二洗脱峰。

化合物74:

化合物75:

方法17：制备化合物160和161：5-甲基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和5-甲基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

5-甲基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和5-甲基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在70℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(800mg，2.31mmol)、3-溴-5-甲基苯甲酸(360mg，1.59mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(113mg，0.16mmol)和磷酸钾(844mg，3.98mmol)在二噁烷(15mL)和水(5mL)中的溶液搅拌1h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相柱层析在以下条件下纯化残余物：水(含有0.1％FA)/ACN(0％至40％，经20分钟)。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：(柱：CHIRALPAK AS-H(03)，2×25cm(5μm)；流动相A：CO

化合物160:

化合物161:

方法18：制备化合物88和89：6-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲唑-3-羧酸和6-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲唑-3-羧酸

6-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲唑-3-羧酸和6-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)-1H-吲唑-3-羧酸。在90℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(400mg，0.88mmol)、6-溴-1H-吲唑-3-羧酸(258mg，1.05mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(62mg，0.088mmol)、磷酸钾(558mg，2.63mmol)在二噁烷(10mL)和水(3mL)中的混合物搅拌过夜。将所得混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相层析在以下条件下纯化残余物：水(含有0.05％TFA)/ACN(0％至40％，经25分钟)。通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化产物：柱：CHIRALPAK IG，2×25cm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和EtOH(在10分钟内保持50％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为呈灰白色固体状的化合物88(11.4mg，3％)的第一洗脱峰和为呈灰白色固体状的化合物89(20mg，5％)的第二洗脱峰。

化合物88:

化合物89:

方法19：制备化合物220和221：6-氟-5-甲基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-氟-5-甲基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 3-溴-4-氟-5-甲基苯甲酸。在-78℃下在氮气气氛下向2,2,6,6-四甲基哌啶(4.65g，32.9mmol)在四氢呋喃(15mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加正丁基锂(2.11g，32.9mmol)。在-60℃下搅拌混合物30分钟。随后在-78℃下逐滴添加3-溴-4-氟苯甲酸(3.28g，14.98mmol)和碘甲烷(3.75mL，60.2mmol)。在室温下搅拌所得混合物过夜。用饱和氯化铵(50mL)淬灭反应物。用乙酸乙酯(2×50mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过在以下条件下的Prep-HPLC纯化粗产物：水(含有0.1％FA)和ACN(5％至50％，经30分钟)，得到呈白色固体状的3-溴-4-氟-5-甲基苯甲酸(1.3g，34％)。LCMS(ES,m/z):232,234[M+H]

步骤2. 6-氟-5-甲基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-氟-5-甲基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在90℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(514mg，1.25mmol)、3-溴-4-氟-5-甲基苯甲酸(349mg，1.50mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(88.5mg，0.125mmol)、磷酸钾(530mg，2.50mmol)在二噁烷(10mL)和水(3mL)中的混合物搅拌过夜。将所得混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相层析在以下条件下纯化残余物：水(含有0.05％TFA)和ACN(0％至45％，经35分钟)。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化：柱：CHIRALPAK IC，2×25cm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和EtOH(在16分钟内保持50％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为化合物220(141.2mg，25％)的第一洗脱峰和为化合物221(150.5mg，27％)的第二洗脱峰，其呈白色固体状。

化合物220:

化合物221:

方法20：制备化合物192和193：4-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)吡啶甲酸和4-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)吡啶甲酸。

4-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)吡啶甲酸和4-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)吡啶甲酸。

在90℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(700mg，1.70mmol)、4-溴吡啶-2-甲酸(344mg，1.70mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(120mg，0.17mmol)、磷酸钾(722mg，3.70mmol)和水(2mL)在二噁烷(10mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：水(0.1％FA)/ACN(在15分钟内30％至70％)。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化：柱：CHIRALPAK IG-3，0.46×5cm，3μm；流动相：MTBE(0.1％FA)和EtOH(在21分钟内保持30％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物192(101.0mg，15％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物193(100.5mg，15％)的第二洗脱峰。

化合物192:

化合物193:

方法21：制备化合物198和199：((S)-1-(2'-甲基-4'-(1H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮和((R)-1-(2'-甲基-4'-(1H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮。

步骤1. 2-甲基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-甲腈。在90℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(826mg，2.01mmol)、4-溴-3-甲基苯甲腈(394mg，2.01mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(142mg，0.20mmol)、磷酸钾(852mg，4.02mmol)和水(2mL)在二噁烷(10mL)中的溶液搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的2-甲基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-甲腈(600mg，75％)。LCMS(ES,m/z):401[M+H]

步骤2.((S)-1-(2'-甲基-4'-(1H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮和((R)-1-(2'-甲基-4'-(1H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮。在90℃下在氮气气氛下将2-甲基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-甲腈(600mg，1.50mmol)、叠氮化钠(292mg，4.50mmol)、水(4mL)和碘化锌(717.30mg，2.25mmol)在叔丁醇(8mL)中的混合物搅拌20h。将混合物冷却至室温。用饱和碳酸氢钠(30mL)淬灭反应物。通过过滤收集固体。通过硅胶柱层析用二氯甲烷/甲醇(10:1)洗脱来纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化：柱：CHIRALPAK IG，20×250mm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和EtOH(在22分钟内保持30％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物198(57.7mg，8％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物199(85.2mg，12％)的第二洗脱峰。

化合物198:

化合物199:

方法22：制备化合物200和201：((S)-1-(2'-甲基-5'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮和((R)-1-(2'-甲基-5'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮。

步骤1. 6-甲基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-甲腈。在90℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(826mg，2.01mmol)、3-溴-4-甲基苯甲腈(394mg，2.09mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(142mg，0.20mmol)、磷酸钾(852mg，4.02mmol)和水(2mL)在二噁烷(10mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的6-甲基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-甲腈(636mg，80％)。LCMS(ES,m/z):401[M+H]

步骤2.((S)-1-(2'-甲基-5'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮和((R)-1-(2'-甲基-5'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮。在90℃下在氮气气氛下将6-甲基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-甲腈(636mg，1.59mmol)、叠氮化钠(309mg，4.76mmol)、水(4mL)和碘化锌(760mg，2.38mmol)在叔丁醇(8mL)中的混合物搅拌20h。将混合物冷却至室温。用饱和碳酸氢钠(30mL)淬灭反应物。通过过滤收集固体。通过硅胶柱层析用二氯甲烷/甲醇(10:1)洗脱来纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化：柱：CHIRALPAK AS-3，3×100mm，3um；流动相：MeOH(20mM NH3)(在4.0分钟内10％至50％，在50％下保持2.0分钟)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物200(101.0mg，14％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物201(95.5mg，14％)的第二洗脱峰。

化合物200:

化合物201:

方法23：制备化合物84和85：7-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-3-羧酸和7-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-3-羧酸

7-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-3-羧酸和7-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-3-羧酸。在90℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(500mg，1.22mmol)和7-溴喹啉-3-羧酸(306mg，1.22mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(86mg，0.12mmol)、磷酸钾(516mg，2.43mmol)和水(3ml)在二噁烷(15mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：水(0.1％FA)/ACN(在25分钟内30％至60％)。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化：柱：CHIRALPAK IG，2×25cm，5μm；流动相：MTBE(0.1％FA)、IPA和DCM(在20分钟内保持30％DCM)；检测器：UV254nm，得到为呈黄色固体状的化合物84(125.7mg，22％)的第一洗脱峰和为呈黄色固体状的化合物85(144.4mg，26％)的第二洗脱峰。

化合物84:

化合物85:

方法24：制备化合物170和171：5-氯-6-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和5-氯-6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 3-溴-5-氯-4-羟基苯甲酸甲酯。在0℃下向3-氯-4-羟基苯甲酸甲酯(5.25g，28.2mmol)在冰醋酸(20mL)和二氯甲烷(20mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加溴(1.6mL，31.27mmol)。在室温下搅拌所得混合物过夜。用水(100mL)淬灭反应物。用二氯甲烷(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(2:1)洗脱来纯化粗产物，得到呈黄色油状的3-溴-5-氯-4-羟基苯甲酸甲酯(7.2g，87％)。LCMS(ES,m/z):265,267[M+H]

步骤2. 3-溴-5-氯-4-甲氧基苯甲酸甲酯。在60℃下在氮气气氛下将3-溴-5-氯-4-羟基苯甲酸甲酯(6.7g，25.2mmol)、碳酸钾(10.5g，75.7mmol)、碘甲烷(2.4mL，16.6mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的混合物搅拌2h。将反应物冷却至室温并且通过水(100mL)淬灭。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取混合物。合并的有机层用盐水(3×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(4:1)洗脱来纯化粗产物，得到呈黄色油状的3-溴-5-氯-4-甲氧基苯甲酸甲酯(7g，89％)。LCMS(ES,m/z):279,281[M+H]

步骤3 5-氯-6-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯。在90℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(514mg，1.25mmol)、3-溴-5-氯-4-甲氧基苯甲酸甲酯(419mg，1.50mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(88.5mg，0.125mmol)和磷酸钾(530mg，2.50mmol)在二噁烷(10mL)和水(3mL)中的混合物搅拌2h。将所得混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(5:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的5-氯-6-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯(450mg，67％)。LCMS(ES,m/z):484[M+H]

步骤4. 5-氯-6-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和5-氯-6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在室温下将5-氯-6-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯(450mg，0.93mmol)、氢氧化锂(89mg，3.72mmol)、水(2mL)和甲醇(2mL)在四氢呋喃(6mL)中的混合物搅拌2h。用盐酸(1M)将混合物酸化至pH 6。用乙酸乙酯(3×30mL)萃取混合物。合并有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且在真空下浓缩。通过反相柱层析用水(含有10mmol/L NH

化合物170:

化合物171:

方法25：制备化合物172和173：5-氟-6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和5-氟-6-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 3-溴-5-氟-4-羟基苯甲酸甲酯。在0℃下向3-氟-4-羟基苯甲酸甲酯(2.4g，14.11mmol)在冰醋酸(20mL)和二氯甲烷(10mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加溴(0.8mL，15.61mmol)。在室温下搅拌所得混合物过夜。用水(100mL)淬灭反应物。用二氯甲烷(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(2:1)洗脱来纯化粗产物，得到呈黄色油状的3-溴-5-氟-4-羟基苯甲酸甲酯(3.7g，90％)。LCMS(ES,m/z):249,251[M+H]

步骤2. 3-溴-5-氟-4-甲氧基苯甲酸甲酯。在60℃下在氮气气氛下将3-溴-5-氟-4-羟基苯甲酸甲酯(3.7g，14.86mmol)、碳酸钾(6.2g，44.57mmol)、碘甲烷(3.2g，22.26mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中的混合物搅拌2h。将反应物冷却至室温并且通过水(100mL)淬灭。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取混合物。合并的有机层用盐水(3×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(4:1)洗脱来纯化粗产物，得到呈黄色油状的3-溴-5-氯-4-甲氧基苯甲酸甲酯(2.7g，59％)。LCMS(ES,m/z):263,265[M+H]

步骤3. 5-氟-6-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯。在90℃下在氮气气氛下将6((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(720mg，1.75mmol)、3-溴-5-氟-4-甲氧基苯甲酸甲酯(553mg，2.10mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(124mg，0.18mmol)和磷酸钾(743mg，3.50mmol)在二噁烷(15mL)和水(5mL)中的混合物搅拌2h。将所得混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(3:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的5-氟-6-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯(580mg，64％)。LCMS(ES,m/z):468[M+H]

步骤4. 5-氟-6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和5-氟-6-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在室温下将5-氟-6-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯(580mg，1.24mmol)、氢氧化锂(119mg，4.96mmol)、水(2mL)和甲醇(2mL)在四氢呋喃(6mL)中的混合物搅拌2h。用盐酸(1M)将混合物酸化至pH 6。用乙酸乙酯(3×30mL)萃取混合物。合并有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且在真空下浓缩。通过反相柱层析用水(含有10mmol/L NH

化合物172:

化合物173:

方法26：制备化合物216和217：4-羟基-6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和4-羟基-6-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

4-羟基-6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和4-羟基-6-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在90℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(500mg，1.22mmol)、5-溴-2-羟基-4-甲氧基苯甲酸(300mg，1.22mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(86mg，0.12mmol)和磷酸钾(516mg，2.43mmol)在二噁烷(15mL)和水(5mL)中的混合物搅拌2h。将所得混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：水(0.1％FA)/ACN(在25分钟内30％至60％)。通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化产物：柱：CHIRALPAK IG，2×25cm、5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和EtOH(在23分钟内保持30％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物216(89mg，16％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物217(98.5mg，18％)的第二洗脱峰。

化合物216:

化合物217:

方法27：制备化合物174和175：4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-(三氟甲氧基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-(三氟甲氧基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-(三氟甲氧基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-(三氟甲氧基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在90℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(600mg，1.46mmol)、3-溴-4-(三氟甲氧基)苯甲酸(416mg，1.46mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(103mg，0.15mmol)和磷酸钾(619mg，2.92mmol)在二噁烷(15mL)和水(5mL)中的混合物搅拌2h。将所得混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：水(0.1％FA)/ACN(在30分钟内10％至50％)。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化：柱：CHIRALPAK AS-H，2.0cm×25cm(5μm)；流动相：CO2和MeOH(0.1％FA)(在4.0分钟内10％至50％，在50％下保持2.0分钟)；检测器：UV 254nm，得到为化合物174(141.6mg，20％)的第一洗脱峰和为化合物175(157.7mg，22％)的第二洗脱峰。

化合物174:

化合物175:

方法28：制备化合物190和191：6-(二氟甲基)-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-(二氟甲基)-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

6-(二氟甲基)-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-(二氟甲基)-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在90℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(600mg，1.46mmol)、3-溴-4-(二氟甲基)苯甲酸(366mg，1.46mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(103mg，0.15mmol)和磷酸钾(619mg，2.92mmol)在二噁烷(15mL)和水(5mL)中的混合物搅拌2h。将所得混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：水(0.1％FA)/ACN(在35分钟内10％至55％)。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化：柱：CHIRALPAK IG，20×250mm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和EtOH(在14分钟内保持40％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为呈灰白色固体状的化合物190(100mg，15％)的第一洗脱峰和为呈灰白色固体状的化合物191(77mg，11％)的第二洗脱峰。

化合物190:

化合物191:

方法28：制备162和163：5-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和5-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

5-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和5-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在90℃在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(500mg，1.09mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(110mg，0.124mmol)、磷酸钾(900mg，4.03mmol)和3-溴-5-甲氧基苯甲酸(450mg，1.85mmol)在二噁烷(10mL)和水(3mL)中的溶液搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过反相快速层析用水(含有0.1％碳酸氢铵)和乙腈(5％至40％，经60分钟)纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK AS-3(3×100mm，3μm)；流动相：A，CO

化合物162:

化合物163:

方法29：制备化合物224和225：6-氟-5-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-氟-5-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 3-溴-4-氟-5-碘苯甲酸。在0℃下向3-溴-4-氟苯甲酸(5g，22.8mmol)在硫酸(150mL)中的经搅拌溶液中逐份添加N-碘代琥珀酰亚胺(5.34g，23.74mmol)。在室温下搅拌所得混合物2h。在0℃下用冰水(200mL)淬灭反应物。通过过滤收集沉淀固体并且用水洗涤，得到呈粉红色固体状的3-溴-4-氟-5-碘苯甲酸(8g，粗产物)，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤中。LCMS:(ES,m/z):345,347[M+H]

步骤2. 3-溴-4-氟-5-羟基苯甲酸。在100℃下将3-溴-4-氟-5-碘苯甲酸(500mg，1.45mmol)、氧化铜(25mg，0.18mmol)和氢氧化钠(300mg，7.49mmol)在水(5mL)中的混合物搅拌16h。将混合物冷却至室温。过滤所得混合物，并且用盐酸(5M)将滤液酸化至pH 5。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在真空下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈粉红色固体状的3-溴-4-氟-5-羟基苯甲酸(250mg，73％)。LCMS:(ES,m/z):235,237[M+H]

步骤3. 3-溴-4-氟-5-甲氧基苯甲酸甲酯。在60℃下在氮气气氛下将3-溴-4-氟-5-羟基苯甲酸(500mg，1.70mmol)、碳酸钾(1.17g，8.04mmol)和碘甲烷(724mg，4.85mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且用水(30mL)稀释。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用PE/EtOAc(4:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的3-溴-4-氟-5-甲氧基苯甲酸甲酯(280mg，58％)。LCMS:(ES,m/z):263,265[M+H]

步骤4. 6-氟-5-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯。在80℃下在氮气气氛下将3-溴-4-氟-5-甲氧基苯甲酸甲酯(290mg，0.88mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(78mg，0.094mmol)、磷酸钾(704mg，3.15mmol)和((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(500mg，0.97mmol)在二噁烷(8mL)和水(2mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且浓缩。通过硅胶柱层析用PE/EtOAc(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈白色固体状的6-氟-5-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯(400mg，78％)。LCMS:(ES,m/z):468[M+H]

步骤5. 6-氟-5-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-氟-5-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在室温下将6-氟-5-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯(390mg，0.67mmol)、氢氧化锂(62mg，2.20mmol)在四氢呋喃(6mL)、水(3mL)和甲醇(3mL)中的混合物搅拌2h。在真空下浓缩所得混合物。通过反相快速层析用水(含有0.1％FA)和乙腈(10％至60％，经40分钟)纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：Chiralart纤维素-SB(0.46×10cm，3μm)；流动相：A，己烷(0.1％FA)和B，EtOH(在10分钟内保持50％EtOH)；检测器：UV 254，得到为呈白色固体状的化合物224(106.5mg，33％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物225(105.4mg，33％)的第二洗脱峰。

化合物224:

化合物225:

方法30：制备化合物56和57：3-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-8-羧酸和3-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-8-羧酸

3-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-8-羧酸和

3-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-8-羧酸。

在80℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(680mg，1.65mmol)和3-溴喹啉-8-羧酸(500mg，1.98mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(117mg，0.17mmol)和磷酸钾(702mg，3.31mmol)在二噁烷(10mL)和水(2mL)中的混合物搅拌2h。用EtOAc(2×20mL)萃取所得混合物。将混合物冷却至室温并且浓缩。通过Prep-HPLC用水(0.1％FA)和ACN(在20分钟内40％至最多55％)纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IG，20×250mm，5μm；流动相：MTBE(0.1％FA)和EtOH(在30分钟内保持50％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为化合物56(66mg，7％)的第一洗脱峰和为化合物57(61.9mg，7％)的第二洗脱峰，其呈白色固体状。

化合物56:

化合物57:

方法31：制备化合物222和223：6-氯-5-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-氯-5-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 4-氯-3,5-二碘苯甲酸。在室温下在氮气气氛下将碘(6.20g，24.41mmol)、三氧代铬(2.44g，24.40mmol)在硫酸(150mL)中的混合物搅拌30分钟。向以上混合物中添加4-氯苯甲酸(3.00g，18.78mmol)。在室温下搅拌所得混合物过夜，并且随后用水(200mL)稀释。通过过滤收集沉淀固体并且用水(3×50mL)洗涤，得到呈白色固体状的4-氯-3,5-二碘苯甲酸(5g，62％)。粗产物不经进一步纯化即直接用于下一步骤中。LCMS(ES,m/z):409[M+H]

步骤2. 4-氯-3-羟基-5-碘苯甲酸。在室温下向4-氯-3,5-二碘苯甲酸(5.0g，11.61mmol)和氧化铜(0.21g，1.40mmol)在水(50mL)中的经搅拌混合物中添加氢氧化钠(2.8g，69.82mmol)。在80℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物2h。用盐酸(2M)将混合物酸化至pH 6。将混合物用二氯甲烷(3×50mL)萃取。有机层用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化粗产物，得到呈黄色固体状的4-氯-3-羟基-5-碘苯甲酸(3.1g，42％)。LCMS(ES,m/z):299[M+H]

步骤3. 4-氯-3-碘-5-甲氧基苯甲酸甲酯。在90℃下在氮气气氛下将4-氯-3-羟基-5-碘苯甲酸(1.00g，3.28mmol)、碳酸钾(1.93g，13.17mmol)和碘甲烷(1.47g，9.85mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物搅拌1h。用水(50mL)稀释所得混合物。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取水层。在减压下浓缩所得混合物。合并有机层，用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(5:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的4-氯-3-碘-5-甲氧基苯甲酸甲酯(250mg，22％)。LCMS(ES,m/z):327[M+H]

步骤4. 6-氯-5-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯。在80℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(470mg，1.08mmol)、4-氯-3-碘-5甲氧基苯甲酸甲酯(250mg，0.78mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(108mg，0.15mmol)和磷酸钾(487mg，2.20mmol)在二噁烷(15mL)和水(3mL)中的混合物搅拌1h。在减压下浓缩所得混合物。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的6-氯-5-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯(350mg，63％)。LCMS(ES,m/z):484[M+H]+。

步骤5. 6-氯-5-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-氯-5-甲氧基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在室温下将6-氯-5-甲氧基-4'-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯(200mg，0.37mmol)和氢氧化锂(45mg，1.86mmol)在水(3mL)和四氢呋喃(10mL)中的混合物搅拌2h。在减压下浓缩所得混合物。通过反相快速层析用水(0.1％FA)和ACN(在25分钟内15％至最多55％)纯化残余物。产物通过Chiral HPLC(柱：CHIRAL ART纤维素-SB，2×25cm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和IPA(在30分钟内保持30％IPA)；检测器：UV 254)分离，得到为呈白色固体状的化合物222(42.5mg，48％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物223(34mg，39％)的第二洗脱峰。

化合物222:

化合物223:

方法32：制备化合物212和213：3-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)异喹啉-8-羧酸和3-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)异喹啉-8-羧酸

步骤1.N-[(2-溴苯基)甲基]-2,2-二甲氧基乙酰胺。在80℃下在氮气气氛下将1-(2-溴苯基)甲胺(4g，21.5mmol)和2,2-二甲氧基乙酸甲酯(3.60g，26.8mmol)的混合物搅拌1h。将混合物冷却至室温并且用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的N-[(2-溴苯基)甲基]-2,2-二甲氧基乙酰胺(3g，48％)。LCMS(ES,m/z):288,290[M+H]

步骤2. 8-溴异喹啉-3-醇。在室温下将N-[(2-溴苯基)甲基]-2,2-二甲氧基乙酰胺(3.0g，10.4mmol)在硫酸(6mL)中的混合物搅拌16h。通过添加水/冰(100mL)淬灭反应物。用饱和碳酸钠溶液将混合物碱化至pH 8。通过过滤收集沉淀固体并且用甲醇(2×30mL)洗涤，得到呈黄色固体状的8-溴异喹啉-3-醇(2.0g，粗产物)。LCMS(ES,m/z):224,226[M+H]

步骤3. 3-羟基异喹啉-8-羧酸甲酯。在100℃下在氮气气氛下将8-溴异喹啉-3-醇(1.00g，4.46mmol)、乙酸钯(0.10g，0.45mmol)和1,3-双(二苯基膦基)丙烷(0.37g，0.89mmol)在甲醇(10.00mL)和N,N-二甲基甲酰胺(10.00mL)中的溶液搅拌16h。将所得混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过Prep-HPLC用水(0.1％FA)和ACN(在35分钟内25％至最多55％)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的3-羟基异喹啉-8-羧酸甲酯(500mg，52％)。LCMS(ES,m/z):204[M+H]

步骤4. 3-(三氟甲烷磺酰基氧基)异喹啉-8-羧酸甲酯。在室温下在氮气气氛下将3-羟基异喹啉-8-羧酸甲酯(500mg，2.46mmol)、吡嗪(0.4mL，4.92mmol)和三氟甲磺酸酐(0.62mL，3.69mmol)在二氯甲烷(20.00mL)中的溶液搅拌2h。用饱和氯化铵将混合物酸化至pH 6。用二氯甲烷(3×200mL)萃取所得混合物。合并的有机层经无水硫酸镁干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的3-(三氟甲烷磺酰基氧基)异喹啉-8-羧酸甲酯(480mg，55％)。LCMS(ES,m/z):336[M+H]

步骤5. 3-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)异喹啉-8-羧酸甲酯。在80℃下在氮气气氛下将3-(三氟甲烷磺酰基氧基)异喹啉-8-羧酸甲酯(480mg，1.43mmol)、((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(883mg，2.15mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(101mg，0.14mmol)和磷酸钾(608mg，2.86mmol)在1,4-二噁烷(20.00mL)和水(4.00mL)中的溶液搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:5)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的3-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)异喹啉-8-羧酸甲酯(450mg，64％)。LCMS(ES,m/z):471[M+H]

步骤6. 3-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)异喹啉-8-羧酸和3-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)异喹啉-8-羧酸。在室温下将3-(4-(6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)异喹啉-8-羧酸甲酯(450mg，0.99mmol)和氢氧化锂(69mg，2.87mmol)在四氢呋喃(10mL)和水(3mL)中的混合物搅拌2h。用盐酸(1M)将反应混合物酸化至pH 6。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过Prep-HPLC用水(0.1％FA)和ACN(在7分钟内25％至最多55％)纯化粗产物。产物通过在以下条件下的SFC-Prep-HPLC分离：柱：CHIRALPAK AS-H(03)，2×25cm，5μm；流动相：二氯甲烷(含有0.2％二乙胺)和甲醇(在16分钟内保持50％甲醇)；检测器：UV 254，得到为呈黄色固体状的化合物212(149mg，31％)的第一洗脱峰和为呈黄色固体状的化合物213(148mg，31％)的第二洗脱峰。

化合物212:

化合物213:

方法33：制备化合物168和169：2-氟-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和2-氟-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

2-氟-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和2-氟-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在80℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(1.47g，3.56mmol)、3-溴-2-氟苯甲酸(600mg，2.74mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(194mg，0.27mmol)和磷酸钾(1.16mg，5.48mmol)在1,4-二噁烷(20mL)和水(4mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(0.1％FA)和ACN(在20分钟内30％至50％)纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IG，20×250mm，5μm；流动相：(己烷和DCM 3:1)(0.3％FA)和EtOH(在11分钟内保持50％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为呈灰白色固体状的化合物168(104.5mg，9％)的第一洗脱峰和为呈灰白色固体状的化合物169(129.1mg，11％)的第二洗脱峰。

化合物168:

化合物169:

方法34：制备化合物176和177：4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在100℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(713mg，1.73mmol)、3-溴-4-(三氟甲基)苯甲酸(311mg，1.16mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(82mg，0.12mmol)和磷酸钾(491mg，2.31mmol)在1,4-二噁烷(20mL)和水(4mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(0.1％FA)和ACN(在20分钟内10％至50％)；检测器：UV 254nm纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IG，20×250mm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和EtOH(在17分钟内保持EtOH20％)；检测器：UV 254nm，得到为呈灰色固体状的化合物176(83mg，15％)的第一洗脱峰和为呈灰色固体状的化合物177(52mg，9％)的第二洗脱峰。

化合物176:

化合物177:

方法35：制备化合物120和121：3-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-7-羧酸和3-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-7-羧酸。

3-(4-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-7-羧酸和3-(4-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)喹啉-7-羧酸。在80℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(450mg，1.10mmol)、3-溴喹啉-7-羧酸(689mg，2.74mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(89.3mg，0.11mmol)和磷酸钾(702mg，3.31mmol)在1,4-二噁烷(15mL)和水(3mL)中的溶液搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过Prep-HPLC用水(0.1％FA)和ACN(在10分钟内40.0％至最多60.0％)纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IF，0.46×5cm，3μm；流动相：己烷(含有0.1％甲酸):二氯甲烷(3:1)和甲醇(在15分钟内保持50％甲醇)；检测器：UV 254nm，得到为呈黄色固体状的化合物120(119.2mg，24％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物121(119.3mg，34％)的第二洗脱峰。

化合物120:

化合物121:

方法36：制备化合物218和219：((S)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮和((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮。

步骤1. 1-(3-溴-4-氯-5-甲基苯基)乙-1-酮。向1-(4-氯-3-甲基苯基)乙-1-酮(5g，29.65mmol)和氯化铝(11.9g，88.95mmol)的经搅拌混合物中添加溴(5.45g，34.1mmol)。在80℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物2h。反应物用水/冰(100mL)淬灭并且用乙酸乙酯(3×300mL)萃取。合并的有机层用盐水(3×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的1-(3-溴-4-氯-5-甲基苯基)乙-1-酮(2.2g，28％)。LCMS(ES,m/z):247,249[M+H]

步骤2. 3-溴-4-氯-5-甲基苯甲酸。在40℃下在氮气气氛下将1-(3-溴-4-氯-5-甲基苯基)乙-1-酮(1.00g，4.04mmol)在次氯酸钠(15mL)中的混合物搅拌16h。将混合物冷却至室温并且用水(20mL)稀释并且用盐酸(2M)酸化至pH 5。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过Prep-HPLC用水(0.1％FA)和ACN(在7分钟内35％至最多45％ACN)纯化粗产物，得到呈白色固体状的3-溴-4-氯-5-甲基苯甲酸(600mg，57％)。LCMS(ES,m/z):249,251[M+H]

步骤3. 6-氯-5-甲基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和6-氯-5-甲基-4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在80℃下在氮气气氛下将3-溴-4-氯-5-甲基苯甲酸(550mg，2.20mmol)、((R)-四氢呋喃-2-基)(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(1.36g，3.31mmol)、磷酸钾(941mg，4.43mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(156mg，0.22mmol)在1,4-二噁烷(15mL)和水(3mL)中的混合物搅拌2.5h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(0.1％甲酸)和乙腈(在15分钟内30％至60％)纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IC，2×25cm，5μm；流动相：己烷(含有0.1％甲酸)和乙醇(在16分钟内保持40％乙醇)；检测器：UV 254nm，得到为呈黄色固体状的化合物218(135.5mg，34％)的第一洗脱峰和为呈黄色固体状的化合物219(136.4mg，34％)的第二洗脱峰。

化合物218:

化合物219:

方法37：制备化合物118：4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸

4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸。在80℃下在氮气气氛下将((S)-四氢呋喃-2-基)((R)-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(300mg，0.73mmol)、4-溴-3-(三氟甲基)苯甲酸(294mg，1.09mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(51.6mg，0.073mmol)和磷酸钾(310mg，1.46mmol)在1,4-二噁烷(20mL)和水(4mL)中的混合物搅拌2h。将所得混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过Prep-HPLC用水(含有0.1％甲酸)和乙腈(在7分钟内60％至最多85％乙腈)纯化粗产物，得到呈白色固体状的4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸(化合物118)(108mg，31％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.28(s,1H),8.22(d,J＝8.0Hz,1H),7.58-7.54(m,1H),7.36-7.33(m,2H),7.28-7.25(m,2H),4.70-4.58(m,1H),3.83-3.49(m,4H),3.27-3.15(m,2H),2.12-1.77(m,5H),1.64-1.42(m,2H),1.33-1.00(m,3H),0.97-0.82(m,1H).LCMS(ES,m/z):474[M+H]

方法38：制备化合物119：4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸。

4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸。在80℃下在氮气气氛下将((R)-四氢呋喃-2-基)((R)-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)甲酮(200mg，0.49mmol)、4-溴-3-(三氟甲基)苯甲酸(196mg，0.73mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(34.4mg，0.05mmol)和磷酸钾(206mg，0.97mmol)在1,4-二噁烷(15mL)和水(3mL)中的混合物搅拌2h。在真空下浓缩所得混合物。通过Prep-HPLC用水(含有0.1％甲酸)和乙腈(在7分钟内60％至最多85％乙腈)纯化粗产物，得到呈白色固体状的4'-((R)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸(化合物119)(48.3mg，21％)。

方法38：制备化合物44和45：4-{4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}-3-甲基苯甲酸(44)和4-{4-[(1R)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}-3-甲基苯甲酸(45)。

步骤1. 1-[4-[(叔丁氧基)羰基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。向1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(5.5g，13.32mmol)和4-溴-3-甲基苯甲酸叔丁酯(3g，11.07mmol)在二噁烷(20mL)和水(5ml)中的经搅拌溶液中添加双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(784mg，1.12mmol)和磷酸钾(4.69g，22.14mmol)。在80℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物2h。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(5:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的1-[4-[(叔丁氧基)羰基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(5.7g，97％)。LCMS(ES,m/z):478[M+H]

步骤2. 4-[6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-羧酸叔丁酯。在0℃下将1-[4-[(叔丁氧基)羰基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(5.7g，11.93mmol)和三氟乙酸(10mL)在二氯甲烷(80mL)中的混合物搅拌0.5h。用饱和碳酸氢钠将混合物碱化至pH 8。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，得到呈黄色油状的4-[6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-羧酸叔丁酯(3.9g，78％)。LCMS(ES,m/z):378[M+H]

步骤3. 4-[6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-羧酸叔丁酯。在室温下将1-羟基环丙烷-1-羧酸(307mg，3.00mmol)、1-羟基苯并三唑(406mg，3.00mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(720mg，3.76mmol)、4-[6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-羧酸叔丁酯(567mg，1.50mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(10mL)的混合物搅拌2h。将所得混合物用水(50mL)稀释，并且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(3:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的4-[6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-羧酸叔丁酯(520mg，68％)。LCMS(ES,m/z):462[M+H]

步骤4. 4-{4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}-3-甲基苯甲酸(44)和4-{4-[(1R)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}-3-甲基苯甲酸(45)。在室温下将4-[6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-羧酸叔丁酯(500mg，1.08mmol)和三氟乙酸(3mL)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌2h。在真空下浓缩所得混合物。通过Prep-HPLC用水(含有0.1％甲酸)和乙腈(在10分钟内20％至最多55％乙腈)纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IA，2×25cm，5μm；流动相：己烷:(0.1％FA)和EtOH(在20分钟内保持10％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为化合物44(129.5mg，29％)的第一洗脱峰和为化合物45(133mg，30％)的第二洗脱峰，其呈白色固体状。

化合物44:

化合物45:

方法39：制备化合物196和197：(S)-4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-[1,1'-联苯]-3-羧酸和(R)-4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 3-溴-4-甲氧基苯甲酸叔丁酯。向3-溴-4-甲氧基苯甲酸(5g，21.65mmol)和4-二甲基氨基吡啶(1.3g，10.82mmol)在叔丁醇(100mL)中的经搅拌溶液中逐份添加二碳酸二叔丁酯(9.0g，41.28mmol)。在50℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物过夜。将混合物冷却至室温并且浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(5:1)洗脱来纯化残余物，得到呈白色固体状的3-溴-4-甲氧基苯甲酸叔丁酯(1.6g，24％)。LCMS:(ES,m/z):287,289[M+H]

步骤2. 1-[5-[(叔丁氧基)羰基]-2-甲氧基-[1,1-联苯]-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。在80℃下在氮气气氛下将3-溴-4-甲氧基苯甲酸叔丁酯(1.6g，5.02mmol)、1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(2.76g，6.34mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(320mg，0.45mmol)和磷酸钾(3.55g，15.89mmol)在二噁烷(25mL)和水(5mL)中的经搅拌溶液搅拌2h。将所得混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(3:1)洗脱来纯化残余物，得到呈白色固体状的1-[5-[(叔丁氧基)羰基]-2-甲氧基-[1,1-联苯]-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(2.68g，85％)。LCMS:(ES,m/z):494[M+H]

步骤3. 4-[6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸叔丁酯。向1-[5-[(叔丁氧基)羰基]-2-甲氧基-[1,1-联苯]-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(2g，3.44mmol)在二氯甲烷(25mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加三氟乙酸(3mL)。在0℃下搅拌混合物0.5h。用饱和碳酸氢钠将混合物碱化至pH 8。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，得到呈白色固体状的4-[6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸叔丁酯(1.28g，80％)。LCMS:(ES,m/z):394[M+H]

步骤4. 4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸叔丁酯。在室温下将1H-1,2,3-三唑-5-羧酸(253mg，2.13mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(439mg，2.18mmol)、1-羟基苯并三唑(227mg，1.60mmol)、6-甲氧基-4'-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸叔丁酯(450mg，1.15mmol)和4-甲基吗啉(339mg，3.35mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物搅拌2h。通过反相快速层析用水(含有0.1％FA)和ACN(15％至50％，经40分钟)纯化粗产物，产生呈白色固体状的4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸叔丁酯(400mg，69％)。LCMS:(ES,m/z):489[M+H]

步骤5.(S)-4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-[1,1'-联苯]-3-羧酸和(R)-4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在室温下将4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸叔丁酯(430mg，0.75mmol)和三氟乙酸(3mL)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌1h。在真空下浓缩混合物。通过反相快速层析用水(含有0.1％FA)和乙腈(20％至60％，经40分钟)纯化粗产物。通过在以下条件下的Chiral HPLC分离产物：柱：CHIRALPAK IG-3(0.46×5cm，3μm)；流动相：A，己烷(0.1％FA)和B，EtOH(在12分钟内保持40％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物196(44.8mg，13％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物197(46mg，14％)的第二洗脱峰。

化合物196:

化合物197:

方法40：制备化合物194和195：(S)-4'-(6-(1H-吡唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-[1,1'-联苯]-3-羧酸和(R)-4'-(6-(1H-吡唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 4'-(6-(1H-吡唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸叔丁酯。向1H-吡唑-5-羧酸(160mg，1.43mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(624mg，3.25mmol)和1-羟基苯并三唑(352mg，2.60mmol)在二氯甲烷(10mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加N-甲基吗啉(395mg，3.91mmol)和4-[6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸叔丁酯(512.2mg，1.302mmol)。在室温下搅拌所得混合物2h。将所得混合物用水(30mL)稀释，并且用二氯甲烷(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的4'-(6-(1H-吡唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸叔丁酯(400mg，57％)。LCMS(ES,m/z):488[M+H]

步骤2.(S)-4'-(6-(1H-吡唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-[1,1'-联苯]-3-羧酸和(R)-4'-(6-(1H-吡唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在室温下将6-甲氧基-4-[6-(1H-吡唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸叔丁酯(400mg，0.820mmol)和三氟乙酸(4mL)在二氯甲烷(12mL)中的溶液搅拌2h。在真空下浓缩所得混合物。通过Prep-HPLC用水(含有0.1％FA)和乙腈(10％至50％，经45分钟)纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IE，2×5cm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和EtOH(在23分钟内保持40％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为194(58.3mg，16％)的第一洗脱峰和为化合物195(62.8mg，17％)的第二洗脱峰，其呈白色固体状。

化合物194:

化合物195:

方法41：制备化合物142和143：(S)-4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-[1,1'-联苯]-4-羧酸和(R)-4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-[1,1'-联苯]-4-羧酸。

步骤1. 1-(4'-(叔丁氧羰基)-2'-甲基-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。向1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(5.5g，13.32mmol)和4-溴-3-甲基苯甲酸叔丁酯(3g，11.07mmol)在二噁烷(30mL)和水(6mL)中的经搅拌溶液中添加双(4-(二叔丁基磷烷基)-N,N-二甲基苯胺)二氯钯(784mg，1.11mmol)和磷酸钾(4.69g，22.14mmol)。在80℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物2h。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(5:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的1-(4'-(叔丁氧羰基)-2'-甲基-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(5.7g，97％)。LCMS(ES,m/z):478[M+H]

步骤2. 2-甲基-4'-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸叔丁酯。向1-[4-[(叔丁氧基)羰基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(5.7g，11.93mmol)在二氯甲烷(100mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加三氟乙酸(10mL)。在0℃下搅拌混合物0.5h。用饱和碳酸氢钠将混合物碱化至pH 8。用二氯甲烷(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩，得到呈黄色油状的2-甲基-4'-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸叔丁酯(3.9g，78％)。LCMS(ES,m/z):378[M+H]

步骤3. 4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-[1,1'-联苯]-4-羧酸叔丁酯。在室温下将1H-1,2,3-三唑-5-羧酸(250mg，2.10mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(500mg，2.48mmol)和1-羟基苯并三唑(250mg，1.76mmol)、N-甲基吗啉(400mg，3.76mmol)和4-[6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-羧酸叔丁酯(500mg，1.19mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物搅拌1h。用水(30mL)稀释所得混合物。用乙酸乙酯(3×30mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-[1,1'-联苯]-4-羧酸叔丁酯(500mg，80％)。LCMS(ES,m/z):473[M+H]

步骤4.(S)-4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-[1,1'-联苯]-4-羧酸和(R)-4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-[1,1'-联苯]-4-羧酸。在室温下将4'-(6-(1H-1,2,3-三唑-5-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-[1,1'-联苯]-4-羧酸叔丁酯(400mg，0.77mmol)和三氟乙酸(3mL)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌1h。在真空下浓缩所得混合物。通过反相层析用水(含有0.1％FA)和ACN(5％至50％，经50分钟)纯化粗产物。产物通过Chiral HPLC(柱：CHIRALPAK IG，20×250mm，5μm；流动相A：己烷(含有0.1％FA)和B：EtOH(在23分钟内保持50％EtOH)；检测器：UV 254nm)分离，得到为化合物142(134.4mg，83％)的第一洗脱峰和为化合物143(128.0mg，79％)的第二洗脱峰，其呈白色固体状。

化合物142:

化合物143:

方法42：制备化合物134和135：3-甲基-4-{4-[(1S)-6-(1,3-噁唑-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}苯甲酸和3-甲基-4-{4-[(1R)-6-(1,3-噁唑-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}苯甲酸。

步骤1. 2-甲基-4'-(6-(噁唑-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸叔丁酯。在室温下将1,3-噁唑-2-羧酸(250mg，2.10mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(500mg，2.48mmol)和1-羟基苯并三唑(250mg，1.76mmol)、N-甲基吗啉(400mg，3.76mmol)和4-[6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-2-甲基-[1,1-联苯]-4-羧酸叔丁酯(500mg，1.19mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液搅拌1h。用水(30mL)稀释所得混合物。用乙酸乙酯(3×30mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的2-甲基-4-[6-(1,3-噁唑-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-4-羧酸叔丁酯(510mg，81％)。LCMS(ES,m/z):473[M+H]

步骤2.3-甲基-4-{4-[(1S)-6-(1,3-噁唑-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}苯甲酸和3-甲基-4-{4-[(1R)-6-(1,3-噁唑-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}苯甲酸。在室温下将2-甲基-4-[6-(1,3-噁唑-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-4-羧酸叔丁酯(320mg，0.61mmol)和三氟乙酸(3mL)在二氯甲烷(10mL)中的溶液搅拌1h。在真空下浓缩所得混合物。通过反相层析(柱：C18；流动相：A：水(含有0.1％FA)和B：ACN(5％至40％，经60分钟)；检测器：UV 254nm)纯化粗产物。产物通过Chiral HPLC(柱：CHIRALPAK IG，20×250mm，5μm；流动相A：己烷(含有0.1％FA)和B：EtOH(在23分钟内保持50％)；检测器：UV 254nm)分离，得到为呈灰白色固体状的化合物134(91.2mg，71％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物135(86.7mg，68％)的第二洗脱峰。

化合物134:

化合物135:

方法43：制备化合物182和183：(S)-(1-(3'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)(环丙基)甲酮和(R)-(1-(3'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)(环丙基)甲酮。

步骤1. 1-(3'-氰基-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。在80℃下在氮气气氛下将1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(1.50g，3.63mmol)、3-碘苯甲腈(832mg，3.63mmol)、磷酸钾(2.30g，10.89mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(91mg，0.103mmol)在水(3mL)和二噁烷(15mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈白色固体状的1-(3'-氰基-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(1.67g，93％)。LCMS(ES,m/z):389[M+H]

步骤2. 1-(3'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。在90℃下在氮气气氛下将1-(3'-氰基-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(1.67g，4.30mmol)、叠氮化钠(840mg，12.92mmol)、氯化锌(877mg，6.45mmol)和水(4mL)在叔丁醇(18mL)中的溶液搅拌16h。将反应物冷却至室温并且在室温下用饱和碳酸氢钠(100mL)淬灭。用二氯甲烷/甲醇(10:1)(2×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用二氯甲烷/甲醇(10:1)洗脱来纯化残余物，得到呈白色固体状的1-(3'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(700mg，38％)。LCMS(ES,m/z):432[M+H]

步骤3. 1-(3'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷三氟乙酸盐。在室温下将1-(3'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(700mg，1.62mmol)和三氟乙酸(2mL)在二氯甲烷(10mL)中的溶液搅拌1h。所得混合物在真空下浓缩，得到呈黄色固体状的1-(3'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷三氟乙酸盐(530mg，粗产物)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。LCMS(ES,m/z):332[M+H]

步骤4.(S)-(1-(3'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)(环丙基)甲酮和(R)-(1-(3'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)(环丙基)甲酮。在室温下将1-[3-(2H-1,2,3,4-四唑-5-基)-[1,1-联苯]-4-基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷三氟乙酸盐(265mg，0.80mmol)、环丙烷羧酸(122mg，1.42mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(385mg，2.01mmol)、1-羟基苯并三唑(212mg，1.61mmol)和4-甲基吗啉(0.45ml,4.01mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液搅拌1h。所得混合物用水(50mL)稀释，并且用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。随后合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(0.1％FA)和ACN(在10分钟内10％至50％)纯化残余物。粗产物通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化：柱：CHIRALPAK IG-3，0.46×5mm，3um；流动相：己烷(0.1％FA):EtOH 50:50(在19分钟内保持50％EtOH)，检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物182(86.2mg，35％)的第一洗脱峰和为化合物183(82mg，33％)的第二洗脱峰。

化合物182:

化合物183:

方法44：制备化合物210和211：(S)-4'-(6-(1-氨基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸和(R)-4'-(6-(1-氨基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸。

步骤1.(S)-4'-(6-(1-氨基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸叔丁酯和(R)-4'-(6-(1-氨基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸叔丁酯。向4'-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸叔丁酯和1-氨基环丙烷-1-羧酸(0.83g，8.24mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的经搅拌混合物中添加1-羟基苯并三唑(1.12g，8.36mmol)、N'-(乙基亚胺亚甲基(carbonimidoyl))-N,N-二甲基盐酸盐(2.37g，12.35mmol)和N-甲基吗啉(2.09g，20.65mmol)。在室温下搅拌所得混合物2h。反应物用水(120mL)淬灭并且用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物。产物通过在以下条件下的Prep-Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IA-3，0.46×5cm；3μm；流动相：A，己烷(0.1％FA)和B，EtOH(持续14分钟保持EtOH 70％)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物I-210(180mg，12.2％)的第一洗脱峰和为化合物I-211(180mg，12％)的第二洗脱峰。LCMS(ES,m/z):447[M+H]

步骤2.化合物210-4'-(6-(1-氨基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸。在室温下将化合物I-210(120mg，0.27mmol)和三氟乙酸(4mL)在二氯甲烷(10mL)中的经搅拌混合物搅拌1h。在真空下浓缩所得混合物。通过Prep-HPLC用水(0.1％FA)和ACN(在7分钟内23％至最多32％ACN)纯化粗产物，得到呈白色固体状的化合物210(107mg，94％)。通过Prep-HPLC用水(0.1％FA)和ACN(在7分钟内23％至最多32％ACN)纯化粗产物，得到呈白色固体状的(S)-4'-(6-(1-氨基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸(107mg，94％)。

步骤3化合物211-4'-(6-(1-氨基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸酯。在室温下将叔丁基化合物I-211(120mg，0.27mmol)和三氟乙酸(4mL)在二氯甲烷(10mL)中的经搅拌混合物搅拌1h。在真空下浓缩所得混合物。通过Prep-HPLC用水(0.1％FA)和ACN(在7分钟内23％至最多32％ACN)纯化粗产物，得到呈白色固体状的(R)-4'-(6-(1-氨基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸酯(化合物211)。通过Prep-HPLC用水(0.1％FA)和ACN(在7分钟内23％至最多32％ACN)纯化粗产物，得到呈白色固体状的(R)-4'-(6-(1-氨基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸酯(114mg，94％)。

方法45：制备化合物108和109：(S)-2-(4-(6-(1-羟基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸和(R)-2-(4-(6-(1-羟基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸。

步骤1. 2-(4-(6-(叔丁氧羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯。在110℃下在氮气气氛下将1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(600mg，1.56mmol)、1,3-苯并噁唑-6-羧酸叔丁酯(409mg，1.87mmol)、乙酸钯(18mg，0.072mmol)、碘化铜(59mg，0.21mmol)、XantPhos(180mg，0.31mmol)和碳酸铯(1.27mg，3.84mmol)在甲苯(15mL)中的混合物搅拌1h。将混合物冷却至室温并且在真空下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的2-(4-(6-(叔丁氧羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯(370mg，4544.765％)。LCMS(ES,m/z):505[M+H]

步骤2. 2-(4-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯。在0℃下将2-(4-(6-(叔丁氧羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯(370mg，0.70mmol)和三氟乙酸(3mL)在二氯甲烷(25mL)中的混合物搅拌0.5h。用饱和碳酸氢钠将混合物的pH调节至pH 7并且用二氯甲烷(3×50mL)萃取反应物。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩，得到呈黄色固体状的2-(4-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯(310mg，95％)。LCMS(ES,m/z):405[M+H]

步骤3. 2-(4-(6-(1-羟基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯。向1-羟基环丙烷-1-羧酸(138mg，1.02mmol)、1-羟基苯并三唑(1.12g，8.36mmol)、N'-(乙基亚胺亚甲基)-N,N-二甲基-单盐酸盐(261mg，1.36mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的经搅拌混合物中添加2-(4-(6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯(290mg，0.68mmol)和N-甲基吗啉(206mg，2.04mmol)。在室温下搅拌所得混合物2h。通过添加水/冰(50mL)淬灭反应物并且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(2:1)洗脱来纯化残余物，得到2-(4-(6-(1-羟基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯(300mg，86％)。LCMS(ES,m/z):489[M+H]

步骤4.(S)-2-(4-(6-(1-羟基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸和(R)-2-(4-(6-(1-羟基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸。在室温下将2-(4-(6-(1-羟基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)苯基)苯并[d]噁唑-6-羧酸叔丁酯(300mg，0.583mmol)和三氟乙酸(3mL)在二氯甲烷(10mL)中的经搅拌混合物搅拌1h。在减压下浓缩混合物。粗产物通过Chiral HPLC(柱：(R,R)Whelk-01，21.1×250mm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA):IPA1:1(在30分钟内保持50％IPA)；检测器：UV 254nm)分离，得到为呈白色固体状的化合物108(36.9mg，2928.79％)的第一洗脱峰和为化合物109(30.1mg，23％)的第二洗脱峰。

化合物108:

化合物109:

方法46：制备化合物140和141：3-甲基-4-{4-[(1S)-6-丙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}苯甲酸和3-甲基-4-{4-[(1R)-6-丙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}苯甲酸。

步骤1.1-(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)丙-1-酮。在室温下将丙酸(419mg，5.65mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(742mg，3.87mmol)、1-羟基苯并三唑(383mg，2.84mmol)、1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷(500mg，1.88mmol)和4-甲基吗啉(572mg，5.66mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物搅拌2h。将所得混合物用水(30mL)稀释，并且用二氯甲烷(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈白色固体状的1-(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)丙-1-酮(440mg，62％)。LCMS(ES,m/z):322,324[M+H]+。

步骤2. 3-甲基-4-{4-[(1S)-6-丙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}苯甲酸和3-甲基-4-{4-[(1R)-6-丙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}苯甲酸。在80℃下在氮气气氛下将3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酸(370mg，1.34mmol)、1-[1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基]丁-1-酮(412mg，1.10mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(91mg，0.103mmol)和磷酸钾(816mg，3.65mmol)在二噁烷(10mL)和水(2.5mL)中的混合物搅拌3h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(含有0.1％FA)和乙腈(20％至60％，经40分钟)纯化粗产物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRALPAK IG-3(0.46×5cm，3μm)；流动相：A：己烷(0.1％FA)和B，EtOH(在14分钟内保持30％EtOH)；检测器：UV 254，得到为呈白色固体状的化合物140(139.9mg，3231.932％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物141(137.9mg，31％)的第二洗脱峰。

化合物140:

化合物141:

方法47：制备化合物158和159：[(1S)-6-环丁烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸和4-[(1R)-6-环丁烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸。

步骤1.(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)(环丁基)甲酮。在室温下将1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷(700mg，2.63mmol)和环丁烷羧酸(395mg，3.94mmol)、1-羟基苯并三唑(711mg，5.26mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.51g，7.89mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物搅拌2h。用冰水(100mL)淬灭反应物。将所得混合物用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈白色固体状的1-(4-溴苯基)-6-环丁烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛烷(450mg，47％)。LCMS(ES,m/z):348,350[M+H]

步骤2.(S)-4'-(6-(环丁烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸。向1-(4-溴苯基)-6-环丁烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛烷(500mg，1.44mmol)和3-(二羟基硼烷基)-4-甲氧基苯甲酸(365.74mg，1.87mmol)在1,4-二噁烷(15mL)和水(3ml)中的经搅拌溶液中添加双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(101mg，0.14mmol)和磷酸钾(609mg，2.87mmol)。在80℃下在氮气气氛下搅拌混合物2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(0.1％FA)和ACN(在25分钟内20％至60％)纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化：柱：CHIRALPAK IG，20×250mm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和IPA(在27分钟内保持30％IPA)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物158(83mg，14％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物159(52mg，98.559％)的第二洗脱峰。

化合物158:

化合物159:

方法48：制备化合物144和145：(S)-4'-(6-乙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸和(R)-4'-(6-乙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 1-(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)乙-1-酮。在室温下将乙酸(120mg，1.97mmol)、1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷(350mg，1.37mmol)、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇水合物(213mg，3.16mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(303mg，1.08mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物搅拌2h。用冰水(100mL)淬灭反应物。将所得混合物用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的1-[1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基]乙-1-酮(340mg，80％)。LCMS(ES,m/z):308,310[M+H]

步骤2.(S)-4'-(6-乙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸和(R)-4'-(6-乙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在80℃下在氮气气氛下将1-[1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基]乙-1-酮(340mg，1.10mmol)、3-(二羟基硼烷基)-4-甲氧基苯甲酸(324.27mg，1.66mmol)、磷酸钾(468mg，2.21mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(78mg，0.11mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(3mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(0.1％FA)和ACN(在15分钟内40％至70％)纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC纯化：柱：CHIRALPAK IE，2×25cm，5μm；流动相：己烷(含有0.1％甲酸)和乙醇(在28分钟内保持30％乙醇)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物144(102.7mg，24％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物145(71.4mg，17％)的第二洗脱峰。

化合物144:

化合物145:

方法49：制备化合物146和147：(S)-6-甲氧基-4'-(6-丙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和(R)-6-甲氧基-4'-(6-丙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 1-(1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)丙-1-酮。在室温下将丙酸(125mg，1.69mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(259mg，1.35mmol)、1-羟基苯并三唑(183mg，1.35mmol)和1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷(300mg，1.13mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物再搅拌1h。在室温下用水(50mL)淬灭反应物。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的1-[1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基]丙-1-酮(300mg，78％)。LCMS(ES,m/z):322,324[M+H]

步骤2.(S)-6-甲氧基-4'-(6-丙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸和(R)-6-甲氧基-4'-(6-丙酰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸。在80℃下在氮气气氛下将1-[1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基]丙-1-酮(300.00mg，0.93mmol)、(4-溴-2-甲氧基苯基)硼酸(322mg，1.40mmol)、磷酸钾(395.23mg，1.86mmol)和双(4-(二叔丁基磷烷基)-N,N-二甲基苯胺)(65.92mg，0.093mmol)在二噁烷(10mL)和水(3mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(0.05％TFA)和ACN(在20分钟内30％至70％)纯化残余物。产物通过在以下条件下的ChiralHPLC分离：柱：CHIRALPAK IE，0.46×5cm，3μm；流动相：己烷(含有0.1％甲酸)和IPA(在21分钟内保持30％IPA)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物146(107.2mg，29％)的第一洗脱峰和为化合物147(88.3mg，24.02％)的第二洗脱峰。

化合物146:

化合物147:

方法50：制备化合物148和149：4-[(1S)-6-环丙烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸和4-[(1R)-6-环丙烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸。

步骤1. 1-(4-溴苯基)-6-环丙烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛烷。在室温下将环丙烷羧酸(252mg，2.93mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.12g，5.86mmol)、1-羟基苯并三唑(528mg，3.91mmol)、1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷(520mg，1.95mmol)和4-甲基吗啉(1.58g，15.63mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物搅拌2h。反应物用水(80mL)淬灭并且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(3:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的1-(4-溴苯基)-6-环丙烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛烷(580mg，84％)。LCMS(ES,m/z):334,336[M+H]

步骤2. 4-[(1S)-6-环丙烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸和4-[(1R)-6-环丙烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸。在80℃下在氮气气氛下将1-(4-溴苯基)-6-环丙烷羰基-6-氮杂螺[2.5]辛烷(580mg，1.74mmol)、3-(二羟基硼烷基)-4-甲氧基苯甲酸(340mg，1.74mmol)、磷酸钾(737mg，3.47mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(123mg，0.17mmol)在二噁烷(20ml)和水(4mL)中的混合物搅拌2h。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过反相快速层析用水(0.1％FA)和ACN(在25分钟内10％至70％)纯化残余物。产物通过在以下条件下的Chiral HPLC分离：柱：CHIRAL ART纤维素-SB S-5μm，2×25cm，5μm；流动相：己烷(0.1％FA)和EtOH(在13分钟内保持30％EtOH)；检测器：UV 254nm，得到为呈白色固体状的化合物148(109.1mg，15％)的第一洗脱峰和为呈白色固体状的化合物149(106.8mg，15.03％)的第二洗脱峰。

化合物148:

化合物149:

方法51：制备化合物251和252：(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸(251)和(1R)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸(252)。

步骤1. 2-(4-溴苯基)-2-重氮乙酸叔丁酯。在0℃下向4-甲基苯磺酰基叠氮化物(26.2g，66.42mmol，50％在乙酸乙酯中)和2-(4-溴苯基)乙酸叔丁酯(15.0g，55.35mmol)在乙腈(200mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(42.0g，83.02mmol)。在室温下搅拌所得混合物过夜并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用乙酸乙酯/石油醚(1:10)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的2-(4-溴苯基)-2-重氮乙酸叔丁酯(13.5g，82.3％)。LCMS(ES,m/z):297,299[M+H]

步骤2. 1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸1,6-二叔丁酯。向乙酸铑二聚体(1.40g，1.39mmol,46％)和4-亚甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(11.00g，55.80mmol)在二氯甲烷(200mL)中的经搅拌溶液中添加2-(4-溴苯基)-2-重氮乙酸叔丁酯(13.50g，46.40mmol)。在40℃下搅拌所得溶液过夜。将混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用乙酸乙酯/石油醚(1:10)洗脱来纯化残余物，得到呈淡黄色油状的1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸1,6-二叔丁酯(10.8g，49.9％)。

步骤3. 1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸1,6-二叔丁酯。

向4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(2.37g，8.87mmol)和1-(4-溴苯基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸1,6-二叔丁酯(3g，5.92mmol)在二噁烷(30mL)中的经搅拌混合物中添加乙酸钾(1.83g，17.75mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(0.46g，0.59mmol)。在80℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物1h。在减压下浓缩所得混合物。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(4:1)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色油状的1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸1,6-二叔丁酯(3.1g，93.86％)。LCMS(ES,m/z):514[M+H]

步骤4. 1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸1,6-二叔丁酯。在70℃下将1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸1,6-二叔丁酯(1.6g，2.80mmol)、7-溴喹啉(714mg，3.26mmol)、磷酸钾(1.98g，8.86mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(221mg，0.31mmol)在1,4-二噁烷(20mL)和水(5mL)中的混合物搅拌1h。将所得混合物冷却至室温并且在减压下浓缩。通过硅胶层析用乙酸乙酯/石油醚(1:2)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸1,6-二叔丁酯(1.3g，81.06％)。LCMS(ES,m/z):515[M+H]

步骤5.双(1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸叔丁酯)。在0℃下将双(1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸1,6-二叔丁酯)(1.3g，1.14mmol)和三氟乙酸(2mL)在二氯甲烷(20mL)中的溶液搅拌1h。用饱和碳酸氢钠将残余物碱化至pH＝8。所得混合物用二氯甲烷(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×60mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩，得到呈黄色油状的双(1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸叔丁酯)(1.0g，95.50％)。LCMS(ES,m/z):415[M+H]

步骤6. 6-(1-羟基环丙烷羰基)-1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸叔丁酯。在室温下将1-羟基环丙烷-1-羧酸(185mg，1.72mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(473mg，2.34mmol)、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇水合物(244mg，1.71mmol)、4-甲基吗啉(366mg，3.44mmol)和1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.09mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液搅拌2h。将所得混合物用水(50mL)稀释，并且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:3)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的6-(1-羟基环丙烷羰基)-1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸叔丁酯(470mg，78.15％)。LCMS(ES,m/z):499[M+H]

步骤7.(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸(实例251)和(1R)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸(实例252)。在室温下将6-(1-羟基环丙烷羰基)-1-[4-(喹啉-7-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸叔丁酯(400mg，0.72mmol)和三氟乙酸(4mL)在二氯甲烷(10mL)中的溶液搅拌1h。在真空下浓缩所得混合物。通过反相层析(柱：C18；流动相，A：水(含有10mmol/L NH

化合物251:

化合物252:

方法52：制备化合物280：2-甲氧基-4-[7-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-7-氮杂螺[3.5]壬-2-基]-[1,1-联苯]-4-羧酸：

步骤1. 2-(4-溴苯基)-2-羟基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯。在-78℃下在氮气气氛下向二溴苯(5g，21.2mmol)在四氢呋喃(20mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加正丁基锂(10mL，2.5mol/L)。在-78℃下经10分钟向上述溶液中逐滴添加含2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(6g，25.4mmol)的四氢呋喃(20mL)。在室温下搅拌所得混合物过夜。通过添加水/冰(200mL)淬灭反应物。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱层析(用2:1乙酸乙酯/石油醚洗脱)纯化，得到呈黄色固体状的2-(4-溴苯基)-2-羟基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(6g，57.14％)。LCMS(ES,m/z):396,398[M+H]

步骤2. 2-(4-溴苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯。在-70℃下在氮气气氛下向2-(4-溴苯基)-2-羟基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(2.80g，7.065mmol)在二氯甲烷(10mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加三乙基硅烷(2.80mL,17.53mmol)和BF

步骤3. 2-(4-溴苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷。在0℃下将2-(4-溴苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(400mg，1.05mmol)和三氟乙酸(2mL)在二氯甲烷(10mL)中的溶液搅拌1h。用饱和碳酸钠将混合物碱化至pH 8。所得混合物用二氯甲烷(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩，得到呈黄色固体状的2-(4-溴苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷(350mg，粗产物)。LCMS(ES,m/z):280,282[M+H]

步骤4. 2-(4-溴苯基)-7-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷。在室温下向2-(4-溴苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷(330mg，1.18mmol)、(2R)-氧戊环-2-羧酸(165mg，1.42mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物中添加1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(364mg，2.35mmol)、1-羟基苯并三唑(231mg，1.71mmol)、4-甲基吗啉(347mg，3.43mmol)，并搅拌混合物1h。所得混合物用冰/水(50mL)稀释。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析(用3:1乙酸乙酯/石油醚洗脱)纯化残余物，得到呈黄色油状的2-(4-溴苯基)-7-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷(400mg，84.9％)。LCMS(ES,m/z):378,380[M+H]

步骤5. 7-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-2-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷。在80℃下在氮气气氛下将2-(4-溴苯基)-7-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷(380mg，1.00mmol)、双(频哪醇合)二硼(382mg，1.50mmol)、1,1-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(164mg，0.20mmol)和乙酸钾(296mg，3.02mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌2h。使混合物冷却至室温。滤出固体。用二氯甲烷(3×10mL)洗涤滤饼。在减压下浓缩滤液。通过硅胶柱层析(用3:1乙酸乙酯/石油醚洗脱)纯化残余物，得到呈黄色固体状的7-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-2-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷(350mg，73.72％)。LCMS(ES,m/z):426[M+H]

步骤6. 2-甲氧基-4-[7-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-7-氮杂螺[3.5]壬-2-基]-[1,1-联苯]-4-羧酸(280)。在100℃在氮气气氛下将3-溴-4-甲氧基苯甲酸(196mg，0.85mmol)、7-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-2-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷(300mg，0.71mmol)、磷酸钾(450mg，2.12mmol)和氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(50mg，0.07mmol)在1,4-二噁烷(12mL)和水(3mL)中的混合物搅拌2h。使反应物冷却至室温。在减压下浓缩所得混合物。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：柱，C18硅胶；流动相，A：水(5％NH4HCO3)和B：ACN(在20分钟内30％至70％ACN)；检测器，UV 254nm，得到呈灰白色固体状的化合物280(132.5mg，40.54％)。

化合物280:

方法53：制备化合物282、283、284、285：6-甲氧基-4-[(1R,3R)-5-[(2r)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚-1-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(282)、6-甲氧基-4-[(1S,3R)-5-[(2r)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚-1-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(283)、6-甲氧基-4-[(1R,3S)-5-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚-1-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(284)和6-甲氧基-4-[(1S,3S)-5-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚-1-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(285)

步骤1. 1-(4-溴苯基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-羧酸叔丁酯。在0℃下在氮气气氛下向N-[(4-溴苯基)亚甲基]-4-甲基苯磺酰肼(9.64g，27.29mmol)在二氯甲烷(100mL)中的经搅拌混合物中逐份添加氢化钠(2.34g，58.50mmol，60％)。在0℃下经30分钟向上述混合物中逐份添加3-亚甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(4.00g，21.83mmol)和氧代(三氟甲烷磺酰基)银(1.18g，4.58mmol)。在40℃下搅拌所得混合物12h。将反应物冷却至室温，随后用饱和氯化铵(150mL)淬灭。滤出固体。用乙酸乙酯(3×200mL)洗涤滤饼。滤液经硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析(用4:1石油醚/乙酸乙酯洗脱)纯化残余物，得到呈黄色油状的1-(4-溴苯基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-羧酸叔丁酯(1.4g，15.31％)。LCMS(ES,m/z):352,354[M+H]+。

步骤2. 1-(4-溴苯基)-5-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚烷1-(4-溴苯基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷；三氟乙醛。在室温下将1-(4-溴苯基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-羧酸叔丁酯(600mg，1.70mmol)在二氯甲烷(15mL)和三氟乙酸(3mL)中的溶液搅拌2h。在减压下浓缩所得溶液得到1-(4-溴苯基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷；三氟乙醛(610mg，粗产物)，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤中。LCMS(ES,m/z):252,254[M+H]

步骤3. 1-(4-溴苯基)-5-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚烷。在室温下将(2R)-氧戊环-2-羧酸(345mg，2.97mmol)、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇水合物(322mg，2.38mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(456mg，2.38mmol)、1-(4-溴苯基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷(500mg，1.98mmol)和4-甲基吗啉(986mg，9.75mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物搅拌1.5h。通过添加冰/水(50mL)淬灭反应物。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析(用1:1石油醚/乙酸乙酯洗脱)纯化残余物，得到呈黄色油状的1-(4-溴苯基)-5-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚烷(390mg，50.04％)。LCMS(ES,m/z):350,352[M+H]

步骤4. 6-甲氧基-4-[(1R,3R)-5-[(2r)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚-1-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(282)、6-甲氧基-4-[(1S,3R)-5-[(2r)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚-1-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(283)、6-甲氧基-4-[(1R,3S)-5-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚-1-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(284)和6-甲氧基-4-[(1S,3S)-5-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚-1-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(285)。在80℃下在氮气气氛下将1-(4-溴苯基)-5-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-5-氮杂螺[2.4]庚烷(360mg，1.03mmol)、3-(二羟基硼烷基)-4-甲氧基苯甲酸(302mg，1.54mmol)、磷酸钾(262mg，1.23mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(873mg，1.23mmol)在1,4-二噁烷(12mL)和水(3mL)中的混合物搅拌1.5h。使反应物冷却至室温并且用冰/水(50mL)稀释。所得混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：柱，C18硅胶；流动相，水(0.1％FA)和ACN(在30分钟内5％至95％)；检测器，UV 254/220nm。产物通过在以下条件下的Chiral-Prep-HPLC分离：柱，CHIRAL ART纤维素-SB，2×25cm，5μm；流动相，正己烷(0.1％甲酸)和异丙醇(在19分钟内保持50％异丙醇)；检测器，UV254/220nm，得到呈白色固体状的化合物282(14.3mg，4.74％)、化合物283(6.3mg，2.09％)、化合物284(27.2mg，9.06％)以及呈白色固体状的化合物285(22.9mg，7.62％)。

化合物282:

化合物283:

化合物284:

化合物285:

方法54：制备化合物296和297：6-甲氧基-4-[(2s,4s)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基]-[1,1'-联苯]-3-羧酸(296)和6-甲氧基-4'-[(2r,4r)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(297)

步骤1. 2-(4-溴苯基)-2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯。在-78℃下在氮气气氛下向二溴苯(5.70g，24.16mmol)在THF(30mL)中的经搅拌溶液中逐滴添加正丁基锂(11.0mL，27.78mmol，2.5mmol/L)。在-78℃下经10分钟向以上混合物中逐滴添加含2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯(5.00g，22.19mmol)的THF(10mL)。在室温下搅拌所得混合物过夜。通过添加水/冰(100mL)淬灭反应物。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析(用1:2乙酸乙酯/石油醚洗脱)纯化残余物，得到呈黄色固体状的2-(4-溴苯基)-2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯(3g，33.59％)。LCMS(ES,m/z):382,384[M+H]

步骤2. 4-[6-(叔丁氧羰基)-2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸。在80℃下在氮气气氛下将2-(4-溴苯基)-2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯(1.50g，3.92mmol)、3-(二羟基硼烷基)-4-甲氧基苯甲酸(0.92g，4.71mmol)、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(0.28g，0.39mmol)和磷酸钾(1.67g，7.85mmol)在二噁烷(25mL)和水(5mL)中的经搅拌混合物搅拌2h。使反应混合物冷却至室温。反应物用冰/水(100mL)稀释。用二氯甲烷(3×100mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：柱，C18硅胶；流动相，A：ACN和水(0.1％FA)和B：ACN(在30分钟内10％至50％ACN)；检测器，UV 254nm，得到呈白色固体状的4-[6-(叔丁氧羰基)-2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸(1.2g，67.5％)。LCMS(ES,m/z):454[M+H]

步骤3. 4-[6-氮杂螺[3.4]辛-2-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸。在-40℃下在氮气气氛下向4-[6-(叔丁氧羰基)-2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸(1.20g，2.65mmol)在DCM(30mL)中的经搅拌溶液中添加三氟乙酸(5mL)和三乙基硅烷(0.58g，4.99mmol)。在-10℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物3h。在减压下浓缩混合物。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：柱，C18硅胶；流动相，水(0.1％FA)和ACN(在30分钟内10％至50％ACN)；检测器，UV 254nm，得到呈白色固体状的4-[6-氮杂螺[3.4]辛-2-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸(800mg，80.65％)。LCMS(ES,m/z):338[M+H]

步骤4. 6-甲氧基-4-[(2s,4s)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(296)和6-甲氧基-4-[(2r,4r)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基]-[1,1-联苯]-3-羧酸(297)。将(2R)-氧戊环-2-羧酸(165mg，1.42mmol)、4-[6-氮杂螺[3.4]辛-2-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸(400mg，1.19mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(490mg，2.56mmol)、1-羟基苯并三唑(80mg，0.59mmol)和4-甲基吗啉(360mg，3.56mmol)在DMF(15mL)中的混合物搅拌2h。反应物用冰/水(50mL)稀释。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：柱，C18硅胶；流动相A：水(0.1％FA)和B：ACN(在30分钟内20％至50％ACN)；检测器，UV 254nm。产物通过在以下条件下的Chiral-Prep-HPLC分离：柱，CHIRAL ART纤维素-SB，2×25cm，5um；流动相，己烷(0.1％FA)和IPA(在19分钟内保持50％IPA)；检测器，UV 254nm，得到化合物296(53.9mg，10.23％)和化合物297(70.8mg，13.44％)，其呈白色固体状。

化合物296:

化合物297:

方法55：制备化合物298：7-(1-羟基环丙烷羰基)-2-[4-(喹啉-7-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸(298)

步骤1. 2-(4-溴苯基)-2-氰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯。向2-氰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(1.60g，6.39mmol)和二溴苯(3.00g，12.72mmol)在甲氧基环戊烷(30mL)和四氢呋喃(30mL)中的经搅拌溶液中添加6-双(二苯基膦基)吩噁嗪(388mg，0.70mmol)、三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(585mg，0.64mmol)和双(三甲基硅基)氨基锂(20.00mL，1mol/L)。在70℃下搅拌所得混合物过夜。使反应物冷却至室温。用冰/水(100mL)稀释混合物。将所得混合物用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(4:1)洗脱来纯化残余物，得到呈淡黄色油状的2-(4-溴苯基)-2-氰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(1.6g，49.41％)。LCMS:(ES,m/z):405,407[M+H]

步骤2. 2-氰基-2-[4-(喹啉-7-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯。在100℃下在氮气气氛下将2-(4-溴苯基)-2-氰基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(1.50g，3.70mmol)、喹啉-7-基硼酸(704mg，4.07mmol)和磷酸钾(2.36g，11.12mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(ii)(262.00mg，0.37mmol)在二噁烷(15mL)和水(5mL)中的混合物搅拌2h。使混合物冷却至室温。所得混合物用冰/水(50mL)稀释。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取混合物。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过硅胶柱层析用石油醚/乙酸乙酯(1:3)洗脱来纯化残余物，得到呈黄色固体状的2-氰基-2-[4-(喹啉-7-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(1.6g，85.79％)。LCMS:(ES,m/z):454[M+H]

步骤3. 2-[4-(喹啉-7-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸。在100℃下将2-氰基-2-[4-(喹啉-7-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(1.50g，3.31mmol)在硫酸(30％水溶液，15mL)中的混合物搅拌过夜。使混合物冷却至室温。在减压下浓缩所得混合物。通过反相快速层析在以下条件下纯化粗产物：柱，C18硅胶；流动相，A：水(含有0.1％甲酸)和B：乙腈(5％至30％，经20分钟)；检测器，UV 254/220nm，得到呈黄色固体状的2-[4-(喹啉-7-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸(1.2g，82.81％)。LCMS:(ES,m/z):373[M+H]

步骤4. 7-(1-羟基环丙烷羰基)-2-[4-(喹啉-7-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸(298)。在室温下将1-羟基环丙烷-1-羧酸(134mg，1.31mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(418mg，2.18mmol)、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇水合物(222mg，1.64mmol)、4-甲基吗啉(0.6mL,5.46mmol)和2-[4-(喹啉-7-基)苯基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸(400mg，1.07mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的经搅拌混合物搅拌2h。用冰/水(20mL)稀释混合物。用乙酸乙酯(3×30mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过反相快速层析在以下条件下纯化粗产物：柱，C18硅胶；流动相，A：水(含有0.1％甲酸)和B：乙腈(5％至30％，经60分钟)；检测器，UV 254/220nm，得到呈白色固体状的化合物298(126.6mg，23.01％)。

化合物298:

方法56：制备化合物326：3-羟基-4-[6-甲基-4-[(1S)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-3-基]环丁-3-烯-1,2-二酮(326)

步骤1. 3-(3-溴-4-甲基苯基)-4-羟基环丁-3-烯-1,2-二酮

在0℃下向3-氯-4-羟基环丁-3-烯-1,2-二酮(3.00g，22.642mmol)和邻溴甲苯(3.87g，22.642mmol)在CHCl3(15.00mL)中的经搅拌混合物中逐份添加氯化铝(3.02g，22.651mmol)。在室温下搅拌所得混合物1h。用冰/水(100mL)稀释所得混合物。用DCM(3×50mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。在过滤后，在减压下浓缩滤液。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：柱，C18硅胶；流动相，水(NH4CO3 10mmol/L)和ACN(在10分钟内30％至70％ACN)；检测器，UV 254nm。这产生呈黄色固体状的3-(3-溴-4-甲基苯基)-4-羟基环丁-3-烯-1,2-二酮(3.1g，46.14％)。LCMS(ES,m/z):283,285[M+H]

步骤2. 3-羟基-4-[6-甲基-4-[(1S)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-3-基]环丁-3-烯-1,2-二酮(326)

在室温下向3-(3-溴-4-甲基苯基)-4-羟基环丁-3-烯-1,2-二酮(80.00mg，0.300mmol)和(1S)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷(147.00mg，0.357mmol)在二噁烷(2.00mL)和H2O(0.50mL)中的经搅拌混合物中添加PdAMPHOS(40.00mg，0.056mmol)和K3PO4(183.00mg，0.862mmol)。在90℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物1h。使混合物冷却至室温。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：柱，C18硅胶；流动相，水(10mmol/L NH4HCO3)和ACN(在10分钟内20％至50％)；检测器，UV 254nm。这产生呈黄色固体状的化合物326(32.3mg，22.41％)。

化合物326:

方法57：制备化合物330：N-[4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-基磺酰基]乙酰胺(330)

步骤1. 3-溴-4-甲氧基苯磺酰胺

在0℃下将3-溴-4-甲氧基苯磺酰氯(3.00g，10.506mmol)和含NH

步骤2.N-(3-溴-4-甲氧基苯磺酰基)乙酰胺

在室温下将3-溴-4-甲氧基苯磺酰胺(1.80g，6.764mmol)、TEA(76.00mg，0.751mmol)和Ac2O(690.00mg，6.759mmol)在DCM(18mL)中的溶液搅拌过夜。通过反相快速层析在以下条件下纯化粗产物：柱，C18硅胶；流动相，A：水(含有0.1％FA)和B：ACN(20％至60％ACN，经60分钟)；检测器，UV 254nm，得到呈白色固体状的N-(3-溴-4-甲氧基苯磺酰基)乙酰胺(800mg，34.54％)。LCMS(ES,m/z):308,310[M+H]

步骤3.N-[6-甲氧基-4-[(1S)-6-[1-(氧烷-2-基氧基)环丙烷羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-3-基磺酰基]乙酰胺

在90℃下在氮气气氛下将(1S)-6-[1-(氧烷-2-基氧基)环丙烷羰基]-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷(50.00mg，0.104mmol)、N-(3-溴-4-甲氧基苯磺酰基)乙酰胺(35.00mg，0.114mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(8.00mg，0.011mmol)和磷酸钾(66.00mg，0.311mmol)在二噁烷(4mL)和水(1mL)中的混合物搅拌1h。使混合物冷却至室温。在减压下浓缩所得混合物。通过反相快速层析在以下条件下纯化粗产物：柱，C18硅胶；流动相，A：水(含有10mM碳酸氢铵)和B：ACN(20％至50％，经30分钟)；检测器，UV 254nm，得到呈白色固体状的N-[6-甲氧基-4-[(1S)-6-[1-(氧烷-2-基氧基)环丙烷羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-3-基磺酰基]乙酰胺(30mg，44.62％)。LCMS(ES,m/z):583[M+H]

步骤4.N-[4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-基磺酰基]乙酰胺(330)

在室温下将N-[6-甲氧基-4-[(1S)-6-[1-(氧烷-2-基氧基)环丙烷羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-3-基磺酰基]乙酰胺(30.00mg，0.051mmol)和TFA(0.5mL)在DCM(3mL)中的经搅拌溶液搅拌30分钟。在减压下浓缩所得混合物。通过反相快速层析在以下条件下纯化粗产物：柱，C18硅胶；流动相，A：水(含有10mM碳酸氢铵)和B：ACN(10％至30％ACN，经30分钟)；检测器，UV 254nm。这产生呈白色固体状的化合物330(10.7mg，39.60％)。

化合物330:

方法58：制备化合物337：4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲基-[1,1-联苯]-3-基(甲基)次膦酸(337)

步骤1.甲基(6-甲基-4-[(1S)-6-[1-(氧烷-2-基氧基)环丙烷羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-3-基)次膦酸

在室温下在氮气气氛下向(1S)-6-[1-(氧烷-2-基氧基)环丙烷羰基]-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷(50.00mg，0.104mmol)、3-溴-4-甲基苯基(甲基)次膦酸(29.00mg，0.116mmol)和K3PO4(66.00mg，0.311mmol)在二噁烷(4mL)和H2O(1mL)中的经搅拌混合物中添加PdAMPHOS(8.00mg，0.011mmol)。在90℃下在氮气气氛下搅拌所得混合物1h。使混合物冷却至室温。在减压下浓缩所得混合物。通过反相快速层析在以下条件下纯化粗产物：柱，C18硅胶；流动相：A，水(含有10mM碳酸氢铵)和B，ACN(10％至35％ACN，经30分钟)；检测器，UV 254nm。这产生呈淡黄色油状的甲基(6-甲基-4-[(1S)-6-[1-(氧烷-2-基氧基)环丙烷羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-3-基)次膦酸(30mg，49.65％)。LCMS(ES,m/z):534[M+H]

步骤2. 4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-6-甲基-[1,1-联苯]-3-基(甲基)次膦酸(337)

在室温下将甲基(6-甲基-4-[(1S)-6-[1-(氧烷-2-基氧基)环丙烷羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]-[1,1-联苯]-3-基)次膦酸(30.00mg，0.057mmol)和TFA(0.5mL)在DCM(3mL)中的混合物搅拌1h。通过反相快速层析在以下条件下纯化粗产物：柱，C18硅胶；流动相：水(含有10mM碳酸氢铵)和ACN(10％至30％ACN，经30分钟)；检测器，UV 254nm。这产生呈白色固体状的化合物337(15mg，56.59％)。

化合物337:

方法59：制备化合物345、346、347和348：6-甲氧基-4'-[(1R,4R)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-[1,1'-联苯]-3-羧酸(345)、6-甲氧基-4'-[(1S,4R)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-[1,1'-联苯]-3-羧酸(346)、6-甲氧基-4'-[(1R,4S)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-[1,1'-联苯]-3-羧酸(347)和6-甲氧基-4'-[(1S,4S)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-[1,1'-联苯]-3-羧酸(348)

步骤1. 4'-[6-(叔丁氧羰基)-1-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸

在-78℃下在氮气气氛下向4-溴-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸(800.00mg，2.605mmol)在THF(10mL)中的溶液中逐滴添加正丁基锂(2.5M在THF中,1.6mL)。在-78℃下搅拌反应混合物1h。随后逐滴添加1-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯(590.00mg，2.619mmol)在THF(5mL)中的溶液。使所得混合物升温至室温并且搅拌过夜。用饱和NH

步骤2. 4'-[6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1'-联苯]-3-羧酸

在-10℃下将4-[6-(叔丁氧羰基)-1-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸(125.00mg，0.276mmol)、TFA(0.5mL)和Et

步骤3. 6-甲氧基-4'-[(1R,4R)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-[1,1'-联苯]-3-羧酸(345)、6-甲氧基-4'-[(1S,4R)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-[1,1'-联苯]-3-羧酸(346)、6-甲氧基-4'-[(1R,4S)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-[1,1'-联苯]-3-羧酸(347)和6-甲氧基-4'-[(1S,4S)-6-[(2R)-氧戊环-2-羰基]-6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-[1,1'-联苯]-3-羧酸(348)。

在室温下将(2R)-氧戊环-2-羧酸(20.00mg，0.172mmol)、4-[6-氮杂螺[3.4]辛-1-基]-6-甲氧基-[1,1-联苯]-3-羧酸(50.00mg，0.148mmol)、EDCI(10.00mg，0.052mmol)和HOBT(40.00mg，0.296mmol)以及NMM(45.00mg，0.445mmol)在DMF(5mL)中的混合物搅拌2h。用水(30mL)淬灭反应物。用EtOAc(3×30mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×30mL)洗涤，经无水Na

化合物345:

化合物346:

化合物347:

化合物348:

方法60：制备化合物384：4-[4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基]喹啉-2-羧酸(384)

步骤1. 4-[4-[(1S)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基]喹啉-2-羧酸

在100℃下在氮气气氛下将(1S)-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷(200mg，0.638mmol)、4-溴喹啉-2-羧酸(193.00mg，0.766mmol)、磷酸钾(406.00mg，1.913mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(90.00mg，0.127mmol)在二噁烷(5mL)和水(1.5mL)中的混合物搅拌1h。使混合物冷却至室温。在减压下浓缩所得混合物。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：柱，C18硅胶；流动相，A：水(10mmol/L NH

步骤2. 4-[4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基]喹啉-2-羧酸(384)

在室温下将1-羟基环丙烷-1-羧酸(15.00mg，0.147mmol)、4-[4-[(1S)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基]喹啉-2-羧酸(50.00mg，0.139mmol)、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇水合物(35.00mg，0.259mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(65.00mg，0.339mmol)和4-甲基吗啉(40.00mg，0.395mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物搅拌3h。通过添加水/冰(30mL)淬灭反应物。用乙酸乙酯(3×30mL)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水(2×30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过反相快速层析在以下条件下纯化残余物：柱，C18硅胶；流动相，A：水(0.1％FA)和B：ACN(在30分钟内20％至50％ACN)；检测器，UV 254nm，得到呈白色固体状的化合物384(15.8mg，25.34％)。LCMS(ES,m/z):443[M+H]

化合物384:

实施例3-FASN生物化学测定方案

在最终体积为6μL的含有50mM HEPES(pH 7.5，(0.5M Hepes，pH 7.5溶液；TeknovaH1575))、50mM NaCl、50mM KCl、0.03％BGG(0.22μM过滤，Sigma，G7516-25G)和0.01％Triton X-100(Sigma，T9284-10L)的测定缓冲液中进行测定。将几纳升的含10滴、3倍连续稀释液的DMSO预分配到1536测定板(Corning,#3724BC)中，最终测试浓度从最高到最低剂量分别为25μM至1.3nM。对浓度和孵育时间进行优化以获得最大信背比(signal-to-background)，同时维持固定底物/辅因子浓度下的初始速度条件。酶(FASN)的最终浓度为20nM并且底物/辅因子为40μM NADPH、20uM乙酰基CoA、20uM丙二酰基CoA。将2μL的2倍酶添加到测定板(用化合物预冲压)中，预先孵育30分钟，并且随后用2μL的2倍底物处理。将板在室温下孵育30分钟，并且通过添加含2μL检测试剂(30μM最终浓度的CPM)的50％乙醇停止反应。将板孵育30分钟，随后在Envision(Perkin Elmer)上读取荧光，在355nm激发并且在535nm下发射。对于所有测定形式，将数据作为与基于以下等式的对照孔相比的抑制百分比报道：抑制％＝100*((FLU-AveLow)/(AveHigh-AveLow))，其中FLU＝所测量的荧光，AveLow＝无酶对照(n＝32)的平均荧光，并且AveHigh＝DMSO对照(n＝32)的平均荧光。通过包括在Activity Base软件包：IDBS XE Designer Model205中的标准4参数对数拟合算法的曲线拟合来测定IC50值。使用Levenburg Marquardt算法拟合数据。IC

权利要求书(按照条约第19条的修改)

1.一种式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

各R

其中R

或氧代基取代；

m为0-4；并且

n为0-6。

2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

环A为6-10元芳基或含有1-2个N原子的6-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

R

m为0-4；并且

n为0-6。

3.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中式(I)具有下式

其中：

R

其中R

各R

各R

其中R

4.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是式(I-a)化合物：

或其药学上可接受的盐，

环A为6-10元芳基或含有1-4个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

R

各R

其中R

各R

R

m为0-4；并且

n为0-6。

5.如权利要求3所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

R

其中R

各R

其中R

6.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是式(II)化合物：

或其药学上可接受的盐，

环A为6-10元芳基或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的5-10元杂芳基；

R

其中R

R

其中R

各R

各R

R

R

各R

其中R

各R

各R

各R

各R

m为0-4；并且

n为0-6。

7.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是式(III)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

其中R

R

其中R

各R

各R

其中R

各R

n为0-4。

8.如权利要求7所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R

9.如权利要求7或8所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R

10.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是式(V)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R

各R

各R

11.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是式(VII-A)化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

环B为苯基、稠合双环8-10元芳基，或含有1-2个独立地选自由O、N和S组成的组的杂原子的稠合双环8-10元杂芳基；

R

各R

各R

12.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自图1。

13.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自图2或图3。

14.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物为：

15.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物为：

16.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物为：

17.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物为：

18.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物为：

19.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物为：

20.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物为：

21.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物为：

22.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物为：

23.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自由以下组成的组：4-{4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基}-3-甲基苯甲酸；(S)-4'-(6-(1-羟基环丙烷-1-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-6-甲基-[1,1'-联苯]-3-羧酸；((S)-1-(4'-(2H-四唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮；6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸；5-氯-6-甲氧基-4'-((S)-6-((R)-四氢呋喃-2-羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基)-[1,1'-联苯]-3-羧酸；((S)-1-(2'-甲氧基-4'-(2H-四唑-5-基)-1',2',3',4',5',6'-六氢-[1,1'-联苯]-4-基)-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)((R)-四氢呋喃-2-基)甲酮；以及4-[4-[(1S)-6-(1-羟基环丙烷羰基)-6-氮杂螺[2.5]辛-1-基]苯基]喹啉-2-羧酸；或其药学上可接受的盐。

24.一种药物组合物，其包含如权利要求1-23中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。