香草精油提取物的制造方法及包括香草精油提取物的化妆品组合物

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年07月02日提交的韩国专利申请No.10-2019-0079260的优先权和权益，其通过引用合并于此用于所有目的，如同在此完全阐述一样。

技术领域

本发明涉及一种香草精油提取物的制造方法及包括香草精油提取物的化妆品组合物，更具体地，涉及一种具有优异的药理活性且皮肤稳定性显著提高的香草精油提取物的制造方法及通过其方法制造的包括香草精油提取物的化妆品组合物。

背景技术

由于高度的药理活性和微弱的毒性，包括香草植物的药用植物从很久以前就使用于治疗目的。这种生理活性基于称为植物化学成分(phytochemical)或生物碱的酚类化合物类的(David O.Kenedy,Advanced in nutrition,2011)。通常，通过对芳香性的香草植物使用有机溶剂执行索氏提取、压榨提取、冷浸提取、温浸提取或超临界提取工艺而获得的精油是芳香疗法的主要手段(大韩民国公开专利第0038962号、大韩民国注册专利第1437221号)。在古代埃及的木乃伊制作过程中已经广泛使用为防腐剂的精油带着各种植物特有的功效以各种方式使用为能够给人类带来治愈的物质，尤其广泛地应用于包括皮肤疾病的各种感染性疾病。已知，这些精油除了精油成分之外还由于芳香性挥发成分和丁香酚及苯丙素、木酚素、麻黄碱、咖啡因、吲哚、氨基丁酸(GABA；gamma-aminobutyric acid)、姜黄素、香豆素和萜烯分具有药理功能。

目前，在皮肤管理领域也使用精油的香和组分以改善皮肤状态，且对具有抗菌及抗氧化效果的精油进行研究以使用用于问题皮肤管理的精油。尤其是，有报告墨角兰与相同浓度的酚相比对金黄葡萄球菌(Staphylococcus aureus)具有三倍或更高的抗菌效果，也有报告指出，百里香、肉桂皮及牛至等具有极高的抗菌性(J.V.Loveti,J.Chem.Ecol.,1989)。并且，有报告指出涂抹熏衣草的小鼠在UVB照射后产生的活性氧少且可以由活性氧解毒系酶迅速地消除，由此确认精油具有抗氧化效果(R.H.Whittaker,Science,1971)。

然而，有报告指出具有高抗菌力的精油在精油组分中还包括可能刺激皮肤的组分。对肉桂皮油而言，有报告指出占精油成分整体组成的50％以上的肉桂醛(cinnamicaldehyde)虽然具有强力的抗菌力，与此相反，也可能对皮肤引起刺激且引发过敏反应。

并且，包括在百里香和牛至的精油组分中的百里香酚(thymol)和香芹酚(carvacrol)组分尽管具有强力的抗菌特性但分类为对皮肤和粘膜引起刺激，因此有劝告使用时要以低浓度使用(康学永，韩国林业能源学报，1999)。

并且，由于溶解度低且含量少，从精油中提取这种植物营养素组分是困难的。因此，公开有使用有机溶剂提高药用成分的溶解度的方法、制造成离子化盐的形式的方法、调节pH的方法、使用脂质体或微型乳剂、环式糊精等分子运输体对难溶性组分进行可溶化的技术方法等(大韩民国注册专利第1495036号、大韩民国注册专利第1897147号)。然而，这些技术改变药用成分的物理、化学性质或表现出选择性可溶化现象，并且，由于结构上的限制，不能获得易于制剂化的形式的活性成分。

如上所述，更需要开发一种新型的提取方法，其降低香草植物所具有的皮肤过敏毒性，因对皮肤没有刺激而安全，能够制造易于制剂化的形式的提取物。

[现有技术文献]

[专利文献]

(专利文献0001)大韩民国注册专利公报第10-1495036号

(专利文献0002)大韩民国注册专利公报第10-1897147号

发明内容

本发明用于解决如上所述的问题，其目的在于提供一种药理活性优异且皮肤稳定性极为提高的香草精油提取物的制造方法及一种包括通过该方法制造的包括香草精油提取物的化妆品组合物。

本发明的所述的和其他目的及优点根据描述优选实施例的以下说明变得明显。

所述目的是可以通过香草精油提取物的制造方法到达的，所述方法包括：第一步骤，其中混合香草精油和粉末吸附剂来使香草精油吸附于粉末吸附剂；第二步骤，其中在吸附于粉末吸附剂的香草精油中添加溶剂并混合来制造香草精油混合物；以及第三步骤，其中通过过滤香草精油混合物来获取香草精油提取物。

在第一步骤中的香草精油可以是选自柠檬草、百里香、柠檬、橙子、酸橙、佛手柑、鼠尾草、迷迭香、荷兰芹、艾、蒲公英、人参、薄荷、熏衣草、雏菊、金盏花、蒜、莳萝、银杏树、报春花、玫瑰、接骨木花、扁柏、甘菊、葡萄柚、桉树及胡椒薄荷中的至少一种精油。

在第一步骤中的粉末吸附剂可以是选自滑石粉、绢云母、环式糊精及二氧化硅中的至少一种。

在第二步骤中的溶剂可以是选自纯净水、乙醇、甘油、丙二醇、二丙二醇、丁二醇及戊二醇中的至少一种。

相对于总100重量％，在第二步骤中的香草精油混合物可以包括香草精油1.0重量％至90.0重量％、粉末吸附剂0.1重量％至50.0重量％及溶剂0.01重量％至90.0重量％。

并且，所述目的是使用包括通过所述方法制造的香草精油提取物作为有效成分的化妆品组合物实现的。

相对于化妆品组合物的总100重量％，可以包括0.1重量％至30重量％的香草精油提取物。

化妆品组合物的剂型可以是可溶化产品、乳化产品及分散产品中的至少一种。

附图说明

图1为概略地图示根据本发明一实施例的香草精油提取物的制造方法的图。

图2为图示实施例1和比较例1的高效液相色谱法结果的图表。

具体实施方式

以下，参照本发明的实施例和附图详细描述本发明。这些实施例仅是为了更具体地描述本发明而示例性地提示的，本公开的范围不限于这些实施例是对本领域的普通技术人员是显而易见的。

并且，除非另有定义，否则在本说明书中使用的所有技术和科学术语的意义与由本发明所属的技术领域的技术人员通常理解的意义相同，若有冲突，包括定义的本说明书中的记载为优先。

在附图中，将与描述无关的部分省略以明确说明所提示的发明，在整个说明书中，对相似的部分使用相似的符号。并且，当有个部分“包括”有个组成要素，除非另有相反的记载，否则这是指可以进一步包括其他组成要素，而不是排除其他组成要素。并且，在说明书中描述的“部”是指用于执行特定功能的一个单位或块。

在各步骤中，识别符号(第一、第二等)仅用于说明上的便宜而不是描述各步骤的顺序，除非在上下文中明确记载特定顺序，否则可以以与所记载的顺序不同的顺序实施各步骤。换言之，各步骤以与所记载的顺序相同的顺序实施，可以实质上与记载的顺序同时实施，也可以与记载的顺序相反的顺序实施。

图1为概略地图示根据本发明一实施例的香草精油提取物的制造方法的图。参照图1描述，根据本发明一实施例的香草精油提取物制造方法包括：混合香草精油和粉末吸附剂来使香草精油吸附于粉末吸附剂的第一步骤；在吸附于粉末吸附剂的香草精油中添加溶剂且进行混合来制造香草精油混合物的第二步骤；及过滤香草精油混合物来获取香草精油提取物的第三步骤。在此，精油是指从芳香性药用植物提取的具有固有的香和杀菌、镇静、弛缓等治愈功效的高浓度的天然植物性油，香草精油是指从香草植物提取的精油。

本发明不使用现有的通常提取方法(有机溶剂及升温、加压、超声波处理等物理方法)而使用固定相的粉末吸附剂和流动相的提取溶剂之间的连续分配现象来从香草精油中有效地提取具有药理活性的芳香性挥发成分和非水溶性植物营养素成分，从而可以制造具有优异的药理活性且皮肤稳定性显著提高的香草精油提取物。进而，所提取的组分具有在提取物内被稳定地分散且使用于各种用途和剂型的化妆品组合物的效果。

通常，可以使用有机溶剂通过索氏提取、压榨提取、冷浸提取、温浸提取或超临界提取工艺从芳香性香草植物获取精油，所述精油使用为方向治疗的主要道具。然而，在单纯地直接使用香草精油本身时，虽然在活体外显示一部分的柔软作用，但在将精油应用于皮肤外用剂时存在其效果实质上并不令人满意且引起皮肤毒性过敏的问题。并且，香草精油具有由于柠檬烯、萜烯、樟脑、苯基乙醇等的精油成分不易于使用为化妆品的问题，还具有油酸等不饱和成分导致产品容易被氧化或变质而难以获得稳定的化妆品的缺点。为了解决如上所述的问题，本发明在混合固定相的粉末吸附剂和流动相的提取溶剂后使用连续的分配工艺制造了香草精油提取物，从而不但具有优异的药理效果还具有使用于各种化妆品组合物作为皮肤外用剂的效果。

第一步骤是混合香草精油和粉末吸附剂来使香草精油吸附于粉末吸附剂的步骤，首先，将香草精油与固定相的粉末吸附剂混合且进行吸附。此时，选自柠檬草、白里香、柠檬、橙子、酸橙、佛手柑、鼠尾草、迷迭香、荷兰芹、艾、蒲公英、罗勒、人参、薄荷、熏衣草、雏菊、金盏花、蒜、莳萝、银杏树、报春花、玫瑰、接骨木花、扁柏、甘菊、葡萄柚、桉树及胡椒薄荷中的至少一种可以使用为香草精油。并且，选自滑石粉、绢云母、环式糊精和二氧化硅中的至少一个可以被使用为粉末吸附剂(粉状吸附剂)，但不限于此。

第二步骤是在吸附于粉末吸附剂的香草精油中加入溶解并进行混合来制造香草精油混合物的步骤，即在吸附于固定相粉末吸附剂的香草精油加入流动相的各种极性的提取溶剂进行混合的步骤。此时，提取溶剂可以是选自纯净水、乙醇、甘油、丙二醇、二丙二醇、丁二醇及戊二醇中的至少一种，但不限于此。

只有以适合的含量混合香草精油、粉末吸附剂和溶剂才能有效地获得香草精油提取物，以总100重量％为准，优选包括1.0重量％至90.0重量％的香草精油、0.1重量％至50.0重量％的粉末吸附剂，和0.01重量％至90.0重量％的溶剂。并且，纯净水可能被使用于调节均衡，溶剂可以包括纯净水。

第三步骤为通过过滤香草精油混合物来获取香草精油提取物的步骤，虽然对提取条件没有特别的限制，但优选在温度为室温、旋转次数为20rpm至180rpm的条件下提取1小时至24小时。

通过上述的方法制造的香草精油可能被包括在化妆品组合物中作为有效成分。包括作为有效成分不但是指在组合物中添加有香草精油提取物而在使用者使用化妆品组合物时能够显示皮肤状态的改善效果，还包括为了成分传输和稳定化而添加各种其他成分作为副成分来制成各种形式。此时，相对于化妆品组合物的总100重量％，优选包括0.1重量％至30重量％的香草精油。因为，在包括的分量少于0.01重量％时皮肤改善效果微不足道，在包括的分量超过30重量％时，对原料投入量的效率性降低，不经济。

化妆品组合物可以被制成各种剂型，可以被制成可溶化产品、乳化产品及分散产品中的至少一种剂型。可溶化产品是指少量的油成分由表面活性剂透明地溶解于水的状态的产品，乳化产品是指油成分由表面活性剂被白浊成乳色的状态的产品，分散产品是指细微的固体粒子由表面活性剂均匀地于水或油成分混合的状态的产品。具体地，剂型可以是化妆水、凝胶、水溶性溶液、面霜、精华素、形成为水包油(O/W)型或油包水(W/O)型的基础化妆品剂型、水包油型或油包水型的隔离霜、粉底、遮霞膏、唇膏、唇彩、扑面粉、两用粉饼、眼影、腮红、眉笔等。

在下文中，通过具体的实施例和比较例将更加详细地描述本公开的组成以及其效果。然而，该实施例用于更具体地描述本公开，而本公开的范围不限于这些实施例。

[实施例1-2]

在使柠檬草精油吸附于固定相粉末吸附剂的滑石粉后，以丁二醇作为提取溶剂(总100g)在常温下以50rpm的条件提取1小时来制造香草精油提取物(参考实施例1、表1)。除了以百里香精油代替柠檬草精油之外，通过与实施例1相同的方法制备实施例2(参考表2)。

[表1]

[表2]

[比较例1-6]

比较例1及4是根据所述表1和表2的含量制造的，通过通常的升温提取方法来制造提取物，所述升温提取方法是细切柠檬草和百里香的叶片干燥物并使用丁二醇作为提取溶剂的方法。将比较例2和5设定为不经过提取过程的精油本身。根据所述表1和表2的含量制造比较例3和6，然而，不使用通常的升温提取方法，而是在50rpm条件下混合丁二醇和精油1小时后，添加纯净水，并仅将纯净水层单独分离过滤来制造比较例3和6。

[实施例3至5]

通过与实施例1相同的方法进行制造，只是变更使用为粉末吸附剂的滑石粉的含量并进行制造(参考表3)。

[表3]

[实施例6至8]

制造成与实施例1相同，只是变更流动相的丁二醇的含量进行了制造(参考表4)。

[表4]

[实施例9至11]

以与实施例1相同地制造，只是改变提取溶剂的类别进行了制造(参考表5)以观察随着流动相的提取溶剂的分配系数变化(对精油的溶解度差)的提取特性。

[表5]

[实施例12]

制造了含有实施例1的化妆品组合物(参照表6)。具体地，将在表6中记载的水溶性成分加热并保存在70℃，添加油溶性成分进行预乳化后使用高速搅拌机均匀地乳化。接着，缓慢地冷却后与实施例1的柠檬草精油提取物均匀地混合来制成面霜(实施例12)剂型。

[表6]

[比较例7]

除了不添加实施例1的柠檬草精油提取物之外，通过与实施例10相同的方法进行了制造(所述表6)。

[实验例1：测量提取物中含有的植物营养素成分的变化]

利用高效液相色谱法对实施例1和比较例1(升温溶剂提取方法)的柠檬草精油提取物内的药理活性成分的生成变化进行定性分析和状态比较，并将其结果表示在图2中。使用Water社的2695系统作为HPLC、使用Sunfire C18(5μm,4.6x250mm)作为柱、使用Waters996二极管阵列检测器作为检测器进行分析，分析条件如下：将溶剂组成为从乙腈(Acetonitrile)2％和H

从测量提取物内药理活性成分的生成变化的图2可确认，与比较例1相比，在实施例1的试料中在约24min区域中特定成分的生成的增加和分布的变化。

从所述结果确认，使用吸附剂和提取溶剂的实施例1可以改变在皮肤中引起药理作用的植物营养素成分。

[实验例2：自由基清除率测量实验]

为了测量从实施例和比较例获取的试料的自由基清除率，在实验室条件下以如绿茶提取物具有优异的抗氧化活性的提取物为比较样品并使用DPPH法测量自由基消除活性。

在DPPH法，使用称为二苯代苦味肼基自由基(DPPH；2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-1picrylhydrazyl free radical)的游离基测量由于还原力的自由基清除率。对由于受验物质DPPH被还原且吸光度减少的程度与空白试验液的吸光度进行比较，在波长560nm测量自由基清除率。

为了测量DPPH自由基清除率，准备了0.2％、0.1％、0.05％、0.005％浓度的实施例(1至11)及比较例(4至6)的试料。将所述浓度的提取物分别投入96孔板，在此添加以100uM甲醇溶液制造的DPPH来使溶液的总体积为200μl。将其在37℃下放置30分钟后在560nm测量吸光度。

[数学式1]

自由基清除率(％)＝{100-(B/A)}x100

A：没有处理本发明的试料的对照组孔的吸光度

B：处理本发明的试料的实验组孔的吸光度

对通过不同的提取方法提取的实施例1(柠檬草精油提取物)及实施例2(百里香精油提取物)和比较例1至6的抗氧化活性，将其结果显示在表7中。使用根据本发明一实施例的提取方法的实施例1及2显示抗氧化活性与作为对照组的绿茶提取物相比类似或稍微低的结果。然而，仅使用精油或使用常规的提取方法的香草叶的比较例1、2、4及5与实施例相比显示更低的抗氧化效果，排除吸附剂的比较例3和6的精油提取物显示稍微的抗氧化活性。

[表7]

对根据作为粉末吸附剂的滑石粉的含量变化的实施例1及3至5的柠檬草精油提取物的抗氧化活性进行了比较，并将其结果表示在以下的表8中。如从表8可见，实施例1及4的抗氧化活性最优异，滑石粉含量最高的实施例5的抗氧化活性较差。由此可见，提取效率根据滑石粉含量不同。

[表8]

对根据流动相的提取溶剂的含量变化的实施例1及6至8的柠檬草精油提取物的抗氧化活性进行了比较，并将其结果表示在表9中。如从表9中可以看出，应用丁二醇15.0重量％的实施例1的抗氧化活性最优异，在其以上的含量没有显著地增加对使用分量的抗氧化效果。

[表9]

对根据提取溶剂的类别的实施例1和9至11的柠檬草精油提取物的抗氧化活性进行了比较，并将其结果显示在表10中。从表10可见，将丁二醇和乙醇应用为提取溶剂的实施例1和9的抗氧化活性最优异。

[表10]

[实施例3：细胞毒性评估)

对实施例1(柠檬草精油提取物)和比较例2(柠檬草精油)的对皮肤细胞的细胞毒性进行了评估。在96孔试验板中的每一孔投入1x10

[数学式2]

细胞存活率(％)＝{(St-Bo)/(Bt-Bo)}x100

Bo：仅对细胞培养基进行发色反应的孔的565nm吸光值

Bt:不处理试料而进行发色反应的孔的565nm吸光值

St：处理试料并进行发色反应的孔的565nm吸光值

[表11]

如从所述表11中可知，实施例1中的柠檬草精油提取物在2.0重量％浓度显示100％的细胞存活率，在考虑通常使用于化妆品的浓度时，为引起皮肤刺激的可能性低的且安全的试料。然而，比较例2的柠檬草精油在0.2重量％或更低的浓度显示100％的细胞存活率，显示比实施例1的提取物高10倍以上的细胞毒性，由此判断为引发皮肤刺激的可能性会高。换言之，对应用根据本公开一实施例的精油提取物制造方法的提取物而言，可知，与使用为精油时相比可以显著地降低皮肤刺激的可能性。

[实验例4：对化妆品应用功效的评估]

对在实施例1中获取的柠檬草精油提取物的化妆品(实施例12)和比较例7以人为对象执行比较实验来评价皮肤弹力改善效果。

以受试者(20至30岁的年龄)20名为对象，在面部的右侧部位和面部的左侧部位一天两次、在连续两个月的期间分别涂抹实施例12的面霜和比较例7的面霜。

在实验结束后，在产品使用前和在使用两个月后用皮肤弹力测量仪(cutometerSEM 575,C+K Electronic Co.,德国(Germany))来测量皮肤弹力改善效果。将实验结果在以下表12中记载为Cutometer SEM 575的ΔR7值。R7值是指皮肤的粘滞弹性(viscoelasticity)。如表12所示，可知，在涂抹含有柠檬草精油提取物的面霜的受试者的皮肤弹力改善效果优异。

[表12]

n＝20,p<0.05

对含有在实施例1中获取的柠檬草精油提取物的化妆品(实施例12)和比较例7以人为对象执行比较实验来评价皮肤皱纹改善效果。

以受试者(20至30岁的年龄)20名为对象，在面部的右侧部位和面部的左侧部位一天两次、在连续两个月的期间分别涂抹实施例12的面霜和比较例7的面霜。

实验结束后，为了确认在产品使用前和使用两个月后皮肤的皱纹改善效果，制造硅材质的仿制品(replica)，并用作为图像分析仪的能见度测定仪(visiometer:SV60,C+KElectronic Co.,Germany)测量指定部位的皱纹状态。将其结果显示在以下的表13中。其结果表示从两个月后的各个参数(parameter)值扣除两个月前的参数值的结果的平均。换言之，该值为负数时，表示皱纹改善效果高。如从表13可见，可以确认含有实施例1的柠檬草精油提取物的实施例12的皮肤皱纹改善效果大为提高。

[表13]

对含有在实施例1中获取的柠檬草精油提取物的化妆品(实施例12)和比较例7以人为对象执行比较实验来评价皮肤美白效果。

以受试者(20至30岁的年龄)20名为对象，在面部的右侧部位和面部的左侧部位一天两次、在连续两个月的期间分别涂抹实施例12的面霜和比较例7的面霜。实验结束后，对面部左右两侧的涂抹部位的皮肤利用图像分析仪和色度计(Minolta CR300)测量色的亮度变化(L)，实施由多个专家的客观性肉眼观察和由受试者的主观性肉眼观察并根据以下的等级分类测量效果。将其结果显示在以下的表14中。此时，将美白功效程度分类为以下的七个等级进行了评估。

[美白功效评估的基准]

-3：极为恶化

-2：恶化

-1：稍微恶化

0：没有变化

1：稍微改善

2：改善

3：极为改善

如表14所示，可见，在涂抹含有柠檬草精油提取物的面霜的受试者的脸部皮肤上的美白效果优异。

[表14]

可知，通过上述的各种试验使用滑石粉等粉末吸附剂作为固定相且使用纯净水和丁二醇等作为提取溶剂来提取的香草精油提取物显示出抗氧化效果、除去细胞内活性氧的效果、阻碍酪胺酸酵素活性的效果、美白效果、对由于紫外线照射的细胞毒性的缓和效果、对由于紫外线照射的炎症性细胞因子表达的抑制效果。

并且，可以确认，与现有的精油相比，不引起皮肤过敏刺激的同时具有优异的抗氧化活性效果，还可以确认具有可溶化能力来将包括在皮肤中显示药理效果的非水溶性的短链脂肪酸(short chain fatty acid)的植物营养素成分或生物碱成分在提取物内稳定地分散。因此，香草精油提取物可以被适用于制造化妆水、面霜、乳液、面膜、粉末等化妆品组合物，该化妆品组合物可以显示皮肤抗老化效果、美白效果、对皮肤刺激的弱化效果等优异的皮肤外用剂效果。

根据本发明，可以从香草精油有效地提取具有药理活性的芳香性挥发成分和非水溶性植物营养素成分，由此可以制造具有优异的药理活性且皮肤稳定性显著提高的香草精油提取物。

并且，可以解决现有的香草精油所具有的皮肤过敏毒性及常用性问题，具有优异的生理活性，且通过最小化在提取过程中的化学有机溶剂的使用来解决环境问题。

进而，所提取的组分具有在提取物内被稳定地分散且使用于各种用途和剂型的化妆品组合物的效果。

然而，本发明的效果不限于在上文中提及的效果，未提及的其他效果应当基于下文中的记载由本领域的普通技术人员明确地理解。

在本说明书中，仅对本发明人执行的各种实施例中的几个例子进行了描述，然而，本公开的技术思想不限于此，可以由本领域的普通技术人员经过变形且实施为各种形式。