复合植物肽粉、制备方法及其用途

技术领域

本发明涉及食品及食品加工技术领域，具体涉及一种复合植物肽粉、制备方法及其用途。

背景技术

植物蛋白资源来源丰富，具有产量高、价格低的优势，通过酶法水解植物蛋白制备植物蛋白肽粉，符合现代食品生物工业的发展要求，具有广阔的应用前景。植物性肽粉是植物蛋白的水解产物，经后续处理、精炼后得到的低肽混合物，具有抗菌、抗疲劳、抗氧化、调节免疫、血管紧张素转换酶抑制作用等众多的生理活性，被广泛应用在保健品、功能饮料、功能食品及医用食品领域，是当今保健食品和生物医药领域的研究热点之一。目前对植物肽粉的研究多集中在其生物功效与作用方面，而对其安全、物理性质指标的研究还较少。

目前市场上的复合植物肽粉大多数存在溶解于水后得到的乳液不均匀、不稳定，放置一会即出现分层现象，肽粉的营养成分比较单一，因此开发一种能解决上述技术难题的复合植物肽粉是非常必要的。

发明内容

针对上述现有技术中存在的不足，本发明提供了一种复合植物肽粉、制备方法及其用途。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

一种复合植物肽粉，其特征在于，由以下重量份组成：核桃肽粉40-60份、大豆肽粉10-30份、甜味剂1-2份、膳食纤维2-5份。

其中核桃肽粉中不仅含有丰富的磷脂、蛋白质、各种有机酸、对大脑系统的运转都有一定的促进作用，维生素E能够润滑肌肤，使得肌肤具有弹性；而且还含有大量人体必需的营养素，微量元素和抗氧化物质，不仅能够增加免疫力，延缓衰老，还能降低老人常见的三高“高血糖、高血压、高胆固醇”，更对心脏有着一定的保护作用。大豆肽粉作为一种新型多功能营养配料，含有多种生物活性肽，具有多种生理活性，包括抗氧化、降血压、降低胆固醇、降血脂、抗疲劳、增强免疫等。添加甜味剂可以有效降低核桃中微苦味，膳食纤维可以丰富复合植物肽粉的营养，预防因饮食不平衡所引起的维生素缺乏。膳食纤维可促边人体内血脂和脂蛋白的代谢，降低脂类的吸收水平，降低血脂浓度和血液粘度，保持血管通畅，防止和减缓动脉硬化和心脑血管的发病率。膳食纤维还能吸附胆固醇，阻止其被人体吸收，减少胆固醇在体内的生成量，从而降低了血胆固醇的含量，膳食纤维还能影响碳水化合物的吸收，使人不容易产生饥饿感。

一种复合植物肽粉，所述核桃肽粉由以下方法制备而成：

S1、选料：挑选饱满的、无霉变、无虫蛀、不溢油的核桃，除去核桃壳及其杂质，得核桃仁；

S2、去皮：在上述核桃仁中加入核桃仁重量2-3倍的碱液浸泡5-10min，浸泡温度为60-80℃，用核桃仁重量3-5倍的纯净水清洗，将核桃仁放入烘箱内烘烤，烘烤温度为80-100℃，时间为40-60min，烘烤后去皮，得去皮核桃仁；所述碱液为含有CaCl

S3、磨浆：将S2中的核桃仁和核桃仁质量2-5倍的纯净水混合，放入粉碎机粉碎打浆，粉粹机转速为1000-1200转/分，打浆时间为3-5min，过100-500目筛，得浆液；

S4、酶解：向浆液中加入浆液重量0.2-1％的蛋白酶，用浓度为1-3mol/L的碳酸钠调节PH＝7-8，温度为45-60℃下酶解30-60min，得酶解液；

S5、灭酶：将上述酶解液煮沸5-10min进行灭酶，冷却，以转速为3000-5500rpm进行离心15-30min，弃沉淀，取上清液；

S6、均质：将上清液：稳定剂：乳化剂按质量比为(80-90)：(1.5-5)：(5-10)混合，在压力为15-25MPa、均质温度为25-35℃下第一次均质15-30min，将压力为40-60MPa、均质温度为25-35℃下第二次均质5-15min，得到均质液；

S7、真空浓缩：将上述均质液在浓缩温度60-80℃，真空度0.05-0.08MPa，浓缩速度3.5-5L/h进行浓缩，使浓缩液为浓缩前体积的20-40％，即得浓缩液；S8、喷雾干燥：在进口温度180℃±20℃，出口温度为80℃±20℃，热风风速为3-5m

本发明中的发明构思之一是在酶解过程中加超高压协同酶解，提高酶解的效率，同时又不会破坏酶和底物的物质结构，其原因是超高压处理酶，可以影响蛋白质的结构和性质，也会影响蛋白质的酶解过程，蛋白质经过超高压处理后，结构会发生伸展，变得松散，暴露出更多的蛋白酶结合位点，使酶和底物的接触几率变大，有利于酶解反应的进行，同时提高酶效率并获得更具活性的肽物质，有利于提高植物肽粉分散性，进而提高溶解性。

其次，因为压力的存在能够促进蛋白与酶的结合，同时促进了酶与产物复合物的分离。经过高压处理后的核桃蛋白分离物，疏水基团和SH基团暴露出来，在压力释放后，它们又参与新的疏水作用形成新的二硫键，使蛋白重新发生聚合。因此，适当的超高压可以促进蛋白酶和底物的结合，并提高酶水解的效率，进一步提高植物肽粉分散性，进而提高溶解性。

优选的，所述核桃肽粉由以下方法制备而成：

S1、选料：挑选饱满的、无霉变、无虫蛀、不溢油的核桃，除去核桃壳及其杂质，得核桃仁；

S2、去皮：在上述核桃仁中加入核桃仁重量2-3倍的碱液浸泡5-10min，浸泡温度为60-80℃，用核桃仁重量3-5倍的纯净水清洗，将核桃仁放入烘箱内烘烤，烘烤温度为80-100℃，时间为40-60min，烘烤后去皮，得去皮核桃仁；所述碱液为含有CaCl

S3、磨浆：将S2中的核桃仁和核桃仁质量2-5倍的纯净水混合，放入粉碎机粉碎打浆，粉粹机转速为1000-1200转/分，打浆时间为3-5min，过400目筛，得浆液；

S4、酶解：向浆液中加入浆液重量0.2-1％的蛋白酶，用浓度为1-3mol/L的碳酸钠调节PH＝7-8，在超高压300-500MPa，温度为45-60℃下超高压酶解30-60min，得酶解液；

S5、灭酶：将上述酶解液煮沸5-10min进行灭酶，冷却，以转速为3000-5500rpm进行离心15-30min，弃沉淀，取上清液；

S6、均质：将上清液：稳定剂：乳化剂按质量比为(80-90)：(1.5-5)：(5-10)混合，在压力为15-25MPa、均质温度为25-35℃下第一次均质15-30min，在再压力为40-60MPa、均质温度为25-35℃下第二次均质5-15min，得到均质液；

S7、真空浓缩：将上述均质液在浓缩温度60-80℃，真空度0.05-0.08MPa，浓缩速度3.5-5L/h进行浓缩，使浓缩液为浓缩前体积的20-40％，即得浓缩液；S8、喷雾干燥：在进口温度180℃±20℃，出口温度为80℃±20℃，热风风速为3-5m

所述蛋白酶为胰蛋白酶、风味蛋白酶中的任一种或两种混合物组成。

优选的，所述蛋白酶由胰蛋白酶和风味蛋白酶二种酶混合而成，所述胰蛋白酶和风味蛋白酶的质量比为(1-3)：(1-5)。

本发明的构思之二是在均质得过程中加入乳化剂和稳定剂，提高复合植物肽粉的溶解性和稳定性，同时还可以提高植物肽粉的组织状态、口感。乳化剂采用特定方法制备的改性大豆磷脂，以乙酸、双氧水、大豆磷脂为主要原料，在超声的情况下，乙酸和双氧水反应生成过氧乙酸，过氧乙酸再与大豆磷脂发生环氧化反应，得到环化大豆磷脂，由于环化大豆磷脂分子内存在三元环，因此，分子的张力很大，化学性质活泼，在加入碱作为催化剂的情况下，加热很容易与聚乙二醇发生开环反应，得到具有羟基化乙氧基化双重改性大豆磷脂。由于聚乙二醇也是易溶于水的乳化剂，二者协同效应，因此所制备得到的双重改性大豆磷脂的分散性、乳化性得到显著提高，从而提高复合肽粉的稳定性和溶解性。另外，由于风味蛋白酶能够不同程度地脱除低水解度产物——苦味蛋白水解液的苦味，增进和改善水解液的风味。因此在多酶水解的基础上加入风味蛋白酶不仅能发挥其中内肽酶的作用，还能利用端解酶来改善水解液的苦味。稳定剂采用黄原胶，因其亲水性高，易溶于水，黄原胶是具有良好的悬浮、乳化、稳定性于一体，可进一步提高复合植物肽粉稳定性和溶解性。

所述乳化剂为大豆磷脂或改性大豆磷脂，优选的，所述乳化剂为改性大豆磷脂。

所述改性大豆磷脂由以下方法制备而成：

S1、将4-8重量份大豆卵磷脂、0.5-2重量份质量分数60-80％的乙酸、4-8重量份质量分数20-30％的双氧水均匀混合，在室温下搅拌3-10min，置于200-300W的超声波清洗器中，常温下反应20-50min，反应结束后，加入0.5-4mol/L的KOH进行直至溶液显中性，在旋转温度为50-70℃、旋转速度80-120rpm的旋转蒸发仪中脱水1-5h，在45-70℃下干燥0.5-3h，得到改性大豆磷脂；

优选的，所述所述改性大豆磷脂由以下方法制备而成：

S1、将4-8重量份大豆卵磷脂、0.5-2重量份质量分数60-80％的乙酸、4-8重量份质量分数20-30％的双氧水均匀混合，在室温下搅拌3-10min，置于200-300W的超声波清洗器中，常温下反应20-50min，反应结束后，加入0.5-4mol/L的KOH进行直至溶液显中性，在旋转温度为50-70℃、旋转速度80-120rpm的旋转蒸发仪中脱水1-5h，在45-70℃下干燥0.5-3h，得到固体粉末；

S2、将上述固体粉末、聚乙二醇-400、0.5-4mol/L的KOH于水浴温度60-90℃下反应3-6h，冷却至室温，加入与固体粉末质量相同的无水碳酸钠，搅拌1-3h，反应结束后，得混合液，加入混合液质量1-3倍的无水乙醇，在转速为7000-9000rpm下离心20-50min，在50-70℃下干燥20-30h，得到改性大豆磷脂；所述固体粉末、聚乙二醇-400、0.5-4mol/L的KOH的质量比为(1-2)：(1-2):(0.01-0.1)。

所述的稳定剂为瓜尔豆胶、黄原胶、海藻酸钠中的一种或两种以上混合物，优选的，所述稳定剂为黄原胶。

所述甜味剂为山梨糖醇、麦芽糖醇、三氯蔗糖、阿斯巴甜中的一种或两种以上混合物。

所述膳食纤维为水溶性膳食纤维。

一种所述复合植物肽粉的制备方法：按比例称取核桃肽粉、大豆肽粉、甜味剂、膳食纤维，均匀混合，即得复合植物肽粉。

一种复合植物肽粉在免疫力低下人群的保健品及食品中的应用。

本发明的有益效果：本发明提供一种蛋白质含量高，溶解性好、核桃风味突出的高营养价值复合植物肽粉。本发明配方中主要以核桃为主，以大豆肽粉为辅料，使产品的口感更饱满醇厚，不添加色素和香精，产品更天然，同时添加乳化剂和稳定剂以改善产品的溶解性，另外，膳食纤维的添加以丰富肽粉的营养价值。本发明在营养价值方面增加了核桃和膳食纤维，提高了蛋白质含量，丰富了产品营养价值；在加工工艺方面优化工艺参数以改善产品的口感及溶解性能；特别是为老人和儿童提供一种有益于身体健康、增加营养的方便保健食品。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的上述发明内容作进一步的详细描述，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。

本申请中部分原料的介绍：

实施例中核桃购于大姚广益发展有限公司，产品标准号：GB/T 22165。

实施例中核桃肽粉购于北京太爱肽生物工程技术有限公司，食品级，货号：YF020006-4。

实施例中的纯净水购于乐开怀食品专营店，商品编号：43537195716。

实施例中大豆肽粉购于南京熙美诺生物科技有限公司，食品级，有效物质含量：99％，货号：052。

实施例中大豆磷脂购于河南开济贸易有限公司，食品级，货号：04。

实施例中胰蛋白酶采购于南宁东恒华道生物科技有限责任公司，酶活力为4000U/g的食品级胰蛋白酶，有效物质含量：95％，型号：A003，货号：4-10。

实施例中风味蛋白酶购于陕西晨明生物科技有限公司，酶活力为30000U/g的食品级风味蛋白酶，酶活力保存率：99％，有效物质含量：99％，货号：sdxaw。

实施例中聚乙二醇-400购于苏州源泰润化工有限公司，货号：VK001，食品级，含量：99％。

实施例中山梨糖醇购于湖南千荣食品配料有限公司，货号：87698，食品级，有效物质含量：99％。

实施例中水溶性膳食纤维购于郑州塔伯商贸有限公司，货号：TB-0181，食品级，有效物质含量：99％。

实施例1

一种复合植物肽粉，由以下重量份原料组成：核桃肽粉50份、大豆肽粉20份、甜味剂1.5份、膳食纤维3份。

所述甜味剂为山梨糖醇；所述膳食纤维为水溶性膳食纤维；

所述核桃肽粉由以下方法制备而成：

S1、选料：挑选饱满的、无霉变、无虫蛀、不溢油的核桃，除去核桃壳及其杂质，得核桃仁；

S2、去皮：在上述核桃仁中加入核桃仁重量2倍的碱液浸泡8min，浸泡温度为65℃，用核桃仁重量4倍的纯净水清洗，将核桃仁放入烘箱内烘烤，烘烤温度为85℃，时间为45min，烘烤后去皮，得去皮核桃仁；所述碱液为含有CaCl

S3、磨浆：将S2中的核桃仁和核桃仁质量3倍的纯净水混合，放入粉碎机粉碎打浆，粉粹机转速为1100转/分，打浆时间为4min，过400目筛，得浆液；

S4、酶解：向浆液中加入浆液重量0.5％的蛋白酶，用浓度为2mol/L的碳酸钠调节PH＝7.4，在温度为50℃下酶解50min，得酶解液；所述蛋白酶为胰蛋白酶；

S5、灭酶：将上述酶解液煮沸8min进行灭酶，冷却，以转速为4000rpm进行离心20min，弃沉淀，取上清液；

S6、将上清液：稳定剂：乳化剂按质量比为90：2：8混合，在压力为20MPa、均质温度为30℃下第一次均质30min，再在压力为50MPa、均质温度为30℃下第二次均质10min，得到均质液，所述乳化剂为大豆磷脂，所述稳定剂为黄原胶；

S7、真空浓缩：将上述均质液在浓缩温度70℃，真空度0.06MPa，浓缩速度4.5L/h进行浓缩，使浓缩液为浓缩前体积的20％，即得浓缩液；

S8、喷雾干燥：在进口温度180℃，出口温度为80℃，热风风速为4m

所述复合植物肽粉的制备方法如下：将50重量份核桃肽粉、20重量份大豆肽粉、1重量份甜味剂、3重量份膳食纤维混合均匀，即得复合植物肽粉。

实施例2

与实施例1基本相同，其区别在于S4的酶解过程不同，所述S4的酶解：向浆液中加入浆液重量0.5％的蛋白酶，用浓度为2mol/L的碳酸钠调节PH＝7.4，在超高压力为400MPa，温度为50℃下超高压酶解50min，得酶解液；所述蛋白酶为胰蛋白酶。

对比例1

与实施例1基本相同，其区别在于S4的酶解过程不同，所述S4的酶解：将浆液用浓度为2mol/L的碳酸钠调节PH＝7.4，在超高压力为400MPa，温度为50℃下处理50min，得酶解液。

实施例3

与实施例2基本相同，其区别在于S4的酶解过程不同，所述S4的酶解：向浆液中加入浆液重量0.5％的蛋白酶，用浓度为2mol/L的碳酸钠调节PH＝7.4，在超高压力为400MPa，温度为50℃下超高压酶解50min，得酶解液；所述蛋白酶为风味蛋白酶。

实施例4

与实施例2基本相同，其区别在于S4的酶解过程不同，所述S4的酶解：向浆液中加入浆液重量0.5％的蛋白酶，用浓度为2mol/L的碳酸钠调节PH＝7.4，在超高压力为400MPa，温度为50℃下超高压酶解50min，得酶解液；所述蛋白酶由胰蛋白酶、风味蛋白酶按质量比1:2组成的混合物。

实施例5

一种复合植物肽粉，由以下重量份原料组成：核桃肽粉50份、大豆肽粉20份、甜味剂1.5份、膳食纤维3份。

所述甜味剂为山梨糖醇；所述膳食纤维为水溶性膳食纤维；

所述核桃肽粉由以下方法制备而成：

S1、选料：挑选饱满的、无霉变、无虫蛀、不溢油的核桃，除去核桃壳及其杂质，得核桃仁；

S2、去皮：在上述核桃仁中加入核桃仁重量2倍的碱液浸泡8min，浸泡温度为65℃，用核桃仁重量4倍的纯净水清洗，将核桃仁放入烘箱内烘烤，烘烤温度为85℃，时间为45min，烘烤后去皮，得去皮核桃仁；所述碱液为含有CaCl

S3、磨浆：将S2中的核桃仁和核桃仁质量3倍的纯净水混合，放入粉碎机粉碎打浆，粉粹机转速为1100转/分，打浆时间为4min，过400目筛，得浆液；

S4、酶解：向浆液中加入浆液重量0.5％的蛋白酶，用浓度为2mol/L的碳酸钠调节PH＝7.4，在超高压力为400MPa，温度为50℃下超高压酶解50min，得酶解液；所述蛋白酶由胰蛋白酶和风味蛋白酶的按质量比为1:2组成的混合物；

S5、灭酶：将上述酶解液煮沸8min进行灭酶，冷却，以转速为4000rpm进行离心20min，弃沉淀，取上清液；

S6、将上清液：稳定剂：乳化剂按质量比为90：2：8混合，在压力为20MPa、均质温度为30℃下第一次均质30min，再在压力为50MPa、均质温度为30℃下第二次均质10min，得到均质液；

S7、真空浓缩：将上述均质液在浓缩温度70℃，真空度0.06MPa，浓缩速度4.5L/h进行浓缩，使浓缩液为浓缩前体积的20％，即得浓缩液；

S8、喷雾干燥：在进口温度180℃，出口温度为80℃，热风风速为4m

所述稳定剂为黄原胶，所述乳化剂为改性大豆磷脂；

改性大豆磷脂由以下方法制备而成：S1、将5重量份大豆卵磷脂、1重量份质量分数75％的乙酸、6重量份质量分数25％的双氧水均匀混合，在室温下搅拌3min，置于250W的超声波清洗器中，常温下反应30min，反应结束后，加入2mol/L的KOH进行直至溶液显中性，在旋转温度为60℃、旋转速度100rpm的旋转蒸发仪中脱水2h，在60℃下干燥1h，得到固体粉末；

S2、将上述固体粉末、聚乙二醇-400、2mol/L的KOH于水浴温度80℃下反应3.5h，冷却至室温，加入与固体粉末质量相同的无水碳酸钠，搅拌1h，反应结束后，得混合液，加入混合液质量2倍的无水乙醇，在转速为8000rpm下离心30min，在60℃下干燥24h，得到改性大豆磷脂；所述固体粉末、聚乙二醇-400、2mol/L的KOH的质量比为1:1.2:0.01。

所述复合植物肽粉的制备方法如下：将50重量份核桃肽粉、20重量份大豆肽粉、1重量份甜味剂、3重量份膳食纤维混合均匀，即得复合植物肽粉。

对比例2

与实施例5基本相同，其区别在于所述改性大豆磷脂的制备方法不同；

改性大豆磷脂由以下方法制备而成：S1、将5重量份大豆卵磷脂、1重量份质量分数75％的乙酸、6重量份质量分数25％的双氧水均匀混合，在室温下搅拌3min，置于250W的超声波清洗器中，常温下反应30min，反应结束后，加入2mol/L的KOH进行直至溶液显中性，在旋转温度为60℃、旋转速度100rpm的旋转蒸发仪中脱水2h，在60℃下干燥1h，得到改性大豆磷脂。

对比例3

所述复合植物肽粉的制备方法如下：将50重量份市售核桃肽粉、20重量份大豆肽粉、1.5重量份甜味剂、3重量份膳食纤维混合均匀，即得复合植物肽粉；

所述甜味剂为山梨糖醇；所述膳食纤维为水溶性膳食纤维。

测试例1

感官评价标准：分别取实施例1-4制得的植物肽粉分发给100人进行感官评价测试，随机分成4组，评价者根据自己的喜好对其进行评价，且对结果的评价主要根据不同职业或不同年龄段的人进行感官评价。将感官评价分为3个不同的等级，评价者根据自己的喜好对其进行评价，结果见表一的评价标准和表二的评价结果。

表一、评价标准

表二、感官评价

可见，加入采用复合蛋白酶协同超高压酶解可以提高复合植物肽粉的组织状态、色泽及风味，更受大众喜爱，原因是加入的乳化剂和稳定剂具有增稠、乳化的作用，可以改善口感，提高柔软性。同时由于风味蛋白酶能够不同程度地脱除低水解度产物-苦味蛋白水解液的苦味，增进和改善水解液的风味。因此在多酶水解的基础上加入风味蛋白酶不仅能发挥其中内肽酶的作用，还能利用端解酶来改善水解液的苦味。

测试例2

将营养植物肽粉置于温度为25±1℃、相对湿度为60±5％的环境下密封保存6个月后进行测试。

1、稳定性测试：参考河南工业大学学报(自然科学版)《大豆分离蛋白和浓缩蛋白乳液体系稳定性的比较》中的1.2.3.1乳状液稳定系数进行测试：在2mL圆底离心管中准确加入2mL乳状液，以400rpm离心30min，在距离心管底部1cm处取样，采用浊度法测定吸光度(A

2、溶解度测试：复合植物肽粉溶解度的测定按以下方法进行：称取1g喷雾干燥后的复合植物肽粉，加入50mL水，在室温25℃下搅拌1h，取部分上清液于10000×g下离心15min，再参考GB/T 5009.5-2016《食品安全国家标准食品中蛋白质的测定》中的第一法凯氏定氮法进行测试，蛋白的溶解度计算公式为：(上清液蛋白浓度/全溶液中蛋白浓度)×100％，平行测试5组，取平均值。

表三、稳定性和溶解度测试

可见，比较实施例1和实施例2和对比例1、3，市售的核桃肽粉的溶解性和稳定性明显低于本发明制备的核桃肽粉的溶解性和稳定性。同时发现酶解过程中加超高压协同酶解，提高酶解的效率，其原因是超高压处理酶，可以影响蛋白质的结构和性质，也会影响蛋白质的酶解过程，蛋白质经过超高压处理后，结构会发生伸展，变得松散，暴露出更多的蛋白酶结合位点，使酶和底物的接触几率变大，有利于酶解反应的进行，同时提高酶效率并获得更具活性的肽物质，有利于提高植物肽粉分散性，进而提高溶解性。比较实施例2-4可知，加入复合酶能够进一步提高植物肽粉的溶解性和稳定性能，因为压力的存在能够促进蛋白与酶的结合，同时促进了酶与产物复合物的分离。经过高压处理后的核桃蛋白分离物，疏水基团和SH基团暴露出来，在压力释放后，它们又参与新的疏水作用形成新的二硫键，使蛋白重新发生聚合。因此，适当的超高压可以促进蛋白酶和底物的结合，并提高酶水解的效率，进一步提高植物肽粉分散性，进而提高溶解性。

进一步比较实施例4-5和对比例2，加入改性大豆磷脂的溶解性和稳定性显著提高，其原因是聚乙二醇和大豆磷脂均是易溶于水的乳化剂，二者协同效应，因此所制备得到的双重改性大豆磷脂的分散性、乳化性得到显著提高，从而提高复合肽粉的稳定性和溶解性。稳定剂采用黄原胶，因其亲水性高，易溶于水，黄原胶是具有良好的悬浮、乳化、稳定性于一体，可进一步提高复合植物肽粉稳定性和溶解性。

以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。