一种改善植物组培瓶苗气体微环境的方法及专用培养基

技术领域

本发明属植物生物技术领域，涉及一种植物组织培养方法，具体涉及调节植物组培瓶内二氧化碳和水分的方法及专用培养基。

背景技术

（一）植物组织培养技术种苗生产、脱除病毒、种质改良等具有广阔的市场前景。“在传统的植物组织培养中，组培苗是在密闭的试管或玻璃瓶中培养，由于容器内湿度过高、CO

1. 目前植物组织培养基中的碳源蔗糖含量一般为3%，培养中每天进行光照和黑暗交替培养，“在暗期由于呼吸作用瓶内高浓度CO

2.“培养器内相对湿度近于100%,以致造成小植株的表皮角质层不够发达, 驯化期间的水势低, 从而导致驯化阶段苗成活率降低。此外, 培养器内空气的水势大大高于培养器外, 因而小苗蒸腾量小, 对小苗的光合作用不利”[史跃林.组培苗的生育环境与调节.植物生理学通讯,1990(3): 65-67]。培养瓶内空气水汽来自叶片蒸腾作用，也来自培养基琼脂水分向瓶内空间的蒸发作用。

3.“培养基中生长素、细胞分裂素、吲哚乙酸、BA 及KIN含量的增加可促进乙烯产生, 对器官分化、繁育起抑制作用。而CO

（二）目前组培气体微环境调控系统大致有开放式和半开放式两类，都存在专用设备, 涉及环节多等问题，还无法普及应用[徐志刚, 等.组培育苗气体微环境自动调控系统的研制与试验.农业工程学报,2003，19(6):14-17]。

（三）提高组培瓶内空气CO

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种调节植物组培瓶内空气二氧化碳和湿度的方法及专用培养基。

本发明提供的技术方案如下：

一种改善植物组培苗气体微环境的方法，其特征在于，在组织培养培养基接种芽苗后，将CO

所述的CO

以滤纸或无纺布装满聚丙烯酸钠制作吸湿袋，外观近扁平，袋边缘附有细线，常规干热空气灭菌（160℃～170℃，维持2小时）。

本发明还提供一种改善植物组培瓶苗气体微环境的专用培养基，其特征在于，CO

所述的CO

以滤纸或无纺布装满聚丙烯酸钠制作吸湿袋，外观近扁平，袋边缘附有细线。

本发明原理与技术效果如下：

1.CO

吸水缓释材料具有平衡水分的功能，在高湿度下能吸收水分，在低湿度下又能释放水分。

CO

当颗粒内吸水缓释材料水分不足，吸水缓释材料也可从瓶内空间吸收水汽供CO

2.以滤纸或无纺布包装高吸水性树脂聚丙烯酸钠制作吸湿袋，聚丙烯酸钠具强吸湿性，在高湿度空气中能吸收大量水分，当空气湿度下降到一定程度能自动释放水分，从而调节空气湿度在一定的范围。

3. 与常规组培相比，本发明瓶内湿度较低，培养基琼脂的水分与瓶内空间水汽压差较大，加快琼脂水分蒸发，可能导致根系供水不足而影响瓶苗生长，所以CO

4.CO

本发明有益效果，（1）本发明提高瓶内CO

具体实施方法

实施例一

制备CO

正方形滤纸包装袋2.5×2.5cm，装满聚丙烯酸钠1.3g，密封成吸湿袋，外观近扁平，袋边缘附有细线。干热空气灭菌（160℃～170℃）维持2小时。

常规组培（对照组），容积200ml培养瓶（圆柱状，直径约6cm），培养基MS+ NAA 0.2mg/L +蔗糖3%，处理组（本发明）培养瓶同对照，培养基 MS+ NAA 0.2 mg/L +蔗糖1.5%。

草莓（

培养30天，对照组、处理组培养瓶在温室练苗5天，瓶苗移栽入土，温室内常规管理。

（二）结果

培养期间，对照组瓶内湿度95-100%，处理组瓶内湿度65-80%。培养30天，对照组培养瓶污染率4.02±0.38%，处理组污染率0%，较对照组显著降低，瓶苗生长指标见下表。

表. 草莓瓶苗生长、移栽情况

瓶苗净光合速率处理组较高，与对照差异显著。处理组茎叶平均鲜重较对照极显著提高，平均叶数处理组较对照多，差异显著。两组瓶苗成活率相同。

处理组根系平均鲜重较重，与对照差异显著，平均根数处理组较对照显著增多。蒸腾速率处理组较低，与对照差异极显著。出瓶移栽后1个月后，处理组苗成活率较对照组极显著提高。

（三）结论

本发明处理组培养基蔗糖量减半，可减少微生物繁殖营养，减轻培养基污染。

本发明增加瓶内二氧化碳供给，茎叶净光合速率提高，提高茎叶、根生长量。本发明瓶苗在较低湿度环境生长，蒸腾能力降低可减少植株移栽后蒸腾失水，再加上瓶苗根系发达，结果使瓶苗移栽成活率较对照提高。

实施例二

制备CO

正方形无纺布包装4×4cm，装满聚丙烯酸钠2.4g，密封成吸湿袋，外观近扁平，袋边缘附有细线，干热空气灭菌（160℃～170℃）维持2小时。

常规组培（对照组），容积650ml兰花瓶（底部直径约8cm，瓶口直径约4cm），培养基1/2MS+ NAA 0.2 mg/L +蔗糖3%，处理组（本发明）培养瓶同对照，培养基1/2MS+ NAA 0.2mg/L +蔗糖1.5%。

白芨（

培养90天，对照组、处理组培养瓶在温室练苗7天，瓶苗移栽入土，温室内常规管理。

（二）结果

培养期间，对照组瓶内湿度100%，处理组瓶内湿度70-85%。瓶内培养90天，对照、处理组培养基污染率各3.45±0.39%和1.78±0.08%，处理组污染率显著降低，瓶苗生长指标见下表。

表. 白芨瓶苗生长、移栽情况

瓶苗净光合速率处理组较对照极显著升高。处理组茎叶平均鲜重较重，与对照差异极显著，平均叶数处理组较对照多，差异显著。瓶苗成活率处理组显著提高。

处理组根系平均鲜重较重，与对照差异显著，平均根数两组差异不显著。蒸腾速率处理组较对照极显著低。出瓶移栽后1个月后，处理组苗成活率较对照组极显著提高。

（三）结论

本发明培养基蔗糖量减半，减少微生物繁殖营养，减轻培养基污染。

本发明增加瓶内二氧化碳供给，茎叶净光合速率提高，提高茎叶、根生长量。本发明瓶苗在较低湿度环境生长，蒸腾能力降低可减少植株移栽后蒸腾失水，再加上瓶苗根系发达，结果使瓶苗移栽成活率较对照提高。