一种天麻煮散饮片的制备方法

技术领域

本发明涉及中药及药物分析技术领域，尤其是涉及一种天麻煮散饮片的制备方法。

背景技术

本品为兰科植物天麻Gastrodia elata Bl.的干燥块茎。收载于2020版《中国药典》，具有息风止痉，平抑肝阳，祛风通络等功效。用于小儿惊风，癫痫抽搐，破伤风，头痛眩晕，手足不遂，肢体麻木，风湿痹痛。研究表明，天麻主要成分包括天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷类等酚类化合物。现代药理研究发现天麻及其有效成分具有多靶点、多途径的多重药理作用机制，包括抗凝、抗血小板聚集、降压、降脂、抑制心肌细胞凋亡、促血管生成、营养神经、抗抑郁、抗惊厥等作用。

中药煮散饮片(以下简称煮散饮片)始于先秦，盛于唐宋，至明清时期为有利于中药饮片的鉴别真伪、切制成以片状为主的各种外形并沿用至今。煮散饮片的临床应用可通过中医临床疗效结果评价更为可靠。因此，天麻煮散饮片有较高的开发利用价值和广阔的应用前景。传统天麻煮散饮片的加工方式为鲜天麻，从新鲜药材到饮片再到煮散饮片需要经过产地加工和饮片炮制两个环节，其中产地加工由种植农户完成，将采收的新鲜天麻，立即洗净，蒸透，敞开低温干燥成药材。新鲜天麻大小不一，其蒸制时间和干燥时间也不同；

饮片炮制则由生产企业将天麻药材洗净、润透或蒸软、切薄片、干燥成饮片后，饮片再经粉碎后制成相应规格的粗颗粒或粗粉状煮散饮片。

传统天麻煮散饮片的制备方法要经过蒸煮、干燥得到药材，药材经过清洗、蒸制、切薄片、干燥得到饮片，饮片经过粉碎得到煮散饮片。传统加工方法需低温烘干不仅时间长，且经过两层水洗和蒸制，使有效成分大量流失，期间如遇到阴雨天气，药材易发生霉变，导致药材变质。同时，传统饮片的批内质量、批间质量差异较大，煎煮效率低、资源浪费、不利于临床的自动化调配等因素，影响了中药饮片的现代化进程。

目前为止，针对天麻煮散饮片的传统制备过程中天麻素及对羟基苯甲醇等成分易严重流失，导致药效降低，且批内质量、批间质量差异较大，所以天麻煮散饮片制备工艺是目前天麻煮散饮片生产中急需解决的一生产难题。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种天麻煮散饮片的制备方法，以至少解决现有技术中存在的天麻煮散饮片传统制备过程中天麻素及对羟基苯甲醇等成分易严重流失，导致药效降低，且批内质量、批间质量差异较大的技术问题。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明提供了一种天麻煮散饮片的制备方法，所述方法包括以下步骤：

S1、将新鲜天麻经捡选、清洗，将清洗后的天麻破碎成统一粒径大小后取出；

S2、将S1中制备的统一粒径大小的新鲜天麻进行蒸煮熟化；

S3、对S2制备的熟化后的天麻进行热风循环干燥，制得天麻煮散饮片。

进一步的，所述步骤S1中的粒径大小为0.8mm～10mm。

进一步的，所述蒸煮熟化包括蒸煮至透心。

进一步的，所述热风循环干燥的温度为50℃～60℃。

进一步的，所述步骤S1中的粒径为10mm。

进一步的，所述热风循环干燥的温度为60℃。

进一步的，所述将清洗后的天麻破碎成统一粒径大小包括将清洗后的天麻投入到破碎容器中，通过叶轮旋转将天麻破碎成统一粒径大小。

进一步的，所述叶轮的刀片外源旋转速度为70m/s～120m/s。

进一步的，所述天麻投入到破碎容器中的速度为80kg/h～90kg/h。

进一步的，所述天麻投入到破碎容器中的速度为90kg/h，所述叶轮的刀片外源旋转速度为100m/s。

本发明提供的一种天麻煮散饮片的制备方法，通过省略掉药材干燥后再蒸制、切制、干燥再加工破碎的工艺，将鲜天麻经破碎、蒸制后直接干燥加工成煮散饮片一体化生产，减少二次加工的污染，使鲜天麻加工时不受高温和阴雨天气的影响。通过将新鲜天麻破碎成统一粒径的工艺改进，减少干燥时间，减少蒸煮次数，本发明制备的天麻煮散饮片中的天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷类、对羟基苯甲醛、香草醛、多糖含量分别比同一批次的传统干燥煮散饮片高55％、77％、126％、54％、28％和33％，比先蒸制再切制干燥的煮散饮片高47％、33％、115％、41％、23％和18％，达到了减少天麻素和对羟基苯甲醇以及酚类等成分的流失的目的，提高天麻干燥煮散饮片品质，使药效优于传统制备煮散饮片，本发明操作简单，有利于产品的质量控制同时省时节能。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明提供的一种天麻煮散饮片的制备方法流程图；

图2为现有技术中的天麻煮散饮片制备方法流程图；

图3为本发明实验1提供的天麻煮散饮片特征图谱；

图4为本发明实验5提供的醋酸扭体镇痛实验扭体次数，其中*表示相对于对照*P＜0.05，**P＜0.01，#表示相对于罗通定P＜0.05，△△表示相对于传统干燥煮散饮片P＜0.01；

图5为本发明实验5提供的醋酸扭体镇痛实验镇痛潜伏时间，其中*表示相对于对照*P＜0.05，**P＜0.01，#表示相对于罗通定P＜0.05，△△表示相对于传统干燥煮散饮片P＜0.01。

具体实施方式

除非本文另有定义，连同本发明使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。术语的含义和范围应当清晰，然而，在任何潜在不明确性的情况下，本文提供的定义优先于任何字典或外来定义。在本申请中，除非另有说明，“或”的使用意味着“和/或”。此外，术语“包括”及其他形式的使用是非限制性的。

除非另有说明，本发明的方法和技术一般根据本领域众所周知，且如各种一般和更具体的参考文献中所述的常规方法来进行，所述参考文献在本说明书自始至终引用和讨论。酶促反应和纯化技术根据制造商的说明书、如本领域通常实现的或如本文所述来进行。连同本文描述的分析化学、合成有机化学以及医学和药物化学使用的命名法、以及其实验室程序和技术是本领域众所周知和通常使用的那些。

下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

结合图1进行说明，本发明提供了一种天麻煮散饮片的制备方法，所述方法包括以下步骤：

S1、将新鲜天麻经捡选、清洗，将清洗后的天麻破碎成统一粒径大小后取出；

其中捡选时通常从形状、颜色两方面进行捡选，形状可以为长椭圆形，粗壮且皱纹均匀，两端有干枯芽孢以及圆形疤痕的天麻，颜色可以为黄白色至淡黄棕色的天麻，避免选颜色较白或较黑的天麻。

S2、将S1中制备的统一粒径大小的新鲜天麻进行蒸煮熟化；

S3、对S2制备的熟化后的天麻进行热风循环干燥，制得天麻煮散饮片。

通过省略掉药材干燥后再蒸制、切制、干燥再加工打碎的工艺，将鲜天麻经破碎、蒸制后直接干燥加工成煮散饮片一体化生产，减少二次加工的污染，使鲜天麻加工时不受高温和阴雨天气的影响。通过将新鲜天麻破碎成统一粒径的工艺改进，减少干燥时间，减少蒸煮次数；通过热风循环烘干，保证物料受热均匀。本发明制备的天麻煮散饮片中的天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷类、对羟基苯甲醛、香草醛、多糖含量分别比同一批次的传统干燥煮散饮片高55％、77％、126％、54％、28％和33％，比先蒸制再切制干燥的煮散饮片高47％、33％、115％、41％、23％和18％，达到了减少天麻素和对羟基苯甲醇等酚类成分的流失的目的，提高天麻干燥煮散饮片品质，使药效优于传统制备煮散饮片，本发明操作简单，有利于产品的质量控制同时省时节能。

在一些优选的实施例中，所述步骤S1中的粒径大小为0.8mm～10mm。

其中粒径大小可以为但不限于0.8mm、1.8mm、2.8mm、3.8mm、4.8mm、5.8mm、6.8mm、7.8mm、8.8mm、9.8mm或10mm，也可以为0.8mm～10mm之间的任意值。

通过将粒径大小限制在0.8mm～10mm，一方面能够减小新鲜天麻的尺寸，便于蒸煮，缩短蒸煮时间，减少有效成分的流失；另一方面0.8mm～10mm的尺寸制备得到的天麻煮散饮片符合本领域对天麻煮散饮片的相关规定，如《中药煮散饮片质量标准研究指导原则和技术要求(试行)》中药煮散饮片所规定的0.2～10mm的粗颗粒或粗粉状饮片的粒径范围内。风干后能够直接过筛得到天麻煮散饮片成品，无需再次进行破碎，破碎过程中往往会伴随机械能向热能的转化，引起天麻煮散饮片的温度变化，造成成分的流失或改变，影响成品质量。

在一些优选的实施例中，所述蒸煮熟化包括蒸煮至透心。

在一些优选的实施例中，所述热风循环干燥的温度为50℃～60℃。

其中热风循环干燥的温度可以为但不限于50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃或60℃，也可以为50℃～60℃之间任意值。

通过将干燥温度限定在50℃～60℃，在保证天麻煮散饮片干燥效率的同时，对有效活性成分的影响最小。

在一些优选的实施例中，所述将清洗后的天麻破碎成统一粒径大小包括将将清洗后的天麻投入到破碎容器中，通过叶轮旋转将天麻破碎成统一粒径大小。

通过使用破碎容器对天麻进行破碎能够提高效率，避免手工操作造成人为污染，影响天麻煮散饮片的质量。

破碎容器可以为粗碎机。

在一些优选的实施例中，所述叶轮的刀片外源旋转速度为70m/s～120m/s。

其中，所述叶轮的刀片外源旋转速度可以为但不限于70m/s、80m/s、90m/s、100m/s、110m/s或120m/s，也可以为70m/s～120m/s之间任意值。

在一些优选的实施例中，所述天麻投入到破碎容器中的速度为80kg/h～90kg/h。

其中所述天麻投入到破碎容器中的速度可以为但不限于80kg/h、81kg/h、82kg/h、83kg/h、84kg/h、85kg/h、86kg/h、87kg/h、88kg/h、89kg/h或90kg/h，也可以为80kg/h～90kg/h之间任意值。

通过限定叶轮刀片外源旋转速度和天麻投入的速度，确保投入的天麻破碎均匀。

下面通过实施例对本发明作进一步说明。如无特别说明，实施例中的材料为根据现有方法制备而得，或直接从中药材市场上购得。

实施例1

本实施例提供了一种天麻煮散饮片的制备方法，包括以下步骤：

S1、将40kg新鲜天麻经捡选、清洗后，以90kg/h的速度投料至破碎容器中，在高速旋转叶轮的作用下将天麻破碎成统一粒径大小；

其中破碎容器为粗碎机(型号：CSJ-250)，叶轮刀片外源旋转速度为100m/s，破碎后天麻粒径为10mm，取出，

S2、将步骤S1中制备的10mm粒径大小的天麻常压蒸制透心即为熟化；

其中，熟化时间为15分钟；

S3、将步骤S2制备的熟化后的天麻置于密闭容器内，同时采用风机对密闭容器中的熟化后的天麻进行热风循环干燥，干燥温度为60℃，天麻在密闭容器中干燥，240min后干燥的天麻煮散饮片由热风带出密闭容器，收集后过筛，完成天麻煮散饮片的制备。

实施例2

与实施例1不同的是，叶轮刀片外源旋转速度为100m/s，破碎后天麻粒径为1mm，熟化时间为5分钟；干燥温度为50℃，干燥90min。

实施例3

与实施例1不同的是，叶轮刀片外源旋转速度为100m/s，破碎后天麻粒径为6mm，熟化时间为10分钟；干燥温度为54℃，干燥180min。

对比例1

与实施例1不同的是，将步骤S1中的破碎成统一粒径大小与步骤S2中的常压下蒸制熟化顺序进行调换，即将40kg新鲜天麻经捡选、清洗后，先常压下蒸制熟化，同样蒸至透心即为熟化，本实施例中熟化时间为60分钟，再进行切制成统一粒径大小，干燥。

对比例2

结合附图2进行说明，本对比例使用现有技术中的天麻煮散饮片制备方法制备传统天麻煮散饮片，具体包括：将40kg新鲜天麻经捡选、清洗后，常压下蒸制熟化，60℃干燥72h后，洗净，再蒸软，纵切呈薄片状，再干燥，打碎成与实施例1相同粒径大小的颗粒，过筛完成传统天麻煮散饮片制备。

对比例3

与实施例1不同的是，粒径大小为20mm，由于粒径大于实施例1，本对比例中熟化至透心所用时间为25min。

对比例4

与实施例1不同的是，粒径大小包括1mm、6mm、10mm，1mm粒径天麻、6mm粒径天麻和10mm粒径天麻的质量比为1:1:1，为了便于与实施例1进行对比，本对比例的熟化时间为15min。

实施例1-实施例3和对比例1-对比例4均设3个平行。

实验1天麻煮散饮片中特征图谱的比较

(1)参照物溶液制备

取天麻对照药材约0.5g，置具塞锥形瓶中，加入50％甲醇25ml，超声处理(功率500W，频率40kHz)30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液。另取天麻素对照品、对羟基苯甲醇对照品适量，精密称定，加乙腈-水(3:97)混合溶液制成每1ml含天麻素50μg、对羟基苯甲醇25μg的混合溶液，即得，作为对照品参照溶液。

(2)供试品溶液制备

分别取实施例1～实施例3制得的三种天麻煮散饮片，打磨过四号筛，各取0.5g，按对照药材参照物溶液制备方法同法制成供试品溶液。

(3)色谱条件与系统适用性试验

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按表1中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.8ml；柱温为30℃；检测波长为220nm。理论板数按天麻素峰计算应不低于5000。

表1梯度洗脱条件

测定法分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，具体结果如附图3所示(其中a为实施例1、b为实施例2、c为实施例3、d为对照药材参照物)。供试品实施例1至实施例3的色谱中均呈现与对照药材参照物色谱中的6个特征峰相对应的特征峰，且与对照品参照物特征峰保留时间相一致，均符合药典规定。

实验2天麻煮散饮片中天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷C、巴利森苷E和香草醛的检测

(1)供试液制备

分别取实施例1～实施例3、对比例1～对比例4制得的天麻煮散饮片，研磨过三号筛，分别精密称取0.2g，将0.2g天麻煮散饮片置10ml容量瓶，加入70％乙醇至刻度线，室温超声提取60min，摇匀，用0.22μm的有机滤膜过滤，即得供试液。

(2)混合对照品溶液制备

分别称取天麻素2.83mg、对羟基苯甲醇1.29mg、对羟基苯甲醛1.59mg、巴利森苷C1.86mg、巴利森苷E 2.43mg、香草醛1.67mg。于10ml容量瓶中；加入10ml70％乙醇，超声溶解至澄清，用0.22μm的有机滤膜过滤，即得混合对照品溶液。

(3)天麻素等成分含量测定

采用赛默飞高效液相色谱进行天麻素含量测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05％磷酸溶液(3：97)为流动相；检测波长为220nm。理论板数按天麻素峰计算应不低于5000。

采用色谱柱Luna C18-HST(2.5μm，100×3.0mm)；流动相为流动相A(CH

表2UPLC-梯度洗脱表

按照以下公式计算结果：

含量(％)＝样品成分浓度/样品浓度*100％；

具体结果如表3所示，天麻素和对羟基苯甲醇等6种成分在实施例1～实施例3含量均高于对比例1～对比例4，其中实施例1中含量最高，可知本发明提供的天麻煮散饮片的制备方法显著提高了天麻煮散饮片的有效成分的含量，优于对比例的制备方法；在对比例中，除巴黎森苷E外，其他指标成分对比例3含量最高，对比例2最低。可知，本发明提供的天麻煮散饮片的制备方法当粒径过大时，也比传统天麻煮散饮片制备的效果要好。

通过将新鲜天麻破碎成统一粒径的工艺改进，减少干燥时间，减少蒸煮次数；通过热风循环烘干，保证物料受热均匀，提高了天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷C、巴利森苷E和香草醛的含量。

表3煮散饮片中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷C、巴利森苷E、对羟基苯甲醛、香草醛检测结果(n＝3)

实验3天麻煮散饮片中多糖成分的检测，步骤如下：

(1)对照品溶液的制备

取D-无水葡萄糖对照品10mg，精密称定，置10mL容量瓶中，加入纯化水溶解并稀释至刻度，摇匀，制成对照品储备液，其质量浓度为1.0mg/mL。

(2)供试品溶液的制备

分别取实施例1～实施例3、对比例1～对比例4制得的天麻煮散饮片打粉，过三号筛，精密称定1.0g，置圆底烧瓶中，加入样品重100倍体积的无水乙醇浸泡过夜，滤过，滤渣挥至无醇味，加入液料比50:1的纯化水，密塞摇匀，称定质量，超声(200W、40kHz)30min，称定质量，用蒸馏水补足减失的质量，回流提取3h，4000r/min离心10min，精密吸取上清液1mL，加3mL乙醇放于4℃冰箱沉淀12h，4000r/min离心10min，取白色沉淀，加纯化水定容至250mL容量瓶，精密吸取溶液1.0mL，分别加入5％苯酚溶液1.0mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸溶液5.0mL，摇匀后，放置10min，置沸水浴中加热15min，取出，冷却至室温，在490nm处测其吸光度，按回归方程求出各供试品溶液中天麻多糖的含量。

1.标准曲线的绘制

精密量取对照品溶液0.0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL，各加水至1.0mL，摇匀，再分别加入5％苯酚溶液1.0mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸溶液5.0mL，摇匀后，放置10min，置沸水浴中加热15min，取出，放冷，以0.0mL作为空白对照，用苯酚-硫酸法在490nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标、质量浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为Y＝0.0055X+0.0125，R

按照以下公式计算天麻多糖含量(mg/g)：

具体结果如表4所示，实施例1～实施例3的多糖成分均含量高于对比例1～对比例4，其中，实施例1含量最高；在对比例中，对比例3含量最高，对比例2最低，多糖成分含量的结果趋势与实验2的结果趋势相同。可知，本发明提供的天麻煮散饮片的制备方法显著提高了天麻煮散饮片的多糖含量，优于对比例的制备方法。

表4天麻煮散饮片中多糖成分的检测结果

实验4不同粒径天麻煮散饮片批内质量差异实验检测

实验样品制备：取实施例1三个平行制备的样品，设置为1-a，1-b，1-c；

对比例样品制备：分别取对比例4制备的3个平行的样品，设置为2-a，2-b，2-c。

按2020版《中国药典》天麻项下含量测定方法，检测实验样品和对比例样品中的天麻素、对羟基苯甲醇总量测定，对比批内质量差异结果。

按照以下公式计算天麻素、对羟基苯甲醇含量：

含量(％)＝样品成分浓度/样品浓度*100％；

具体结果如表5所示，实施例1制得的天麻快速制备煮散饮片批内质量差异小于对比例4的批内质量差异，故将天麻趁鲜切制成统一粒径可以有效的减少批内质量差异。

表5不同粒径快制备煮散饮片中天麻素和对羟基苯甲醇检测结果(n＝3)

实验5天麻煮散饮片在药理学上差异的醋酸扭体镇痛实验

1.动物分组及给药

SPF级昆明小鼠64只，雌雄各半，随机分组8组，分别为空白组、快速制备煮散饮片高剂量组、快速制备煮散饮片中剂量组、快速制备煮散饮片低剂量组，传统制备煮散饮片高剂量组、传统制备煮散饮片中剂量组、传统制备煮散饮片低剂量组，阳性对照组。连续给药七天。

其中快速制备煮散饮片为实施例1制备的煮散饮片，传统制备煮散饮片为对比例2制备的煮散饮片，空白组为使用0.2mL/20g生理盐水，阳性对照组为给予30mg/kg的罗通定进行灌胃。高剂量指煮散饮片用量为1.0g/kg，中剂量指煮散饮片用量为0.5g/kg，低剂量指煮散饮片用量为0.25g/kg。

2、醋酸扭体实验

末次给药后0.5h，小鼠腹腔注射0.6％醋酸溶液，每只0.2mL/20g，记录15min之内各组的小鼠扭体次数以及潜伏时间；扭体判断依据(腹部内凹、躯干与后肢伸张、臀部高起)实验结果如图4所示，在醋酸扭体镇痛实验中，快速制备煮散饮片高剂量组组扭体次数显著低于传统制备煮散饮片高剂量组，并且具有统计学意义(P<0.01)。

潜伏时间结果如图5所示，在醋酸扭体镇痛实验中，在高剂量组(1g/kg)和中剂量组(0.5g/kg)中，快速制备煮散组的镇痛潜伏时间是高于传统制备煮散饮片组的，并且在高剂量组具有明显的统计学意义(P<0.01)。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。